Laporan Praktikum Bakteriologi

Nama

: Yuni Tri Wulandari

Tingkat

: II

Institusi

:D-III Analis Farmasi dan Makanan

No. Absen

:08

Tanggal

:25 September 2014

Topik

: Pewarnaan Gram

Tujuan

: untuk mengetahui perbedaan kuman gram positif dan kuman gram negatif

Prinsip

Alat

Bahan

Kuman Gram Positif

Dituangi Gram 1 (gentian violet) berwarna ungu, kemudian digenangi
dengan gram 2 (lugol) agar cat semakin kuat dan bila dilunturkan dengan
gram 3 (alkohol 70%) tidak luntur, dan bila digenangi Fuchsin tidak
terserap, sehingga kuman tetap berwarna ungu
Kuman Gram Negatif
Dituangi Gram A (gentian Violet) berwarna ungu, kemudian digenangi
dengan Fuchsin cat tersarap dan kuman berwarna merah

Mikroskop
Obyek glass
Lampu spiritus
Ose bulat
Pipet Pasteur
Korek api

Suspensi kuman
Gram 1 (Gentian Violet)
Gram 2 (Lugol)
Gram 3 (alkohol 70%)
Gram 4 (Fuchsin)
Oil Immersi
Xylol

Prosedur

:
1. Siapkan obyek glass yang telah bersih
2. Ambil sediaan dengan menggunakan ose bulat yang sebelumnya ose telah
disterilkan
3. Sebelum dan sesudah menga,bil sediaan tabung diflaming
4. Sediaan difiksasi
5. Sediaan dituangi dengan Gram 1 (Gentian Violet) selama 3-5 menit
6. Cat dibuang dan dicuci dengan air kran
7. Sediaan digenangi dengan gram 2 (lugol) selama 1 menit
8. Cuci dengan air kran
9. Sediaan dilunturkan dengan gram 3 (alkohol 70%) selama 10-15 detik
10. Cuci dengan air kran
11. Sediaan digenangi gram 4 (Fuchsin) selama 3-5 menit, cuci tangan dengan
air kran keringkan
12. Periksa dibawah mikroskop dengan pembesaran 100x

Hasil

Kesimpulan

Bentuk
Warna
Susunan
Sifat

: batang
: merah
: menyebar
: Gram negatif

:
Jadi, pada pewarnaan Gram ditemukan bakteri Gram negatif, warna merah,
susunan menyebar, dan sifat Gram negatif.

Diskusi

Pewarnaan Gram
Adalah pewarnaan untuk membedakan kuman yang bersifat gram negatif
dan gram positif dengan menggunakan lebih dari satu macam cat
Hasil pewarnaan Gram
Kuman gram positif akan berwarna ungu
Kuman gram negatif akan berwarna merah
Macam-macam cat pada pewarnaan Gram
a. Gram 1 (Gentian Violet)
Untuk mewarnai kuman Gram positif
b. Gram 2 (Lugol)
Sebagai cat penguat
c. Gram 3 (Alkohol 70%)
Untuk melunturkan cat
d. Gram 4(Fuchsin)
Untuk mewarnai kuman Gram negatif
Komposisi cat Gram
1. Gram 1
A. Cat induk gentian violet 10 ml

1% phenol dalam air 90 ml

B. Gentian Violet 1 gram
Carbolic acid kristal 2 gram
Alkohol 96% 10 ml
Aquadest 100ml
2. Gram 2
Iodium kristal 1 gram
KI 2 gram
Aquadest 300 ml
3. Gram 3
Alkohol 70%
4. Gram 4
Cat induk Fuchsin 10 ml
Aquadest 90 ml
Yang diamati pada pawarnaan Gram
1. Bentuk kuman
2. Susunan kuman
3. Warna kuman
4. Sifat kuman
5. Pewarnaan kuman
Contoh bakteri Gram negatif
1. Escherichia coli
2. Salmonella thypi
3. Shigella
4. Vibrio cholerae
5. Proteus
Contoh bakteri Gram positif
1. M. Tuberculose
2. M. Leprae
3. C. Diptheri