UJI FERMENTASI

KARBOHIDRAT, MR, VP, DAN

SCA
Kelompok 2

Muhammad Taufiq Pratama 1011201065

Stellaria Nevia Emeng 1011201104

 Uji Fermentasi Karbohidrat
PRINSIP

Menentukan kemampuan organisme untuk memfermentasi karbohidrat tertentu

yang tergabung dalammedium dasar dengan membentuk asam atau asam dengan
gas yang dapat dilihat pada tabung durham.

TUJUAN

Untuk mengetahui apakah kuman memfermentasi masing-masing gula diatas

membentuk asam.
 REAKSI
BIOKIMI
A
 

ALAT DAN
BAHAN
Bahan
Alat
Aquadest Powder manitol
Autoclave Neraca
BTB Powder laktosa
Batang pengaduk Sendok tanduk
Larutan KOH Powder glukosa
Cawan petri Tabung + rak
Larutan K2Cr2O4 Powder maltosa
Durham Pipet tetes
Larutan fuchsin Powder sukrosa
Erlenmeyer Pipet ukur
Methylen blue Peptone
Kertas pH Waterbath
NaCl
 CARA KERJA
●  
1. Menyiapkan nutrient karbohidrat yaitu glukosa, sukrosa, laktosa, maltosa, dan
manitol masing-masing 1%. Kaldu karbohidrat yang mengandung BTB (brom timol
biru) sebagai indikator pH.
2. Ditambahkan pepton sebagai sumber nitrogen, vitamin dan mineral dimasukkan
dalam tabung reaksi yang dilengkapi tabung Durham.
3. Dinokulasi dengan biakan bakteri.
4. Diinkubasi dalam inkubator pada suhu 30 selama 24 jam.
5. Fermentasi karbohidrat diperiksa dengan melihat pembentukan asam (warna
kuning) dan pembentukan gas dalam tabung Durham.
 INTERPRESTASI
HASIL
 Positif (+) : Terjadi perubahan warna
media dari merah menjadi kuning.
 Positif dan gas (+/gas) : Terjadi perubahan
warna media dari merah menjadi kuning
dan terbentuk gas pada tabung durham.
 Negatif (-) : Tidak terjadi perubahan
media dan tidak ada gas pada tabung
durham, tetapi terjadi kekeruhan pada
media. Gambar 1 : Positif dan gas (+/gas)
Gambar 2 : Positif (+)
Gambar 3 : Negatif (-)
 PRECAUTION ATAU PENCEGAHAN
●  
 Jika suhu kurang dari 30 dapat terjadi positif palsu.
 Jika waktu inkubasi kurang dari 24 jam dapat terjadi negatif palsu.
 UJI METYL RED

PRINSIP
Menguji kemampuan organisme untuk menghasilkan dan
mempertahankan hasil akhir asam yang stabil dari fermentasi
glukosa dam mempertahankan sistim buffer dari perbenihan. REAKSI BIOKIMIA
TUJUAN
Untuk mengetahui kemampuan mikroba membentuk asam dari
hidrolisis glukosa.
ALAT DAN BAHAN
CARA KERJA
 Jarum ose
 Biakan E.coli dan
Staphylococcus  Inokulasikan ke dalam ●   MR-VP dengan jarum
medium
 Medium MR-VP

ose biakan bakteri.
Biakan
 Inkubasi selama 72 jam pada suhu 37.
 Tetes 3 tetes reagen Methyl Red.
 Amati permukaan medium. Terbentuknya warna
merah menunjukkan uji Methyl Red positif.
Bandingkan dengan kontrol.
INTERPRESTASI
HASIL
 Uji positif jika kaldu berwama merah
setelah penambahan reagen metil
merah maka menunjukan hasil uji
positif.
 Uji negatif jika warna kaldu berwarna
kuning.
 PRECAUTION ATAU PENCEGAHAN
●  
 Jika suhu kurang dari 37 dapat terjadi positif palsu.
 Jika waktu inkubasi kurang dari 72 jam dapat terjadi negatif palsu.
 UJI VOGES-PROSKAUER

PRINSIP
Menentukan kemampuan organisme untuk menghasilkan REAKSI BIOKIMIA
produk akhir yang netral (acethyl methyl carbinol) dari
fermentasi glukosa.
TUJUAN
Untuk mengetahui kemampuan mikroorganisme menghasilkan
senyawa acetyl carbinol atau 2,3 butandiol.
 ALAT DAN
BAHAN CARA
 Jarum ose   KERJA
 Medium MR-VP  Inokulasikan medium  MR-VP dengan 1 ose
 Biakan E.coli dan Staphylococcus
biakan yang telah disiapkan.
 Reagen barrit (-naftol 50% dan
KOH 40%)
 Inkubasi pada suhu 37 selama 72 jam.
 Tambahkan 0,6 ml reagen α-naftol 5% dan 0,5
ml KOH 40%. Lalu kocok perlahan-lahan selama
beberapa menit.
 Amati permukaan medium. Terbentuknya
warna merah tua menunjukkan uji VP positif.
Bandingkan dengan kontrol.
 INTERPRESTASI
HASIL
 Dikatakan VP Positif bila media
berwarna merah.
 Dikatakan VP Negatif bila media
berwarna kuning atau tidak ada
perubahan.
 PRECAUTION ATAU PENCEGAHAN
●  
 Jika suhu kurang dari 37 dapat terjadi positif palsu.
 Jika waktu inkubasi kurang dari 72 jam dapat terjadi negatif palsu.
 UJI SIMMONS CITRATE AGAR

PRINSIP
Menentukan apakah suatu organisme dapat menggunakan REAKSI BIOKIMIA
sitrat sebagai sumber karbon satu-satunya untuk metabolisme
dengan menghasilkan suasana basa.
TUJUAN
Untuk mengetahui kemampuan mikroba memanfaatkan sitrat
sebagai satu-satunya sumber karbon.
 ALAT DAN
BAHAN
 Jarum ose
CARA KERJA
 Media Simon Citrate Agar (SCA)
 Biakan E.coli dan Staphylococcus  ●   kedalam medium SCA
Inokulasikan biakan bakteri
miring.
 Biarkan 1 tabung tidak diinokulasikan dan
gunakan sebagai kontrol
 Inkubasi selama 48 jam pada suhu 37.
 Amati pertumbuhan mikroba. Perubahan medium
dari hijau menjadi biru menunjukkan uji citrat
positif.
 INTERPRESTASI
HASIL
 Dikatakan Positif : Bila warna
media berwarna biru.
 Dikatakan Negatif : Bila warna
media Berwarna hijau.
 PRECAUTION ATAU PENCEGAHAN
●  
 Jika suhu kurang dari 37 dapat terjadi positif palsu.
 Jika waktu inkubasi kurang dari 48 jam dapat terjadi negatif palsu.
THANK
YOU 