Proses Pewarnaan dan Penutupan

Proses pewarnaan didasarkan pada penggunaan pewarna rutin hematoksilin-eosin (HE),

baik untuk sayatan parafin, sayatan beku, maupun untuk sayatan celloidin.

Sayatan parafin
Sayatan ini dihidrasi terlebih dahulu secara bertahap sebelum diwarnai dimana Hidrasi
hanya bisa dilakukan jika parafin yang masih terdapat dalam jaringan dilarutkan terlebih dahulu
dalam xilol. Prosedur pewarnaa dengan hematoksilin adalah sebagai berikut :
Xilil I → Xilol II → Xilol-alkohol absolut (1:1) → Alkohol absolut → 95% → 80% → 70% →
50% → Akuades → Hemaktoksilin → Air ledeng mengalir (dua kali ganti) → Akuades (2 kali
ganti) → Eosin → Alkohol 70% → Alkohol 80% → Alkohol 96% → Xilol I → Menutup.
Semua larutan dalam coplin jar harus ditutup untuk menghindari penguapan dan setiap jar dilabel
secara memadai untuk menghindari kekeliruan.
Masukkan 5 slide ke dalam jar berisi xilol I kemudian biarkan selama 5 menit dan pindahkan ke
xilol II dengan 3 bibir untuk membersihkan sayatan dari parafin. Ganti xilol dengan xa,puran
xilol-alkohol, dan kemudia turun ke alcohol sampai akuades.
Cara pewarnaan ini dilakukan agar dapat mencegah terjadinya kekeliruan. Pewarnaan ini juga
dapat dilakukan dengan coplin jar walaupun tidak semudah dengan menggunakan cawan persegi
yang dilengkapi dengan rak slide.
Diusahakan slide tidak disusun saling memunggungi kemudian Reagen ini akan terbawa masuk
ke reagen kedua. Jika ini terjadi pada dehidrasi maka air akan terbawa masuk ke dalam alcohol
absolut dan jika masuk ke xilol, molekul air akan terbawa ke xilol.

Sayatan celloidin
Setelah penyayatan, sayatan dimasukkan dan ditahan ke dalam alcohol 80% kemudian dipindahkan ke
alcohol 70% dan terakhir dalam Akuades. Pewarnaan juga dapat menggunakan section lifter yang
terbenam dalam alcohol. Dengan cara yang sama pindahkan sayatan kedalam akuades, hemtoksilin, air
ledeng, lalu ke akuades, eosin, alcohol 70,80, dan 95% kemudian jernihkan hingga kering dan ditutup.
Bahan penutup dapat dilakukan dengan cara yang sama dengan Canada Balsam tetapi bahan sintetik ini
harus digunakan lebih tipis dari Canada Balsam.