PENDAHULUAN

Baru-baru ini, isolasi antioksidan alami dari sumber

tanaman telah meningkat secara signifikan karena
antioksidan sintetis seperti Butylated Hydroxy Anisole
(BHA), Butylated Hydroxy Toluene (BHT) dan Tersier
Butil Hydro kuinon (TBHQ ) yang diduga memiliki
khasiat terhadap kerusakan hati dan carcinogenesis.
Tanaman mengandung berbagai macam zat seperti
alkaloid, terpenoid, fenolat, flavonoid, vitamin C,
vitamin E, xanthophylls, karoten, glikosida, pitosterol
dan tanin yang memiliki antioksidan, antiproliferatif
antimikroba, anti-inflamasi, imunomodulator dan
anti aktivitas diabetes.
Lanjutan
teknik spektroskopi analitis seperti Nuclear Magnetic
Resonance Spectroscopy (NMR), Liquid
Chromatography electrospray Ionisasi Mass
Spectroscopy (LC-ESI-MS) dan Fourier Transform
Infrared Spectroscopy (FT-IR) memainkan kunci
peran dalam identifikasi dan karakterisasi prinsip
bioaktif yang memiliki antioksidan, antimikroba dan
aktivitas antiproliferatif.
Tujuan penelitiaan
UNTUK PEMURNIAN DAN KARAKTERISASI
SENYAWA BIOAKTIF DARI EKSTRAK METANOL
DAUN MILLINGTONIA Hortensis LINN.
BAHAN DAN METODE
BAHAN
1. DAUN MELATI POHON
2. METANOL
3. HEKSANA KLOROFORM
4. ETIL ASETAT
LANJUTAN
METODE
1. PEMBUATAN EKSTRAK DAUN MELATI POHON
daun segar dari Millingtonia hortensis dikumpulkan
dalam kantong steril dan dibawa ke laboratorium.
Ekstraksi senyawa bioaktif mentah Daun segar dicuci
dengan air keran dan kemudian dibersihkan dengan air
suling dan dikeringkan selama seminggu. Kemudian
daun kering yang digilling menjadi bubuk halus dengan
menggunakan lesung dan alu. Ekstrak kering dan bubuk
halus daun Millingtonia hortensis (300 g) diekstraksi
dengan metanol selama 48 jam dengan Soxhlet extractor
menghasilkan 45.6g dari ekstrak kasar.
LANJUTAN
2.METODE PEMURNIAAN EKSTRAK DAUN MELATI POHON.
A. METODE TLC ( KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS)
fase diam menggunakan silica gel, dan fase gerak engunakan
kombinasi pelarut asetat kloroform-etil dan etil asetat.
Pemurnian senyawa bioaktif menggunakan Kolom Silica Gel .ekstrak
mentah daun melati pohon sebagai target pemisahan silica gel untuk
memisahkan ekstrak kedalam fraksi komponen meningkatkan
polaritas digunakan sebagai fase gerak dalam metanol untuk
memvisualisasikan tempat dan dibiarkan pada udara kering selama
5 menit. Kemudian lempeng kromatografi dipanaskan pada 110oC
sampai bintik muncul.
Kaca Kolom (80cm panjang dan 5cm diameter) digunakan
untuk pemurnian senyawa bioaktif. kemudiaan Sebuah
plug kapas ditempatkan di bagian bawah kolom dan
kolom tetap berdiri vertikal menggunakan klem.
Kemudian 1/3 rd kolom disemprotkan dengan n-heksana
. Sementara itu, silika gel dengan ukuran mata jaring 230-
400 diaktifkan dengan menempatkan lebih dari 110oC
dalam oven Selama semalam. Dan hasil darai fraksi
dikumpulkan dan di uji kembali menggunakan HPLC.
B. HPLC
HPLC digunakan untuk memisahkan aktivitas senyawa
antimikroba ,antioksidan. Semua fraksi yang terkumpul
dengan meggunakan uji MMT dimana ekstrak metanol
ditriturasi dengan silika gel dan dimuat kekolom. Dan
dengan menggunakan HPLC DAN BANTUAN PELARUT
ELUSI EKSTRAK DILAKUKAN . (HPLC) sistem secara
bertahap meningkatkan polaritas menggunakan HPLC
(Agilent 1100 seri) dengan solusi LC heksana, kloroform,
etilasetat dan metanol. Dengan rasio sebagai berikut
kemurnian semua dikumpulkan n-heksana:
 kloroform 100: 0, 75:25, 50:50 dan fraksi dengan single
tempat dalam analisis TLC. 20 ml 25:75; kloroform: etil
asetat 100: 0, 75:25, dari sampel disuntikkan menggunakan
Hamilton suntik 50:50 dan 25:75; etil asetat dan metanol
(Bonaduz schweiz). Asetonitril: air: formic 100: 0, 75:25,
50:50, 25:75 dan 0: 100. 10 Asam (60: 40: 1) campuran
disaring melalui 0,2 ml fraksi dikumpulkan dan sasaran
filter membran mikron dan digunakan sebagai ponsel TLC.
Fraksi dielusi denganbintik-bintik yang berbedafase pada
kecepatan aliran 0,5 ml / menit. Dan didapatkan hasil
adalah fraksi s6 yang akan diidentifikasi struktur kimia
yang didapat dari hplc dengan spektro FTIR YANG
MENDAPAT HASIL C6H1206( KARBOHIDRAT)
HASIL DARI IDENTIFKASI FTIR