HIGH PRESSURE LIQUID

CROMATOGRAPHY (HPLC)
OLEH : DEDE SUTRIONO,S.Si

HPLC

Dari sistem peralatannya, HPLC

termasuk kromatografi kolom karena
dipakai fase diam yang diisikan atau
terpacking didalam kolom.
Ditinjau dari segi pemisahan : HPLC
termasuk kromatografi adsorpsi atau
kromatografi partisiatau asas lainnya
tergantung jenis kolom yang dipakai
dan analit yang ditentukan.

Perkembangan HPLC berawal dari proses

pemisahan yang berazaskan absorpsi dari
partisi ke arah yang lebih luas yaitu
proses pemisahan yang berazaskan
afinitas, filtrasi gel dan ion yang
berpasangan, akan tetapi proses
pemisahannya tetap dilaksanakan
didalam kolom disertai pemakaian pelarut
pengembang dengan tekanan tinggi.

Hal-hal yang perlu diperhatikan dan

dipersiapkan untuk analisa dengan HPLC

Dipilih pelarut pengembang atau

pengembang campuran yang sesuai
unntuk komponen yang dipisahkan
Berkaitan dengan pemilihan pelarut
pengembang fasa mobile maka kolom
yang dipakai juga harus diperhatikan
Detektor yang memadai
Pengetahuan dasar HPLC yang baik serta
pengalaman dan keterampilan kerja yang
baik

Beberapa keuntungan dari HPLC

Dapat dilakukan pada suhu kamar

Kolom dan pelarut pengembang
dapat digunakan berkali kali
Detektor HPLC dapat divariasi dan
banyak jenisnya
Waktu analisis pada umumnya
singkat
Ketepatan dan ketelitiannya yang
relatif tinggi
Mudah dioperasikan secara otomatis

Profil Kromatogram

Parameter

Parameter yang dapat digunakan

untuk mengetahui kualitas suatu
kromatogram :
waktu tambat
Faktor kapasitas
Jarak setara plat teori
Resolusi
Faktor simetri