HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Analisis kualitatif
 Persentase hasil
Persentase hasil ekstrak aseton air dari kulit akar Clerodendrum infortunatum ditemukan
1,5%.
 Analisis Fitokimia
Skrining fitokimia ekstrak aseton air dari kulit akar menunjukkan adanya tanin dan
fenol. Tanaman memiliki molekul pemulung radikal bebas seperti vitamin, terpenoid,
asam fenolik, tanin, flavonoid, kuinon, kumarin dan alkaloid yang memiliki sifat
antioksidan yang menjanjikan. Senyawa ini membuat tumbuhan menjadi sumber obat
yang kaya.

 Uji presipitasi protein

Endapan buram diamati dalam bentuk cincin di sekitar sumur yang diolah dengan
ekstrak aseton encer. Kemampuan untuk mengendapkan protein adalah ciri khas tanin.
Mereka dapat berikatan silang dengan protein berserat karena sifat polimeriknya.
Endapan buram mengkonfirmasi adanya tanin di kulit akar

 Kromatografi lapis tipis

Bintik yang mengandung ekstrak aseton berair tetap berada pada asal ketika pelat KLT
dikembangkan dalam toluena: aseton: asam format (60/60/10) sebagai fase gerak dan
difumigasi dengan uap iodium. Asam tanat referensi bermigrasi dari asalnya dan dapat
divisualisasikan sebagai pita diskrit. Ini menegaskan tanin sebagai komponen fitokimia
hadir dalam ekstrak aseton air.

B. Analisis Kuantitatif
 Uji Folin-denis
Jumlah tanin dihitung dengan uji Folin-denis dan dinyatakan sebagai absorbansi ekstrak
aseton berair meningkat dengan peningkatan konsentrasi. Ini sesuai dengan standar
asam tanat. Kandungan tanin total dari ekstrak aseton air ditemukan 166,6 + 5,607 mg
setara asam tanat / g ekstrak kering. mg setara asam tanat / g ekstrak kering

 Metode difusi radial

Ekstrak pada semua konsentrasi protein yang diendapkan dalam gel yang dapat dilihat
sebagai cincin di sekitar sumur. Diameter cincin tampaknya meningkat dengan
meningkatnya konsentrasi ekstrak. Dari kurva standar asam tanat, jumlah tanin dalam
ekstraet ditemukan 163,75 + 7,5 mg setara asam tanat / g ekstrak kering.

 Penentuan selektif tanin kental atau terhidrolisis

 Dalam metode modifikasi difusi radial, cincin pengendapan tidak diamati pada ekstrak
yang diberi pereaksi hidroksilamina hidroklorida sedangkan ekstrak yang tidak diberi
perlakuan menunjukkan cincin endapan di sekitar sumur. Perlakuan tanin terhidrolisis
dengan hidroksilamina hidroklorida menghasilkan hidrolisis ikatan ester, yang
kemudian terurai menjadi poliol inti dan hidroksamat dari asam fenolat (asam galat dan
asam ellagic). Fenolat ini tidak dapat mengendapkan protein dalam metode difusi
radial. Tanin kental tidak terpengaruh oleh hidroksilaminolisis. Ini menunjukkan
adanya tanin terhidrolisis dalam ekstrak.

 Pengujian Antioksidan
Sejumlah besar penyakit disebabkan karena efek gratis yang merusak radikal dan
spesies oksigen dan nitrogen reaktif. Antioksidan mengais molekul-molekul ini
sebelum menyerang tubuh dan dengan demikian melindungi dari penyakit. Saat ini
minat terhadap antioksidan alami telah meningkat karena toksisitas yang terkait dengan
obat sintetis

 Mengurangi daya
Tanin terisolasi menunjukkan daya reduksi yang signifikan yang meningkat dengan
meningkatnya konsentrasi. Hasil tersebut menunjukkan kurva dosis-respons untuk daya
reduksi tanin. Daya reduksi tanin mungkin karena adanya gugus hidroksil fenol, yang
memiliki kemampuan mendonor hidrogen. Sebelumnya dilaporkan bahwa senyawa
fenolik mengais radikal bebas dengan mekanisme transfer elektron.

 Aktivitas pembersihan radikal DPPH

Tanin yang diisolasi menunjukkan aktivitas pemulungan radikal tergantung konsentrasi.
Persentase penghambatan radikal meningkat pada kisaran konsentrasi 1,95-31,25 µg /
ml, setara dengan 1,95-31,25 µg / ml asam askorbat. Nilai IC50 tanin juga
menunjukkan potensi antioksidannya. Efek antioksidan dalam DPPH dapat dikaitkan
dengan kemampuan mendonasikan hidrogennya.

 Aktivitas antioksidan total

Tanin terisolasi menunjukkan aktivitas antioksidan efektif yang ditemukan sebesar
242,5 ± 8,216 mg asam askorbat ekuivalen / g ekstrak kering. Aktivitas antioksidan
tanin mungkin disebabkan adanya gugus fenolik. Senyawa polifenol dilaporkan
dipamerkan aktivitas antioksidan, yang mungkin disebabkan oleh sifat redoks, donor
hidrogen dan pemadam oksigen tunggal yang terlibat dalam menyerap dan menetralkan
radikal bebas. Tanin sebelumnya dilaporkan memiliki aktivitas antioksidan yang
signifikan.

 Kemampuan reduksi besi

 Kemampuan reduksi besi dari tanin diperkirakan dengan reaksi terkait redoks.
Antioksidan bertindak sebagai reduktor dan mereduksi tripyridyltriazine besi menjadi
kompleks besi dengan warna biru intens dan dinyatakan sebagai ekuivalen mmol dari
FeSO, dan dihitung dari plot standar FeSO4. Ini adalah reaksi yang bergantung pada
pH. Kemampuan reduksi tanin ditemukan sebesar 314,67 + 13,57 mmol FeSO4
ekuivalen per gram ekstrak kering, meskipun lebih kecil bila dibandingkan dengan asam
askorbat. Ini menunjukkan bahwa mereka mampu mendonasikan elektron ke radikal
bebas untuk membuatnya stabil.

 Efek antiproliferatif tanin terhadap garis sel kanker usus besar

Kanker tetap menjadi salah satu penyebab utama kematian di dunia. Kanker usus besar,
juga dikenal sebagai kanker kolorektal atau usus, yang ditandai dengan pertumbuhan sel
yang tidak terkendali di usus besar dan rectum. Hal ini disebabkan karena kurangnya
agen kemoterapi yang efektif dan efek samping yang terkait dengan yang sudah ada.
Paparan sel kanker usus besar terhadap tanin menunjukkan penurunan yang signifikan
dalam konversi MTT yang terbukti dari penurunan absorbansi. Pembelahan cincin
tetrazolium di MTT melibatkan mitokondria suksinat dehidrogenase dan tergantung
pada aktivitas rantai pernapasan dan keadaan redoks mitokondria. Jumlah sel yang
hidup berkurang dengan meningkatnya konsentrasi tanin yang diisolasi. Pada
konsentrasi 100 µg / ml, lebih dari separuh sel ditemukan mati oleh efek sitotoksik
tanin. Sel-sel diperiksa di bawah mikroskop dan ditemukan memiliki fitur struktural
yang menjadi ciri hilangnya viabilitas. Semua yang dirawat sel menunjukkan tingkat
sitotoksisitas yang berbeda. Penyusutan sel, agregasi, pembulatan sel dan kematian sel
terlihat, tergantung pada konsentrasinya. Sel ditemukan terlepas dari permukaan.
Perubahan morfologi ini juga menunjukkan efek sitotoksik dari tanin.

KESIMPULAN

Tanin dari kulit akar Clerodendrum infortunatum dapat bertindak sebagai antioksidan dan agen
antikanker karena Tanin yang diisolasi dari kulit akar Clerodendrum infortunatum memiliki
aktivitas antioksidan yang signifikan. Daya pereduksi tanin meningkat dengan meningkatnya
konsentrasi. Mereka menunjukkan kemampuan untuk mengais radikal DPPH dan aktivitas
antioksidan total yang signifikan. Radikal bebas terlibat dalam patogenesis banyak penyakit dan
dengan demikian pemulung radikal bebas dapat memberikan efek perlindungan dari kondisi
tersebut. Dalam pandangan ini, efek antiproliferatif dari tanin dievaluasi dan menunjukkan
sitotoksisitas yang signifikan terhadap garis sel HCT-15.