PERCOBAAN I

IMOBILISASI ENZIM SECARA PENYERAPAN FISIK

I.

Tujuan Percobaan
Mempelajari cara imobilisasi enzim amilase secara penyeerapan fisik
menggunakan bahan pengamobil limbah abu sekam padi dan arang aktif.

II. Alat dan Bahan

II.1 Alat
1. Neraca analitik
2. Gelas ukur 10 ml
3. Botol semprot
4. Gelas kimia 600 ml
5. Batang pengaduk
6. Spektrofotometer
7. Erlenmeyer 100 ml
8. Corong buchner
9. Kuvet
10. Tabung reaksi dan rak tabung reaksi
11. Autoclave
12. Hot plate
13. Mesin agitasi

II.2Bahan
1. Larutan pati 1 %
2. Larutan iodium 10 %
3. Enzim alfa amilase
4. Aquades

III.

Cara Kerja
III.1
Imobilisasi Enzim Alfa Amilase dengan Karbon Aktif
1. Mengambil 10 ml enzim amilase dan mencampurkan dengan 40 ml air
destilata dalam erlenmeyer 100 ml.
2. Menambahkan 10 g karbon aktif ke dalam erlenmeyer, kemudian
mengaduk campuran selama 1 jam.
3. Menyaring campuran dengan corong buchnerhingga kering dan
menimbang
rendemennya

untuk

mengetahui

menggunakan

beratnya

persamaan

serta

menentukan

berikut,

dan

menyimpannya untuk pengujian aktivitasnya.

berat enzim amobil
Rendemen Enzim amobil = berat earang anzim+arang aktif
%
3.2 Penentuan Aktivitas Alfa Amilase Amobil Hasil imobilisasi

juga

100

1. Memasukkan larutan pati 1 % sebanyak 5 ml ke dalam tabung reaksi yang

berkode A, B, dan C , kemudian menambahkan masing-masing tabung
dengan 0,05 ml larutan iodium 10 %.
2. Menambahkan tabung reaksi A dengan 1 ml enzim amilase, tabung reaksi
B dengan 2 g amilase amobil dengan bahan pengamobil karbon aktif dan
tabung reaksi C degan menambahkan 1 ml air destilata.
3. Mengocok ketiga tabung d=hingga homogen, kemudian memasukka ke
dalam air bersuhu 60oC selama 30 menit, selanjutnya memasukkan ke
dalam air mendidih selama 10 menit.
4. Memindahkan produk reaksi ke dalam erlenmeyer 100 ml dan
IV.

menambahkan air destilata sebanyak 50 ml.

Hasil Pengamatan
IV.1
Hasil pengamatan abu sekam padi
No.
1.

Perlakuan
10 g abu sekam padi + 5 ml
enzim alfa amilase

Hasil Pengamatan
Enzim alfa amilase amobil

2.

5 ml larutan pati 1 % + 0,05 ml Larutan berwarna kuning dengan

larutan iodinum 10% + 1 ml nilai A sebesar 0,058
enzim alfa amylase + panaskan
pada 60oC selama 30 menit +
panaskan pada air mendidih
selama 10 menit + 50 ml
aquadest + saring + mengukur
absorbansi
pada
panjang
gelombang 500 nm. (Tabung A)

3.

5 ml larutan pati 1 % + 0,05 ml Larutan berwarna kuning dengan

larutan iodinum 10% + 2 g nilai A sebesar 0,080
enzim alfa amylase amobil+
panaskan pada 60oC selama 30
menit + panaskan pada air
mendidih selama 10 menit + 50
ml aquadest + saring +
mengukur absorbansi pada

panjang gelombang 500 nm.

(Tabung B)
4.

5 ml larutan pati 1 % + 0,05 ml Larutan berwarna biru

larutan iodinum 10% + 1 ml nilai A sebesar 1,141
aquadest + panaskan pada 60oC
selama 30 menit + panaskan
pada air mendidih selama 10
menit + 50 ml aquadest + saring
+ mengukur absorbansi pada
panjang gelombang 500 nm.
(Tabung C)

dengan

IV.2 Hasil pengamatan arang aktif

No.
1.

Perlakuan
10 ml enzim amilase+ 40 ml air
destilata+10 g arang aktif

Hasil Pengamatan
19,030 gram ( berat gelas+ enzim)

2.

5 ml larutan pati 1 % + 0,05 ml Larutan berwarna kuning dengan

larutan iodinum 10% + 1 ml nilai A sebesar 0,080
enzim alfa amylase + panaskan
pada 60oC selama 30 menit +
panaskan pada air mendidih
selama 10 menit + 50 ml
aquadest + saring + mengukur
absorbansi
pada
panjang
gelombang 500 nm. (Tabung A)

3.

5 ml larutan pati 1 % + 0,05 ml Larutan berwarna kuning dengan

larutan iodium 10% + 2 g enzim nilai A sebesar 0,110
alfa amylase amobil+ panaskan
pada 60oC selama 30 menit +
panaskan pada air mendidih
selama 10 menit + 50 ml
aquadest + saring + mengukur
absorbansi
pada
panjang
gelombang 500 nm. (Tabung B)

4.

5 ml larutan pati 1 % + 0,05 ml Larutan berwarna biru

larutan iodinum 10% + 1 ml nilai A sebesar 1,642
aquadest + panaskan pada 60oC
selama 30 menit + panaskan
pada air mendidih selama 10
menit + 50 ml aquadest + saring
+ mengukur absorbansi pada
panjang gelombang 500 nm.
(Tabung C)

Ket: berat gelas = 3,162 gram

V. Analisa Data
V.1 Imobilisasi Enzim Alfa Amilase dengan Abu Sekam Padi
Berat enzim amylase
= 11,635 gram (10 ml)
Berat abu sekam padi
= 10 gram
Berat enzim amobil
= 21,523 gram
Rendemenenzim amobil =

berat enzim amobil

100
berat enzim+ berat karbon aktif

21,523 gram
=99,4823
11,635 gram+10 gram

V.2 Imobilisasi Enzim Alfa Amilase dengan Arang Aktif

Berat enzim amylase
= 10 gram (10 ml)
Berat abu sekam padi
= 10 gram
Berat enzim amobil
- Berat gelas + enzim
= 19,030 gram
- Berat gelas
= 3,162 gram
- Berat enzim amobil
(Berat gelas + enzim) (Berat gelas)
- Jadi, berat enzim amobilnya = 19,030 gram 3, 162 gram
= 15,868 gram
Rendemenenzim amobil =

berat enzim amobil

100
berat enzim+ berat karbon aktif

dengan

15,868 gram
100 =79,34
10 gram+ 10 gram

V.3 Penentuan Aktivitas Alfa Amilase Amobil Hasil Imobilisasi (Abu

Sekam padi)
Penentuan serapan pada panjang gelombang 500 nm
No
.
1.

Tabung
B

A
0,058

0,080

A bebas
Retensi Amobil= A amobil
0,058
= 0,080

D
1,141

x 100%

x 100% = 72,5 %

V.4 Penentuan Aktivitas Alfa Amilase Amobil Hasil Imobilisasi (Arang

Aktif)
Penentuan serapan pada panjang gelombang 500 nm
No
.
1.

Tabung
B

A
0,080

0,110

A bebas
Retensi Amobil= A amobil
0,080
= 0,110

x 100%

x 100% = 72,7%

C
1,642