PRESENTASI PRAKTIKUM BIOKIMIA

2016

ISOLASI DAN PEMURNIAN AWAL ENZIM AMILASE

h : Faris Ashabul Yamin, Lia Wijayanti,
Dwi Ari Fitri Haryati, Nurul Lativah
Nova Rifki R. dan Patrezia Diah Ayu Paminto

Asisten : Leni Diah Putri

(24030113120044)

UNIVERSITAS DIPONEGORO

ENZI
M

Enzim
amylase

Isolasi dan
pemurnian
awal

UNIVERSITAS DIPONEGORO

Tujuan

Prinsip

Metode

Memperoleh enzim -amilase dari

sumber organisme melalui pemurnian
tahap awal.

Pemurnian protein tahap awal yang

didasarkan pada pengendapan protein
dengan cara salting-out

Fraksinasi dan sentrifugasi

UNIVERSITAS DIPONEGORO

Isolasi dan Pemurnian Enzim amylase

METODE PERCOBAAN
- Alat
1. Tabung reaksi
2. Blender
3. Gelas bekker
4. Magnetik stirer
5. Pipet tetes
6. Spatula

- Bahan
1. Pisang
2. Amilum
3. Akuades
4. Larutan Iodin

6. Gelas ukur
7. Sentrifuge
8. Penangas es
9. Botol vial
10. Kain

5. Buffer fosfat
6. Ammonium sulfat ((NH4)2SO4)

UNIVERSITAS DIPONEGORO

UNIVERSITAS DIPONEGORO

Isolasi Enzim -amilase

Sentrifugasi
Teknik sentrifugasi adalah suatu teknik pemisahan
yang dilakukan berdasarkan partikel dalam medan
gaya sentrifugal. Partikel yang berbeda dalam
berat jenis, ukuran, dan bentuk akan mengendap
searah dengan gaya sentrifugal dengan kecepatan
yang berbeda

UNIVERSITAS DIPONEGORO

Pemurnian Awal Enzim -amilase

Reaksi uji positif enzim amylase
CH2OH

CH 2OH

OH

+ H2O

OH

enzim amilase

water
O

OH

OH

2-(((4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-(methoxymethyl)tetrahydro-2H pyran-3-yl)methoxy)methyl)-6-(hydroxymethyl)-5-(methoxymethyl)-5methyltetrahydro-2H-pyran-3,4-diol

CH2 OH
O OH

OH

Iiodide

OH
OH

6-(hydroxymethyl)tetrahydro-2H -pyran2,3,4,5-tetraol

UNIVERSITAS DIPONEGORO


Reaksi pemecahan (hidrolisis) amilum
menjadi glukosa

UNIVERSITAS DIPONEGORO

Kesimpulan

1. Isolasi enzim -amylase dapat dilakukan dengan

metode fraksinasi dan sentrifugasi.
2. Pemurnian awal enzim - amylase menggunakan
prinsip salting out dan fraksinasi dilakukan secara
bertahap dengan penambahan ammonium sulfat.
3. Sampel pisang terbukti mengandung enzim
amylase yang ditandai dengan terbentuknya warna
ungu pekat yang lebih pudar daripada larutan kontrol
yang berwarna biru pekat.
UNIVERSITAS DIPONEGORO

Gambar hasil percobaan

2
3
1
Keterangan :
Blanko aquades
Fraksi I
Fraksi II

2
1

Keterangan :
1 Blanko aquades
2 Fraksi I
3 Fraksi II

UNIVERSITAS DIPONEGORO