Anda di halaman 1dari 40

Ana Indrayati

Lokasi ekspresi gen

Produk rekombinan:
Interferon Insulin Superoksida dismutase (SOD) Streptokinase Eritropoetin (EPO) Bone morphogenetic 2 (BMP2) Amilase

DNA REPLIKASI ATAU DNA SINTESIS: PROSES PENGGANDAAN MOLEKUL DNA/MATERI GENETIK MENJAMIN SETIAP SEL MENGANDUNG KROMOSOM YANG IDENTIK DENGAN SEL ASAL TERJADI SEBELUM SEL MEMBELAH Semi konservatif Konservatif Dispersif

Eksperimen Meselson -Stahl

DNA (replikon) DNA HELIKASE: MEMBUKA UNTAI GANDA DNA PRIMER: MENYEDIAKAN UJUNG 3 OH BEBAS UNTUK DNA POLIMERASE ORI (ORIGIN OF REPLCATION): TITIK ASAL DIMULAINYA REPLIKASI DNA DI DALAM SEL dNTP (DEOKSI NUKLEOTIDA TRIFOSFAT): dATP, dGTP, dCTP, dTTP TERMINUS: TEMPAT REPLIKASI BERAKHIR

PROTEIN SSB: SINGLE STRANDED BINDING PROTEIN DNA POLIMERASE: POLIMERISASI RNA POLIMERASE/PRIMASE: MENSINTESIS PIMER DNA LIGASE: SEALING DNA NICK

KETERBATASAN DNA POL:


1.

HANYA DAPAT MENAMBAHKAN NUKLEOTIDA BILA TERDAPAT GUGUS HIDROKSI (OH) BEBAS PADA KARBON 3 PADA NUKLEOTIDA SEBELUMNYA

2. 3.

BERJALAN DARI ARAH 5 KE 3 MEMBUTUHKAN PRIMER (OLIGONUKLEOTIDA, MERUPAKAN MOLEKUL RNA) MENYEDIAKAN GUGUS HIDROKSI BEBAS

LEADING STRAND SINTESIS DNA DARI ARAH 5 KE 3 TERJADI SECARA KONTINU LAGGING STRAND SINTESIS DNA DARI ARAH 3 KE 5 SECARA DISKONTINU MENGHASILKAN FRAGMEN OKAZAKI

E. coli Ukuran genom: 4,7 x 106 pb Origin of replication (ori): 1 1000 nukleotida/detik-40 menit Kesalahan replikasi: 1/109 nukleotida Mekanisme: proof-reading Manusia: 150 x 106 pb 50 basa/detik Banyak ori

Sintesis RNA

PROSES PEMBENTUKAN RNA DARI DNA SEBAGAI TEMPLAT HASIL: RNA TRANSFER (tRNA), RNA RIBOSOM (rRNA), RNA MESSENGER (mRNA) PROSES ENZIMATIK DIKATALIS OLEH RNA POLIMERASE TRANSCRIPTION UNIT: BAGIAN DARI DNA YANG DITRANSKRIPSI MENJADI RNA UNTAI SENSE (TEMPLATE STRAND): UNTAI TUNGGAL DNA YANG DIGUNAKAN SEBAGAI CETAKAN UNTUK SINTESIS RNA UNTAI NON-SENSE (NON-TEMPALTE STRAND): UNTAI TUNGGAL DNA YANG TIDAK DIGUNAKAN SBG CETAKAN UTK SINTESIS RNA. ARAH SINTESIS RNA DARI 5 KE 3 PROKARIOT TERJADI DI SITOPLASMA EUKARIOT TERJADI DI NUKLEUS (INTI SEL)

PROMOTOR: URUTAN TERTENTU PADA MOLEKUL DNA YANG MENANDAI TEMPAT AWAL TRANSKRIPSI RNA POLIMERASE: MENGAKATALIS TRANSKRIPSI FAKTOR SIGMA (): PROTEIN MEMBANTU RNA POLIMERASE MENGENALI PROMOTOR HOLOENZIM: KOMPLEKS ANTARA RNA POL DGN FAKTOR TERMINATOR: URUTAN TERTENTU PADA MOLEKUL DNA YANG MENANDAI TRANSKRIPSI BERAKHIR. TERMINATOR: PROTEIN RHO DAN STEM-LOOP KECEPATAN SINTESIS RNA SEKITAR 30 SAMPAI 60 NUKLEOTIDA/DETIK ASAM RIBONUKLAEAT TRIFOSFAT (rNTP) RIFAMPIN MENGHAMBAT PERTUMBUHAN MIKROBA DENGAN CARA MENGGANGGU PROSES TRANSKRIPSI

INISIASI 1. KOMPLEKS RNA POL DGN FAKTOR SIGMA BERJALAN SEPANJANG MOLEKUL DNA MENCARI PROMOTOR 2. KOMPLEKS BERIKATAN DENGAN PROMOTOR 3. UNTAI GANDA DNA TERPISAH 4. FAKTOR SIGMA DILEPASKAN 5. INISIASI TRANSKRIPSI TERJADI ELONGASI 1. RNA POL MEMPERPANJANG rNTP DENGAN ARAH 5 KE 3 2. rNTPYANG DITAMBAHKAN HARUS KOMPLEMEN DENGAN URUTAN DNA CETAKAN TERMINASI 1. TRANSKRIPSI BERAKHIR: PROTEIN RHO/STEM-LOOP

2005 W. H. Freeman Pierce, Benjamin. Genetics: A Conceptual Approach, 2nd ed. (New York: W. H. Freeman and Company), 357. Used with permission. All rights reserved.

Sintesis protein

PROSES SINTESIS PROTEIN BERDASARKAN INFORMASI PADA mRNA BERLANGSUNG DI DALAM SITOPLASMA UJUNG 5 mRNA MEMPUNYAI URUTAN TERTENTU YANG MENGENALI RIBOSOM URUTAN INI DISEBUT RIBOSOM BINDING SITE (RBS) ANTIBIOTIK AMINOLIKOSIDA, KLINDAMISIN, TETRASIKLIN, KLORAMFENIKOL BEKERJA MENGHAMBAT SINTESIS PROTEIN PADA BAKTERI

RIBOSOM (SUBUNIT 30S DAN 50S): TEMPAT TRANSLASI KODON INISIASI/START: AUG (Metionin KODON STOP: UAA, UGA, UAG FAKTOR INISIASI FAKTOR ELONGASI tRNA, GTP, ATP, mRNA RIBOSOM BINDING SITE (RBS): TEMPAT AWAL TRANSLASI RELEASE FACTOR

Struktur ribosom