KinetikadanInhibisienzim
UMM
2015
1. Mengetahuitentangenzimdanmemahami
pentingnyaenzimdalamilmufarmasidanobat.
Mengetahuidasarkatalisisenzimatik,konsep
umum,terminology,dansifatenzim,spesifisitas,
danbagaimanaenzimbekerja(tinjauanumum).
2. Mengetahuidanmengertitentangdasarkinetika
enzim,persamaanMichaelis-Menten,batasan,
implikasi,pengamatan(plotkurva)dan
sejauhmanapentingnya,relevansidan
interpretasipersamaandanterminologinya,
definisiparameterkinetika(Km,kcat,kcat/Km).
3.Mampumendefinisikaninhibitorenzim,peran
danpentingnya,sertadefinisidanperbedaan
antarainhibisireversibeldantakreversibel
inhibisikompeteitifdannon-kompetitif,makna
danrelevansiKi,kurvaLineweaver-Burkdan
interpretasinya;
contohberbagaijenisinhibitor.
SubTopik
I.Konsepumumbiokatalisis;
II.Kinetikaenzim
III.Inhibisienzim:reversibel,kompetitifdan
non-kompetitif
I.KONSEPUMUMBIOKATALIS
Enzimberfungsisebagaibiokatalisator,artinya
mempercepatjalannyareaksidengancara
menurunkanenergiaktivasi
Energiaktivasiadalah
energiyangdiperlukan
untukmengaktifkansuatu
reaktansehinggadapat
bereaksiuntuk
membentuksenyawalain.
ENZIM?
Enzimadalahproteinyangmengkatalisis
reaksi-reaksibiokimia.Enzimbiasanya
terdapatdalamseldengankonsentrasi
yangsangatrendah,dimanamereka
dapatmeningkatkanlajureaksitanpa
mengubahposisikesetimbangan;artinya
baiklajureaksimaupunlajureaksi
kebalikannyaditingkatkandengan
kelipatanyangsama.
Enzimdiproduksidisitoplasma
KarakteristikEnzim
Enzimmempercepatreaksikimiatetapitidak
mempengaruhikeseimbanganakhir.
Enzimhanyadiperlukandalamjumlahkecil
untukmengubahsejumlahbesarmolekul.
EnzimhanyaakanberfungsipadakondisipH,
temperatur,konsentrasisubstrat,kofaktor
tertentu.
Enzimbersifatspesifik(khusus)artinyaenzim
hanyamengkatalisisreaksidalamskalakecil
ataudalambeberapakasushanyamengkatalis
satureaksi.
ENZIM
SEDERHANA
PROTEIN
ENZIM
KONJUGASI/HALOENZIM
PROTEIN
APOENZIM
ORGANIK=KOENZIM
BUKANPROTEIN
GUGUSPROSTETIK
ANORGANIK=KOFAKTOR
Untukaktivitasnyaenzimseringmemerlukan
adanyagugusnonproteinyaituko-faktor.
Istilahgugusprostetikdigunakanuntukkofaktoryangterikatkuatolehikatankovalen
terhadapproteinenzim,sedangkan
koenzim untuksenyawayangikatannya
kurangkuatterhadapenzim.Bagianprotein
darienzimdinamakanapoenzim,
sedangkanenzimyanglengkapdinamakan
holoenzim.
KOENZIM:
CoenzymeA
Flavinmononucleotide
FlavinAdeninedinucleotide
Nicotinamideadenine
dinucleotide
Adininedinucleotide
phosphat
Thiaminepyrophosphat
Tetrahydrofolate
Deoxyadenosylcobalamin
Pyridoxalphosphat
KOFAKTOR
-Zn2+
-Fe2+
Enzimmimilikisisiaktif=bagianyang
berikatandengansubtrat
Mekanismekerjaenzim
E+SESE+P
Duamodelikatanenzim
Penggolonganenzim
Tempat
bekerjanya
Cara
terbentuknya
Dayakatalisnya
Subtratyang
dikatalisnya
Tempatbekerjanya
Endoenzim=intraseluler
berkerjadidalamsel
Eksoenzim=ekstraseluler
bekerjadiluarsel
Caraterbentuknya
Enzimkonstitutif
Enzimyangjumlahnyatetapdalamsel,
tidakdipengaruhisubtrat
Enzimadapatif
Enzimyangpembentukannyadirangsang
olehadanyasubstrat
Subtratyangdikatalisnya
Protease
Amilase
Lipase
Laktase
Seloluse
Dayakatalis
Oksidoreduktase
Enzimyangmengkatalisisreaksioksidasireduksi,yangmerupakanpemindahanelektron,
hidrogenatauoksigen.
contoh,oksigenase,dehidrogenase,
b. Transferase
Enzimyangmengkatalisispemindahangugusan
molekuldarisuatumolekulke
molekulyanglain.
contoh,Transaminase,Transfosforilase,dan
Transasilase.
Hidrolase
Enzimyangmengkatalisisreaksi-reaksi
hidrolisis
Contoh:Karboksilesterase,Kitinase,Peptidase,
dll
Liase
Enzimyangmengkatalisispengambilanatau
penambahangugusandarisuatumolekultanpa
melaluiproseshidrolisis
Contoh:Lmalathidroliase(fumarase),
Dekarboksiliase(dekarboksilase)
. Isomerase
Enzimyang mengkatalisisreaksiisomerisasi
Contoh:
-Rasemase,merubahl-alaninD-alanin
-Epimerase,merubahD-ribulosa-5-fosfatD-
xylulosa-5-fosfat
-Cis-transisomerase,merubah
transmetinalcisrentolal
-Intramolekulketolisomerase,merubahDgliseraldehid-3-fosfatdihidroksiasetonfosfat
-Intramolekultransferaseataumutase,
merubahmetilmalonil-CoAsuksinil-CoA
Ligase
Enzimyangmengkatalisisreaksi
penggabungan2molekuldengan
dibebaskannyamolekulpirofosfatdari
nukleosidatrifosfat
contohadalahenzimasetat=CoASH
ligaseyangmengkatalisisrekasisebagai
berikut:
Asetat+CoA-SH+ATPAsetilCoA+AMP+P-P
Kinetikaenzim
Aktivitasenzim=kecepatanenzimuntuk
melakukankatalispadasubtrat,
satuannyaUnit(U)
1U=Jumlahenzimyangmelakukan
katalissehinggaterjadiperubahan1
mikronmolsubtratpermenitpadasuhu
25oC
ModelMichaelis-Menten
Modelinimenggambarkankatalisenzim
dengankonsepsebagaiberikut:
k1
k3
E+SESE+P
k2
.PersamaanMichaelis-Menten
Vinit =
Vmax [S]
KM + [S]
Km=k2+k3
k1
Km(KonstantaMinhaelis)menggambarkan
kesetimbangandisosiasikompleksESmenjadi
enzimdansubstrat.
NilaiKmkecilberartienzimmempunyaiafinitas
tinggiterhadapsubstratmakakompleksES
sangatmantap,sehinggakesetimbanganreaksi
kearahkompleksES.
ApabilanilaiKmbesarberartienzim
mempunyaiafinitasrendahterhadapsubstrat,
sehinggakesetimbanganreaksikearahE+S.
Km=k2+k3
k1
Aktivitasenzimtergantungkepada:
- Konsentrasisubtrat
- Konsentrasienzim
- pH
- suhu
- Konsentrasi enzim
Padasituasidimanakonsentrasisubtratjenuh,
peningkatankonsentrasienzimakan
menyebabkankecepatanenzimjugameningkat
- Suhu
Setiapjenisenzimmemilikiaktivitasmaksimal
padasuhutertentu
- pH
Setiapjenisenzimmemilikiaktivitasmaksimal
padapHtertentu
Inhibitor enzim =
zat atau senyawa yang dapat menghambat enzim
.Inhibitor kompetitif
Senyawatertentuyang
mempunyaistrukturmirip
dengansubstratsaat
reaksienzimatikakanterjadi.
Contoh:asammalonat
Inhibitorinidapatdiatasi
denganmenambahjumlah
substratsampai
berlebihan.
Inhibitorirreversible
- Senyawapenghambatyangterikatkuat
padasisiaktifenzim
- Ikatantersebutadalahikatankovalen
- Enzimmenjadiinaktifsecarapermanen
- Contoh:diisopropylfluorophosphat,
iodoacetamide,danpenicillin
FeedBackInhibitor
Penghambatanyangdisebabkanolehhasilakhirsuatu
rangkaianreaksienzimatikyangmenghambataktifitas
enzimpadareaksipertama.Hasilakhirreaksijuga
mempengaruhipembentukanenzim,yangdapat
digambarkansebagaiberikut:
Enzima Enzimb
Enzimc
Enzimd
A
BCD
X
ABCDX
Keterangan:A,B,C,D:substratenzima,b,c,d.
X:hasilakhirreaksienzimatikyangmenghambat
sintesisenzima.
InhibitorRepresor
- Represoradalahhasilakhirsuaturangkaianreaksi
enzimatikyangdapatmempengaruhiataumengatur
pembentukanenzim-enzimpadareaksisebelumnya.
- Gambaranskematikreaksinyaadalahsebagaiberikut:
Enzima EnzimbEnzimc
Enzimd
A
BCD
Keterangan:A,B,C,D:substratenzima,b,c,d.
X:hasilakhirreaksienzimatikyangmenghambatsintesis
enzima,b,c,d.
Alosterik inhibitor
Penghambatyangdapatmempengaruhienzimalosterik.
Enzimalosterikadalahenzimyangmempunyaidua
bagianaktif,yaitubagianaktifyangmenangkapsubstrat
danbagianyangmenangkappenghambat.
Apabilaadasenyawayangdapatmemasukibagianyang
menangkappenghambatmakaenzimmenjaditidakaktif,
senyawapenghambattersebutmerupakanpenghambat
alosterik.
Struktursenyawapenghambatalosteriktidakmirip
denganstruktursubstrat.
Apabilaenzimmenangkapsubstratmakapenghambat
tidakdapatterikatpadaenzim,sehinggaenzimdapat
aktifmereaksikansubstratmenjadiproduk.