KROMATOGRAFI KOLOM

Teknik kromatografi adalah

metode pemisahan yang
digunakan untuk sintesis
senyawa murni (atau hampir
murni).
 KROMATOGRAFI

Kromatografi adalah suatu teknik

pemisahan molekul berdasarkan
perbedaan pola pergerakan antara fase
gerak dan fase diam untuk memisahkan
komponen (berupa molekul) yang berada
pada larutan.
 TUJUAN

Kromatografi kolom bertujuan untuk

purifikasi dan isolasi komponen dari suatu
campurannya. Metode pembuatan kolom
terbagi menjadi 2 yaitu untuk metode
kering dan metode basah.
 KEUNTUNGAN DAN KERUGIAN

Keuntungan kromatografi kolom Kerugian dari kromatografi

yaitu dapat digunakan untuk
analisis, digunakan untuk
menentukan jumlah komponen
campuran digunakan untuk
memisahkan dan purifikasi
substansi.
kolom yaitu untuk
mempersiapkan kolom
dibutuhkan kemampuan teknik
dan manual, sehingga metode ini
sangat membutuhkan waktu yang
lama.
 FASE DIAM DAN FASE GERAK DALAM
KROMATOGRAFI KOLOM
fase diam (Stationary phase)
merupakan salah satu komponen yang
penting dalam proses pemisahan
dengan kromatografi karena dengan
adanya interaksi dengan fase diamlah
terjadi perbedaan waktu retensi (tR)
dan terpisahnya komponen suatu
senyawa analit. Fase diam dapat
berupa bahan padat atau porous
(berpori) dalam bentuk molekul kecil
atau cairan yang umumnya dilapiskan
pada padatan pendukung.
fase gerak (Mobile phase) merupakan
pembawa analit, dapat bersifat inert
maupun berinteraksi dengan analit
tersebut. Fase gerak dapat berupa
bahan cair dan dapat juga berupa gas
inert yang umumnya dapat dipakai
sebagai carrier gas senyawa yang
mudah menguap (volatile).digunakan
untuk analisis, digunakan untuk
menentukan jumlah komponen
campuran digunakan untuk memisahkan
dan purifikasi substansi.
APLIKASI KROMATOGRAFI KOLOM DALAM
KEHIDUPAN
Menganalisa zat
Dalam bidang clinical
pewarna alami dalam
(klinik)
tumbuh-tumbuhan
bermanfaat dalam
Contohnya menginvestigasi fluida
mengekstrak daun badan antara lain:
atau wortel. Air liur dan Air kencing

bidang bioteknologi

penentuan kualitatif pemisahan molekul-molekul seperti

maupun kuantitatif asam nukleat, karbohidrat, lemak,
senyawa dalam vitamin dan molekul penting
protein. lainnya
 PROSES PEMISAHAN ATAU MEKANISME
PEMISAHAN

*Penyiapan Sampel
Sampel ditimbang kemudian dilarutkan
dalam pelarut yang sesuai, lalu
dituangkan hati-hati diatas packing
kolom. Fase gerak dikeluarkan tetes
demi tetes, diatur kecepatan
menetesnya (tergantung besar-kecilnya
kolom) dan dijaga kolom tetap
terendam,
*Elusi
Fase gerak dimasukkan kedalam kolom
dengan cara dituangkan sedikit demi
sedikit atau dialirkan dari bejana yang
diletakkan diatas kolom sehingga fase
gerak mengalir dengan sendirinya.
 ORGANISING IN PPT

CRISDAYANTI YEYEN TRIWULANDARI

SULAIMAN AFRISAL. S M. TEGUH NASUTION MUSADDAT