I. Tujuan
- Mengetahui secara lebih baik peran insulin dalam tubuh dan pengaruhnya
pada penyakit diabetes.
- Mengenal teknik untuk mengevaluasi penyakit diabetes dengan cara
konvensional dan komputerisasi.
II.
Prinsip
Penyakit diabetes merupakan gangguan metabolisme yang salah satu
symptomnya berupa kadar glukosa dalam darah di atas batas normal yang
disebabkan oleh defisiensi insulin relative atau absolute.
2. Obat hipoglikemik adalah obat yang merangsang sekresi insulin oleh sel
pancreas dan meningkatkan pengikatan insulin pada jaringan target dan
reseptor sehingga menurunkan kadar glukosa dalam darah.
3. Pengujian diabetes dan antidiabetes dapat dilakukan dengan cara
komputerisasi (dry lab) atau konvensional (wet lab).
1.
.
III. Teori
Diabetes melitus merupakan suatu penyakit yang terjadi akibat adanya
gangguan pada metabolime glukosa, disebabkan kerusakan proses pengaturan
sekresi insulin dari sel-sel beta. Insulin, yang diahasilkan oleh kelenjar pankreas
sangat penting untuk menjaga keseimbangan kadar glukosa darah. Kadar glukosa
darah normal pada waktu puasa antara 60-120 mg/dl, dan dua jam sesudah makan
dibawah 140 mg/dl. Bila terjadi gangguan pada kerja insulin, baik secara kualitas
maupun kuantitas, keseimbangan tersebut akan terganggu, dan kadar glukosa
darah cenderung naik (hiperglikemia) ( Hayes,1996 ).
Diabetes melitus adalah gangguan metabolisme yang ditandai dengan
hiperglikemia
dan
glukosuria
yang
berhubungan
dengan
abnormalitas
yang diproduksi oleh sel pulau Langerhans kelenjar Pankreas baik absolut
maupun relatif (Herman, 1993; Adam, 2000; Sukandar, 2008). Kelainan
metabolisme yang paling utama ialah kelainan metabolisme karbohidrat. Oleh
karena itu, diagnosis diabetes melitus selalu berdasarkan kadar glukosa dalam
plasma darah ( Herman, 1993 ).
Diabetes melitus merupakan salah satu jenis penyakit yang ditandai
dengan meningkatnya kadar glukosa darah (hiperglikemia) sebagai akibat dari
rendahnya sekresi insulin, gangguan efek insulin, atau keduanya. Diabetes
mellitus bukan merupakan patogen melainkan secara etiologi adalah kerusakan
atau gangguan metabolisme. Gejala umum diabetes adalah hiperglikemia,
poliuria, polidipsia, kekurangan berat badan, pandangan mata kabur, dan
kekurangan insulin sampai pada infeksi. Hiperglikemia akut dapat menyebabkan
sindrom hiperosmolar dan kekurangan insulin dan ketoasidosis. Hiperglikemia
kronik
metabolisme sel, jaringan dan organ. Komplikasi jangka panjang diabetes adalah
macroangiopathy, microangiopathy, neuropathy, katarak, diabetes kaki dan
diabetes jantung ( Reinauer, 2002 ).
Gejala penyakit diabetes melitus dari satu penderita ke penderita lainnya
tidak selalu sama. Gejala yang disebutkan dibawah ini adalah gejala yang
umumnya timbul dengan tidak mengurangi kemungkinan adanya variasi gejala
lain. Ada pula penderita diabetes melitus yang tidak menunjukkan gejala apa pun
sampai pada saat tertentu ( Tjoktoprawiro, 1998 ).
1. Pada permulaan, gejala yang ditunjukkan meliputi tiga P yaitu:
a. Polifagia (meningkatnya nafsu makan, banyak makan)
b. Polidipsia (meningkatnya rasa haus, banyak minum)
c. Poliuria (meningkatnya keluaran urin, banyak kencing)
Dalam fase ini biasanya penderita menunjukkan berat badan yang terus
meningkat, bertambah gemuk, mungkin sampai terjadi kegemukan. Pada keadaan
ini jumlah insulin masih dapat mengimbangi kadar glukosa dalam darah (
Hayes,1996 ).
2. Bila keadaan diatas tidak segera diobati, kemudian akan timbul gejala
yang disebabkan oleh kurangnya insulin, yaitu :
a. Banyak minum
b. Banyak kencing
c. Berat badan menurun dengan cepat (dapat turun 5-10 kg dalam waktu
2-4 minggu)
d. Mudah lelah
e. Bila tidak lekas diobati, akan timbul rasa mual jika kadar glukosa
darah melebihi 500 mg/dl, bahkan penderita akan jatuh koma (tidak
sadarkan diri) dan disebut koma diabetik.
Koma diabetik adalah koma pada penderita diabetes melitus akibat kadar
glukosa darah terlalu tinggi, biasanya 600 mg/dl atau lebih. Dalam praktik,
gejala dan penurunan berat badan inilah yang paling sering menjadi keluhan
utama penderita untuk berobat ke dokter ( Tjokroprawiro, 1998 ).
Kadang-kadang penderita diabetes melitus tidak menunjukkan gejala akut
(mendadak), tetapi penderita tersebut baru menunjukkan gejala setelah beberapa
bulan atau beberapa tahun mengidap penyakit diabetes melitus. Gejala ini dikenal
dengan gejala kronik atau menahun ( Katzung, 2002 ).
Gejala kronik yang sering timbul pada penderita diabetes adalah seperti
yang disebut dibawah ini :
1. Kesemutan
2. Kulit terasa panas, atau seperti tertusuk-tusuk jarum
3
3. Rasa tebal pada kulit telapak kaki, sehingga kalau berjalan seperti diatas
bantal atau kasur
4. Kram
5. Capai, pegal-pegal
6. Mudah mengantuk
7. Mata kabur, biasanya sering ganti kacamata
8. Gatal di sekitar kemaluan, terutama wanita
9. Gigi mudah goyah dan mudah lepas
10. Kemampuan seksual menurun, bahkan impoten, dan
Para ibu hamil sering mengalami gangguan atau kematian janin dalam
kandungan,
atau
melahirkan
bayi
dengan
berat
lebih
dari
3,5 kg.
( Tjokroprawiro, 1998 ).
Klasifikasi dan Etiologi Diabetes Mellitus
1. Diabetes Mellitus tergantung Insulin (DMTI, tipe 1)
Diabetes mellitus tergantung insulin (DMTI atau IDDM) merupakan
istilah yang digunakan untuk kelompok pasien diabetes mellitus yang tidak dapat
bertahan hidup tanpa pengobatan insulin. Penyebab yang paling umum dari
IDDM ini adalah terjadinya kerusakan otoimun sel-sel beta () dari pulau-pulau
Langerhans ( Katzung, 2002 ).
Kebanyakan penderita IDDM berusia masih muda, dan usia puncak
terjadinya serangan adalah 12 tahun. Namun demikian, 10% pasien diabetes diatas
65 tahun merupakan pengidap IDDM ( Katzung, 2002 ).
IDDM dapat juga disebabkan adanya interaksi antara faktor-faktor
lingkungan dengan kecenderungan sebagai pewaris penyakit diabetes mellitus.
Hal ini menunjukkan bahwa IDDM dapat timbul karena adanya hubungan dengan
gen-gen pasien dan dapat pula dipicu oleh faktor lingkungan yang ada, termasuk
bermacam-macam virus ( Jones , 1998 ).
4
Sensitizer Insulin
Golongan obat ini meliputi obat hipoglikemik golongan biguanida dan
thiazolidinedione, yang dapat membantu tubuh untuk memanfaatkan
insulin secara lebih efektif
1. Golongan Biguanida
Saat ini golongan biguanid yang banyak dipakai adalah metformin.
Mekanisme kerja golongan biguanid (metformin):
a. Meningkatkan glikolisis anaerobik hati.
b. Meningkatkan uptake glukosa di jaringan perifer atau mengurangi
glukoneogenesis.
c. Menghambat absorpsi glukosa dari usus ( Herman, 1993 )
terdapat di jaringan target kerja insulin yaitu jaringan adiposa, otot skelet dan hati,
sedang reseptor pada organ tersebut merupakan regulator homeostasis lipid,
diferensiasi adiposit, dan kerja insulin. Glitazon dapat merangsang ekspresi
beberapa protein yang dapat memperbaiki sensitivitas insulin dan memperbaiki
glikemia, seperti GLUT 1, GLUT 4, p85alphaPI-3K dan uncoupling protein-2
(UCP) ( Herman, 1993 ).
Aloksan
Rumus molekul
Masa molar
Titik leleh
:
:
:
C4H2N2O4
142.07 g/mol
256 C
:
:
:
:
Gliburid
NIDDM ringan - sedang
wanita menyusui, profiria, dan ketoasidosis
Penggunaan harus hati-hati pada pasien usia lanjut,
gangguan fingsi hati dan ginjal.
gejala saluran cerna dan sakit kepala. Gejala
Efek samping
hematologik
termasuk trombositopenia,
jarang sekali.
Dengan penghambat ACE dapat menambah efek
hipoglikemik. alkohol meningkatkan efek hipoglikemik,
8
(glibenklamid).
Dosis awal 2,5 mg bersama sarapan, maksimal 15 mg.
( Depkes RI, 2000 ).
Alat
a ) Alat sonde oral 1 ml
d ) Glukometer
e ) Komputer
f ) Pisau cutter
c ) Stopwatch
Bahan
V. Prosedur
a. Percobaan Uji Diabetes Menggunakan Komputerisasi (Dry Lab)
Percobaan I : Pembuatan Kurva Standard dan Glukosa
Tube 1-5 disiapkan, dengan cara diklik dan didrag tabung kedalam slot
incubator sesuai nomor yang telah disediakan. Diklik dan ditahan mouse pada
pipet tetes botol Glucose Standard, kemudian didrag dan diteteskan pada tabung
no.1 denga melepaskan tombol mouse. Langkah tadi diulangi untuk tabung no.25. Tiap tabung otomatis akan mendapat larutan standar glukosa satu tetes lebih
banyak (Tabung no.2 mendapat 2 tetes, no.3 mendapat 3 tetes, no.4 mendapat 4
tetes, dan no.5 mendapat 5 tetes). Diklik dan ditahan mouse pada pipet tetes
botol Deionized Water, kemudian didrag dan diteteskan pada tabung no.1 dengan
melepaskan tombol mouse, otomatis akan memberikan 4 tetes pada tabung no 1.
Langkah tadi diulangi untuk tabung no.2-4. Tiap tabung otomatis akan mendapat
larutan standar glukosa satu tetes lebih sedikit (tabung no.2 mendapat 3 tetes,
no.3 mendapat 2 tetes, no. 4 mendapat 1 tetes). Tombol Mix diklik pada
incubator yang mencampur bahan dalam tabung. Diklik tombol Centrifuge,
maka tabung akan turun kedalam incubator dan disentrifugasi sehingga partikel
yang mengendap di bagian bawah tabung yang disebut pellet. Diklik tombol
Remove Pellet untuk menghilangkan endapan yang terbentuk . Diklik dan tahan
mouse pada pipet tetes botol Enzyme-Colour Reagent, kemudian drag dan
teteskan pada tabung no.1 dengan melepaskan tombol mouse, otomatis akan
memberikan 5 tetes. Diulangi langkah tadi untuk tabung no.2-5. Diklik tombol
incubate, tabung akan masuk kedalam incubator untuk diinkubasi. Tombol Set
Up diklik pada spektrofotometer yang memanaskan alat dan mengkalibrasinya
sehingga siap digunakan dalam pengukuran. Klik dan drag tabung no.1 ke dalam
spektrofotometer kemudian lepaskan tombol mouse, tabung akan terkunci pada
11
tempatnya. Diklik tombol Analyze, akan terlihat pada layer nilai Optical Density
dan Glucose. Diklik tombol Record Data. Diklik dan Didrag kedalam pencuci
tabung. Ulangi langkah 13-16 untuk tabung yang lainnya. Setelah semua tabung
dianalisis, klik tombol Graph sehingga terbentuk kurva yang dapat digunakan
pada percobaan tahap II.
Percobaan II : Membandingkan kadar glukosa sebelum dan sesudah injeksi
insulin
Alat suntik Saline pada tikus control diklik dan didrag kemudian
dilepaskan tombol untuk menginjeksi hewan tersebut. Diklik dan Didrag alat
suntik Alloxan pada tikus percobaan dan lepaskan tombol mouse untuk
menginjeksi hewan tersebut. Diklik dan Didrag tabung baru pada tikus control
dan lepaskan tombol, sehingga 3 tetes darah dari ekor tikus akan masuk ke
dalam tabung, kemudian diklik dan didrag tabung ke tempat no.1 pada
inkubator. Diklik dan didrag tabung baru pada ekor tikus percobaan dan
dilepaskan tombol, sehingga 3 tetes darah dari ekor akan masuk ke dalam
tabung, kemudian diklik dan didrag tabung ke tempat no.2 pada incubator.
Diklik dan didrag alat suntik Insulin pada tikus control dan dilepaskan tombol
mouse untuk menginjeksi hewan tersebut. Diulangi langkah tersebut untuk
hewan percobaan. Diulangi langkah ke 3 dan 4 untuk memperoleh sample darah
dari tiap tikus dan disimpan ditempat no.3 dan 4 pada incubator. Diklik tombol
Obtainreagent pada cabinet sehingga alat sunti dan tikus akan hilang dan muncul
3 botol tetes pada layar. Diklik dan tahan mouse pada pipet tetes botol Deionized
Water, kemudian didrag dan diteteskan pada tabung no.1 dengan melepaskan
tombol mouse, otomatis akan memberikan 5 tetes pada tabung no.1. Diulangi
langkah tadi untuk tabung yang lainnya. Diklik dan ditahan mouse pada pipet
tetes tombol Barium Hydroxide (untuk menghilangkan protein) kemudian didrag
dan diteteskan pada tabung no.1 dengan melepaskan tombol mouse, otomatis
akan memberikan 5 tetes pada tabung no.1. Diulangi langkah tadi untuk tabung
yang lainnya. Diklik dan Ditahan mouse pada pipet tetes botol Heprin (sebagai
antikoagulan sehingga darah tidak menggumpal selama pengujian) kemudian
12
didrag dan diteteskan pada tabung no.1 dengan melepaskan tombol mouse.
Diulangi langkah tadi untuk tabung yang lainnya . Diklik tombol Mix pada
incubator untuk mencampur bahan dalam tabung. Diklik tombol Centrifuge,
maka tabung akan turun ke dalam incubator dan disentrifugasi. Diklik tombol
Remove Pellet untuk menghilangkan endapan yang terbentu. Diklik dan ditahan
mouse pada pipet tetes botol Enzyme-Colour Reagent, kemudian didrag dan
diteteskan pada tabung no.1 dengan melepaskan tombol mouse. Diulangi
langkah tadi untuk tabung yang lainnya. Diklik tombol Incubate, tabung akan
masuk ke dalam incubator untuk inkubasi. Diklik tombol Set Up pada
spektrofotometer untuk memanaskan alat dan mengkalibrasinya sehingga siap
digunakan pada pengukuran. Diklik tombol Graph Glucose Standard untuk
memunculkan grafik dari percobaan 1. Diklik dan drag tabung no.1 ke dalam
spektrofotometer kemudian lepaskan tombol mouse, tabung akan terkunci pada
tempatnya. Diklik tombol Analyze, akan terlihat pada layar garis horizontal dan
nilai Optical Density. Drag moveable rule (garis vertical merah pada bagian
kanan monitor spektrofotometer) melewati garis horizontal melewati garis
glukosa standar. Lihatlah apa yang terjadi pada layar glukosa ketika
memindahkan garis tersebut ke kiriBacalah kadar glukosa ketika garis horizontal
melewati garis standar glukosaKlik tombol Record Data. Klik dan drag tabung
dari spektrofotometer ke dalam pencuci tabung, kemudian klik Clear. Ulangi
langkah 22-27 untuk tabung yang lainnya dan catatlah kadar glukosanya
VI.
Data Pengamatan
Percobaan I
14
Tabung uji
Optical Density
1
2
3
4
5
0.8
0.5
0.6
0.8
1.0
Glukosa
mg/desiliter
30
60
90
120
150
Percobaan II
Test Tube
1
2
3
4
Optical
Glukosa
Density
mg/desiliter
0
0
0
0
87
131
89
153
Insulin
Saline
Aloxan
No
Yes
Yes
No
Yes
No
Yes
No
Yes
Kelompok
Mencit
I
Kontrol
(PGA )
1
2
3
4
II
Obat Uji
Berat (g)
39.20
37.50
20.00
25.80
Rata-rata
1
36.00
2
22.00
3
40.00
Massa ( s )
0 min
60 min
142
178
109
99
113
116
174
100
134.5
123.25
164
118
111
133
72
82
Jumlah ratarata
134.50
+ 123.25
257.75
116.25
+ 94.25
15
40.70
Rata-rata
1
22.00
2
20.50
3
20.00
4
13.30
Rata-rata
( Glibenclamid
e dosis I )
III
Obat Uji
( Glibenclamid
e dosis II )
VII.
118
116.25
148
76
114
76
103.5
44
94.25
74
124
87
136
105.25
210.50
103.50
+ 105.25
208.75
Perhitungan
1. Dosis mencit
Dosis = weight ( g )
20
1
2
Kontrol
1.
2.
3.
4.
39.20/20
37.50/20
20.00/20
25.80/20
X
X
X
X
0.5 =
0.5 =
0.5 =
0.5 =
0.98 ml
0.94 ml
0.50 ml
0.65 ml
X
X
X
X
0.5 =
0.5 =
0.5 =
0.5 =
0.90 ml
0.55 ml
1.00 ml
1.02 ml
X
X
X
X
0.5 =
0.5 =
0.5 =
0.5 =
0.55 ml
0.51 ml
0.50 ml
0.33 ml
36.00/20
22.00/20
40.00/20
40.70/20
22.00/20
20.50/20
20.00/20
13.30/20
16
2. Persen penurunan
100%
Obat dosis I
Persen penurunan
257.75 210.50
100%
210.50
22.45 %
Obat dosis II
Persen penurunan
257.75 208.75
100%
208.75
23.47 %
100%
Obat dosis I
Persen kadar
94.25
100%
116 .25
81.08 %
17
Obat dosis II
Persen kadar
105.25
100%
103.50
101.69 %
Grafik
18
VIII.
Perbahasan
Percobaan kali ini bertujuan untuk mengetahui secara lebih baik peran
insulin dalam tubuh dan pengaruhnya terhadap penyakit diabetes, serta mengenal
teknik untuk mengevaluasi penyakit diabetes dengan cara konvensional.
Percobaan ini didasarkan pada prinsip bahwa obat antidiabetes yang diberikan
kepada hewan percobaan (mencit) dapat menurunkan kadar glukosa darah, yang
mana dapat diukur dengan menggunakan glucose test strips dan glucose meter.
Diabetes
mellitus
merupakan
penyakit
gangguan
kronik,
khususnya
Tipe ini disebut juga diabetes mellitus tipe I, yang mana penderitanya
senantiasa membutuhkan insulin. Pada tipe ini terjadi destruksi dari sel
pancreas yang mengarah kepada keadaan defisiensi insulin absolute, yaitu sel
pancreas tidak mampu memproduksi insulin lagi dengan kaibat sel-sel tidak
bias menyerap glukosa dari darah.
2. NIDDM (Non Insulin Dependent Diabetes Mellitus)
Tipe ini disebut juga diabetes mellitus tipe II, yang mana umumnya
penderita diabetes tipe ini tidak memerlukan pengobatan dengan insulin untuk
mempertahankan hidupnya karena defisiensi insulin yang terjadi hanya
bersifat relatif, dimana sel pancreas masih mampu memproduksi insulin.
Pada umumnya, pengobatan dilakukan dengan pemberian obat yang dapat
memicu sekresi insulin dan sensitifitas insulin.
3. Diabetes mellitus Gestasional
Tipe ini terjadi pada wanita yang sedang hamil. Kenaikan kadar
glukosa darah yang terjadi dianggap sebagai suatu hal yang lazim, dimana
kenaikan kadar glukosa darah dapat teradi karena intake makanan yang tinggi
pada wanita hamil dan pengaruh hormon yang dikeluarkan oleh kelenjar
ketika hamil untuk tujuan-tujuan tertentu.
Dari ketiga tipe diabetes mellitus tersebut, tipe yang diujikan dalam percobaan
kali ini adalah diabetes mellitus tipe II / NIDDM, yakni dengan melihat pengaruh
yang diberikan obat antihiperglikemik oral terhadap kadar glukosa darah mencit.
Percobaan diawali dengan mempuasakan mencit sehari sebelum percobaan
dengan tidak diberi makan, tetapi tetap diberikan minum. Tujuannya adalah untuk
memperoleh kadar glukosa puasa mencit. Sebenarnya, terdapat dua tipe
pengukuran kadar glukosa, yakni:
1. Pengukuran kadar glukosa puasa
2. Pengukuran kadar glukosa 2 jam setelah makan
20
Pada percobaan kali ini dipilih kadar glukosa puasa mencit untuk menghilangkan
variabel-variabel yang ada, misalnya nafsu makan mencit yang berbeda-beda,
yang mana dapat menyebabkan intake/masukan glukosa dari makanan yang
berbeda pula. Mencit dengan intake makanan yang tinggi akan menghasilkan
kadar glukosa darah yang tinggi dan sebaliknya, mencit dengan intake makanan
yang rendah akan menghasilkan kadar glukosa darah yang rendah. Selain itu,
apabila dianalogikan pengukuran kadar glukosa darah ini pada manusia,
pengukuran kadar glukosa 2 jam setelah makan lebih rentan terhadap pengaturan
pola makan pasien sebelum pemeriksaan, dimana tipe pengukuran ini lebih
memungkinkan
pasien
untuk
mengurangi
asupan
makanannya
sebelum
pemeriksaan supaya hasil test kadar glukosa darahnya baik. Tentunya, hal ini
salah, karena itulah pengukuran kadar glukosa puasa dipilih.
Setelah dipuasakan selama sehari, mencit kemudian ditimbang. Mencit
dikelompokkan menjadi 3 kelompok, yang terdiri dari:
1. Kelompok Kontrol
Kelompok kontrol diberikan PGA 2% secara per oral, yang mana akan
digunakan sebagai pembanding. Mencit kontrol dengan berat 39,2 g diberikan
PGA sebanyak 0,98 ml
2. Kelompok Uji Dosis
merupakan
obat
antihiperglikemik
oral
golongan
kadar
glukosa
darah
mencit
sebelum
pemberian
obat
antihiperglikemik oral. Kadar glukosa darah mencit ini nantinya akan digunakan
sebagai pembanding untuk melihat ada atau tidaknya penurunan kadar glukosa
mencit sebelum dan sesudah pemberian obat antihiperglikemik oral. Pengukuran
kadar glukosa darah mencit dilakukan dengan menggunakan glucose meter dan
glucose test strips, dimana bagian ujung ekor mencit dipotong, kemudian darah
diteteskan ke bagian ujung strip dan setelah 20 detik kadar glukosa darah akan
terlihat pada monitor glucose meter. Hasilnya:
1. Kadar glukosa darah mencit kontrol adalah 142
2. Kadar glukosa darah mencit uji I adalah 164
3. Kadar glukosa darah mencit uji II adalah 148
Setelah pengukuran kadar glukosa darah sebelum pemberian PGA dan
glibenklamid, semua mencit diberikan glukosa sebanyak 1
Glukosa ini
digunakan sebagai parameter untuk melihat adanya kenaikan kadar glukosa darah
atau tidak. Kenaikan kadar glukosa mencit yang diberikan glibenklamid nantinya
kaan dibandingkan dengan kenaikan kadar glukosa mencit kontrol.
22
teoritis karena pada mencit uji seharusnya terdapat penurunan kadar glukosa
manakala pada mencit kontrol terdapat peningkatan kadar glukosa. Terdapat
beberapa factor yang dapat menyumbang dalam penyimpangan ini. Antaranya
ialah kesalahan praktikan dalam pemberian peroral sehingga dosis glukosa yang
diberi kepada mencit tidak tepat.
VIII.
Kesimpulan
23
Daripada percobaan kali ini,telah diketahui secara lebih baik peran insulin
dalam tubuh dan pengaruhnya pada penyakit diabetes.Teknik untuk mengevaluasi
penyakit diabetes dengan cara konvensional dan komputerisasi telah dikenal .
Persen penurunan pada dosis I adalah 22.45% dan pada dosis II adalah
23.47%.Persen kadar glukosa relatif pada dosis I adalah 81.08% dan pada dosis II
adalah 101.69%.
Daftar pustaka
15 Mei 2012 ]
24
Terapi,
http://www.
Baru
farmasiku
.com/index.php?target=categories&category_id=171 [ Diakses
pada
15 Mei 2012 ]
Soegando,2006
,Bagian
Farmakologi
Fakultas
Kedokteran
Universitas
Indonesia
25