Pengembangan stabilitas dari

metode indikasi
 PENDAHULUAN

Kualitas data analisis yang dihasilkan pada sampel stabilitas

sangat penting untuk menyelesaikan keberhasilan dalam studi
stabilitas dan kemampuan untuk menarik kesimpulan yang tepat
mengenai stabilitas produk yang akan diuji. Karena tujuan dari studi
stabilitas adalah untuk memantau kemungkinan perubahan suatu
produk atau material dari waktu ke waktu dan pada kondisi
penyimpanan yang berbeda, diharapkan bahwa semua metode
analisis yang diterapkan dalam penelitian harus menunjukkan
stabilitas dan hanya metode yang benar-benar stabil.

2
 Studi Degradasi Paksa

• degradasi paksa biasanya melibatkan paparan sampel perwakilan dari zat obat atau produk obat
dengan kondisi tekanan yang relevan cahaya, panas, kelembaban, hidrolisis asam / basa, dan
oksidasi.
• Percobaan ini berperan penting dalam proses pengembangan obat. Hasil studi degradasi paksa
dapat memfasilitasi pengembangan SIM, desain perumusan obat, pemilihan kondisi penyimpanan
dan pengemasan, pemahaman yang lebih baik dari potensi kimia molekul obat, dan penyelesaian
masalah terkait stabilitas.
• Studi ini mengungkapkan bahwa sebagian besar perusahaan melakukan beberapa jenis studi
degradasi paksa, tetapi praktik perusahaan sangat bervariasi dalam hal bagaimana dan kapan studi
dilakukan.
• Bagian ini berfungsi untuk menggambarkan peran penting dari studi degradasi paksa dengan
menggambarkan praktik umum yang digunakan oleh industri.
• Rinciannya termasuk protokol penelitian umum, deskripsi eksperimen yang diperlukan untuk zat obat
dan produk obat, kondisi uji spesifik, dan garis waktu yang disarankan untuk melakukan studi relatif
terhadap tahap pengembangan obat.

3
 Pendekatan eksperimental untuk Studi
Degradasi Paksa
Yang paling umum untuk melakukan studi degradasi paksa, disusun sesuai dengan
jenis bahan uji (zat obat, produk obat padat atau cair) dan jenis degradasi
(hidrolisis, oksidasi, dll.).

Kondisi untuk Pengujian tegangan

• Overstressing dapat merusak senyawa atau dapat menyebabkan degradasi lebih

lanjut dari degradasi primer yang relevan.
Konsentrasi tekanan obat dalam larutan sampel dapat mempengaruhi
tingkat target degradasi yang akhirnya tercapai. Konsentrasi sampel yang lebih
encer umumnya menghasilkan degradasi yang lebih luas daripada larutan yang lebih
pekat, Oleh karena itu, menurunkan konsentrasi obat dapat membantu untuk
meningkatkan degradasi bila diperlukan.

4
 Hidrolisis Asam dan Basa Zat Obat dalam
Larutan
Degradasi hidrolisis dilakukan dengan menggunakan larutan HCl dan NaOH, Jika
senyawa tersebut tidak larut dalam air, co-pelarut organik dapat digunakan dalam
kombinasi dengan asam atau basa. Tekanan biasanya pertama kali dimulai pada suhu
kamar; jika tidak terjadi degradasi,tinggi Suhu diterapkan (50–70◦C). Kontrol termal (yaitu,
obat dalam larutan netral pada suhu tegangan yang sama) juga harus dijalankan untuk
mengidentifikasi degradasi karena suhu saja. Waktu tegangan maksimum tidak boleh
melebihi 7 hari. Sampel uji yang terdegradasi sering dinetralkan menggunakan asam / basa
/ penyangga untuk menghindari dekomposisi lebih lanjut. Namun, jika degradasi
kesetimbangan berbasis pH, ini dapat menghilangkan degradasi yang diinginkan. ketika
melakukan stress testing, harus memperhatikan terhadap kemungkinan reaksi samping
yang dapat mempengaruhi obat, misalnya, metanol harus dihindari untuk senyawa yang
mengandung -CO2H, -CO2R, kelompok amida.

5
 Oksidasi

Oksidasi dapat dilakukan dengan menggunakan beberapa kondisi . Hidrogen

peroksida adalah oksidan yang paling umum digunakan. Konsentrasi hidrogen peroksida dapat
disesuaikan seperlunya untuk mendapatkan degradasi 5-20%. Salah satu kerugian
menggunakan H2O2 adalah bahwa ia tidak selektif dan relatif tidak dapat diprediksi dalam
hasil-hasilnya. Tekanan dengan hidrogen peroksida sering menyebabkan degradasi sekunder
dari degradasi primer membuat interpretasi hasil lebih sulit. Pemrakarsa radikal seperti AIBN
(2,2-azobis isobutyronitrile), ACVA (azobis-cyan valeric acid), dan AMPD (azobis metil
propionamidine dihidroklorida) adalah pilihan yang lebih baik untuk studi oksidasi, tetapi lebih
jarang digunakan. Mereka umumnya lebih selektif daripada peroksida dan dapat digunakan
untuk mengkonfirmasi atau membatalkan hasil peroksida. Suhu yang tepat untuk reaksi adalah
40◦C. Tes dapat dihentikan setelah 5-20% degradasi atau setelah 7 hari jika tidak ada degradasi
yang diamati.

6
Mekanisme Reaksi / Jalur Degradasi

Mekanisme reaksi umum dari degradasi kimia senyawa

farmasi termasuk hidrolisis, oksidasi, isomerisasi /
epimerisasi, dekarboksilasi, penataan ulang, dimerization /
polimerisasi, fotolisis, dan reaksi dengan eksipien dan bentuk
garam.

7
 Pertimbangan Khusus dalam Melakukan Pengujian Tekanan

Stabilitas Stereokimia

Degradasi kimia dapat mempengaruhi pusat kiral. Metode

pengotor / degradasi mungkin atau tidak cukup untuk menilai stabilitas
stereokimia tergantung pada jumlah pusat kiral. Obat-obatan dengan satu
pusat kiral harus dianalisis dengan metode kiral untuk menilai konten
stereoisomer. Obat-obatan dengan dua atau lebih pusat kiral kemungkinan
besar akan diubah menjadi diastereomer sehingga analisis akiral harus
cukup, menyediakan stereoisomer yang dipisahkan dengan baik oleh
HPLC achiral.

8
 Polimorfisme
Bentuk fisik dari API dapat mempengaruhi stabilitas fisik
dan kimia. potensi untuk perbedaan stabilitas kimia antara
polimorf menunjukkan bahwa studi degradasi paksa (hanya
yang dilakukan dalam keadaan padat) harus diulang ketika
bentuk baru polimorfik maju selama pengembangannya.
Kekhawatiran pada stabilitas API pada produk obat dan
dokumen menyarankan melakukan percobaan untuk
memahami efek potensial bahwa bentuk polimorfik dapat
memiliki stabilitas produk pada obat.

9
 Obat Kombinasi

Produk obat yang mengandung lebih dari satu bahan aktif harus
diserahkan ke pengujian tegangan dan dinilai untuk produk degradasi yang
dihasilkan oleh interaksi obat-obat dan obat-obat. Degradasi dari masing-masing
bahan aktif biasanya dikarakterisasi dengan baik oleh waktu pengembangan
produk kombinasi dimulai dan degradasi paksa dari masing-masing API mungkin
tidak perlu diulang. Dalam satu contoh (tablet kombinasi atorvastatin dan
amlodipine), tablet itu sendiri, di samping masing-masing obat secara terpisah,
diserahkan ke degradasi paksa, maka mengevaluasi degradasi tambahan yang
mungkin disebabkan oleh reaksi antara dua zat aktif tsb.
The Power of PowerPoint |
thepopp.com
10
 Karakterisasi Degradasi

Jalur degradasi primer perlu ditetapkan sebagai bagian dari karakterisasi penuh
zat obat baru. Dalam prakteknya, degradasi primer yang diperoleh dalam kondisi
bertekanan sering diidentifikasi. Keputusan untuk mengisolasi dan / atau
mengkarakterisasi produk degradasi harus didasarkan terutama pada hasil yang
diperoleh dari studi stabilitas formal dari substansi obat dan produk obat bila
memungkinkan. Hanya puncak yang terjadi pada atau di atas ambang identifikasi ICH
dari studi stabilitas formal dari substansi obat dan produk obat perlu diidentifikasi.

The Power of PowerPoint |

thepopp.com
11
 Stabilitas Menunjukkan Pengembangan Metode HPLC

Seperti yang dibahas dalam pendahuluan, definisi yang diterima dari SIM untuk
farmasi tradisional (molekul kecil) adalah metode kromatografi (atau pemisahan lainnya),
mampu memisahkan degradasi yang dilaporkan yang dihasilkan pada penyimpanan
jangka panjang dari produk. Secara tradisional, kualitas menunjukkan stabilitas metode
ini ditunjukkan dengan menggunakan sampel stres atau sampel stabilitas jangka panjang.
Jika metode tunggal digunakan untuk kontrol kualitas dan stabilitas API, metode ini juga
harus dapat memisahkan kotoran yang berhubungan dengan proses. Stress testing bukan
satu-satunya jalan yang tersedia untuk mengevaluasi validitas metode penentuan
stabilitas. Jika tersedia, sampel yang berusia alami atau sampel terdegradasi lainnya
mungkin lebih representatif dari degradasi produk.
The Power of PowerPoint |
thepopp.com
12
 Sifat fisiko-kimia dari Obat-obatan
Informasi tentang senyawa dan formulasi (potensial) sangat penting dalam
membantu pengembangan metode, terutama untuk menentukan apakah HPLC
/ UV tepat (bab ini mengasumsikan bahwa untuk menjadi kasus), untuk pilih
pengencer dan mode kromatografi. Mungkin ada informasi latar belakang yang
signifikan yang sudah tersedia dari laporan atau pengalaman penemuan /
pengembangan ilmuwan sebelumnya. Sangat disarankan untuk berkonsultasi
dengan orang-orang ini dan literatur. Dalam beberapa kasus, studi degradasi
telah dilakukan, meskipun dengan tujuan yang berbeda (seperti penajaman
senyawa pra-nominasi atau pekerjaan pengembangan eksplorasi) tetapi
mereka mungkin berguna dalam memilih kondisi dari studi stres atau mungkin
dalam mengusulkan mekanisme degradasi.
The Power of PowerPoint |
thepopp.com
13
 Puncak Kemurnian
Puncak kemurnian (atau puncak homogenitas) analisis puncak
utama, untuk menilai keberadaan kotoran di bawah puncak utama,
merupakan bagian penting dari validasi SIM. Penentuan kemurnian puncak
lebih sulit daripada kelihatannya karena seseorang tidak pernah dapat
memastikan bahwa puncaknya benar-benar murni. Keyakinan dapat
ditingkatkan dengan menggunakan beberapa pendekatan untuk evaluasi
langsung atau tidak langsung dari kemurnian puncak.
Evaluasi langsung dapat dilakukan secara in-line dengan
menggunakan deteksi PDA , LC-MS, atau LC-NMR. Namun, PDA hanya
berfungsi baik untuk degradasi yang memiliki spektrum UV berbeda dari obat.
Evaluasi LC-MS tidak akan berfungsi jika degradasi memiliki berat molekul
yang sama, seperti halnya untuk diastereomer, atau jika ionisasi degradasi
ditekan oleh API co-eluting.
The Power of PowerPoint |
thepopp.com
14
 Saldo massal

Defisit neraca massal dapat diselidiki dengan berbagai cara.

 Memperluas rentang polaritas gradien HPLC. Investigasi keberadaan senyawa yang sangat
dipertahankan dengan menggunakan fase gerak yang lebih kuat atau dengan menggunakan TLC;
 mencari degradasi yang kurang baik dalam kekosongan volume.
 Membandingkan profil UV komponen yang terdeteksi karena ketidakseimbangan dapat terjadi
 dari tanggapan UV yang berbeda: penggunaan PDA secara sistematis dalam pengembangan metode
awal
 memungkinkan untuk memeriksasignifikan λmaks yang pergeseran. RRF harus digunakan untuk analisis
kuantitatif yang akurat
 Mencari potensi puncak yang tidak terdeteksi (non-chromophoric degradant) oleh alterasialternatif
 dan / atau deteksiseperti MS, spektroskopi inframerah, indeks refraktif, detektor nitrogen
chemiluminescence, TLC (dengan I2 atau visualisasi asam / arang ), CAD, atau ELSD
 Analisis GC dari volatil yang mudah menguap
 Investigasi keberadaan oligomer / polimer dengan kromatografi ukuran eksklusi
The Power of PowerPoint |
thepopp.com
15
METODE VALIDASI DAN TRANSFER
ANALISIS METODE VALIDASI

• Selama pengembangan metode dari prosedur analisis, aspek dari metode

validasi membutuhkan suatu pertimbangan. Contohnya, spesifisitas dari metode
selama studi degradasi paksa akan secara resmi selesai sebagai metode
validasi; namun, pengetahuan dari ketidakmurnian dan profil degradasidari obat
adalah perlu untuk pengembangan dari metode analisis yang baik.

• Pengembangan dari metode telah ditemukan kemudian tidak menunjukkan

syabilitas yang mengharuskan pengembangan kembali metode dan validasi
yang sudah selesai mungkin harus dilakukan kembali dan data sebelumnya
dievaluasi untuk dapat diterima.

17
 PARAMETER VALIDASI

AKURASI PRESISI LINEARITAS JARAK

SPESIFISITAS KETAHANAN DETEKSI

18
Akurasi

Definisi sederhana dari akurasi adalah pengukuran dari seberapa dekatnya

nilai pengujian terhadap nilai nyatanya. Jika produk farmasetik telah dianalisa
mengandung 50 mg API, metode akurasi akan menghasilkan hasil dimana
akan mendekati rata-rata sampai 50 mg.

The Power of PowerPoint |

thepopp.com
19
Presisi

Presisi didefinisikan sebagai “suatu pengukuran dimana seberapa dekat nilai

data antara satu dengan yang lain untuk jumlah dari pengukuran dibawah
kondisi analisis yang sama”.

The Power of PowerPoint |

thepopp.com
20
 Linearitas

Parameter validasi ini dapat didefinisikan

sebagai “sebuah kemampuan dari prosedur
analisis untuk uji hasil perhitungan dimana
berbanding lurus dengan konsentrasi dari
analit dalam sampel”.

21
Jarak

• hal ini didefinisikan ikatan konsentrasi atas dan bawah untuk metode
dengan nilai yang dapat diterima secara presisi, akurasi, dan linearitas.
untuk metode pengujian untuk menyelesaikan bentuk dosis, jarak dapat
dideskripsikan sebagai 80-120% dari target, bergantung dari pengerjaan
studi pemulihan pada jarak ini serta linearitas dari jangkauan yang
diperpanjang sampai 50-150% dari target.
• sebagai contoh, untuk menyelesaikan produk membutuhkan keseragaman
kandungan, jarak biasanya digunakan pada interval yang lebar sebesar 70-
130%. sebagai catatan dibawah dengan pengujian campuran / metode
berkaitan dengan substansi, penting untuk didirikan selama validasi dari
jarak yang meliputi kedua pengukuran untuk menjamin hasil yang akurat.

22
 Spesifisitas

Pedoman ICH mendefinisikan spesifisitas sebagai “suatu kemampuan untuk menilai dengan
tegas analit yang terdapat dalam komponen yang mungkin diharapakan hadir”.

23
 Ketahanan (Robustness)

Robustness menetapkan keandalan metode

sehubungan dengan variasi yang disengaja
dalam parameter operasi, mengevaluasi
penggunaan kolom yang berbeda dari vendor,
dan juga menentukan stabilitas sampel dan
solusi standar.

24
 Metode validasi dengan tahap pengembangan

• Pada tahap ini, studi praformulasi akan juga sedang

dalam proses dan metode untuk membantu
pemilihan bahan formulasi akan menjadi penting.
Validasi metode terbatas akan dilakukan dan
didokumentasikan pada tahap ini dan pedoman
internal bukan protokol formal dengan kriteria
penerimaan yang ditetapkan dapat digunakan.

• Pedoman FDA tahap 1 menunjukkan bahwa "Data

validasi dan spesifikasi yang ditetapkan biasanya
tidak perlu disampaikan pada tahap awal
pengembangan obat". Ketika obat terus
berkembang, banyak informasi akan tersedia bagi
ahli kimia analitik.
25
 Teknologi transfer
Teknologi dari satu manufaktur atau situs pengujian ke yang
lain terjadi karena berbagai alasan dan dapat terjadi selama
pengembangan obat atau setelah peluncuran produk. Dalam
kasus program pengembangan obat dalam perusahaan yang
sama, produk akan diproses dari penemuan melalui
pengembangan termasuk studi klinis dan akhirnya untuk
komersialisasi.

Tim transfer teknologi membutuhkan kepemimpinan yang

kuat,komunikasi yang jelas garis dan menyetujui tujuan yang
berkaitan dengan berbagi informasi dan pencapaian. Produk
global menghadirkan tantangan tambahan untuk transfer
teknologi di beberapa situs yang sering terlibat dalam
pembuatan dan pengujian untuk berbagai wilayah di dunia.
Sasaran dari transfer teknologi termasuk transfer
pengetahuan efektif dan efisien dan dokumentasi ke situs
penerima dan akhirnya, persetujuan peraturan.
26
 Protokol metode transfer

• Transfer metode biasanya ditulis oleh lab asal dengan review dan persetujuan
oleh kedua lab.
• Dalam beberapa kasus, lab penerima memiliki SOP mereka sendiri yang
harus mereka ikuti terutama dalam situasi di mana produsen / laboratorium
kontrak terlibat. Dalam kasus ini karena kontraktor menangani banyak
pelanggan, mereka mungkin memiliki persyaratan sendiri yang kurang
fleksibel dari laboratorium asal.

27
 Bagian metode transfer

Bahan,
Desain
Objektif Cakupan Metode,
Eksperimental
Peralatan

Analisis Data Review /

Formulir Penyimpangan
& Kriteria Persetujuan
Laporan Data & Investigasi
Penerimaan

28
 Kotoran / produk degradasi

• Untuk pengotor / degradasi, baik pendekatan pembandingan atau validasi dapat digunakan
tergantung pada tingkat pengotor yang biasanya ditemukan dalam produk atau API yang
sebenarnya.
• Untuk pengujian stabilitas, fokus harus pada produk degradasi karena pengotor dikendalikan
dalam API saat rilis. Jika tingkat produk degradasi dalam khas sampel adalah > 0,1% maka
pengujian komparatif dapat dilakukan. Pendekatan ini mirip dengan pengujian yang dijelaskan
di atas menggunakan beberapa sampel / pengukuran, analis, kolom, dan instrumen.
• sampel harus dipilih dengan hati-hati agar tidak menimbulkan masalah yang tidak terkait
dengan transfer metode.

29
 Pengujian

• Hasil untuk setiap kelompok harus dihitung

untuk setiap analis dan dibandingkan
dengan hasil lab asal atau COA pemasok.
• Kriteria penerimaan akan bervariasi dengan
metode tetapi khas untuk molekul kecil
untuk menetapkan kriteria pada 2% mutlak
perbeda anantara laboratorium.
• Selain itu, persyaratan presisi juga dapat
diatur seperti 2% RSD untuk hasil batch per
analis. Persyaratan kesesuaian sistem juga
perlu dipenuhi dan harus didokumentasikan.

30
 Metode mentransfer laporan
• Setelah pengujian transfer metode selesai, hasilnya harus dievaluasi oleh pemimpin protokol dan
setiap perbedaan diselesaikan.
• Laporan harus menyertakan tabel dengan hasil yang dikompilasi, rincian spesifik yang berkaitan
dengan batch yang diuji, peralatan yang digunakan, dan setiap penyimpangan dari protokol.
• Jika hasil diperoleh atipikal atau jika ada bagian dari transfer metode gagal, penyelidikan harus
dilakukan dan didokumentasikan.
• Investigasi harus dirangkum dalam laporan, korektif tindakan yang dijelaskan dan disposisi data
yang ditentukan.
• Kesimpulan laporan harus meringkas hasil dan menunjukkan apakah transfer berhasil.
• Jika semua hasil memenuhi kriteria penerimaan dan tidak ada penyimpangan / investigasi yang
luar biasa, situs penerima memenuhi syarat untuk melakukan pengujian yang direferensikan.

31
THANK YOU…

32