2.

Pada penetapan kadar vitamin B1 dan B6 di dalam sampel serum, dipipet 2 ml sampel
serum, kemudian ditambahkan 2-3 tetes larutan NH4OH 6 N hingga sampel serum mencapai
pH 8. Kemudian ditambahkan 10 ml pelarut organik dan dilakukan ekstraksi selama 5 menit
sehingga didapatkan pemisahan fase air dan fase organik. Dilakukan pengukuran dengan
metode spektrofotometri (metode simultan) terhadap fase organik dan didapatkan hasil
pengukuran absorbansi sebesar 0,765 pada λ=240 nm dan 0,598 pada λ=280 nm. Diketahui E
(1%, 1 cm) vitamin B1 pada λ=240 nm adalah 570 dan pada λ=280 nm adalah 340,
sedangkan E (1%, 1 cm) vitamin B6 pada λ=240 nm adalah 315 dan pada λ=280 nm adalah
585. Hitunglah kadar vitamin B1 dan B6 dalam sampel serum.
Sampel = 2 ml diekstraksi dengan 10 ml pelarut organik
Pengukuran spektrofotometri :
λ 240 nm= 0,765
λ 280 nm= 0,598
 Data A 1%, 1 cm B1
λ 240 nm= 570
λ 280 nm= 340
 Data A 1%, 1 cm B6
λ 240 nm= 315
λ 280 nm= 585
Kadar ?
A240 = A B 1+ A B 6

0,765 = E.C B 1 + E.C B 6

0,765 = 570 . C B 1 + 315 . C B 6 … persamaan 1

A28 0 = A B 1+ A B 6

0,598 = E.C B 1 + E.C B 6

0,598 = 340 . C B 1 + 585 . C B 6 … persamaan 2

0,765 = 570 . C B 1 + 315 . C B 6 x 340

0,598 = 340 . C B 1 + 585 . C B 6 x 570

260,1 = 193.800 C B 1 +107.100 C B 6