PEMBAHASAN

Mikroorganisme merupakan sumber dari banyak produk bioteknologi di dunia

modern. Antibiotik adalah salah satu metabolit sekunder yang dihasilkan oleh beberapa jamur
dan bakteri. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan kondisi optimal untuk
produksi penisilin dan ekstraksi dari budaya Penicillium chrysogenum filtrat. Dua isolat
jamur menjadi sasaran percobaan. Metabolit yang terdeteksi menggunakan TLC dan HPLC
dibandingkan dengan standar penisilin G. Ditemukan bahwa, produksi maksimum penisilin
dalam media kultur kaldu adalah interval 8-6 hari setelah inokulasi. Kondisi kultur yang
optimal adalah kehadiran 3 g ekstrak khamir, 21 g sukrosa per liter, kondisi suhu optimal
antara 28-25 C dengan 120 rpm gerakan Shaker. Tidak ada perbedaan yang bermakna yang
diamati antara dua isolat diuji.
Penisilin adalah jenis antibiotik yang dicapai dari P.chrysogenum atau P.notatum
budaya. Dalam kondisi normal, tingkat produksi penisilin rendah. Penisilin efektif pada
bakteri gram positif, tetapi beberapa gram-negatif juga terpengaruh. Cara kerjanya adalah
mencegah produksi enzim polimerase peptida glycan. Hal ini menyebabkan sel bakteri
menyerap terlalu banyak air dan pecahnya sel akan mencegah dari bekerja dan pertumbuhan.
Penemuan bahan antibiotik pertama yang diperoleh secara tidak sengaja dari Jamur
Penicillium notatum dilakukan oleh Fleming, pada tahun 1928. Howard Florey dimurnikan
bahan ini dan berhasil menyembuhkan infeksi oleh pendekatan sistemik.
Dua isolat Penicillium chrysogenum dipersiapkan untuk penelitian ini. Pertumbuhan
jamur dalam medium cair yang diperlukan untuk ekstraksi antibiotik. Dalam rangka untuk
mengekstrak penisilin yang dihasilkan dalam lingkungan ini, pelarut seperti kloroform dan
butil asetat digunakan. Setelah studi yang diperlukan untuk mendapatkan media kultur
optimal untuk pertumbuhan chrysogenum Penicillium, media disiapkan dengan 3 g ekstrak
ragi dan 21 gram sukrosa dalam satu liter air suling murni. Penicillium tumbuh baik dalam
lingkungan ini pada suhu kamar. Setelah 5 sampai 8 hari pertumbuhan jamur, media itu
terkontaminasi dengan menggunakan berbagai pengenceran bakteri untuk mengevaluasi
aktivitas anti-mikroba jamur. Kemampuan produksi antibiotik dan anti aktivitas mikroba
jamur dinilai, setelah kultur mereka pada medium padat dengan adanya bakteri yang berbeda.
Jamur dengan produksi metabolit sekunder mencegah pertumbuhan bakteri dan membangun
zona inhibisi sekitar itu sendiri. Zona inhibisi adalah jumlah yang berbeda untuk setiap
bakteri.
Ekstraksi antibiotik dari media kultur Kloroform dan butil asetat pelarut yang
digunakan, untuk isolasi antibiotik dari media jamur. Untuk tujuan ini, suhu lingkungan
dikurangi menjadi 0-4 C, setelah pemisahan kotoran dan miselia dan spora dari media. PH
media dibawa ke sekitar 2. Jadi, dalam kondisi ini antibiotik akan bercampur baik dengan
pelarut yang diinginkan dalam lingkungan. Menggunakan TLC untuk mendeteksi Penisilin G
di jamur kromatografi lapis tipis menengah (TLC) digunakan untuk mendeteksi keberadaan
penisilin dalam medium. Pelarut yang digunakan untuk sampel loading pada pelat TLC.
Solvent dituangkan dalam tangki TLC selama 60 sampai 90 menit dan mereka diberi waktu
sampai bergerak. Kemudian, dengan menggunakan panjang gelombang yang berbeda dari

UV, warna dan RF yang dihasilkan oleh masing-masing dibandingkan dengan standar
penisilin G.
Dalam penelitian ini, pertumbuhan jamur dalam basis cair yang digunakan
menunjukkan bahwa dua strain yang digunakan dapat tumbuh dengan baik di media ini.
Setelah hari kelima budidaya, jamur ini mampu menghasilkan zat penghambat pertumbuhan
bakteri. Ini efek penghambatan pertumbuhan sebagian besar bakteri gram positif. Komposisi
anti-kritis dalam media ini ditentukan penisilin tipe G, menggunakan metode TLC dan
dibandingkan dengan penisilin standar G. Perbandingan kromatogram yang diperoleh dari
injeksi sampel diekstraksi dari media jamur di hari kedelapan, untuk HPLC menunjukkan
bahwa waktu retensi untuk disuntikkan sampel standar dan penisilin diekstrak dari media
Penicillium tumbuh pada hari kedelapan, adalah sama, dalam kondisi yang sama untuk
HPLC. Hasil ini membuktikan kehadiran Penisilin G di ekstraksi diperoleh. Seperti yang
terlihat pada gambar berikut, kromatogram yang diperoleh dari kedua suntikan konsisten satu
sama lain.
Dalam perbandingan metode yang berbeda dari ekstraksi menggunakan pelarut yang
berbeda, tingkat tertinggi ekstraksi penisilin adalah dengan menggunakan pelarut butil asetat
dan metode tiga langkah. Tingkat tertinggi antibiotik yang diproduksi oleh P. chrysogenum
adalah 6-8 hari setelah budidaya. Sebelum hari kelima, jamur tidak dapat menghasilkan zat
penghambat pertumbuhan. Jadi, durasi budidaya jamur efektif pada produksi penisilin.
Menurut hasil Kromatogram yang diperoleh dari injeksi sampel yang diambil dalam kondisi
suhu yang berbeda, variasi suhu menyebabkan perubahan dalam tingkat produksi G penisilin
dalam medium chrysogenum P.. Tingkat tertinggi produksi berada di 28C. Tingkat produksi
penisilin berkurang secara signifikan pada suhu di atas 30 C. Setelah membandingkan hasil
kromatogram yang diperoleh dari suntikan dalam kondisi yang berbeda, nilai-nilai optimum
komponen menengah ditentukan sebagai: 3 g ekstrak ragi dan 2 g sukrosa dalam satu liter air
suling murni dan jumlah optimal gerakan Shaker ditetapkan pada 120 rpm.