KIMIA ANALITIK

INSTRUMEN

MINGGU KE-3
KROMATOGRAFI CAIRAN TEKANAN TINGGI
(HPLC)

Ir. MUHAMMAD TAUFIK. M.SI

2020
 KROMATOGRAFI

KROMATOGRAFI
KROMATOGRAFI KROMATOGRAFI KROMATOGRAFI
CAIRAN TEKANAN
KOLOM GAS LAPISAN TIPIS
TINGGI
Kromatografi Cair Tekanan Tinggi

HPLC secara mendasar merupakan

perkembangan tingkat tinggi dari
kromatografi kolom. Selain dari
pelarut yang menetes melalui kolom
dibawah grafitasi, didukung melalui
tekanan tinggi sampai dengan 400
atm. Ini membuatnya lebih cepat.
Gambar alat HPLC
Skema alat HPLC
 Bagian-bagian HPLC
 Tempat pelarut
 Pompa
 Injektor
 Kolom
 Detektor
 rekorder
 Tempat pelarut

 Tempat pelarut digunakan

sebagai tempat larutan
yang akan dipakai dalam
pengoperasian HPLC
 Pompa
 Tujuan penggunaan pipa pada HPLC
adalah untuk mendorong fase gerak
masuk ke dalam kolom
 Tipe pompa yang biasa digunakan dalam
penggunaan HPLC adalah :
1. Pompa dengan tekanan tetap
2. Pompa dengan kecepatan alir tetap
 Syarat-syarat yang harus di
penuhi pompa dalam HPLC adalah
 Dapat memompakan fase gerak secara
konstan (0.1-10 ml/menit)
 Dapat memberikan tekanan yang cukup
tinggi
 Memberikan fluktuasi tekanan se minimal
mungkin
 Memberikan noise yang rendah
 Cara kerja sederhana
 Cukup inert terhadap pelarut yang
digunakan
 Injektor
 Injektor adalah tempat memasukkan contoh
yang akan dianalisa ke dalam sistem HPLC
 Suatu injektor dikatakan baik apabila:
 Dapat memasukkan zat ke dalam kolom
sesempit mungkin
 Memiliki keberulangan yang tinggi
 Dapat digunakan pada tekanan balik yang
relatif tinggi pada kolom
 Mudah digunakan
 Macam-macam injektor pada
HPLC
1. injektor sluice
 Pada tipe ini sample dimasukkan dengan
bantuan syringe, dan dapat digunakan
apabila tekanan yang dihasilkan cukup
rendah
1. Injektor loop
 Injektor tipe ini sangat baik digunakan
karena memiliki keberulangan yang tinggi
 kolom
 Kolom pada HPLC terdiri atas 2 badian
utama yaitu partikel –partikel fase diam
yang merupakan isi dari pada tabung
kolom dan tabung kolom pada tempat
dimana partikel-partikel tersebut
ditempatkan.bahan yang digunakan
untuk kolom sebaiknya terbuat dari
bahan tahan tekanan seperti stainless
stell,dari gelas ataupun logam.
 detektor
 Detektor digunakan untuk mendeteksi
komponen-komponen yang telah
dipisahkan dalam kolom .pendeteksi ini
gunanya untuk menentukan komponen-
komponen baik secara kualitatif atau
kuantitatif.
 Detektor yang sering digunakan dalam
HPLC adalah :
1. Detektor indeks refraksi
2. Detektor uv/vis
 Detektor indeks refraksi

 Detektor RI adalah detektor universal

yang memberikan respon apabila ada
perbedaan indeks refraksi antara fase
gerak dan fase gerak yang mengandung
komponen,perbedaan indeks refraksi
dipengaruhi oleh temperatur.
 Detektor uv/vis
 Tipe pengukuran pada detektor ini
didasarkan pada absorbsi pada daerah uv
atau visible.detektor uv/vis paling banyak
dipakai di dalam HPLC karena lebih
sensitif dan kebanyakan dari zat-zat
organik menyerap radiasi pada daerah
uv/vis
Kerjakan soal-soal dibawah ini di lembar Ms.Word kirim ke email m_taufik@polsri.ac.id
Secara kolektif perkelas.

1. Sebutkan bagian-bagian HPLC!

2. Jelaskan aplikasi HPLC!
3. Jelaskan instrumen alat HPLC secara berurutan dan fungsi-fungsinya!
4. Berikan contoh penggunaan HPLC dalam percobaan serta berikan gambarnya !
5. Jelaskan aplikasi penggunaan alat HPLC dalam kehidupan sehari-hari !