Individual and combined effects of ochratoxin A and Salmonella enterica serovar

Gallinarum infection on pathological changes in broiler chickens

Abstrak
Sebuah penelitian dilakukan untuk mengevaluasi efek individu dan gabungan dari
ochratoxin A (OA) dan Salmonella enterica serovar Gallinarum (S. Gallinarum) pada temuan
dan histopatologi pada ayam broiler. 176 ekor ayam broiler umur 1 hari dibagi menjadi dua
kelompok masing-masing 88 ekor; satu kelompok diberi makan mash diet kontrol, dan
kelompok lain diberi makan mash diet yang mengandung 2 bagian/10 6OA. Pada hari ke-14,
masing-masing kelompok dibagi lagi menjadi dua kelompok, dengan satu kelompok
diinokulasi S. Gallinarum secara intraperitoneal (1,25 10 10 unit pembentuk koloni/0.5ml)
sedangkan kelompok lainnya tidak diinokulasi dengan S. Gallinarum. Empat ekor unggas dari
masing-masing kelompok nekropsi pada hari ke-1, 2, 3, 5, 7, 10, 14 dan 21 pasca inokulasi
untuk mencatat perubahan patologis pada organ yang berbeda. Perubahan PA dan
mikroskopis pada burung yang diberi OA menunjukkan ginjal dan bursa Fabricius sebagai
organ utama yang terpengaruh oleh toksin ini. Perubahan besar dan mikroskopis akibat
infeksi S. Gallinarum menunjukkan hati dan limpa sebagai organ utama yang terkena infeksi
ini. Efek OA pada ginjal dan bursa Fabricius ditingkatkan setelah infeksi S. Gallinarum.
Perubahan degeneratif dan nefritis interstisial di ginjal, dan penipisan limfosit dari folikel
bursal lebih jelas dan diamati lebih awal pada kelompok kombinasi. Kesimpulannya, data
menunjukkan bahwa burung yang diberi OA dan terinfeksi S. Gallinarum akan menunjukkan
peningkatan patologi dibandingkan dengan burung yang diberi OA saja atau mereka yang
terinfeksi S. Gallinarum tetapi tidak diberi makan OA.

Pendahuluan
Ochratoxin A (OA), metabolit sekunder dari spesies Aspergillus dan Penicillium,
merupakan kontaminan alami pada unggas dan pakan ternak di seluruh dunia, dan
merupakan ancaman potensial bagi produksi unggas. Elling dkk. (1975) adalah orang
pertama yang melaporkan asosiasi nefropati toksik spontan pada unggas dengan OA.
Kemudian, wabah ochratoxicosis yang terjadi secara alami menyebabkan penurunan laju
pertumbuhan, penurunan produksi dan kematian dilaporkan pada kalkun, ayam petelur dan
ayam broiler di Amerika Serikat oleh Hamilton et al. (1982). Dalam studi eksperimental, OA
pada tingkat yang berbeda telah dilaporkan menyebabkan penurunan berat badan,
penurunan asupan pakan, pengurangan efisiensi konversi pakan, dan imunosupresi pada
unggas (Huff et al. 1974; Dwivedi & Burns 1984a, 1984b; Elaroussi et al., 2006). Organ target
OA pada unggas adalah ginjal, meskipun perubahan patologis juga telah dilaporkan di hati,
organ limfoid, sistem kerangka, dan jaringan hematopoietik (Burns & Dwivedi, 1986).
Tifus unggas yang disebabkan oleh Salmonella enterica serovar Gallinarum (S.
Gallinarum) merupakan penyakit septikemia unggas yang menimbulkan kerugian ekonomi
yang cukup besar melalui mortalitas dan peningkatan morbiditas. Ini paling sering
merupakan penyakit pada burung yang sedang tumbuh dan dewasa, meskipun telah terlihat
pada anak ayam sebagai akibat dari penularan infeksi melalui telur. Perubahan patologis
pada unggas tifus terutama diamati pada hati dan limpa, tetapi perubahan juga dapat dilihat
pada jantung, ginjal dan organ reproduksi (Shivaprasad 2000).
 OA dapat meningkatkan keparahan dan/atau frekuensi infeksi sekunder pada unggas
(Elissalde et al., 1994; Sandhu et al., 1995; Fukata et al., 1996; Koynarski et al., 2007).
Elissalde dkk. (1994) memberi makan 3 bagian/106 OA pada ayam broiler dan diinokulasi
dengan Salmonella Typhimurium. Mereka melaporkan interaksi sinergis yang signifikan
antara OA dan S. Typhimurium yang mengakibatkan peningkatan kematian. Tidak ada efek
OA pada jumlah koloni sekum S. Typhimurium yang diamati. Namun, Fukata et al. (1996),
saat mempelajari efek dari 3 bagian/106 OA pada ayam petelur yang ditantang S.
Typhimurium, melaporkan OA sebagai salah satu faktor yang mempengaruhi kerentanan
ayam terhadap kolonisasi Salmonella. Koynarski dkk. (2007) melaporkan bahwa anak ayam
yang diberi OA dan terinfeksi Eimeria acervulina memiliki penurunan laju pertumbuhan yang
lebih besar, lebih banyak perubahan histologis dan gangguan ginjal daripada anak ayam
yang diberi OA saja atau hanya terinfeksi spesies Eimeria saja. Studi yang dilakukan di
laboratorium kami mengungkapkan bahwa anak ayam broiler yang diberi OA dan diinokulasi
dengan Escherichia coli mengalami penurunan berat badan yang lebih besar, perubahan
efisiensi konversi pakan, peningkatan kematian, dan perubahan kotor dan histopatologi
yang lebih parah daripada burung yang diberi makan OA saja atau mereka yang terinfeksi E.
coli saja (Kumar et al., 2003; Kumar et al., 2004). Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui
interaksi antara OA dengan infeksi S. Gallinarum pada ayam broiler. Dalam makalah ini, efek
individu dan gabungan dari 2 bagian/106 OA dan infeksi S. Gallinarum eksperimental
dievaluasi dalam kaitannya dengan perubahan mikroskopis kasar dan ringan pada organ
yang berbeda pada ayam broiler. Penelitian ini merupakan kelanjutan dari penelitian kami
sebelumnya, di mana efek dari 2 bagian/106 OA dievaluasi dalam kaitannya dengan respon
pertumbuhan, pola kematian, dan perubahan biokimia tertentu dengan adanya infeksi
Salmonella Gallinarum pada ayam broiler. (Gupta et al., 2005).

Bahan dan metode

Burung percobaan dan pengelolaannya. Penelitian dilakukan dengan 176 ekor anak
ayam broiler umur 1 hari (Cobb) tanpa kelamin dari hatchery lokal di Hisar, India. Anak ayam
yang digunakan dalam penelitian ini berasal dari kelompok pembiakan yang sama. Sebelum
perumahan, ruang percobaan dan kandang dibersihkan secara menyeluruh dan kemudian
difumigasi. Anak ayam disimpan di bawah kondisi higienis yang ketat dan dipelihara pada
ayam broiler tumbuk dari hari 1 sampai akhir percobaan. Pakan dan air diberikan ad libitum
kepada unggas dan tidak ada probiotik, antibiotik promotor pertumbuhan atau obat
terapeutik yang diberikan selama seluruh periode percobaan. Acak feses diambil dari anak
ayam pada hari 1 dan diinokulasi dalam kaldu selenite dan kemudian diinkubasi selama 24
jam pada 378C, diikuti dengan inokulasi pada piring Agar Lactose MacConkey. Sampel
ditemukan negatif Salmonella pada pemeriksaan bakteriologis. S. Gallinarum yang
digunakan dalam penelitian ini diisolasi dari wabah tipus unggas pada ayam pedaging anak
ayam dan dikonfirmasi oleh National Salmonella dan Escherichia Pusat Penelitian, Lembaga
Penelitian Pusat, Kasauli (Himachal Pradesh), India. Isolat tersebut serotipe Salmonella
Gallinarum 9,12: : .
Patologi Anatomi.
Lesi kotor yang tercatat pada organ burung percobaan dalam kelompok yang berbeda
bersama dengan intensitasnya disajikan pada Tabel 1. Tidak ada perubahan besar yang
diamati pada organ mana pun yang diperiksa selama percobaan untuk anak ayam yang
diberi ransum basal saja. (grup CX). OA saja (kelompok OX) tidak menyebabkan perubahan
pada organ mana pun yang diteliti hingga usia 14 hari (yaitu pada hari ke 0 inokulasi S.
Gallinarum). Namun, OA menginduksi perubahan besar dari hari ke 21 pasca makan (yaitu 7
dpi), dan perubahan pada interval ini termasuk ginjal bengkak, sedikit pembesaran hati dan
pengurangan ukuran bursa Fabricius. Pada interval berikutnya, perubahannya lebih terasa.
Pengurangan ukuran limpa dan timus juga diamati dari 10 d.p.i. seterusnya. Setelah infeksi
S. Gallinarum pada hari ke-14, perubahan besar terjadi diamati dari 1 d.p.i. seterusnya pada
anak ayam kelompok CS. Perdarahan titik pin di hati adalah perubahan pertama diamati
dalam kelompok ini. Kemudian, dari 3 d.p.i. seterusnya, fokus nekrotik di hati dan limpa juga
diamati. Perihepatitis fibrosa diamati pada anak ayam kelompok CS dari 3 d.p.i. seterusnya.
Tingkat kemacetan ringan sampai sedang juga diamati di limpa. Infeksi S. Gallinarum saja
tidak menyebabkan perubahan besar pada timus dan bursa. Anak ayam yang diberi OA dan
diinokulasi bersamaan dengan S. Gallinarum (kelompok OS) mengalami perubahan yang
lebih parah pada semua organ yang diteliti ketika dibandingkan dengan kelompok CS dari 1
d.p.i. seterusnya. Perdarahan titik pin di hati dan kongesti limpa lebih menonjol pada
kelompok OS dibandingkan pada kelompok CS. Perihepatitis fibrosa adalah temuan yang
menonjol pada sebagian besar anak ayam kelompok OS pada semua interval waktu.
Hepatomegali dan splenomegali juga diamati pada kelompok OS, dan ginjal tampak bengkak
dan pucat dibandingkan anak ayam kelompok OX. Pengurangan ukuran organ limfoid lebih
terlihat pada anak ayam kelompok OS bila dibandingkan dengan anak ayam kelompok OX.
Pada kelompok OX, skor lesi kasar rata-rata tertinggi untuk ginjal diikuti oleh hati, bursa,
limpa dan timus sedangkan skor lesi pada kelompok CS tertinggi untuk hati diikuti oleh
limpa, ginjal, bursa dan timus. Pada kelompok OS, ginjal memiliki skor lesi organ tertinggi
diikuti oleh hati dan organ limfoid (Tabel 2). Rata-rata skor lesi ginjal kotor pada kelompok
OS secara signifikan lebih tinggi dibandingkan pada kelompok CS (P50,05). Demikian pula,
skor lesi rata-rata untuk organ lain dalam kelompok OS lebih tinggi dibandingkan pada
kelompok OX dan CS, tetapi perbedaannya tidak signifikan secara statistik.

Histopatologi
Ginjal
Perubahan mikroskopis, sedini 3 d.p.i. pada anak ayam yang diberi OA saja (kelompok
OX), terdiri dari pembengkakan tubulus, perubahan degeneratif pada lapisan epitel tubulus
ginjal bersama dengan perdarahan fokal sesekali.
Pada 14 d.p.i. dan seterusnya, tubulus ginjal tampak sangat bengkak, dan puing-puing
nekrotik dan epitel terkelupas terlihat jelas di banyak tubulus selain nefritis interstisial fokal,
perubahan vakuolar pada epitel tubulus, dan kongesti (Gambar 2).
Area fokal nekrosis koagulatif di parenkim ginjal tidak jarang. Lesi ini disertai dengan
atrofi glomerulus dan, di beberapa tempat, berkas glomerulus tampak menyusut. Satu-
satunya perubahan nyata pada ginjal anak ayam yang diinokulasi dengan S. Gallinarum saja
(kelompok CS) adalah kongesti ringan dan perubahan degeneratif pada tubulus. Lesi serupa
seperti yang diamati pada kelompok OX diamati pada anak ayam kelompok OS tetapi lesinya
lebih parah. Pada kelompok OS, area fokal nefritis interstisial bersama dengan
pembengkakan sel epitel tubulus yang keruh terlihat jelas sebagai awal 5 d.p.i. (Gambar 3).