Andriani - Tesis - Uji Aktivitas Penyembuhan Luka Eksisi Salep Daun Mobe Pada Tikus - 2019

TESIS
UJI AKTIVITAS PENYEMBUHAN LUKA EKSISI SALEP

EKSTRAK ETANOL DAUN MOBE (Artocarpus lakoocha Roxb.)
TERHADAP TIKUS JANTAN
OLEH:
CUT RISKA ANDRIANI
NIM 167014008
PROGRAM STUDI MAGISTER ILMU FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2019
Universitas Sumatera Utara

EKSTRAK ETANOL DAUN MOBE (Artocarpus lakoocha Roxb.)
TESIS
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh Gelar

Magister dalam Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi
OLEH:
CUT RISKA ANDRIANI
NIM 167014008
PROGRAM STUDI MAGISTER ILMU FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2019

iii
PERSETUJUAN TESIS
Nama Mahasiswa : Cut Riska Andriani
Nomor Induk Mahasiswa : 167014008
Program Studi : Magister Ilmu Farmasi
Judul Tesis : Uji Aktivitas Penyembuhan Luka Eksisi Salep Ekstrak
Etanol Daun Mobe (Artocarpus lakoocha. Roxb.)
Terhadap Tikus Jantan
Telah diuji dan dinyatakan LULUS di depan Komisi Penguji Tesis pada hari Senin
tanggal dua puluh satu bulan Januari tahun dua ribu Sembilan belas.
Menyetujui:
Komisi Penguji Tesis
Ketua : Prof. Dr. Rosidah, M. Si., Apt.
Sekretaris : Dr. Aminah Dalimunthe, S.Si.,M.Si., Apt
Anggota : Dr. Poppy Anjelisa Z. Hsb, S.Si.,M.Si., Apt
Yuandani, S.Farm., M.Si., Ph.D., Apt

iv
v
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan karunia
yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan tesis dengan judul “UJI
AKTIVITAS PENYEMBUHAN LUKA EKSISI SALEP EKSTRAK ETANOL
DAUN MOBE (Artocarpus lakoocha Roxb.) TERHADAP TIKUS JANTAN” Tesis
ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Farmasi di
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Selama menyelesaikan penelitian dan tesis ini, penulis telah banyak
mendapatkan bantuan dan dorongan dari berbagai pihak baik moril maupun materil.
Untuk itu penulis ingin mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada:
1. Bapak Rektor Prof. Dr. Runtung, S.H., M.Hum. selaku Rektor Universitas
Sumatera Utara, yang telah memberikan kesempatan dan fasilitas kepada
penulis untuk mengikuti dan menyelesaikan Program Studi Magister.
2. Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara, yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis untuk
mengikuti dan menyelesaikan Program Studi Magister di Fakultas Farmasi.
3. Bapak Prof. Dr. Urip Harahap, Apt. selaku Ketua Program Studi Magister
Farmasi dan Ibu Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt. selaku Sekretaris Program
Studi Magister Farmasi yang telah banyak memberikan motivasi dan
bimbingan sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan ini.
4. Ibu Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt. dan Ibu Dr. Aminah Dalimunthe, S.Si.,
M.Si., Apt selaku ketua dan anggota komisi pembimbing yang telah banyak

vi
membantu memberikan saran, koreksi dan bimbingan kepada penulis dalam
menyelesaikan tesis ini.
5. Ibu Yuandani, S. Farm., M.Si., Ph.D., Apt. dan Ibu Dr. Poppy Anjelisa Z.
Hasibuan, M. Si., Apt selaku anggota komisi penguji yang telah banyak
memberikan saran, dan koreksi kepada penulis dalam menyelesaikan tesis ini.
6. Bapak dan Ibu staf pengajar Program Studi Magister Farmasi atas
bimbingannya selama penulis menjalani pendidikan.
7. Kedua orangtua saya Ir. T.M Daudsyah dan Irawati yang telah membesarkan,
mendoakan saya tanpa henti, merawat, mendidik penulis sejak kecil tanpa
lelah dan memberi dukungan dan semangat kepada penulis.
8. Suami saya M. Kashah Nasution, S.T yang telah mendoakan dan memberikan
dukungan kepada penulis.
9. Rekan-rekan Program Studi Magister Farmasi atas kerjasama, bantuan, doa
dan kekompakannya selama pendidikan dan seluruh teman-teman yang tidak
dapat penulis sebutkan satu persatu.
Penulis menyadari bahwa tesis ini masih banyak kekurangan dan perlu mendapatkan
masukan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis berharap adanya kritik dan
saran membangun demi kesempurnaan tesis ini.
Medan,April 2019
Penulis,
Cut RiskaAndriani
NIM 167014008

vii
EKSTRAK ETANOL DAUN MOBE (ArtocarpuslakoochaRoxb.)
ABSTRAK
Proses penyembuhan luka merupakan proses biologik dimulai dari adanya
trauma dan berakhir dengan terbentuknya luka parut. Salah satu tumbuhan yang
secara empiris digunakan masyarakat untuk menyembuhankan luka adalah daun
mobe. Mobe (Artocarpus lakoocha) termasuk keluarga Moraceae, yang dikenal
sebagai tanaman obat di wilayah Asia Tenggara biasa disebut jack Monkey. Daun
mobe secara tradisional digunakan sebagai obat penyembuhan luka. Tujuan penelitian
untuk mengetahui pengaruh salep ekstrak etanol daun mobe dalam mempercepat
penutupan luka, meningkatkan jumlah fibroblast dan ekspresi PDGF BB luka eksis
pada tikus jantan.
Serbuk simplisia daun mobe diekstraksi secara maserasi menggunakan pelarut
etanol. Dilakukan skrining fitokimia dan karakterisasi serbuk simplisia dan ekstrak
etanol daun mobe, penyembuhan luka eksisi mengunakan salep ekstrak etanol daun
mobe (SEEDM) yang dibagi dalam masing-masing konsentrasi 1%; 3%; 5%; 7%
diamati selama 15 hari. Salep yang berpotensi akan dilakukan pengamatan gambaran
histopatologi dan perhitungan skor ekspresi PDGF BB menggunakan preparat kulit
tikus. Dilakukan analisis statistik dengan menggunakan one way ANOVA.
Serbuk dan ekstrak daun mobe mengandung senyawa flavonoid, tannin,
saponin, glikosida dan steroid/triterpenoid. Hasil dari uji aktivitas penyembuhan luka
SEEDM konsentrasi yang baik dalam menyembuhkan luka adalah SEEDM 5%
dengan persen pengurangan luka pada hari ke-3 sebesar 28,43%; ke-6 sebesar
45,31%; ke-9 sebesar 60,31%; ke-12 sebesar 75,62% dan ke-15 sebesar 88,75%.
Hasil gambaran histopatologi kulit pada luka eksisi tikus dalam pembentukan jumlah
fibroblast pada hari ke-3 sebesar 43,25 sel/lapang ;hari ke-7 sebesar 70,25 sel/lapang;
hari ke-14 sebesar 60,25 sel/lapang. Hasil ekspresi PDGF BB pada luka eksisi tikus,
pada hari ke-3 sebesar 131,75 sel/lapang; hari ke-7 sebesar 137,25 sel/lapang; hari ke-
14 sebesar 141,25 sel/lapang.
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa SEEDM 5% memiliki
kemampuan paling baik dalam penyembuhan luka eksisi, meningkatkan jumlah
fibroblast dan skor ekspresi PDGF BB.
Kata kunci: daun mobe, luka eksisi, fibroblast, Platelet-derived growth factor
(PDGF) BB.

viii
EXCISION WOUND HEALING ACTIVITYOF OINMENT
ETHANOL EXTRACT OF MOBE LEAF (Artocarpuslakoocha
Roxb.) IN RATS
ABSTRACT
The process of wound healing is a biological process starting from the trauma and
ending with the formation of scarring. One of the plants empirically used by the
community to heal wounds is the leaves of the mobe. Mobe (Artocarpuslakoocha),
including the Moraceae family, which is known as a medicinal plant in the Southeast
Asian region, commonly called jack Monkey. Mobe leaves are traditionally used as
anti-inflammatory drugs. The aim of the study was to determine the effect of leaf
ethanol extract ointment in accelerating wound closure, increasing the number of
fibroblasts and expression of PDGF BB wounds present in male rats.
Mobe leaf simplicia powder was extracted maceratedly. Phytochemical
screening and characterization of simplicia powder and leaf ethanol extract of mobe
were carried out, excision wound healing using mobe leaf ethanol extract ointment
(SEEDM) which was divided into each concentration of 1%; 3%; 5%; 7% were
observed for 15 days. The potential ointment will be observed by histopathology and
the calculation of PDGF BB expression score using rat skin preparations. Statistical
analysis was performed using one way ANOVA.
Mobe powder and leaf extract contain flavonoids, tannins, saponins,
glycosides and steroids / triterpenoids. The results of the SEEDM wound healing
activity test for a good concentration in wound healing are 5% SEED with a percent
reduction in wounds on day 3 of 28.43% the 6th is 45.31%; the 9th is 60.31%; the
12th is 75.62% and the 15th is 88.75%. The results of skin histopathology on rat
excision wounds in the formation of fibroblast counts on day 3 were 43.25 cells /
field; day 7 was 70.25 cells / field; the 14th day is 60.25 cells / field. The results of
PDGF BB expression on rat excision wounds, on day 3 were 131.75 cells / field; the
7th day is 137.25 cells / field; the 14th day is 141.25 cells / field.
From the results of the study it can be concluded that 5% SEEDM has the ability to
heal excision wounds, increase the number of fibroblasts and PDGF BB expression
scores.
Keywords: leaf mobe, excision wound, fibroblast, Platelet-derived growth factor

(PDGF) BB.

ix
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL……………………………..………………………… i
HALAMAN PENGESAHAN TESIS…………………………….………… iii
HALAMAN PERSETUJUAN TESIS……………………………………… iv
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS…………………………… v
KATA PENGANTAR……………………………………………………… vi
ABSTRAK…………………………………………………………………. vii
ABSTRACT………………………………………………………………... viii
DAFTAR ISI……………………………………………………………..… ix
DAFTAR GAMBAR………………………………………………………. xii
DAFTAR TABEL…………………………………………………………. xiii
DAFTAR LAMPIRAN……………………………………………………. xiv
BAB I PENDAHULUAN…………………………………….……………. 1
1.1. Latar Belakang…………………………………….………………... 1
1.2. Perumusan Masalah…………………………………………………. 3
1.3. Hipotesis…………………………………………………….………. 4
1.4. Tujuan Penelitian…………………………………………….……… 4
1.5. Manfaat Penelitian……………………………………………........... 4
1.6. Kerangka Pikir Penelitian…………………………………………… 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA……………………….…………..….….. 7

2.1. Luka………………………...………………………………............ 7
2.2. Mekanisme Penyembuhan Luka………………………….……….. 10
2.3. Kulit……………………………………………………….……….. 12
2.4. Sediaan Salep……………………………………………..……….. 15
2.4.1. Jenis dasar salep……………………………………......................... 15
2.4.2. Pemilihan dasa rsalep……………………………..……………….. 17
2.4.3. Jenis salep berdasarkan daya penetrasiobat………..……………… 18
2.5. Pertumbuhan Platelet-Derived Growth Factor (PDGF)….…………. 19
2.6. KlasifikasiTumbuhanMobe (ArtocarpuslakoochaRoxb)…..…….. 20
2.6.1. Morfologi tumbuhan mobe…………………………………………. 20
2.6.2. Manfaat tumbuhan mobe……………………………..….................. 21
2.6.3. Kandungan metabolit sekunder………………………….................. 21
2.7. Metode Ekstraksi…………………………………….……….……. 22
BAB III METODE PENELITIAN……………………..………….……… 22

3.1. Alat-alat…………………………………………………….……… 22
3.2.Bahan……………………………………………………….……… 22
3.3. Penyiapan Hewan Percobaan……………………………………… 23
3.4.Prosedur Pembuatan Simplisia……………………………………. 23
3.4.1. Pengambilan bahan……………………………………………… 23

x
3.4.2. Identifikas itumbuhan…………………………………………….. 23
3.4.3. Pembuatan simplisia……………………………………………… 23
3.5 . Proses Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Mobe (EEDM)………….. 24
3.6. Pemeriksaan Karakteristik ….…………………………..………….. 24
3.6.1. Pemeriksaan makroskopik………………………………………. 24
3.6.2. Pemeriksaan mikroskopik……………………………………….. 24
3.6.3. Penetapan kadar air……………………………..…...…………… 25
3.6.4. Penetapan kadar sari larut air……………………….…………… 25
3.6.5. Penetapan kadar sari larut etanol…………………….................... 26
3.6.6. Penetapan kadar abu total………………………………………... 26
3.6.7. Penetapan kadar abu tidak larut asam…………………………… 26
3.7. Skrinig Fitokimia Simplisia dan Ekstrak Daun Mobe…………. 27
3.7.1. Pemeriksaan Flavonoid………………………………………….. 27
3.7.2.Pemeriksaan alkaloid……………………………………………. 27
3.7.3. Pemeriksaan saponin………………………….…………………. 28
3.7.4. Pemeriksaan tannin……………………………………………… 28
3.7.5. Pemeriksaan glikosida…………………………………………… 28
3.8.6. Pemeriksaan steroid/triterpenoid………………………………… 29
3.8. Sediaan Salep Ekstak Daun Mobe……..………………………… 29
3.8.1. Formulasi sediaan salep ekstrak daun mobe…...………………… 29
3.8.2. Pembuatan salep ekstrak daun mobe…………………………….. 29
3.9. Evaluasi Sediaan Salep……………………….………………….. 30
3.9.1. Uji organoleptik…………………………………………………. 30
3.9.2.Uji pH……………………………………………………………. 30
3.9.3. Uji homogenitas…………………………………………………. 30
3.10. Pembuatan Luka Hewan Uji……………………………..…......... 30
3.11. Perawatan Luka Hewan Uji…………………………………........ 31
3.12. Pengamatan Penutupan Luka……………………………………. 31
3.13.Pembuatan Blok Parafin………………………………………… 32
3.14. Pemerikasaan Jumlah Fibroblas…………..…………………….. 32
3.15. Pemeriksaan Imunohistokimia………………………………….. 34
3.15.1. Pemeriksaan imunohisto kimia PDGF BB………….…………… 34
3.16. Analisis Data……………………………………………………. 36
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN……………………………….. 37

4.1.Hasil Identifikasi Tumbuhan…………………………………….. 37
4.2. Hasil Pemeriksaan Makroskopik………………………………… 37
4.3. Hasil Pemeriksaan Mikroskopik………………………………… 37
4.4. Hasil Karakterisasi Simplisia……………………………………. 37
4.5. Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak………………… 38
4.6. Pembuatan Sedian Salep…………………………………………. 39
4.7. Evaluasi Sediaan Salep…………………………………………… 40
4.7.1. Hasil uji organoleptik…………………………………………….. 40
4.7.2. Hasil uji pH………………………………………………………. 43
4.7.3. Hasil uji homogenitas…………………………………………….. 44

xi
4.8. Penyembuhan Luka Eksisi……………………………………....... 45
4.9. Pemeriksaan Jumlah Fibroblas……………………………….…… 48
4.10.Imunohistokimia PDGF BB………………………………………. 53
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN………………………………….. 59

5.1. Kesimpulan………………………………………………………… 59
5.2.Saran……………………………………………………………….. 59
DAFTAR PUSTAKA……………………………………………………… 60

xii
DAFTAR GAMBAR
1.1. Diagram Kerangka Pikir Penelitian……………………………………….. 6

2.1. Struktur Kulit……………………………………………………………… 12
2.2. (a) Tumbuhan Mobe……………………...……………………………..… 20
2.2. (b) Daun Mobe…………………………………………………….……….. 20
4.1. Luka Eksisi Pada Tikus……………………………………………………. 44
4.2. Grafik Presentase Pengurangan Diameter Luka Hari Ke- 3……………….. 45
4.5. Grafik Presentase Pengurangan Diameter Luka Hari Ke- 12……………… 47
4.6. Grafik Presentase Pengurangan Diameter Luka Hari Ke- 15……………… 48
4.7. Grafik Rerata Jumlah Fibroblas Luka Eksisi………………………………. 50
4.8. Gambaran Mikroskopik Histopatologi Fibroblas Hari ke- 3 ………………. 51
4.9. Gambaran Mikroskopik Histopatologi Fibroblas Hari ke- 7……………….. 52
4.10. Gambaran Mikroskopik Histopatologi Fibroblas Hari ke- 14…………….. 53
4.11. Imunohistokimia PDGF BB Hari ke- 3…………………………………… 57
4.12. Imunohistokimia PDGF BB Hari ke- 7…………………………………… 58
4.14. Imunohistokimia PDGF BB Hari ke- 14…………………………………. 59

xiii
DAFTAR TABEL
4.1 Hasil Karakterisasi SimplisiaDaunMobe ...................................... 38

4.2 Hasil Skrining FitokimiaSimplisiadanEkstrak .............................. 40
4.3 Hasil Uji Organoleptik .................................................................. 41
4.4 Hasil Uji pH .................................................................................. 42
4.5 Hasil Uji Homogenitas .................................................................. 43

xiv
DAFTAR LAMPIRAN
1 Surat hasil identifikasi tumbuhan.................................................. 65

2 Surat rekomendasi persetujuan etik penelitian ............................. 66
3 Gambar daun mobe ....................................................................... 67
4 Hasil pemeriksaan mikroskopik daun mobe ................................. 68
5 Perhitungan kadar air simplisia daun mobe .................................. 69
6 Perhitungan kadar saril arut air simplisia daun mobe ................... 70
7 Perhitungan kadar sari larut etanol simplisia daun mobe ............. 71
8 Perhitungan kadar abu total simplisia daun mobe ........................ 72
9 Perhitungan kadar abu tidak larut asam simplisia daun mobe ...... 73
10 Hasil analisis data statistic pengurangan luka ............................... 77
11 Hasil analisis data statistic uji histopatologi fibroblas .................. 84
12 Hasil analisis data statisik uji ekspresi PDGF BB ........................ 87

xv
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Luka merupakan hilang atau rusaknya sebagian dari jaringan tubuh dan juga
didefinisikan sebagai kerusakan fisik akibat dari terbukanya atau hancurnya kulit
yang menyebabkan ketidakseimbangan fungsi dan anatomi kulit normal (Nagori and
Solanki, 2011).Inflamasi atau radang ialah respon protektif normal yang ditimbulkan
oleh cedera atau kerusakan jaringan yang disebabkan oleh trauma fisik, zat kimia
yang merusak atau invasi mikroorganisme patogen.Ada dua fase inflamasi yaitu akut
dan kronis.Inflamasi akut merupakan respon awal terhadap cedera jaringan yang
memicu vasodilatasi lokal dan meningkatkan permeabilitas kapiler sehingga terjadi
akumulasi cairan di daerah cedera. Jika stimulus penyebab inflamasi tidak
dihilangkan tepat waktu, peradangan akan berkembang menjadi fase kronis. Inflamasi
kronis ditandai oleh infiltrasi leukosit dan sel fagosit (Julia dkk, 2010).
Penyembuhan luka merupakan suatu proses kompleks yang melibatkan
interaksi yang terus menerus antara sel dengan sel dan antara sel dengan matriks yang
terangkum dalam tiga fase mekanisme penyembuhan luka yang terjadi yaitu fase
inflamasi (0-3 hari), fase proliferasi dan pembentukan jaringan (3-14 hari) serta fase
remodeling jaringan (Reddy et al., 2012).Proses penyembuhan luka merupakan
proses biologik dimulai dari adanya trauma dan berakhir dengan terbentuknya luka
parut. Tujuan dari manajemen luka adalah penyembuhan luka dalam waktu sesingkat
mungkin, dengan rasa sakit, ketidaknyamanan, dan luka parut yang minimal pada

1
pasien.Luka harus segera ditangani agar tidak timbul masalah lainnya.Namun, masih
banyak masyarakat yang sering menghiraukan luka yang terjadi pada organ
tubuh.Luka yang tidak ditangani dengan baik dapat menyebabkan penyakit akibat
luka (Soni andSinghai, 2012). Salah satu cara penyembuhan luka yaitu dengan
mengobati luka tersebut menggunakan sediaan topikal. Pemberian sediaan topikal
yang tepat dan efektif diharapkan dapat mengurangi dan mencegah infeksi pada
luka.Bentuk sediaan topikal yang disukai salah satunya adalah salep karena mudah
merata jika dioleskan pada kulit tanpa penekanan.
Salah satu tumbuhan yang secara empiris digunakan masyarakat untuk
membantu penyembuhan luka adalah daun mobe.Daun mobe (Artocarpus lakoocha)
termasuk keluarga Moraceae, yang dikenal sebagai tanaman obat di wilayah Asia
Tenggara ini biasa disebut jack Monkey. Daun mobe ini secara tradisional digunakan
sebagai obat penyembuh luka (Akhil et al, 2014).Tanaman mobe digunakan dalam
pengobatan tradisional Thailand untuk terapi penyembuhan luka dan juga penuaan
dini (Hossain, et al, 2016).Uji paw edema karagenandengan menggunakan ekstrak
daun mobe secara oral menunjukkan aktivitas antiinflamasi yang bergantung dosis (P
<0,05) menunjukkan efek antiinflamasi pada dosis 200 mg / kg (penghambatan
64,90%) dibandingkan dengan indometasin (69,86%) (Luthfun, et al, 2015).
Uji induksi asam asetat daun mobe menunjukkan aktivitas analgesik 57,41%
pada dosis 200mg / kg yang sama dengan Indometasin (p 0,05) dengan jelas
menunjukkan mekanisme perifer yang terlibat dalam tindakan antinociceptive dari

2
Artocarpus lakoocha. Metabolit sekunder seperti flavonoid dan steroid, triterpen telah
terbukti memiliki aktivitas anti-inflamasi dan analgesik (Luthfun, et al, 2015).
Ekstrak daun mobe menunjukkan kemampuannya dalam perlindungan
terhadap kerusakan hati, menurunkan tekanan darah tinggi dan mengatur kadar gula
darah pada penelitian sebelumnya. Komponen utama daun dari genus Artocarpus
ditemukan adanya flavonoid dengan rantai samping isoprene 3-6 yang memiliki
aktivitas antioksidan, anti-inflamasi, anti-diabetes, tirosinase dan sifat penghambatan
melanin (Mahadeva, et al, 2017).Hal ini pun dijelaskan Jagtap and Bapat (2010) yang
menyatakan genus Artocarpus memiliki flavonoid seperti Artonin A, Artonin b,
Artocarpanone yang dapat menjadi penghambat mediator kimia yang dilepaskan dari
sel mast, neutrofil, dan makrofag. Adapun hasil dari penelitian Anima and Bhatnagar
(2009) menyatakan bahwa familyArtocarpus mengandung metabolit sekunder yang
bemanfaat juga sebagai antibakteri, bakteri yang dihambat adalahE. coli, S. aureus,
Shigella, dan Bacillus.
Berdasarkan hal tersebut diatas, mengenai penelitian daun mobe menjadi
pertimbangan penulis untuk melakukan penelitian dengan menggunakan formulasi
dari ekstrak etanol daun mobe dalam bentuk salepuntuk melihat efek terhadap
penyembuhan luka eksisi dengan parameter penutupan luka, epitalisasi dan jumlah
fibroblast, ekspresi Platelet-Derived Factor(PDGF) BB
1.2 Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, maka perumusan masalah penelitian ini
adalah:

3
a. Apakah pemberian salep ekstrak daun mobe mampu mempercepat penutupan
luka eksisi pada tikus jantan
b. Apakah pemberian salep ekstrak etanol daun mobe dapat meningkatkan
jumlah fibrolas pada luka eksisi terhadap tikus jantan
c. Apakah pemberian salep ekstrak daun mobe mampu meningkatkan ekspresi
PDGF BB pada luka eksisi terhadap tikus jantan
1.3 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah diatas, maka hipotesis awal dari penelitian ini
adalah:
a. Pemberian salep ekstrak etanol daun mobe mampu mempercepat penutupan
luka eksisi terhadap tikus jantan.
b. Pemberian salep ekstrak etanol daun mobe dapat meningkatkan
jumlahfibrolas pada luka eksisi terhadap tikus jantan.
c. Pemberian salep ekstrak etanol daun mobe mampu meningkatkan ekspresi
PDGF BB pada luka eksisi terhadap tikust jantan.
1.4 Tujuan Penelitian
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui:
a. Pengaruh salep ekstrak etanol daun mobe dalam mempercepat penutupan
lukaeksisi tikus jantan
b. Pengaruh salep ekstrak etanol daun mobe dapat meningkatkan jumlahfibrolas
pada luka eksisi terhadaptikusjantan.

4
c. Pengaruh salep ekstrak etanol daun mobe dalam meningkatkan ekspresi
PDGF BB pada luka eksisi terhadap tikus jantan.
1.5 Manfaat Penelitian
Berdasarkan tujuanpenelitian di atas, maka manfaat penelitian ini adalah
memberikan informasi kepada masyarakat tentang adanya khasiat daun mobe sebagai
obat penyembuhan luka.
1.6 Kerangka Pikir Penelitian
Adapun kerangka pikir dalam penelitian ini dapat dilihat variable bebas dalam
penelitian ini adalah hewan percobaan yang digunakan tikus jantan, salep betadine
sebagai kontrol positif kemudian kontrol negative yang digunakan yaitu basis salep
serta salep ekstrak etanol daun mobe dengan varian konsentrasi 1%, 3%, 5% dan 7%.
Variabel terikat dalam penelitian ini adalah evaluasi sediaan salep dan pengujian
aktivitas penyembuhan luka terhadap tikus. Parameter yang digunakan dalam
penelitian ini adalah evaluasi sediaan salep yang termasuk dalam uji organoleptis, uji
pH dan uji homogenitas serta untuk pengamatan aktivitas penyembuhan luka
menggunakan parameter pengamatan penutupan luka, migrasi fibroblast dan
imunohistokimia ekspresi PDGFBB (Gambar 1.1).

5
6
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Luka
Luka merupakan kerusakan sel secara anatomi dan fungsi dari suatu
jaringan.Hal ini dapat terjadi akibat gangguan mekanik, kimia, suhu, mikroba atau
imunologik. Ketika kulit tertusuk, tercabik atau tersayat maka luka yang terbentuk
dikatakan luka terbuka sementara luka tertutup seperti luka bakar umunya disebabkan
oleh api, panas, listrik, radiasi, senyawa kimia dan cahaya matahari (Thakur et al.,
2011).
a. Derajat keparahan luka
Menurut Alam et al. (2011), Berdasarkan derajat keparahan, luka terdiri dari 2
golongan yaitu :
1. Akut
Luka akut merupakan jenis luka yang dalam penyembuhannya dapat terjadi
secara alamiah seiring waktu walaupun tanpa pengobatan.Hal ini terjadi karena siklus
penyembuhan yang dialami berlangsung dengan baik sehingga perbaikan dapat
terjadi pada struktur anatomi maupun fungsi kulit.Waktu yang diperlukan dalam
penyembuhan luka tergantung kedalaman dan lebar luka.
2. Kronis
Umumnya jenis luka yang tergolong kronis sulit mengalami perbaikan anatomi
dan fungi secara total.Penyembuhannya tidak berlangsung sempurna karena
dipengaruhi oleh beberapa faktor diantaranya infeksi, hipoksia, benda asing dan

7
beberapa jenis penyakit seperti diabetes mellitus, malnutrisi, imunodefiensi, serta
obat-obatan.oleh sebab itu sebagian besar luka yang terbentuk akan semakin lama
penyembuhannya bahkan semakin buruk.
b. Jenis-jenis kontaminasi luka
Menurut Dunn (2005), jenis-jenis kontaminasi terhadap luka terbagi menjadi :
1. Luka bersih
Sebanyak 75 % dari luka tergolong jenis luka bersih.Luka bersih merupakan
luka bedah yang tidak terkontaminasi serta tidak mengalami inflamasi.Luka bersih
dapat ditemukan pada pembedahan saluran pernafasan, saluran pencernaan, saluran
kemih dan alat pada kelamin.Jenis luka insisi ini dibuatdalam kondisi aseptik
sehingga tidak menimbulkan infeksi.Inflamasi secara normal dapat terjadi dalam
penyembuhan luka namun berbeda halnya jika disebabkan oleh bakteri.Inflamasi
yang terinfeksi bakteri menyebabkan kerusakan yang lebih besar.Resiko terjadi
infeksi pada luka bersih kurang dari 2%.
2. Luka bersih-terkontaminasi
Luka terkontaminasi merupakan luka bedah yang terdapat pada
saluranpernafasan, saluran pencernaan, alat kelamin dan saluran kemih yang dibuat
dengan kondisi yang terkontrol tanpa kontaminasi.Sama halnya dengan luka bersih
yang terjadi kontaminasi dengan masukknya ke suatu cairan menyebabkan
perdarahan.Resiko infeksi pada luka bersih-terkontaminasi sebesar 5-10%.
3. Luka terkontaminasi
Luka terkontaminasi termasuk luka terbuka, luka trauma atau luka
akibatkecelakaan seperti dalam prosedur bedah saluran kemih yang terkontaminasi

8
urin serta prosedur pembedahan saluran empedu dengan kontaminasi cairan
empedu.Mikroorganisme dapat berkembang dengan cepat sehingga dalam waktu 6
jam setelah terjadi kontaminasi dapat menimbulkan infeksi. Resiko infeksi yang
akanterjadi pada luka terkontaminasi sekitar 20%.
4. Luka kotor dan terinfeksi
Luka jenis ini telah mengalami kontaminasi yang tinggi sehinggamembentuk
nanah.Biasanya hal ini terjadi akiat benda tajam seperti perforasi pada rongga perut
dan luka trauma yang dibiarkan tanpa perawatan.Resiko terjadi infeksi pada luka
kotor dan terinfeksi sekitar 40%.Menurut Thakur et al. (2011), luka dapat dibuat
dengan 4 jenis yaitu:
1. Luka eksisi
Luka eksisi biasanya dibuat pada daerah punggung sekitar 1-1,5 cm dari tulang
punggung. Umunya dibuat dengan ukuran diameter 2,5 cm dan kedalaman 2 mm.
Perdarahan dapat diatasi menggunakan kapas yang telah diolesi garam.
2. Luka insisi
Luka insisi umumnya dibuat pada daerah punggung dibuat mulai dari
kulithingga lapisan subkutan. Panjang luka sekitar 1,5 cm dari tulang belakang dan
dibuat dengan panjang sekitar 4-6 cm sehingga terbentuk luka sayatan dengan
kedalaman 0,5-1 cm. Luka insisi tergolong jenis luka dimana tidak terjadi kehilangan
jaringan kulit. Ketika terjadi perdarahan maka harus segera ditindak lanjuti karena
perdarahan cendrung sulit berhenti (Sharma, 2013; Karakata dan Bachsinar, 1992).

9
3. Luka dalam
Luka dalam dibuat didaerah aksila dan pangkal paha berbentuk silinder dibuat
dengan ukuran 2,5 x 0,3 cm. Kerusakan fisik dan mekanik jaringan granulosum dari
luka yang dibuat dalam ini sedang dipelajari.
4. Luka bakar
Luka bakar dibuat dengan menggunakan tembaga dengan ukuran 2x2
cmdilengakapi batang pegangan.Tembaga dipanaskan pada suhu 60○C selanjutnya
ditempelkan pada bagian punggung selama 30 detik. Teknik lain dapat pula dilakukan
dengan memanaskan tembaga pada suhu 90○C dan digunakan pada bagian punggung
selama 10 detik (Thakur et al., 2011).
2.2 Mekanisme Penyembuhan Luka
Saat kulit mengalami kerusakan akibat terjadinya luka maka tubuh akansegera
merespon untuk melakukan perbaikan.Mekanisme penyembuhan tersebut tersusun
atas beberapa tahapan hingga diperoleh perbaikan anatomi dan fungsi dari kulit.
Tahapan penyembuhan luka terdiri atas :
a. Koagulasi dan hemostatik
Proses penyembuhan luka diawali dengan tahapan koagulasi danhemostatik.
Tujuan tahapan ini ialah mencegah perdarahan dan membentuk komponen yang
berguna untuk tahapan selanjutnya. Beberapa saat setelah terjadinya luka maka akan
terjadi vasokonstriksi dan ekstravasasi darah ke tempat terjadinya luka.
Vasokonstriksi bertujuan mencegah terjadinya perdarahan.Sementara ekstravasasi
darah menuju ke tempat luka bertujuan untuk menghadirkan komponen yang dapat
berfungsi sebagai pertahanan tubuh terhadapbenda ag yang masuk.Seiring dengan

10
terjadinya proses hemostatik, tubuh juga memulai proses koagulasi. Pergerakan darah
menuju tempat luka mengakibatkan terjadinya interaksi antara platelet dengan
komponen dasar ekstraselullar dan kolagen.Hal ini merangsang terjadinya pembekuan
darah yang tersusun atas fibronetin, fibrin, vitronectin dan trombospondin.Makrofag
merupakan pabrik produksi growth factors seperti PDGF, fibroblast growth factor
(FGF), vascular endothelial growth factor (VEGF), TGF-β, dan TGF-αyang akan
berinteraksi dengan neutrophil, makrofag, sel endotel, dan fibroblast. Makrofag
berperan penting dalam pengaturan sel seperti fungsi fagositosis, memakan dan
mencerna serta membunuh organisme patogen, membersihkan debris jaringan dan
merusak sisa netrofil, menarik fibroblas ke jaringan luka dan memicu pembuluh
darah baru.Selain itu platelet mengandung vasoaktif amin (serotonin) yang berfungsi
saat vasodilatasi dan peningkatan permeabilitas pembuluh darah (Velnar et al., 2009).
b. Inflamasi
Fase inflamasi terjadi setelah fase penghentian perdarahan. Fase ini
mulaiterjadi 24-48 jam setelah terjadinya cedera dan akan selesai sekitar 2 minggu
(Alam et al., 2011). Tanda klinis terjadinya inflamasi ialah terbentuknya kemerahan
(rubor), panas (color), pembengkakan (tumor) dan nyeri (dolor).Fase inflamasi
diawali dengan perubahan monosit menjadi makrofag.Makrofag berfungsi sebagai
fagosit yang dapat menjaga tubuh dari bakteri dan benda asing yang
masuk.(Diegelman and Evan, 2004).
c. Proliferasi

11
Fase ini terjadi pada hari ke 3 sampai 2 minggu setelah terbentuk luka
danditandai dengan pengaktifan limfosit.TGF (Transforming growth factor) yang
dihasilkan platelet, makrofag dan limfosit T menjadi komponen dasar fase
proliferatif.Selain itu TGF berfungsi mengendalikan fibroblast, meningkatkan
transkripsi gen kolagen, proteoglikan dan fibrinektin yang dapat membentuk protein
dasar penyembuhan luka.(Diegelman and Evan, 2004).
d. Remodeling
Fase remodeling terjadi sekitar 3 minggu hingga 2 tahun atau lebih. Tahap ini
mulai terjadi proses pembentukan kembali kolagen dan jaringan tensil mulai
diperkuat. Penyembuhan luka pada fase ini dikendalikan oleh PDGF (Platelet
Derived Growth Factor).Selain itu pada fase ini terjadi proses kontrol kestabilan
antara sintesis dan degradasi dari kolagen. Pembentukan kolagen akan stabil setelah 3
minggu paska cedera. Proses remodeling akan berakhir saat bekas luka menghilang
dan jaringan tensil yang terbentuk semakin kuat (Velnar et al., 2009).
2.3 Kulit
Kulit merupakan organ yang tersebar di seluruh bagian tubuh.Kulittersusun
atas pembuluh darah, saraf serta kelenjar. Kulit berfungsi sebagai perlindungan dari
kerusakkan terhadap radiasi UV, menjaga kestabilan cairan tubuh yang mencegah
masuknya zat-zat kimia yang berbahaya, mengatur suhutubuh melalui pengeluaran
keringat atau vasodilatasi pembuluh darah kulit,sintesis vitamin D dan fungsi
imunologis (Graham dan Burn, 2005). Adapun gambaran struktur kulit manusia
adalah sebagai berikut

12
Gambar 2.1.Struktur kulit
Kulit tersusun atas beberapa lapisan diantaranya :
1. Epidermis
Lapisan epidermis merupakan lapisan terluar dari kulit.Sel utama yang
berdiferensisasi pada lapisan epidermis ialah keratinosit yang berfungsi sebagai
pembentuk keratin yang terletak di stratum malfigi.Sel lainnya yang berkembang
pada lapisan epidermis ialah melanosit.Sel melanosit berfungsi membentuk warna
kulit dan melindungi kulit dari pengaruh yang merugikan dari cahaya matahari.Orang
kulit hitam amerika memiliki sel melanosom yang besar dan tidak mudah tehidrolisis
sedangkan orang kulit putih memiliki sel melanosom yang kecil dan mudah
terhidrolisis. Lapisan epidermis tersusun atas 2 lapisan sel yaitu :
A. Stratum korneum
Ketebalan sratum korneum tergantung letaknya pada tubuh.Bagian tubuhyang
tebal seperti telapak tangan dan telapak kaki.Sel-sel pada sratum korneumberbentuk
pipih yang menglamai keratinasi, tanpa inti dan organel sel sitoplama.

13
B. Stratum malfigi
Stratum malfigi merupakan lapisan asal dari sel-sel permukaan yang telah
mengalami diferensiasi sehingga membentuk tiga lapisan yaitu:
1.Sratum granulosum
Sratum granulosom terletak di bawah stratum korneum.Sratum granulosum
berfungsi dalam pembentukan protein dan ikatan kimia sratum korneum.
2.Sratum spinosum
Sratum spinosum disebut juga lapisan sel prikel (runcing).Lapisan ini tersusun atas
sel-sel langharhans yang merupakan hasil modifikasi dari makrofag yang bersumber
dari sum-sum tulang dan bermigrasi ke epidermis.Sel ini berfungsi dalam pertahanan
awal tubuh melawan antigen.
3.Sratum germinativum (lapisan sel basal)
Sratum germinativum tersusun atas sel epidermis yang tidak mengalami diferensiasi
dan terus mengalami mitosis untuk terus memperbaharui lapisan epidermis.Hal ini
diatur oleh agen stimulator dan inhibitor seperti epidermalgrowth factor (EGF) dan
tranforming growth factor alfa dan sel beta pada permukaan kulit yang membentuk
srtaum korneum.Sratum germinativum membutuhkan sekitar 8-10 minggu untuk
mecapai permukaan epidermis.
2. Dermis
Dermis tersusun atas serabut kolagen, elastin, dan retikulin yang berada dalam
substansi dasar matriks kulit dan tersusun atas saraf serta pembuluh darah.Pengaturan
nutrisi kulit dilakukan oleh saraf dan pembuluh darah.Disekitar pembuluh darah
terdapat sel limfosit, sel mast, leukosit yang berfungsi dalam perlindungan kulit

14
terhadap infeksi atau invasi benda asing.Selain itu lapisan dermis banyak
mengandung pembuluh darah, limfe, saraf, dan reseptor sensoris.
3. Subkutan
Lapisan ini mengandung kelenjar keringat yang tersusun atas urea dan
laktat.Lapisan ini berguna dalam pengaturan suhu tubuh.Kelenjar keringat tersebar
hampir diseluruh permukaan tubuh kecuali telinga dan bibir.Lapisan subkutan
memisahkan antara kulit dengan fascia dan otot yang berada di bawahnya (Graham
dan Burn, 2005; Price dan Wilson 1995).
2.4 Sediaan Salep
Sediaan topikal terdiri dari salep, pasta, gel, krim, mikstur gojog dan
linimen.Salep merupakan salah satu sediaan semi solid yang digunakan untuk tujuan
topikal.Sediaan salep bersifat mudah dioleskan dan tidak berbau tengik.Bahan
obatnya harus terdispersi sempurna ke dalam basis yang sesuai (Anief, 1997).
2.4.1 Jenis dasar salep
Dasar salep merupakan komponen yang penting dalam sediaan salep.Dasar
salep berfungsi membentuk masa dari sediaan salep.Dasar salep umumnya bertekstur
setengah padat, mudah dioleskan dan sebagian besar berlemak.Dasar salep dalam
bentuk zat padat harus diubah menjadi cair terlebih dahulu sebelum dicampurkan
dengan komponen salep lainnya.Sementara dasar salep yang berbentuk cair atau
setengah padat dapat langsung diolah.
Menurut Anief (1997) Adapun beberapa jenis dasar salep diantaranya :
1. Dasar salep hidrokarbon

15
Dasar salep jenis hidrokarbon memiliki sifat sangat lengket pada kulit dan
sukar dicuci, agar mudah dicuci dapat ditambahkan surfaktan dalam jumlah yang
sesuai. Zat yang tergolong dasar salep hidrokarbon seperti vaselin putih, vaselin
kuning, campuran antara vaselin dengan malam kuning atau malam putih, paraffin
cair, parafin padat, jelene dan minyak tumbuhan.
2. Dasar salep serap
Dasar salep serap mampu menyerap air, terdiri dari adeps lanae, lanolin,
petrolatum hidrofilik (vaselin album, cera album, stearil alkohol, kolesterol),
unguentum simpeks (30 bagian malam kuning dan 70 bagian minyak wijen).
3. Dasar salep larut air
Dasar salep ini terdiri dari PEG atau campuran PEG (PEG 4000 40% + PEG
400 60%), tragakan dan PGA.
4. Dasar salep mudah tercuci
Dasar salep ini sangat mudah tercuci dengan air, terdiri dari.
a. Dasar salep emulsi tipe M/A seperti vanishing krim yang terdiri atas lanolin, cetil
alkohol, parafin cair, asam stearat, kalii hidroksi, propilen glikol dan aquades.
b. Emulsifying oitment yang terdiri atas emulsifying wax, vaselin album dan parafin
cair.
c. Hydrophilic ointment yang dibuat dari minyak mineral, stearil alkohol, dan
aquades.
2.4.2 Pemilihan basis (dasar) salep
Menurut Fatimah, 2004 pemilihan dasar salep harus memperhatikan beberapa hal
berikut :

16
1. Penetrasi dan penyerapan
Tujuan penggunaan obat merupakan salah satu pertimbangan dalam pemilihan
dasar salep.Tujuan penggunaan untuk pengobatan penyakit diharapkan mampu
meneruskan senyawa aktif sediaan salep. Proses penyampaian tersebut melewati dua
tahapan yaitu penetrasi dan penyerapan. Proses penetrasi senyawa aktif dari dasar
salep melalui kulit. Tahapan penyerapan terjadi pada dasar salepmenuju aliran darah
selanjutnya terjadi pelepasan obat dari dasar salep.Daya penetrasi yang baik didukung
oleh dasar salep yang larut dalam minyak karena sebagian besar kulit tersusun atas
lemak.
2. Ketercampuran keringat dan serum
Dasar salep yang tidak tercampur dengan keringat akan mudah diserap dengan
cepat. Keuntungannya dosis obat yang diperlukan lebih efisien.
3. Cocok dengan keringat
Kondisi kulit dengan pH sekitar 4,5-6,5 menjadi pertimbangan dalam
pemilihan dasar salep. Dasar salep dengan pH netral berguna untuk menghindari
reaksi yang tidak dinginkan yang kemungkinan akan terjadi.
4. Iritasi kulit
Pemilihan dasar salep tidak terlepas dari kemungkinan timbulnya efek
alergi.Dasar salep berlemak berpotensi menyebabkan reaksi alergi.
5. Sifat emulsi
Dasar salep berguna sebagai pembawa senyawa aktif dengan tujuann
terapetik.Selain itu dasar salep berfungsi dalam menjaga kelembaban kulit.Oleh sebab
itu tipe dasar salep emulsi sangat cocok sebagai pembawa obat.

17
6. Kemudahan pemakaian
Sediaan topikal diharapkan mudah tersebar, mudah diolesi serta mudah untuk
dicuci dan hal ini lebih disukai oleh konsumen.
2.4.3 Jenis salep berdasarkan daya penetrasi obat
Jenis basis salep berdasarkan daya penetrasi obat kedalam lapisan kulit terdiri dari :
1. Epidermis
Lapisan epidermis menjadi target kerja tipe salep antiseptik dan astringent.
Oleh sebab itu dasar salep yang sesuai ialah dasar salep yang sulit diserap seperti
hidrokarbon.
2. Endodermis
Pada lapisan endodermis tujuan penggunaanya sebagai emolien dan stimulan
sehingga diharapkan dapat berpenetrasi hingga ke dalam kulit.Contoh dasar salep
tersebut ialah sejenis minyak tumbuhan dan basis serap.
3. Diadermis
Penggunaan obat dengan tujuan sistemik lebih sesuai menggunakan dasar
salep berlemak sehingga obat dapat melewati lapisan kulit dan cepat berpenetrasike
pembuluh darah.
2.5 Pertumbuhan Platelet-Derived Factor (PDGF)
PDGF terdiri dari keluarga homo- atau heterodimeric faktor pertumbuhan,
termasuk PDGF-AA, PDGF-AB, PDGF-BB, PDGF-CC, dan PDGF-DD. PDGF
adalah faktor pertumbuhan pertama yang ditunjukkan kemostatik untuk sel yang
bermigrasi ke dalam kulit penyembuhan luka, seperti neutrofil, monosit, dan

18
fibroblas. Selain itu, PDGF dapat meningkatkan proliferasi fibroblast dan produksi
matriks ekstraselular dengan sel. Sehingga hal ini merangsang fibroblas untuk
produksi kolagen matriks dan menginduksi fenotipe myofibroblast dalam sel, dengan
demikian PDGF adalah stimulus utama dalam penyembuhan luka.Serangkaian
penelitian eksperimental dan klinis menunjukkan efek yang menguntungkan dari
PDGF untuk pengobatan gangguan penyembuhan luka.Selanjutnya, PDGF
merupakan faktor pertumbuhan pertama yang disetujui untuk pengobatan ulkus
manusia (Sabine and Ricahard, 2003).Penyembuhan luka melibatkan reepitelisasi,
angiogenesis, dan deposisi matriks ekstraseluler.Tiga jalur penelitian mendukung
peran PDGF dalam penyembuhan luka, yaitu, penyelidikan efek in vitro PDGF pada
jenis sel penting untuk penyembuhan luka, analisis ekspresi PDGF dan reseptor
PDGF selama proses penyembuhan luka, dan studi efek aplikasi topikal PDGF untuk
penyembuhan luka (Heldin, and Westermark, 1999). Sebagai hasil dari persetujuan
FDA, PDGF-BB telah banyak digunakan untuk mengobati bisul diabetes (Borena, et
al., 2015).
2.6Klasifikasi Tumbuhan Mobe (Artocarpus lakoocha Roxb)
Menurut Piyush and Ramesh (2013) Tumbuhan mobe secara taksonomi
memiliki klasifikasi ilmiah sebagai berikut :
Kingdom : Plantae
Divisi : Spermatophyta
Kelas : Magnoliopsida
Ordo : Rosales
Famili : Moraceae
Genus : Artocarpus
Species : Artocarpus lakoocha Roxb.

19
2.6.1 Morfologi tumbuhan mobe
Artocarpusmerupakan salah satu family dari Moraceae yang terdapatdi daerah
tropis dan subtropis.Tumbuhan ini umumnya mempunyai pohon yang tinggi dan
bergetah putih di seluruh bagian tumbuhan, berkayu keras, berakar tunggang dan
memiliki buah yang umumnya berdaging berwarna kuning, kuning pucat, kuning
kemerah-merahan dan beraroma harum (Piyush and Ramesh, 2013).
Tumbuhan mobe mempunyai beberapa nama daerah seperti keledang beruk,
keledang tampang bulu, tompang ambon, tampang nangka dan tampang gelugor.
Tumbuhan mobe memiliki tinggi pohon 25-50 m. Batangnya berbentuk bulat
panjang, berkayu keras dan tumbuhnya lurus dengan diameter 0,5-2,5 m. Kulit batang
tumbuhan mobe bertekstur kasar dan berwarna keabu-abuan. Bentuk daun membulat
dan panjang 10-25 cm, bertepi rata dan bagian bawah daun berbulu (Esai Indonesia,
1995).
(a)
(b)
Gambar 2.2 Tumbuhan Mobe

20
2.6.2 Manfaat tumbuhan mobe
Tumbuhan mobe memiliki beragam manfaat yang biasanya masyarakat
menggunakannya sebagai anti bakteri terhadap penyembuhan luka, anti malaria dan
anti oksidan (Piyush and Ramesh, 2013).
2.6.3 Kandungan metabolit sekunder
Menurut penelitian Anima (2009), kandungan metabolit sekunder yang
terdapat pada daun mobe adalah flavonoid, tannin, saponin, fenolik, streroid dan
triterpenoid.
2.7 Metode Ekstraksi
Ekstraksi adalah proses penarikan kandungan kimia yang terdapat dalam suatu
tumbuhan dengan pelarut yang sesuai. Ekstraksi dibagi dalam dua metode yaitu
metode ekstraksi cara dingin dan cara panas. Ekstraksi cara dingin dibagi dalam dua
metode yaitu maserasi dan perkolasi sedangkan cara panas adalah refluks, sokletasi,
digesti, infus dan dekok (Depkes, 2000).
Maserasi adalah proses perendaman sampel dengan pelarut organic dengan
temperature ruangan. Teknik ini dilakukan untuk mengekstrak jaringan tumbuhan
yang belum diketahui kandungan senyawanya yang mungkin bersifat tidak tahan
panas.Kelebihan dari metode maserasi ini alat yang digunakan sederhana serta dapat
digunakan untuk zat yang tidak tahan terhadap pemanasan.Sedangkan kelemahan dari
metode maserasi ini adalah pelarut yang digunakan dalam jumlah yang banyak dan
membutuhkan waktu yang cukup lama (Depkes, 2008).

21
BAB III
METODE PENELITIAN
Metode penelitian yang dilakukan adalah penelitian eksperimental, dimana
dilihatdan diamati penyembuhan luka eksisi pada tikus jantan dengan parameter
pengamatan penutupan luka, jumlah fibroblas dan imunohikstokimia ekspresi
Platelet-Derived Factor(PDGF) BB.Penelitian dilakukan di Laboratorium
Farmakognosi dan Laboratorium Farmakologi Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara. Pembuatan simplisia, pemeriksaan karakteristik simplisia,
pembuatan ekstrak etanol daun mobe, skrining fitokimia ekstrak dan pembuatan salep
dilakukan di Laboratorium Farmakognosi. Pengujian penyembuhan luka eksisi pada
tikusdilakukan di Laboratorium Farmakologi. Pembuatan blok prafin, pengerjaan
pulasan hematoksilin eosin, dan imunohistokimia PDGF BB luka eksisi
tikusdilakukan di Laboratorium Patologi Anatomi Rumah Sakit Murni Teguh.
3.1 Alat-alat
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah alat-alat gelas
laboratorium, blender, neraca listrik, lemari pengering, rotary evaporator, hot plate
desikator, oven listrik, tanur, spektrofotometer, pH meter, wadah salep, pencukur
bulu, penggaris, cawan petri, mortir, pisau bedah dan sarung tangan.
3.2 Bahan
Bahan tumbuhan yang digunakan pada penelitian ini daun mobe. Bahan kimia
yang digunakan adalah kloral hidrat, besi (III) klorida, timbal (II) asetat, asam sulfat

22
pekat, asam klorida pekat, metanol, kloroform-isopropanol, asam asetat anhidrida,
toluene, Etanol 96%, pereaksi Meyer, pereaksi Bouchardt, pereaksi Dragendroff,
pereaksi Lieberman-Bourchard, pereaksi Molis, Xylol, adeps lanae, vaselin album,
Aquades, Alkohol 70%, larutan Buffered Natural Formalin (BNF) 10%, salep
Betadine.
3.3 Penyiapan Hewan Percobaan
Hewan percobaan yang digunakan adalah tikus jantandengan berat badan 200-
250 gram dan usia 2-3 bulan, diperoleh dari Laboratorium Farmakologi Universitas
Sumatera Utara.
3.4 Prosedur Pembuatan Simplisia
3.4.1 PengambilanBahan
Pengambilan tumbuhanmobedilakukan secara purposif tanpa membandingkan
dengan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Bahan tumbuhanmobe diambil
daridaerah kecamatan Laguboti, Kabupaten Toba Samosir, Provinsi Sumatera
Utara.Sampel yang digunakan dalam penelitian adalah bagian daunnya.
3.4.2 IdentifikasiTumbuhan Mobe
Determinasi daun mobe dilakukan di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia
Pusat Penelitian Biologi-LIPI Bogor.
3.4.3 Pembuatan Simplisia Daun Mobe
Sampel daun mobe disortasi, dicuci hingga bersih menggunakan air mengalir
lalu ditimbang.Kemudian sampel dikeringkan di lemari pengering sampai daun

23
menjadi kering.Daun kering dihaluskan menggunakan blender sehingga diperoleh
serbuk halus daun (Depkes, 2008).
3.5 Proses Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Mobe (EEDM)
Proses pembuatan ekstrak dilakukan dengan cara maserasi menggunakan pelarut
etanol.Menurut Farmakope Herbal Indonesia (2008), masukkan satu bagian serbuk
kering simplisia kedalam maserator, ditambahakan 10 bagian pelarut. Rendam selama
6 jam pertama sambil sekali-kali diaduk, kemudian didiamkan selama 18 jam.
Pisahkan maserat dengan cara disaring. Ulangi proses penyarian sekurang-kurangnya
dua kali dengan jenis dan jumlah pelarut yang sama. Selanjutnya kumpulkan semua
maserat, kemudian diuapkan dengan rotary evaporator hingga diperoleh ekstrak
kental.
3.6 Pemeriksaan Karakteristik
Pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia dan ekstrak daun mobe meliputi
pemeriksaan makroskopik, mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari
larut air, penetapan kadar sari larut etanol, penetapan kadar abu total, dan penetapan
kadar abu tidak larut asam(Depkes, 1995).
3.6.1 Pemeriksaan makroskopik
Pemeriksaan makroskopik dan organolepik dilakukan dengan mengamati
bentuk, bau dan rasa dari daun mobe dan serbuk simplisia daun mobe.
3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia daun mobe.
Serbuk simplisia daun mobediletakkan di atas kaca objek yang telah ditetesi dengan

24
larutan kloralhidrat dan ditutup dengan kaca penutup, selanjutnya diamati di bawah
mikroskop.
3.6.3 Penetapankadar air
Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluena).
Alat terdiri dari labu alas bulat 500 ml,alat penampung, pendingin, tabung
penyambung dan tabung penerima.Dimasukkan 200 ml toluena dan 2 ml air suling ke
dalam labu alas bulat, lalu didestilasi selama 2 jam. Setelah itu, toluena dibiarkan
mendingin selama 30 menit, dan dibaca volume air pada tabung penerima dengan
ketelitian 0,05 ml. Kemudian ke dalam labu tersebut dimasukkan 5 g serbuk simplisia
yang telah ditimbang seksama, labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah
toluena mendidih, kecepatan tetesan diatur lebih kurang 2 tetes tiap detik sampai
sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan tetesan dinaikkan hingga 4 tetes
tiap detik. Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan
toluena. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan
mendingin pada suhu kamar. Setelah air dan toluena memisah sempurna, volume air
dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan
kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam
persen.
3.6.4 Penetapankadar sari larut air
Sebanyak 2 g sampel, dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air-kloroform
(2,5 ml kloroform dalam air suling sampai 1 liter) dalam labu bersumbat sambil
dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, lalu
disaring. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan

25
penguap yang berdasar rata yang telah ditara dan sisa dipanaskan pada suhu 105 oC
sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam air dihitung terhadap
bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1995).
3.6.5 Penetapankadar sari larut etanol
Sebanyak 2 g sampel, dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96%
dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian
dibiarkan selama 18 jam. Kemudian disaring cepat untuk menghindari penguapan
etanol. Sejumlah 20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang
berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105 oC
sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sariyang larut dalam etanol 96% dihitung
terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1995).
3.6.6 Penetapankadar abu total
Sebanyak 2 g sampel dimasukkan dalam krus porselin yang telah dipijar dan
ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, jika
arang masih tidak dapat dihilangkan, ditambahkan air panas, saring melalui kertas
saring bebas abu. Pijarkan sisa dan kertas saring dalam krus yang sama. Masukkan
filtrat ke dalam krus, uapkan, pijarkan hingga bobot tetap, timbang. Kadar abu
dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1995).
3.6.7 Penetapankadar abu tidak larut asam
Abu yang diperoleh dalam penetapan kadar abu dididihkan dalam 25 ml asam
klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan,
disaring melalui kertas saring bebas abu, cuci dengan air panas, dipijarkan, kemudian

26
didinginkan dan ditimbang sampai bobot tetap. Kadar abu yang tidak larut dalam
asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1995).
3.7. Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak Daun Mobe
Skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak daun mobemeliputi
pemeriksaan senyawa golongan flavonoid, alkaloid, saponin, tanin, glikosida dan
steroid/triterpenoid.
3.7.1 Pemeriksaanflavonoid
Sebanyak 2 g sampel ditambahkan 10 ml air panas, dididihkan selama 5 menit
dan disaring dalam keadaan panas, ke dalam 5 ml filtrat ditambahkan 0,1 g serbuk
magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok dan
dibiarkan memisah. Flavonoida positif jika terjadi warna merah, kuning atau jingga
pada lapisan amil alkohol (Farnsworth, 1966).
3.7.2 Pemeriksaan alkaloid
Sampel ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida 2
N dan 9 ml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, didinginkan
dan disaring. Filtrat yang diperoleh dipakai untuk tes alkaloid. Diambil 3 tabung
reaksi, lalu ke dalamnya dimasukkan 0,5 ml filtrat. Pada masing-masing tabung
reaksi:
- Ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer
- Ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat
- Ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff

27
Alkaloid positif jika terjadi endapan atau kekeruhan pada dua dari tiga percobaan
diatas (Depkes, 1995).
3.7.3 Pemeriksaan saponin
Seampel ditimbang sebanyak 0,5 g dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi,
lalu ditambahkan 10 ml air panas, didinginkan, kemudian dikocok kuat-kuat selama
10 menit. Jika terbentuk busa setinggi 1-10 cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit
dan buih tidak hilang dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2 N menunjukkan
adanya saponin (Depkes, 1995).
3.7.4 Pemeriksaantanin
Sebanyak 0,5 g sampel disari dengan 10 ml air suling lalu disaring, filtratnya
diencerkan dengan air suling sampai tidak berwarna. Diambil 2 ml larutan dan
ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Jika terjadi warna biru
kehitaman atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Depkes, 1995).
3.7.5 Pemeriksaanglikosida
Sampel ditimbang sebanyak 3 g, lalu disari dengan 30 ml campuran etanol
96%-air (7:3) dan 10 ml asam klorida 2 N, direfluks selama 2 jam, didinginkan dan
disaring. Diambil 20 ml filtrat, ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II)
asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan selama 5 menit, lalu disaring. Filtrat disari dengan
20 ml campuran kloroform-isopropanol (3:2) sebanyak 3 kali. Pada kumpulan sari
lapisan air diuapkan pada suhu tidak lebih dari 50oC. Sisanya dilarutkan dengan 2 ml
metanol untuk larutan percobaan. 0,1 ml larutan percobaan diuapkan diatas penangas
air, pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes Molish, kemudian ditambahkan hati-

28
hati 2 ml asam sulfat, terbentuk cincin berwarna ungu pada batas cairan,
menunjukkan adanya ikatan gula (Depkes, 1995).
3.7.6 Pemeriksaansteroid/triterpenoid
Sampel ditimbang sebanyak 1 g, dimaserasi dengan 20 ml n-heksan selama 2
jam, disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap dan pada sisanya ditambahkan
pereaksi Liebermann-Burchard melalui dinding cawan. Apabila terbentuk warna ungu
atau merah yang berubah menjadi biru ungu atau biru hijau menunjukkan adanya
steroid/triterpenoid (Harborne, 1987).
3.8 Sediaan Salep Daun Mobe
3.8.1 Formulasi sediaan salep daun mobe
Formulasi sediaan salep dibuat menggunakan basis salep yang terdiri dari
jenis hidrokarbon dan basis serap yaitu:
R/ Adeps lanae 15 g
Vaselin Album 85 g
m.f. salep 100 g (Hamdiyah, dkk, 2013).
Pada penelitian ini dibuat sediaan salep dengan varian konsentrasi ekstrak yaitu
1%, 3%, 5% dan 7% untuk 2 kali pemakaian pagi dan sore dalam sehari selama 15
hari pengamatan.
3.8.2 Pembuatan Salep daun mobe
Disiapkan semua bahan yang akan digunakan. Bahan ditimbang sesuai dengan
formula yang ada.Langkah pembuatan salep diawali dengan dileburkan basis salep

29
adepslanae dan vaselin album diatas penangas air, selanjutnya adeps lanae dan
vaselin dimasukkan dalam mortar dan digerus hingga terbentuk basis salep,
selanjutnya setengah masa basis disisihkan kemudian dimasukkan dalam mortar
sedikit demi sedikit ekstrak etanol daun mobe bersamaan dengan sisa basis
yangdisisihkan digerus hingga homogen.
3.9 Evaluasi Sediaan Salep
3.9.1 Uji organoleptik
Uji organoleptik dilakukan dengan cara pengamatan sediaan salep secara fisik
yang meliputi warna, bau dan bentuk (Anief, 1997).
3.9.2 Uji Homogenitas
Uji homogenitas dilakukan dengan cara sediaan salep dioleskan pada kaca
preparat, kemudian diamati ada tidaknya butiran kasar (Paputungan dkk., 2014).
3.9.3 Uji pH
Uji pH dilakukan dengan cara mengukur pH sediaan menggunakan pHmeter.
Sebelumnya pH meter dikalibrasi dengan larutan dapar netral (pH 7,01)dan pH
asam (pH 4,01). Selanjutnya dicuci elektroda dengan aquades dan
dikeringkan.Kemudian 1 g sediaan salep dilarutkan dalam 100 mL aquades.
Selanjutnya dicelupkan elektroda dan dicatat angka yang tertera pada monitor pH
meter (Rowlins, 2003).
3.10 Pembuatan Luka Hewan Uji
Tikus jantan yang digunakan sebanyak 24 ekor untuk 6 perlakuan dengan
masing-masing kelompok jumlah 4 tikus jantan.Rancangan Acak Lengkap (RAL).

30
Tikus diaklimatisasi selama 7 hari, kemudian di anastesi menggunakan ketamin HCl,
selanjutnya rambut dicukur dibagian punggung tikus yang akan di buat luka sampai
licin kemudian di bersihkan dengan kapas yang diberi alkohol 70%. Bagian
punggung tikus dibuat luka dengan menggunakan punch biopsy 2 cm. Punch biopsy
ditekan pada kulit kemudian diputar sambil ditekan dan ditarik ke atas sampai
jaringan yang terpotong (Kintoko, et al, 2017).
3.11 Perawatan Luka Hewan Uji
Perawatan luka dilakukan dengan cara pengolesan sediaan dua kali sehari,
pada pagi dan sore hari. Tikusjantanakan dibagi dalam 6 kelompok yaitu:
1. Kelompok I sebagai kontrol negatif diberikan basis salep
2. Kelompok II sebagai kontrol positif diberikan salep povidone iodine
3. Kelompok III diberikan salep ekstrak etanol daun mobe 1%
4. Kelompok IV diberikan salep ekstrak etanol daun mobe 3%
5. Kelompok V diberikan salep ekstrak etanol daun mobe 5%
6. Kelompok VI diberikan salep ekstrak etanol daun mobe 7%
3.12 Pengamatan Pengurangan Luka
Pengamatan pengurangan luka dengan cara
menghitung presentase pengurangan luka menggunakan rumus :
P% =
Keterangan :d0 : diameter luka hari ke-0

dx : diameter luka hari pengamatan

31
3.13 Pembuatan Blok Parafin
Pengambilan jaringan luka dilakukan dengan mengorbankan hewan coba
menggunakan klorofrom. Setelah efek tercapai, dilakukan pengambilan luka eksisi
dengan mengikut sertakan jaringan kulit normal, segera dibuat dalam bentuk blok
parafin. Jaringan hasil eksisi direndam dengan buffer formalin 10% selama 2-4 jam.
Kemudian dilakukan proses dehidrasi dengan alkohol bertingkat yaitu:
a. Etanol 80% selama 30 menit-1 jam
b. Etanol 95% selama 30 menit-1 jam
c. Etanol 95% selama 30 menit-1 jam
d. Etanol absolut selama 30 menit-1 jam dengan tiga kali pengulangan
e. Larutan xilen dua kali, masing-masing selama 30 menit-1 jam
f. Parafin cair tiga kali, masing-masing selama 30 menit-1 jam
Dilakukan pencetakan dan dibiarkan membeku, kemudian blok parafin dipotong
dengan alat mikrotom dengan ketebalan 4-6 μm (Warsito dan Wuryastuti, 2014).
3.14 Pemerikasaan Jumlah Fibroblas
Dalam penelitian ini digunakan 12 ekor tikus jantan dengan 3 perlakuan
dengan masing-masing kelompok berjumlah 4 tikus jantanperlakuan yaitu:
1. Kelompok I sebagai kontrol negetif diberikan basis salep
2. Kelompok II sebagai kontrol positif diberikan salep povidone iodine
3. Kelompok III diberikan salep ekstrak etanol daun mobe 5%

32
Pemeriksaan jumlah fibroblast dilakukan pada hari ke 3,7 dan 14tikus jantan
dikorbankan menggunakan klorofom. Setelah dikorbankan, diambil preparat jaringan
kulit pada sediaan paraffin dengan menggunakan pewaraan Hematoksilin Eosin
diamati dibawah mikroskop dengan pembesaran 400 kali pada 3 lapang pandang
untuk memperjelas fibroblast yang terbentuk.Proses pembuatan preparat histologi dan
pewarnaan HE (Hasibuan, 2014):
a. Jaringan yang telah diblok parafin dimasukkan ke dalam waterbath, kemudian
kulit diambil menggunakan object glass dan disimpan dalam inkubator
dengan suhu 37 0C selama 24 jam.
b. Dideparafinasi dengan larutan xylene (I dan II) selama 2 menit.
c. Kemudian dilakukan proses rehidrasi dengan cara merendamkan sediaan ke
dalam etanol bertingkat selama 1 menit. Kemudian sediaan dicuci dengan air
yang mengalir selama 1 menit.
d. Preparat direndam dalam larutan Mayer’s Haematoxyllin selama 8 menit.
e. Dicuci dengan air mengalir selama 30 detik.
f. Dicelupkan kedalam larutan lithium carbonat selama 15-30 detik.
g. Dicuci dengan air mengalir selama 2 menit.
h. Direndam dalam larutan eosin selama 2-3 menit.
i. Dicuci dengan air mengalir selama 30-60 detik.
j. Preparat dicelupkan kedalam larutan etanol 95% dan etanol absolut sebanyak
10 kali celupan selama 2 menit.
k. Kemudian dicelupkan ke dalam xylene I selama 1 menit dan xylene II selama
2 menit.

33
l. Setelah pewarnaan, sediaan ditetesi perekat Canada balsem (Entellan®) dan
ditutup dengan cover glass.
m. Diamati dengan menggunakan mikroskop cahaya.
Pengamatan hasil jumlah fibroblas pada preparat dengan pewarnaan HE,
dilakukan dengan mencari daerah sebaran fibroblas yang relatif merata lalu
menggunakan lensa obyektif 400 kali gambar preparat difoto. Dengan menggunakan
bantuan Image Raster dibuat kotak dengan ukuran 50 μm x 50 μm, lalu dihitung
jumlah fibroblas perlapang pandang dengan 5 kali pengulangan secara acak
(Palumpum, dkk., 2017)
3.15 Pemeriksaan Imunohistokimia
Pengambilan jaringan luka dilakukan pada hari ke 3,7 dan 14 dengan
mengorbankan tikus jantan menggunakan klorofom. Setelah efek tercapai, dilakukan
eksisi pada bagian luka yang paling luas dengan mengikutsertakan jaringan kulit
normal. Jaringan hasil eksisi segera dibentangkan dikertas untuk mempermudah
pemotongan dengan microtome, kemudian difiksasi dalam formalin buffer 10% dan
dibuat blok paraffin, kemudian dipotong dengan ketebalan 4-6 mikron.
3.15.1 Pemeriksaan imunohistokimia PDGF BB
Pengujian ekspresi PDGF BB menggunakan tikus yang sama pada pengujian
pemeriksaan jumlah fibroblast, pengujian ini menggunakan metode IHC, dengan
mengamati dan menghitung ekspresi PDGF BB kulit eksisi pada hari-3, 7, dan 14

34
dengan menggunakan mikroskop. Prosedur pulasan immunohistokimia PDGF BB di
Laboratorium Patologi Anatomi Rumah Sakit Murni Teguh:
a. Deparafinisasi dengan mencelupkan slaid ke dalam cairan xylene sebanyak 3
kali, masing-masing 5 menit
b. Rehidrasi dengan cara mencelupkan secara berurutan dalam etanol 100%,
90%, 70% masing-masing selama 5 menit
c. Dimasukkan kedalam microwave, dipanaskan pada suhu 1000C selama 10
menit, kemudian dipanaskan pada suhu 800C selama 10 menit
d. Didinginkan di suhu ruang ±40-60 menit
e. Bilas/rendam dengan air mengalir selama 5 menit.
f. Novopen (untuk memberikan batasan pada jaringan
g. Peroxidase block reagen selama 5 menit
h. Bilas dengan PBS cuci selama 5 menit
i. Protein block
j. Bilas dengan PBS cuci sebanyak 2 kali masing-masing selama 5 menit
k. Inkubasi dengan antibodi primer PDGF BB dengan pengenceran 1 : 50 selama
1jam
l. Bilas dengan PBS cuci sebanyak 2 kali masing-masing selama 5 menit
m. Post primary selama 30 menit
n. Bilas dengan PBS cuci sebanyak 2 kali masing-masing selama 5 menit
o. Compact polymer
p. Bilas dengan PBS cuci sebanyak 2 kali masing-masing selama 5 menit

35
q. DAB (1:20), Chromogen 1 bagian + substrate chromogen 19 bagian selama 5
menit
r. Bilas dengan aquades sebanyak 2 kali, masing-masing selama 5 menit
s. Haematoxylin selama 5 menit
t. Bilas dengan aquades sebanyak 2 kali, masing-masing selama 5 menit
u. Dehidrasi dengan cara mencelupkan secara berurutan dalam etanol 70%, 90%,
100% masing-masing selama 5 menit
v. Clearing dengan mencelupkan slaid ke dalam cairan xylene sebanyak 3 kali,
masing-masing 5 menit
w. Teteskan Entellan dan tutup dengan cover slide
Sel berekspresi jika memberikan warna coklat tua, coklat sedang dan coklat muda
keunguan, sedangkan yang tidak mengekpresikan berwarna ungu.Analisis
mikroskopis dilakukan dengan mengamati tingkat proliferasi dengan metode
IHC.Analisis kuantitatif tingkat proliferasi sel dilakukan dengan parameter
mAgNOR, yaitu dengan menghitung ekspresipada 200 sel yang diamati. Pengamatan
preparat dilakukan sebanyak lima lapang pandang yang berbeda untuk tiap preparat
(Pratiwi, dkk. 2010).
3.16 Analisis Data
Data yang dihasilkan dalam penelitian ini akan dianalisis dengan
menggunakan perangkat lunak SPSS versi 21.0 dengan metode one way analisys of
variance (ANOVA) untuk menentukan perbedaan rata-rata di antara sampel. Harga
P<0,05 menunjukkan perbedaan yang signifikan (α = 0.05)

36
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan
Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan oleh Lembaga Ilmu Pengetahuan
Indonesia Pusat Penelitian Biologi- LIPI Bogordapat dilihat pada Lampiran 1
halaman 67.
4.2. Hasil Pemeriksaan Makroskopik
Hasil dari makroskopik daun mobe adalah bentuk daun membulat dan panjang
bertepi rata dan bagian bawah daun berbulu(Lampiran 3 halaman 69).
4.3. Hasil Pemeriksaan Mikroskopik
Hasil pemeriksaan simplisia daun mobe yaitu rambut penutup dan jaringan
vascular dan memiliki tipe stomata anisositik.Hasil pemeriksaan mikroskopik dapat
dilihat pada Lampiran 4 halaman 70.
4.4 Hasil Karakterisasi Simplisia
Dalam Depkes (2000), pemeriksaan standarisasi simplisia dan ekstrak adalah
penentuan dalam persyaratan yang akan digunakan sebagai bahan obat dan menjadi
menjadi penetapan nilai parameter produk. Hasil pemeriksaan karaterisasi simplisia
daun mobe dapat dilihat pada Table 4.1.

37
Tabel 4.1.Hasil karakterisasi simplisia daun mobe.
No. Karakterisasi Hasil karakterisasi
simplisia daun mobe (%)
1 Kadar air 7,99
2 Kadar sari larut air 26,58
3 Kadar sari larut etanol 10,38
4 Kadar abu total 10,04
5 Kadar abu tidak larut dalam asam 0,48
Penetapan kadar air pada simplisia bertujuan untuk mengetahui jumlah air
yang terdapat didalam simplisia. Hasil penetapan kadar air daun mobe adalah 8%,
hasil tersebut sesuai dengan standar Materia Medika Indonesia (MMI) yaitu kurang
dari 10% karena kelebihan air didalam suatu simplisia dapat menyebabkan
pertumbuhan mikroba, jamur sehingga dapat merusak bahan aktif didalam simplisia
tersebut (WHO, 1998). Hasil penetapan kadar sari larut air dari daun mobe sebesar
26,58%, sedangkan kadar sari larut etanol sebesar 10,38%. Penetapan kadar sari larut
air dan kadar sari larut etanol ini bertujuan untuk menentukan jumlah senyawa aktif
yang terekstraksi dalam pelarut dari sejumlah serbuk simplisia (Atma, 2018).
Hasil dari penetapan kadar abu total dari daun mobe sebesar 10,04%
sedangkan kadar abu tidak larut asam sebesar 0,48%. Penetapan kadar abu total dan
kadar abu tidak larut asam bertujuan untuk memperlihatkan gambaran kandungan
mineral yang berasal dari proses awal sampai terbentuknya ekstrak. Kadar abu total
dan kadar abu tidak larut asam ini sebaiknya memiliki nilai yang rendah karena
parameter ini menunjukkan terdapatnya pencemaran logam berat yang bertahan pada
suhu tinggi (Ratnani, dkk, 2015).

38
4.5 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak
Skrining fitokimia terhadap simplisia daun mobe dan ekstrak etanol daun
mobe dilkakukan untuk mendapatkan informasi tentang kandungan senyawa
metabolit sekunder yang terdapat didalamnya.Hasil skrining fitokimia simplisia dan
ekstrak daun mobe dapat dilihat pada Tabel 4.2.
Tabel 4.2. Hasil skrining fitokimia simplisia dan ekstrak daun mobe
Skrining Pereaksi Warna/Endapan Simplisia Ekstrak
Alkaloid Mayer Endapan putih
Bouchardat Endapan kuning - -
Dragendroff Endapan coklat
Flavonoid Mg + HCl pekat Jingga + +
Tanin FeCl3 1% Hijau kehitaman + +
Saponin Air Busa
panas/dikocok + +
Glikosida Molisch Cincin ungu + +
Steroid/triterpenoid Lieberman- Biru ungu + +
Burchard
Hasil pengujian skrining fitokimia simplisia dan ekstrak daun mobe terdapat
senyawa flavonoid, tannin, saponin, glikosida dan steroid/triterpenoid sedangkan
alkaloid tidak terkandung didalam daun mobe.Senyawa-senyawa diatas memiliki sifat
antibakteri sehingga dapat mempercepat terjadinya penyembuhan luka.Flavonoid dan
tanin yang bersifat sebagai antiseptik yang berperan penting dalam melindungi luka
dari pertumbuhan bakteri pada fase inflamasi dan dapat membantu mempercepat
penyembuhan luka dan meningkatan jumlah pembentukan pembuluh darah kapiler
dan sel-sel fibroblast (Lydia, dkk, 2016).
4.6 Pembuatan Sediaan Salep
Ekstrak etanol daun mobe yang diperoleh selanjutnya diformulasi
menjadisediaan salep dengan variasi konsentrasi 1%; 3%; 5% dan 7%.Basis salep

39
yang digunakan terdiri atas campuran vaselin album dan adeps lanae.Penambahan
ekstrak ke dalam basis salep dilakukan sedikit demi sedikit bersamaan dengan
setengah basis salep yang telah disisihkan sebelumnya.Hal ini bertujuan agar ekstrak
merata dalam sediaan salep.Pemilihan basis salep diharapkan tidak mengganggu efek
terapi dari zat aktif yang terkandung dari ekstrak (Anief, 1997).
4.7. Evaluasi Sediaan Salep
4.7.1 Uji organoleptik
Pengamatan uji organoleptik salep ekstrak daun mobe terdiri dari warna, bau
dan bentuk.Hasil pengamatan uji organoleptik tertera pada Tabel 4.3.
Tabel 4.3. Hasil uji organoleptik

Formula Bentuk Warna Bau
Basis salep Setengah padat Putih kekuningan Khas salep

Salep povidone iondine Setengah padat Merah kehitaman Khas povidone iodine
SEEDM 1% Setengah padat Hijau kecoklatan Khas lemah daun mobe
SEEDM 3% Setengah padat Hijau kecoklatan Khas lemah daun mobe
SEEDM 5% Setengah padat Hijau tua Khas kuat daun mobe
SEEDM 7% Setengah padat Hijau kehitaman Khas kuat daun mobe
Keterangan : SEEDM : Salep Ekstrak Etanol Daun Mobe
Bentuk SEEDM yang dihasilkan sesuai dengan kriteria bentuk salep yaitu
setengah padat.Bentuk dan konsistensi yang dihasilkan tidakmengalami perubahan
setiap minggu selama waktu pengamatan.Berdasarkan warna salep yang dihasilkan
SEEDM 1% dan 3% terlihat berwarna hijau kecoklatan sementara SEEDM 5%
berwarna hijau tua dan SEEDN 7% berwarna hijau kehitaman.Warna SEEDM
yangdihasilkan tidak mengalami perubahan selama 3 minggu.Perbedaan warna yang
dihasilkan dipengaruhi oleh perbedaan konsentrasi ekstrak yang digunakan.Semakin

40
besar konsentrasi ekstrak yang digunakan dalam komposisi salep maka warnanya
akan semakin pekat mendekati warna ekstrak yang dihasilkan. Asumsiini sejalan
dengan pengamatan warna salep pada penelitian yang dilakukan oleh Paputungan dkk
(2014).Bau yang dihasilkan berupa bau khas lemah daun mobe , dimana bau yang
dihasilkan dari SEEDM 7% lebih kuat dibandingkan SEEDM 1%; 3% dan 5%.
Kekuatan bau pada salep mengalami penurunan selama waktu pengamatan.Hal ini
dipengaruhi oleh udara sehingga terjadi reaksi oksidasi dari ekstrak(Young et al.,
2002).
4.7.2 Uji pH
Uji pH dengan pH meter dilakukan setiap minggu selama waktu pengamatan.
Hasil uji pH sediaan salep dapat dilihat pada Tabel 4.4.
Tabel 4.4. Hasil uji pH salep

Formula pH rata-rata pada hari ke
1 7 14
Basis 6,61 6,71 6,90
Salep
Salep Povidone 5,62 5,89 5,97
Iodine
SEEDM 6,52 6,66 6,70
1%
SEEDM 3% 6,66 6,67 6,69
SEEDM 5% 6,57 6,66 6,71

SEEDM 7% 6.67 6,71 6,72
Salep ekstrak etanol daun mobe memiliki rata-rata belum memenuhi
persyaratansediaan salep yang baik karena dimana nilai pH sediaan berada diatas nilai
pH kulit yaitu 4,5-6,5 (Anief, 2007; Rowlins, 2003). Berdasarkan hasil yang
diperoleh diasumsikan nilai pH sediaan salep ekstrak etanol daun mobe dipengaruhi

41
oleh nilai pH basis salep yang berada di atas 6,5. Nilai pH salep yang terlalu basa
mengakibatkan kulit menjadi bersisik (Tranggono dan Latifah, 2007).Nilai pH salep
ekstrak etanol daun mobe kurang stabil karena mengalami sedikit peningkatan setiap
minggunya selama waktu pengamatan.Hal ini kemungkinan dipengaruhi oleh kondisi
penyimpanan yang kurang baik dan ekstrak yang telah teroksidasi (Young et al.,
2002).Uji pH bertujuan untuk menentukan kestabilan salep yang dihasilkan. Oleh
sebab itu perlu dilakukan pengkajian lebih lanjut mengenai formulasi yang lebih baik
dengan penambahan eksipien lain agar dihasilkan sediaan salep yang stabil dan
memenuhi nilai pH kulit.
4.7.3 Uji homogenitas
Homogenitas salep ekstrak etanol daun mobe menunjukkan sediaan yang
homogen.Kestabilan homogenitas salep selama 2 minggu dapat dilihat pada Tabel
4.5.
Tabel 4.5. Hasil uji homogenitas

Formula Homogenitas (Hari)
1 7 14
Basis Salep Homogen Homogen Homogen
Povidone iodine Homogen Homogen Homogen
SEEDM 1% Homogen Homogen Homogen
Homogenitas salep ditandai dengan tidak ada butiran kasar dan tidak
menggumpal(Muthalib dkk., 2013).Berdasarkan hal tersebut menunjukkan bahwa

42
ketercampuran bahan dasar salep dan ekstrak etanol daun mobe tergolong baik
sehingga pada penggunaanya dapat merata.
4.8 Penyembuhan Luka Eksisi
Saat kulit mengalami kerusakan akibat terjadinya luka maka tubuh akansegera
merespon untuk melakukan perbaikian pada kulit. Mekanisme penyembuhan tersebut
tersusun atas beberapa tahapan hingga diperoleh perbaikan anatomi dan fungsi dari
kulit, proses penyembuhan luka termasuk dalam fase yaitu, fase hemostasis, fase
inflamasi, fese proliferasi, dan fase remodeling.
Gambar 4.1 Luka Eksisi Pada Tikus
Pada penelitian ini seperti pada gambar 4.1, punggung tikus yang telah dibuat
luka dirawat dengan pengolesan salepsebanyak 2 kali sehari pagi dan sore hari selama
15 hari. Penelitian ini menggunakan 6 perlakuan yaitu perlakuan 1 dioleskan basis
salep, perlakuan 2 dioleskan salep povidone iodine, perlakuan 3 dioleskan SEEDM
1%, perlakuan 4 dioleskan SEEDM 3%, perlakuan 5 dioleskan SEEDM 5% dan
perlakuan 6 dioleskan SEEDM 7%. Salep dioleskan sepanjang luka yang terbuka
menggunakan cotton bud.
Penyembuhan luka eksisi dilihat berdasarkan pengurangan presentase luka
selama 15 hari perlakuan. Pada hari ke- 3 sudah terlihat pengurangan luka pada

43
kontrol positif yaitu salep povidone iodine sebesar 32,8%, kontrol negatif yaitu basis
salep terjadi pengurangan luka sebesar 4,31%, SEEDM 1% sebesar 12,42%, SEEDM
3% sebesar 22,17%, SEEDM 5% sebesar 28,43% dan SEEDM 7% sebesar 25,52%
(Gambar 4.2).Berdasarkan perhitungan statistik, pada hari ke-3 terdapat perbedaan
yang signifikan antara perlakuan dengan pemberian SEEDM 1%, SEEDM 3%,
SEEDM 5% dan SEEDM 7% memberikan perbedaan yang signifikan terhadap
kontrol positif.
40
a
Pengurangan diameter luka
35
a
30 ab
25 ab
20
ab
(%)
15
10 b
5
0
kontrol kontrol SEEDM SEEDM SEEDM SEEDM
positif negatif 1% 3% 5% 7%
Perlakuan Hari ke- 3
Gambar 4.2Grafik Persentase Pengurangan Diameter Luka Eksisi Tikus Pada Hari
ke-3(a) p<0,05 terdapat perbedaan signifikan dengan kelompok kontrol
negatif. (b) p<0,05 terdapat perbedaan signifikan dengan kelompok
kontrol positif.
Pengurangan hari ke-6 pada kontrol positif sebesar 56,37%, kontrol negatif
terjadi pengurangan luka sebesar 20,38%, SEEDM 1% sebesar 25,49%, SEEDM 3%
sebesar 37,68%, SEEDM 5% sebesar 45,31% dan SEEDM 7% sebesar 49,85%
(Gambar 4.3). Berdasarkan hasil statistik perbandingan SEEDM 7% lebih besar
dengan SEEDM 5% pada hari ke- 6 dibandingkan pada hari ke-3.Pengurangan luka

44
pada kontrol positif memberikan hasil yang berbeda secara signifikan dengan
perlakuan SEEDM 1%, SEEDM 3%, SEEDM 5% dan SEEDM 7%.
Pemgurangan 80 a
diameter luka 60 ab ab ab
(%) 40 b b
20
0
kontrol kontrol SEEDM SEEDM SEEDM SEEDM
positif negatif 1% 3% 5% 7%
kontrol positif.
Pengurangan luka pada hari ke- 9 pada kontrol positif sebesar 67,85%, kontrol
negatif pengurangan luka sebesar 32,47%, SEEDM 1% sebesar 42,85%, SEEDM 3%
sebesar 49,71%, SEEDM 5% sebesar 60,31% dan SEEDM 7% sebesar 61,58%
(Gambar 4.4). Berdasarkan hasil dari statistik SEEDM 5% dan SEEDM 7% tidak
berbeda secara signifikan pada hari ke 6 tetapi terhadap kontrol positif berbeda secara
signifikan terhadap setiap perlakuan.
80 a ab ab
diameter luka
Pengurangan
60 ab ab
40 b
(%)
20
0
kontrol kontrol SEEDM 1% SEEDM 3% SEEDM 5% SEEDM 7%
positif negatif
kontrol positif.

45
Pengurangan luka pada hari ke- 12 pada kontrol positif sebesar 72,05%,
kontrol negatif pengurangan luka sebesar 47,68%, SEEDM 1% sebesar 61,97%,
SEEDM 3% sebesar 63,66%, SEEDM 5% sebesar 75,62% dan SEEDM 7% sebesar
73,54% (Gambar 4.5).Berdasarkan hasil statistik pada hari ke-12 SEEDM 5%
memiliki pengurangan paling besar tetapi tidak berbeda secara signifikan dengan
kontrol positif.
100
a ab
80 a
ab ab
60 b
40
(%)
20
0
kontrol kontrol SEEDM 1% SEEDM 3% SEEDM 5% SEEDM 7%
positif negatif
ke-12a) p<0,05 terdapat perbedaan signifikan dengan kelompok
kontrol negatif. (b) p<0,05 terdapat perbedaan signifikan dengan
kelompok kontrol positif.
Pengurangan luka pada hari ke- 15 yaitu hari terakhir masa penyembuhan luka
pada kontrol positif sebesar 91,92%, kontrol negatif pengurangan luka sebesar
67,16%, SEEDM 1% sebesar 75,42%, SEEDM 3% sebesar 75,67%, SEEDM 5%
sebesar 88,75% dan SEEDM 7% sebesar 86,00% (Gambar 4.6). Berdasarkan hasil
statistik pengurangan luka terhadap perlakuan SEEDM 5% tidak berbeda secara
signifikan terhadap perlakuankontrolpositif.

46
120

100 a ab a
ab ab
80 b
(%)
60
40
20
0
kontrol kontrol SEEDM 1%SEEDM 3%SEEDM 5%SEEDM 7%
positif negatif
ke-15a) p<0,05 terdapat perbedaan signifikan dengan kelompok
kontrol negatif. (b) p<0,05 terdapat perbedaan signifikan dengan
kelompok kontrol positif
Penyembuhan luka eksisi pada tikus mengalami fase hemostasis, inflamasi,
proliferasi, dan remodeling.Dibandingkan dengan kontrol negatif yaitu basis salep
memiliki penyembuhan paling lambat dibandingkan perlakuan yang lainnya, salep
yang mengandung ekstrak etanol daun mobe memberikan penyembuhan luka
dibandingakn kontrol negatif karena terdapatnya kandungan metabolit sekunder.
Peran metabolit sekunder salah satunya adalah flavonoid karena memiliki fungsi efek
anti inflamasi dan antikosidan serta dapat menurunkan udem pada proses
penyembuhan luka (Herni dan Abdul, 2014).
Jumlah presentase pengurangan luka eksisi pada tikus yang diberikan
perawatan menggunakan salep ekstrak etanol daun mobe dengan konsentrasi 1%; 3%;
5% dan 7%, basis salep dan salep povidone iodine dari awal sampai hari ke- 15
memberikan hasil bahwa pengurangan luka paling tinggi adalah kontrol positif yaitu

47
povidone iodine dan paling rendah adalah kontrol negatif yaitu basis salep. Hasil
pengujian pemberian SEEDM yang paling baik dalam peningkatan presentase
pengurangan luka adalah pemberian SEEDM 5% karena selama masa pengamatan
pengurangan luka presentase yang dihasilkan tidak berbeda secara signifikan dengan
kontrol positif.
4.9 Pemeriksaan Jumlah Fibroblas
Proses penyembuhan luka merupakan proses biologis yang terjadi di dalam
tubuh, melibatkan rangkaian proses yang rumit, rentan, dan sangat mungkin terjadi
gangguan ataupun kegagalan, sehingga diperlukan kondisi yang optimal untuk
mendapatkan penyembuhan yang baik. Pada proses penyembuhan luka, terjadi
serangkaian interaksi antara berbagai jenis sel mediator sitokin, dan matriks ekstrasel
terangkum dalam tiga fase yang saling tumpang tindih, yaitu fase inflamasi, fase
proliferasi, serta fase remodeling jaringan (Eva et al, 2017). Proliferasi dari fibroblas
menentukan hasil akhir dari penyembuhan luka.Fibroblas akan menghasilkan kolagen
yang akan menautkan luka dan fibroblas juga akan mempengaruhi proses reepitelisasi
yang akan menutup luka. Peran fibroblas sangat besar pada proses perbaikan, yaitu
bertanggung jawab pada persiapan menghasilkan produk struktur protein yang akan
digunakan selama proses rekonstruksi jaringan.
Gambaran histopatologi fibroblast dapat dilihat pada (Gambar 4.8), pada hari
ke-3 rerata jumlah fibroblast pada perlakuan kontrol positif adalah 35,4 sel/lapang
sedangkan kontrol negatif adalah 27,25 sel/lapang dan SEEDM 5% jumlah fibroblast
sebanyak 43,25 sel/lapang. Pada gambar 4.8, dapat dilihat SEEDM 5% lebih dapat

48
meningkatkan jumlah fibroblast dibandingkan kontrol positif dan negatif.
Berdasarkan hasil statistik pembentukan jumlah fibroblast pada hari ke-3 kontrol
positif berbeda secara signifikan dengan kontrol negatif akan tetapi perlakuan
SEEDM 5% tidak berbeda secara signifikan terhadap kontrol positif(Lampiran 11
halaman 84)
80
a
70
a a
60 a
Rerata Fibroblas
50
Sel/Lapang
a b
40 a b
30 b
20
10
0
HARI KE 3 HARI KE 7 HARI KE 14
KONTROL NEGATIF KONTROL POSITIF SEEDM 5%
Gambar 4.7 Grafik Rerata Jumlah Fibroblas Luka Eksisia) p<0,05 terdapat
perbedaan signifikan dengan kelompok kontrol negatif. (b) p<0,05
terdapat perbedaan signifikan dengan kelompok kontrol positif
Dibandingkan hari ke- 3, rerata jumlah fibroblast pada hari ke- 7 pada kontrol
negatif adalah 35,75 sel/lapang sedangkan kontrol positif menghasilkan jumlah
fibroblast sebanyak 60,2 sel/lapang dan SEEDM 5% adalah 70,25 sel/lapang. Rerata
jumlah fibroblas terbanyak dihasilkan oleh SEEDM 5%, Berdasarkan hasil statistik
pada hari ke- 7 kontrol positif berbeda secara signifikan terhadap kontrol negatif akan
tetapi SEEDM 5% tidak berbeda secara signifikan dengan kontrol positif.
Hari ke- 14 rerata jumlah fibroblast kontrol positif adalah 53,4 sel/lapang,
sedangkan negatif sebanyak 41,5 sel/lapang dan SEEDM 5% rerata jumlah fibroblast

49
sebanyak 60,25 sel/lapang. Berdasarkan hasil statistik kontrol positif berbeda secara
signifikan terhadap kontrol negatif akan tetapi perlakuan SEEDM 5% tidak berbeda
secara signifikan dengan kontrol positif.
(a) (b)
(c)
Gambar 4.8Gambaran mikroskopik histopatologi fibroblas pada kulit tikus hari ke- 3
dengan perbesaran 400 kali.
Keterangan: : Fibroblas : Kolagen

a. Kontrol positif
b. Kontrol negatif
c. SEEDM 5%

50
(a) (b)
(c)
Gambar 4.9Gambaran mikroskopik histopatologi fibroblas pada kulit tikus hari ke- 7
dengan perbesaran 400 kali

a. Kontrol positif
b. Kontrol negatif
c. SEEDM 5%

51
(a) (b)
(c)
Gambar 4.10Gambaran mikroskopik histopatologi fibroblas pada kulit tikus hari ke-
14 dengan perbesaran 400 kali

a. Kontrol positif
b. Kontrol negatif
c. SEEDM 5%
Fibroblast merupakan sel utama dalam menghasilkan kolagen yang berperan
dalam penyembuhan luka, seperti kolagen tipe I (berperan dalam pembentukan
fibrosis), III (granulasi) dan VIII (integritas jaringan). Disamping itu fibroblast juga

52
menghasilkan fibronektin, yang bersama sama dengan kolagen menjadi penyusun
matriks ekstraseluler. Dari hasil rerata jumlah fibroblast pada hari ke 14 terjadi
penurunan hal ini disebabkan karena kebutuhan kolagen yang diproduksi oleh
fibroblast sudah optimal dalam pembentukan jaringan baru pada hari ke-7 yang
mampu menginduksi sel-sel sekitar luka untuk menghasilkan kolagen, maka dari itu
fibroblas akan berhenti menghasilkan kolagen apabila fase granulasi jaringan
mencapai puncaknya dan jaringan granulasi yang kaya firoblas digantikan oleh
jaringan parut yang aseluler sehingga jumlah firoblas akan menurun setelah hari ke-7
(Oky dkk, 2012).
Meningkatkan jumlah fibroblas dan kolagen karena adanya kandungan
metabolit sekunder yaitu tanin dan flavonoid.Tanin mempunyai aktivitas mekanisme
seluler yaitu membersihkan radikal bebas dan oksigen reaktif, meningkatkan
penyambungan luka, serta meningkatkan pembentukan pembuluh darah kapiler serta
aktivasi fibroblas. Flavonoid bekerja sebagai antioksidan dan antibakteri yang bisa
meningkatkan aktivasi dan proliferasi fibroblas, sehingga memicu pembentukan
kolagen dan mempercepat proses penyembuhan luka (Nurdiana dkk, 2016).
4.10 Imunohistokimia PDGF BB
Dalam penelitian ini menghitung skor ekspresi PDGF BB kulit tikus untuk
melihat apakah terdapat peningkatan proliferasi sel sehingga dapat memperbaiki sel
yang rusak akibat luka.Semakin tinggi nilai skor ekspresi PDGF BB, maka semakin
besar pula proliferasi selnya sehingga sel-sel yang rusak mengalami
perbaikan.Gambaran mikroskopik pulasan kulit dengan protein PDGF BB dapat

53
dilihat pada gambar 4.10-4.12.Rerata skor ekspresi PDGF BB pada kulit tikus dapat
dilihat pada gambar 4.9.Perhitungan skor ekspresi PDGF BB pada tiap-tiap kelompok
perlakuan dilakukan menggunakan mikroskop cahaya dengan perbesaran 400 kali dan
dibagi menjadi 4 lapangan pandang.Dihitung persentase sel yang mengekspresikan
PDGF BB (berwarna coklat) dari 200 sel yang diamati dengan bantuan aplikasi
Image Raster.
200
Jumlah ekspresi PDGF
ab ab ab
150 a
b
Sel/Lapang
100
BB
50
0
Hari ke 3 Hari ke 7 Hari ke 14
Kontrol negatif Kontrol positif SEEDM 5%
Gambar 4.11Rerata skor ekspresi PDGF BB pada kulit tikusa) p<0,05 terdapat
perbedaan signifikan dengan kelompok kontrol negatif. (b) p<0,05
terdapat perbedaan signifikan dengan kelompok kontrol positif
Pada hari ke- 3 rerata jumlah skor ekspresi PDGF BB untuk kontrol positif
sebanyak 89 sel/lapang, sedangkan untuk kontrol negatif sebanyak 87 sel/lapang dan
untuk SEEDM 5% sebanyak 131,75 sel/lapang. Berdasarkan hasil statistik kontrol
positif berbeda secara signifikan terhadap SEEDM 5% (Lampiran 12 halaman
87).Rerata jumlah skor ekspresi PDGF BB dibandingkan hari ke-3, pada hari ke- 7
mengalami peningkatan pada masing-masing perlakuan kontrol positif adalah 118,25
sel/lapang, sedangkan untuk kontrol negatif sebanyak 91,25 sel/lapang dan SEEDM
5% sebanyak 137,25 sel/lapang. Berdasarkan hasil statistik kontrol positif berbeda
secara signifikan terhadap SEEDM 5% (Lampiran 12 halaman 87).Pada hari ke- 14

54
rerata skor PDGF BB untuk kontrol positif sebanyak 122,5 sel/lapang, sedangkan
untuk kontrol negatif rerata skor PDGF BB sebanyak 109,5 dan rerata skor PDGF BB
untuk SEEDM 5% sebanyak 141,5 sel/lapang. Berdasarkan hasil statistik kontrol
positif berbeda secara signifikan terhadap SEEDM 5%(Lampiran 12 halaman 87) dari
hari ke 3 sampai hari ke 14 hasil rerata pada SEEDM 5% lebih meningkat
dibandingkan kontrol positif dan kontrol negatif.
(a) (b)
(c)
Gambar 4.11.Gambaran Mikroskopik IHC Ekspresi PDGF BB Luka Eksisi Tikus

Hari ke- 3 (perbesaran 400 kali)
Keterangan : : Ekspresi (+) : Ekspresi (-)
a. Kontrol positif
b. Kontrol negatif
c. SEEDM 5%

55
(a) (b)
(c)

a. Kontrol positif
b. Kontrol negatif
c. SEEDM 5%

56
(a) (b)
(c)

a. Kontrol positif
b. Kontrol negatif
c. SEEDM 5%
d.
Platelet derived growth factorBB(PDGF) berperan pada setiap fase pada
proses penyembuhan luka. PDGF BB dilepaskan dari degranulasi trombosit pada luka

57
dan terdapat pada cairan luka.PDGF BB menstimulasi mitogenisitas dan kemotaksis
neutrofil, makrofag, fibroblas, dan sel otot polos ke lokasi luka dengan menginisiasi
respon inflamasi selama proses penyembuhan luka. Platelet yang beraktivasi akan
menyebabkan platelet lain untuk beregenerasi dan segera akan memenuhi daerah luka
sehingga platelet dan bekuan darah menjadi stabil. Pembentukan bekuan darah pada
daerah luka akan diisi oleh sel fibroblast, masenkim,osteoblas dan kondroblas yang
bermigrasi, kemudian berproliferasi akibat pengaruh adanya PDGF BB yang akan
menarik makrofag untuk fagositosis mikroba saat terjadinya luka (Hendrik dkk,
2017). Secara keseluruhan pemberian salep ekstrak etanol daun mobe 5% (SEEDM)
dapat meningkatkan ekspresi PDGF BB, hal ini disebabkan adanya kandungan
metabolit sekunder seperti flavonoid, tannin, saponin didalam ekstrak etanol daun
mobe.

58
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan pembahasan dan hasil penelitian diperoleh kesimpulan :
a. Salep ekstrak etanol daun mobe (SEEDM) dapat menyembuhkan luka eksisi
pada tikus, dari hasil pengujian SEEDM 5% yang paling berpotensi dalam
menyembuhkan luka dengan persen pengurangan luka pada hari ke-3 sebesar
28,43% ± 5,03; ke-6 sebesar 45,31% ± 1,19; ke-9 sebesar 60,31% ± 2,77; ke-
12 sebesar 75,62%± 2,97 dan ke-15 sebesar 88,75% ± 2,70.
b. SEEDM 5% berpengaruh terhadap gambaran histopatologi kulit pada luka
eksisi tikus dalam pembentukan jumlah fibroblast pada hari ke-3 sebesar
43,25 ± 11,35 sel/lapang ;hari ke-7 sebesar 70,25 ± 0,95 sel/lapang; hari ke-
14 sebesar 60,25 ± 2,06 sel/lapang.
c. SEEDM 5% dapat meningkatkan ekspresi PDGF BB pada luka eksisi tikus,
pada hari ke-3 sebesar 131,75 ± 6,70 sel/lapang; hari ke-7 sebesar 137,25 ±
6,84 sel/lapang; hari ke-14 sebesar 141,25 ± 8,69 sel/lapang.
5.2 Saran
Dari kesimpulan penelitian ini, disarankan kepada peneliti selanjutnya
meneliti lebih lanjut kandungan senyawa aktif dari ekstrak etanol daun mobe yang
berkhasiat dalam menyembuhkan luka dan menguji toksisitasnya.

59
DAFTAR PUSTAKA
Alam, G., Singh M.P., and Singh, A. (2011). Wound Healing Potensial Of Some
Medical Plants. Int J Pharm. Sci. Rev and Res. 9 (1) : 136-145.
Alkhil H., Revikumar K.G., and Divya D. (2014).Artocarpus a review of it

phytochemistry and pharmacology.Journal of Pharma Search. Vol 9(1)
ISSN:621-5370
Anief.(1997). Ilmu Meracik Obat Teori dan Praktek.Gadjah Mada University

Press.Yogyakarta. Hal 52-53.
Anima, P., and Bhatnagar, S.P. (2009). Preliminary Phytochemical Screening And
Antimicrobial Studies OnArtocarpus lookcha Roxb. Journal Acient Science
Of Life. Vol 28 (4): 21-24.
Borena, B.M., Martens, A., Broeckx, S.Y., Meyer, E., Chiers, K., Duchateau, A., et
al. (2015). Regenerative Skin Wound Healing in Mammals: State-of-theArt
on Growth Factor and Stem Cell Based Treatments. Cell Physiol Biochem.
36:1-2.
Diegelman, R.F and Evan, M.C. (2004) . Wound Healing : An Overview of Acute,
Fibrotic and Delayed Healing. Frontier in Biosci.9: 283-289.
Depkes.(1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan

RI. Hal 321-325, 333-337.
Depkes.(2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta:

Departemen Kesehatan RI. Hal 5, 10-11.
Depkes.(2008). Farmakope Herbal Indonesia. Edisi I. Jakarta: Departemen

Kesehatan RI. Hal 174-175.
Dunn, D.L. (2005). Wound Closure Manual. Penerbit Ethicon Inc. Somerville. Page
34-37.
Eisai Indonesia.(1995). Indeks Tumbuh-tumbuhan Obat Di Indonesia. Edisi Kedua.

Hal 137.
Fatimah, C. (2004). Uji aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Angsana (Pterocarpus

indicus Willd.) secara in vitro dan Efek penyembuhan Sediaan SalepTerhadap
Luka Buatan Kulit Marmut yang diinfeksi.Tesis.UniversitasSumatera Utara.

60
Franswort, N. (1996). Biological and Phytochemical Screening Of Plants. Journal
Pharmaceutical Sciences. Vol 55 (3): Page 245-264.
Graham-Brown, R dan Burn, T. (2005).Dermatologi.Terjemahan dari Dermatology

oleh M. Anis Zakaria. Penertbit Erlangga. Jakarta. Hal 1-4.
Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia, Penuntun Cara Modern Menganalisa

Tumbuhan. Penerjemah Kosasih Padmawinata. Edisi II. Bandung: ITB
Press.Halaman 152-153.
Hamdiyah, H., Fatimah, P. V., Yamlean dan Jeane, M. (2013). Formulasi Salep
Ekstrak Etanol Daun Nangka (Artocarpus heterophyllusLam.) Dan Uji
Efektivitas Terhadap Penyembuhan Luka Terbuka Pada Kelinci. Jurnal
Ilmiah Farmasi. Vol 2 (03). ISSN: 20302-2493.
Hendrik, S. B, Pratiwi, S, dan Zhafirah, I. (2017).Gambaran Histopatologi

Penyembuhan Luka Pencabutan Gigi Pada Makrofag dan Neovaskular
Dengan Pemberian Getah Daun Pisang.Majalah Kedokteran Gigi
Indonesia.Vol 3 (3): 2442-2576.
Hossain, M.F., Islam, M.A., Akhtar S., and Numan, S.M. (2016).Nutritional Value
and Medicinal Uses of Monkey Jack fruit (ArtocarpusLakoocha).
International Research Journal of Biological Sciences. Vol 5 (1): 60-63.
Hasibuan, P. A. Z. (2014). Aktivitas Antioksidan dan Antikanker Ekstrak Daun Bangun-

Bangun (Plectranthus amboinicus (Lour.)Spreng.) Terhadap 98 Kanker
Payudara Secara In Vitro dan In Vivo. Disertasi. Program Studi Doktor Ilmu
Farmasi Universitas Sumatera Utara. Halaman 80-85.
Jagtap U.B and Bapat V.A,.(2010). Artocarpus: A review of its tradisional uses,
phytochemistry and pharmacology. Journal of Ethnopharmacology. 129:
142-166.
Jeanly V.A., Paulina V.Y, dan Hamidah S. (2014). Uji Efektivitas Sediaan Gel
Ekstrak Jambu Biji (Psidium guajava Lim.) Terhadap Penyembuhan Luka
yang Terinfeksi Bakteri Staphylococcus aureus pada Kelinci.Jurnal Ilmiah
Farmasi. Vol 3 (3): 2302-2493.
Julia M. N., Anne W., dan Aduthya Y. (2010). Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol
Daun Suji (Dracaena angustifolia Roxb.) Terhadap Edema Kaki Tikus
Putih Jantan.Jurnal Ilmiah Farmasi. Vol 2 (3): 2302-2493.
Kintoko, Karimatulhajj, H., Elfasyari, T.Y., Ihsan, E.A., Putra, T.A., Hariadi, P., et al.
(2017). Effect of Diabetes Condition on Topical Treatment of Binahong
Leaf Fraction in Wound Healing Process.Trad. Med. J. 22(2):103-110.

61
Kristanti, A.N., Aminah, N., Tanjung, M., dan Kurniadi, B., (2008).Buku Ajar
Fitokimia.Airlangga University Press. Surabaya. Hal 47-48.
Lydia, S. D., Muhammad, A. L., dan Seila, Z. (2016).Uji Efektivitas Sediaan Gel
Fraksi Etil Asetat Daun Jambu Biji (Psidium guajava Linn) Terhadap
Penyembuhan Luka Terbuka Pada Mencit.Jurnal Natural. Vol 16 (2): ISSN
1141-8513
Luthfun, N., Shirajun, M., Anamika, S. B. Monirul, I., Habibullah, C., and Mamunur,
R. (2015). Cytotoxic, Anti-Inflamasi, Analgesic, CNS Depressan,
Antidiarrhoeal Activities Of The Methanolic Extract Of the Artocarpus
lakoocha Roxb Leaves. Journal Of Pharmaceutical Sciense: Vol 3 (2): 167-
174.
Mahaveda, N., Ananthanarayanan, N., and Muhammed, M. (2017).Pharmacognostic

Evaluation of Leaf and Stem Wood Extract of Artocarpus hirsutus Lam.
Journal in the field of Natural Products and Pharmacognosy. 9 (6): 887-
894.
Muthalib, E. M., Fatimawali.,dan Edy, H. J. (2013). Formulasi Salep Ekstrak

EtanolDaun Tapak Kuda (Ipomoea pes-caprae) dan Uji
Efektivitasnyaterhadap Luka Terbuka pada Punggung Kelinci.
PHARMACON JurnalIlmiah Farmasi – UNSRAT. 2 (3) : 79-82
Nagori, B.D. and Solanki, R. (2011).Role of Medicinal Plants in Wound

Healing.Research Journal of Medicinal Plant 5 (4). p. 392-405.
Nurdiana, Ikhda. U, dan Putu, R. A. P. (2016).Pengaruh Pemberian Gel Ekstrak Daun

Melati (Jasminum sambac I, Ait) Terhadap Jumlah Fibroblas Dalam
Penyembuhan Luka Bakar Derajat II A Pada Tikus Putih.Jurnal Ilmu
Keperawatan. Vol 4 (1).
Oky, M, Menkher, M, Andani E. P, dan Salmiah, (2012). Pengaruh Cairan Cultur

Filtrate Fibroblast (CFF) Terhadap Penyembuhan Luka Terhadap Rattus
Norvegicus Galur Wistar.Majalah Kesehatan Andalas. Vol 1 (3). Hal 112-
117.
Paputungan, F., Yamelan, P.V.Y., dan Citraningtyas, G. (2014).Uji Efektifitas Salep

Ekstrak Etanol Daun Bakau Hitam (Rhizopura mucronata Lamk.) dan
Pengujian Terhadap Proses penyembuhan Luka Punggung Kelincinyang
diinfeksi Bakteri Staphylococcus aureus.J Ilm Far-UNSRAT.3 (1) : 15-26.
Perez, W. P., Dina, F., dan Iwang, Y. (2012).Pengaruh Lendir Bekicot (Achatina
fulica) Terhadap Jumlah Sel Fibroblas Pada Penyembuhan Luka Sayat

62
Pada Kulit Mencit.Bagian Biologi Fakultas Kedokteran Universitas Islam
Sultan Agung. Semarang.Vol 4 (2): 195-203.
Piyush, G and Ramesh, P. (2013).Artocarpus lakoocha Roxb On review.Journal Of

Complementary and Alternative Medicine. Vol 1 (1): 10-14
Palumpun, E.F., Wiraguna, A.A., dan Pangkahila, W. (2017). Pemberian Ekstrak

Daun Sirih (Piper betle) Secara Topikal Meningkatkan Ketebalan
Epidermis, Jumlah Fibroblas, dan Jumlah Kolagen dalam Proses
Penyembuhan Luka pada Tikus Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus).
Jurnal e-Biomedik (eBm). 5(1): 1-7.
Pratiwi, D., Hastuti, N., Nur, N.W., Armandari, I., Ikawati, M, Hermawan, A., et. al.
(2010).Potency of Citrus Peels (Citrus aurantiifolia (Cristm.) Swingle)
Ethanolic Extract as Chemopreventive Agent Through Downregulation of c-
myc Expression and Inhibition of 7.12-dimethylbenz[a]antrachene Induced
Female Sprague Dawley Rats Breast Cell Proliferation. Majalah Obat
TRadisional.15(1): 8-15.
Ratnami, R. D., Hartati, I., Anas, T., Endah.P.D., dan Khilyati, D. (2015).Standarisasi
Spesifik dan Non Spesifik Ekstraksi Hidrotropi Andrographolid dari
Sambiloto (Andrographis paniculata).Prosiding Seminar Nsional Peluang
Herbal Sebagai Alternatif Medicine: 152-153.
Rawee, T., Sukunlaya, S., and Jindaporn, P. (2014). In vitro Antimicrobial and
Antibiofilm Activity OfArtocarpus lakoocha Roxb Extract against Some
Oral. Journal Of Pharmaceutical Research. Vol 13 (7): 1149-1155
Reddy, G.A.K., Priyanka, B., Saranya, Ch.S., and Kumar, C.K.A. (2012). Wound
Healing Potential Of Indian Medicinal Plants. International Journal of
Pharmacy Review & Research. Vol: 2. p. 75-78.
Rowlins, E. A. (2003). Bentley’s Textbook of Pharmaceutic. Bailierre Tindall. London.
Sabine, W and Richrad, G. (2003).Regulation of Wound Healingby Growth Factors

and Cytokines.Physiol Review. 83: 835-870.
Sharma, Y., Jeyabalan, G., Singh, R., and Semwal, A. (2013). Current Aspects of
Wound Healing Agents From Medicinal Plants: A Review. Journal
ofMedicinal Plants Studies. 1(3) : 1-11.
Soni, H. and Singhai, A.K. (2012).A Recent Update of Botanicals for Wound Healing
Activity.International Research Journal of Pharmacy, 3. p. 1-6.

63
Tranggono, R.I, dan Latifah,.(2007). Buku Pegangan Ilmu Pengetahun
Kosmetik.Penerbit Gramedia, Jakarta.
Thakur, R., Jain, N., Pathak, R., and Shandu, S.S. (2011).Practices in Wound Healing
Studies of Plant.Evidence-Based Comp and Alt Med. 2011 (1) :1-17
Velnar, T., Bailey, T., Smrkolj.(2009). The Wound Healing Process : an Overview of
the Celluar and Molecular Mechanism. The J Int Med Res. 37 (5) : 1528-
1542.
Warsito, R. dan Wuryastuti, H. (2014).Antibodi dan Imunohistokimia. Yogyakarta:

Rapha Publishing. Halaman 56.

64
Lampiran 1.Surat hasil identifikasi tumbuhan

65
Lampiran 2.Surat rekomendasi persetujuan etik penelitian kesehatan

66
Lampiran 3. Gambar daun mobe
Permukaan atas daun mobe
Permukaan bawah daun mobe

67
Lampiran 4.Hasil pemeriksaan mikroskopik daun mobe
Gambar mikroskop simplisia daun mobe

Keterangan :
a. Stomata dengan tipe anisocytic
b. Rambut penutup
c. Jaringan vaskular

68
Lampiran 5. Perhitungan kadar air daun mobe
% = Kadar air simplisia = x 100%
a. Kadar air = x 100% = 6,99%
b. Kadar air = x 100% = 7,99 %
c. Kadar air = x 100% = 8,99%
% Rata-rata = = 7,99%

69
Lampiran 6. Perhitungan kadar sari larut air daun mobe
% = Kadar sari larut dalam air = x x 100%
a. Kadar sari larut dalam air = 100% = 24,6%
b. Kadar sari larut dalam air = 100% = 26,98%
c. Kadar sari larut dalam air = 100% = 28,08%
% Rata-rata kadar sari larut dalam air = = 26,58%

70
Lampiran 7. Perhitungan kadar sari larut etanol daun mobe
% = Kadar sari larut dalam etanol = x x 100%
a. Kadar sari larut dalam etanol = 100% = 10,82%
b. Kadar sari larut dalam etanol = 100% = 8,01%
c. Kadar sari larut dalam etanol = 100% = 12,31%
% Rata-rata kadar sari larut dalam etanol = = 10,38%

71
Lampiran 8. Perhitungan kadar abu total daun mobe
% Kadar abu total = 100%
a. Kadar abu total = 100% = 10,04%
b. Kadar abu total = 100% = 10%
c. Kadar abu total = 100% = 10,07%
% Rata-rata kadar abu total = = 7,07%

72
Lampiran 9. Perhitungan kadar abu tidak larut asam daun mobe
% Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100%
a. Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% = 0,46%
b. Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% = 0,52%
c. Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% = 0,48%
% Rata-rata kadar abu tidak larut dalam asam = = 0,48%

73
Lampiran 10. Hasil data statistik pengurangan diameter luka
1. Uji deskriptif
95% Confidence
Std. Interval for Mean
Deviatio Std. Lower Upper
N Mean n Error Bound Bound Minimum Maximum
harike-3 kontrol positif 4 32,8000 4,62169 2,31084 25,4459 40,1541 26,00 36,20
kontrol
4 4,3150 2,07860 1,03930 1,0075 7,6225 2,50 7,31
negatif
SEEDM 1% 4 12,4225 ,53965 ,26983 11,5638 13,2812 11,62 12,79
SEEDM 3% 4 22,1750 ,64273 ,32136 21,1523 23,1977 21,68 23,12
SEEDM 5% 4 28,4375 5,03891 2,51946 20,4195 36,4555 21,25 32,50
SEEDM 7% 4 25,5250 1,31708 ,65854 23,4292 27,6208 24,39 26,82
Total 24 20,9458 10,28710 2,09985 16,6020 25,2897 2,50 36,20
harike-6 kontrol positif 4 56,3750 5,98686 2,99343 46,8486 65,9014 48,70 62,60
kontrol
4 20,3875 2,36375 1,18187 16,6263 24,1487 17,50 23,10
negatif
SEEDM 1% 4 25,4950 2,00952 1,00476 22,2974 28,6926 23,25 27,58

74
SEEDM 3% 4 37,6850 ,23000 ,11500 37,3190 38,0510 37,34 37,80
SEEDM 5% 4 45,3125 1,19678 ,59839 43,4081 47,2169 43,75 46,25
SEEDM 7% 4 49,8500 1,24502 ,62251 47,8689 51,8311 48,19 51,21
Total 24 39,1842 13,35908 2,72691 33,5431 44,8252 17,50 62,60
harike-9 kontrol positif 4 67,8500 1,15614 ,57807 66,0103 69,6897 66,20 68,70
kontrol
4 32,4750 1,09962 ,54981 30,7253 34,2247 31,20 33,70
negatif
SEEDM 1% 4 49,7100 ,99690 ,49845 48,1237 51,2963 48,27 50,57
SEEDM 3% 4 42,8525 1,05418 ,52709 41,1751 44,5299 41,46 43,90
SEEDM 5% 4 60,3125 2,77169 1,38585 55,9021 64,7229 57,50 63,75
SEEDM 7% 4 61,5800 ,70437 ,35218 60,4592 62,7008 60,97 62,19
Total 24 52,4633 12,44520 2,54037 47,2082 57,7185 31,20 68,70
harike12 kontrol positif 4 72,0500 ,51962 ,25981 71,2232 72,8768 71,60 72,50
kontrol
4 47,6825 2,93419 1,46710 43,0135 52,3515 44,44 51,20
negatif
SEEDM 1% 4 61,9725 1,69926 ,84963 59,2686 64,6764 59,77 63,71
SEEDM 3% 4 63,6650 3,52860 1,76430 58,0502 69,2798 60,97 68,85
SEEDM 5% 4 75,6250 2,97560 1,48780 70,8902 80,3598 72,50 78,75
SEEDM 7% 4 80,5475 1,59869 ,79935 78,0036 83,0914 78,31 81,70
Total 24 66,9238 11,18755 2,28365 62,1997 71,6478 44,44 81,70

75
harike15 kontrol positif 4 91,9250 ,67515 ,33758 90,8507 92,9993 91,20 92,50
kontrol
4 67,1675 ,72862 ,36431 66,0081 68,3269 66,20 67,90
negatif
SEEDM 1% 4 75,4275 ,69106 ,34553 74,3279 76,5271 74,41 75,86
SEEDM 3% 4 75,6725 2,32239 1,16119 71,9771 79,3679 73,17 78,31
SEEDM 5% 4 88,7500 2,70031 1,35015 84,4532 93,0468 85,00 91,25
SEEDM 7% 4 86,0025 3,55976 1,77988 80,3381 91,6669 82,92 89,15
Total 24 80,8242 9,09034 1,85556 76,9857 84,6627 66,20 92,50

76
Lampiran 10. Lanjutan
2. Uji Homogenitas
Levene df1 df2 Sig.

Statistic
harike-3 3,070 5 18 ,035
harike-6 4,974 5 18 ,005
harike-9 3,307 5 18 ,027
harike12 2,585 5 18 ,062
harike15 7,524 5 18 ,001
3. Uji Annova
Sum of Mean
Squares df Square F Sig.
harike-3 Between Groups 2273,431 5 454,686 50,983 ,000
Within Groups 160,531 18 8,918
Total 2433,962 23
Total 4104,696 23
Total 3562,308 23
harike12 Between Groups 2771,827 5 554,365 93,359 ,000
Total 2878,711 23
harike15 Between Groups 1820,123 5 364,025 81,433 ,000
Total 1900,587 23

77
4. Uji Tukey
Hari ke 3
Sampel N Subset for alpha = 0.05
1 2 3 4
Kontrol negatif 4 4,3150
SEEDM 1% 4 12,4225
SEEDM 3% 4 22,1750
SEEDM 7% 4 25,5250
SEEDM 5% 4 28,4375 28,4375
Kontrol positif 4 32,8000
Sig. 1,000 1,000 ,076 ,347

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000.
Hari ke 6
1 2 3 4
SEEDM 1% 4 25,4950
SEEDM 3% 4 37,6850
SEEDM 5% 4 45,3125
SEEDM 7% 4 49,8500
Sig. ,164 1,000 ,261 1,000

78
Hari ke 9
1 2 3 4 5
0
SEEDM 3% 4 42,852
5
SEEDM 1% 4 49,710
0
SEEDM 5% 4 60,312
5
SEEDM 7% 4 61,580
0
0
Sig. 1,000 1,000 1,000 ,819 1,000
Hari ke 12
1 2 3 4
SEEDM 1% 4 61,9725
SEEDM 3% 4 63,6650
SEEDM 5% 4 75,6250 75,6250
SEEDM 7% 4 80,5475
Sig. 1,000 ,918 ,342 ,093

79
Hari ke 15
1 2 3 4
SEEDM 1% 4 75,4275
SEEDM 3% 4 75,6725
SEEDM 7% 4 86,0025
SEEDM 5% 4 88,7500 88,7500
Sig. 1,000 1,000 ,468 ,319


80
Lampiran 11. Hasil data statistik jumlah fibroblast
1. Uji Deskritif
N Mean Std. Std. 95% Confidence Interval Min Max

Deviatio Error for Mean
n Lower Upper
Bound Bound
Jumlah Kontrol Negatif 4 27.2500 1.70783 .85391 24.5325 29.9675 25.00 29.00
fibroblas luka
Kontrol positif 4 43.5000 2.08167 1.04083 40.1876 46.8124 41.00 46.00
hari ke 3
SEEDM 5% 4 43.2500 11.35415 5.67707 25.1830 61.3170 35.00 60.00
Total 12 38.0000 10.00909 2.88937 31.6405 44.3595 25.00 60.00
Jumlah Kontrol Negatif 4 35.7500 3.59398 1.79699 30.0312 41.4688 33.00 41.00
fibroblas luka
Kontrol positif 4 73.5000 2.64575 1.32288 69.2900 77.7100 70.00 76.00
hari ke 7
SEEDM 5% 4 70.2500 .95743 .47871 68.7265 71.7735 69.00 71.00
Total 12 59.8333 17.99916 5.19591 48.3972 71.2695 33.00 76.00
Jumlah Kontrol Negatif 4 41.5000 3.51188 1.75594 35.9118 47.0882 38.00 45.00
fibroblas luka
Kontrol positif 4 63.2500 4.03113 2.01556 56.8356 69.6644 59.00 68.00
hari ke 14
SEEDM 5% 4 60.2500 2.06155 1.03078 56.9696 63.5304 58.00 63.00
Total 12 55.0000 10.48809 3.02765 48.3362 61.6638 38.00 68.00

81
2. Uji Homogenitas
Levene df1 df2 Sig.

Statistic
Jumlah fibroblas luka 5.223 2 9 .031
hari ke 3
hari ke 7
hari ke 14
3. Uji Anova
Sum of df Mean F Sig.

Squares Square
Jumlah fibroblas Between Groups 693.500 2 346.750 7.640 .011
luka hari ke 3 Within Groups 408.500 9 45.389
Total 1102.000 11
luka hari ke 7 4
Within Groups 62.500 9 6.944
Total 3563.667 11
luka hari ke 14 Within Groups 98.500 9 10.944
Total 1210.000 11

82
4. Uji Tukey
Hari ke 3
1 2
Kontrol Negatif 4 27.2500
SEEDM 5% 4 43.2500
Kontrol positif 4 43.5000
Sig. 1.000 .998
Hari ke 7
1 2
SEEDM 5% 4 70.2500
Sig. 1.000 .242
Hari ke 14

1 2
SEEDM 5% 4 60.2500
Sig. 1.000 .439

83
84
Lampiran 12. Hasil data statistik jumlah ekspresi PDGF BB
1. Uji Deskriptif
N Mean Std. Std. 95% Confidence Interval for Min Max

Deviation Error Mean
Lower Bound Upper
Bound
Jumlah Ekspresi PDGF Kontrol Negatif 4 87.0000 2.94392 1.47196 82.3156 91.6844 83.00 90.00
luka hari ke 3 Kontrol positif 4 96.0000 14.16569 7.08284 73.4592 118.5408 85.00 116.00
SEEDM 5% 4 131.7500 6.70199 3.35099 121.0856 142.4144 125.00 141.00
Total 12 104.9167 21.83599 6.30351 91.0427 118.7906 83.00 141.00
luka hari le 7
Kontrol positif 4 118.2500 2.75379 1.37689 113.8681 122.6319 115.00 121.00
SEEDM 5% 4 137.2500 6.84957 3.42479 126.3508 148.1492 129.00 145.00
Total 12 115.5833 20.24153 5.84323 102.7225 128.4442 87.00 145.00
luka hari ke 14 Kontrol positif 4 122.5000 4.20317 2.10159 115.8118 129.1882 118.00 128.00
SEEDM 5% 4 141.5000 8.69866 4.34933 127.6585 155.3415 130.00 150.00
Total 12 124.5000 15.03027 4.33887 114.9502 134.0498 100.00 150.00

84
2. Uji Homogenitas
Levene df1 df2 Sig.

Statistic
Jumlah Ekspresi PDGF 2.292 2 9 .157
luka hari ke 3
Jumlah Ekspresi PDGF 1.472 2 9 .280
luka hari le 7
Jumlah Ekspresi PDGF .936 2 9 .427
luka hari ke 14
3. Uji Anova
Sum of df Mean F Sig.

Squares Square
Jumlah Ekspresi Between Groups 4482.167 2 2241.083 26.443 .000
PDGF luka hari ke 3
Total 5244.917 11

PDGF luka hari le 7
Total 4506.917 11

PDGF luka hari ke
14
Total 2485.000 11

85
4. Uji Tukey
Hari ke 3
1 2

SEEDM 5% 4 131.7500
Sig. .389 1.000
Hari ke 7
1 2 3

SEEDM 5% 4 137.2500
Sig. 1.000 1.000 1.000
Hari ke 14
1 2

SEEDM 5% 4 141.5000
Sig. .056 1.000

86
87

Andriani - Tesis - Uji Aktivitas Penyembuhan Luka Eksisi Salep Daun Mobe Pada Tikus - 2019

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Andriani - Tesis - Uji Aktivitas Penyembuhan Luka Eksisi Salep Daun Mobe Pada Tikus - 2019

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

TESIS

UJI AKTIVITAS PENYEMBUHAN LUKA EKSISI SALEP

PROGRAM STUDI MAGISTER ILMU FARMASI

Universitas Sumatera Utara

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh Gelar

PROGRAM STUDI MAGISTER ILMU FARMASI

Universitas Sumatera Utara

Nama Mahasiswa : Cut Riska Andriani

Nomor Induk Mahasiswa : 167014008

Program Studi : Magister Ilmu Farmasi

Judul Tesis : Uji Aktivitas Penyembuhan Luka Eksisi Salep Ekstrak

Etanol Daun Mobe (Artocarpus lakoocha. Roxb.)

Terhadap Tikus Jantan

Komisi Penguji Tesis

Ketua : Prof. Dr. Rosidah, M. Si., Apt.

Sekretaris : Dr. Aminah Dalimunthe, S.Si.,M.Si., Apt

Anggota : Dr. Poppy Anjelisa Z. Hsb, S.Si.,M.Si., Apt

Yuandani, S.Farm., M.Si., Ph.D., Apt

Universitas Sumatera Utara

AKTIVITAS PENYEMBUHAN LUKA EKSISI SALEP EKSTRAK ETANOL

DAUN MOBE (Artocarpus lakoocha Roxb.) TERHADAP TIKUS JANTAN” Tesis

Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Selama menyelesaikan penelitian dan tesis ini, penulis telah banyak

Sumatera Utara, yang telah memberikan kesempatan dan fasilitas kepada

penulis untuk mengikuti dan menyelesaikan Program Studi Magister.

Sumatera Utara, yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis untuk

mengikuti dan menyelesaikan Program Studi Magister di Fakultas Farmasi.

Studi Magister Farmasi yang telah banyak memberikan motivasi dan

bimbingan sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan ini.

Universitas Sumatera Utara

menyelesaikan tesis ini.

bimbingannya selama penulis menjalani pendidikan.

lelah dan memberi dukungan dan semangat kepada penulis.

dukungan kepada penulis.

9. Rekan-rekan Program Studi Magister Farmasi atas kerjasama, bantuan, doa

dan kekompakannya selama pendidikan dan seluruh teman-teman yang tidak

dapat penulis sebutkan satu persatu.

saran membangun demi kesempurnaan tesis ini.

Universitas Sumatera Utara

Universitas Sumatera Utara

Keywords: leaf mobe, excision wound, fibroblast, Platelet-derived growth factor

Universitas Sumatera Utara

BAB II TINJAUAN PUSTAKA……………………….…………..….….. 7

BAB III METODE PENELITIAN……………………..………….……… 22

Universitas Sumatera Utara

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN……………………………….. 37

Universitas Sumatera Utara

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN………………………………….. 59

Universitas Sumatera Utara

1.1. Diagram Kerangka Pikir Penelitian……………………………………….. 6

Universitas Sumatera Utara

4.1 Hasil Karakterisasi SimplisiaDaunMobe ...................................... 38

Universitas Sumatera Utara

1 Surat hasil identifikasi tumbuhan.................................................. 65

Universitas Sumatera Utara

1.1 Latar Belakang

memicu vasodilatasi lokal dan meningkatkan permeabilitas kapiler sehingga terjadi

akumulasi cairan di daerah cedera. Jika stimulus penyebab inflamasi tidak

Penyembuhan luka merupakan suatu proses kompleks yang melibatkan

remodeling jaringan (Reddy et al., 2012).Proses penyembuhan luka merupakan

Universitas Sumatera Utara

mengobati luka tersebut menggunakan sediaan topikal. Pemberian sediaan topikal

merata jika dioleskan pada kulit tanpa penekanan.