Bagi teman-teman yang akan ujian praktikum Mikrobiologi, semangat ya.

Ini rangkuman catatan mimin waktu ujian praktikum Mikro.

A. Alat
Baiklah kita mulai dari alat-alat :
1. Inkubator :
Yaitu suatu alat yang berfungsinya sebagai alat untuk menginkubasi atau memeram
mikroba pada suhu yang terkontrol. Alat ini dilengkapi dengan pengatur suhu dan pengatur
waktu.

2. Ose / Jarum Inokulum (inoculating loop)

Yaitu jarum inokulum berfungsi untuk memindahkan biakan untuk ditanam/ditumbuhkan
ke media baru. (mimin yakin pasti tau bentuknya yang mana hehe *-* )
3. Cawan Petri ( Petri Dish)
Cawan petri berfungsi untuk membiakkan (kultivasi) mikroorganisme. Medium dapat
dituang ke cawan bagian bawah dan cawan bagian atas sebagai penutup. Cawan petri tersedia
dalam berbagai macam ukuran, diameter cawan yang biasa berdiameter 15 cm dapat
menampung media sebanyak 15-20 ml, sedangkan cawan berdiameter 9 cm kira-kira cukup
diisi media sebanyak 10 ml.

4. Autoklaf (Autoclave)
Autoklaf adalah alat pemanas tertutup yang digunakan untuk mensterilisasi suatu
benda menggunakan uap bersuhu dan bertekanan tinggi (121 0C, 15 lbs) selama kurang
lebih 15 menit.

Autoklaf terutama ditujukan untuk membunuh endospora, yaitu sel resisten yang
diproduksi oleh bakteri, sel ini tahan terhadap pemanasan, kekeringan, dan antibiotik.
Endospora dapat dibunuh pada suhu 100 C, yang merupakan titik didih air pada
tekanan atmosfer normal. Pada suhu 121 C dalam tekanan 1 atm, endospora dapat
dibunuh dalam waktu 4-5 menit, dimana sel vegetatif bakteri dapat dibunuh hanya dalam
waktu 6-30 detik pada suhu 65 C. (Wah bentuknya mirip dandang nasi/sop ya, jadi ngiler
:D)

5. Oven
Oven Berfungsi untuk sterilisasi kering. alat-alat yang disterilkan menggunakan oven
antaralain peralatan gelas seperti cawan petri, tabung reaksi, dll. serilisasi kerning dengan
oven dilakukan dengan cara memanaskan dengan suhu 160-170 0 C selama 1-2 jam.
(Bentuknya mirip binggo dengan oven kue di tukang roti. Jangan salah masukkan ya
kalau ntar jadi ahli mikrobiologi).
6. Biological Safety Cabinet / Laminar Air Flow
Biological Safety Cabinet (BSC) atau dapat juga disebut Laminar Air Flow (LAF) adalah
alat yang berguna untuk bekerja secara aseptis karena BSC mempunyai pola pengaturan dan
penyaring aliran udara sehingga menjadi steril dan aplikasisinar UV beberapa jam sebelum
digunakan.
(Kalau pernah main-main ke rumah sakit anak atau lihat di tv, pasti ingat benda ini
mirip banget. Emang benda ini prinsip kerjanya sama dengan di rumah sakit anak.
Agar tidak terkontaminasi deng.)

7. Anaerobic jars
Anaerobic jars adalah suatu wadah berpenutup kedap udara yang digunakan untuk
kultivasi mikroorganisme anaerob
Prinsip kerja : Menyerap O2 dengan cara mengikatnya dengan Hsehingga terbentuk H2O yang
kemudian diserap lagi sehingga terciptakondisi yang anaerob.

8. Desikator
Prinsip kerja : Menjaga kelembapan dengan cara menyerap uap air (olehsilika gel).
Fungsi : Menjaga objek (biakan) tetap pada berat normal.

9. Gas Eto
Suhunya biasanya 55 0 C. Merupakan autoclave yang mengalami modifikasi. Alat ini
bersifat bakterisidal dan sporasidal. Tidak tahan terhadap panas tinggi.
Tips mimin :
1. Apa beda antiseptik dengan desinfektan? Hayooo
2. Pemanasan <100 0 C dengan 100>0 C apa bedanya?
B. Media
Sekarang kita cus ke media yang sering digunakan dan sering di tanya saat ujian.
HohOhoHo.
1. Penanaman M.tuberculosis pakai media : (KOL). (mimin yakin ini bakal ditanya, tapi
jangan bilang-bilang ya)
- K = kudoh
- O = ogawa
- L = lowenstain jensen
2. Penanaman bakteri anaerob :
- Agar darah
- Brucella agar darah

- Thyioglicolat
- Thyioglicolat dengan antibiotik
3. Penanaman enterobakteri : (saat mimin ujian ini di tanyak mas broh).
- DCLS
- TCBS
- Mc Conkey Agar
4. Penanaman mikologi : mikologi kan jamur, jadi mimin ingetnya : Pak Sudirman kena
jamur di Daerah Anunya. (jadi ingat awalnya aja P dan S).
- SDA
- PDA
5. Penanaman media sensitivitas test :
- Agar base
- Mueller Hinton
- DST
- Supristol
- BHI
C. Pewarnaan
Mari sista kita belajar mewarnai ya.
1. Pewarnaan sederhana :
Pakai Methyline blue yang digenangi selama 30 -60 detik.
2. Pewarnaan gram :
a. Gram positif :
Bakterinya warna ungu. Kok bisa? Ya bisalah karena kan methylin blue. Jadi
prinsipnya, pada bakteri gram +, di berwarna ungu karena sanggup
mempertahankan warna dari pewarnaan walaupun disiram pakai alkohol..
Kalau gram -, gak sanggup untuk mempertahankan pewarnaan ungu, jadi dia
ambil pewarnaan dari warna counter yakni merah).
b. Gram negatif :
Bakterinya warna merah. Penjelasan udah atu di atas.
3. BTA (Bakteri Tahan Asam).
o Pemeriksaan Mycobakterium :
Ziehl Neelsen
Tan Thiam Hock
Prinsipnya pertama di genangi dengan zat warna fuchin basa yang
mengandung fenol (carbol fuchin), lalu di lunturkan dengan asam keras H2SO4
atau HCl dalam alkohol 95%.
Zat warna yang digunkan :
o Carbol fuchin
o Asam alkohol
o Methyline blue
4. Pewarnaan kapsul pakai Gins Burri. (ini keluar mas bro waktu ujian mimin)
5. Pewarnaan flagella pakai pewarnaan Gray
6. Pewarnaan Chlamidya pakai :
a. Giemsa
b. Gimenez

Langsung ke soal latihan ya guys :

1. Penanaman pada medium cair yang diisi dengan tabung terbalik untuk melihat
apakah ada gas atau tidak menggunakan jesnis tabung?
Tabung duham
2. Pada penanman medium padat, menggunakan teknik penggoresan?
o Radian
o Sinambung
3. Yang merupakan bakteri kontaminan adalah :
o Bacillus subtilis
o Proteus sp
4. Pada penanman spesies Nisseria, maka dikultur di suasana mikroaerofilik, pada
suhu 36,5-370c. Dilakukan di kultur di media ?
o Coklat agar atau thayer martin.
5. Uji serologi ya sis.
a. Infeksi Troponema palladium akan mengakibatkan penyakit ?
Sifilis
b. Untuk melakukan uji pada Troponema palladium dilakukan?
Serologi (untuk mendeteksi antibodi).
c. Pada uji serologi dilakukan 2 tes yakni uji serologi nonspesifik dan
spesifik.
Tes Nonspesifik (Reagins Test):
Menggunakan cardiolipin sebagai antigennya.
a. Tes Flokulasi (flocculation test) yaitu:
- VDRL (venereal disease research laboratory) test
- RPR (rapid plasma reagin) test
- Kahn test
b. Tes Ikatan Komplemen (complement fixation test) yaitu:
- Wassermann test
- Kolmer test
Uji Serologi Spesifik (tes spesifik)
Pada uji (test) ini dipakai antigen dari T. pallidum. Beberapa contoh uji ini
adalah:
a. TPHA (T. pallidum haemagglutination) test
b. TPI (T. pallidum immobilization) test
c. FTA-ABS (fluorescent treponemal antibody absorbed) test

BTC
eaio
rskdc
sieac

t
r

pliki
o/G/
rBB
ameu
tPrl
aosa
nipt

s
t

fgo
r
a

1. Cocci Gram Positif Penyebab Infeksi Bernanah ( Pyogenic Cocci)

A. STAPHYLOCOCCUS sp,
Ciri-ciri: Berbentuk sferis/ coccus/ bulat ; berdiameter : 1mikrometer
Tersusun irreguler/ staphyle/ seperti Anggur ( A bunch of
Grapes)
Gram Positif ( warna= Ungu)
Nonspora ( Tidak berspora)
Nonmotil ( Tidak bergerak)
Bersifat Aerob atau mikroaerob

Klasifikasi:
Spesies

Warna
Koloni

Hemolisa
pada
Agar
Darah

S. aureus

kuning
emas

S. citreus/

kuning

Beta
Hemolyti
c
Beta/ O

Fermenta
si pada
Mannitol
Salt Agar
(MSA)
+

Koagulas
e

Uji Sensitif
NOVOBIO
SIN

DNAase

S.
saphropyti
cus
S. albus/ S.
epidermidi
s

citrun

Putih/Alb
a

Beta/ O

Untuk membedakan Staphylococcus sp. Dengan Streptococcus sp adalah

dengan:
-

Tes Katalase + ; Mengubah Hidrogen Peroksida(H2O2) menjadi H2O dan

O2
B. STREPTOCOCCUS
Ciri-ciri : Berbentuk sferis/ coccus/ bulat
Tersusun seperti berbentuk rantai.
Gram Positif ( warna=ungu)
Tidak Berspora
Klasifikasi :

Klasifikasi

S. alpha
Hemolyticus

S. Beta
Hemolyticus

Hemolisa
pada agar
Darah

Tidak
sempurna;
tampak warna
kehijauan di
sekeliling
koloni ( green
hemolysis)

Sempurna ; +
Clear ZOne

S. Gamma
Hemolyticus
(anhemolisa)
Tidak
melisiskan
darah

Untuk membedakan antara serogroup A(pyogenes) dan serogroup B(agalactie)

Streptococcus Beta hemoliticus adalah dengan melakukan tes Basitrasin;
Serogroup A (+) basitrasin dan Serogroup B (-) basitrasin
C. Diplococcus Pneumoniae
Perbedaan antara Diplococcus pneumoniae dan Stertococcus viridans
( ada di penuntun)
2. Cocci Gram Negatif Penyebab Infeksi Bernanah( Pyogenic Cocci)
A. Neiserria
Ciri-ciri : Gram negatif ( warna= Merah muda)
Tersusun berpasangan seperti biji kopi.
Klasifikasi :
N. meningitis : membentuk asam dari glukosa dan maltosa

N. gonorrhoeae : membentuk asam dari glukosa saja.

-

Kultur :
Agar Coklat
Thayer Martin

Ok guys, kan diatas udah di jelasin tentang beberapa hal pengalaman mimin selama ini. So,
mari kita baca ya dengan penuh hikmah dan secara seksama. Jangan lupa untuk diHayati ya !

(bukan hayati dan bang zainuddin ya hehehe). Mimin jamin ini bakal keluar (padahal mimin
bukan dosen heheh).
Apa yang terlihat
tidak

Hasil

ditemukan

pandang
ditemukan
pandang

1-9

BTA

dalam

BTA

dalam

(tuliskan

jumlah

Apa yang

100

lapang Negati

dituliskan
Neg

100

f
lapang Scanty

Tulis jumlah

BTA

yang *

BTA

ditemukan)
ditemukan 10 99 BTA dlm 100 lapang 1+

1+

pandang
ditemukan

1 10 BTA setiap 1 lapang 2+

2+

pandang(periksa minimal 50 lapang pandang)

ditemukan 10 BTA dalam 1 lapang 3+

3+

pandang(periksa minimal 20 lapang pandang)

+/-

+/-

Proteus spp.

+/-

+/-

-/+

Salmonella spp.
Shigella spp.
No
1.
2.
3.

Sukrosa

Klebsiella spp.

Manitol

+/-

+/-

+/-

+/-

Maltosa

Laktosa

Glukosa

H2S

Gas

slant/butt

Escherichia coli

Fermentasi

a/a

al/a

a/a

al/a

al/a

al/a

Enterobacteriace

Motilitas

Simmons Citrate

Urea se

ae
Enterobacter spp.

Famili

Voges-Proskauer

Methyl Red

Uji TSI

Produksi Indole

Uji

Organisme

Fermentasi

Koagulase

DNAse

Novobiocin

Hemolisa

Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis
Staphylococcus saprophyticus

Mannitol
+
-

+
-

+
-

S
S
R

Beta
Beta / O
O

Kalau mimin kasi tes udah bisa lah ya? Coba kita mulai, kan senin udah mau ujian .(>_<).
1. Apa perbedaan hemolisis alpha, beta, gamma? Kalau dari media bisa bedain gak?
Ingat ya ingat!
2. apa beda koagulase dengan katalase?
3. Kan ada tuh suasana dalam pembiakan bakteri, coba sebutkan seluruhnya, dan beda
seluruhnya?
4. Sebutkan flora normal yang ada di daerah oral, saluran cerna?
5. Penanaman mikologi menggunakan media apa ? (Ingat bang Sudirman ya)!
6. Untuk mewarnain flagella pakai apa?
7. Untuk mewarnai kapsul pakai apa?
8. Sebutkan perbedaan gram + dengan gram - ? Ingat lah itu saat kuliah mikro.
9. Media kultur c.albicans dimana ya? Bentuk medianya? Warnanya?
10. Cooked meet untuk kuman apa ? bentuk medianya gimana?

Dari ringkasan diatas, coba identifikasi gambar-gambar berikut ini !

Mimin kasih tips deh bonusnya tips bocoran hahaha !

Tau gak bedain secara mikroskop staphylococcus, streptococcus, nissereae !

Maaf ya gan, sista, kalau ada kesalahn atau terlalu

lebay, mimin hanya mencoba untuk share pengalaman juga
bagi ilmu dikit lah. Karena kesempurnaan itu milik Allah swt.
Follow Ig kita kakak : @danihrp6
@madtechan