Anda di halaman 1dari 37

Biokatalisis:

KinetikadanInhibisienzim

UMM
2015

Setelah mengikuti perkuliahan ini mahasiswa diharapkan:

1. Mengetahuitentangenzimdanmemahami
pentingnyaenzimdalamilmufarmasidanobat.
Mengetahuidasarkatalisisenzimatik,konsep
umum,terminology,dansifatenzim,spesifisitas,
danbagaimanaenzimbekerja(tinjauanumum).
2. Mengetahuidanmengertitentangdasarkinetika
enzim,persamaanMichaelis-Menten,batasan,
implikasi,pengamatan(plotkurva)dan
sejauhmanapentingnya,relevansidan
interpretasipersamaandanterminologinya,
definisiparameterkinetika(Km,kcat,kcat/Km).

3.Mampumendefinisikaninhibitorenzim,peran
danpentingnya,sertadefinisidanperbedaan
antarainhibisireversibeldantakreversibel
inhibisikompeteitifdannon-kompetitif,makna
danrelevansiKi,kurvaLineweaver-Burkdan
interpretasinya;
contohberbagaijenisinhibitor.

SubTopik
I.Konsepumumbiokatalisis;
II.Kinetikaenzim
III.Inhibisienzim:reversibel,kompetitifdan
non-kompetitif

I.KONSEPUMUMBIOKATALIS
Enzimberfungsisebagaibiokatalisator,artinya
mempercepatjalannyareaksidengancara
menurunkanenergiaktivasi

Energiaktivasiadalah
energiyangdiperlukan
untukmengaktifkansuatu
reaktansehinggadapat
bereaksiuntuk
membentuksenyawalain.

ENZIM?

Enzimadalahproteinyangmengkatalisis
reaksi-reaksibiokimia.Enzimbiasanya
terdapatdalamseldengankonsentrasi
yangsangatrendah,dimanamereka
dapatmeningkatkanlajureaksitanpa
mengubahposisikesetimbangan;artinya
baiklajureaksimaupunlajureaksi
kebalikannyaditingkatkandengan
kelipatanyangsama.
Enzimdiproduksidisitoplasma

KarakteristikEnzim
Enzimmempercepatreaksikimiatetapitidak
mempengaruhikeseimbanganakhir.
Enzimhanyadiperlukandalamjumlahkecil
untukmengubahsejumlahbesarmolekul.
EnzimhanyaakanberfungsipadakondisipH,
temperatur,konsentrasisubstrat,kofaktor
tertentu.
Enzimbersifatspesifik(khusus)artinyaenzim
hanyamengkatalisisreaksidalamskalakecil
ataudalambeberapakasushanyamengkatalis
satureaksi.

ENZIM
SEDERHANA

PROTEIN

ENZIM
KONJUGASI/HALOENZIM

PROTEIN

APOENZIM

ORGANIK=KOENZIM

BUKANPROTEIN

GUGUSPROSTETIK

ANORGANIK=KOFAKTOR

Untukaktivitasnyaenzimseringmemerlukan
adanyagugusnonproteinyaituko-faktor.
Istilahgugusprostetikdigunakanuntukkofaktoryangterikatkuatolehikatankovalen
terhadapproteinenzim,sedangkan
koenzim untuksenyawayangikatannya
kurangkuatterhadapenzim.Bagianprotein
darienzimdinamakanapoenzim,
sedangkanenzimyanglengkapdinamakan
holoenzim.

KOENZIM:
CoenzymeA
Flavinmononucleotide
FlavinAdeninedinucleotide
Nicotinamideadenine
dinucleotide
Adininedinucleotide
phosphat
Thiaminepyrophosphat
Tetrahydrofolate
Deoxyadenosylcobalamin
Pyridoxalphosphat

KOFAKTOR
-Zn2+
-Fe2+

Enzimmimilikisisiaktif=bagianyang
berikatandengansubtrat

Mekanismekerjaenzim
E+SESE+P

Duamodelikatanenzim

Penggolonganenzim
Tempat
bekerjanya

Cara
terbentuknya

Dayakatalisnya
Subtratyang
dikatalisnya

Tempatbekerjanya
Endoenzim=intraseluler
berkerjadidalamsel
Eksoenzim=ekstraseluler
bekerjadiluarsel

Caraterbentuknya
Enzimkonstitutif
Enzimyangjumlahnyatetapdalamsel,
tidakdipengaruhisubtrat
Enzimadapatif
Enzimyangpembentukannyadirangsang
olehadanyasubstrat

Subtratyangdikatalisnya

Protease
Amilase
Lipase
Laktase
Seloluse

Dayakatalis
Oksidoreduktase
Enzimyangmengkatalisisreaksioksidasireduksi,yangmerupakanpemindahanelektron,
hidrogenatauoksigen.
contoh,oksigenase,dehidrogenase,
b. Transferase
Enzimyangmengkatalisispemindahangugusan
molekuldarisuatumolekulke
molekulyanglain.
contoh,Transaminase,Transfosforilase,dan
Transasilase.

Hidrolase
Enzimyangmengkatalisisreaksi-reaksi
hidrolisis
Contoh:Karboksilesterase,Kitinase,Peptidase,
dll
Liase
Enzimyangmengkatalisispengambilanatau
penambahangugusandarisuatumolekultanpa
melaluiproseshidrolisis
Contoh:Lmalathidroliase(fumarase),
Dekarboksiliase(dekarboksilase)

. Isomerase
Enzimyang mengkatalisisreaksiisomerisasi
Contoh:
-Rasemase,merubahl-alaninD-alanin
-Epimerase,merubahD-ribulosa-5-fosfatD-

xylulosa-5-fosfat
-Cis-transisomerase,merubah
transmetinalcisrentolal
-Intramolekulketolisomerase,merubahDgliseraldehid-3-fosfatdihidroksiasetonfosfat
-Intramolekultransferaseataumutase,
merubahmetilmalonil-CoAsuksinil-CoA

Ligase
Enzimyangmengkatalisisreaksi
penggabungan2molekuldengan
dibebaskannyamolekulpirofosfatdari
nukleosidatrifosfat
contohadalahenzimasetat=CoASH
ligaseyangmengkatalisisrekasisebagai
berikut:
Asetat+CoA-SH+ATPAsetilCoA+AMP+P-P

Kinetikaenzim
Aktivitasenzim=kecepatanenzimuntuk
melakukankatalispadasubtrat,
satuannyaUnit(U)
1U=Jumlahenzimyangmelakukan
katalissehinggaterjadiperubahan1
mikronmolsubtratpermenitpadasuhu
25oC

ModelMichaelis-Menten
Modelinimenggambarkankatalisenzim
dengankonsepsebagaiberikut:
k1

k3

E+SESE+P
k2

.PersamaanMichaelis-Menten
Vinit =

Vmax [S]
KM + [S]

Km=k2+k3
k1

Km(KonstantaMinhaelis)menggambarkan
kesetimbangandisosiasikompleksESmenjadi
enzimdansubstrat.
NilaiKmkecilberartienzimmempunyaiafinitas
tinggiterhadapsubstratmakakompleksES
sangatmantap,sehinggakesetimbanganreaksi
kearahkompleksES.
ApabilanilaiKmbesarberartienzim
mempunyaiafinitasrendahterhadapsubstrat,
sehinggakesetimbanganreaksikearahE+S.
Km=k2+k3
k1

Aktivitasenzimtergantungkepada:
- Konsentrasisubtrat
- Konsentrasienzim
- pH
- suhu

- Konsentrasi enzim
Padasituasidimanakonsentrasisubtratjenuh,
peningkatankonsentrasienzimakan
menyebabkankecepatanenzimjugameningkat

- Suhu
Setiapjenisenzimmemilikiaktivitasmaksimal
padasuhutertentu
- pH
Setiapjenisenzimmemilikiaktivitasmaksimal
padapHtertentu

Inhibitor enzim =
zat atau senyawa yang dapat menghambat enzim
.Inhibitor kompetitif
Senyawatertentuyang
mempunyaistrukturmirip
dengansubstratsaat
reaksienzimatikakanterjadi.
Contoh:asammalonat
Inhibitorinidapatdiatasi
denganmenambahjumlah
substratsampai
berlebihan.

INHIBITOR NON KEMPETITIF


Zat-zatkimiatertentu
mempunyaiafinitasyangtinggi
terhadapionlogampenyusun
enzim.
Senyawapenghambatuntuk
enzimyangmengandungFe,
yaitudenganterjadinyareaksi
antarasenyawa-senyawa
tersebutdenganionFeyang
menyebabkanenzimmenjadi
tidakaktif.
Merkuri(Hg)danperak(Ag)
merupakanpenghambatenzim
yangmengandunggugusan
sulfhidril(-SH).

Inhibitorirreversible
- Senyawapenghambatyangterikatkuat
padasisiaktifenzim
- Ikatantersebutadalahikatankovalen
- Enzimmenjadiinaktifsecarapermanen
- Contoh:diisopropylfluorophosphat,
iodoacetamide,danpenicillin

FeedBackInhibitor
Penghambatanyangdisebabkanolehhasilakhirsuatu
rangkaianreaksienzimatikyangmenghambataktifitas
enzimpadareaksipertama.Hasilakhirreaksijuga
mempengaruhipembentukanenzim,yangdapat
digambarkansebagaiberikut:

Enzima Enzimb
Enzimc
Enzimd
A
BCD
X
ABCDX
Keterangan:A,B,C,D:substratenzima,b,c,d.
X:hasilakhirreaksienzimatikyangmenghambat
sintesisenzima.

InhibitorRepresor
- Represoradalahhasilakhirsuaturangkaianreaksi
enzimatikyangdapatmempengaruhiataumengatur
pembentukanenzim-enzimpadareaksisebelumnya.
- Gambaranskematikreaksinyaadalahsebagaiberikut:
Enzima EnzimbEnzimc
Enzimd
A
BCD

Keterangan:A,B,C,D:substratenzima,b,c,d.
X:hasilakhirreaksienzimatikyangmenghambatsintesis
enzima,b,c,d.

Alosterik inhibitor

Penghambatyangdapatmempengaruhienzimalosterik.
Enzimalosterikadalahenzimyangmempunyaidua
bagianaktif,yaitubagianaktifyangmenangkapsubstrat
danbagianyangmenangkappenghambat.
Apabilaadasenyawayangdapatmemasukibagianyang
menangkappenghambatmakaenzimmenjaditidakaktif,
senyawapenghambattersebutmerupakanpenghambat
alosterik.
Struktursenyawapenghambatalosteriktidakmirip
denganstruktursubstrat.
Apabilaenzimmenangkapsubstratmakapenghambat
tidakdapatterikatpadaenzim,sehinggaenzimdapat
aktifmereaksikansubstratmenjadiproduk.