Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Jurnal Internasional Penelitian ChemTech

CODEN (AS): IJCRGG ISSN: 0974-4290
Vol.8, No.11 hal 229-236, 2015

Penentuan Spektrofotometri Amlodipine Besylate (AMB) Dalam

Sediaan Farmasi Menggunakan Gresol Red (GR)
Reagen
Rozana Badran1*, Muhammad Jamal Al-Khatib1

Universitas Damaskus, Fakultas Sains, Departemen Kimia,

Damaskus-Suriah.

Abstrak: Metode spektrofotometri sederhana, cepat dan sensitif untuk penentuan amlodipine
besilat (AMB) dalam bentuk murni dan dalam sediaan farmasi telah dikembangkan. Metode yang
diusulkan didasarkan pada pembentukan kloroform berwarna yang dapat diekstraksi pasangan
ion kompleks setara molekul (AMB) dengan gresol merah (GR) dalam buffer pH 2 britton.
Kompleks yang diekstraksi menunjukkan serapan maksimal pada 420nm. Hukum s bir dipatuhi
dalam rentang konsentrasi (1,1-5,5µg.ml-1). Absorptivitas molar adalah 4.4110.104 L.mol- 1.cm-1 dan
sensitivitas Sandell adalah 0,0257 g.cm-2, yang menunjukkan sensitivitas tinggi dari metode yang
diusulkan. Persentase standar deviasi relatif 1,83% mengacu pada akurasi dan presisi tinggi dari
metode yang diusulkan.
Kata kunci: amlodipine besylate, gresol merah, kompleks pasangan ion, analisis
spektrofotometri, sediaan farmasi.

pengantar
Arnlodipine besylate (AMB) adalah agen penghambat bahan kimia saluran kalsium dengan aktivitas
vasodilatasi mirip dengan yang digunakan nifedipine. Hal ini terutama digunakan untuk aktivitas antiaritmia,
antiangina dan antihipertensi (Heynen, 1992)[1]. Secara kimia dikenal sebagai 2-[(2- aminoethoxy)methyl]-4-(2-
chloroprienyl)-1,4- dihydro-6-methyl-3,5-pyridine- dicarboxylicacid,3-ethyl,5 methylesterbesylate (Gbr. .1) [2].
Beberapa metode analitik telah dikembangkan untuk penentuan AMB dalam jumlah besar, formulasi farmasi dan
cairan biologis. Di antara metode analisis yang dilaporkan untuk AMB adalah metode spektrofotometri [3-7],
kromatografi cair kinerja tinggi menggunakan deteksi fluoresensi [8], deteksi UV [9-16] dan LC-MS/MS [17-18]. Dalam
karya ini, sederhana, sensitif, dan metode spektrofotometri ekstraktif yang akurat dijelaskan untuk penentuan AML.
Metode ini didasarkan pada pembentukan kompleks pasangan ion antara obat (AMB) dan gresol red (GR) dalam
buffer pH 2 britton.

567,1 gram. mol-1 : C₂₀H₂₅ClN₂HAI, C₆H₆HAI₃S 2-[(2- aminoetoksi)metil]-4-(2-kloroprienil)-1,4-dihidro- 6-

metil-3,5-piridin- asam dikarboksilat,3-etil,5 metilesterbesilat
Gambar 1. Struktur amlodipine besilat (AMB)
Rozana Badran dkk /Int.J. ChemTech Res. 2015,8(11), hlm 229-236. 230

Bahan dan metode

Peralatan

Semua pengukuran spektral serapan dilakukan menggunakan spektrofotometer UV-Vis Optizen-3220 dengan
Panjang Gelombang Range 200-1100 nm dan Spectral Bandwidth 2 nm dilengkapi dengan sel kuarsa.

Bahan kimia dan reagen

· Tablet AMB (mengandung amlodipine besylate sama dengan 5 mg amlodipine) diperoleh dari (Bahri Labs;
Syria).
· AMB murni (C₂₀H₂₅ClN₂HAI, C₆H₆HAI₃S = 567,1 gram. mol-1) diperoleh dari Sigma-Aldrich (India).
Kemurniannya ditemukan 99,68% menurut (BP&USP Pharmacopia).
· Analitik-reagen gresol red ( GR) diperoleh dari Merck.
· Semua bahan kimia bekas dibeli dari Merck.

Solusi standar

· Larutan stok amlodipine besilat: 10 mg AMB ditimbang secara akurat ke dalam labu ukur 100 ml. 50
ml metanol ditambahkan dan campuran dikocok sampai AMB benar-benar larut. Kemudian larutan
diencerkan sampai 100 ml dengan air suling (100µg/ml) [2].
· Larutan reagen: 382,4 mg GR dilarutkan dalam (etanol: air; 1:1) dan diencerkan hingga 1000ml dengan
air suling (10-3M) [19-20].
· Larutan obat: Dua puluh tablet ditimbang dan dihaluskan hingga menjadi bubuk halus. Sebuah alikuot
yang setara dengan sekitar 5 mg AMB dipindahkan ke dalam labu ukur 100 ml. Suspensi obat dengan 15
ml metanol dan 25 ml air dikocok selama 10 menit dan disaring ke dalam labu ukur 100 ml kedua. Labu
pertama dibilas dengan air 3x10 ml, yang dipindahkan melalui kertas saring yang sama. Solusi akhir
diencerkan sampai 100 ml dengan air suling (50µg/ml) [2].

Prosedur

0,1-1,0 ml larutan standar AMD dipindahkan ke dalam serangkaian labu ukur 10 ml. 3,5 ml GR (1,10-3M)
solusi ditambahkan ke mereka, kemudian 2 ml larutan buffer Britton (pH = 2) ditambahkan ke mereka dan
solusi diencerkan dengan volume dengan air suling. Campuran reaksi diekstraksi dengan (3ml) kloroform
selama 2 menit menggunakan vortex mixer, dan didiamkan selama 5 menit untuk pemisahan lapisan
kloroform. Absorbansi fase kloroform diukur setelah waktu kesetimbangan 10 menit dalam sel kuarsa 1 cm
pada 420 nm terhadap larutan kosong, yang disiapkan sama seperti kompleks kecuali penambahan zat obat.
Plot kalibrasi standar disiapkan untuk menghitung jumlah obat analis dalam sampel yang tidak diketahui.
Warnanya stabil setidaknya selama 24 jam hingga 30 °C.

hasil dan Diskusi

Karakteristik spektral

Mengandung nitrogen kationik, obat yang disebutkan bereaksi dengan GR untuk membentuk kompleks pasangan ion
kuning antara nitrogen dasar obat dalam buffer Britton dan GR Setiap kompleks pewarna obat, dengan dua ion bermuatan
berlawanan, berperilaku sebagai satu unit yang disatukan oleh gaya tarik elektrostatik [21-23]. Kompleks ini secara kuantitatif
diekstraksi ke dalam kloroform. Spektrum penyerapan kompleks pasangan ion AMB-GR kuning yang diekstraksi ke dalam
kloroform dengan maksnya pada 420 nm ditunjukkan pada Gbr.2. Blanko tak berwarna memiliki absorbansi yang praktis dapat
diabaikan.
Rozana Badran dkk /Int.J. ChemTech Res. 2015,8(11), hlm 229-236. 231

Gambar 2. Spektrum absorpsi kompleks AMB-GR

Optimalisasi variabel

Kondisi optimal yang diperlukan untuk pembentukan cepat dan kuantitatif kompleks pasangan ion
berwarna dengan stabilitas dan sensitivitas maksimum ditetapkan oleh sejumlah percobaan awal. Buffer Britton
ditemukan cocok untuk metode GR. Kloroform lebih disukai daripada pelarut lain (Benzena, Diklorometana, dan
Dietil eter) untuk ekstraksi selektif dan kuantitatifnya (Gbr. 3).

Gambar 3. Pengaruh pelarut organik pada absorbansi AMB-GR.

Kondisi optimum ditetapkan dengan memvariasikan satu parameter pada satu waktu sambil menjaga parameter lain
konstan dan mengamati pengaruhnya pada absorbansi pada 420 nm untuk GR. Untuk GR, pengaruh pH dipelajari dengan
mengekstraksi spesies kompleks berwarna pada pH yang berbeda. Absorbansi maksimal diamati pada pH 2 (Gambar 4).
menggunakan 2 mL buffer (Gambar 5).

Gambar 4. Pengaruh pH pada absorbansi AMB-GR.

Rozana Badran dkk /Int.J. ChemTech Res. 2015,8(11), hlm 229-236. 232

Gambar 5. Pengaruh volume buffer pada absorbansi AMB-GR.

Volume 3,5 ml GR (1,10-3M) ditemukan optimal untuk kompleksasi lengkap, karena

absorbansi ditemukan maksimum pada volume yang disebutkan. Pengaruh konsentrasi reagen pada
absorbansi ditunjukkan pada (Gambar 6).

Gambar 6. Pengaruh konsentrasi reagen pada absorbansi AMB-GR.

Hubungan stoikiometri [41]

Rasio stoikiometri obat untuk pewarna dalam kompleks berwarna ditentukan dengan menggunakan rasio
molar dan metode variasi kontinu. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa kompleks 1:1 terbentuk antara
amlodipine dan gresol red. Hal ini terlihat dari data yang ditunjukkan pada (Gbr.7 dan 8).

Gambar 7. metode pekerjaan variasi kontinu kompleks AMB-GR.

Rozana Badran dkk /Int.J. ChemTech Res. 2015,8(11), hlm 229-236. 233

Gambar 8. Metode rasio mol kompleks AMB-GR.

Linearitas dan jangkauan [25-26]

Rentang hukum Beer, absorptivitas molar, sensitivitas Sandell, persamaan regresi, rentang konsentrasi
Ringbom dan koefisien korelasi yang ditentukan untuk metode ini diberikan pada Tabel 1. Hubungan linier
ditemukan antara absorbansi padamaksimal dan konsentrasi obat dalam kisaran (1,1-5,5) g.ml-1 untuk metode GR dalam
volume terukur akhir 10ml (Gbr.9). Analisis regresi plot hukum Beer dimaksimal menunjukkan korelasi yang baik. Grafik
menunjukkan intersep yang dapat diabaikan dan dijelaskan oleh persamaan regresi, A=mC+b (di mana A adalah
absorbansi lapisan 1cm, m adalah kemiringan, b adalah intersep dan C adalah konsentrasi larutan terukur dalam
g.ml-1) diperoleh dengan metode kuadrat terkecil. Absorptivitas molar yang tinggi dari kompleks berwarna yang
dihasilkan menunjukkan sensitivitas metode yang tinggi.

Gambar 9. Rentang linier untuk penentuan AMB dengan membentuk kompleks (AMB-GR) dan ekstraksi dengan
Kloroform

Tabel 1. Data statistik persamaan regresi untuk penentuan AMB dengan metode usulan.

Metode ekstraksi dengan GR Parameter

420 maks, nm
1:1 Rasio stoikiometri
1.1- 5.5 Rentang hukum bir ,(µg.ml-1)
1.1- 3.3 Ringbom con. rentang, (µg.ml-1)
0,071 Batas deteksi, (µg.ml-1)
0,0257 Sensitivitas Sandell (SS), g.cm-2
44110 , L.mol-1.cm-1ε

persamaan regresiA
0,231 Lereng
0,088 - Mencegat
R2 = 0,996 Koefisien korelasi
A Sehubungan dengan A=mC+b, di mana C adalah konsentrasi (µg.ml-1) dan A adalah absorbansi.
Rozana Badran dkk /Int.J. ChemTech Res. 2015,8(11), hlm 229-236. 234

Validasi metode [27-28]

Validitas metode analisis AMB dalam keadaan murni dan formulasinya diperiksa dengan menganalisis
sampel menggunakan prosedur yang diusulkan. Hasil yang diperoleh untuk obat murni diberikan pada Tabel
2. Ketepatan dan akurasi metode diuji dengan menganalisis lima ulangan obat. Nilai deviasi standar relatif
(RSD%) yang rendah menunjukkan presisi dan reproduktifitas metode yang baik. Hasil analisis bentuk sediaan
diberikan pada Tabel 3. Hasilnya dapat direproduksi dengan nilai RSD% yang rendah. Persen pemulihan rata-
rata yang diperoleh adalah kuantitatif (99,09%-102,42%) yang menunjukkan akurasi metode yang baik.

Tabel 2. Penentuan AMB dalam bentuk murni dengan metode GR.α=95% , t = 2,776 , n = 5

Cdiambil , g.ml-1 Cditemukan*, g.ml-1 R% RSD% x ±Dx , g.ml-1

1.65 1.69 102.42 0,59 1,69 ± 0,01
2.2 2.18 99.09 1.83 2.18 ± 0,05
2.75 2,782 101.16 0,40 2,782 ± 0,01
3.3 3.32 100.61 1.81 3,32 ± 0,07
* Rata-rata dari lima penentuan.

Tabel 3. Penentuan AMB dalam Tablet (Amlodipine-Medico5, 5mg/tab) dengan metode GR. =95%, t =
2,776 , n = 5
Cdiambil , g.ml-1 Cditemukan*, g.ml-1 R% RSD% T
2.00 2.02 100.92 1.37 1.62
3,00 3.02 100.3 1.13 1.05
4.00 3.99 99.84 084 1.14
* Rata-rata dari lima penentuan

Aplikasi untuk bentuk sediaan farmasi

Metode yang diusulkan berhasil diterapkan untuk penentuan AMB dalam sediaan farmasi (Amlodipine-
Medico5, 5mg/tab). Penerapan metode yang diusulkan untuk pengujian obat yang dipelajari dalam formulasi
farmasi diperiksa dengan menganalisis berbagai sampel dan hasilnya ditabulasikan pada Tabel 4. Hasilnya
dapat direproduksi dengan nilai RSD% yang rendah. Persen pemulihan rata-rata baik, menunjukkan akurasi
yang baik dari perbandingan metode yang diusulkan dengan metode farmakope.

Tabel 4. Penentuan AMB dalam Tablet dengan Metode Usulan dan Metode Farmakope.

Amlodipin- metode farmakope metode yang diusulkan

Medico5, Cditemukan*,mg/tab R% RSD% Cditemukan*,mg/tab R% RSD%
5mg/tab 5.07 101,51 0.73 5.03 100.53 1.13
* Rata-rata dari lima penentuan

Kesimpulan

Metode yang diusulkan sederhana, akurat, tepat dan cepat. Oleh karena itu, pendekatan ini dapat
dipertimbangkan untuk analisis Amlodipine di laboratorium kendali mutu. Metode yang diusulkan
menggunakan reagen sederhana, yang dapat dibeli oleh laboratorium analitik biasa. Metode cukup sensitif
untuk memungkinkan penentuan bahkan hingga 0,071 g.ml-1. Sensitivitas dalam hal absorptivitas molar dan
presisi dalam hal RSD% metode ini sangat cocok untuk penentuan Amlodipine fumarat dalam bentuk murni
dan sediaan. Aditif yang umum digunakan seperti pati, laktosa, titanium dioksida dan magnesium stearat tidak
mengganggu prosedur pengujian.
Rozana Badran dkk /Int.J. ChemTech Res. 2015,8(11), hlm 229-236. 235

Referensi

1. Bennett, PN & Brown, MJ, 2003. Farmakologi Klinis, Elsevier 9th, diterbitkan dengan pengaturan dengan
Limited, Oxford, Inggris.
2. British Pharmacopeia., 2005. Her Majest s Stationary Office Ltd, London.
3. Alizadeh, A., Hemati, F., 2014. Metode spektrofotometri untuk penentuan amlodipine besilat dalam bentuk
murni dan sediaan menggunakan 7,7,8,8-tetracyanoquinodimethane dan tetracyanoethylene, Buletin
Fakultas Farmasi, Vol. 52, hal.109-114.
4. Belal, T., Mahrous, M., 2014. Campuran antihipertensi yang mengandung amlodipine besilat bersama dengan
candesartan atau telmisartan. Pendaran, Vol. 29, No. 7, hlm. 893-900.
5. Derayea, S., Askal, H., 2012. Penentuan spektrofotometri Amlodipine Besylate dalam formulasi
Farmasi melalui formulasi kompleks biner dengan eosinY, Journal of Applied Pharmaceutical
Science, Vol. 2, No.6, hal.84-89.
6. Ramesh, D., Ramakrishina, S., 2010. Metode Spektrofotometri Baru untuk Penentuan Simultan
Amlodipine Besylate dan Kalsium Atorvastatin dalam bentuk sediaan tablet, International Journal
of Pharmacy and Pharmaceutical Science, Vol. 2, Nomor 4.
7. Sirikatitham, A., Panrat, K., Tanmanee, N., 2008. Penentuan amlodipine dalam plasma manusia dengan
metode ionisasi elektrospray LC-MS/MS: validasi dan studi stabilitasnya, Songklanakarin Journal of
Science and Technology, Vol. 30, hlm. 455-462.
8. Tatar, S., Atmaca, S., 2001. Penentuan amlodipine dalam plasma manusia dengan kromatografi
cair kinerja tinggi dengan deteksi fluoresensi, Jurnal Kromatografi B: Ilmu dan Aplikasi
Biomedis, Vol. 758, Edisi. 2, hal. 305-310.
9. El-Gizawy, S., Abdelmageed, O., 2012. Pengembangan Validasi Metode HPLC untuk Penentuan
Simultan Valsartan, Amlodipine Besylate, Hydrochlorothiazide dalam Bentuk Dosis dan Spiked
Human Plasma, American Journal of Analytical Chemistry, Vol. 3, hal. 422-430.
10. Abu-nameh, E., Abu-shandi, K., 2011. Pengembangan Validasi Metode HPLC untuk Penentuan
Simultan Valsartan, Amlodipine Besylate dalam bentuk murni dan sediaan, Jordan Journal of
Pharmaceutical Science, Vol. 4, No.2, hal.84-89.
11. Jothieswari, D., Anandakumar, K., 2010. Validasi Metode RP-HPLC untuk Penentuan Simultan
Amlodipine Besylate, Valsartan dan Hydrochlorothiazide dalam Formulasi Massal dan
Farmasi, Jurnal Ilmu Farmasi dan Biomedis, ISSN. TIDAK. 2230-7885.
12. Safeer, K., Anbarasi, B., 2010. Pengembangan metode analisis dan validasi amlodipine dan
hidroklorotiazid dalam bentuk sediaan gabungan oleh RP-HPLC, International Journal of ChemTech
Research,Vol.2,Issue.1,pp.21- 25.
Priyanka, R., Sachin, U., Pandurang, N., 2009. Estimasi Simultan Ramipril dan Amlodipine dengan Metode
Spektrofotometri UV, J. Farmasi. dan Teknologi, Vol. 2, Masalah. (2(, hlm. 304-307.
13. Çelebier, M., Sinan Kaynak, M., Altınöz, S., 2008. Pengembangan Metode HPLC Validasi: Analisis
Simultan Amlodipine dan Valsartan dalam Sampel untuk Hati, Jurnal Universitas Hacettepe
Fakultas Farmasi , Vol. 28, No. 1, hal. 15-30.
14. Yuanyuan, M., Feng Qin, X., Xiumei, Lu., 2007. Penentuan dan studi farmakokinetik amlodipine
dalam plasma manusia dengan kromatografi cair kinerja ultra-spektrometri massa ionisasi
elektrospray, Jurnal Analisis Farmasi dan Biomedis, Vol. 43, No. 4, hlm. 1540-1545.
15. Naidu, KR., Kale, UN., Shingare, MS., 2005. Stabilitas menunjukkan metode RP-HPLC untuk penentuan
simultan amlodipine dan benazepril hidroklorida dari produk obat kombinasi mereka, Pharm Biomed
Anal, Vol. 39, hlm. 147-155.
16. Zarghi, A., Foroutan, S., 2005. Metode HPLC yang divalidasi untuk penentuan amlodipine dalam plasma
manusia dan penerapannya pada studi farmakokinetik, Il Farmaco, Vol. 60, Edisi 9, hlm. 789-792
17. Chitlange, SS., Kiran Bagri, DM., 2008. Stabilitas Menunjukkan Metode RP-HPLC untuk Estimasi
Simultan Valsartan dan Amlodipine dalam Formulasi Kapsul, Asian J. Research Chem, Vol. 1,
hal.15-18.
18. Chaudhari, BG., Patel. NM., 2007. Stabilitas menunjukkan metode RP-HPLC untuk penentuan
simultan atorvastatin dan amlodipine dari produk obat kombinasi mereka, Chem Pharm Bull
(Tokyo), Vol. 55, hlm. 241-246.
19. Indeks Merchandise
20. ChemDat, 2002. Basis Data Kimia Merck, dalam CD-ROM, Ver.1 Internasional, Merck KGaA,
Darmstadt, Jerman
Rozana Badran dkk /Int.J. ChemTech Res. 2015,8(11), hlm 229-236. 236

21. Muller P., 1994. Daftar istilah yang digunakan dalam kimia organik fisik, Apel Murni. Kimia, 66(5), 1126,
1077-1184.
22. Moss G,P., Smith PAS, Tavernier D., 1995. Daftar nama kelas senyawa organik dan intermediet
reaktif berdasarkan struktur, Pure Appl. Kimia, 67(8-9), 131307-1375.
23. Mcnaught AD, Wilkinson A.(Ed), 1997. Ringkasan terminologi kimia IUPAC, 2dan Edn.
24. Vocburgh, WC, Cooper, GR, 1941. Ion Kompleks. Identifikasi Ion Kompleks dalam Larutan dengan
Pengukuran Spektrofotometri, J. Amer. Kimia Soc., 63, 437-442.
25. Paul, C.Sadek., Panduan Pelarut HPLC, Edisi Kedua, hlm. (5-10).
26. Morell, B., 1983. Analis, 108, hal. 870-879.
27. Nalimov, VV, 1963. Penerapan Statistik Matematika untuk Kimia, Pergamon Press, Oxford,
H. 189.
28. Holscher HH, Buku Pegangan Metode Analisis Statistik Sederhana, Ujian dan Tabel, 1stED.
Massachusetts, Buku Cahners, hal. 234.

*****