satu mikroba, yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba lain Definisi sekarang : suatu senyawa yang dihasilkan oleh suatu mikroba, atau yang diproduksi seluruh atau sebagian nya secara sintesis kimia, yang dalam konsentrasi kecil dapat menghambat pertumbuhan mikroba lain Inhibisi sintesis dinding sel (penisilin, sefalosporin, glikopeptida) Inhibisi sintesis protein (aminoglikosida, tetrasiklin, kloramfenikol, klindamisin) Inhibisi sintesis asam nukleat (rifampisin, sulfonamida, trimetoprim) Inhibisi fungsi membran sel (amfoterisin B, triazol, imidazol) sejumlah antibiotika diencerkan hingga diperoleh variasi konsentrasi, lalu masing- masing konsentrasi diberikan pada suspensi kuman dalam media. Setelah diinkubasi, diamati ada atau tidaknya pertumbuhan bakteri yang ditandai dengan terjadinya kekeruhan. Contoh masing-masing konsentrasi antibiotika yang menunjukkan hambatan pertumbuhan tersebut ditanam pada agar padat sebagai media pertumbuhan bakteri yang bebas antibiotika dan diinkubasi selama 1x24 jam. Kemudian diamati ada atau tidaknya pertumbuhan bakteri. berdasarkan pengamatan luas daerah hambatan pertumbuhan bakteri karena berdifusinya antibakteri dari titik awal pemberian ke daerah difusi. Metode ini bertujuan untuk menguji sensitivitas antimikroba terhadap mikroorganisme Syarat jumlah bakteri untuk uji kepekaan/sensitivitas yaitu 105- 108 cfu/mL. metode Silinder metode Sumuran metode Kirby Bauer membuat lubang pada agar padat yang telah diinokulasi dengan bakteri. Jumlah dan letak lubang disesuaikan dengan tujuan penelitian, kemudian lubang diinjeksikan dengan ekstrak yang akan diuji. Setelah dilakukan inkubasi, pertumbuhan bakteri diamati untuk melihat ada tidaknya daerah hambatan di sekeliling lubang. sistem difusi kertas cakram-agar yang distandarisasikan untuk menentukan sensitivitas antibiotik terhadap bakteri Sensitivitas antibiotik tersebut ditentukan oleh diameter zona hambat yang terbentuk Semakin besar diameternya maka semakin tinggi hambatan pertumbuhan bakteri Faktor-faktor yang mempengaruhi metode Kirby-Bauer yaitu konsentrasi mikroba uji, konsentrasi antibiotik yang terdapat dalam cakram, jenis antibiotik, dan pH medium ( difusi antibiotik dari silinder yang tegak lurus pada lapisan agar padat dalam cawan petri atau lempeng yang berisi biakan mikroba uji pada jumlah tertentu sehingga mikroba dapat dihambat pertumbuhannya Zona Radikal zona disekitar disk dimana sama sekali tidak terdapat perumbuhan bakteri Zona Irradikal zona disekitar disk dimana pertumbuhan bakteri dihambat oleh disk antibiotik tetapi tetap dimatikan Zona Hambatan zona dimana bakteri tidak tumbu di sekitar disk akibat dihamat oleh disk antibiotik MIC (Minimum Inhibitor Test) daya hambat minimal MBC (Minimum Bakteriosid Test) daya bunuh minimal KHM (Kadar Hambat Minimal) KBM (Kadar Bunuh Minimal)