Isi dan aktivitas antibakteri flavonoid

diekstrak dari daun Guava guajava

Empat flavonoid antibakteri (morin-3-O-lyxoside, morin-3-O-arabinoside, quercetin, dan

quercetin-3-Oarabinoside) terisolasi

dari daun segar dan kering Guava guajava , dan

konsentrasi mereka ditentukan. Di antara mereka, quercetin dan morin-3-O-arabinoside

adalah yang sangat dan paling berlimpah, masing-masing. Studi tentang efek penghambatan
flavonoid busuk dan patogen bawaan makanan bakteri mengungkapkan bahwa mereka
memiliki bakteriostatik modus tindakan terhadap semua diuji busuk dan keracunan makanan
bakteri patogen termasuk Bacillus stearothermophilus, Brochothrix thermosphacta,
Escherichia
Listeria monocytogenes, Pseudomonas fluorescens coli O157: H7, Salmonella enterica,
Staphylococcus aureus dan Vibrio cholerae.

INTRODUCTION
Makanan dimakan mentah biasanya dijual dalam bentuk siap-untuk-makan, dan kebanyakan
dari mereka umumnya tidak mengandung presservatives makanan atau zat antimikroba.
Banyak makanan Thai jatuhdalam kategori ini seperti nham (sosis babi difermentasi), KemBuk-Nud (fermentasi nanas), Jom Kung (udang Sisipkan), Puk Dong (fermentasi sayur).
Makanan ini melayani sebagai sumber tidak hanya untuk bakteri pembusuk makanan yang
mempersingkat kehidupan rak makanan tetapi juga untuk patogen bakteri yang menyebabkan
makanan penyakit terkait. Pembusukan bakteri adalah mikroorganisme yang menyebabkan
makanan memburuk dan mengembangkan bau yang tidak menyenangkan, rasa dan tekstur.
Kebanyakan dari mereka adalah jenis Bacillus, Clostridium, Micrococcus, Proteus,
Pseudomonas, Shewanella dan Xanthomonas (Lund et al., 2000). Patogen bawaan makanan

bakteri dapat menyebabkan penyakit bawaan makanan dengan flu seperti gejala seperti mual,
muntah, diare, dan/atau demam. Berbagai bakteri telah dikenal untuk menjadi terkait dengan
makanan termasuk Listeria patogen monocytogenes, Escherichia coli, Salmonella spp.,
Shigella spp., Aeromonas hydrophila, Staphylococcus Aureus dan Yersinia enterocolitica
(Lund et al., 2000)
Aditif makanan dengan aktivitas antimikroba dapat digunakan untuk mengatasi masalah
tersebut. Namun, saat menggunakan Aditif makanan berbasis kimia keberatan oleh banyak
konsumen. Mereka lebih suka aditif yang berasal dari alamproduk. Banyak tanaman dapat
mewakili sumber alamantimikroba zat untuk meningkatkan kehidupan rak dan
keselamatan makanan (Cowen, 1999). Diantaranya: Guava guajava atau jambu adalah salah
satu tanaman potensi untuk digunakan dalam makanan untuk tujuan tersebut.

P. guajava atau jambu adalah tanaman dalam keluarga Myrtaceae bersama dengan cengkeh,
allspice, dan eucalyptus. Asli tropis Amerika, sekarang dibudidayakan di banyak tropis dan
negara-negara subtropis untuk buahnya dapat dimakan (Perez et al., 2008). ia telah digunakan
sebagai bahan dalam banyak makanan resep dan makanan penutup. P. guajava telah diketahui
memiliki antimikroba (Arima dan Danno, 2002; Chah et al., 2006; Prabu et al., 2006), antiinflamasi (Ojewole,2006), obat (Tona et al. 1998), antitumor (Manosroi et al., 2006; Chen et
al., 2007), antiallergic (Seo et al, 2005), antihyperglycemic (Ojewole, 2005; Mukhtar et al.,
2006) dan antimutagenic (Grover dan Bala, 1993) kegiatan. Itu telah digunakan untuk
mengobati luka (Chah et al., 2006), acne lesi (Qadan et al, 2005), batuk (Jairaj et al., 1999)
dan penyakit gigi (Razak Te Al., 2006). Flavonoid yang diekstrak dari daun jambu termasuk
morin-3-O-lyxoside, morin-3-O-arabinoside, Quercetin dan quercetin-3-O-arabinoside
dilaporkan untuk kuat antibakteri tindakan (Arima dan Danno, 2002). studi ini bertujuan
untuk mengkaji flavonoid isi jambu segar dan kering daun dan aktivitas antibakteri dan

modus tindakan terhadap berbagai strain bakteri patogen yang busuk dan keracunan
makanan.

BAHAN DAN METODE

Strain bakteri dan kondisi budaya Bakteri yang digunakan dalam penelitian ini adalah
Bacillus stearothermophilus (ATCC 12980), Brochothrix thermosphacta (ATCC 11509), E.
coli O157: H7 (ATCC 35150), Listeria monocytogenes (ATCC 19111), Pseudomonas
fluorescens (ATCC 11150), Salmonella enterica (ATCC 8326), S. aureus (ATCC 25923) dan
Vibrio cholerae (ATCC 14101). kondisi pertumbuhan bakteri yang disajikan dalam Tabel 1.
Bakteri saham budaya disimpan sebagai beku pada-80 C di mengandung gliserol 20% (v/v)
kaldu yang sesuai. Bahan tanaman dan preparasi sampel Daun segar P. guajava dibeli dari
toko ramuan
"Ban Samunprai" di Pranakorn, Bangkok, Thailand. Mereka dijual dengan sertifikat
identifikasi yang disetujui oleh Royal Forest Departemen, Bangkok, Thailand. Daun-daun
kering yang diperoleh oleh kue segar daun dalam oven pada 70 C untuk 72 h. segar dan
kering
Jambu daun awalnya diekstraksi oleh metanol dan kemudian mengalami isolasi flavonoid
oleh Kromatografi kolom seperti sebelumnya dijelaskan oleh Arima dan Danno (2002).

HASIL DAN DISKUSI

Ketika segar daun P. guajava dipanggang dalam oven pada 70 C untuk 72 h, hasil dari daundaun kering adalah tentang 10,2% (w/w). Isolasi flavonoid dari kedua jenis daun
mengungkapkan bahwa konsentrasi semua flavornoids yang diekstrak dari daun-daun kering
yang lebih tinggi daripada diekstrak dari daun segar (Tabel 2). Namun, perbedaan antara
konsentrasi flavonoid setiap diekstrak dari kedua jenis daun adalah lebih rendah daripada 10

waktu: sekitar 2,3, 2,8, 2.7 dan 2.8 kali untuk morin-3-Olyxoside, morin-3-O-arabinoside,
quercetin-3-Oarabinoside dan quercetin, masing-masing. Hasil ini disarankan bahwa
flavonoid yang hilang selama pengeringan proses jambu daun. Namun, lebih lanjut
penyelidikan
diminta untuk mengidentifikasi sebenarnya penyebab hilangnya flavonoid dalam daun kering.
Terlepas dari jenis jambu daun digunakan untuk isolasi, Quercetin dan morin-3-Oarabinoside adalah yang paling dan flavonoid paling berlimpah, masing-masing. Konsentrasi
quercetin daun segar dan kering adalah tentang 63.9 dan 179.3, masing-masing sementara
orang-orang dari morin-3-Oarabinoside segar dan kering daun sekitar 28.8 dan 65.4, masingmasing (Tabel 2). Semua flavonoid belajar dalam karya ini, quercetin telah yang paling sering
flavonoid belajar. Dilaporkan untuk hadir dalam berbagai sayuran dan buah-buahan yang
termasuk bawang (284-486mg/kg), kale (110 mg/kg), kacang Perancis (32-45 mg/kg),brokoli
(30 mg/kg), apel (21-72 mg/kg), selada (14mg/kg) dan tomat (8 mg/kg) (Hertog et al., 1992).
Dibandingkan dengan ini konsentrasi quercetin, jambu .Daun dapat dianggap mengandung
yang relatif tinggi kandungan senyawa. P. guajava daun telah lama diakui untuk mereka
aktivitas antibakteri. Mereka ditunjukkan untuk menghambat kedua Bakteri gram-positif dan
gram-negatif seperti S. Aureus, Streptococcus mutans, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella
enteritidis, Bacillus cereus, Proteus spp., Shigella spp. dan E. coli (Cowen, 1999; Perez et al.,
2008). Sejak flavonoid yang diekstrak dari Jambu daun diyakini bertanggung jawab untuk
aktivitas, sangat menarik untuk memeriksa morin-3-O-lyxoside, Morin-3-O-arabinoside,
quercetin-3-O-arabinoside dan Quercetin untuk aktivitas antibakteri terhadap beberapa
strain bakteri patogen yang busuk dan keracunan makanan termasuk B. stearothermophilus,
B. thermosphacta, E. coli O157: H7 L. monocytogenes, P. fluorescens, S. enterica, S. aureus,
dan V. cholerae. Hasil penelitian menunjukkan flavonoid yang mampu menghambat semua
bakteri

digunakan dalam kajian ini dengan berbagai tingkat inhibisi (tabel 3). P. fluorescens dan B.
Stearothermophilus paling dan paling sensitif strain untuk flavonoid, masing-masing. Untuk
masing-masing diperiksa bakteri, nilai-nilai MIC tempat flavonoid telah ada perbedaan yang
signifikan (p < 0.05), menunjukkan partisipasi semua empat flavonoid dalam aktivitas
antibakteri jambu daun. Selain flavonoid,senyawa lain juga ditemukan dalam daun jambu biji
seperti sebagai anthocyans, alkaloid, tanin, dan terpenoids (Cowen, 1999). Namun, senyawa
ini diekstraksi dari jambu pernah dilaporkan memiliki aktivitas antibakteri. Itu juga
ditunjukkan dalam studi yang Tidak punya MICs flavonoid untuk bakteri diuji setiap
perbedaan signifikan (p < 0.05) dari orang-orang dari oxytetracycline (Tabel 3). Dari hasil ini,
mungkin bahwa f lavonoids dapat digunakan sebagai antimikroba alami bahan-bahan untuk
menggantikan antibiotik untuk mengendalikan bakteri infeksi. Untuk menentukan apakah
flavonoid memiliki bakterisida atau bakteriostatik modus tindakan pada sensitif bakteri,
kemampuan flavonoid yang menghambat bakteri untuk melanjutkan pertumbuhan mereka
dalam kaldu segar lingkungat diamati. Hasil penelitian menunjukkan bahwa bakteri dihambat
oleh Semua flavonoid bisa melanjutkan pertumbuhan mereka segar media dalam waktu 24
jam (Tabel 4). Hasil ini menyarankan bahwa flavonoid telah bakteriostatik modus tindakan
pada bakteri. Sebaliknya, oxytetracycline telah terbukti memiliki bakterisida modus tindakan
pada semua bakteri diuji ditunjukkan oleh kurangnya kemampuan obat menghambat sel-sel
bakteri untuk tumbuh di media yang segar dalam waktu 24 jam (tabel 4). dalam studi
sebelumnya, jambu daun flavonoid yang juga terbukti memiliki efek bakteriostatik pada ikan
patogen
bakteri yang termasuk Aeromonas hydrophila, Aeromonas salmonicida subsp. salmonicida,
Flavobacterium columnare, Lactococcus garvieae, streptokokus agalactiae dan salmonicida
Vibrio (Rattanachaikunsopon dan Phumkhachorn, 2007). Penggunaan antimikroba zat dengan
bakteriostatik modus tindakan mungkin memiliki efek samping lebih sedikit dibandingkan

dengan modus bakterisida tindakan. Yang terakhir cenderung untuk membunuh semua bakteri
di tubuh termasuk normal flora sedangkan yang mantan hanya menghambat pertumbuhan
bakteri yang lebih lanjut tewas oleh respon imun tubuh. Dengan cara ini, flora normal yang
tidak dirugikan oleh kekebalan Tanggapan adalah hanya sementara terhambat. Temuantemuan yang disajikan dalam laporan ini menunjukkan bahwa flavonoid yang terisolasi dari
daun jambu biji (morin-3-O-lyxoside, Morin-3-O-arabinoside, quercetin, dan quercetin-3Oarabinoside) mungkin potensi biologis aktif senyawa untuk digunakan sebagai makanan
pengawet untuk meningkatkan rak-hidup dan keamanan makanan.

Bahan tanaman dan preparasi sample

Daun segar P. guajava dibeli dari toko ramuan "Ban Samunprai" di Pranakorn, Bangkok,
Thailand. Mereka dijual dengan sertifikat identifikasi yang disetujui oleh Royal Forest
Departemen, Bangkok, Thailand. Daun-daun kering yang diperoleh oleh kue segar daun
dalam oven pada 70 C untuk 72 h. segar dan kering Jambu daun awalnya diekstraksi oleh
metanol dan kemudian mengalami isolasi flavonoid oleh Kromatografi kolom seperti
sebelumnya dijelaskan oleh Arima dan Danno (2002). Aktivitas antimikroba penentuan
Flavonoid diperiksa untuk aktivitas antimikroba mereka terhadap bakteri patogen yang busuk
dan keracunan makanan yang bernama di atas menggunakan metode microdilution yang
dijelaskan oleh Amsterdam (1996) dengan beberapa modifikasi. Secara singkat, setiap
senyawa diuji adalah ditambahkan ke dalam piring Sungkup asap yang mengandung kaldu
yang sesuai untuk mendapatkan konsentrasi mulai dari 10 hingga 200 g/ml. Bakteri menjadi
diuji ditambahkan ke sumur yang mengandung senyawa untuk mendapatkan kadar akhir CFU
104/ml. Kontrol yang positif (tanpa senyawa diuji) dan negatif kontrol (tanpa diuji bakteri)
dimasukkan untuk piring masing-masing. Setelah inkubasi pada suhu optimal, pertumbuhan
bakteri Diperiksa di 24 h. hasilnya dilaporkan sebagai minimal penghambatan konsentrasi
(MIC) diperlukan untuk menyebabkan tidak ada pertumbuhan bakteri. Setiap nilai MIC
Diperoleh dari lima percobaan. Sama protokol ini digunakan untuk menentukan MIC
oxytetracycline untuk penghambatan semua diuji bakteri patogen.
Pemeriksaan modus tindakan
Flavonoid (pada akhir konsentrasi sama dengan nilai MIC) ditambahkan ke ml 4.9 bakteri
budaya (103 CFU/ml). Setelah inkubasi pada suhu optimal untuk 24 h, 100 L campuran
diinokulasi ke ml 4.9 segar lingkungat kaldu. Sebagai kontrol, 100 l tidak diobati budaya
bakteri pada konsentrasi 103 CFU ml dipindahkan ke ml 4.9 segar lingkungat kaldu. The
optik kepadatan pada panjang gelombang 600 nm (OD600nm) dari diuji dan budaya kontrol
ditentukan pada saat inokulasi dan setelah inkubasi untuk 24 h. Protokol yang sama

digunakan untuk menentukan modus tindakan oxytetracycline pada semua diuji bakteri
patogen.
Analisis Statistik
Analisis varians ini dilakukan dengan menggunakan Linear Umum Model prosedur analisis
statistik sistem (SAS Institute Inc, ary, NC, USA). Darichristin baru beberapa berbagai tes
digunakan untuk memperoleh pairwise perbandingan antara sampel berarti. Evaluasi
Berdasarkan tingkat kepentingan 5% (p < 0.05).