Metode High Performance Liquid

Chromatography untuk Pemisahan

NSAIDs dan Analgesik Opioid pada
Sistem Penghantaran Obat dan
Plasma Manusia
Larasati

Pendahuluan
Penanganan rasa sakit telah berkembang
Kombinasi NSAIDs dan analgesik opioid sering
diresepkan untuk mengurangi rasa sakit yang
hebat, misalnya pada kanker dan pasca
operasi
Penting untuk mengetahui kadar analgesik di
dalam darah untuk memonitor efek klinis dan
ketoksikannya

Pendahuluan
Na diklofenak (derivat asam arilpropionat)
adalah NSAIDs yang memiliki efek analgesik,
antipiretik, dan antiinflamasi
Mekanisme aksi yaitu menghambat COX dan
menekan biosintesis prostaglandin
Flurbiprofen (derivat asam propionat) adalah
NSAIDs untuk menangani rematik
Tramadol HCl adalah agonis opioid yang
memblok reseptor

Struktur kimia sampel

DFS = Na diklofenak
FLP = Flurbiprofen
TMD = Tramadol HCl

Sistem dan kondisi kromatografi

The Sykam GmbH HPLC system consisted of S-2100 solvent
delivery system (Germany)
VE 3210 variable UV/Vis detector
Rheodyne sample injector with a 20 l loop
Hypersil ODS column (250mm x 4.6mm); 5m particle size of
internal packing
S 4011 column thermo controller (30C)
Pemisahan isokratik dengan komposisi fase gerak yang telah
dioptimasi
Fase gerak asetonitril-bufer NaH2PO4 (pH 3.5; 10mM) :
asetonitril (33 : 67 v/v)
Flow rate 1.0 ml/minute
242 nm (0-5 min) dan 274 nm (5-11 nm)

Penyiapan Larutan Baku

Larutan standar DFS, FLP, TMD 100 g/ml
dibuat dengan melarutkan 100 mg @ obat
dalam 100 ml asetonitril
Range pengenceran baku 10 ng/ml 20
g/ml untuk DFS dan 20 ng/ml 10 g/ml
untuk FLP dan TMD
Pengenceran plasma manusia setelah dispiking dengan konsentrasi obat tertentu

Penetapan kadar analgesik dalam obat

paten
10 tablet DFS, FLP, TMD dan 10 kapsul
sustained release DFS, FLP ditumbuk,
ditimbang setara dengan berat tertentu, dan
dilarutkan dalam 100 ml asetonitril
Sampel disonikasi 5 menit dan disaring
dengan filter 0.45 m
1 ml filtrat dilarutkan 50 ml asetronitril
20 l diinjeksi ke sistem HPLC

Penetapan kadar analgesik dalam

sistem penghantaran obat
Microcapsule (liposom) DFS, FLP, TMD setara
dosis tertentu ditimbang, dilarutkan dengan
asetonitril, disentrifugasi, dan disaring dengan
filter 0.45 m
1 ml filtrat dilarutkan 50 ml asetronitril
20 l diinjeksi ke sistem HPLC

Penetapan kadar NSAIDs dalam

plasma manusia
Sampel darah diambil, disentrifugasi, dan
disimpan pada suhu -20C
Sampel diekstraksi dan supernatan
diinjeksikan ke dalam HPLC

Hasil dan Pembahasan

Pemilihan sistem
kromatografi

Penetapan kadar analgesik dalam sediaan obat

Akurasi dan presisi within day

Penetapan kadar analgesik dalam sediaan obat

Akurasi dan presisi inter day

Penetapan kadar analgesik dalam sediaan obat

Recovery

Penetapan kadar analgesik dalam plasma

Linearitas Kurva Baku

Penetapan kadar analgesik dalam plasma

Akurasi dan presisi within day

Penetapan kadar analgesik dalam plasma

Akurasi dan presisi inter day

Penetapan kadar analgesik dalam plasma

stabilitas

Penetapan kadar analgesik dalam plasma

stabilitas

Conclusion
A simple and inexpensive simultaneous HPLC
method for the determination of analgesics
employing UV detection was developed and found
successful in analysis of marketed brands, drug
delivery systems and human plasma samples.
The validation parameters were also found in
acceptable limits of FDA and ICH.
The method was found accurate, precise and stable
that makes it applicable for quality control
operations
in
pharmaceutical
industry,
pharmacokinetics studies and therapeutic drug
monitoring of these drugs in clinical settings.