Ekstrak Etanol Daun Biwa

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN BIWA
(Eriobotrya japonica(Thunb.) Lindl.) DENGAN METODE

DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl)
SKRIPSI
OLEH:
YULIANA
NIM 131524041
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2020
Universitas Sumatera Utara

DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl)
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
OLEH:
YULIANA
NIM 131524041
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2020

PENGESAHAN SKRIPSI

DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl)
OLEH:
YULIANA
NIM 131524041
Dipertahankan di Hadapan Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

pada Tanggal: 06 Desember 2019
Disetujuioleh: PanitiaPenguji,
Pembimbing,
Marianne, S.Si., M.Si., Apt. Prof. Dr.Rosidah, M.Si., Apt.

NIP 198005202005012006 NIP 195103261978022001
Marianne, S.Si., M.Si., Apt.

Ketua Program StudiSarjana Farmasi, NIP 198005202005012006
Dr.Sumaiyah,S.Si.,M.Si.,Apt. Dr. Poppy Anjelisa Z. Hasibuan M.Si., Apt.

NIP 197712262008122002 NIP 197506102005012003
Medan, 06 Desember 2019
Disahkan oleh:
Dekan,
Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.

NIP 195707231986012001

KATA PENGANTAR
Puji serta syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan karunia yang
berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi yang berjudul Uji
Aktivitas Antioksidan EkstrakEtanol DaunBiwa (Eriobotrya Japonica (Thunb.) Lindl)
dengan Metode DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl)
ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas
Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini, dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih
yang sebesar-besarnya kepada Ibu Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas
Farmasi yang telah menyediakan fasilitas kepada penulis selama perkuliahan di Fakultas
Farmasi. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada bapak Ibu Marianne, S.Si., M.Si.,
Apt., yang telah meluangkan waktu dan tenaga dalam membimbing penulis dengan penuh
kesabaran dan tanggung jawab, memberikan petunjuk dan saran-saran selama penelitian
hingga selesainya skripsi ini. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Ibu Prof.
Dr Rosidah, M.Si., Apt., selaku ketua penguji,Ibu Dr. Poppy Anjelisa Z. Hasibuan, M.Si.,
Apt.,selaku anggota penguji yang telah memberikan saran untuk menyempurnakan skripsi
ini. Ibu Khairunnisa, S.Si., M.Pharm., Ph.D., Apt selaku dosen pembimbing akademik serta
Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah banyak membimbing penulis
selama masa perkuliahan hingga selesai.
Penulis juga mempersembahkan rasa terima kasih dan penghargaan tyang tiada
terhingga kepada keluarga tercinta , Ayahanda M.Yunus, Ibu Maryani, S.Pd., abang Safrizal,
S.Pd serta adik tersayang Nuramalia juga seluruh sanak
Saudara yang telah memberikan doa, dukungan yang tulus baik secara moril maupun materil
dalam menyelesaikan skripsi ini. Tak lupa juga penulis ucapkan terimakasih kepada sahabat-
sahabat yang luar biasa Kak Cut Aidil, Jannati, Yanti, Caca, Asma, member Cupe serta adik-

adik Feran, Revi, Tuti dan Rifka yang telah mendoakan penulis , juga teman-teman angkatan
2013 Fakultas Farmasi USU atas doa dan dukungan kepada penulis.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa penulisan skripsi ini masih belum sempurna,
oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun demi kesempurnaan
skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan
khususnya di bidang farmasi.
Medan, Desember2019
Penulis,
Yuliana
NIM 131524041

SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS
Saya yang bertanda tangan di bawah ini:
Nama : Yuliana
Nomor Induk Mahasiswa : 131524041
Program Studi : Sarjana Farmasi
Judul Skripsi :Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Biwa
(Eriobotrya japonica (Thunb.) Lindl.) dengan
MetodeDPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi yang saya buat adalah asli karya sendiri dan bukan
plagiat. Apabila di kemudian hari diketahui skripsi saya tersebut terbukti plagiat karena
kesalahan sendiri, maka saya bersedia diberi sanksi apapun oleh Program Studi Sarjana
Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Saya tidak akan menuntut pihak
manapun atas perbuatan saya tersebut.
Demikian surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya dan dalam keadaan sehat.
Medan, Desember 2019

Yang membuat pernyataan,
Yuliana
NIM 131524041

(Eriobotrya japonica(Thunb.) Lindl.)DENGAN METODE DPPH(1,1-
diphenyl-2-picrylhidrazyl)
ABSTRAK
Latar belakang: Daun biwa atau nama latinnya Eryobotrya japonica(Thunb.) Lindl adalah
daun dari keluarga Rosaceae. Secara tradisional, daun ini digunakan untuk mengobati
penyakit pada sistem pernafasan, batuk, bronkhitis kronis, inflamasi dan diabetes.
Tujuan: Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui akitivitas antioksidan yang terdapat
pada ekstrak etanol daun biwa(Eriobotrya japonica (Thunb.) Lindl.).
Metode penelitian: Penelitian ini dilakukan secara eksperimental, meliputi pengumpulan
dan pengolahan tumbuhan, identifikasi bahan tumbuhan, karakterisasi simplisia, skrining
fitokimia, pembuatan ekstrak etanol daun biwa(Eriobotrya japonica (Thunb.) Lindl.)dan
pengujian aktivitas antioksidan dari daunbiwadengan metode aktivitas peredaman radikal
bebas DPPHyang diukur secara spektrofotometri visibel.
Hasil: Hasil yang diperoleh dari pemeriksaan karakteristik simplisia adalah kadar air 7,3%,
kadar sari yang larut air 9,3%, kadar sari yang larut dalam etanol 25%, kadar abu total
8,08%,dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 4,5%. Hasil skrining fitokimia, serbuk
simplisia mengandung senyawa flavonoid, glikosida, steroid/triterpen, saponin, dan tanin.
Hasil uji aktivitas antioksidan dalam menurunkan radikal bebas DPPH diperoleh nilai
inhibitory concentration(IC50) ekstrak etanol daun biwa sebesar 56,55µg/mL dikategorikan
kuat dan untuk kuersetin diperoleh IC50 sebesar 4,36 µg/mL sangat kuat.
Kesimpulan: Ekstrak etanol daun biwa memilikiaktivitasantioksidan kuat sedangkan
kuersetin sangat kuat.
Kata kunci: antioksidan, DPPH, daun biwa, eriobotryajaponica.

ANTIOXIDANT ACTIVITY TEST ETHANOL EXTRACTOF BIWA
LEAF(Eriobotrya japonica (Thunb.) Lindl.) WITH DPPH
METHOD(1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl)
ABSTRACT
Background: Biwa leaf (Eriobotrya japonica (Thunb.) Lindl is one of the family plants
Rocaceae which has been known as a traditional medicine and used, This plant is used to
treat respiratory diseases, coughs, chronic bronchitis, inflammation and diabetes.
Purpose: The purpose of this study was to determine the antioxidant activity found in the
ethanolic extract of the biwa leaves (Eriobotrya japonica (Thunb.) Lindl.).
Methods: This research method was carried out experimentally. The research included
collection and processing of plant material, identification of plant material, simplicia
characterization, phytochemical screening, ethanol extract of biwa leaves (Eriobotrya
japonica (Thunb.) Lindl.) and antioxidant activity testing of biwa leaves using DPPH free
radical reduction (1,1-diphenyl-2- picrylhidrazyl) which is measured by visible
spectrophotometry.
Results: The result of simplicia powder characterization and biwa leaf extract obtained by
consecutive water content 7.3%, level of extract soluble in water 9,3 %, level ofextract
soluble in ethanol 25%, level of total ash content 8,08%, level of ash content insoluble in acid
4.5% and level of biwa leafcontain chemical compounds of flavonoids, glycosides, tannins,
saponins and triterpenoid/steroids. The result of antioxidant activity analysis of ethanol
extract had IC50 value of 56.55 μg/mL categorized as strong, the and quercetin 4.36 μg/mL
very strong.
Conclusion: The conclusion of the study was that ethanol extract had activityantioxidants are
strong while quercetin is very strong.
Key words: antioxidant, DPPH, biwa leaf, eriobotrya japonica.

DAFTAR ISI
JUDUL ................................................................................................................... i
HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. iii
KATA PENGANTAR .......................................................................................... iv
SURAT PERNYATAAN ORISINALITAS ......................................................... vi
ABSTRAK ............................................................................................................ vii
ABSTRACT........................................................................................................... viii
DAFTAR ISI......................................................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xi
DAFTAR TABEL ................................................................................................. xii
DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... . xiii
BAB I PENDAHULUAN ..................................................................................... 1
1.1Latar belakang .................................................................................................. 1
1.2Perumusan masalah .......................................................................................... 4
1.3Hipotesis .......................................................................................................... 4
1.4Tujuan penelitian ............................................................................................. 4
1.5Manfaat penelitian ........................................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................... 5
2.1KlasifikasiTumbuhan ....................................................................................... 5
2.1.1 Sistematika tumbuhan .................................................................................. 5
2.1.2. Manfaat tumbuhan ...................................................................................... 6
2.2 Uraian golongan senyawa kimia daun biwa ................................................... 6
2.2.1 Tanin ............................................................................................................ 6
2.2.2 Saponin ........................................................................................................ 7
2.2.3 Glikosida ...................................................................................................... 8
2.2.4 Triterpenoid/steroid...................................................................................... 8
2.2.5 Flavonoid ..................................................................................................... 9
2.2.6 Alkaloid........................................................................................................ 10
2.3Ekstraksi .......................................................................................................... 10
2.3.1 Metode ekstraksi .......................................................................................... 11
2.3.2 Cara dingin ................................................................................................... 11
2.3.3 Cara panas ................................................................................................... 12
2.4 Radika bebas ................................................................................................... 13
2.5 Antioksidan ..................................................................................................... 14
2.5.1 Kuersetin ...................................................................................................... 16
2.6 Sepektrofotometer UV-Visibel ....................................................................... 17
2.7 Penentuanaktivitasantioksidandenganmetode DPPH ..................................... 18
2.7.1 Pelarut .......................................................................................................... 20
2.7.2 Pengukuran panjang gelombang .................................................................. 20
2.7.3 Waktu pengukuran ...................................................................................... 20
BAB III METODE PENELITIAN ....................................................................... 21
3.1 Tempat Pelaksaan Penelitian .......................................................................... 21
3.2 Metode Penelitian... ........................................................................................ 21
3.3 Alat .................................................................................................................. 21
3.4 Bahan ............................................................................................................. 22
3.5 Penyiapan Bahan Tumbuhan ......................................................................... 22
3.5.1 Pengumpulan Bahan Tumbuhan .................................................................. 22
3.5.2 Identifikasi Tumbuhan ................................................................................ 22
3.5.3 Proses Pembuatan Serbuk simplisia............................................................ 22
3.6Pemeriksaan karakteristik Simplisia ................................................................ 23
3.6.1 Pemeriksaan Mikroskopik .......................................................................... 23

3.6.2 Penetapan Kadar Air ................................................................................... 23
3.6.3 Penetapan Kadar Abu Total ........................................................................ 23
3.6.4 Penetapan Kadar Abu Larut dalam Asam ................................................... 24
3.6.5 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air ....................................................... 24
3.6.6 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol ................................................... 24
3.7 Skrinning Fitokimia simplisia daun biwa ..................................................... 25
3.7.1 Pemeriksaan Alkaloid.............. ................................................................... 25
3.7.2 Pemeriksaan Flavonoid ............................................................................... 26
3.7.3 Pemeriksaan Tanin ...................................................................................... 27
3.7.4 Pemeriksaan Glikosida................................................................................ 27
3.7.5 Pemeriksaan Saponin ................................................................................. .27
3.7.6 Pemeriksaan Steroid/triterpenoid ................................................................ 28
3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol daun biwa......................................................... 28
3.9 Pengujian aktivitas antioksidan dan metode DPPH .................................... 28
3.9.1 Prinsip metode pemerangkapanradikal bebas DPPH ................................... 28
3.9.2 Pembuatan larutanInduk Baku DPPH .......................................................... 29
3.9.3 Pembuatan Larutan Blanko .......................................................................... 29
3.9.4 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ............................................... 29
3.9.5 Pembuatan larutan Induk Baku ekstraketanoldaunbiwa ..................... ........ 29
3.9.6 Pembutan larutan induk baku Kuersetin ..................................................... 29
3.9.7 Pembutan Larutan Uji ................................................................................. 30
3.9.8 Pengujianmetode DPPH dengan spektrofotometri ...................................... 30
3.9.9 Analisis Data ................................................................................................ 31
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 32
4.1 Identifikasi tanaman ...................................................................................... 32
4.2 Karakterisasi simplisia .................................................................................. 32
4.3 Skrining fitokimia ......................................................................................... 33
4.4 Hasil pengujian aktivitas antioksidan .......................................................... 34
4.4.1 Hasil penentuan panjang gelombang serapanmaksimum ............................ 34
4.4.2 Hasilanalisiswaktupengukuran(operating time) .......................................... 35
4.4.3 Hasil analisisaktivitasantioksidanetanol daunbiwa dankuersetin ................ 35
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 38
5.1 Kesimpulan .................................................................................................... 38
5.2 Saran............... ............................................................................................... 38
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 39
LAMPIRAN .......................................................................................................... 41

DAFTAR GAMBAR
2.1 Gambar Struktur kimia Flavanoid ................................................................. 9

2.2 Gambar Struktur kimia Kuersetin .................................................................. 16
2.3Gambar Struktur DPPH .................................................................................. 18
2.4Mekanisme Reaksi antioksidan dengan radikal bebas DPPH......................... 19
4.1Kurva serapan maksimum larutan DPPH 40 g/mL menggunakan
spektrofotometer uv-visibel ................................................................................. 35

DAFTAR TABEL
4.1 Hasil karakteristik simplisiadaun biwa ......................................................... 32

4.2 Hasil skrining fitokimia simplisia dan ekstrak etanol daun biwa ................. 34
4.3 Penurunan absorbansi dan persen pemerangkapan DPPH oleh ekstrak
Etanol daun biwa........................................................................................... 36
4.4 Penurunan absorbansi dan persen pemerangkapanDPPH oleh kuersetin ..... 36
4.5 Hasil persamaan regresi linier dan hasil IC50 yang diperoleh dari
Ekstrak etanol dan Kuersetin ........................................................................ 37
4.6 Kategori nilai IC50 sebagai antioksidan ........................................................ 37

DAFTAR LAMPIRAN
1 Surat hasil identifkasi tumbuhan ....................................................................... 41

2 Gambar tumbuhan dan serbuk simplisia daun biwa ......................................... 42
3 Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia............................................. 43
4 Perhitungan karakterisik simplisia .................................................................... 44
5 Penentuan waktu kerja uji antioksidan ............................................................. 48
6 Hasil uji aktivitas antioksidan ........................................................................... 49
7 Perhitungan nilai IC50 ................................................................................................................................ 56
8 Kurva analisis konsentrasi versus absorbansi ................................................... 58
9 Gambar alat spektrofotometer UV-Visibel (UV-Shimadzu) ............................ 59

BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Pemanfaatan bahan alam sebagai obat tradisional akhir-akhir ini sangat meningkat di
Indonesia, bahkan beberapa bahan alam telah diproduksi dalam skala besar.Penggunaan obat
tradisional dinilai memiliki efeksamping yang lebih kecil dibandingkan dengan obat yang
berasal dari bahan kimia.Selain itu, keuntungan lain penggunaan obat tradisional adalah
bahan bakunya mudah diperoleh dan juga harganya relatif murah (Roslizawaty, dkk., 2013).
Biwa (Eriobotryajaponica) yang dikenal dengan nama loquat di Indonesia. Data dan
informasi tentang tanaman biwa masih sangat minim, namun akhir-akhir ini buah biwa
semakin banyak diminati oleh konsumen terutama etnis Cina. Walaupun biwa belum banyak
dikenal dan dibudidayakan di Indonesia, namun buah ini telah dikenal di Cina, Jepang dan
Eropa (Bangun et al., 2004)
Tanaman biwa memiliki banyak manfaatnya diantaranya adalah:daging buah
biwa banyak mengandung asam sitrat, karoten, vitamin B dan C. Biwa mengandung jumlah
antioksidan tinggi seperti vitamin A. Vitamin A melindungi tubuh dari radikal bebas dan
flavanoid yang dapat melindungi tubuh dari kerusakan radikal bebas. Biwa rendah kalori dan
tinggi serat yang dapat melindungi membran di usus dari serangan penyakit kanker. Tanaman
ini digunakan untuk mengobati penyakit pada sistem pernafasan, batuk, bronchitis kronis,
inflamasi, diabetes. Biwa juga mengandungpotasium yang baik untuk mengontrol tekanan
darah tinggi dan detak jantung. Zat tembaga dan besi yang tekandung dapat membantu
pembentukan sel darah merah. Selain itu, daun dan bijinya mengandung amygdalin yang
bermanfaat sebagai antikanker (Sembiring, 2009). Tubuh kita secara terus menerus
membentuk radikal bebas melalui peristiwa metabolisme sel normal, peradangan, kekurangan
gizi dan akibat respon terhadap pengaruh dari luar tubuh berupa polusi lingkungan, sinar ultra

violet, asap rokok dan asap kendaraan. Radikal bebas adalah atom atau senyawa yang
kehilangan pasangan elektron (Winarsi, 2010).
Radikal bebas ialah atom atau gugus yang memiliki satu atau lebih elektron tidak
berpasangan (Fessenden dan Fessenden 1986). Pembentukan radikal bebas dalam tubuh akan
menyebabkan reaksi berantai dan menghasilkan radikal bebasbaru yang jumlahnya terus
bertambah. Radikal bebas memiliki pasangan electron bebas di kulit terluar sehingga sangat
reaktif dan mampu bereaksi dengan protein, lipid, karbohidrat, dan DNA. Reaksi antara
radikal bebas dan molekul-molekul tersebut berujung pada timbulnya suatu penyakit, seperti
kanker, penyakit jantung koroner, penuaan dini dan parkinson. Langkah yang tepat untuk
menghadapi gempuran radikal bebas adalah dengan meningkatkan sistem pertahanan tubuh
dengan rajin mengkonsumsi antioksidan (Momuat et al., 2011).
Antioksidan adalah senyawa kimia yang dapat menyumbangkan satu atau lebih
elektron kepada radikal bebas, sehingga radikal bebas tersebut dapat diredam. Sumber
antioksidan ada dua yakni antioksidan alami dan sintetik. Antioksidan alami mampu
melindungi tubuh terhadap kerusakan yang disebabkan oleh spesies oksigen reaktif yang
mampu menghambat terjadinya penyakit degenerasi serta mampu menghambat peroksidase
lipid pada makanan (Kumalaningsih, 2006).
Penggunaan antioksidan sintetik mulai dibatasi karena dari hasil penelitian dilaporkan
bahwa antioksidan sintetik seperti BHT (butylhydroxytoluena) ternyata dapat meracuni
hewan percobaan dan bersifat karsinogenik sehingga industri makanan dan obat-obatan mulai
mengembangkan dan mencari sumber- sumber antioksidan alami yang baru (Takashi dan
Takayumi, 1997). Didalam makanan yang berasal dari sumber alami banyak terdapat
senyawa kimia yang memiliki khasiat sebagai antioksidan, diantaranya adalah senyawa-
senyawa fenol, seperti fenol sederhana, asam fenolat, kumarin, tannin dan flavonoid
(Silalahi, 2006).

Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah radikal 1,1-diphenyl-2-
picrylhydrazil (DPPH) scavenging method atau metode pemerangkapan radikal (DPPH),
merupakan metode yang paling banyak digunakan, efektifdan valid untuk mengukur
kemampuan antioksidan yang terdapat pada makanan, buah-buahan dan sayur-sayuran dalam
meredam radikal bebas. Adapun metode lain untuk pengukuran antioksidan meliputi total
radical– trapping antioxidant parameter (TRAP) assay, photochemiluminescence (PCL),
DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl), (N,N-dimethyl-phenylendiamine), (DMPD) assay
(Prakash, dkk., 2001).
1.2 Perumusan Masalah
Perumusan masalah dalam penelitian ini adalah apakah ekstrak etanol daun biwa
memiliki aktivitas sebagai antioksidan untuk meredam radikal bebas.
1.3 Hipotesis
Berdasarkan perumusan masalah di atas, maka hipotesis penelitian ini adalah ekstrak
etanol daun biwa (Eriobotrya japonica) memiliki aktivitas sebagai antioksidan.
1.4 Tujuan Penelitian
Tujuan dilakukannya penelitian ini antara lain untuk :
1. Mengetahui akitivitas antioksidan yang terdapat pada ekstrak etanol daun biwa
2. Kekuatan aktivitas antioksidan antara ekstrak etanol daun biwa (Eriobotrya japonica)
dapat ditentukan dengan metode 1,1 –diphenyl-2picrylhidrazyl (DPPH) dan ditandai
dengan nilaiIC50.
1.5 Manfaat Penelitian
Manfaat dari penelitian ini adalah member informasi tentang kekuatan akitivitas
antioksidan ekstrak etanol daun biwa (Eriobotrya japonica).

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Klasifikasi Tumbuhan
Biwa (Eriobotrya Japonica (Thunb) Lindl.) merupakan tanaman yang termasuk
keluarga Rosaceae. Semua bagian dari tumbuhan biwa mulai dari buah, daun, dan kulit telah
banyak dipublikasikan memiliki khasiat bagi kesehatan (Zar dkk., 2013).
2.1.1 Sistematika tumbuhan
Secara sistematika tumbuhan biwadapat diklasifikasikan sebagai berikut :
Divisi : Spermatophyta
Subdivisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledoneae
Subkelas : Rosidae
Ordo : Rosales
Famili : Rosaceae
Genus : Eryobotrya
Spesies : Eryobotryajaponica(Thunb.) Lindl.
Sinonim : Crataegus bibar Lour
(MEDA USU, 2017)
2.1.2 Manfaat tumbuhan
Tanaman biwa memiliki banyak manfaatnya diantaranya adalah: daging buah biwa
banyak mengandung asam sitrat, karoten, vitamin B dan C. Biwa mengandung jumlah
antioksidan tinggi seperti vitamin A. Vitamin A melindungi tubuh dari radikal bebas dan
flavanoid yang dapat melindungi tubuh dari kerusakan radikal bebas. Biwa rendah kalori dan

tinggi serat yang dapat melindungi membran di usus dari serangan penyakit kanker. Tanaman
ini digunakan untuk mengobati penyakit pada sistem pernafasan, batuk, bronchitis kronis,
inflamasi, diabetes. Biwa juga mengandung potasium yang baik untuk mengontrol tekanan
darah tinggidandetakjantung.Zat tembaga dan besi yang tekandung dapat membantu
pembentukan sel darah merah. Selain itu, daun dan bijinya mengandung amygdalin yang
bermanfaat sebagai antikanker (Sembiring, 2009).
2.2 Uraian Golongan Senyawa Kimia Daun Biwa
Senyawa kimia yang terdapat pada daun biwa meliputi tanin, saponin, glikosida,
steroid/triterpenoid, flavonoid dan alkaloid.
2.2.1 Tanin
Tanin terdapat luas pada tumbuhan berpembuluh.Sebagian besar tumbuhan banyak
mengandung tanin rasanya sepat.Salah satu fungsi tanin dalam tumbuhan ialah sebagai
penolak hewan pemakan tumbuhan (Robinson, 1995).
Berdasarkanidentitas inti fenolit dan cara pembentukannya, tanin dibagi menjadi tiga
yaitu tanin yang terhidrolisis, tanin yang terkondensasi dan tanin kompleks (Trease dan
Evans, 1983).
a. Tanin terhidrolisis (hydrosable tannin)
Tanin jenis ini biasanya berikatan pada karbohidrat dengan membentuk jembatan
oksigen dan dapat dihidrolisis menggunakan asam sulfat atau asam klorida ataupun dengan
enzim.Prekursor pembentukan tanin ini adalah asam fenolit (asam galat, asam elagit), residu
glukosa, serta antara asam fenolit dan glukosa ada ikatan ester.
b. Tanin terkondensasi (condesed tannins)

Tanin terkondensasi biasanya tidak dapat dihidrolisis, tetapi terkondensasi menghasilkan
asam klorida.Tanin jenis ini kebanyakan terdiri dari polimer flavanoida yang merupakan
senyawa fenol.Prekursor pembentukan tanin ini adalah flavanoida, catechin, flavonol-3-4-
diol.
c. Tanin kompleks (complex tannin)
Tanin kompleks merupakan campuran antara tanin terhidrolisis dan tanin
terkondensasi.Contoh tumbuhan yang mengandung tanin kompleks adalah teh, kuercus, dan
castanea.
2.2.2 Saponin
Saponin adalah glikosida triterpenoida dan sterol.Senyawa golongan ini banyak
terdapat pada tumbuhan tinggi, merupakan senyawa dengan rasa yang pahit dan mampu
membentuk larutan koloidal dalam air serta menghasilkan busa jika dikocok dalam
air.Aglikon dari saponin sering disebut sebagai sapogenin.Saponin merupakan senyawa aktif
permukaan, bersifat seperti sabun dan dapat diuji berdasarkan kemampuannya membentuk
busa. Pembentukan busa yang mantap sewaktu mengekstraksi tumbuhan atau pada waktu
memekatkan ekstrak tumbuhan merupakan bukti terpercaya akan adanya saponin pada
tumbuhan tersebut (Harbone, 1987)
2.2.3Glikosida
Glikosida adalah suatu senyawa yang jika dihidrolisis akan menghasilkan bagian gula
yang disebut glikon dan bagian bukan gula disebut aglikon. Gula yang dihasilkan biasanya
adalah glukosa, ramnosa, dan lain sebagainya.Jika bagian gulanya adalah glukosa maka
disebut glukosida, sedangkan jika bagian gulanya selain glukosa disebut glikosida (Robinson,
1995).
Berdasarkan hubungan ikatan antara glikon dan aglikonnya, glikosida dibagi (Robinson,
1995):

a. O-glikosida, yaitu senyawa glikosida yang ikatan antara glikon dan aglikonnya
dihubungkan oleh atom O. Contoh: Salisin.
b. S-glikosida, yaitu senyawa glikosida yang ikatan antara glikon dan aglikonnya
dihubungkan oleh atom S. Contoh: Sinigrin.
c. N-glikosida, yaitu senyawa glikosida yang ikatan antara glikon dan aglikonnya
dihubungkan oleh atom N. Contoh: Adenosine.
d. C-glikosida, yaitu senyawa glikosida yang ikatan antara glikon dan aglikonnya
dihubungkan oleh atom C. Contoh: Barbaloin.
2.2.4 Triterpenoid/steroid
Triterpenoid adalah senyawa yang kerangka karbonnya berasal dari enam satuan
isopren dan secara biosintesis diturunkan dari hidrokarbon C30 asiklik, yaitu skualen.
Senyawa tersebut mempunyai struktur siklik yang relatif kompleks, kebanyakan merupakan
suatu alkohol, aldehid atau karboksilat (Harbone, 1987).
Steroid adalah triterpen yang kerangka dasarnya sistem cincin siklopentana
perhidrofenantren. Dahulu steroid dianggap sebagai senyawa satwa (digunakan sebagai
hormon kelamin, asam empedu), tetapi pada tahun-tahun terakhir ini makin banyak senyawa
steroid yang ditemukan dalam jaringan tumbuhan (Harborne, 1987).
Menurut asalnya senyawa steroid dibagi atas:

a. Zoosterol, yaitu steroid yang berasal dari hewan, misalnya kolesterol.
b. Fitosterol, yaitu steroid yang berasal dari tumbuhan, misalnya sitosterol dan stigmasterol.
c. Mycosterol, yaitu steroid yang berasal dari fungi, misalnya ergosterol.
d. Marinesterol, yaitu steroid yang berasal dari organisme laut, misalnya spongesterol.
2.2.5 Flavonoid
Senyawa flavonoid merupakan salah satu senyawa polifenol terbesar, mengandung 15
atom karbon, terdiri dari dua cincin benzen yang dihubungkan menjadi satu oleh rantai linier

yang terdiri dari 3 atom karbon, tersusun dalam konfigurasi C6-C3-C6(Robinson,
1995).Rumus bangun turunan flavonoid dapatdilihat pada Gambar 2.1.
Gambar 2.1 Strukturkimia flavonoid(Redha, 2010).
Flavonoid memiliki sifat antioksidan.Senyawa ini berperan sebagai penangkap radikal
bebas karena mengandung gugus hidroksil.Karena bersifat sebagai reduktor, flavonoid dapat
bertindak sebagai donor hidrogen terhadap radikal bebas(Silalahi, 2006).
Senyawa flavonoid terdapat pada semua bagian tumbuhan termasuk daun, akar, kayu,
kulit, bunga, buah dan biji (Markham, 1988).Flavonoid mengandung senyawa aromatik
terkonjugasi sehingga menunjukkan pita serapan kuat pada spektrum UV dan sinar
tampak.Umumnya terdapat dalam bentuk terikat pada gula yang disebut dengan glikosida
sehingga untuk menganalisis flavonoid, lebih baik ekstrak tumbuhan dihidrolisis terlebih
dahulu untuk memecah ikatan gula dengan aglikon (Harborne, 1987).
2.2.6 Alkaloid
Alkaloid merupakan senyawa kimia bersifat basa, mengandung satu atau lebih atom
nitrogen, dan biasanya bergabungan sebagai bagian sistem siklik.Sifat alkaloid yang basa
menyebabkan senyawa tersebut mengalami dekomposisi akibat adanya sinar atau adanya
oksigen (Indrawati dkk, 2013).Ada tiga pereaksi yang digunakan dalam pemeriksaan
senyawa kimia untuk mendeteksi golongan alkaloid yaitu pereaksi Mayer, Bouchardat dan
Dragendroff (Depkes, 1995).

2.3Ekstraksi
Ekstraksi adalah suatu cara untuk menarik satu atau lebih zat dari bahan asal dengan
menggunakan pelarut. Umumnya zat berkhasiat tersebut dapat ditarik, namun khasiatnya
tidak berubah.Tujuan utama ekstraksi adalah mendapatkanatau memisahkan sebanyak
mungkin zat-zat yang memiliki khasiat pengobatan dari zat-zat yang tidak dibutuhkan, agar
lebih mudah dipergunakan (kemudahan diabsorpsi, rasa, dan pemakaian) dan disimpan
dibandingkan simplisia asal, dan tujuan pengobatannya lebih terjamin.Hasil ekstraksi disebut
dengan ekstrak,yaitu sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif dari
simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua
atau hampir semua pelarut diuapkan (Depkes, 1995).
2.3.1 Metode ekstraksi
Metode ekstraksi yang digunakan adalah metode maserasi/ Maserasi adalah cara
penarikan simplisia dengan merendam simplisia tersebut dalam cairan penyari dengan beberapa
kali pengocokan atau pengadukan pada temperatur kamar,
sedangkan remaserasi merupakan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan
penyaringan maserat pertama, dan seterusnya (Depkes, 2000).
Tujuan utama ekstraksi adalah umtuk mendapatkan atau memisahkan sebanyak
mungkin zat-zat yang memiliki khasiat pengobatan (consentrata) dari zat-zat yang tidak
bermanfaat, agar lebih mudah dipergunakan dan disimpan dibandingkan simplisia asal, dan
tujuan pengobatan lebih terjamin (Syamsuni, 2006).
2.3.2 Cara dingin
a. Maserasi
Maserasi adalah penyarian simplisia dengan cara perendaman menggunakan pelarut
disertai sesekali pengadukan pada temperatur kamar. Maserasi yang dilakukan pengadukan

secara terus menerus disebut maserasi kinetik sedangkan yang dilakukan penambahan ulang
pelarut setelah dilakukan penyaringan terhadap maserat pertama dan seterusnya disebut
remaserasi.
b. Perkolasi
Perkolasi adalah proses penyarian simplisia menggunakan alat perkolator dengan
pelarut yang selalu baru, umumnya dilakukan pada temperatur kamar. Proses perkolasi terdiri
dari tahap pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya
(penampungan perkolat) terus menerus sampai diperoleh ekstrak.
2.3.3 Cara panas
a. Digesti
Digesti adalah proses penyarian dengan pengadukan kontinu pada temperatur lebih
tinggi dari temperatur kamar, yaitu secara umum dilakukan pada temperatur 40-500C.
b. Infundasi
Infundasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada
temperatur 900C selama 15 menit.
c. Dekoktasi
Dekoktasi adalah proses penyarian dengan menggunakan pelarut air pada temperatur
900C selama 30 menit.
d. Refluks
Refluks adalah proses penyarian simplisia pada temperatur titik didihnya menggunakan
alat dengan pendingin balik dalam waktu tertentu dimana pelarut akan terkondensasi menuju
pendingin dan kembali ke labu.
e. Sokletasi

Sokletasi adalah proses penyarian menggunakan pelarut yang selalu baru, dilakukan
dengan menggunakan alat khusus (soklet) dimana pelarut akan terkondensasi dari labu
menuju pendingin, kemudian jatuh membasahi sampel.
2.4 Radikal Bebas
Radikal bebas adalah setiap molekul yang mengandung satu atau lebih elektron yang
tidak berpasangan.radikal bebas sangat reaktif dan dengan mudah menjurus ke reaksi yang
tidak terkontrol, menghasilkan ikatan dengan DNA, protein, lipida atau kerusakan oksidatif
pada gugus fungsional yang penying pada biomolekul ini, perubahan ini akan menyebabkan
proses penuaan. Radikal bebas juga terlibat dan berperan dalam patologi dari berbagai
penyakit degenerative, yakni kanker, aterosklerosis, rematik, jantung koroner, katarak dan
penyakit degenerasi saraf seperti Parkinson (Silalahi, 2006).
Radikal dapat dibentuk dari spesi non-radikal yang kehilangan satu elektronnya,
panggabungan dengan satu elektron atau terputusnya ikatan kovalen melalui peristiwa fisi
homolitik (homolytic fission). Peristiwa ini terjadi apabila satu elektron dari pasangan
elektron terikat pada masing-masing atomnya (Halliwell dan Gutteridge, 1999).
Kerusakan sel akan menyebabkan dampak negatif pada struktur dan
fungsinya.Semakin besar ukuran biomolekul yang mengalami kerusakan, semakin parah
akibatnya. Secara biologis senyawa biomolekul memiliki fungsi yang sangat penting. Oleh
sebab itu, adanya kerusakan struktur dan fungsi sel akan sangat menggangu sistem kerja
organ secara umum (Winarsi, 2007).
Tubuh memiliki mekanisme pertahan antioksidan dalam bentuk enzim antioksidan
dan antioksidan untuk menetralisir radikal bebas. Perkembangan industri yang pesat
menyebabkan manusia berkontak dengan berbagai radikal bebas yang berasal dari lingkungan
dan dari kegiatan fisik yang tinggi menyebabkan sistem pertahanan antioksidan dalam tubuh
tidak memadai (Silalahi, 2006).

2.5 Antioksidan
Antioksidan adalah senyawa yang mampu menangkal atau meredam dampak negatif
oksidan dalm tubuh. Antioksidan bekerja dengan mendonorkan satu elektronnya kepada
senyawa yang bersifat oksidan sehingga aktivitas oksidan tersebut biasa dihambat.
Penyebab utama kerusakan oksidatif didalam tubuh adalah senyawa oksidan, baik
yang berbentuk radikal bebas ataupun bentuk senyawa oksigen reaktif lain yang bersifat
sebagai oksidator. Kerusakan oksidatif terjadi sebagai akibat dari rendahnya antioksidan
dalam tubuh sehingga tidak dapat mengimbangi reaktivitas senyawa oksidan.
Khasiat antioksidan untuk mencegah berbagai penyakit akibat pengaruh oksidatif
akan lebih efektif jika kita mengkonsumsi sayur-sayuran dan buah-buahan yang kaya akan
antioksidan dan berbagai jenis dari pada menggunakan antioksidan tunggal. Efek antioksidan
dari sayur-sayuran dan buah-buahan lebih efektif daripada suplemen antioksidan yang
diisolasi dikarenakan oleh adanya komponen lain dalam sayur-sayuran dan buah-buahan yang
berperan secara positif (Silalahi, 2006).
Secara umum, antioksidan dikelompokkan menjadi 2, yaitu antioksidan enzimatis dan
non-enzimatis. Antioksidan enzimatis misalnya enzim superoksida dismutase (SOD), katalse
dan glutation peroksidase. Antioksidan non-enzimatis masih dibagi dalam 2 kelompok lagi:
a. antioksidan larut lemak, seperti tokoferol, karotenoid, flavonoid, quinon, dan bilirubin.
b. Antioksidan larut air,asam askorbat, asam urat, protein pengikat logam, dan protein
pengikat heme.
Berdasarkan mekanisme kerjanya, antioksidan digolongkan menjadi 3 kelompok,
yaitu antioksidan primer, sekunder dan tersier.
a. Antioksidan primer meliputi superperoksida dismutase (SOD), katalase dan glutation
perosidase (GSH-Px). Antioksidan primer disebut juga antioksidam enzimatis.

b. Antioksidan sekunder disebut juga antioksidan eksogenus atau non-enzimatis. Antioksidan
dalam kelompok ini juga disebut sistem pertahanan preventif. Dalam sistem pertahanan
ini, terbentuknya senyawa oksigen reaktif dihambat dengan cara merusak
pembentukannya. Antioksidan sekunder meliputi vitamin E, vitamin C, β-
karoten,flavonoid, asam urat, bilirubin, dan albumin.
c. Antioksidan tersier meliputi sistem enzim DNA-repair dan metionin sulfoksida reduktase.
Enzim-enzim ini berfungsi dalam perbaikan biomolekuler yang rusak akibat reaktivitas
radikal bebas (Winarsi, 2007).
2.5.1 Kuersetin
Kuersetin adalah senyawa golongan flavonol (bagian dari flavonoid) yang banyak
terkandung dalam buah-buahan dan sayuran, misalnya apel, anggur, teh, bawang merah
dan kopi. Kuersetin memiliki 5 gugus –OH bebas yang dapat disubsitusi oleh gugus asil
melalui reaksi esterifikasi. Ester kuersetin dapat diperoleh dengan mereaksikan kuersetin
dengan senyawa golongan asam karboksilat, halida asam karboksilat dan anhidrida
karboksilat (Silalahi, 2006).
Kuersetin seperti semua antioksidan lainnya telah diteliti untuk memenuhi
kemampuannya dalam melawan kanker. Kuersetin sebagai antioksidan, melindungi sel
dari radikal bebas dengan menetralisir efek buruknya terhadap sel tubuh. Kuersetin adalah
bentuk aglikon dari sejumlah glikosida flavonoid lainnya, seperti halnya rutin dan
kuersitrin, ditemukan dalam buah jeruk, gandum dan bawang. Beberapa sumber kuersetin
yaitu teh hitam, teh hijau, bawang, apel, anggur dan spesies berry (Silalahi, 2006). Rumus
bangun kuersetin dapat dilihat pada Gambar 2.2

Gambar 2.2 Struktur kimia kuersetin (Silalahi, 2006).
2.6 Spektrofotometer UV-Visibel
Metode pengukuran menggunakan prinsip spektrofotometri adalah berdasarkan
absorpsi cahaya padapanjan gelombang tertentu melalui suatu larutan yang mengandung
kontaminan yang akan ditentukan konsentrasinya. Prinsip kerja dari metode ini adalah jumlah
cahaya yang diabsorpsi oleh larutan sebanding dengan konsentrasi kontaminan dalam larutan
(Lestari, 2009).
Prinsip kerja spektrofotometer UV-Vis berdasarkan penyerapan cahaya atau energi
radiasi oleh suatu larutan. Jumlah cahaya atau energi radiasi yang diserap memungkinkan
pengukuran jumlah zat penyerap dalam larutan secara kuantitatif (Triyati, 1985). Panjang
gelombang untuk sinar ultraviolet antara 200-400 nm sedangkan panjang gelombang untuk
sinar tampak/visible antara 400-750 nm (Gandjar dan Rohman, 2007).
Metode spektrofotometri ultra-violet dan sinar tampak (visible) telah banyak
diterapkan untuk penetapan senyawa-senyawa organik yang umumnya dipergunakan untuk
penetuan senyawa dalam jumlah yang sangat kecil. Dalam suatu larutan, gugus molekul yang
dapat mengabsorpsi cahaya dinamakan gugus kromofor. Molekul-molekul yang
mengandung satu gugus kromofor dapat mengalami perubahan padapanjang gelombang.
Molekul mengandung dua gugus kromofor atau lebih akan mengabsorbsi cahaya pada
panjang gelombang yang hampir sama dengan molekul yang hanya mempunyai satu gugus

kromofor tertentu, tetapi intensitas absorpsinya adalah sebanding dengan jumlah kromofor
yang ada (Triyati, 1985).
2.7 Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Salah satu uji yang dapat dilakukan untuk menentukan potensi antioksidan suatu
senyawa adalah dengan menguji kemampuannya dalam meredam senyawa radikal DPPH
(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil). DPPH merupakan radikal bebas yang stabil pada suhu
kamar dan sering digunakan untuk menilai aktivitas antioksidan beberapa senyawa atau
ekstrak bahan alam (Gurav, dkk., 2007).
DPPH menerima elektron atau radikal hidrogen akan membentuk molekul diamagnetik
yang stabil. Interaksi antioksidan dengan DPPH baik secara transfer elektron atau radikal
hidrogen pada DPPH, akan menetralkan radikal bebas dari DPPH dan membentuk reduksi
DPPH. Warna larutan berubah dari ungu tua menjadi kuning terang dan absorbansi pada
panjang gelombang 516 nm akan hilang jika semua elektron pada radikal bebas DPPH
menjadi berpasangan. Perubahan ini dapat diukur sesuai dengan jumlah elektron atau atom
hidrogen yang ditangkap oleh molekul DPPH akibat adanya zat reduktor. Suatu zat
mempunyai sifat antioksidan bila nilai IC50 kurang dari 200 ppm. Bila nilai IC50 yang
diperoleh berkisar antara 200-1000 ppm, maka zat tersebut kurang aktif namun masih
berpotensi sebagai zat antioksidan (Molyneux, 2004).
A• +
A+
Gambar 2.3 Struktur DPPH (Molyneux, 2004).

Metode sederhana yang telah dikembangkan untuk menentukan kapasitas antioksidan
dari makanan memanfaatkan 1,1 –diphenyl-2-picrylhidrazyl. DPPH memberikan serapan
maksimum pada panjang gelombang 516 nm dan memiliki warna ungu (Prakash, 2001).
Prinsip metode pemerangkapan radikal bebas DPPH, yaitu elektron ganjil pada molekul
DPPH memberikan serapan maksimum pada panjang gelombang 516 nm. Interaksi
antioksidan dengan DPPH akan menetralkan karakter radikal bebas dari DPPH (Molyneux,
2004). Warna ungu larutan DPPH akan berubah menjadi kuning lemah apabila elektron ganjil
tersebut berpasangan dengan atom hidrogen yang dari senyawa antioksidan (Prakash,
2001).Mekanisme reaksi antioksidan dengan radikal bebas DPPH dapat dilihat pada Gambar
2.4.
Gambar 2.4 Mekanisme reaksi antioksidan dengan radikal bebas DPPH

(Molyneux, 2004)
Parameter yang dipakai untuk menunjukkan aktivitas antioksidan adalah harga
konsentrasi efisien atau Efficient Concentration (EC50) atau Inhibitory Concentration (IC50)
yaitu konsentrasi suatu zat antioksidan yang dapat menyebabkan 50% DPPH kehilangan
karakter radikal atau konsentrasi suatu zat antioksidan yang memberikan persen peredaman
sebesar 50% (Molyneux, 2004).
2.7.1 Pelarut
Metode DPPH akan memberikan hasil yang baik menggunakan pelarut metanol atau
etanol karena kedua pelarut ini tidak mempengaruhi dalam reaksi antara sampel uji
antioksidan dengan radikal bebas DPPH (Molyneux, 2004).

2.7.2 Pengukuran panjang gelombang
Panjang gelombang yang digunakan untuk analisis kuantitatif adalah panjang
gelombang yang mempunyai absorbansi maksimal. Panjang gelombang maksimum yang
digunakan dalam pengukuran sampel uji pada metode pemerangkapan radikal bebas DPPH
sangat bervariasi. Menurut beberapa literatur, panjang gelombang maksimum untuk DPPH
antara lain 515-520 nm (Molyneux, 2004).
2.7.3 Waktu pengukuran
Waktu pengukuran atau waktu kerja (operating time) bertujuan untuk mengetahui
waktu yang tepat dalam melakukan pengukuran, yakni saat sampel telah mencapai
kesetimbangan sehingga dalam kondisi stabil. Waktu pengukuran yang digunakan dalam
beberapa penelitian sangatlah bervariasi, yaitu 1-240 menit. Waktu pengukuran yang paling
banyak direkomendasikan adalah 60 menit. Kecepatan reaksi dipengaruhi oleh sifat dari
aktivitas antioksidan yang terdapat di dalam sampel (Rosidah, dkk., 2008).

BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Tempat Pelaksanaan Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Fitokimia dan Laboratorium Penelitian
Fakultas Farmasi, Universitas Sumatera Utara
3.2 Metode Penelitian
Metode penelitian ini dilakukan secara eksperimental. Penelitian meliputi
pengumpulan dan pengolahanbahan tumbuhan, identifikasi bahan tumbuhan, karakterisasi
simplisia,skrining fitokimia, pembuatan ekstrak etanol daunbiwa (Eriobotrya japonica
(Thunb.) Lindl.)dan pengujian aktivitas antioksidan daun biwa dengan metode aktivitas
pemerangkapan radikal bebas DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl) yang diukur secara
spektrofotometri visibel.
3.3 Alat
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini terdiri dari alat-alat gelas laboratorium,
blender, desikator, krus porselin, lemari pengering, mikroskop (Olympus), neraca analitik
(Boeco Germany), oven (Memmert), penangas air, rotary evaporator (Stuart), pipet tetes,
labu tentukur (Oberoi), bola hisap (D&N), corong (Pyrex), kaca arloji, gelas ukur(Pyrex),
spektrofotometer UV-Visible (Shimadzu UV-1800), stopwatch dan tanur (Nabertherm).
3.4 Bahan
Bahan-baha yang dipergunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak etanol daun
biwa(Eriobotrya japonica (Thunb.) Lindl.), kuersetin, metanol p.a, etanol 96% dan DPPH
(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil).

3.5 Penyiapan Bahan Tumbuhan
3.5.1 Pengumpulan Bahan Tumbuhan
Pengumpulan sampel dilakukan secara purposif, yaitu tanpa membandingkan
tumbuhan yang sama dari daerah lain. Tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah
biwa yang diambil dari Taman Simalem Resort, Jalan Raya Merek, Sidikalang, Provinsi
Sumatera Utara. Bagian tumbuhan yang digunakan yaitu daun biwa. Daun yang diambil
sebagai sampel adalah keseluruhan dari daun tumbuhan yang masih dalam keadaan baik
3.5.2 Identifikasi Tumbuhan
Identifikasi tanaman dilakukan di Herbarium medanense, (MEDA) Universitas
Sumatera Utara.
3.5.3 Proses Pembuatan Serbuk Simplisia
Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah daun biwa yang masih segar. Daun
dicuci hingga bersih untuk menghilangkan tanah dan pengotoran lainnya, kemudian ditiriskan
dan ditimbang. Diperoleh berat basah. Selanjutnya daun tersebut dikeringkan dalam lemari
pengering sampai daun kering (ditandai bila diremas rapuh). Simplisia yang telah kering
ditimbang, kemudian diblender menjadi serbuk. Lalu dimasukkan ke dalam kantung plastik
dengan silika gel dan disimpan pada suhu kamar.
3.6 Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia
Pemeriksaan karakterisasi simplisia meliputi pemeriksaan makroskopik dan
mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari larut dalam air, penetapan kadar sari
larut dalam etanol, penetapan kadar abu total, dan penetapan kadar abu tidak larut dalam
asam (Depkes, 1995).

3.6.1 Pemeriksaan Mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopik terhadap simplisia dilakukan dengan cara menaburkan serbuk
simplisia di atas kaca objek yang telah diteteskan dengan larutan kloralhidrat dan ditutup
dengan kaca penutup kemudian diamati di bawah mikroskop.
3.6.2 Penetapan Kadar Air
Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluena). Cara
Kerja: toluena sebanyak 200 mL dan air suling sebanyak 2 mL dimasukkan ke dalam labu
alas bulat, didestilasi selama 2 jam. Toluena didinginkan selama 30 menit dan volume air
dalam tabung penerima dibaca.Kemudian ke dalam labu tersebut dimasukkan 5 g serbuk
simplisia yang telah ditimbang seksama, labu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah
toluena mendidih, kecepatan tetesan diatur 2 tetes tiap detik sampai sebagian besar air
terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik. Setelah semua
air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluena. Destilasi dilanjutkan selama 5
menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar. Setelah air dan
toluena memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua
volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang
diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (WHO, 1998).
3.6.3 Penetapan Kadar Abu Total
Sebanyak lebih kurang 2 g zat yang telah digerus dan ditimbang seksama dimasukkan
dalam krus porselen yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijarkan
perlahan-lahan hingga arang habis, jika arang masih tidak dapat dihilangkan, ditambahkan air
panas, saring melalui kertas saring bebas abu. Pijarkan hingga bobot tetap, timbang. Kadar
abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1995).

3.6.4 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam
Abu yang telah diperoleh dari penetapan kadar abu total dididihkan dalam 25 mL
asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan,
disaring melalui kertas saring, dipijarkan hingga bobot tetap kemudian didinginkan dan
ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah
dikeringkan (Depkes, 1995).
3.6.5 Penetapan Kadar Sari larut Dalam Air
Sebanyak 5 g serbuk dimaserasi selama 24 jam dalam 100 mL air kloroform (2,5 mL
kloroform dalam air suling sampai 1 liter) dalam labu bersumbat sambil sesekali dikocok
selama 6 jam pertama kemudian dibiarkan selama 18 jam dan disaring. Sejumlah 20 mL
filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara.
Sisa dipanaskan dalam oven pada suhu 105oC sampai diperoleh bobot konstan. Kadar sari
yang larut di dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1995).
3.6.6 Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Etanol
Sebanyak 5 g serbuk yang telah dikeringkan di udara dimaserasi selama 24 jam dalam
100 mL etanol 96% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama dan
kemudian dibiarkan selama 18 jam dan disaring. Sejumlah 20 mL filtrat pertama diuapkan
sampai kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara. Sisa dipanaskan dalam
oven pada suhu 105oC sampai diperoleh bobot konstan. Kadar sari yang larut dalam etanol
dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes, 1995).

3.7 Skrining Fitokimia Simplisia Daun Biwa
3.7.1 Pemeriksaan Alkaloid
Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 mL asam klorida
2 N dan 9 mL air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, didinginkan lalu
disaring. Filtrat dipakai untuk percobaan berikut:
a. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereaksi Mayer akan terbentuk
endapan berwarna putih atau kuning.
b. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereaksi Bouchardat akan
terbentuk endapan berwarna coklat-hitam.
c. Filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereaksi Dragendorff akan
terbentuk endapan berwarna merah atau jingga.
Alkaloida dinyatakan positif jika terjadi endapan atau paling sedikit dua atau tiga dari
percobaan di atas (Depkes, 1995).
3.7.2 Pemeriksaan Flavonoid
Larutan Percobaan:
Sebanyak 0,5 g sampel disari dengan 10 mL metanol lalu direfluks selama 10 menit,
disaring panas-panas melalui kertas saring berlipat, filtrat diencerkan dengan 10 mL air
suling. Setelah dingin ditambah 5 mL eter minyak tanah, dikocok hati-hati, didiamkan.
Lapisan metanol diambil, diuapkan pada temperatur 40oC. Sisa dilarutkan dalam 5 mL etil
asetat, disaring.
Cara Percobaan:
a. Satu mL larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan dalam 1-2 mL
etanol 96%, ditambahkan 0,5 g serbuk seng dan 2 mL asam klorida2N, didiamkan selama
satu menit. Ditambahkan 10 mL asam klorida pekat, jika dalam waktu 2-5 menit terjadi
warna merah intensif menunjukkan adanya flavonoida (glikosida-3-flavonol).

b. Satu ml larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan dalam 1 mL etanol
96%, ditambahkan 0,1 g magnesium dan 10 mL asam klorida pekat, terjadi warna merah
jingga sampai merah ungu menunjukkan adanya flavonoida (Depkes, 1995).
3.7.3 Pemeriksaan Tanin
Sebanyak 0,5 g sampel disari dengan 10 mL air suling, disaring lalu filtratnya
diencerkan dengan air suling sampai tidak berwarna. Diambil 2 mL larutan lalu ditambahkan
1 sampai 2 tetes pereaksi besi (III) klorida. Terjadi warna biru atau hijau kehitaman
menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1966).
3.7.4 Pemeriksaan Glikosida
Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 3 g kemudian disari dengan 30 mL campuran 7
bagian volume etanol 96% dan 3 bagian volume air suling, selanjutnya ditambahkan 10 mL
HCl 2 N, direfluks selama 10 menit, didinginkan dan disaring. Pada 30 mL filtrat
ditambahkan 25 mL air suling dan 25 mL timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan
selama 5 menit lalu disaring. Filtrat disari sebanyak 3 kali, tiap kali dengan 20 mL campuran
3 bagian volume kloroform dan 2 bagian volume isopropanol. Diambil lapisan air kemudian
ditambahkan 2 mL air dan 5 tetes pereaksi Molisch, ditambahkan hati-hati 2mL asam sulfat
pekat terbentuk cincin warna ungu pada batas kedua cairan menunjukkan adanya ikatan gula
(Depkes, 1995).
3.7.5 Pemeriksaan Saponin
Sebanyak 0,5 g sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi lalu ditambahkan 10 mL
air panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 men it jika terbentuk busa
setinggi 1-10 cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit dan buih tidak hilang dengan
penambahan 1 tetes larutan asam klorida 2N menunjukkan adanya saponin(Depkes, 1995).

3.7.6 Pemeriksaan Steroida/Triterpenoid
Sebanyak 1 g serbuk simplisia dimaserasi dengan 20 mL eter selama 2 jam, lalu
disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa dalam cawan penguap
ditambahkan 2 tetes asam asetat anhidrida dan 1 tetes asam sulfat pekat. Timbul warna ungu
atau merah kemudian berubah menjadi hijau biru menunjukkan adanya steroida triterpenoida
(Harborne, 1987).
3.8 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Biwa (Eriobotrya japonica)
Pembuatan ekstrak dilakukan secara maserasi mengunakan pelarut etanol 96%.
Masukkan 500 gsimplisia ke dalam sebuah bejana, tuangi dengan 75 bagian (3,75 L)
cairan penyari, dan tutup biarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk,
diserkai, diperas, dicuci ampas dengan cairan penyari sebanyak 25 bagian (1,25 L) hingga
diperoleh 100 bagian (5 L). Pindahkan kedalam bejana tertutup, biarkan di tempat sejuk,
terlindung dari cahaya selama 2 hari, dienap tuangkan.Maserat yang diperoleh dipekatkan
dengan menggunkan alat rotary evaporator pada suhu ± 400C sampai diperoleh maserat
pekat. Kemudian diuapkan, sehingga diperoleh ekstrak kental (Depkes, 1979).
3.9 Pengujian Aktivitas Antioksidan dan Metode DPPH
3.9.1 Prinsip Metode Pemerangkapan Radikal Bebas DPPH
Kemampuan sampel uji dalam meredam proses oksidasi radikal bebas DPPH (1,1
diphenyl-2-picrylhidrazyl) dalam larutan metanol (sehingga terjadi
perubahan warna DPPH dari ungu menjadi kuning) dengan nilai IC50 (konsentrasi
sampel uji yang mampu meredam radikal bebas 50%) digunakan sebagai parameter
menentukan aktivitas antioksidan sampel uji (Molyneux, 2004).

3.9.2 Pembuatan Larutan Induk Baku DPPH
Sebanyak 9,8 mg DPPH ditimbang, kemudian dilarutkan dalam metanol hingga
volume 50 mL (konsentrasi 200 ppm).
3.9.3 Pembuatan Larutan Blanko
Larutan DPPH 0,5 mM (kosentrasi 200 ppm). Dipipet sebanyak 1 mL, kemudian
dimasukkan kedalam labu tentukur 5 mL, dicukupkan volumenya dengan metanol sampai
garis tanda (konsentrasi 40 ppm).
3.9.4 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Panjang gelombang maksimum ditentukan dengan mengunakan larutan DPPH
kosentrasi 40 ppm dan diukur serapannya pada panjang gelombang 400-800 nm. Larutam
DPPH 40 ppm ini juga digunakan sebagai larutan kontrol (larutan uji dengan konsentrasi 0
ppm).
3.9.5 Pembutan Larutan Induk Baku Ekstrak Etanol Daun Biwa
Sebanyak 10 mg sampel ditimbang kemudian dilarutkan dalam labu tentukur 10
mL,larutkan dengan etanol sampai garis tanda (konsentrasi1000 ppm).
3.9.6 Pembuatan Larutan Induk Baku Kuersetin
Sebanyak 10 mg serbuk kuersetin ditimbang kemudian dilarutkan dalam labu tentukur
10 mL, larutkan dengan metanol sampai garis tanda (konsentrasi 1000 ppm)
3.9.7 Pembuatan Larutan Uji
3.9.7.1 Larutan Uji Ekstrak Etanol Daun Biwa
Larutan induk baku masing-masing ekstrak dipipet sebanyak 0,1 mL; 0,2 mL; 0,3 mL;
0,4 mL; kemudian dimasukan ke dalam labu tentukur 5 mL (untuk mendapatkan konsentrasi
20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm),kemudian masing-masing labu tentukur ditambahkan 1
mL larutan induk baku DPPH 200 ppm, lalu volumenya dicukupkan dengan metanol sampai
garis tanda dan dihomogenkan.

3.9.7.2 Larutan Uji Pembanding Kuarsetin
Larutan induk kuarsetin dipipet sebanyak 0,01 mL; 0,02 mL; 0,03 mL; 0,04 mL;
kemudian dimasukakan kedalam ke dalam labu tentukur 5 mL (untuk mendapatkan
konsentrasi 2 ppm, 4 ppm, 6 ppm, 8 ppm),kemudian masing-masing labu tentukur
ditambahkan 1 mL larutan induk baku DPPH 200 ppm, lalu volumenya dicukupkan dengan
metanol sampai garis tanda dan dihomogenkan.
3.9.8 Pengujian Metode DPPH Dengan Spektrofotometri
Larutan uji yang telah dipersiapkan, segera diinkubasikan pada suhu 37o C selama 15
menit. Selanjutnya kontrol dan sampel uji diukur pada panjang gelombang 516 nm.
Besarnya aktivitas antioksidan dihitung dengan mengunakan rumus:
A kontrol - A sampel
(%peredaman = x 100%
A kontrol
Keterangan: Akontrol= Absorbansi tidak mengandung sampel
Asampel = Absorbansi sampel
Selanjutnya hasil perhitungan dimasukkan ke dalam persamaan regresi dengan
kosentrasi ekstrak (μg/mL). Sebagai absis (sumbu X) dan nilai % peredaman (antioksidan)
sebagai oridinatnya (sumbu Y)
3.9.9 Analisis Data
Perhitungan yang digunakan dalam penentuan aktivitas pemerangkapan radikal bebas
adalah nilai IC50 (Inhibitory Concentration), nilai tersebut menggambarkan besarnya
konsentrasi senyawa uji yang dapat memerangkap radikal bebas sebesar 50% (Molyneux,
2004). Hasil perhitungan dimasukkan ke dalam persamaan regresi dengan konsentrasi sampel
(μg/mL) sebagai absis (sumbu x) dan nilai % pemerangkapan (antioksidan) sebagai
ordinatnya (sumbu y).

Secara spesifik, suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat jika nilai IC50
kurang dari 50 μg/mL, kuat untuk IC50 bernilai 50-100 μg/mL, sedang jika IC50bernilai 101-
150μg/mLdan lemah jika IC50bernilai lebihdari150 μg/mL(Fidrianny, dkk., 2014).

BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Identifikasi Tanaman
Hasil identifikasi yang dilakukan di Herbarium Medanense (MEDA) Universitas
Sumatera Utara terhadap sampel tanaman yang digunakan pada penelitian ini adalah daun.
Hasil Identifikasi menunjukkan bahwa sampel tersebut adalah daun biwa (Erioboryta
japonica(Thunb.)Lindl). Identifikasi daun biwa ini diambil dari hasil penelitianMarianne,
dkk., (2018), hasil identifikasi dapat dilihat pada Lampiran 1.
4.2 Karakterisasi Simplisia
Standarisasi suatu simplisia dilakukan sebagai pemenuhan terhadap persyaratan
sebagai bahan obat dan menjadi penetapan nilai untuk berbagai parameter produk (Depkes
RI, 2000).
Hasil karakterisasi simplisia daun biwa dapat dilihat pada Tabel 4.1.
Tabel 4.1Hasil karakteristik simplisia daun biwa

No. PemeriksaanKarakteristik Kadar (%)
1. Kadar air 7,3
2. Kadar abu total 8,08
3. Kadar abutidaklarutasam 4,5
4. Kadar sari larut dalam air 9,3
5. Kadar sari larut dalam etanol 25
Monografi dari simplisia biwa tidak ditemukan di buku Materia Medika Indonesia
(MMI), sehingga tidak ada acuan untuk menentukan parameter simplisia tersebut. Hasil
penetapan kadar air simplisia daun biwa adalah 7,3%, telah memenuhi standarisasi kadar air
simplisia secara umumya itu tidak lebih dari 10% (Depkes RI,1995). Kelebihan air dalam
simplisia akan menyebabkan pertumbuhan mikroba, jamur atau serangga, serta mendorong
kerusakan bahan aktif yang terkandung didalamnya karena dapat terurai (hidrolisis) (WHO,
1998).

Hasil karakterisasi simplisia daun biwa diperoleh kadar sari larut air sebesar 9,3%
dankadar sari larut etanol sebesar 25%. Tujuan dilakukannya penetapan kadar sari yaitu
untuk mengetahui kadar sari bahan yang terlarut di dalam pelarut air dan etanol (Depkes RI,
2000).
Hasil penetapan kadar abu total pada simplisia daun biwa sebesar 8,08% dan kadar
abu tak larut asam sebesar 4,5%. Penentuan kadar abu merupakan metode pengukuran kadar
terhadap abu yang dipanaskan pada temperatur tertentu, karena senyawa organik dan
turunannya akan terdestruksi dan menguap sehingga yang tertinggal hanya unsur mineral dan
anorganik (DepkesRI,2000). Perhitungan hasil karakterisasi simplisia daun biwa dapat dilihat
pada Lampiran 4.
4.3 Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia dilakukan untuk mengetahui golongan metabolit sekunder yang
mempunyai aktivitas biologi yang terdapat dalam simplisia dan ekstrak etanol daun biwa.
Skrining fitokimia yang dilakukan adalah pemeriksaan golongan senyawa alkaloid,
flavonoid, tanin, glikosida, saponin dan steroid/triterpenoid. Hasil skrining fitokimia
simplisia dan ekstrak dari daun biwa dilihat pada Tabel 4.2
Tabel 4.2 Hasil skrining fiokimia simplisia dan ekstrak etanol daun biwa
PemeriksaanKandungan Hasil
No.
Simplisia Ekstrak
1. Alkaloid  
2. Flavonoid + +
3. Tanin + +
4. Glikosida + +
5. Saponin + +
6. Steroid/triterpenoid + +
Keterangan: (+): ada
(): tidak ada
Berdasarkan hasil skrining diketahui bahwa simplisia dan ekstrak etanol daun biwa
mengandung flavonoid, tanin, glikosida, saponin, dan steroid/triterpenoid. Pada pengujian
alkaloid tidak menunjukkan reaksi positif. Hal itu terbukti pada pengujian dengan

menambahkan pereaksi Dragendorff tidak terbentuk suatu endapan. Hal yang sama juga
terjadi pada saat penambahan pereaksi Bouchardat. Begitu juga dengan penambahan pereaksi
Mayer tidak terbentuk endapan putih (Depkes RI, 1979).
4.4 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan
4.4.1 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum
Pengukuran serapan maksimum larutan DPPH 40 μg/mL dalam metanol dengan
menggunakan spektrofotometer UV-Visibel. Data hasil pengukuran panjang gelombang
maksimum dapat dilihat pada Gambar 4.1.
Gambar 4.1 Kurva serapan maksimum larutan DPPH 40 μg/mL menggunakan

spektrofotometer uv-visibel
Hasil pengukuran menunjukkan bahwa larutan DPPH dalam etanol menghasilkan
serapan maksimum pada panjan ggelombang 516 nm. Panjang gelombang 516 nm, termasuk
dalam kisaran panjang gelombang sinar tampak 400-750 nm, serta termasuk dalam rentang
panjang gelombang DPPH yang berkisar antara 515-520 nm (Molyneux, 2004).
4.4.2 Hasil Analisis Waktu Pengukuran (operating time)
Waktu pengukuran (operating time) metode DPPH menurut beberapa literatur yang
direkomendasikan selama 60 menit,tetapi dalam beberapa penelitian waktu yang digunakan
sangat bervariasi dari 1 menit hingga 240 menit (Marinova dan Batchvarov, 2011). Penentuan

operating time larutan DPPH 40μg/mL dalam metanol diperoleh waktu kerja terbaik yaitu
pada menit ke- 15 setelah penambahan pelarut metanol. Hasil operating time larutan DPPH
40 μg/mL dalam metanol dapat dilihat Lampiran 5.
4.4.3 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Biwa dan
Kuersetin
Aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun biwa diperoleh dari hasil pengukuran
absorbansi DPPH pada menit ke-15 dengan adanya penambahan larutan uji dengan
konsentrasi 20 μg/mL, 40 μg/mL, 60 μg/mL dan 80 μg/mL yang dibandingkan dengan
kontrol DPPH (tanpa penambahan larutan uji). Pada hasil analisis aktivitas antioksidan
terlihat adanya penurunan nilai absorbansi DPPH sebanding dengan peningkatan konsentrasi
larutan uji ekstrak etanol. Penurunan absorbansi DPPH dan persen pemerangkapan dengan
penambahan ekstrak etanol dapat dilihat pada Tabel 4.3
Tabel 4.3 Penurunan absorbansi dan persen pemerangkapan DPPH oleh ekstrak
etanol daun biwa
Konsentras Absorbansi % pemerangkapan Rata-
i (µg/ml) I II III I II III rata
0 0,991 0,991 0,991 0 0 0 0
20 0,85 0,851 0,848 14,22 14,04 14,42 14,22
40 0,638 0,637 0,635 35,62 35,72 35,92 35,75
60 0,452 0,454 0,456 54,38 54,18 53,98 54,18
80 0,291 0,29 0.289 70.63 70,73 70.83 70,73
Aktivitas antioksidan kuersetin diperoleh dari hasil pengukuran absorbansi DPPH pada
menit ke-60 dengan adanya penambahan larutan kuersetin dengan konsentrasi 2 μg/mL, 4
μg/mL, 6 μg/mL dan 8 μg/mL yang dibandingkan dengan kontrol DPPH (tanpa penambahan
larutan kuersetin). Padahasil analisis aktivitas antioksidan terlihat adanya penurunan nilai
absorbansi DPPH sebanding dengan peningkatan konsentrasi larutan kuersetin. Penurunan
absorbansi DPPH dan persen peredaman dengan penambahan larutan kuersetin dapat dilihat
pada Tabel 4.4.

Tabel 4.4Penurunan absorbansi dan persen pemerangkapan DPPH oleh kuersetin
Konsentrasi
Absorbansi % pemerangkapan Rata-
(µg/ml)
Rata
I II III I II III
0 0,991 0,991 0,991 0 0 0 0
2 0,756 0757 0,757 23,71 23,61 23,61 23,64
4 0,566 0,567 0,559 43,59 43,59 43,59 43,59
6 0,301 0,301 0,301 69,63 69,63 69,63 69,63
8 0,076 0,077 0,077 92,23 92,23 92,23 92,23
Penurunan nilai absorbansi menunjukkan peningkatan aktivitas antioksidan. Penurunan
nilai absorbansi terjadi karena ekstrak etanol daun biwa dan larutankuersetinmampu
menetralisir DPPH dengan memberikan elektron kepada DPPH sehingga atom dengan
elektron yang tidak berpasangan mendapat pasangan elektron dan tidak lagi menjadi radikal
(Silalahi, 2006).
Hasil persamaan regresi linier dan hasil analisis IC50 yang diperoleh dari ekstrak etanol
daun biwa dan kuersetindapat dilihat pada Tabel 4.5
Tabel4.5 Hasil persamaan regresi linier dan hasil analisis IC50 yang diperoleh dari ekstrak
etanol daun biwa dan kuersetin
No
Larutanuji Persamaan regresi IC50(µg/mL) Korelasi Kategori
.
Ekstrak etanol
1 Y = 0,9071X-1,346 56,55 R= 0,996 Kuat
daun biwa
Y = 11,5225X- Sangatku
2 Kuersetin 4,36 R= 0,998
0,272 at
Hasil tersebut menunjukkan aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun biwa dalam
kategori kuat dengan nilai IC50 sebesar56,56μg/mL, sedangkan kuersetin memiliki aktivitas
antioksidan yang sangat kuat dengan nilai IC50 sebesar 4,36μg/mL, hal ini dikarenakan bahwa
kuersetin merupakan senyawa murni sedangkan ekstrak etanol daun biwa masih berupa
campuran beberapa senyawa. Menurut Fidrianny, dkk., (2014), kategori IC50 sebagai
antioksidan dapat dilihat pada Tabel4.6.

Tabel 4.6 Kategori nilai IC50 sebagai antioksidan
No. Kategori Konsentrasi (μg/mL)
1. Sangat kuat <50
2. Kuat 50 – 100
3. Sedang 101 – 150
4. Lemah > 150

BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa:
a. Sampel ekstrak etanol daun biwa memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC50
sebesar 56,55 μg/mL.
b. Ekstrak etanol daun biwa merupkan sampel dengan aktivitas antioksidan yang kuat
karena memiliki nilai IC50 dengan konsentrasi antara 50-100μg/mL.
5.2 Saran
Dari hasil penelitian ekstrak etanol daun biwa memiliki aktivitas antioksidan yang
kuat, oleh sebab itu disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk melakukan isolasi dengan
harapan agar didapat nilai IC50 dari senyawa murni yang memiliki aktivitas antioksidan
yang sangat kuat.

DAFTAR PUSTAKA
Bangun, E., Frits, H. S., Karsinah, Fatiani, M., Rasiska, T. 2004. Biwa Tanaman Buah
Langka Kebun Percobaan Tanaman Buah Brastagi. Brastagi. Belum dipublikasi.
Depkes, RI. 1979. Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
Halaman 47.
Depkes, RI. 1995. Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
Halaman 297-325, 333-340.
Depkes, RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen
Kesehatan RI. Halaman 1, 9-10.
Depkes, RI.2010. Farmakope Indonesia. Jilid IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
Halaman: 1035-1036.
Fransworth, N.R. 1966. Biological and Phytochemical Screening of Plants. Journal of
Pharmaceutical Sciences.Volume 55 No.3. Chiccago: Rheis Chemical Compan.
Pages 263-264.
Ferreres dan Champe, P.C. 2009. Pharmacological Experiments on Isolated Preparations.
Edisi II. Edinburg: Churcill Livingstone. Halaman 25.
Fessenden, R,J. and J.S Fassenden, 1986. Organic Chemistry, diterjemahkan oleh
Pudjaatmaka, H.A., Edisi Ketiga, Jilid 1, Erlangga, Jakarta
Fidrianny, I., Darmawati, A danSukrasno. 2014. Antioxidant Capacities from Different
Polarities Extracs of Cucurbitaceae leaves Using FRAP, DPPH Assay and
Correlation with Phenolic, Flavonoid, Carotenoid Content. International Journal
ofPharmacy and Pharmaceutical Sciences. 6(2): 858-862.
Gandjar, I. G., dan Rohman, A. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
Halaman 222,252-256.
Gurav, S., Deshkar, N., Gulkari, V., Duragkar, N., and Patil A. 2007. Free Radical
Scavenging Activity of Polygala Chinensis Linn. Pharmacologyline, No. 2: Hal. 249
Hallwel, B. and Gutteridg, J.M.C. 1999. Free Radicals in Biology andMedicine, Third
Edition, Oxford University Press, New York.
Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan.
Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Terbitan Kedua. Bandung:
Penerbit ITB. Halaman 71, 130-147, 259.
Indrawati, N.L., Razimah. 2013. Bawang Dayak Si Umbi Ajaib Penakluk Aneka Penyakit.
Jakarta: Penerbit PT Agromedia Pustaka. Halaman 46.
Lestari, F. 2009. Bahaya Kimia: Sampling dan Pengukuran Kontaminan Kimiadi Udara.
Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Halaman 189..
Kumalanungsih, S. (2006). Antioksidan Alami. Cetakan 1. Trubus Agrisarana Surabaya:
Halaman 16-25.
Marinova, G., danBatchvarov,V.2011. Evaluation of the Methods for Determination of the
Free Radical Scavenging Activity by DPPH. Bulgarian Journal of Agricultural
Science 17:1.11-24.
Markham, K.R. 1998. Cara Mengidentifikasi Flavanoid. Bandung: Penerbit ITB. Halaman1,
12, 15
Molyneux, P. 2004. The Use of the Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl
(DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin J. Sci. Technol. 26(2):
211-219.
Momuat, L., Fatimah, F., Wchantouw, F., dan Momondol, O. 2011. Total Antioksidan dari
Beberapa Jenis Sayuran Tinatuan yang Ditanam di Daerah Berbeda Ketinggian.
Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas
SamRatulangi. Manado: Chem. Prog. Halaman 11.

Prakash, A. 2001. Antioxidant Activity. Medallion Laboratories-Analytical Progress. 19(2):
2.
Redha, A. 2010. Flavanoid: Struktur, Sifat Antioksidatif dan Perannya dalam Sistem
Biologis. Jurnal Belian, Halaman:9
Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi Keempat.
Bandung: Penerbit ITB. Halaman 100-150, 191-193.
Rosidah, Yam, M.F., Sadikun, A., dan Asmawi, M.Z. 2008. Antioxidant Potential of
Gynura procumbens. Pharmaceutical Biology. 46(9): 616-625
Roslizawaty, 2013. Pengaruh Ekstrak Etanol Sarang Semut (Myrmecodia sp.) Terhadap
Gambaran Histopatologi Ginjal Mencit (Mus musculus) Jantan Yang
Hiperurisemia, Jurnal Medika Veterineria, ISSN: 0853-1943.
Sembiring, S. 2009. Analisis Fungsi Tanaman Biwa Di Kabupaten Karo. Tesis. Universitas
Sumatera Utara.
Silalahi, J. 2006. Makanan Fungsional. Yogyakarta: Kanisius. Halaman 40, 47-48.
Syamsuni, H. A. 2006. Ilmu Resep. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Halaman 243.
Takashi. M., dan Takayumi, S. 1997. Antiokxidant Activities Of Natural Compound Found
In Plants, Journal of Agriculture and Food Chemistry. Halaman 45.
Trease, G.e., dan Evans, W.C. 1983. Phrmacognosy. Edisi Kedua belas London: Bailliere
Tindall. Halaman 220-221.
Triyati, E. 1985. Spektrofotometer Ultraviolet dan Sinar Tampak Serta Aplikasinya dalam
Oseanologi. Oseanal (10): 39-47.
Winarsi,H. 2010. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas dan Aplikasinya dalam
Kesehatan. Cetakan ke-4. Yogyakarta: Penerbit Kanisius. Halaman 12-15.
WHO. 1998. Quality Control Methods For Medical Plant Materils. Ganeva:
World Health Organization. Halaman:25-28
Zar, P.P.K., Sakao, k., Hashimoto, F., Morishita, a., , Fuji, m., , Wada, K., and
Hou H. 2013. Antioxidant and anti-inflammatory activities of loqua (Eriobotrya
Japonica) tea. The Journal of Functional Foods in Health and Disease
3(11):447-461.

Lampiran 1.
Hasil
identifikasi
tanaman
Lampiran 2.
Gambar
tumbuhan biwa
dan simplisia
daun biwa

Tumbuhan biwa
Daun segar biwa

Simplisia daun biwa
Lampiran 3. Hasil pemeriksaan mikroskop

a
Gambar mikroskopik daun biwa dengan pembesaran 10x40
Keterangan: a. Stomata tipe anomositik
b. Kristal kalsium oksalat berbentuk prisma
c. Trikoma
d. Epidermis
Lampiran 4. Hasil perhitungan karakterisasi simplisia
1. Penetapankadar air

% Kadar air simplisia = x 100%
No. Berat sampel (g) Volume akhir (ml)

1. 5,00 0,4
2. 5,00 0,4
3. 5,00 0,3
% Kadar air = x 100%
0,4
1. % Kadar air = x 100% = 8%
5,00
0,4
2. % Kadar air = x 100% = 8%
5,00
0,3
3. % Kadar air = x 100% = 6%
5,00
0,4% 0,4% 0,3%

% rata-rata kadar air = = 7,3%
3
2. Penetapan kadar sari larut air
% Kadar sari larut dalam air = x x 100%
No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,00 0,08
2. 5,00 0,1
3. 5,00 0,09
1. % Kadar sari larut dalam air = x x 100% = 8%
2. % Kadar sari larut dalam air = x x 100% = 10%

3. % Kadar sari larutdalam air = x x 100% = 10%
8% 10% 10%
% rata-rata kadar sari larut dalam air = = 9,3%
3
3. Penetapan kadar sari larut etanol
% Kadar sari larut dalam etanol = x x 100%
No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,00 0,25
2. 5,00 0,26
3. 5,00 0,24
1. % Kadar sari larut dalam etanol = x x 100% = 25%
25% 26% 24%

% rata-rata kadar sari larut dalam etanol = = 25%
3
4. Penetapan kadar abu total
% Kadar abu total = x 100%
No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,017 0,16
2. 2,034 0,16

3. 2,022 0,17
1. % Kadar abu total = x100% = 7,96%
2. % Kadar abu total = x100% = 7,88%
3. % Kadar abu total = x100% = 8,41%
% rata-rata kadar abu total = = 8,08%

3
5. Penetapan kadar abu tidak larut asam
% Kadar abu total = x 100%
No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,00 0,07
2. 2,00 0,11
3. 2,00 0,11
1. % Kadar abu tidak larut asam = x100% = 3,5%
% rata-rata kadar abu tidak larut asam = = 4,5%

3
ampiran 5.Penentuan waktu kerja

 Hasil penentuan waktu kerja (operating time)uji aktivitas antioksidan
Menit
ke- Absorbansi 1 0.9108

2 0.9095 Menit
3 0.9089 Absorbansi
4 0.9084 ke-
5 0.9077 40 0.9072
6 0.9074 41 0.9081
7 0.9070 42 0.9083
8 0.9070 43 0.9083
9 0.9069 44 0.9084
10 0.9065 45 0.9083
11 0.9064 46 0.9086
12 0.9063 47 0.9087
13 0.9063 48 0.9088
14 0.9061 49 0.9088
15 0.9061 50 0.9088
16 0.9061 51 0.9088
17 0.9061 52 0.9089
18 0.9059 53 0.9090
19 0.9059 54 0.9090
20 0.9060 55 0.9090
21 0.9061 56 0.9092
22 0.9059 57 0.9091
23 0.9059 58 0.9092
24 0.9059 59 0.9109
25 0.9060 60 0.9121
26 0.9059
27 0.9061
28 0.9059
29 0.9059
30 0.9061
31 0.9061
32 0.9062
33 0.9062
34 0.9063
35 0.9063
36 0.9064
37 0.9064
38 0.9064
39 0.9064

Lampiran 5. Hasil uji aktivitas antioksidan
1. Ekstrak etanol daun biwa
Data absorbansi menit ke-15 pengukuran pertama
No Konsentrasi (µg/ml) Absorbansi % Peredaman
1 0 0.991 0
2 20 0.85 14,22
3 40 0,638 35,62
4 60 0,452 54,38
5 80 0,291 70,63
% peredaman = kontrol- sampel × 100%

kontrol
Keterangan:
kontrol = Absorbansi tidak mengandung sampel
sampel = Absorbansi sampel
Perhitungan % peredaman ekstrak etanol daun biwa
- Konsentrasi 20 µg/ml
0,991-0,85
% peredaman= × 100% = 14,22%
0,991
0,991-
0,638
% peredaman= × 100% = 35,62%
0,991
0,991-
0,425
% peredaman= × 100% = 54,38%
0,991

0.991-
0,291
% peredaman= × 100% = 70,63%
0,991

Lampiran 5. (lanjutan)
Data absorbansi menit ke-15 pengukuran kedua
1 0 0.991 0
2 20 0,851 14,04
3 40 0,637 35,72
4 60 0,454 54,18
5 80 0,29 70,73

kontrol
Keterangan:
0.991-
0,851
% peredaman= × 100% = 14,04%
0,991
0.991-637
% peredaman= × 100% = 35,65%
0,991
0,991-
0,454
% peredaman= × 100% = 54,38%
0,991

0,991-0,29
% peredaman= × 100% = 70,73%
0,991
Lampiran 5.(lanjutan)
Data absorbansi menit ke-15 pengukuran ketiga
1 0 0.991 0
2 20 0,848 14,42
3 40 0,635 35,92
4 60 0,456 53,98
5 80 0,289 70,83

kontrol
Keterangan:
sampel= Absorbansi sampel
0,991-
0,848
% peredaman= × 100% = 14,42%
0,991
0,991-635
% peredaman= × 100% = 35,92%
0,991

0,991-
0,456
% peredaman= × 100% = 53,98%
0,991
0,991-
0,289
% peredaman= × 100% = 70,83%
0,991
Data nilai rata-rata % peredaman ekstrak etanol daun biwa
Absorbansi % Peredaman Rata-

Konsentrasi
Rata
(µg/ml)
I II III I II III
0 0,991 0,991 0,991 0 0 0 0
20 0,85 0,851 0,848 14,22 14,04 14,42 14,25
40 0,638 0,637 0,635 35,62 35,65 35,92 35,73
60 0,452 0,454 0,456 54,38 54,18 53,98 54,18
80 0,291 00,29 0.298 70.63 70,73 70.83 70,73

2. Kuersetin
Data absorbansi menit ke-15 pengukuran pertama

1 0 0.991 0
2 2 0756 23,71
3 4 0,559 43,59
4 6 0,301 69,63
5 8 0,077 92,23
% peredaman = kontrol- sampel× 100%

kontrol
Keterangan:
Perhitungan % peredaman kuersetin
0,991-
0,756
% peredaman= × 100% = 23,71%
0,991
0,991-
0,559
% peredaman= × 100% = 43,59%
0,991
0,991-
0,301
% peredaman= × 100% = 69,63%
0,991

0,991-
0,077
% peredaman= × 100% = 92,23%
0,991
Data absorbansi menit ke-15 pengukuran kedua

1 0 0.991 0
2 2 0,757 23,61
3 4 0,559 43,59
4 6 0,301 69,63
5 8 0,077 92,23

kontrol
Keterangan:
0,991-
0,757
% peredaman= × 100% = 23,61%
0,991

0,991-
0,559
% peredaman= × 100% = 43,59%
0,991
0,991-
0,301
% peredaman= × 100% = 69,63%
0,991
0,991-0,077
% peredaman = × 100% = 92,23%
0,991
Data absorbansi menit ke-15 pengukuran ketiga

1 0 0.991 0
2 2 0,757 23,61
3 4 0,559 43,59
4 6 0,301 69,63
5 8 0,077 92,23

kontrol
Keterangan:

0,991-
0,257
% peredaman = × 100% = 23,61%
0,991
-Konsentrasi 4 µg/ml
0,991-
0,559
% peredaman = × 100% = 43,59%
0,991
0,991-
0,301
% peredaman= × 100% = 69,63%
0,991
0,991-0,077
% peredaman = × 100% = 92,23%
0,991
Data nilai rata-rata % peredaman kuersetin
Absorbansi % Peredaman Rata-Rata

Konsentrasi
(µg/ml)
I II III I II III
0 0,991 0,991 0,991 0 0 0 0
2 0,756 0,757 0,757 23,71 23,61 23,61 23,64
4 0,559 0,559 0,559 43,59 43,59 43,59 43,59

6 0,301 0,301 0,301 69,63 69,63 69,63 69,63
8 0,077 0,077 0,077 92,23 92,23 92,23 92,23
Lampiran 6. Perhitungan Nilai IC50

1. Perhitungan IC50 rata-rata ekstrak etanol daun biwa
No X Y XY X2
1 0 0 0 0
2 20 14,22 284,4 400
3 40 35,75 1429,2 1600
4 60 54,18 3262,8 3600
5 80 70,73 5650,4 6400
∑ X=200 ∑Y =174,88 XY=10626,8 X2=12000

Mean X =40 34,97
Keterangan: X = Konsentrasi (μg/mL)

Y = % Peredaman
a= ( XY)2- ( X)(2Y) / n
( X )  ( X) / n
a= (10626,8 )  (200)(174,88) / 5 3631,6

  0,9079
(12000)  (200) / 5
2
4000
b = Y  aX
34,97 – (0,9079)(40)
b= -1,346
Jadi, persamaan garis regresi Y = 0,9079X -1,346
Nilai IC50 = Y = 0,9079X -1,346
50 = 0,9079X –1,346
X = 56,55µg/ml
IC50 rata-rata ekstrak etanol daun biwa = 56,55 µg/ml

2. Perhitungan rata-rata IC50 Kuersetin
No X Y XY X2
1 0 0 0 0
2 2 23,64 47,28 4
3 4 43,59 174,36 16
4 6 69,63 417,78 36
5 8 92,23 737,84 64
∑ X=20 Y =229.09 XY=1377,26 X2=120

Mean 4 45,818
Keterangan: X = Konsentrasi (μg/mL)

Y = % Peredaman
a= ( XY)2- ( X)(2Y) / n
( X )  ( X) / n
a= (1377,26)  (20)(229,09) / 5 460,9

  11,5225
(120)  (20) / 5
2
40
b = Y  aX
45,818 – (11,5225)(4)
b= -0,272
Jadi, persamaan garis regresi Y 11,5225X -0,272
Nilai IC50 = Y 11,5225X -0,272
50 = 11,5225X –0,272
X = 4,36µg/ml
IC50 rata-rata kuersetin = 4,36 µg/ml

Lampiran 7. Kurva analisis konsentrasi versus persen peredaman
a. Kurva analisis konsentrasi versus persen peredaman dari ekstrak etanol daun
biwa
80
70 y = 0,9079x - 1,346
60 R² = 0,996
50
40 Series1
30 Linear (Series1)
20
10
0
-10 0 50 100
b Kurva analisis konsentrasi versus persen peredaman dari kuersetin
80
y = 11,5225x - 0,272
60
R² = 0,998
40 Series1
20 linier kuarsetin
0
0 2 4 6 8 10
-20

Lampiran 9. Gambar alat spektrofotometer UV-Visibel (UV- Shimadzu)

Ekstrak Etanol Daun Biwa

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Ekstrak Etanol Daun Biwa

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN BIWA

(Eriobotrya japonica(Thunb.) Lindl.) DENGAN METODE

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

Universitas Sumatera Utara

UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN BIWA

Dipertahankan di Hadapan Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

Marianne, S.Si., M.Si., Apt. Prof. Dr.Rosidah, M.Si., Apt.

Marianne, S.Si., M.Si., Apt.

Dr.Sumaiyah,S.Si.,M.Si.,Apt. Dr. Poppy Anjelisa Z. Hasibuan M.Si., Apt.

Medan, 06 Desember 2019

Prof. Dr. Masfria, M.S., Apt.

Universitas Sumatera Utara

Aktivitas Antioksidan EkstrakEtanol DaunBiwa (Eriobotrya Japonica (Thunb.) Lindl)

dengan Metode DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl)

Farmasi Universitas Sumatera Utara.

selama masa perkuliahan hingga selesai.

S.Pd serta adik tersayang Nuramalia juga seluruh sanak

Universitas Sumatera Utara

khususnya di bidang farmasi.

Universitas Sumatera Utara

Saya yang bertanda tangan di bawah ini:

manapun atas perbuatan saya tersebut.

Medan, Desember 2019

Universitas Sumatera Utara

Kata kunci: antioksidan, DPPH, daun biwa, eriobotryajaponica.

Universitas Sumatera Utara

Key words: antioxidant, DPPH, biwa leaf, eriobotrya japonica.

Universitas Sumatera Utara

Universitas Sumatera Utara

Universitas Sumatera Utara

2.1 Gambar Struktur kimia Flavanoid ................................................................. 9

Universitas Sumatera Utara

4.1 Hasil karakteristik simplisiadaun biwa ......................................................... 32

Universitas Sumatera Utara

1 Surat hasil identifkasi tumbuhan ....................................................................... 41

Universitas Sumatera Utara

1.1 Latar Belakang

Eropa (Bangun et al., 2004)

Tanaman biwa memiliki banyak manfaatnya diantaranya adalah:daging buah

Universitas Sumatera Utara

kehilangan pasangan elektron (Winarsi, 2010).

dengan rajin mengkonsumsi antioksidan (Momuat et al., 2011).

mampu menghambat terjadinya penyakit degenerasi serta mampu menghambat peroksidase

lipid pada makanan (Kumalaningsih, 2006).

bahwa antioksidan sintetik seperti BHT (butylhydroxytoluena) ternyata dapat meracuni

Universitas Sumatera Utara

picrylhydrazil (DPPH) scavenging method atau metode pemerangkapan radikal (DPPH),

radical– trapping antioxidant parameter (TRAP) assay, photochemiluminescence (PCL),

DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl), (N,N-dimethyl-phenylendiamine), (DMPD) assay

(Prakash, dkk., 2001).

1.2 Perumusan Masalah

memiliki aktivitas sebagai antioksidan untuk meredam radikal bebas.

etanol daun biwa (Eriobotrya japonica) memiliki aktivitas sebagai antioksidan.

1.4 Tujuan Penelitian

Tujuan dilakukannya penelitian ini antara lain untuk :

dapat ditentukan dengan metode 1,1 –diphenyl-2picrylhidrazyl (DPPH) dan ditandai

1.5 Manfaat Penelitian

antioksidan ekstrak etanol daun biwa (Eriobotrya japonica).

Universitas Sumatera Utara

2.1 Klasifikasi Tumbuhan

Biwa (Eriobotrya Japonica (Thunb) Lindl.) merupakan tanaman yang termasuk