49-56
1
Wardinal, 2Safika dan 3Yulia Sari Ismail
1
Program Studi Magister Biologi FMIPAUniversitas Syiah Kuala; 2Departemen Ilmu Penyakit Hewan
dan Kesehatan Masyarakat Vateriner, Fakultas Kedokteran Hewan IPB Bogor Indonesia;
3
Jurusan Biologi FMIPAUniversitas Syiah Kuala
Email: wardinalbiologi@gmail.com
ABSTRAK
Bakteri Asam Laktat (BAL) selama ini sudah banyak digunakan sebagai probiotik dan manfaat
lainnya yang baik bagi kesehatan manusia maupun hewan. Genus Lactobacillus terdiri atas banyak
spesies yang digunakan untuk fermentasi dan pengawet makanan. Dari 106 spesies Lactobacillus, 56
diantaranya berpotensi sebagai probiotik. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan
mengidentifikasi BAL genus Lactobacillus yang diisolasi dari feses orangutan sumatera (Pongo
abelii) liar di Stasiun Penelitian Suaq Belimbing Aceh Selatan. Sampel yang digunakan dalam
penelitian ini adalah feses orangutan Sumatera (Pongo abelii) Liar di Stasiun penelitian Suaq
Belimbing Aceh Selatan. Isolasi bakteri di lakukan menggunakan media selektif yaitu de Man Rogosa
Sharpe Agar (MRSA). Koloni yang tumbuh pada media MRSA di amati morfologinya dan dilakukan
pewarnaan Gram serta dilakukan uji biokimia dengan mengguanakan KIT API 50 CHL. Analisis data
menggunakan program komputer Apiwebᵀᴹ Version V-5.2. Hasil identifikasi menunjukan bahwa
isolat OUL merupakan spesies Lactobacillus delbrueckii ssp delbrueckii, dengan identity 93,8 %.
Berdasarkan hal tersebut dapat disimpulkan bahwa terdapat BAL pada feses orangutan Sumatera
(Pongo abelii) Liar di Stasiun penelitian Suaq Belimbing Aceh Selatan terdapat Genus Lactobacillus.
ABSTRACT
Lactic Acid Bacteria (LAB) has many benefits for human and animal health and has been widely used
as a probiotic. One of the LAB is the genus Lactobacillus which consists of many species used for
fermentation and food preservation. This study was conducted to isolate and identify the LAB of the
genus Lactobacillus from the faeces of wild Sumatran Orangutan (Pongo abelii) at the Suaq
Belimbing Research Station in South Aceh. Bacterial isolation was carried out using Man Rogosa
Sharpe Agar (MRSA). Colonies that grew on MRSA media were observed for morphology and were
Gram stained. Biochemical tests were conducted using KIT API 50 CHL. Data analysis used the
Apiweb computer program Version V-5.2. The results showed that the OUL isolate was a species of
Lactobacillus delbrueckii ssp delbrueckii, with an identity of 93.8%. Based on this, it can be
concluded that there is a Lactic Acid Bacteria of the Lactobacillus in the faeces of wild Sumatran
Orangutan (Pongo abelii) at the Suaq Belimbing Research Station in South Aceh.
PENDAHULUAN
akteri asam laktat (BAL) telah lama Vagococcus dan Weissella yang memiliki
dikenal sebagai kelompok bakteri yang morfologi, pH, suhu optimum, toleransi garam,
menguntungkan. Pemanfaatannya sangat habitat serta potensi patogenitas yang berbeda
luas baik untuk pangan maupun pakan. Bakteri [1]. Lactobacillus merupakan genus terbesar
Asam Laktat terdiri dari genus Lactobacillus, dalam kelompok BAL dengan hampir 80 spesies
Lactococcus, Leuconostoc, Streptococcus, berbeda. Jenis Lactobacillus dapat dibedakan
Enterococcus, Pediococcus, Melissococcus, atas dua kelompok yaitu bersifat
Carnobacterium, Oenococcus, Tetragenococcus, homofermentatif dan heterofermentatif. Spesies
[49]
Wardinal, dkk
[51]
Wardinal, dkk
Pewarnaan Gram
Identifikasi mikroskopis dilakukan dengan
cara pengamatan langsung di bawah mikroskop
untuk mengamati morfologi dari sel BAL.
Identifikasi BAL secara mikroskopis dilakukan
dengan menggunakan pewarnaan Gram.
Gambar 1. Koloni BAL yang tumbuh pada
Pewarnaan Gram digunakan untuk mengetahui
media MRSA, A= pengenceran
morfologi sel bakteri serta untuk membedakan
10-4, B= pengenceran 10-5
bakteri Gram positif (warna ungu) dan Gram
Proses isolasi dilakukan dengan teknik negatif (warna merah). Perbedaan warna
goresan.Kultur tumbuh terpisah diinokulasikan disebabkan oleh perbedaan komposisi dinding
pada media agar MRS dengan metode gores dan sel. Menurut Campbel et al. (2008) bakteri
diinkubasi pada inkubator dengan suhu 37 ºC Gram positif memiliki dinding sel yang lebih
selama 24 jam. Koloni BAL tunggal yang sederhana dengan jumlah peptidoglikan yang
relatif banyak, sedangkan bakteri Gram negatif
tumbuh dimurnikan kembali dengan cara
memiliki peptidoglikan yang lebih sedikit dan
menginokulasikan kembali koloni ke dalam
lebih komplek secara struktural, dengan
media MRS Agar secara goresan, kemudian
membran luar yang mengandung
diinkubasi kembali pada inkubator.
lipopolisakarida (karbohidrat yang berikatan
Hasil isolasi didapatkan koloni BAL yang dengan lipid) [19]. Hasil pewarnaan Gram bisa
tumbuh secara terpisah/tunggal. Tahap dilihat pada Gambar 2.
selanjutnya dilakukan dentifikasi makrokopis Berdasarkan hasil pewarnaan Gram
dengan mengamati langsung morfologi koloni terhadap isolat yang sudah identifikasi secara
yang meliputi bentuk (circular, irregular, makrokopis didapatkan sel yang berbentuk
spindle, filamentous, rhizoid), tepian (entire, batang (basil) dan berwana ungu. Hal ini sesuai
lobate, undulate, serrate felamentous, curled), dengan ciri BAL yang merupakan kelompok
elevasi (flat, raised, convex, umbonate), dan bakteri Gram positif yang disatukan oleh
[52]
Identifikasi Lactobacillus sp pada Orangutan Sumatera (Pongo abelii) Liar Menggunakan KIT API 50 CHL…
[53]
Wardinal, dkk
delbrueckii ssp delbrueckii dan Lactobacillus organik, hidrogen peroksida, bakteriosin, dan
salivarius termasuk dalam kelompok komponen lainnya. Bakteriosin merupakan suatu
homofermentatif, sedangkan Lactococcus lactis péptida antimikroba yang dihasilkan bakteri
ssp lactis juga dikelompokkan dalam kelompok asam laktat selama fase pertumbuhan
homofermentatif [22]. eksponensial yang dalam jumlah yang cukup,
Genus Lactobacillus terdiri atas banyak dapat membunuh atau menghambat bakteri lain
spesies yang digunakan untuk fermentasi dan yang berkompetisi dalam ekologi yang sama
pengawet makanan. Dari 106 spesies [25]. BAL dapat menghasilkan molekul yang
Lactobacillus, 56 diantaranya berpotensi sebagai menarik di antaranya adalah gamma amino
probiotik [23]. Beberapa probiotik dari genus butirat (GABA) exopolysaccharides (EPS),
Lactobacillus anatara lain L. achidophilus, L. fructooligosaccharides (FOS), asam lemak
casei, L delbruecki, L. reuteri, L. brevis, L. rantai pendek (SCFA), asam linoleat
cellobiosus, L. curvatus, L. fermentum, L. terkonjugasi (CLA), dan selenoprotein. Selain
plantarum, L. paracasei, L. farmicinis dan L. itu BAL juga diketahui sebagai probiotik, anti
jonsoni [24]. oksidan, anti kanker prostat, pengurang
Selama pertumbuhannya, BAL dapat kolesterol, imunomodulator, memodulasi fungsi
memproduksi komponen metabolit, seperti asam imunologi, anti-inflamasi dan pro inflamasi [1].
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dengan Lactobacillus delbrueckii ssp delbrueckii
menggunakam KIT API 50 CHL dapat terdapat pada feses orangutan Sumatera (Pongo
disimpulkan bahwa koloni bakteri asam laktat abelii) Liar di Stasiun Penelitian Suaq
genus Lactobacillus dengan spesies Belimbing Aceh Selatan.
DAFTAR PUSTAKA
[1] Pessione E. 2012. Lactic Acid Bacteria Journal Vet School Universitas
Contribution to Gut Microbiota Brawijaya Vol. 1.
Complexity: Lights and Shadows. [6] Syahputra, Y. 2015. Isolasi Bakteri Asam
Journal Frontiersin Cellular and Laktat (BAL) pada Feses orangutan
Infection Microbiology, Volume 2 : 1- Sumatera (Pongo abelii) di Kebun
15. Binatang Bukittinggi Sumatera Barat,
[2] Adams, M.R and M.O. Moss. 2008. Food Skripsi. Fakultas Kedokteran Hewan
Microbiology. 3rd ed. The Royal Universitas Syiah Kuala, Banda Aceh.
Society of Chemistry Publishing, UK. [7] Hajar S., Safika., Darmawi., Sary W. N.,
[3] Havenaar, R. B.T . Brink, and J.H.J. In't Rahmi E., Syahputra Y., Nurliana.,
Veld. 1992. Selection of strains for Rinidar. 2016. Characterization of
probiotic use. In : Probiotics, The Lactic Acid Bacteria (LAB) Origin
Scientific Basis. Ed. Fuler, R. Chapman Sumatran Orangutan (Pongo abelii) In
& Hall, London . pp. 209-224. Zoo Bukittinggi Based On Analysis 16
[4] Tannock, G.W. 2002. Probiotics and S rRNA. Int. Journal. Trop. Vet.
prebiotics. Where are we going?. Biomed. Res.2:6-14.
Norfolk, UK: Caister Acad Press. [8] Septiarini, W.E. 2011. Aktivitas
[5] Prasthani I. H.P., Masdiana C Pandaga, Antimikroba Bakteri Asam Laktat
Dyah A. Oktavianie. 2012. Isolasi dan (BAL) yang Diisolasi dari Feses
Karakterisasi Bakteri Asam Laktat Asal Orangutan (Pongo pygmaeus) terhadap
Feses Orangutan (Pongo Pygmaeus) Penghambatan Pertumbuhan Bakteri
Sebagai Kandidat Probiotik. Student
[54]
Identifikasi Lactobacillus sp pada Orangutan Sumatera (Pongo abelii) Liar Menggunakan KIT API 50 CHL…
Enterik patogen secara In Vitro. [14] IUCN. 2017. IUCN. Red List of
Skripsi. Universitas Brawijaya. Malang. Threatened Species. Version 3 May
[9] Qaida Minati, Arman Sayuti, Idawati 2017. www.iucnredlist.org.
Nasution. 2014. Interpretasi Ukuran [15] Rahmi E., Agustina D dan Jamin F. 2014.
Jantung Orangutan Sumatera (Pongo Isolasi dan Identifikasi Genus
abelii) Berdasarkan Foto Rontgen Salmonella dan Shigelladari Feses
Toraks Di Pusat Karantina Orangutan Orangutan Sumatera (Pongo abelii) di
Sumatera Utara. Jurnal Medika Pusat Reintroduksi Orangutan Jantho,
Veterinaria Vol. 7, No. 2 ; 409-417. Jurnal Medika Veterinaria Vol. 8 No.
[10] Nater, A., M.P. Greminger, A. Nurcahyo, 1; 5-8.
M.G. Nowak, M. de Manuel Montero, [16] Purwani, E., S.W.N. Hapsari, dan R. Rauf.
T. Desai, C.P. Groves, M. Pybus, T.B. 2009. Respon hambatan bakteri gram
Sonay, C. Roos, A.R. Lameira, S.A. positif dan negatif pada ikan nila
Wich, J. Askew, M. Davila-Ross, G.M. (Oreochromis niloticus) yang
Fredriksson, G. de Valles, F. Casals, J. diawetkan dengan ekstrak jahe
Prado-Martinez, B. Goossens, E.J. (Zingiber officinale). Jurnal Kesehatan.
Verschoor, K. S. Warren, I. Singleton, 2(1): 61-70.
D. A. Marques, J. Pamungkas, D. [17] Widyastuti Y., Sofarianawati E. 1999.
Perwitasari-Farajallah, P. Rianti, A. Karater Bakteri Asam Laktat
Tuuga, I.G. Gut, M. Gut, P. Enterococus sp. yang Diisolasi Dari
OrozcoterWengel, C.P. van Schaik, J. Saluran Pencernaan Ternak. Jurnal
Bertranpetit, M. Anisimova, A. Scally, Mikrobiologi Indonesia, Vol 4 NO. 2 :
T. Marques-Bonet, E. Meijaard, and M. 50-53.
Krützen. 2017. in press. Morphometric, [18] Sya’baniar L., Erina, Sayuti A. 2017.
behavioural, and genomic evidence for Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam
a new orangutan species. Current laktat (BAL) Genus Lactobacillus Dari
Biology. Feses Orangutan Sumatera (Pongo
[11] Rijksen, H.D., Meijaard, E. 1999. Our abelii) di Kebun Binatang Kasang
Vanishing Relative: The status of Wild Kulim Bangkinang Riau. JIMVET.
Orang-utans at the close the Twentieth 01(3): 351-359.
Century. Kluwer Academic Publisher, [19] Campbell, N. A. & J. B. Reece. 2008.
Dordrecht. Biologi, Edisi Kedelapan Jilid 3.
[12] Singleton, I., Wich, S., Husson, S., Terjemahan: Damaring Tyas
Stephens, S., Atmoko, S.U., Leighton, Wulandari. Jakarta: Erlangga.
M., Rosen, N., Traylor-Holzer, K., [20] Salminen, S., Atte Von W., Arthur O.
Lacy, R. & Byers, O. (eds.). 2004. 2004. Lactic Acid Bacteria
Orangutan Population and Habitat Microbiological and Functional
Viability Assessment: Final Report. Aspects Third Edition. Revised and
IUCN/SSC Conservation Breeding Expanded, Marcel Dekker, Inc., New
Specialist Group, Apple Valley, MN. York.
[13] Wich, S.A, Meijaard, E., Marshall, A.J, [21] Winarno FG, Ahnan WW, Widjajanto W.
Huson, S., Ancrenaz, M., Robert, C.L., 2003. Flora Usus dan Yoghurt. Bogor
van Schaik, C.P., Sugardjito, J., (ID): M-BRIO Pr. hlm 9-17.
Simorangkir, T., Kathy, T.H, Doughty, [22] Holzapfel, W.H. and Wood, B.J.B. (2004)
M., Supriatna, J., Dennis, R., Gumal, Lactic Acid Bacteria Biodiversity and
M., Knott, C.D., & Singleton, I. 2008. Taxonomy. John Wiley and Sons, Ltd.,
Distribution and conservation status of United Kingdom.
the orang-utan (Pongo spp) on [23] Otieno, D.O. 2011. Biology of Prokaryotic
Kalimantan and Sumatera: 43(3) : 329- Probiotics, In Probiotics, Microbiology
339. Monographs (M.T. Liong, ed.) pp. 1-
25.Springer-Verlag. Berlin.
[55]
Wardinal, dkk
[56]