Bagian Mikrobiologi

Petunjuk Praktikum Blok Respirasi

Tahun Akademik 2008 / 2009
Mycobacterium tuberculosis (TB)
Mikobakteria adalah bakteri aerob, berbentuk batang ang tidak berspora! "alaupun
tidak mudah ter#arnai, apabila telah ter#arnai bakteri ini tahan terhadap penghilangan #arna
$de%olori&er' oleh asam atau alkohol dan karena itu dinamakan Basil Tahan Asam!
Penegakan diagnosis pada penakit TB(paru $M. tuberculosis' dapat dilakukan dengan
melihat keluhan/gejala klinis, pemeriksaan biakan, pemeriksaan mikroskopis, radiologik dan
tuber%ulin test! Pada pemeriksaan biakan hasilna akan didapat lebih baik, namun #aktu
pemeriksaanna biasana memakan #aktu ang terlalu lama! )ehingga pada saat ini
pemeriksaan dahak $sputum' se%ara mikroskopis lebih banak dilakukan karena sensiti*itas
dan spesi*itasna tinggi disamping biaana rendah! )eorang penderita tersangka dinatakan
sebagai penderita paru menular berdasarkan gejala batuk berdahak + kali! ,uman ini baru
kelihatan diba#ah mikroskopis bila jumlah kuman paling sedikit sekitar -000 batang dalam .
ml sputum!
Pengambilan sputum dapat dilakukan setiap saat dan dapat dikeluarkan oleh penderita
sendiri, sputum ang berasal dari paru(paru dan bukan ludah! /ikenal + jenis sputum 0 $.'!
Sputum pagi, sputum ang dikeluarkan oleh penderita pada #aktu pagi bangun tidur, $2'!
Spot sputum, sputum ang dikeluarkan pada saat itu dan $+'! Collection sputum, sputum ang
keluar dan ditampung selama 21 jam!
Penderita ang akan memeriksakan sputum untuk pemeriksaan TB, harus mengikuti
aturan 2Sewaktu Pagi Sewaktu3 $S P S), aitu Sewaktu $sputum ang dikeluarkan pada saat
penderita datang ke laboratorium untuk pemeriksaan ang pertama', Pagi $sputum ang
dikeluarkan oleh penderita pada #aktu pagi bangun tidur', dan Sewaktu $sputum ang
dikeluarkan pada saat penderita datang ke laboratorium untuk pemeriksaan berikutna'!
)putum diambil .(2 ml dimasukkan dalam %up sampel atau botol steril! )putum langsung
diperiksa di laboratorium, atau dapat dimasukkan lemari es selama 2 minggu!
Pemeriksaan mikroskopik dapat dilakukan dengan 2 %ara 0
a! sediaan langsung
adalah sediaan ang dibuat langsung dari spesimen
apabila ang dibuat adalah sputum, maka hasilna dapat dinilai derajat positi4na
sehingga dapat digunakan untuk melihat sejauh mana seseorang sedang menderita atau
sampai dimana hasil pengobatanna!
b! sediaan tidak langsung
adalah sediaan ang dibuat tidak langsung dari spesimen tetapi dibuat dari sedimen
setelah pengolahan $homogenisasi/dekontaminasi'
sediaan ini memberi kemungkinan hasil BTA $5' lebih besar daripada sediaan
langsung tetapi tidak dapat dipakai untuk mengukur keberhasilan pengobatan
Bagian Mikrobiologi
Petunjuk Praktikum Blok Respirasi
Tahun Akademik 2008 / 2009
Pewarnaan ACID-FAST cara Ziehl Neelsen (Basil Tahan Asam / BTA)
Pe#arnaan ini dikenal dengan sebagai pe#aranaan 6iehl 7elson, aitu pe#arnaan
bakteri ang mengandung banak lemak! Bakteri sema%am ini tidak dapat di#arnai baik
dengan pe#arnaan sederhana maupun pe#arnaan gram! Pe#arnaan ang sudah melekat pada
sel, tidak dapat dilunturkan dengan pelarut biasa!
.! Buat preparat ulas dari sputum Mycobacterium tuberculosis
a! 8bje%k glass dibersihkan dengan alkohol sampai kotoran ang melekat hilang,
kemudian obje%k glass dipanaskan di atas api bunsen dan diolesi sputum TB9
b! 8bje%k glass dibersihkan dengan alkohol sampai kotoran ang melekat hilang,
kemudian obje%k glass diolesi sputum TB9 dibiarkan kering di suhu ruang
2! :akukan 4iksasi dengan %ara mele#atkan preparat $obje%k glass' di atas api bunsen!
+! a! Teteskan karbol 4ukhsin di atas apusan sputum TB9 dan panaskan dengan api bunsen
sampai - menit dan diusahakan &at #arna tidak sampai mendidih
b! Teteskan karbol 4ukhsin di atas apusan sputum TB9 dan panaskan di atas air mendidih
sampai - menit dan diusakan &at #arna tidak sampai kering
1! 9u%i dengan air mengalir dan dikeringanginkan
-! Tetesi dengan &at peluntur #arna $peluntur asam' 0 20; <
2
)8
1
atau %ampuran alkohol
9-; dengan 2,-; <78
+
, biarkan selama .0(+0 detik sampai #arna merah hilang
=! 9u%i dengan air mengalir dan dikeringanginkan
>! Tetesi dengan metiline blue sebagai &at #arna penutup dan dibiarkan selama .0? +0 detik!
8! 9u%i dengan air mengalir dan dikeringanginkan
9! Amati diba#ah mikroskop menggunkan minak imersi
Bagian Mikrobiologi
Petunjuk Praktikum Blok Respirasi
Tahun Akademik 2008 / 2009
Bagian Mikrobiologi
Petunjuk Praktikum Blok Respirasi
Tahun Akademik 2008 / 2009
Penilaian tingkat in4eksi TB9 menurut @AAT $International Union Against Tuberculosis'
B /isebutkan jumlah kumanna 0 diketemukan . ? 9 sel BTA / .00 :P
B Positi4 . $5' 0 diketemukan .0 ? 99 sel BTA / .00 :P
B Positi4 2 $5 5' 0 diketemukan . ? .0 sel BTA / . :P
B Positi4 + $5 5 5' 0 diketemukan lebih dari .0 sel BTA / . :P
Sel BTA