Tes pengikatan DNA

Kemungkinan interaksi 7 dengan DNA timus anak sapi

dianalisis dengan cara spektrofotometri dan
spektrofluorometri titrasi. Catatan bahwa pyrene fluorophore
memungkinkan penggunaan optik ini teknik dan mendukung
adanya interaksi hidrofobik π- π dengan pasangan basa DNA,
yaitu mode pengikatan interkalasi yang bisa memiliki
signifikansi farmakologis. Titrasi dilakukan dengan
menambahkan meningkatkan jumlah DNA langsung ke dalam
kuvet yang berisi larutan kompleks dan diulangi pada suhu
yang berbeda
 Hasil dan pembahasan

Spektrofotometri titrasi untuk itu 7 / DNA sistem; C D = 1,8 × 10 −5 M, C P dari 0M menjadi 5,3 × 10 −5 M (panah
mengikuti meningkat. Kandungan DNA), [NaCac] = 2,5 mM, pH 7,0, DMSO = 1%, T = 25,7 ° C.
Titrasi spektrofluorometri dilakukan serupa dengan spektro, percobaan fotometrik dan mengkonfirmasi variasi
emisi fluoresensiasi yang terjadi saat pengikatan DNA yang sangat menarik, amplitudo isoterm pengikat ternyata
menjadi fungsi suhu, menjadi tinggi dan negatif pada 10,1 ° C, sangat kecil pada 26,6 ° C dan tinggi dan positif
pada 44,8 ° C
Tes pengikatan DNA

Analisis data menurut Persamaan. (1) (di mana sinyal perubahan ΔA hanya diganti dengan ΔF) membuat ikatan
kuantitatif lagi dengan pengecualian mode pengikatan yang terkait dengan penurunan sinyal di 10,1 ° C (K = 2,4
× 10 6 M −1 ) dan yang terkait dengan peningkatan fluoresensi pada 44,8. ° C (K = 3,2 × 10 6 M −1 ). Oleh
karena itu, fase pertama, terjadi di adanya kondisi berlebih pewarna dan menghasilkan fluoresensi penurunan
emisi, terkait dengan konstanta pengikat yang meningkat dengan suhu (ΔH> 0)
Secara keseluruhan dapat disimpulkan bahwa afinitas 7 terhadap DNA adalah sangat tinggi, kemungkinan karena
adanya dua aromatik yang terhubung secara fleksibel moieties. Mode pengikatan yang mungkin adalah alur dan
antarkala-tion, yang berlaku tergantung pada suhu dan reagen konsentrasi. Perilaku ganda ini sudah ditemukan
untuk kecil lainnya sistem molekul / DNA . Data literatur juga menegaskan hal itu turunan piren dapat mengikat
baik dalam alur kecil DNA penurunan emisi fluoresensi , atau selingan menghasilkan peningkatan emisi
fluoresensi.
Geometri interaksi DNA

• Spektrum LD dari makromolekul menunjukkan, seperti yang diharapkan, kuat sinyal negatif pada 260 nm,
karena kontribusi purin dan pyr-pasangan basa imidin (jejak a). Mengikuti penambahan 7 (jejak bd) sinyal
dichroic terinduksi yang bergantung pada konsentrasi muncul di lebih tinggi panjang gelombang (300–450
nm), yang merupakan wilayah spektral di mana tidak ada distribusi dari pasangan basa DNA dapat dideteksi
dan hanya chromo-phore dari kompleks yang ditambahkan dapat menyerap.
• dispektrum larutan DNA diinkubasi dengan 7 (jejak bd) sinyal yang direduksi menunjukkan kontribusi positif
dan negative heterogenitas pengikatan. Perilaku ini dapat dijelaskan oleh adanya molekul obat yang
berinterkalasi antara pasangan basa dan mengakomodasi sepanjang alur
Studi sitotoksisitas • Hasil yang diperoleh menunjukkan kemampuan 7 untuk
menginduksi signifikan efek antiproliferatif pada sebagian
besar jalur sel tumor manusia pertimbangan, dengan GI 50
nilai dalam itu kisaran mikromolar. Meskipun nilai-nilai ini
lebih tinggi sehubungan dengan perhitungan tersebut
terlambat untuk obat referensi, menunjukkan kemanjuran
yang lebih rendah pada sel, kapasitas 7 untuk menggunakan
sitotoksisitas yang sebanding pada kedua resisten
(A2780cis) dan sel karsinoma ovarium sensitif (A2780wt),
menyarankan untuk perancah kimia ini kemampuan untuk
mengatasi perlawanan
Kesimpulan
•Kompleks pyridinimino platinum (II) baru telah disiapkan, membawa kelompok piren terminal yang
terhubung ke perancah chelating melalui spacer fleksibel yang dioksigenasi (kompleks 7 ). Anti-
aktivitas proliferatif 7 diperiksa secara in vitro terhadap keduanya yang sensitive dan garis sel kanker
yang resisten. Kompleks 7 menunjukkan kemampuan yang menarik kota untuk menghindari resistensi
terhadap sel A2780 cis, dan interaksi tion dengan DNA diselidiki dengan dua spektroskopi
independent teknik (titrasi UV-vis / fluoresensi dan dichroism aliran linier). Secara khusus, kumpulan
data yang dikumpulkan menunjukkan bahwa kedua alur pengikatan dan interkalasi terjadi, dengan
satu interaksi menjadi lebih jelas dalam kaitannya dengan yang lain menurut spesies yang terlibat
rasio molar dan suhu. Bagian piren aromatik paling banyak kemungkinan bertanggung jawab untuk
interkalasi melalui interaksi π-π, umum untuk residu semacam ini, sementara pengikatan alur dapat
dianggap berasal Interaksi pyrene-pyrene dengan kerangka DNA, disukai juga oleh logam
mengandung residu dan / atau spacer. . Data yang dikumpulkan menunjukkan hal itu kompleks
piridinimino diakhiri aril adalah kelas serbaguna anti- kompleks proliferatif. Studi sedang berlangsung
untuk menyelidiki structural analog dari kompleks 7