PERTANYAAN

1. Kenapa memilih judul tersebut?

Jawab. Karena banyaknya tumbuhan yang memiliki khasiat sebagai obat salahsatunya yaitu
tumbuhan Merdeka. Pada penelitian yang sebelumnya dilakukan oleh agbor 2019 mengatakan
bahwa kombinasi dari ekstrak daun Merdeka ini dan dikombinasikan dengan ocimum
gratissimum menunjukkan adanya aktivitas gastroprotektif namun belum ada yang meneliti
dengan dosis tunggal menggunakan daun Merdeka saja.
Oleh karena itu saya menggunakan dosis tunggal berupa chromolaena odorata untuk melihat
aktivitas sebagai gastroprotektor

2. Kenapa melihat indeks tukak ratio proteksi dan gambaran histopatoologi?

Jawab untuk melihat aktivitas gastroprotektif dari suatu senyawa dapat menggunakan
parameter indeks tukak, ratio proteksi dan juga gambaran histopatologi malbung tikus.

3. Kenapa menggunakan daun merdeka?

Jawab. Karena tumbuhan merdeka itu sendiri merupakan salah satu tumbuhann liar yang sering
dikenal sebagai gulma, namun demikian tumbuhan ini memiliki kandungan metabolit sekunder
seperti alkaloid, flavonoid steroid, tannin, saponin yang dimana telah dilakukan penelitian
bahwa tumbuhan merdeka memiliki khasiat diantaranya sebagai anntidiabetes, antimikroba,
antipiretik, penyembuhan luka, dan memiliki aktifitas sebagai gastroprotektif, namun
penelitian tumbuhan merdeka sbg gastroprotektif baru dilakukan dg dosis kombinasi, belum
dilakukan dengan dosis tunggal. Oleh karena itu saya memilih daun merdeka pada penelitian
ini untuk mengetahui aktivitas gastroprotektornya.

4. Kenapa tukak lambung ga penyakit generative lain?

Jawab. baik sebelumnya noval ingin berbagi pengalaman, bahwa terdapat keluarga noval yang
menderita penyakit lambung dan mengonsumsi daun merdeka ini dan memberikan pengaruh
yang baik.
Penyakit gastritis merupakan salah satu penyakit yang banyak diderita oleh masyarakat.
Terdapat 1,8-2,1 juta kasus setiap tahun di seluruh dunia (Andari dan Yulianda, 2021).
Berdasarkan data sepuluh penyakit terbanyak di Kota Bengkulu, penyakit gastritis menempati
peringkat ke tiga dengan angka morbiditas yakni 12.856 kasus (9,9%), setelah ISPA dan
penyakit kulit (Dinkes Kota Bengkulu, 2017). Apabila penyakit ini dibiarkan dapat
menyebabkan kematian.
Noval telah membaca riset bahwa daun merdeka memang sudah terbukti memiliki aktivitas
sebagai gastroprotektor, namun masih dalam dosis kombinasi, belum secara tunggal. Hal inilah
yang menyebabkan noval berencana untuk meneliti aktivitas gastroprotektif daun merdeka
dengan dosis tunggal.
5. Kenapa menggunakan tikus? Kenapa yg jantan, kenapa galur wistar?
Jawab Penggunaan tikus putih sebagai hewan uji dikarenakan tikus putih memiliki
melabolisme yang menyerupai atau hampir mirip dengan manusia , selain itu tikus putih telah
dikenal sebagai model hewan percobaan yang baik, mudah ditangani, dapat diperoleh dalam
jumlah besar, dan memberi hasil nilai ulangan yang dapat dipercaya (Gelfand, 2002).
Pemilihan galur wistar dikarenakan tikus wistar mempunyai kemampuan metabolisme yang
relatif cepat sehingga lebih sensitif bila digunakan dalam penelitian yang berhubungan dengan
metabolism tubuh (Aminah,2004). Menurut Pujiatiningsih (2014), penggunaan tikus putih
jantan sebagai binatang percobaan dapat memberikan hasil penelitian yang lebih stabil karena
tidak dipengaruhi oleh adanya siklus menstruasi dan kehamilan seperti pada tikus putih betina.
Tikus putih jantan juga mempunyai kecepatan metabolisme obat yang lebih cepat dan kondisi
biologis tubuh yang lebih stabil dibanding tikus betina.

6. Kenapa diinduksi etanol, kenapa 96%

Jawab. Etanol mempunyai daya penetrasi yang kuat dan cepat ke lapisan mukosa lambung
yang menimbulkan kerusakan epitel. Etanol menginduksi kerusakan mukosa lambung melalui
produksi radikal bebas sebagai produk metabolisme. Reactive Oxygen Species (ROS)
merupakan salah satu produk radikal bebas yang dapat menyebabkan kegagalan system
antioksidan endogen.
Menurut penelitian yang dilakukan oleh Usman pada tahun 2016 bahwa Etanol terbukti
mampu menginduksi kerusakan mukosa paling berat dibanding agen ulserogenik lainnya
misalnya indometasin dan asam klorida (HCL) (Usman, 2016)
Kenapa etanol 96% karena Pemberian etanol 96% dapat menyebabkan kerusakan mukosa
lambung yang lebih parah dibandingkan dg pemberian et 70%. Hal ini diperkuat oleh
penelitian Widyaningsih et 2018 bahwa Pemberian etanol 96% dapat menyebabkan kerusakan
mukosa lambung dimana dapat dilihat dengan bentukan tukak pada lambung pada bagian
bawah epitel disertai dengan diskontinuitas lapis keratin, erosi, edema submukosa, hemorrhagi
dan kongesti.

7. Penelitian sebelumnya, daun apa, dosis, efektif ngga?

Jawab. penelitian sebelumnya baru membahas mengenai gambaran histopatologinya blm
termasuk indeks tukak dan ratio proteksinya. kombinasi daun merdeka dan daun selasih,
dengan dosis 250 dan 500 mg/KgBB dengan rasio 1:1 menunjukkan aktivitas gastroprotektif

8. Mengapa menggunakan dosis 100, 200, 400?

Jawab. karena penetiliaan sebelumnya oleh agbor 2019 bahwa dengan dosis kombinasi 500
mg/KgBB menunjukkan aktivitas gastroproptektif. Oleh karena itu pada penelitian ini ingin
melihan aktifitas gastroprotektif dengan dosis tunggal pada dosis dibawah 500 mg/KgBB.
9. Kenapa menggunakan sukralfat sebagai control positif?
Jawab. karena penelitian ini merupakan peenelitian yang bertujuan untuk melihat aktivitas
gastroprotektifnya, gastroprotektif itu sendiri adalah kemampuan suatu senyawa untuk
melindungi mukosa lambung. Dimana sukralfat itu sendiri termasuk kedalam obat penyakit
lambung yang memiliki mekanisme melindungi mukosa lambung. Oleh karena itu pada
penelitian ini menggunakan sukralfat sebagai pembanding atau control positifnya.
Pada penelitian ini menggunakan sukralfat sebagai pembanding yang merupakan polimer
bioadhesif yang mempercepat penutupan luka pada tukak pengamatan tukak lambung dan
tukak duodenum melalui pembentukan kompleks dengan eksudat proteinaceus yang
menempel pada tukak. Kompleks ini menutupi tukak dan melindungi dari serangan asam,
pepsin dan garam empedu lebih lanjut

10. Kenapa dilakukan 14 hari?

Jawab
11. Kenapa induksi etanol dilakukan dihari terakhir?
Jawab. induksi etanol dilakukan di hari terakhir perlakuan dikarenakan pada penelitian ini
bertujuan untuk melihat aktivitas gastroprotektifnya yaitu kemampuan untuk melindungi
mukosa, sehingga tikus diberikan treatment menggunakan ekstrak daun merdeka terlebih
dahulu yang kemudian diinduksi etanol.

12. Kenapa pake kloroform untuk euthanasia?

Jawab. penggunaan kroroform sebagai agen euthanasia sebelum dilakukannya pembedahan
dikarenakan kloroform memiliki khasiat anestesi yang kuat dan lebih baik daripada nitrous
oxide. Dari segi ekonomi penggunaan kloroform akan lebih efektif dibandingkan dengan yang
lain karena kloroform memiliki harga yang lebih murah.

13. Metode eksperimental

Jawab. Penelitian eksperimen merupakan pendekatan ilmiah terhadap
suatu penelitian dimana satu atau lebih variabel bebas diaplikasikan kepada satu atau lebih
variabel terikat untuk kemudian mengukur efeknya. metode penelitian
eksperimen adalah metode penelitian kuantitatif yang digunakan untuk mengetahui
pengaruh variabel independen (treatment/perlakuan) terhadap variabel dependen (hasil) dalam
kondisi yang terkendalikan.

14. Variable pengertian

Jawab. Variabel bebas atau independent variable adalah variabel yang mempengaruhi, atau
yang menjadi sebab perubahan dari adanya suatu variabel dependen (terikat). Variabel
bebas biasanya dinotasikan dengan X. Variabel terikat atau variable dependent diartikan
sebagai variabel yang dipengaruhi, akibat adanya variabel bebas.
15. Kenapa ektrasi dg maserasi
Jawab. ekstraks itu sendiri berarti pemisahan. Pemisahan atau penarikan senyawa metabolit
sekunder ini dilakukan dengan cara maserasi hal ini dikarenakan Metode maserasi pada
penelitian inipraktis, aman dan efektif yang bertujuan untuk menghindari rusaknya senyawa
aktifpada sampel yang tidak tahan panas seperti flavonoid, tannin, dan saponin (Dewi et
al 2016).
Maserasidilakukan dengan cara merendam sampelpada pelarut organik kemudian ekstrakcair
dibebaskan dari pelarutnya denganmenggunakan vacum rotary evaporator.

16. Kenapa menggunakan pelarut etanol 96 bukan 70

Jawab. Pelarut yang digunakan sesuai dengan tingkat kepolaran golongan senyawa yang ingin
diambil. senyawa yang ingin pisahkan yaitu alkaloid, flavonoid, tannin, saponin, steroid
dimana bersifat polar Sehingga pelarut yang digunakan adalah etanol yang bersifat polar juga.

17. Mengapa menggunakan nacmc bukan metilselulosa?

Jawab. Natrium Karboksimetil Selulosa (Na-CMC) merupakan suatu senyawa turunan
selulosa yang berperan sebagai suspending agent untuk meningkatkan
kestabilan suspensi. Na-CMC bekerja dengan mekanisme meningkatkan viskositas atau
kekentalan sediaan.

18. Kenapa ditimbang sebanyak 3 kali? Kenapa ga sekali aja?

Jawab: Penimbangan dilakukan untuk mengetahui perkembangan berat badan tikus, dimana
bertujuan untuk menyesuaikan dosis agar terkontrol, Yang diharapkan dapat memberikan efek
yang maksimal

19. Parameter dari pengamatan tukak?

Jawab. pengamatan tukak dilakukan oleh 3 orang dengan 5 lapang pandang untuk menhindari
bias. Lambung diamati apakah terdapat tukak atau tidak, ditandai dengan adanya luka, lesi
seperti hyperemia, hemmoreage, dan erosi

20. Data apa yg dianalisis spss

Jawab. data yang dianalisis adalah data kuantitatif berupa data indeks tukak dan ratio proteksi
tukak.

21. Data normal dan data tidak normal apa bedanya

22. Seberapa efektif tumbuhan ini dg obat yang beredar
Jawab. Secara bahan daun merdeka cukup mudah didapatkan sehingga dapat menurunkan
biaya produksi, berdasarkan penelitian terdahulu yang dilakukan oleh agbor 2019 bahwa
 tumbuhan merdeka dalam dosis kombinasi dengan tumbuhan selasih ini mampu menunjukkan
aktivitas sebagai gastroprotektor dengan dosis 250 dan 500 mg/KgBB. Dimana aktivitas
tersebut dikaitkan dengan senyawa flavonoid, alkaloid, tannin, saponin dan juga steroid yang
dimilikinya. Oleh karena itu pada penelitian dengan dosis tunggal tumbuhan merdeka ini
diharapkan dapat efektif menunjukkan aktivitas gastriprotektifnya.

23. Apakah penelitian ini lebih baik dari obat lain

Jawab. berdasarkan penelitian terdahulu yang dilakukan oleh agbor tahun 2019, kombinasi
chromolaena odorata dan ocimum graticimum ini lebih baik dibandingkan dengan control
positif berupa omeprazole.

24. Kelebihan dg obatan pasaran

Jawab. kelebihan dari penggunaan daun merdeka sebagai gastroprotektif ini yaitu merupakan
alternative tradisional yang diharappkan memiliki efek samping yang lebih rendah
dibandingkan dengan obat sintesis, dan daun merdeka ini cukup mudah didapatkan sehingga
akan menurunkan kebutuhan ekonomi.

25. Kenapa memilih tikus dengan ukuran 150-200 gr? Harus segitu?
Jawab. Pemilihan tikus dengan berat badan 150-200 g ini dikarenakan pada berat badan
tersebut tikus berada pada kondisi normal tidak mengalami kekurangan atau kelebihan berat
badan yang dimungkinkan akan membengaruhi absorbs maupun metabolism obat atau ekstrak
daun merdeka yang diberikan.

26. Apa yang dilihat pas Identifikasi tumbuhan?Kenapa memilih daun? Kenapa ga batang, akar
dll?
Jawab. Identifikasi tumbuhan bertujuan untuk mengetahui jenis tumbuhan yang akan
digunakan sebagai sampel pengujian. Apakah tumbuhan yang digunakan sesuai atau tidaknya.
Kenapa daun? Karena metabolit sekunder paling banyak ditemukan di daun, oleh karena itu
menggunakan bagian daun sebagai sampelnya.

27. Jelaskan ttg uji anova dan uji kruskal wallis, cara pengujian ataupun parameter
Jawab. Analysis of Varian atau Anova adalah salah satu uji komparatif yang digunakan untuk
menguji perbedaan mean (rata-rata) data lebih dari dua kelompok.
Uji Kruskal Wallis adalah uji nonparametrik berbasis peringkat yang tujuannya untuk
menentukan adakah perbedaan signifikan secara statistik antara dua atau lebih kelompok
variabel independen pada variabel dependen yang berskala data numerik (interval/rasio) dan
skala ordinal (pengganti Anova one Way). sedangkan Mann Whitney U Test adalah uji non
parametris yang digunakan untuk mengetahui perbedaan median 2 kelompok bebas apabila
skala data variabel terikatnya adalah ordinal atau interval/ratio tetapi tidak berdistribusi normal
28. Kandungan metabolit mana yg berpotensi sbg antidiabet dll
Jawab. senyawa metabolit sekunder dapat menunjukkan aktivitasnya sebagai antidiabetes,
amti mikroba dll dengan mekanismenya masing masing, misalnya seperti flavonoid
Flavonoid sebagai antidiabetes flavonoid yang mampu menangkap radikal bebas yang merusak
sel β-pankreas, dimana kemampuan tersebut setara dengan glibenklamid (13) sebagai kontrol
positif yang dapat menurunkan kadar glukosa dalam darah tanpa terjadi efek hipoglikemik
(Widharna dkk., 2010; Widharna dkk., 2015).
Flavonoid sebagai antibakteri Mekanisme kerja flavonoid sebagai senyawa antibakteri dibagi
menjadi 3 yaitu menghambat sintesis asam nukleat, menghambat fungsi membran sel dan
menghambat metabolisme energi (Hendra, 2011 dalam Rijayanti, 2014).
Flavonoid sebagai antioksidan Mekanisme antioksidan dari flavonoid adalah menangkap
ROS secara langsung, mencegah regenerasi ROS, dan secara tidak langsung dapat
meningkatkan aktivitas antioksidan enzim antioksidan seluler (Akhlaghi dan Bandy 2009).
Jadi dari beberapa kandunngan metabolit sekunder yang dimiliki oleh tumbuhan merdeka
berpotensi memiliki banyak khasiat.

29. Bagaimana cara mengamati gambaran histopatologi parameter

Jawab. pengamatan gambaran histopatologi lambung tikus diawali dengan pembuatan preparat
histopatologiknya terlebih dahulu sdengan fiksasi, dehidrasi, penjernihan atau dealkoholisasi,
infiltrasi, penanaman, pemotongan, pewarnaan,pelabelan sesuai dengan kelompok perlakuan.
Setelah preparat histopatologi siap selanjutnya dilakukan pengamatan menggunakan
mikroskop dengan perbesaran 40x. Lensa objektif 4x X 10x lensa okuler. dimana lambung
yang tidak normal ditandai dengan adanya kerusakan pada jaringan, susunan jaringan yang
tidak utuh, dan juga pelepasan sel atau erosi.