Laporan Hibah KTI - Silvi Rahmawati 17711162

PENGARUH EKSTRAK ETANOL KULIT NANAS (Ananas
comosus (L.) Merr.) TERHADAP MORTALITAS PUPA

NYAMUK Aedes aegypti
Hibah Penelitian Karya Tulis Ilmiah
Program Studi Kedokteran

Program Sarjana
oleh:
Silvi Rahmawati
17711162
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS ISLAM INDONESIA
YOGYAKARTA
2021
PENGESAHAN LAPORAN HASIL
1. Judul Kegiatan : Pengaruh Ekstrak Etanol Kulit Nanas
(Ananas comosus (L.) Merr.) terhadap
Mortalitas Pupa Nyamuk Aedes aegypti
2. Bidang Kegiatan : Penelitian
3. Pelaksana Kegiatan
a. Nama Lengkap : Silvi Rahmawati
b. NIM : 17711162
c. Jurusan : Pendidikan Dokter
d. Universitas : Universitas Islam Indonesia
e. Alamat Rumah dan : Jalan Otista Raya No. 60, Jakarta Timur
Nomor Telepon/HP (0895345336886)
f. Email : 17711162@students.uii.ac.id
4. Anggota Pelaksana :-
5. Dosen Pendamping
a. Nama Lengkap dan Gelar : dr. Fitria Siwi Nur Rochmah, M.Sc
b. NIK : 097110418
6. Biaya Kegiatan total : Rp. 5.089.000,-
a. Hibah Fakultas Kedokteran : Rp. 5.089.000,-
b. Sumber lain : Rp.0,-
7. Jangka Waktu Pelaksanaan : 3 bulan
Mengetahui,
Ketua Program Studi Kedokteran Peneliti
Program Sarjana
dr. Umatul Khoiriyah, M.Med.Ed., PhD Silvi Rahmawati

NIK. 047110101 NIM. 17711162
Menyetujui,
Dekan
dr. Linda Rosita, M.Kes, Sp.PK(K)

NIK. 017110102
ii
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ........................................................................................ i

PENGESAHAN LAPORAN HASIL .................................................................. ii
DAFTAR ISI .................................................................................................... iii
DAFTAR TABEL ............................................................................................. v
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ vi
INTISARI ........................................................................................................ vii
ABSTRACT ................................................................................................... viii
BAB I PENDAHULUAN .................................................................................. 1
1.1 Latar Belakang ..................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ................................................................................ 2
1.3 Tujuan Penulisan .................................................................................. 3
1.4 Keaslian Penelitian ................................................................................ 3
1.5 Manfaat Penelitian ................................................................................. 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA.......................................................................... 5
2.1 Telaah Pustaka ..................................................................................... 5
2.1.1 Aedes aegypti ..................................................................................... 5
2.1.2 Upaya Pencegahan dan Pengendalian Aedes aegypti ........................ 12
2.1.3 Ekstrak Etanol Kulit Nanas (Ananas comosus (L.) Merr.) ................... 15
2.1.4 Metode Ekstraksi ................................................................................. 18
2.2 Kerangka Teori ..................................................................................... 20
2.3 Kerangka Konsep .................................................................................. 21
2.4 Hipotesis ............................................................................................... 21
BAB III METODE PENELITIAN ...................................................................... 22
3.1 Jenis dan Desain Penelitian................................................................... 22
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian ................................................................ 22
3.3 Subyek Penelitian .................................................................................. 22
3.4 Variabel Penelitian ................................................................................. 23
3.4.1 Variabel Bebas .................................................................................... 23
3.4.2 Variabel Terikat ................................................................................... 23
3.4.3 Variabel Pengganggu .......................................................................... 23
3.5 Definisi Operasional............................................................................... 23
3.6 Bahan dan Alat Penelitian...................................................................... 24
3.7 Tahapan Penelitian ................................................................................ 25
3.7.1 Uji Determinasi Tumbuhan .................................................................. 25
3.7.2 Penyediaan Ekstrak Etanol Kulit Nanas .............................................. 25
3.7.3 Rearing Pupa Aedes aegypti ............................................................... 25
3.7.4 Uji Kelarutan........................................................................................ 25
3.7.5 Uji Pupasida Pendahuluan .................................................................. 26
3.7.6 Uji Pupasida Utama ............................................................................. 26
3.7 Alur Penelitian ....................................................................................... 28
3.8 Analisis Data.......................................................................................... 28
3.9 Etika Penelitian ...................................................................................... 29
BAB IV BIAYA DAN JADWAL PENELITIAN ................................................... 30
4.1 Anggaran Biaya ........................................................................................ 30
4.2 Jadwal Penelitian ...................................................................................... 30
BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................ 31
5.1 Uji Determinasi Tumbuhan ........................................................................ 31
5.2 Uji Kelarutan ............................................................................................. 31
iii
5.3 Uji Pupasida Pendahuluan ........................................................................ 32
5.4 Uji Pupasida Utama .................................................................................. 32
5.5 Pemabahasan ........................................................................................... 35
BAB VI SIMPULAN DAN SARAN ................................................................... 40
6.1 Kesimpulan ............................................................................................... 40
6.2 Saran ........................................................................................................ 40
DAFTAR PUSTAKA........................................................................................ 41
LAMPIRAN ..................................................................................................... 45
Lampiran 1. Hasil Uji Normalitas dan Uji Kruskall Wallis ................................. 45
Lampiran 2. Hasil Uji Post Hoc ....................................................................... 46
Lampiran 3. Hasil Analisis Probit .................................................................... 61
Lampiran 4. Ethical Clearance ........................................................................ 63
Lampiran 5. Hasil Uji Determinasi Tumbuhan ................................................. 64
Lampiran 6. Catatan Pengeluaran .................................................................. 65
Lampiran 7. Bukti Pengeluaran ....................................................................... 66
iv
DAFTAR TABEL
Tabel 1 Keaslian Penelitian 3

Tabel 2 Ringkasan Anggaran Penelitian 30
Tabel 3 Jadwal Penelitian 30
Tabel 4 Hasil Uji Pupasida Pendahuluan Ekstrak Etanol Kulit Nanas
terhadap Mortalitas Pupa Nyamuk Aedes aegypti 32
Tabel 5 Hasil Uji Pupasida Utama Ekstrak Etanol Kulit Nanas
terhadap Mortalitas Pupa Nyamuk Aedes aegypti 32
Tabel 6 Hasil Uji Pengukuran Suhu dan Kelembaban di Insektarium
Laboratorium Parasitologi FK UII 33
Tabel 7 Perbedaan Tingkat Mortalitas Ekstrak Etanol Kulit Nanas terhadap
Pupa Nyamuk Aedes aegypti 34
v
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1 Siklus Hidup Nyamuk Aedes aegypti 5

Gambar 2 Telur Nyamuk Aedes aegypti. 6
Gambar 3 Larva Nyamuk Aedes aegypti . 8
Gambar 4 Pupa Nyamuk Aedes aegypti 8
Gambar 5 Nyamuk Dewasa Aedes aegypti 9
Gambar 6 Segmen Abdominal Bagian Terminal dari Larva Aedes 10
Gambar 7 Sisi Lateral Tubuh Pupa 11
Gambar 8 Abdomen dan kaki Aedes dewasa. 12
Gambar 9 Struktur Morfologi Utama Tanaman Nanas 16
Gambar 10 Kerangka Teori 20
Gambar 11 Kerangka Konsep 21
Gambar 12 Alur Penelitian 28
Gambar 13 Hasil Uji Kelarutan 31
Gambar 14 Variasi Konsentrasi 0,25%; 0,275%; 0,30%; 0,325%; 0,35%
pada Pengulangan Kedua 33
vi
PENGARUH EKSTRAK ETANOL KULIT NANAS (Ananas comosus (L.) Merr.)
TERHADAP MORTALITAS PUPA NYAMUK Aedes aegypti
Silvi Rahmawati1, Fitria Siwi Nur Rochmah2

1
Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas Islam Indonesia
2
Departemen Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Islam Indonesia
INTISARI
Latar Belakang: Angka kejadian Demam Berdarah Dengue (DBD) masih terhitung
tinggi di Indonesia. Beberapa metode dapat digunakan untuk mencegah dan
mengurangi transmisi virus dengue. Salah satu metode yaitu menggunakan
insektisida alami yang dihasilkan oleh tanaman. Ekstrak nanas memiliki beberapa
kandungan senyawa dan enzim yang terbukti dapat berperan sebagai insektisida
alami.
Tujuan Penelitian: Mengetahui pengaruh ekstrak etanol kulit nanas (Ananas
comosus (L.) Merr.) terhadap mortalitas pupa nyamuk Aedes aegypti serta
mengetahui nilai LC50 dan LC90 ekstrak etanol kulit nanas (Ananas comosus (L.)
Merr.) terhadap pupa nyamuk Aedes aegypti.
Metode Penelitian: Penelitian ini dilakukan dengan membagi subjek penelitian
menjadi kelompok perlakuan dengan variasi konsentrasi 0,25%; 0,275%; 0,30%;
0,325%; 0,35% dan kelompok kontrol dengan menggunakan akuades. Setiap
kelompok terdiri atas 25 pupa Aedes aegypti. Penelitian diamati setiap 24 jam
paska perlakuan selama 3 hari.
Hasil: Persentase efek pupasida pada konsentrasi 0,25%; 0,275%; 0,30%;
0,325%; 0,35% secara berurutan adalah 23%, 54%, 82%, 89% dan 99%. Nilai LC50
adalah 0,272% dan nilai LC90 adalah 0,318%.
Kesimpulan: Penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit nanas
(Ananas comosus L. Merr.) memiliki pengaruh terhadap mortalitas pupa nyamuk
Aedes aegypti.
Kata kunci: Aedes aegypti, Ananas comosus, mortalitas pupa, kulit nanas
vii
THE EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF PINEAPPLE PEEL (Ananas
comosus (L.) Merr.) ON PUPAE MORTALITY OF Aedes aegypti
Silvi Rahmawati1, Fitria Siwi Nur Rochmah2
1
Student of the Faculty of Medicine Universitas Islam Indonesia
2
Parasitology Department Faculty of Medicine Universitas Islam Indonesia
ABSTRACT
Background: The incidence of Dengue Hemorrhagic Fever (DHF) is still relatively

high in Indonesia. Several methods can be used to prevent and reduce dengue
virus transmission. One method is to use natural insecticides produced by plants.
Pineapple extract contains several compounds and enzymes that are proven to act
as natural insecticides.
Objectives: To determine the effect of pineapple peel ethanol extract (Ananas
comosus (L.) Merr.) on pupa mortality of Aedes aegypti mosquitoes and to
determine the LC50 and LC90 values of pineapple peel ethanol extract (Ananas
comosus (L.) Merr.) On Aedes aegypti mosquito pupa .
Methods: This study was conducted by dividing the research subjects into
treatment groups with various concentrations of 0.25%; 0.275%; 0.30%; 0.325%;
0.35%, and the control group using distilled water. Each group consists of 25
Aedes aegypti pupae. The study was observed every 24 hours after treatment for
3 days.
Results: The percentage of pupacid effect at concentrations of 0.25%; 0.275%;
0.30%; 0.325%; 0.35% were 23%, 54%, 82%, 89% and 99%, respectively. The
LC50 value is 0.272% and the LC90 value is 0.318%.
Conclusion: This study shows that the ethanol extract of pineapple peel (Ananas
comosus L. Merr.) Affects the pupa mortality of Aedes aegypti mosquitoes.
Keywords: Aedes aegypti, Ananas comosus, pupa mortality, pineapple peel
viii
BAB I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang

Demam Berdarah Dengue (DBD) adalah penyakit infeksi yang disebabkan
oleh virus dengue. Menurut Centers for Disease Control and Prevention (CDC)
(2019), penyakit ini terjadi pada lebih dari 100 negara di dunia. Empat puluh persen
populasi di dunia (sekitar tiga miliar orang) tinggal di daerah endemis demam
berdarah. Virus dengue ditularkan oleh nyamuk Aedes sp., terutama Aedes
aegypti sebagai vektor utama penyakit DBD. Menurut Kementrian Kesehatan RI
(2017), jumlah kasus DBD yang terjadi di Indonesia sebanyak 68.407 dengan
angka kematian 493 orang. Menurut Brahim (2011) dalam Sayono dan Nurullita
(2016), lebih dari 80,4% kabupaten/kota telah dinyatakan sebagai daerah endemis
DBD.
Terdapat beberapa metode yang dapat digunakan untuk mencegah atau
mengurangi transmisi virus dengue dengan cara mengendalikan vektor penyakit
DBD. Metode tersebut diantaranya yaitu pengelolaan lingkungan, kontrol kimiawi,
kontrol biologi dan pemanfaatan alat-alat tertentu. Pengendalian kimiawi
menggunakan pembunuh serangga sintetik telah terbukti dapat mengakibatkan
keracunan pada manusia, polusi lingkungan bahkan resistensi serangga target,
sehingga diperlukan pembunuh serangga yang lebih aman. Hal ini dapat dicapai
dengan menggunakan pembunuh serangga botanis yang dihasilkan oleh tanaman
(World Health Organization, 2009; Cania dan Setyanimgrum, 2013).
Nanas tumbuh secara luas di daerah tropis dan memiliki berbagai efek
terapeutik yang bermanfaat bagi kesehatan, seperti aktivitas anti-inflamasi dan
anti-helmintik. Nanas memiliki beberapa efek lain, yaitu memperlambat
pembekuan darah, meningkatkan absorpsi obat, mempercepat penyembuhan
luka, memperlancar pencernaan dan melawan tumor (Domingues et al., 2013).
Ekstrak nanas memiliki beberapa kandungan senyawa yang terbukti dapat
berperan sebagai insektisida alami. Penelitian yang dilakukan oleh Domingues et
al. (2013) menunjukkan bahwa enzim bromelin dapat menyebabkan kerusakan
pada Rhipicephalus microplus dengan cara melakukan penetrasi pada bagian
kutikula.
1
2
Pemeriksaan analisis fitokimia yang dilakukan oleh Yeragamreddy et al.

(2013) menunjukkan bahwa bagian kulit nanas juga mengandung senyawa
saponin, tannin, alkaloid dan flavanoid. Menurut Feeny (1970), tannin dapat
bertindak melindungi tanaman dari serangan berbagai organisme. Tannin dapat
berperan sebagai astringen, penghambat pertumbuhan yang mempengaruhi
ketersediaan protein dan berperan sebagai agen toksik secara langsung. Menurut
Karimah (2006), flavonoid mampu menghambat pertumbuhan larva dengan cara
menganggu kerja hormon otak, hormon edikson dan hormon pertumbuhan.
Menurut Ge et al. (2015), alkaloid menyebabkan perkembangan Spodoptera
litura terhambat. Hal ini ditunjukkan melalui penurunan hormon molting saat fase
larva dan pupa seiring dengan peningkatan konsentrasi total alkaloid. Menurut
Chaieb (2010), saponin bekerja sebagai toksin serangga dengan cara berinteraksi
dengan struktur kolesterol pada membran atau melalui metabolisme kolesterol
pada tanaman.
Penelitian menggunakan Ananas comosus sebelumnya juga telah dilakukan.
Penelitian tersebut dilakukan terhadap mortalitas larva nyamuk Aedes aegypti
dengan menggunakan perasan buah nanas (Ananas comosus). Hasil penelitian
menunjukkan bahwa bagian kulit nanas mempunyai kemampuan membunuh larva
nyamuk Aedes aegypti sama baiknya dengan bagian daging dan lebih baik jika
dibandingkan dengan bagian bonggol/batang. Semakin tinggi konsentrasi perasan
buah nanas, maka semakin tinggi tingkat mortalitas larva nyamuk Aedes aegypti
(Tominik dan Haiti, 2018).
Senyawa yang terdapat dalam nanas telah terbukti dapat membunuh
berbagai spesies nyamuk dalam berbagai fase. Menurut Nelson (1986), pupa
merupakan fase dalam siklus hidup nyamuk yang tidak melakukan proses makan.
Saat ini belum dilakukan penelitian yang membuktikan pengaruh kulit nanas dalam
membasmi pupa nyamuk Aedes aegypti. Maka berdasarkan bukti-bukti tersebut,
peneliti ingin mengetahui pengaruh ekstrak etanol kulit nanas (Ananas comosus
(L.) Merr.) terhadap mortalitas pupa nyamuk Aedes aegypti.
1.2. Rumusan Masalah

Berdasarkan pemaparan latar belakang di atas, maka penulis mengajukan
rumusan masalah tentang:
3
a. Apakah pemberian ekstrak etanol kulit nanas (Ananas comosus (L.) Merr.)
memiliki pengaruh terhadap mortalitas pupa nyamuk Aedes aegypti?
b. Berapa LC50 (Lethal Concentration) dan LC90 ekstrak etanol kulit nanas
(Ananas comosus (L.) Merr.) yang menyebabkan mortalitas pada pupa
nyamuk Aedes aegypti?
1.3. Tujuan Penelitian

Tujuan dari dilaksanakannya penelitian ini adalah:
a. Mengetahui pengaruh ekstrak etanol kulit nanas (Ananas comosus (L.)
Merr.) terhadap mortalitas pupa nyamuk Aedes aegypti.
b. Mengetahui nilai LC50 dan LC90 ekstrak etanol kulit nanas (Ananas comosus
(L.) Merr.) yang menyebabkan mortalitas pada pupa nyamuk Aedes aegypti.
1.4. Keaslian Penelitian

Tabel 1. Keaslian Penelitian
No. Judul/tahun Peneliti Hasil penelitian
1 Uji Efektivitas Ekstrak SulistyonoEkstrak buah nanas (Ananas
Etanolik Buah Nanas , Sukiyacomosus (L) Merr) dapat
(Ananas comosus (L) dan menyebabkan kematian larva
Merr) terhadap Aminatun Anopheles aconitus. Konsentrasi
Mortalitas Larva ekstrak buah nanas yang efektif
Anopheles aconitus terhadap mortalitas larva
(2018) Anopheles aconitus adalah
0,074% dengan jumlah kematian
larva sebanyak 50%.
2 Analisis Kematian Larva Tominik Kulit nanas mempunyai
Nyamuk Aedes aegypti dan Haiti kemampuan membunuh larva
Akibat Pemberian nyamuk Aedes aegypti sama
Perasan Buah Nanas baiknya dengan bagian daging
(Ananas comosus) dan lebih baik jika dibandingkan
(2018) dengan bagian bonggol/batang.
3 Mosquito Larvicidal and Venkadac Tephrosia purpurea dan Bacillus
Pupicidal Activity of halam et sphaericus memiliki efek
Tephrosia purpurea al. terhadap kematian larva dan
Linn. (Family: pupa Aedes aegypti. Keduanya
Fabaceae) and Bacillus adalah agen biologis penting
sphaericus against, yang dapat digunakan untuk
Dengue Vector, Aedes mengendalikan kejadian DBD.
aegypti (2017)
4
1.5. Manfaat Penelitian

a. Manfaat bagi Peneliti
Menambah wawasan peneliti mengenai nyamuk Aedes aegypti dan manfaat
nanas serta meningkatkan kemampuan peneliti dalam mengolah karya tulis ilmiah.
b. Manfaat bagi Ilmu Pengetahuan

Memberikan sumbangsih pengetahuan dan wawasan terkait dengan nyamuk
Aedes aegypti dan manfaat nanas.
c. Manfaat bagi Institusi

Penelitian ini diharapkan dapat dijadikan bahan pembelajaran, pedoman dan
referensi bagi kalangan yang akan melakukan penelitian lebih lanjut dengan topik
yang berhubungan dengan judul penelitian ‘Pengaruh Ekstrak Etanol Kulit Nanas
(Ananas comosus (L.) Merr.) terhadap Mortalitas Pupa Nyamuk Aedes aegypti’.
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Telaah Pustaka

2.1.1. Aedes aegypti
a. Taksonomi
Menurut Interagency Taxonomic Information System (2020), taksonomi
Aedes aegypti adalah sebagai berikut:
 Kingdom : Animalia
 Filum : Arthropoda
 Kelas : Insekta
 Ordo : Diptera
 Famili : Culicidae
 Genus : Aedes
 Spesies : Aedes aegypti
b. Siklus Hidup
Nyamuk Aedes sp. memiliki 4 fase hidup, yaitu telur, larva, pupa dan
dewasa. Nyamuk dapat hidup dan melakukan reproduksi di dalam dan di luar
rumah. Seluruh siklus hidup sebagaimana ditunjukkan pada Gambar 1, mulai
dari telur hingga dewasa, membutuhkan waktu sekitar 8-10 hari (CDC, 2019)
Gambar 1. Siklus Hidup Nyamuk Aedes aegypti (Marlik, 2017)
5
6
a) Telur
Nyamuk dewasa betina hanya membutuhkan sedikit air untuk dapat
menariknya datang dan meletakkan telur mereka di bagian dalam tempat
penampungan air, tepatnya di atas permukaan air. Nyamuk dewasa betina
biasanya mengeluarkan 100 telur sekaligus. Telur berwarna putih ketika
diletakkan, namun dengan sangat cepat berubah menjadi warna hitam
berkilau sebagaimana ditunjukkan pada Gambar 2. Perkembangan embrionik
biasanya sempurna dalam waktu 48 jam jika lingkungan lembab dan hangat,
namun membutuhkan 5 hari jika berada di temperatur yang rendah (Nelson,
1986; CDC, 2019).
Telur dapat bertahan ditempat kering dalam jangka waktu yang lama
setelah perkembangan embrionik sempurna, terkadang sampai lebih dari
setahun. Telur tersebut menempel pada dinding tempat penampungan air
seperti lem dan dapat bertahan hingga 8 bulan. Contoh tempat penampungan
air yang dijadikan untuk tempat berkembang biak adalah mangkuk, gelas, air
mancur, vas bunga, tong, dan wadah lain yang memiliki air didalamnya
(Nelson, 1986; CDC, 2019).
Menurut Service (2012), ketika banjir terdapat beberapa telur yang
menetas dalam beberapa menit, sementara yang lain mungkin butuh berada
di dalam air lebih lama sebelum menetas. Telur mungkin dalam keadaan
diapause dan tidak akan menetas sampai periode istirahat ini berakhir
meskipun kondisi lingkungan mendukung. Beberapa stimulus (seperti
pengurangan kadar oksigen di dalam air, perubahan suhu, dsb) mungkin
diperlukan untuk memecahkan keadaan diapause telur Aedes.
Gambar 2. Telur Nyamuk Aedes aegypti (CDC, 2019)

7
b) Larva
Larva berasal dari telur nyamuk, namun larva hanya muncul setelah
jumlah air meningkat untuk menutupi telur. Hal ini menunjukkan bahwa air
hujan atau tambahan air ke tempat bertelur akan memicu larva untuk muncul.
Tahapan larva adalah suatu periode makan dan tumbuh dimana larva
menghabiskan kebanyakan waktunya menggunakan fan-like mouth brushes
untuk memakan objek yang tenggelam dan material organik yang dapat
ditemukan di dalam tempat penampungan air (Nelson, 1986; CDC, 2019).
Terdapat empat tahapan larva dan satu tahapan pupa yang keduanya
bersifat aquatic. Instar I akan muncul dari telur. Terjadi pelepasan kutikula
(moulting) dan muncul instar II setelah sehari atau dua hari makan dan
tumbuh. Segera setelah terjadi moulting, kapsul kepala dan sifon akan lembut
dan transparan, namun setelah berkembang dan mengalami pertumbuhan
lebih lanjut, kapsul kepala dan sifon akan menjadi keras dan gelap. Setelah
tahap kedua, kapsul kepala dan sifon tidak akan berubah ukuran, namun
bagian toraks dan abdomen akan tumbuh selama tahapan selanjutnya.
Gambar larva nyamuk Aedes aegypti ditunjukkan pada Gambar 3 (Nelson,
1986; Bar dan Andrew, 2013).
Beberapa faktor lingkungan seperti suhu, salinitas, pH, dan nutrisi dapat
memengaruhi pertumbuhan larva nyamuk. Suhu yang ekstrim, kekurangan
makanan dan peningkatan salinitas menyebabkan pertumbuhan larva
berkurang dan perkembangan larva tertunda. Waktu untuk menjadi pupa
dapat sesingkat 5 hari bila berada di bawah kondisi yang optimal, namun lebih
sering berlangsung 7 sampai 14 hari. Tiga instar pertama berkembang sangat
cepat, sedangkan instar keempat membutuhkan waktu lebih lama. Instar
keempat akan berkembang dalam waktu beberapa minggu sebelum fase
pupa terjadi bila berada di bawah suhu rendah atau kekurangan
makanan,(Nelson, 1986; Bar dan Andrew, 2013).
Angka mortalitas tertinggi di antara bentuk larva imatur biasanya terjadi
saat instar pertama dan instar kedua bila berada di lingkungan yang stabil.
Namun, kebanyakan hal tersebut terjadi karena habitat larva tidak stabil,
seperti tempat penampungan air yang berukuran kecil (seperti botol, kalen,
ban) dan ditemukan di luar rumah. Tempat untuk berkembangbiak rentan
8
kering terkena matahari, banjir, atau meluap karena hujan. Gangguan-

gangguan tersebut berperan dalam kematian larva dan pupa (Nelson, 1986).
Gambar 3. Larva Nyamuk Aedes aegypti (CDC, 2019)

c) Pupa
Larva akan berubah menjadi pupa yang berbentuk bulat gemuk dan
menyerupai tanda koma sebagaimana ditunjukkan pada Gambar 4. Pupa
nyamuk langsung bereaksi ketika mendapat stimulus eksternal seperti
getaran. Pupa secara aktif berenang disekitar tempat penampungan air dan
tidak makan (Nelson, 1986; Yulidar dan Wilya, 2015).
Pupa akan mengapung di permukaan air karena kemampuan
mengapungnya ketika dalam keadaan tidak aktif, suatu sifat yang
memfasilitasi munculnya nyamuk dewasa. Fase pupa biasanya berlangsung
dua atau tiga hari. Suhu untuk perkembangan pupa yang optimal yaitu sekitar
27-300C. Pupa akan berkembang sampai muncul nyamuk dewasa yang dapat
terbang dari kulit pupa dan pergi meninggalkan air (Nelson, 1986; Yulidar dan
Wilya, 2015).
Gambar 4. Pupa Nyamuk Aedes aegypti (CDC, 2019)

9
d) Dewasa
Nyamuk jantan akan memakan nektar dari bunga dan nyamuk betina
akan memakan darah dari manusia dan hewan untuk memproduksi telur.
Nyamuk betina akan mencari sumber air untuk meletakkan telurnya setelah
makan. Aedes aegypti lebih memilih untuk menggigit manusia. Nyamuk
dewasa betina memerlukan 2-3 kali hinggap dan mengisap darah untuk
merasa kenyang (multiple biters). Aedes aegypti lebih memilih tinggal di dekat
manusia. Bentuk nyamuk dewasa Aedes aegypti ditunjukkan pada Gambar 5
(Agoes dan Natadisastra, 2005; CDC, 2019).
Nyamuk Aedes dewasa memiliki posisi istirahat lebih horizontal atau
parallel terhadap permukaan. Nyamuk Aedes dewasa dapat ditemukan di
dalam rumah dan bangunan dimana jendela dan pintu tidak digunakan atau
dibiarkan terbuka. Nyamuk Aedes dewasa akan beristirahat di dinding tempat
penampungan air untuk beberapa jam setelah melalui fase pupa agar bagian
sayap dan eksoskeleton mengeras. Nyamuk betina dan nyamuk jantan bisa
melakukan perkawinan dan nyamuk betina sudah bisa memakan darah dalam
24 jam setelah menjadi nyamuk dewasa (Nelson, 1986; CDC, 2019).
Nyamuk dewasa mencari tempat yang gelap dan tenang untuk
beristirahat ketika sedang tidak melakukan perkawinan, mencari inang, atau
bermigrasi,. Nyamuk dewasa betina Aedes aegypti dapat hidup selama 2
bulan di laboratorium, namun biasanya hanya mampu hidup selama 10 hari
ketika berada di alam bebas. Kematian harian nyamuk Aedes aegypti adalah
10%, sehingga 50% dari total nyamuk dewasa akan mati saat minggu pertama
dan 95% akan mati saat bulan pertama (Nelson, 1986; Agoes dan
Natadisastra, 2005).
Gambar 5. Nyamuk Dewasa Aedes aegypti (CDC, 2019)

10
c. Morfologi
a) Telur dan Larva
Telur Aedes aegypti biasanya berwarna hitam, bentuknya kurang lebih
seperti telur (ovoid atau egg-shaped), dan selalu diletakkan sendiri-sendiri.
Pada cangkang telur, tampak pola mosaik yang khas, bergaris-garis dan
membentuk bangunan menyerupai gambaran kain kasa. Larva Aedes
biasanya memiliki sifon pendek berbentuk seperti tong (barrel-shaped) yang
ditunjukkan pada Gambar 6, satu pasang jumbai rambut di bagian subventral,
setidaknya terdapat minimal tiga pasang setae di bagian ventral dan pecten
yang tumbuh tidak sempurna. Terdapat pelana terbuka dan gigi sisir berduri
di bagian lateral (Agoes dan Natadisastra, 2005; Service, 2012; Soedarto,
2016).
Larva Aedes aegypti akan tampak transparan setelah menetas. Larva
akan tumbuh dan tampak gelap sebelum terjadi moulting. Setiap instar larva
akan tampak transparan segera setelah terjadi moulting dan kutikula larva
akan tampak gelap sebelum terjadi proses moulting yang selanjutnya. Ukuran
larva meningkat seiring dengan pertumbuhan dan terjadinya proses moulting
(Bar dan Andrew, 2013).
Gambar 6. Segmen Abdominal Bagian Terminal dari Larva Aedes,

menunjukkan sifon pendek dengan jumbai rambut subventral tunggal
(Service, 2012)
11
b) Pupa
Pada bagian dasar toraks pupa, terdapat sepasang tabung pernapasan
(breathing tubes) atau terompet yang menembus permukaan air sehingga
pupa dapat bernapas yang ditunjukkan pada Gambar 7. Pada bagian ujung
abdomen, terdapat sepasang dayung (paddles) yang digunakan untuk
berenang. Sepasang sayap pengayuh ini memungkinkan pupa untuk
menyelam secara cepat dan melakukan serangkaian gerakan sebagai
responnya terhadap suatu rangsangan. Pupa Aedes dibedakan dengan genus
lain melalui terompetnya yang pendek dan tidak mengembang, serta rambut
tunggal yang berada di bagian ujung setiap dayung. Pupa Aedes aegypti
dibedakan dengan spesies Aedes lainnya melalui setae nya yang
berkembang baik dan kokoh di bagian bawah sudut segmen abdominal kedua
sampai keenam (Nelson, 1986; Yulidar dan Wilya, 2015).
Gambar 7. Sisi Lateral Tubuh Pupa (Becker, 2010)
c) Dewasa
Aedes aegypti dewasa memiliki tubuh berwarna hitam dengan bercak
putih keperakan atau putih kekuningan. Pada bagian abdomen, nyamuk
Aedes betina memiliki ujung yang lancip dan cercus yang panjang. Selain itu,
bagian abdomen pada nyamuk Aedes seringkali ditutupi oleh sisik berwarna
hitam dan putih yang membentuk pola-pola berbeda sebagaimana
ditunjukkan pada Gambar 8. Pada bagian toraks (tepatnya dorsal), terdapat
12
bercak putih khas berupa 2 garis sejajar di bagian tengah toraks dan 2 garis
melengkung di tepi toraks, ciri morfologi spesifik ini disebut bentuk lira (lyre-
form). Pada bagian kaki, tampak cincin berwarna hitam dan putih. Sisik pada
sayap nyamuk Aedes biasanya berwarna hitam dan kecil (Agoes dan
Natadisastra, 2005; Service, 2012; Soedarto, 2016).
Gambar 8. (a) Abdomen dan (b) kaki Aedes dewasa, menunjukkan susunan khas
sisik berwarna hitam dan putih (Service, 2012)
2.1.2. Upaya Pencegahan dan Pengendalian Aedes aegypti

Mencegah atau mengurangi transmisi virus dengue seluruhnya bergantung
pada kontrol vektor nyamuk atau interupsi dari kontak manusia dengan vektor.
Terdapat beberapa metode yang telah digunakan untuk mengontrol vektor:
a. Pengelolaan Lingkungan
Pengelolaan lingkungan berupaya untuk mengubah lingkungan menjadi
tidak sesuai dengan kondisi perkembangbiakan nyamuk yang seharusnya. Hal
ini diperlukan guna mencegah atau meminimalkan penyebaran vektor dan
kontak manusia dengan vektor. Pengelolaan lingkungan dilakukan dengan cara
menghancurkan, mengubah, menghilangkan atau mendaur ulang wadah
penampungan air. Misalnya, dengan cara sering mengosongkan dan
membersihkan wadah penampungan air, membersihkan selokan, menyimpan
ban agar tidak terisi air hujan, melakukan daur ulang ban atau wadah
penampung air, dsb (WHO, 2009; Soedarto, 2012).
13
Menurut Kementrian Kesehatan Republik Indonesia (2016), program

Pemberantasan Sarang Nyamuk (PSN) dengan cara 3M Plus harus terus
dilakukan khususnya pada musim hujan. Program PSN antara lain: 1)
Menguras, yaitu membersihkan tempat yang sering dijadikan tempat
penampungan air seperti bak mandi, ember air, tempat penampungan air
minum, dan lain-lain; 2) Menutup, yaitu menutup rapat-rapat tempat-tempat
penampungan air seperti drum, kendi, toren air, dan lain sebagainya; 3)
Memanfaatkan kembali atau mendaur ulang barang bekas yang berpotensi
untuk menjadi tempat berkembangbiak vektor demam berdarah.
b. Kontrol Kimia
Pengendalian nyamuk Aedes ditujukan untuk seluruh stadium nyamuk,
terutama larva (larvasida) dan nyamuk dewasa (imagosida/adulticide).
Penggunaan larvasida harus dipertimbangkan sebagai pelengkap dari metode
pengelolaan lingkungan dan (kecuali dalam keadaan darurat) harus dibatasi
pada tempat penampungan air yang tidak dapat dikelola atau dihilangkan.
Metode ini harus dilakukan dengan sangat berhati-hati ketika penggunaannya
berkaitan dengan air minum untuk menghindari dosis yang beracun bagi
manusia. Selain itu, larvasida harus memiliki daya racun yang lebih rendah
terhadap spesies lain. Zat kimia lain yang dapat digunakan adalah pengusir
nyamuk (repellents) yang dapat diaplikasikan di bagian kulit yang terbuka
(WHO, 2009; Soedarto, 2012).
Insektisida telah digunakan sejak lama untuk memberantas Aedes aegypti
di berbagai daerah di seluruh dunia. Oleh karena itu, telah dilaporkan terjadinya
resistensi nyamuk Aedes aegypti terhadap insektisida di beberapa negara,
antara lain resistensi terhadap organofosfat, piretroid, karbamat dan
organoklorin. Hal ini dapat menyebabkan hambatan besar dalam pengendalian
Aedes aegypti sebagai vektor penyakit dengue. Selain itu, manusia juga dapat
mengalami keracunan akibat insektisida, baik secara sengaja maupun tidak
sengaja. Saat ini banyak insektisida golongan organik fosfor dan organik klorin
yang telah digunakan, kedua golongan insektisida tersebut banyak
menimbulkan masalah keracunan pada manusia (Agoes dan Natadisastra,
2005; Soedarto, 2012).
14
c. Kontrol Biologi
Metode ini menggunakan organisme yang dapat memangsa, berkompetisi,
atau menjadi parasit target spesies sehingga mengurangi populasinya. Agen
kontrol biologi yang digunakan untuk memberantas larva antara lain udang-
udangan rendah (Mesocyclops), Bacillus thurengiensis dan Photorhabdus dari
nematoda Heterorhabditis. Ikan pemakan larva dan predator copepoda telah
terbukti efektif melawan vektor Aedes dalam habitat spesifik tertentu (WHO,
2009; Soedarto, 2012).
Beberapa jenis ikan dapat digunakan untuk memberantas larva nyamuk
yang berada di tandon besar, tangki air industri dan sumur air tawar yang
terbuka. Poecilia reticulata merupakan spesies ikan pemakan larva yang paling
umum digunakan. Ikan cupang (Ctenops vittatus) mampu memberantas
nyamuk Aedes dan nyamuk Culex di Indonesia. Kontrol biologis berguna untuk
menghindari kontaminasi bahan kimia terhadap lingkungan, namun terdapat
beberapa keterbatasan seperti masalah biaya, pemeliharaan organisme,
kesulitan dalam pengaplikasiannya, dan kegunaannya yang terbatas di lokasi
perairan dimana suhu, pH dan polusi organik tidak sesuai dengan kebutuhan
organisme (WHO, 2009; Soedarto, 2012).
d. Pemanfaatan Alat-Alat
Metode berikutnya yaitu menggunakan alat-alat yang dimanfaatkan untuk
mengendalikan vektor. Alat tersebut dapat berupa Insecticide-treated materials
(ITM) dan ovitrap/oviposition trap. ITM biasanya digunakan dalam bentuk
kelambu. Jaring-jaring yang digunakan di atas tirai penutup jendela dan tirai-
tirai lainnya juga dapat memberikan perlindungan di dalam rumah. ITM telah
terbukti sangat efektif dalam mencegah penyakit yang ditularkan oleh nyamuk
yang aktif di malam hari, tetapi nyamuk Aedes aegypti aktif mencari mangsa di
siang hari. Oleh karena itu, ITM mampu melindungi bayi atau pekerja malam
yang tidur saat siang hari. Pemberian insektisida pada tirai yang ada di dalam
rumah juga dapat menurunkan populasi serangga domestik lainnya, seperti
lalat dan lipas (kecoa) (WHO, 2009; Soedarto, 2012).
Ovitrap yang digunakan untuk pengawasan vektor Aedes dapat
dimodifikasi agar mematikan bagi populasi Aedes aegypti, baik yang sudah
dewasa maupun yang belum dewasa. Ovitrap yang diberi bahan pembunuh
larva atau nyamuk dewasa, misalnya diberi insektisida (lethal ovitrap), diberi
15
pelekat (sticky ovitrap) atau perangkap nyamuk yang bisa dijadikan tempat
bertelur, tetapi mencegah terlepasnya nyamuk dewasa (autocidal ovitrap) dapat
mengurangi kepadatan populasi nyamuk bila digunakan dalam jumlah besar
(WHO, 2009; Soedarto, 2012).
2.1.3. Ekstrak Etanol Kulit Nanas (Ananas comosus (L.) Merr.)

a. Taksonomi
Menurut uji determinasi tumbuhan yang dilakukan di Laboratorium
Sistematika Tumbuhan, Fakultas Biologi, Universitas Gadjah Mada (UGM)
Yogyakarta (2020), taksonomi nanas adalah sebagai berikut:
 Divisi : Magnoliophyta
 Kelas : Liliopsida
 Sub kelas : Commelinidae
 Ordo : Bromeliales
 Familia : Bromeliaceae
 Genus : Ananas
 Spesies : Ananas comosus (L.) Merr.
b. Morfologi
Nanas adalah tanaman rumput-rumputan yang tahan lama (perennial) dari
Liliopsida (Monokotiledon). Struktur morfologi utama nanas adalah batang,
daun, gagang bunga (peduncle), buah yang banyak (multiple fruit), mahkota,
tunas, dan akar seperti yang ditunjukkan pada Gambar 9. Nanas mempunyai
daun yang majemuk dengan panjang 80-120 cm dan lebar 2-6 cm. Daun nanas
berbentuk seperti pedang dengan ujung yang lancip dan tepi berduri. Buah
nanas terdiri atas fruitlet yang membentuk susunan spiral dan menyebar dari
bagian tengah buah yang berserat dan berair (Sugeng et al., 2010; Smith, 2003;
Hassan dan Othman, 2011).
Menurut Rohrbach dan Apt (1986), buah yang banyak adalah hasil
perpaduan dari masing-masing buah yang berukuran kecil (fruitlet) pada satu
tangkai. Beberapa bunga tersusun secara heliks (spiral) di sepanjang sumbu,
masing-masing menghasilkan fruitlet yang ditekan oleh fruitlet lain dari bunga
yang berdekatan, kemudian membentuk satu buah nanas yang besar. Fruitlet
satu dengan yang lain dihubungkan melalui inti buah, hal ini sangat penting
16
untuk perkembangan dan kualitas buah nanas. Fruitlet yang berada dekat
dengan batang mengalami pematangan lebih awal dibandingkan dengan fruitlet
yang berada di zona lainnya (Smith, 2003; Hassan dan Othman, 2011; Wongs-
aree dan Noichinda, 2014).
Gambar 9. Struktur Morfologi Utama Tanaman Nanas

(Bartholomew, Paull dan Rohrbach, 2002)
c. Kandungan Kulit Nanas

Berdasarkan analisis fitokimia yang dilakukan oleh Wijayati, Rini dan
Supartono (2017), ekstraksi kulit nanas yang diperoleh dengan cara maserasi
selama 3 hari menggunakan pelarut etanol sekitar 1,2 liter menunjukkan
kandungan senyawa flavonoid, tannin dan saponin.
a) Alkaloid
Menurut Cui, Zhao dan Qiu (2008) dalam Ge et al. (2015), proses molting
pada serangga merupakan reaksi fisiologis rumit yang dipengaruhi oleh
beberapa hormon, yaitu hormon prothoracicotropic (PTTH), hormon molting,
dan hormon juvenile. Sekresi dari PTTH mendorong produksi hormon molting,
suatu hormon yang dibutuhkan untuk masa transisi menjadi dewasa. Hormon
juvenile berperan menekan sintesis dan sekresi dari hormon molting. Jika
sintesis atau sekresi dari hormon-hormon tersebut terganggu, maka proses
metamorfosis dan perkembangan serangga juga akan terganggu.
17
b) Flavonoid
Flavonoid disintesis di seluruh bagian tanaman. Flavonoid adalah golongan
utama dari metabolit sekunder tanaman. Kandungan flavonoid berjumlah 5-
10% dari total produk sekunder yang diketahui pada tanaman. Hingga saat ini,
lebih dari 5000 flavonoid telah didokumentasikan dan jumlahnya terus
bertambah. Flavonoid berperan dalam mekanisme pertahanan tanaman
dengan cara memberikan efek toksik pada serangga sehingga mempengaruhi
perilaku, pertumbuhan dan perkembangan serangga. Flavonoid bersifat
sitotoksik dan berinteraksi dengan berbagai enzim. Flavonoid juga ditemukan
mempengaruhi ecdysone-20 monoxygenase pada serangga yang
bertanggung jawab terjadap biosintesis 20-hydroxyecdysone (Upasani et al.,
2003; Mierziak, Kostyn dan Kulma, 2014).
c) Tannin
Tannin merupakan senyawa makromolekul yang dihasilkan oleh tanaman
dan berperan sebagai penolak nutrisi (antinutrient) dan penghambat enzim
(enzyme inhibitor) sehingga mengakibatkan rendahnya hidrolisis pati dan
menurunkan respons terhadap gula darah pada hewan (Matsushita,
Takenaka dan Ogawa, 2002).
d) Bromelin
Menurut Manoroinsong et al. (2015) dalam Juariah dan Irawan (2017),
enzim bromelin adalah enzim yang bersifat hidrolase, yaitu enzim yang
bekerja ketika terdapat air. Kandungan enzim bromelin dapat ditemukan pada
bagian tangkai, batang, daun, buah, maupun kulit nanas dalam jumlah yang
berbeda. Salah satu bagian yang mengandung zat aktif yang paling banyak
adalah di bagian bawah kulit buah nanas yang sering dibuang saat mengupas
kulit buah nanas. Menurut Wuryanti (2006) dalam Ameilia I. dan Herdyastuti
N. (2017), bromelin adalah enzim endopeptidase yang mempunyai gugus
sulfhidril pada sisi aktifnya. Enzim ini mendegradasi protein dengan cara
memutuskan ikatan peptida dan menghasilkan senyawa yang lebih
sederhana. Nanas adalah sumber protease yang tinggi, terutama dalam buah
yang matang.
e) Saponin
Saponin merupakan metabolit sekunder dari glikosidik yang tersebar luas
di tanaman tetapi juga ditemukan di beberapa sumber hewani seperti hewan
18
invertebrata laut. Efek dari saponin pada serangga umumnya ditandai dengan
gangguan pada durasi tahapan perkembangan dan kegagalan moulting.
Berbagai insektisida baik menggunakan zat alami maupun sintesis
mempengaruhi biosintesis atau mekanisme kerja hormon ekdison, sehingga
mengganggu pertumbuhan serangga dan proses moulting. Saponin adalah
zat yang sering dikutip dalam literatur sebagai pemicu kendala dalam proses
moulting dan malformasi pada berbagai spesies serangga (Chaieb, 2010;
Podolak, Galanty and Sobolewska, 2010).
2.1.4 Metode Ekstraksi

Metode ekstraksi dapat dilakukan dengan menggunakan pelarut. Ekstraksi
dengan memakai pelarut dapat dilakukan dengan cara dingin dan cara panas.
a. Cara Dingin
a) Maserasi
Maserasi merupakan proses pengekstrakan simplisia dengan
menggunakan pelarut dan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada
suhu ruangan. Pada maserasi kinetik, dilakukan pengadukan yang kontinu.
Remaserasi merupakan pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan
penyaringan maserat pertama dan seterusnya (Departemen Kesehatan RI,
2000).
b) Perkolasi
Perkolasi merupakan ekstraksi dengan pelarut sampai sempurna
(exhaustive extraction) yang umumnya dilakukan pada suhu ruangan. Proses
perkolasi terdiri dari tahapan pengembangan bahan, tahap maserasi antara
dan tahap perkolasi sebenarnya. Proses ini dilakukan sampai diperoleh
ekstrak (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan (Departemen Kesehatan RI,
2000).
b. Cara Panas
a) Refluks
Refluks adalah ekstraksi yang memakai pelarut pada suhu mendidih
selama waktu tertentu dengan jumlah pelarut yang terbatas dan relatif konstan
dengan adanya pendingin yang bersifat reversibel (Departemen Kesehatan
RI, 2000).
19
b) Soxhlet
Soxhlet adalah ekstraksi memakai pelarut yang dilakukan dengan alat
khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif
konstan dan disertai dengan pendingin bersifat reversibel (Departemen
Kesehatan RI, 2000).
c) Digesti
Digesti merupakan maserasi kinetik yang dilakukan pada temperatur yang
lebih tinggi dari suhu ruangan (40 - 50°C) (Departemen Kesehatan RI, 2000).
d) Infus
lnfus merupakan ekstraksi dengan menggunakan pelarut air pada
temperatur penangas air (bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih
pada suhu 96-98°C) selama 15 - 20 menit (Departemen Kesehatan RI, 2000).
e) Dekok
Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama (~30°C) dan temperatur
yang digunakan sampai titik didih air (Departemen Kesehatan RI, 2000)
20
2.2. Kerangka Teori
Pengendalian dan Pengendalian Aedes

aegypti (Kemenkes RI, 2016; WHO, 2009;
Soedarto, 2012)
Lingkungan Biologi Kimiawi Mekanik Alami
Ekstrak Etanol Kulit Nanas
-Denaturasi protein (Ameilia I. dan Herdyastuti N, 2017)

-Menghambat proses moulting (Chaieb, 2010; Upasani et al., 2003;
Ge et al., 2015)
-Penolak nutrisi (antinutrient) dan penghambat enzim (enzyme
inhibitor) (Matsushita, Takenaka and Ogawa, 2002)
Tannin, Flavanoid, Saponin, (Wijayanti, Rini

dan Supartono, 2017), Alkaloid, Bromelin.
Mortalitas Pupa Aedes aegypti
Pupasida
Gambar 10. Kerangka Teori

21
2.3. Kerangka Konsep
Variabel terikat: Variabel Bebas:
Variasi konsentrasi ekstrak Persentase mortalitas pupa
etanol kulit nanas (Ananas Aedes aegypti
comosus (L.) Merr.)
Variabel pengganggu:
Suhu, kelembapan dan usia
pupa
Gambar 11. Kerangka Konsep
2.4. Hipotesis
Berdasarkan teori yang telah diuraikan, maka dapat dirumuskan hipotesis berupa:
Ekstrak etanol kulit nanas (Ananas comosus (L.) Merr.) memiliki pengaruh
terhadap mortalitas pupa nyamuk Aedes aegypti.
BAB III. METODE PENELITIAN
3.1. Jenis dan Rancangan Penelitian

Penelitian ini menggunakan metode quasi experimental design dengan
rancangan post test only control group design.
3.2. Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian dilakukan selama 3 bulan di beberapa tempat sebagai berikut:
a. Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Islam Indonesia
(FK UII) untuk uji kelarutan, uji pupasida pendahuluan dan uji pupasida utama.
b. Laboratorium Riset Fakultas Kedokteran Universitas Islam Indonesia (FK UII)
untuk pembuatan ekstrak etanol kulit nanas.
c. Laboratorium Sistematika Tumbuhan Fakultas Biologi Universitas Gadjah
Mada (UGM) Yogyakarta untuk uji determinasi tumbuhan
3.3. Subyek Penelitian

Subjek pada penelitian ini adalah pupa nyamuk Aedes aegypti. Pupa nyamuk
diperoleh melalui proses rearing di insektarium Laboratorium Parasitologi FK UII.
Pupa Aedes aegypti diambil dengan metode simple random sampling. Penelitian
ini dilakukan dengan membagi subjek penelitian pada uji pupasida utama menjadi
2 kelompok besar, yaitu:
1) Kelompok Perlakuan
Kelompok perlakuan adalah kelompok subjek yang diberi perlakuan
dengan menggunakan ekstrak etanol kulit nanas yang telah dilarutkan
dengan pelarut. Kelompok perlakuan terdiri dari 5 kelompok dengan
variasi konsentrasi yang didapatkan dari hasil uji pupasida pendahuluan.
2) Kelompok Kontrol
Kelompok kontrol adalah kelompok kontrol negatif yang diberi perlakuan
dengan menggunakan akuades dan pelarut. Penelitian ini tidak
menggunakan kontrol positif karena belum ada pupasida yang digunakan
secara meluas.
Validitas penelitian dinyatakan dengan adanya replikasi atau pengulangan
yang dihitung menggunakan rumus Federer, yaitu:
22
23
(n – 1) (t-1) ≥ 15
Keterangan:
(n-1) (6-1) ≥ 15
5n-5 ≥ 15 n = Besar pengulangan
5n ≥ 20 t = Jumlah kelompok
n≥4
Berdasarkan hasil penghitungan dengan menggunakan rumus Federer,

didapatkan besar pengulangan sebanyak empat kali. Jumlah pupa yang
digunakan dalam penelitian ini ditentukan berdasarkan standar WHO yaitu
sebanyak 25 pupa perkelompok. Maka dari itu, jumlah pupa yang digunakan dalam
uji pupasida utama yaitu 25 x 6 x 4 = 600 pupa dan jumlah pupa yang dibutuhkan
untuk uji pupasida pendahuluan yaitu 25 x 5 = 125 pupa. Sehingga dapat
disimpulkan bahwa total pupa yang digunakan dalam penelitian ini yaitu 725 pupa.
Kriteria inklusi untuk penelitian ini adalah pupa nyamuk Aedes aegypti yang
berwarna hitam, bergerak aktif dan baru menjadi pupa dalam waktu 24 jam.
Kriteria eksklusi untuk penelitian ini adalah pupa nyamuk Aedes aegypti yang
berusia lebih dari 24 jam sebelum diberikan perlakuan dan mati sebelum diberikan
perlakuan atau tidak ada respon ketika diberi rangsang dengan memakai lidi
pengaduk.
3.4. Variabel Penelitian

3.4.1. Variabel Bebas
Variasi konsentrasi ekstrak etanol kulit nanas (Ananas comosus (L.) Merr).
3.4.2. Variabel Terikat
Persentase mortalitas pupa Aedes aegypti.
3.4.3. Variabel Pengganggu
Suhu, kelembapan, dan usia pupa.
3.5. Definisi Operasional

Variabel yang dipakai dalam penelitian ini dapat didefinisikan sebagai berikut:
a) Ekstrak Etanol kulit nanas
Hasil ekstraksi kulit nanas dengan menggunakan etanol dan dibuat melalui
metode maserasi di Laboratorium Riset FK UII. Ekstrak etanol kulit nanas
dinyatakan dalam satuan persen.
24
b) Efek Pupasida
Persentase banyaknya jumlah pupa yang mati setelah diberikan perlakuan
dengan menggunakan ekstrak etanol kulit nanas dan diamati setiap 24 jam
paska perlakuan sampai 3 hari.
c) LC50
Konsentrasi ekstrak etanol kulit nanas yang menyebabkan 50% populasi
pupa yang terpapar gagal menjadi nyamuk dewasa dalam 3 hari.
d) LC90
Konsentrasi ekstrak etanol kulit nanas yang menyebabkan 90% populasi
pupa yang terpapar gagal menjadi nyamuk dewasa dalam 3 hari.
e) Suhu
Suhu dalam ruangan uji yang diukur dengan menggunakan termometer
dan dinyatakan dalam celcius. Suhu yang ideal adalah (27 ± 2)ºC.
f) Kelembaban Ruangan Uji
Kandungan uap air dalam ruangan uji yang diukur dengan menggunakan
higrometer dan dinyatakan dalam persen. Kelembaban ruangan yang ideal
adalah 75-85%.
g) Volume Air
Volume air ledeng yang digunakan dalam penelitian untuk setiap wadah uji
yang jumlahnya menyesuaikan volume larutan hasil dari perhitungan
rumus pengenceran. Volume air diukur menggunakan gelas ukur dan
dinyatakan dalam satuan mililiter (mL).
h) Kepadatan Pupa
Jumlah pupa dalam wadah uji yang sebelum dimasukkan ke wadah uji
sudah dihitung menggunakan pipet. Jumlah pupa untuk setiap wadah uji
adalah 25 pupa.
3.6. Bahan dan Alat Penelitian

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak etanol kulit nanas,
sarung tangan bersih, tisu, wadah uji, pelarut (tween 80, DMSO dan akuades) dan
pupa Aedes aegypti. Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah lidi
pengaduk, gelas beker, gelas ukur, alat tulis, termometer ruangan, pipet plastik,
neraca digital, wadah ekstrak etanol kulit nanas, higrometer dan mikropipet.
25
3.7. Tahapan Penelitian

3.7.1. Uji Determinasi Tumbuhan
Uji determinasi tumbuhan dilakukan untuk mengidentifikasi nama dan jenis
tumbuhan yang akan digunakan secara spesifik agar proses pemanfaatannya
tepat sasaran. Uji tersebut dilakukan di Laboratorium Sistematika Tumbuhan
Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada (UGM) Yogyakarta.
3.7.2. Penyediaan Ekstrak Etanol Kulit Nanas

Kulit nanas yang digunakan sebagai variabel dalam penelitian ini didapatkan
dari penjual buah nanas yang berada di Jalan Kaliurang KM 11. Setelah melalui
uji determinasi, kulit nanas kemudian diolah menjadi ekstrak etanol kulit nanas di
Laboratorium Riset Fakultas Kedokteran Universitas Islam Indonesia (FK UII)
dengan menggunakan metode maserasi.
3.7.3. Rearing Pupa Aedes aegypti

Pupa didapatkan dengan cara rearing atau proses pemeliharaan. Fase telur
terjadi sekitar 2 hari, fase larva terjadi sekitar 5-14 hari dan fase pupa terjadi sekitar
2-3 hari. Proses rearing dimulai dengan mempersiapkan media. Wadah rearing
diisi dengan air kemudian telur Aedes aegypti dimasukkan ke dalam wadah
rearing. Wadah rearing disimpan di insektarium Laboratorium Parasitologi FK UII.
Telur yang sudah menjadi larva kemudian diberi pakan setiap hari dengan
menggunakan hati ayam. Proses rearing diamati setiap 24 jam. Ketika mencapai
fase pupa, pupa Aedes aegypti dipindahkan dengan menggunakan pipet plastik
untuk uji pupasida pendahuluan dan uji pupasida utama. Menurut Kamaraj et al.
(2009), seluruh fase dipertahankan dalam suhu 27 ± 2ºC dan kelembaban 75-85%.
3.7.4. Uji Kelarutan

Uji kelarutan ekstrak etanol dilakukan dengan menggunakan pelarut
akuades, DMSO, dan tween 80. Tiga pelarut tersebut dipilih untuk menentukan
pelarut yang mempunyai homogenitas paling baik dengan ekstrak etanol kulit
nanas. Uji kelarutan dilakukan sesuai dengan metode Baskoro (2019) dengan
sedikit modifikasi:
1) Ekstrak etanol kulit nanas diambil secukupnya ke dalam tiga kolom plat
tetes.
26
2) Kolom plat tetes pertama diberi larutan akuades, kolom plat tetes kedua
diberi DMSO, dan kolom plat tetes ketiga diberi larutan tween 80.
3) Setiap kolom plat diaduk dengan menggunakan lidi hingga homogen.
4) Melakukan pengamatan larutan yang memiliki homogenitas paling baik.
3.7.5. Uji Pupasida Pendahuluan

Uji pupasida pendahuluan dilakukan dengan cara memberikan paparan
ekstrak etanol kulit nanas terhadap pupa nyamuk Aedes aegypti. Hal ini dilakukan
untuk menentukan konsentrasi ekstrak etanol kulit nanas yang dapat membunuh
pupa nyamuk Aedes aegypti. Menurut WHO (2005), setelah menentukan
mortalitas larva dalam berbagai konsentrasi, rentang dibuat lebih sempit dengan
menggunakan 5 konsentrasi dan menggunakan daya larvasida sebesar 10-95%
dalam waktu 24 atau 48 jam. Syarat ini diperlukan untuk menentukan LC50 dan
LC90. Namun, terkait pupa belum ada protokol khusus. Uji pupasida pendahuluan
dilakukan dengan cara sebagai berikut:
a) Masing-masing wadah diberi label dengan diberi keterangan tanggal dan
konsentrasi yang digunakan (0,25%; 0,30%; 0,325%; 0,35%; 0,375%).
b) Pembuatan larutan stok dengan konsentrasi 5%. Larutan stok dibuat dengan
mencampur 100 ml air yang telah diukur dengan menggunakan gelas ukur
dan 5 gram ekstrak etanol kulit nanas yang diukur dengan menggunakan
neraca digital.
c) Pupa dipindahkan dari wadah rearing ke gelas beker dengan menggunakan
pipet plastik hingga total air dalam gelas beker yang telah terisi pupa adalah
20 ml. Setiap wadah uji membutuhkan 25 pupa.
d) Larutan ekstrak etanol kulit nanas dibuat dengan menggunakan rumus
pengenceran larutan:
C1 x V1 = C2 x V2
Keterangan:
C1 = Konsentrasi larutan asal (larutan stok) (5%)
C2 = Konsentrasi larutan yang akan dibuat (0,25%; 0,30%; 0,325%; 0,35%;
0,375%)
V1 = Volume larutan asal yang akan diencerkan (mL)
V2 = Volume larutan yang akan dibuat (100 mL)
27
Jumlah volume larutan asal yang akan diencerkan kemudian dicampur

dengan air yang sudah dihitung dengan menggunakan gelas ukur dan air
didalam gelas beker yang telah terisi pupa hingga total volume larutan
ekstrak etanol kulit nanas yang telah dilarutkan adalah 100 ml.
e) Waktu ketika memasukkan pupa ke dalam wadah uji dicatat pada label.
f) Dilakukan observasi dan pencatatan setiap 24 jam paska pemaparan
ekstrak etanol kulit nanas sampai 3 hari. Pupa dinyatakan mati ketika tidak
ada respon saat diberi rangsang dengan memakai lidi pengaduk.
3.7.6. Uji Pupasida Utama

Uji pupasida utama dilakukan dengan cara yang sama seperti uji pupasida
pendahuluan. Uji pupasida utama diperlukan untuk menentukan persentase efek
pupasida ekstrak etanol kulit nanas pada pupa nyamuk Aedes aegypti. Selain itu,
uji pupasida utama juga digunakan untuk menentukan LC50 dan LC90. Konsentrasi
yang digunakan pada uji pupasida utama adalah 5 konsentrasi yang memiliki daya
pupasida sebesar 10-95% dalam waktu 24 atau 48 jam paska perlakuan pada saat
uji pupasida pendahuluan. Pada uji pupasida utama, dilakukan pengulangan
sebanyak 4 kali. Setiap hari dilakukan pengukuran suhu dan kelembapan ruangan
uji.
28
3.8. Alur Penelitian
Mengajukan ethical clearance
Uji determinasi tumbuhan
Penyediaan ekstrak etanol kulit nanas
Rearing Pupa Aedes aegypti
Uji kelarutan
Pembuatan larutan ekstrak etanol kulit nanas
Uji pupasida pendahuluan
Uji pupasida utama
Kontrol Negatif Kelompok perlakuan dengan

5 konsentrasi berbeda
Pengulangan sebanyak 4 kali
Analisis data menggunakan SPSS
Gambar 12. Alur Penelitian
3.9. Analisis Data

Metode analisis data yang digunakan dalam penelitian ini adalah analisis
deksriptif dan analisis inferensi. Uji normalitas yang dipilih adalah Shapiro Wilk
Test karena jumlah sampel yang digunakan <50. Kemudian dilakukan uji statistik
29
menggunakan One Way ANOVA test bila distribusi data normal atau
menggunakan uji statistik Kruskall-Wallis bila distribusi data tidak normal. Bila hasil
analisis uji statistik menggunakan uji Kruskall-Wallis menunjukkan perbedaan
yang signifikan (p<0,05), maka analisis dilanjutkan uji post hoc dengan
menggunakan uji Mann-Whitney. Bila hasil analisis uji statistik menggunakan uji
One Way ANOVA test menunjukkan perbedaan yang signifikan (p<0,05), maka
analisis dilanjutkan uji post hoc dengan menggunakan Tukey test. Analisis probit
juga digunakan untuk menentukan dosis efektif LC50 dan LC90 kulit nanas.
Berdasarkan WHO (2005), persentase efek pupasida nyamuk Aedes aegypti
setelah diberikan perlakuan dapat dihitung dengan rumus:
Persentase mortalitas pupa = Jumlah pupa yang mati x 100

Jumlah pupa yang dimasukkan ke wadah uji
3.10. Etika Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan setelah mendapatkan perizinan dari Komite Etik
Fakultas Kedokteran UII dengan nomor 9/Ka.Kom.Et/70/KE/VIII/2020. Penelitian
dilakukan dengan jujur, mulai dari pengambilan pustaka, pengambilan data,
analisis data serta kegagalan dan keberhasilan penelitian. Peneliti berusaha
melaksanakan etika penelitian dengan sebaik-baiknya dalam proses penelitian.
BAB IV. BIAYA DAN JADWAL PENELITIAN
4.1. Anggaran Biaya
Tabel 2. Ringkasan Anggaran Biaya
No Jenis Pengeluaran Biaya (Rp)
1 Peralatan penunjang 48.000
2 Bahan habis pakai 1.554.500
3 Perjalanan 1.800.000
4 Lain-lain 1.686.500
4.2. Jadwal Penelitian

Tabel 3. Jadwal Penelitian
2020 2021
Rangkaian
Kegiatan
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1 2
Penyusunan
Proposal
Pengajuan dan
seminar
proposal
Pengajuan
ethical
clearance
Uji Identifikasi
Tumbuhan, Uji
Kelarutan, Uji
Pendahuluan
dan Uji Utama
Pengolahan
data dan
penyusunan
hasil penelitian
Seminar hasil
penelitian
30
BAB V. HASIL DAN PEMBAHASAN
5.1 Uji Determinasi Tumbuhan

Uji determinasi tumbuhan dilakukan untuk identifikasi spesies yang
digunakan dalam pembuatan ekstrak etanol kulit nanas. Uji tersebut dilakukan di
Laboratorium Sistematika Tumbuhan Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada
(UGM) Yogyakarta dengan nomor surat 014889/S.Tb./IX/2020. Hasil identifikasi
tumbuhan adalah sebagai berikut:
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Liliopsida
Sub kelas : Commelinidae
Ordo : Bromeliales
Familia : Bromeliaceae
Genus : Ananas
Spesies : Ananas comosus (L.) Merr.
Sinonim : Ananas ananas (L.) Voss., Ananas sativus (Lindley)
Schulters. f., Bromelia comosa L.
Nama lokal : Nanas
5.2 Uji Kelarutan
Hasil uji kelarutan dari ketiga pelarut (akuades, DMSO dan tween 80)
menunjukkan bahwa akuades memiliki homogenitas yang paling baik dengan
ekstrak etanol kulit nanas. Akuades menjadi pilihan pelarut yang akan digunakan
untuk uji pupasida utama dan uji pupasida pendahuluan. Hasil uji kelarutan
ditunjukkan Gambar 12.
Gambar 13. Hasil Uji Kelarutan (Sumber: Koleksi Prib
31
32
5.3 Uji Pupasida Pendahuluan

Hasil uji pupasida pendahuluan ditunjukkan pada Tabel 2. Konsentrasi
paling rendah pada uji pupasida pendahuluan adalah 0,25% dan konsentrasi
paling tinggi adalah 0,375%. Konsentrasi yang akan digunakan untuk uji pupasida
utama adalah 5 kelompok konsentrasi yang memiliki daya pupasida sebesar 10-
95% dalam waktu 24 atau 48 jam.
Tabel 4. Hasil Uji Pupasida Pendahuluan Ekstrak Etanol Kulit Nanas terhadap
Mortalitas Pupa Nyamuk Aedes aegypti
Kelompok Jumlah Pupa Jumlah Mortalitas Efek Pupasida
Perlakuan (%) Uji Pupa
0,25 25 5 20%
0,30 25 13 52%
0,325 25 14 56%
0,35 25 23 92%
0,375 25 25 100%
5.4 Uji Pupasida Utama

Berdasarkan hasil dari uji pupasida pendahuluan, konsentrasi yang akan
digunakan untuk uji pupasida utama adalah 0,25%; 0,275%; 0,30%; 0,325%;
0,35% dan kelompok kontrol negatif. Kelompok kontrol negatif digunakan sebagai
pembanding efektivitas ekstrak etanol kulit nanas. Uji pupasida utama dilakukan
dengan pengulangan sebanyak 4 (empat) kali dengan kondisi dan perlakuan yang
sama. Pengamatan pada uji pupasida utama dilakukan setiap 24 jam paska
perlakuan selama 3 hari. Hasil uji pupasida utama dari 600 pupa nyamuk Aedes
aegypti ditunjukkan pada Tabel 3.
Tabel 5. Hasil Uji Pupasida Utama Ekstrak Etanol Kulit Nanas terhadap Mortalitas
Pupa Nyamuk Aedes aegypti
Kelompok Jumlah Jumlah Mortalitas Pupa Efek

Perlakuan (%) Pupa Uji Replikasi Uji pupasida utama ke- Pupasida
1 2 3 4
P1 25 10 6 3 4 23%
P2 25 13 20 15 6 54%
P3 25 23 21 20 18 82%
P4 25 24 22 23 20 89%
P5 25 25 25 25 24 99%
K- 25 0 0 0 0 0
33
Keterangan:
P1 : Konsentrasi ekstrak etanol kulit nanas 0,25%
K- : Kontrol negatif (akuades saja)
Gambar 14. Variasi Konsentrasi 0,25%, 0,275%, 0,30%, 0,325% dan 0,35%
Pada Pengulangan Kedua (Sumber: Koleksi Pribadi)
Pengukuran terhadap parameter abiotik (suhu ruang dan kelembaban

ruang) juga dilakukan setiap hari selama uji pupasida utama dilaksanakan. Suhu
ruangan uji berkisar antara 25°C-27,5°C. Hal ini sesuai dengan suhu ruangan yang
ideal untuk tempat hidup pupa, yaitu dalam rentang 25°C-29°C. Kelembaban
ruangan uji berkisar antara 71,5%-79%, sedangkan kelembaban yang ideal untuk
tempat hidup pupa adalah 75-85%. Hasil dari pengukuran suhu ruang dan
kelembaban ruang ditunjukkan pada Tabel 4.
Tabel 6. Hasil Pengukuran Suhu dan Kelembaban di Insektarium Laboratorium

Parasitologi FK UII
Parameter Hasil Pengukuran

Suhu ruang 25°C-27,5°C
Kelembaban ruang 71,5%-79%
34
Data dari hasil uji pupasida utama kemudian diolah. Uji normalitas yang
dipilih adalah Shapiro-Wilk Test karena jumlah sampel yang digunakan <50. Hasil
uji normalitas menunjukkan bahwa konsentrasi 0,25% memiliki p-value sebesar
0,538 (p>0,05), konsentrasi 0,275% memiliki p-value sebesar 0,908 (p>0,05),
konsentrasi 0,30% memiliki p-value sebesar 0,995, konsentrasi 0,325% memiliki
p-value sebesar 0,850 (p>0,05) dan konsentrasi 0,35% memiliki p-value sebesar
0,001 (p<0,05). Hasil uji normalitas menunjukkan bahwa distribusi data tidak
normal, hal ini ditunjukkan pada konsentrasi 0,35% yang memiliki p-value sebesar
0,001 (p<0,05) sehingga uji statistik dilakukan dengan menggunakan uji Kruskall-
Wallis.
Uji Kruskall-Wallis menunjukkan nilai p=0.001 (p<0,05). Hal ini
menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit nanas memiliki pengaruh terhadap
mortalitas pupa nyamuk Aedes aegypti. Analisis probit juga digunakan untuk
menentukan dosis efektif LC50 dan LC90 ekstrak etanol kulit nanas. Hasil analisis
probit menunjukkan nilai LC50 sebesar 0,272% dan LC90 sebesar 0,318%.
Tabel 7. Perbedaan Tingkat Mortalitas Ekstrak Etanol Kulit Nanas terhadap Pupa
Nyamuk Aedes aegypti
Kelompok Nilai P
P1 P2 P3 P4 P5 K-
P1 - 0,059 0,021 0,021 0,018 0,014
P2 0,059 - 0,059 0,029 0,018 0,014
P3 0,021 0,059 - 0,243 0,018 0,014
P4 0,021 0,029 0,243 - 0,026 0,014
P5 0,018 0,018 0,018 0,026 - 0,011
K- 0,014 0,014 0,014 0,014 0,011 -
Keterangan:
Warna kuning memiliki nilai p<0.05
K- : Kontrol negatif (akuades saja)
35
Hasil uji post hoc dengan menggunakan uji Mann-Whitney menunjukkan

bahwa terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok P3, P4, P5 dan K-
terhadap kelompok P1 dimana nilai p<0,05. Kelompok P4, P5 dan K- menunjukkan
perbedaan yang signifikan terhadap kelompok P2 dengan nilai p<0,05. Kelompok
P1, P5 dan K- menunjukkan perbedaan yang signifikan terhadap kelompok P3
dengan nilai p<0,05. Kelompok P1, P2, P5 dan K- menunjukkan perbedaan yang
signifikan terhadap kelompok P4 dengan nilai p<0,05. Kelompok P1, P2, P3, P4
dan K- menunjukkan perbedaan yang signifikan terhadap kelompok P5 dengan
nilai p<0,05. Kelompok P1, P2, P3, P4 dan P5 menunjukkan perbedaan yang
signifikan terhadap kelompok K-. Hasil yang signifikan ditunjukkan pada nilai p
berwarna kuning pada Tabel 5.
5.5 Pembahasan
Hasil yang diperoleh dari data uji pupasida utama menunjukkan bahwa
semakin tinggi konsentrasi maka semakin tinggi persentase efek pupasida.
Adanya peningkatan persentase efek pupasida seiring dengan peningkatan
konsentrasi ekstrak etanol kulit nanas menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit
nanas bersifat toksik terhadap pupa nyamuk Aedes aegypti. Persentase mortalitas
tertinggi ditunjukkan oleh konsentrasi 0,35% dengan tingkat mortalitas mencapai
99% dan persentase mortalitas paling rendah ditunjukkan oleh konsentrasi 0,25%
dengan tingkat mortalitas sebesar 23%.
Kontrol negatif hanya berisi akuades yang digunakan untuk
membandingkan efektivitas ekstrak etanol kulit nanas dalam proses uji pupasida
utama. Hasil pengulangan empat kali pada uji pupasida utama menunjukkan
bahwa kontrol negatif tidak memberikan dampak pada pupa Aedes aegypti. Hal ini
ditunjukkan ketika seluruh pupa berubah menjadi nyamuk dewasa Aedes aegypti.
Hasil analisis Kruskall Wallis menunjukkan bahwa nilai p=0.001, karena nilai
p<0,05 sehingga nilai H0 ditolak dan H1 diterima. Hal ini menunjukkan bahwa
terdapat perbedaan jumlah mortalitas pupa yang signifikan diantara kelompok uji.
Hasil penelitian ini sejalan dengan efek insektisida yang ditunjukkan oleh
penelitian Sulistyono, Sukiya dan Aminatun (2018) dengan menggunakan ekstrak
etanol buah nanas terhadap larva Anopheles aconitus. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa ekstrak etanol buah nanas dapat menyebabkan kematian
pada larva Anopheles aconitus dengan nilai p<0,05. Penelitian ini juga sejalan
dengan penelitian yang dilakukan oleh Saputra dan Fatiqin (2018) menggunakan
36
perasan buah nanas terhadap larva instar III nyamuk Culex spp. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa perasan buah nanas memiliki pengaruh terhadap kematian
larva Culex spp. dengan nilai p<0,05.
Ekstrak Ocimum gratissimum dengan pelarut ekstrak heksana, kloroform
dan aseton dalam penelitian Pratheeba, Ragavendran dan Natarajan (2015)
menunjukkan bahwa ekstrak tersebut memiliki kandungan yang sama dengan
ekstrak kulit nanas, yaitu flavonoid, saponin, tannin dan alkaloid. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa ketiga ekstrak pelarut memiliki aktivitas larvasida, pupasida
dan adulticidal.
Hasil uji Kruskall-Wallis menunjukkan perbedaan yang bermakna antar
konsentrasi ekstrak etanol kulit nanas yang diujikan dalam penelitian ini. Hal
tersebut didukung dengan hasil analisis uji post hoc dimana sebagian besar antar
konsentrasi memiliki perbedaan yang bermakna, kecuali konsentrasi 0,25% dan
konsentrasi 0,275%, konsentrasi 0,275% dan 0,30% serta konsentrasi 0,30% dan
konsentrasi 0,325% yang menunjukkan rerata kematian pupa tidak berbeda
bermakna.
Hasil analisis probit menunjukkan nilai LC50 adalah 0,272% yang berarti
bahwa konsentrasi ekstrak etanol kulit nanas sebesar 0,272% dapat membunuh
50% pupa Aedes aegypti. Nilai LC90 sebesar 0,318% yang berarti bahwa
konsentrasi ekstrak etanol kulit nanas sebesar 0,318% dapat membunuh 90%
pupa Aedes aegypti. Penelitian yang dilakukan oleh Sulistyono, Sukiya dan
Aminatun (2018) menunjukkan bahwa ekstrak etanol buah nanas memiliki efek
terhadap mortalitas larva Anopheles aconitus dengan LC50 0,074% dan LC90
0,090%. Penelitian yang dilakukan oleh Pratheeba, Ragavendran dan Natarajan
(2015) menunjukkan Ocimum gratissimum memiliki efek terhadap mortalitas pupa
nyamuk Culex quinquefasciatus dengan LC50 sebesar 2,6916 mg/mL dan LC90
sebesar 4,6521 mg/mL.
Saat uji pupasida utama dilaksanakan, pengukuran terhadap suhu ruang
dan kelembaban ruang juga dilakukan setiap hari. Suhu ruangan uji berkisar
antara 25°C-27,5°C dan kelembaban ruangan uji berkisar antara 71,5%-79%.
Pada penelitian yang dilakukan oleh Kamaraj et al. (2009), seluruh eksperimen
dilakukan pada suhu (27 ± 2)ºC dan kelembaban 75-85%. Hal serupa juga
dilakukan pada penelitian Pratheeba, Ragavendran dan Natarajan (2015) dan
Venkadachalam et al. (2017).
37
Analisis fitokimia yang telah dilakukan oleh Yeragamreddy et al. (2013)

menggunakan ekstraksi daun nanas dengan pelarut air menunjukkan bahwa
Ananas comosus mengandung senyawa karbohidrat, tannin, saponin, terpen,
sterol, flavanoid, alkaloid, fenol, asam amino, antraquinon dan glikosida kardiak.
Uji komponen senyawa kimia yang dilakukan oleh Juariah dan Irawan (2017)
menggunakan ekstrak etanol kulit nanas menunjukkan bahwa ekstrak kulit nanas
mengandung senyawa saponin, tannin dan flavonoid.
Hasil analisis fitokimia pada penelitian yang dilakukan oleh Zulhussnain et
al. (2020) menggunakan tanaman Convulvulus arvensis, Chenopodium murale,
Tribulus terrestris, Trianthema portulacastrum dan Achyranthes aspera terhadap
nyamuk Culex quinquefasciatus menunjukkan bahwa kelima tanaman
mengandung beberapa komponen yang sama dengan ekstrak kulit nanas, yaitu
flavonoid, saponin, tannin, dan alkaloid. Analisis Fourier transform infrared
spectroscopy (FTIR) menunjukkan bahwa senyawa-senyawa tersebut memiliki
aktivitas insektisidal. Hasil uji enzim pada penelitian tersebut menunjukkan adanya
peningkatan hambatan aktivitas enzim pada nyamuk Culex quinquefasciatus
seiring dengan peningkatan konsentrasi yang digunakan. Enzim-enzim tersebut
adalah asetilkolinesterase, asam fosfatase, alkaline fosfatase, α-karboksilesterase
dan β-karboksilesterase.
Saat ini diketahui secara luas bahwa interaksi antara polifenol tumbuhan
dan protein memiliki dampak besar terhadap pertumbuhan dan kelangsungan
hidup berbagai organisme. Penelitian yang dilakukan oleh Feeny (1968)
menunjukkan bahwa tannin pada daun oak menyebabkan hambatan pertumbuhan
larva Operophtera brumata. Hal ini kemungkinan disebabkan oleh interaksi antara
tannin dan protein yang melibatkan pembentukan kompleks ikatan hidrogen dan
mungkin sebagian ikatan kovalen. Menurut Mardiana (2009) dalam Siamtuti et al.
(2017), penggunaan senyawa tannin dapat menyebabkan terjadinya penyerapan
air pada tubuh organisme sehingga tubuh organisme kekurangan air dan
organisme tersebut mengalami kematian.
Aktivitas insektisida flavonoid dicapai melalui berbagai mekanisme,
diantaranya yaitu dengan cara menghambat proses makan, menghambat proses
pencernaan dan toksisitas secara langsung. Salah satu insektisida flavonoid yang
paling terkenal dan dapat dimanfaatkan adalah famili isoflavonoid retenoid,
khususnya rotenon. Metabolit tersebut bekerja dengan cara spesifik yaitu
38
menghambat NADH-dependent dehydrogenase dari rantai pernapasan

mitokondria sehingga mengganggu proses pengambilan oksigen pada serangga
(Andersen dan Markham, 2006).
Penelitian yang dilakukan oleh Mitchell et al. (1993), menunjukkan bahwa
flavonoid bekerja sebagai insektisida dengan cara menghambat jalur enzimatik
yang sangat penting, yaitu sitokrom P450 yang bergantung pada hidroksilase
steroid. Flavonoid secara spesifik memblokir aktivitas enzim hidroksilase steroid
yang terlibat dalam regulasi proses moulting pada serangga.
Penelitian yang dilakukan oleh Ikbal et al. (2007) menggunakan ekstrak
saponin mentah dari Cestrum parqui menunjukkan bahwa injeksi ekstrak saponin
mentah pada kavitas thoraks Schistocerca gregaria dan Spodoptera littoralis
menyebabkan terbentuknya jaringan nekrotik pada lokasi injeksi. Penelitian
tersebut juga menjelaskan adanya interaksi antara saponin dan membran
kolesterol secara struktural dengan cara memodifikasi lapisan ganda fosfolipid
sehingga menganggu pertukaran sel dan menyebabkan sitotoksisitas. Ikbal et al.
(2007) juga memiliki asumsi bahwa terdapat kemungkinan adanya pembentukan
pori-pori yang mengganggu permeabilitas membran sehingga menyebabkan
kematian sel.
Hasil penelitian yang dilakukan oleh Ge et al. (2015) dengan menggunakan
alkaloid yang berasal dari Cynanchum mongolicum menunjukkan bahwa alkaloid
memiliki aktivitas insektisida yang nyata pada Spodoptera litura dan Lipaphis
erysimi. Hasil penelitian menunjukkan efek alkaloid terhadap hormon molting,
pertumbuhan dan perkembangan S. litura. Konsentrasi alkaloid yang lebih tinggi
menyebabkan gangguan perkembangan dan tingkat kematian yang lebih tinggi,
terutama dalam waktu 72 jam paska perlakuan. Alkaloid dari C. Mongolicum
mengganggu keseimbangan hormon serangga dengan cara yang sama seperti
azadirahtin. Pada penelitian ini, spodoptera litura memiliki dua puncak sekresi
hormon molting yaitu antara instar ke-4 dan pupa. Namun, dua puncak tersebut
terganggu dan melemah setelah diberikan perlakuan dengan total alkaloid.
Menurut Smith (2003), nanas mengandung suatu enzim proteolitik, yaitu
enzim bromelain yang terkandung pada hampir setengah dari seluruh protein yang
terdapat dalam nanas. Penelitian yang dilakukan oleh Domingues et al. (2013)
menunjukkan bahwa bromelin dan ekstrak air kulit nanas memiliki efikasi yang
serupa terhadap Rhipicephalus (Boophilus) microplus, namun bromelin memiliki
39
aktivitas enzim 18 kali lipat dibanding ekstrak air kulit nanas. Konsentrasi bromelin
yang tinggi kemungkinan mengganggu daya larut dan penetrasi di bagian kutikula.
Penelitian ini memiliki keterbatasan, diantaranya yaitu jumlah kandungan
senyawa alami yang terdapat dalam kulit nanas tidak dipastikan, sehingga tidak
diketahui secara pasti senyawa mana yang berperan secara dominan dalam
proses mortalitas pupa Aedes aegypti.
BAB VI. KESIMPULAN DAN SARAN
6.1 Kesimpulan
Kesimpulan dari penelitian ini adalah:
1. Ekstrak etanol kulit nanas (Ananas comosus (L.) Merr.) memiliki pengaruh
terhadap mortalitas pupa nyamuk Aedes aegypti
2. Ekstrak etanol kulit nanas (Ananas comosus (L.) Merr.) memiliki nilai LC50
sebesar 0,272% dan nilai LC90 sebesar 0,318% yang menyebabkan
mortalitas pada pupa nyamuk Aedes aegypti.
6.2 Saran
1. Penelitian lanjutan perlu dilakukan untuk mengetahui kandungan senyawa
yang berperan dominan sebagai pupasida, sehingga dapat diketahui
secara pasti senyawa mana yang mempengaruhi secara efektif proses
mortalitas pupa Aedes aegypti.
2. Penelitian lebih lanjut dapat dilakukan untuk mengetahui senyawa-
senyawa yang terkandung dalam ekstrak etanol kulit nanas selain
flavonoid, tannin, saponin dan alkaloid yang dapat berfungsi sebagai
pupasida dan memiliki efek sinergis dengan metabolit sekunder yang telah
diketahui.
40
41
DAFTAR PUSTAKA
Agoes, R. dan Natadisastra, D. , 2005, Parasitologi Kedokteran: Ditinjau dari

Organ Tubuh yang Diserang. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
Ahdiyah, I. dan Purwani, K. I. , 2015, ‘Pengaruh Ekstrak Daun Mangkokan
(Nothopanax scutellarium) sebagai Larvasida Nyamuk Culex sp.’, Jurnal
Sains dan Seni ITS, 4(2).
Ameilia, I. dan Herdyastuti, N., 2017, ‘Kitin dari Cangkang Rajungan yang
Diperoleh Secara Enzimatik pada Tahap Deproteinasi’, UNESA Journal of
Chemistry, 6(2), pp. 81–85.
Andersen, Ø. M. dan Markham, K. R., 2006, Flavonoids: Chemistry, Biochemistry
and Applications. United States of America: Taylor & Francis Group.
Bar, A. and Andrew, J., 2013, ‘Morphology and Morphometry of Aedes aegypti
Larvae’, 3(1), pp. 1–21.
Bartholomew, D. P., Paull, R. E. and Rohrbach, K., 2002, The Pineapple: Botany,
Production and Uses. Wallingford, UK: CAB International.
Baskoro, T. S. , 2019, Uji Efek Pupasida Ekstrak Etanol Daun Matoa (Pometia
pinnata) terhadap Nyamuk Aedes aegypti, Skripsi, Jurusan Pendidikan
Dokter Fakultas Kedokteran. Universitas Islam Indonesia.
Becker, N., Petrić, D., Zgomba, M., Boase, C., Madon, M., Dahl, C.H., Kaiser, A.,
2010, Mosquitoes and Their Control. Berlin: Springer Verlag. doi:
10.1007/978-3-540-92874-4.
Cania, E. dan Setyanimgrum, E., 2013, ‘Uji Efektivitas Larvasida Ekstrak Daun
Legundi (Vitex trifolia) terhadap Larva Aedes aegypti’, Medical Journal of
Lampung University Volume, 2(4), pp. 52–60.
Centers for Disease Control and Prevention, 2019, Dengue.
https://www.cdc.gov/dengue/ [diupdate tanggal 14 Juli 2020, diakses pada
tanggal 9 November 2019]
Chaieb, I., 2010, ‘Saponins as Insecticides : a Review’, Tunisian Journal of Plant
Protection, Volume 5:39-50 January 18, 2010 Number 1.
Departemen Kesehatan RI, 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan
Obat. Jakarta. 10-11.
Domingues, L. F., Giglioti R., Feitosa, K. A., Fantatto, R. R., Rabelo, M. D., Oliveira,
M. C. D. S., et al., 2013, ‘In vitro activity of pineapple extracts (Ananas
comosus, Bromeliaceae) on Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari :
Ixodidae)’, Experimental Parasitology. Elsevier Inc., pp. 1–5. doi:
10.1016/j.exppara.2013.03.021.
Fadhilla, G., Adnyana, I. K. dan Chaniago, R., 2020, ‘Analgetic Activity of Ethanol
Extract of Ciplukan Leaves (Physalis peruviana L.) on Male Swiss Webster
Mice by Stretching Method’, Jurnal Ilmiah Farmako Bahari, 11(1), pp. 75–
88.
Feeny, P. P., 1968, ‘Effect of Oak Leaf Tannins on Larval Growth of The Winter
Moth Operophtera Brumata’, J Insect Physiol, Volume 14:805–817
December 28, 1967.
Feeny, P., 1970, ‘Seasonal Changes in Oak Leaf Tannins and Nutrients as a
Cause of Spring Feeding by Winter Moth Caterpillars’, Ecology, Volume
51:150–160 Number 4.
Ge, Y., Liu, P., Yang, R., Zhang, L., Chen, H., Camara, I., et al., 2015, ‘Insecticidal
Constituents and Activity of Alkaloids from Cynanchum mongolicum’,
Molecules: 20, pp. 17483–17492. doi: 10.3390/molecules200917483.
42
Hassan, A. dan Othman, Z., 2011, ‘Pineapple (Ananas comosus L. Merr.)’, dalam
Yahia, E. M., 2011, Postharvest biology and technology of tropical and
subtropical fruits: Volume 4 : Mangosteen to white sapote. Woodhead
Publishing Limited, pp. 194–218. doi: 10.1533/9780857092618.194.
Ikbal, C., Mounir, T., Mounia, B., H., K, Habib, B., H., M., 2007, ‘Histological Effects
of Cestrum parqui Saponins on Schistocerca gregaria adn Spodoptera
Littoralis’, Journal of Biological Sciences, 7(1), pp. 95–101.
Interagency Taxonomic Information System, 2020, Aedes aegypti.
https://www.itis.gov/servlet/SingleRpt/SingleRpt?search_topic=TSN&sear
ch_value=126240#null [diupdate tanggal 7 Februari 2021, diakses pada
tanggal 7 Februari 2021).
Juariah, S. dan Irawan, M. P., 2017, ‘Biolarvasida Ekstrak Etanol Kulit Nanas
(Ananas comosus L. Merr) Terhadap Larva Nyamuk Culex Sp.’, Unnes
Journal of Public Health, 6(4), pp. 233–236.
Julianto, T. S., 2019, Fitokimia Tinjauan Metabolit Sekunder dan Skrining
Fitokimia. Yogyakarta: Universitas Islam Indonesia
Kamaraj, C., Bagavan, A., Rahuman, A. A., Zahir, A. A., Elango, G., Pandiyan, G.,
2009, ‘Larvicidal potential of medicinal plant extracts against Anopheles
subpictus Grassi and Culex tritaeniorhynchus Giles ( Diptera : Culicidae )’,
Parasitol Res, 104, pp. 1163–1171. doi: 10.1007/s00436-008-1306-8.
Karimah, L. N., 2006, Uji Aktivitas Larvasida Ekstrak Etanol 96% Biji Mahoni
(Swietenia mahagoni Jacq) terhadap Larva Nyamuk Anopheles aconitus
instar III serta Profil Kromotografi Lapis Tipisnya, Skripsi, Fakultas Farmasi,
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Kementrian Kesehatan Republik Indonesia, 2016, Kendalikan DBD dengan PSN
3M Plus. https://www.kemkes.go.id/article/view/16020900002/kendalikan-
dbd-dengan-psn-3m-plus.html [diupdate tanggal 7 Februari 2016, diakses
tanggal 15 Februari 2020].
Kementrian Kesehatan RepubIik Indonesia, 2017, Situasi Penyakit Demam
Berdarah di Indonesia Tahun 2017, Pusat Data dan Informasi Kementrian
Kesehatan RI, Jakarta.
Marlik, 2017, Monograf Temu Kunci (Bosenbergia Pandurata Roxb) Sebagai
Biolarvasida Aedes. Surabaya: HAKLI Provinsi Jawa Timur.
Matsushita, H., Takenaka, M. dan Ogawa, H., 2002, ‘Porcine Pancreatic␣-
Amylase Shows Binding Activity toward N -Linked Oligosaccharides of
Glycoproteins’, The Journal of Biological Chemistry, 277(7), pp. 4680–4686.
doi: 10.1074/jbc.M105877200.
Mierziak, J., Kostyn, K. dan Kulma, A., 2014, Flavonoids as Important Molecules
of Plant Interactions with the Environment, Molecules: 19, pp. 16240–
16265. doi: 10.3390/molecules191016240.
Mitchell, M. J., Keogh, D. P., Crooks, J. R., Smith S. L., 1993, Effects of Plant
Flavonoids and Other Allelochemicals on Insect Cytochrome P-450
Dependent Steroid Hydroxylase Activity, Insect Biochem. Molec. Biol.,
23(1), pp. 65–71.
Mukhriani, 2014, Ekstraksi, Pemisahan Senyawa, dan Identifikasi Senyawa Aktif,
Jurnal Kesehatan, VII(2), pp. 361–367.
Nelson, M. J., 1986. Aedes aegypti: Biology and Ecology. Washington D.C.: Pan
American Health Organization.
Podolak, I., Galanty, A. dan Sobolewska, D., 2010, Saponins as cytotoxic agents :
a review, Phytochem Rev: 9, pp. 425–474. doi: 10.1007/s11101-010-9183-
43
z.
Pratheeba, T., Ragavendran, C. dan Natarajan, D., 2015, ‘Larvicidal, pupicidal and
adulticidal potential of Ocimum gratissimum plant leaf extracts against
filariasis inducing vector’, International Journal of Mosquito Research, 2(2),
pp. 1–8.
Rohrbach, K. G. dan Apt, W. J., 1986, Nematode and Disease Problems of
Pineapple, Plant Disease: 70(1), pp. 81–87.
Saputra, A. M. dan Fatiqin, A., 2018, Pengaruh Perasan Buah Nanas (Ananas
comosus (L)) terhadap Kematian Larva Instar III Nyamuk Culex spp,
Seminar Nasional Sains dan Teknologi Terapan.
Sayono dan Nurullita, U., 2016, ‘Situasi Terkini Vektor Dengue (Aedes aegypti) di
Jawa Tengah’, Jurnal Kesehatan Masyarakat: 11(2), pp. 97–105. doi:
http://dx.doi.org/10.15294/ kemas.v11i1.3521.
Service, M., 2012, Medical Entomology for Students (5th ed). United States of
America: Cambridge University Press.
Siamtuti, W. S., Aftiarani, R., Wardhani, Z. K., Alfianto, N., Hartoko, I. V., 2017,
Potensi Tannin pada Ramuan Nginang Sebagai Insektisida Nabati yang
Ramah Lingkungan, Bioeksperimen: 3(2), pp. 83-92.
Smith, L. G., 2003, Pineapples, Encyclopaedia of Food Science and Nutrition (2nd
ed). Australia: Elsevier.
Soedarto, 2012, Pengendalian dan Pencegahan Epidemi Dengue, dalam Demam
Berdarah Dengue: Dengue Haemorrhagic Fever. Jakarta: Sagung Seto,
pp. 115–143.
Soedarto, 2016, Buku Ajar Parasitologi Kedokteran: Hand Book of Medical
Parasitology (2nd ed), Jakarta: Sagung Seto.
Sugeng H. S., B. Sinaga, B. Winarso, E. Handayani, I. Karim, Purwanto, Suparno,
dan Triyanto, 2010, 'Pembibitan dan penanaman' dalam S.A. Yomo, S.
Benny, Zulfahmi, W. Putut, Suharyono, dan W. Bambang. Pedoman praktis
budidaya nanas. PT. Geat Giant Pineapple Terbangi Besar Lampung
Tengah. Hal 120–136.
Sulistyono, S., Sukiya dan Aminatun, T., 2018, Uji Efektifitas Ekstrak Etanolik Buah
Nanas (Ananas comosus (L) Merr) Terhadap Mortalitas Larva Anopheles
aconitus, Jurnal Prodi Biologi, 7(6), pp. 388–397.
Tominik, V. I. dan Haiti, M., 2018, Analisis Kematian Larva Nyamuk Aedes agypti
Akibat Pemberian Perasan Buah Nanas (Ananas comosus)’, Jurnal
Kesehatan: 9(3) pp. 412–418.
Upasani, S. M., Korkar, H. M., Mendki, P. S., Maheshwari, V. L., 2003, Partial
characterization and insecticidal properties of Ricinus communis L foliage
flavonoids, Pest Management Science, 59, pp. 1349–1354. doi:
10.1002/ps.767.
Venkadachalam, R., Subramaniyan, V., Palani, M., Subramaniyan, M., Srinivasan,
P., Raji, M., 2017, Mosquito Larvicidal and Pupicidal Activity of Tephrosia
purpurea Linn. ( Family: Fabaceae ) and Bacillus sphaericus against ,
Dengue Vector, Aedes aegypti, Pharmacogn J, 9(6), pp. 737–742.
Wijayati, N., Rini, A. R. S. dan Supartono, 2016, Hand Sanitizer with Pineapple
Peel Extract as Antibacterial against Staphylococcus aureus and
Escherichia coli, Indonesian Journal of Chemical Science: 6(1), pp. 61-66.
Wongs-aree, C. dan Noichinda, S., 2014, ‘Chapter 10. Postharvest Physiology and
Quality Maintenance of Tropical Fruits’ dalam Postharvest Handling.
Bangkok: Elsevier Inc., pp. 275–312. doi: 10.1016/B978-0-12-408137-
44
6.00010-7.
World Health Organization, 2005, Guidelines for Laboratory and Field Testing of
Mosquito Larvicides.
World Health Organization, 2009, Dengue: Guidelines for Diagnosis, Treatment,
Prevention and Control, Switzerland: WHO Press.
Yeragamreddy, P. R., Peraman, R., Chilamakuru, N. B., Routhu, H., 2013, In vitro
Antitubercular and Antibacterial activities of isolated constituents and
column fractions from leaves of Cassia occidentalis, Camellia sinensis and
Ananas comosus, African Journal of Pharmacology and Therapeutics: 2(4),
pp. 116–123.
Yulidar dan Wilya, V., 2015, Siklus Hidup Aedes aegypti pada Skala Laboratorium’,
2(1), pp. 22–28.
Zulhussnain, M., Zahoor, M. K., Rizvi, H., Zahoor, M. A., Rasul, A., Ahmad, A.,
Majeed, H. N., Rasul, A., Ranian, K., Jabeen, F., Insecticidal and Genotoxic
effects of some indigenous plant extracts in Culex quinquefasciatus Say
Mosquitoes. Sci Rep. 2020 Apr 22;10(1):6826. doi: 10.1038/s41598-020-
63815-w. PMID: 32321960; PMCID: PMC7176662.
45
LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Uji Normalitas dan Uji Kruskall Wallis
Tests of Normalityb
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Konsentrasi Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Mortalitas 0.25 .218 4 . .920 4 .538
0.275 .216 4 . .981 4 .908
0.30 .155 4 . .998 4 .995
0.325 .192 4 . .971 4 .850
0.35 .441 4 . .630 4 .001
a. Lilliefors Significance Correction

b. Mortalitas is constant when Konsentrasi = Kontrol_Negatif. It has been omitted.
NPar Tests
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Konsentrasi N Mean Rank
Mortalitas 0.25 4 6.88
0.275 4 10.63
0.30 4 15.13
0.325 4 17.50
0.35 4 22.38
Kontrol_Negatif 4 2.50
Total 24
Test Statisticsa,b
Mortalitas
Chi-Square 21.360
df 5
Asymp. Sig. .001
a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable: Konsentrasi
46
Lampiran 2. Hasil Uji Post Hoc
Mann-Whitney Test
Ranks
Konsentrasi N Mean Rank Sum of Ranks
Mortalitas 0.25 4 2.88 11.50
0.275 4 6.13 24.50
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U 1.500
Wilcoxon W 11.500
Z -1.888
Asymp. Sig. (2-tailed) .059
Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .057b
a. Grouping Variable: Konsentrasi

b. Not corrected for ties.
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.25 4 2.50 10.00
0.30 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.309

47
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.25 4 2.50 10.00
0.325 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.309

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.25 4 2.50 10.00
0.35 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.366

48
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.25 4 6.50 26.00
Kontrol_Negatif 4 2.50 10.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.460

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.25 4 2.88 11.50
0.275 4 6.13 24.50
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Wilcoxon W 11.500
Z -1.888

49
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.275 4 2.88 11.50
0.30 4 6.13 24.50
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Wilcoxon W 11.500
Z -1.888

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.275 4 2.63 10.50
0.325 4 6.38 25.50
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .500
Wilcoxon W 10.500
Z -2.178

50
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.275 4 2.50 10.00
0.35 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.366

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.275 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.460

51
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.25 4 2.50 10.00
0.30 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.309

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.275 4 2.88 11.50
0.30 4 6.13 24.50
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Wilcoxon W 11.500
Z -1.888

52
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.30 4 3.50 14.00
0.325 4 5.50 22.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Wilcoxon W 14.000
Z -1.169

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.30 4 2.50 10.00
0.35 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.366

53
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.30 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.460

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.25 4 2.50 10.00
0.325 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.309

54
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.275 4 2.63 10.50
0.325 4 6.38 25.50
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .500
Wilcoxon W 10.500
Z -2.178

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.30 4 3.50 14.00
0.325 4 5.50 22.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Wilcoxon W 14.000
Z -1.169

55
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.325 4 2.63 10.50
0.35 4 6.38 25.50
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .500
Wilcoxon W 10.500
Z -2.233

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.325 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.460

56
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.25 4 2.50 10.00
0.35 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.366

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.275 4 2.50 10.00
0.35 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.366

57
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.30 4 2.50 10.00
0.35 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.366

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.325 4 2.63 10.50
0.35 4 6.38 25.50
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .500
Wilcoxon W 10.500
Z -2.233

58
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.35 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.530

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.25 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.460

59
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.275 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.460

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.30 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.460

60
Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.325 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.460

Mann-Whitney Test
Ranks
Mortalitas 0.35 4 6.50 26.00
Total 8
Test Statisticsa
Mortalitas
Mann-Whitney U .000
Wilcoxon W 10.000
Z -2.530

61
Lampiran 3. Hasil Analisis Probit
Probit Analysis
Confidence Limits
95% Confidence Limits for 95% Confidence Limits for
Konsentrasi log(Konsentrasi)b
Lower Upper Lower Upper
Probability Estimate Bound Bound Estimate Bound Bound
PROBITa .010 .205 .184 .220 -.688 -.736 -.658
.020 .212 .192 .226 -.674 -.717 -.646
.030 .217 .197 .230 -.664 -.705 -.639
.040 .220 .201 .233 -.657 -.696 -.633
.050 .223 .205 .235 -.652 -.689 -.629
.060 .225 .208 .237 -.647 -.683 -.625
.070 .228 .210 .239 -.643 -.677 -.621
.080 .230 .213 .241 -.639 -.672 -.618
.090 .231 .215 .242 -.636 -.668 -.615
.100 .233 .217 .244 -.633 -.664 -.613
.150 .240 .225 .250 -.620 -.647 -.602
.200 .246 .232 .255 -.609 -.634 -.593
.250 .251 .239 .259 -.601 -.622 -.586
.300 .255 .244 .264 -.593 -.612 -.579
.350 .260 .249 .268 -.585 -.603 -.573
.400 .264 .254 .271 -.578 -.595 -.566
.450 .268 .259 .275 -.572 -.586 -.560
.500 .272 .264 .279 -.565 -.578 -.554
.550 .277 .269 .284 -.558 -.571 -.547
.600 .281 .273 .288 -.552 -.563 -.541
.650 .285 .278 .293 -.545 -.556 -.533
.700 .290 .283 .298 -.537 -.548 -.525
.750 .296 .288 .305 -.529 -.540 -.516
.800 .302 .294 .312 -.520 -.532 -.506
.850 .309 .300 .321 -.510 -.522 -.493
.900 .318 .308 .333 -.497 -.511 -.477
.910 .321 .310 .337 -.494 -.508 -.473
.920 .323 .312 .340 -.491 -.505 -.469
.930 .326 .315 .344 -.487 -.502 -.464
.940 .329 .317 .348 -.483 -.499 -.459
62
.950 .333 .320 .353 -.478 -.495 -.452

.960 .337 .324 .359 -.472 -.490 -.445
.970 .342 .328 .366 -.465 -.484 -.436
.980 .350 .334 .376 -.456 -.477 -.424
.990 .361 .343 .393 -.442 -.465 -.406
a. A heterogeneity factor is used.

b. Logarithm base = 10.
63
Lampiran 4. Ethical Clearance

64
Lampiran 5. Hasil Uji Determinasi Tumbuhan

65
Lampiran 6. Catatan Pengeluaran

Tanggal Kegiatan Dana Keluar
19/06/2020 Pembayaran ethical clearance 75.000
11/09/2020 Transportasi 300.000
11/09/2020 Pembelian sampel nanas 13.000
25/09/2020 Determinasi tumbuhan 100.000
14/10/2020 Label 3.500
14/10/2020 Gelas aqua 32.000
14/10/2020 Lidi 3.000
15/10/2020 Pengeringan dan pembuatan ekstrak nanas 750.000
15/10/2020 Transportasi 300.000
19/11/2020 Sarung tangan 126.000
27/11/2020 Label 10.500
06/12/2020 Gelas plastik 11.000
09/12/2020 Nampan 16.000
07/12/2020 Telur nyamuk 1.387.500
19/03/2021 Pembuatan daftar isi 30.000
8/04/2021 Pembuatan daftar isi 30.000
13/03/2021 Transportasi 300.000
08/04/2021 Biaya penelitian di laboratorium 214.000
07/04/2021 Biaya cetak hardcopy dan CD untuk 285.000
laporan akhir KTI
07/04/2021 Transportasi dan akomodasi 900.000
08/04/2021 Biaya cetak hardcopy dan CD untuk 102.500
laporan hibah
08/04/2021 Pembuatan poster 100.000
Total (Rp) 5.089.000
66
Lampiran 7. Bukti Pengeluaran

67
68
69
70
71
72
73
74
75

Laporan Hibah KTI - Silvi Rahmawati 17711162

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Laporan Hibah KTI - Silvi Rahmawati 17711162

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

PENGARUH EKSTRAK ETANOL KULIT NANAS (Ananas

comosus (L.) Merr.) TERHADAP MORTALITAS PUPA

Hibah Penelitian Karya Tulis Ilmiah

Program Studi Kedokteran

dr. Umatul Khoiriyah, M.Med.Ed., PhD Silvi Rahmawati

dr. Linda Rosita, M.Kes, Sp.PK(K)

HALAMAN JUDUL ........................................................................................ i

Tabel 1 Keaslian Penelitian 3

Gambar 1 Siklus Hidup Nyamuk Aedes aegypti 5

Silvi Rahmawati1, Fitria Siwi Nur Rochmah2

Background: The incidence of Dengue Hemorrhagic Fever (DHF) is still relatively

1.1. Latar Belakang

Pemeriksaan analisis fitokimia yang dilakukan oleh Yeragamreddy et al.

1.2. Rumusan Masalah

1.3. Tujuan Penelitian

1.4. Keaslian Penelitian

1.5. Manfaat Penelitian

b. Manfaat bagi Ilmu Pengetahuan

c. Manfaat bagi Institusi

2.1. Telaah Pustaka

Gambar 1. Siklus Hidup Nyamuk Aedes aegypti (Marlik, 2017)

Gambar 2. Telur Nyamuk Aedes aegypti (CDC, 2019)

kering terkena matahari, banjir, atau meluap karena hujan. Gangguan-

Gambar 3. Larva Nyamuk Aedes aegypti (CDC, 2019)

Gambar 4. Pupa Nyamuk Aedes aegypti (CDC, 2019)

Gambar 5. Nyamuk Dewasa Aedes aegypti (CDC, 2019)

Gambar 6. Segmen Abdominal Bagian Terminal dari Larva Aedes,

Gambar 7. Sisi Lateral Tubuh Pupa (Becker, 2010)

2.1.2. Upaya Pencegahan dan Pengendalian Aedes aegypti

Menurut Kementrian Kesehatan Republik Indonesia (2016), program

2.1.3. Ekstrak Etanol Kulit Nanas (Ananas comosus (L.) Merr.)

Gambar 9. Struktur Morfologi Utama Tanaman Nanas

c. Kandungan Kulit Nanas

2.1.4 Metode Ekstraksi

2.2. Kerangka Teori

Pengendalian dan Pengendalian Aedes

Lingkungan Biologi Kimiawi Mekanik Alami

Ekstrak Etanol Kulit Nanas

-Denaturasi protein (Ameilia I. dan Herdyastuti N, 2017)

Tannin, Flavanoid, Saponin, (Wijayanti, Rini

Mortalitas Pupa Aedes aegypti

Gambar 10. Kerangka Teori

2.3. Kerangka Konsep

Variabel terikat: Variabel Bebas:

Variasi konsentrasi ekstrak Persentase mortalitas pupa

etanol kulit nanas (Ananas Aedes aegypti

comosus (L.) Merr.)

Gambar 11. Kerangka Konsep

3.1. Jenis dan Rancangan Penelitian

3.2. Tempat dan Waktu Penelitian

3.3. Subyek Penelitian

Berdasarkan hasil penghitungan dengan menggunakan rumus Federer,

3.4. Variabel Penelitian

3.5. Definisi Operasional

3.6. Bahan dan Alat Penelitian

3.7. Tahapan Penelitian

3.7.2. Penyediaan Ekstrak Etanol Kulit Nanas

3.7.3. Rearing Pupa Aedes aegypti

3.7.4. Uji Kelarutan

3.7.5. Uji Pupasida Pendahuluan

Jumlah volume larutan asal yang akan diencerkan kemudian dicampur

3.7.6. Uji Pupasida Utama

3.8. Alur Penelitian

Mengajukan ethical clearance