ANALISIS LIPID

2. Jenis Uji pada LIPID

Tujuan :
Mengetahui sifat yang terdapat pada
lipid ( kelarutan, kepolaran,
kejenuhan lipid dan ketengikan lipid)
Analisis lipid mempunyai 2 metode,
yaitu :
1.Analisis Kualitatif
2.Analisis Kuantitatif

Analisis Kualitatif
Analisis kualitatif merupakan analisis
kimia ada/tidaknya komponen
radikal, ion kation/molekul
Analisis kualitatif lipid, dilakukan
dengan 4 cara, yaitu :
Uji kelarutan lipid
Uji Akrolein
Uji ketidakjenuhan lipid
Uji ketengikan

Uji kelarutan LIPID

Tujuan
Pengujian kepolaran LIPID
Parameter
Lipid bersifat polar ( larut dalam air
dan alkohol )
Lipid bersifat nonpolar ( larut dalam
kloroform dan eter )

Uji Kelarutan LIPID

Hampir semua minyak dan lemak

larut pada pelarut nonpolar
( kloroform dan eter )

Uji Akrolein
Tujuan :
Menentukan keberadaan
gliserin/lemak
Parameternya :
Bau akrolein ( seperti abu alkohol )

Uji Akrolein

Uji Ketidakjenuhan LIPID

Parameter pengujian
Adanya reaksi positif ( berupa
timbulnya warna merah saat ditetesi
ion Hubs )
Asam lemak tidak jenuh adanya
timbul warna merah yang semakin
lama pudar.
Asam lemak jenuh timbul warna
merah tetapi tidak pudar

Uji ketidakjenuhan LIPID

SAMPEL

HASIL

KETERANGAN

Minyak kelapa

Warna merah

Asam oleat

Warna merah pudar

Mentega

Warna merah

Asam palmitat

Warna merah

Margarin

Warna merah

Lemak hewan

Warna merah

Minyak tengik

Warna merah

Keterangan :
( - ) TIDAK JENUH
( + ) JENUH

Rantai Hidrokarbon
Asam Lemak Jenuh

Asam Lemak Tidak Jenuh

Asam Oleat ( struktur

kimia )

Uji Ketengikan LIPID

Tujuan
Mengetahui oksidasi lipid
Parameter
Larutan putih = tidak tengik
Larutan merah muda = tengik

Uji Ketengikan Lipid

Tengiknya suatu larutan karena

golongan trigliserida banyak
teroksidasi oleh oksigen dalam udara
bebas.

KROMATOGRAFI LIPID
Untuk mengetahui fungsi lipid pd
proses biologis
diperlukan mengetahui lipid apa
saja yang ada.
Karena lipid tidak larut dalam air
ekstraksi lipid
dari jaringan menggunakan pelarut
organik
Secara umum, campuran komplek
lipid dipisahkan berdasarkan
perbedaan polaritas atau
kelarutannya pada pelarut non polar

 Lipid netral TAG, lilin, pigmen

mudah diektraksi dari jaringan
dengan : etil eter, kloroform, atau
benzena
Membrane lipid lebih mudah
diekstrak dengan
pelarut yang lebih polar etanol
atau metanol

Tujuan:
Mengurangi interaksi hidrofobik
rantai hidrokarbon
Melemahkan ikatan hidrogen dan
interaksi elektrostatik yang mengikat
lipid dengan protein membran

 Campuran pelarut yang biasa

digunakan :
klorofom : metanol : air = 1:2:0.8
menghasilkan single phase
Untuk mengekstrak semua lipid
ditambahkan air
Menghasilkan 2 fase : metanol/air dan
kloroform

SKEMA ADSORPSI
KROMATOGRAFI

Campuran lipid dapat difraksinasi lebih lanjut

kromatografi berdasarkan perbedaan polaritas
setiap kelas lipid
Adsorbsi kromatografidigunakan material
polar
tidak larut silika gel yang dipak pada kolom
gelas yang panjang dan tipis campuran lipid
dlm
pelarut kloroform dituangkan dr atas
lipid yang lebih polar akan terikat kuat pada
material sedangkan lipid yang netral langsung
keluar. Lipid yang polar dikeluarkan dengan cara
mencuci material tsbt dgn solvent yang lebih
polar.
aseton metanol

Kromatografi Lapisan Tipis

(TLC)
Digunakan untuk memisahkan komponenkomponen atas dasar perbedaan perbedaan
adsorpsi atau partisi oleh fase diam di bawah
gerakan pelarut pengembang.

Aplikasi Kromatigrafi Lapisan

Tipis

Monoacyglycerols
Diacyglycerols
Triacyglycerols
Kolesterol
Asam lemak bebas
Ester kolesterol
Fosfolipid

Kromatografi Eksklusi (SEC)

Digunakan untuk memisahkan produk
hidrolitik, oksidasi dan pemanasan
lemak

Kromatografi Cairan (HPLC)

HPLC digunakan untuk memisahkan
lipida non-volatil yang memiliki berat
molekul tinggi.

Adsorpsi Kromatografi
Adsorpsi
kromatografi
adalah
teknik
kromatografi
tertua
dioperasikan
berdasarkan retensi terlarut pada permukaan
adsorben. Adsorben-adsorben yang umum
digunakan adalah silika gel dan alumina
karena mereka dimiliki daerah yang besar
permukaan dan banyak situs aktif. Zat
terlarut dan pelarut dalam cairan cairan
dapat bersaing satu sama lain untuk
mendapatkan situs yang aktif.

Terima

Kasih