UJI IN VITRO EKSTRAK AIR DAN ETANOL DARI

BUAH ASAM GELUGUR, RIMPANG LENGKUAS, DAN

KENCUR SEBAGAI INHIBITOR AKTIVITAS
LIPASE PANKREAS

ANA FITRIYANI

DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2009
 ABSTRAK
ANA FITRIYANI. Uji in Vitro Ekstrak Air dan Etanol dari Buah Asam Gelugur,
Rimpang Lengkuas, dan Kencur sebagai Inhibitor Aktivitas Lipase Pankreas. Dibimbing
oleh DYAH ISWANTINI PRADONO dan LATIFAH KOSIM DARUSMAN.
Buah asam gelugur merupakan marga Garcinia, sering digunakan sebagai obat
penurun bobot badan. Lengkuas dan kencur adalah tanaman obat tradisional yang
berpotensi sebagai antiobesitas yang mudah didapat dan murah karena telah diteliti
mampu menurunkan fosfolipid, trigliserida, serta kolesterol. Penelitian ini bertujuan
mengevaluasi potensi ketiga tanaman sebagai antiobesitas melalui kemampuan ekstrak air
dan etanolnya dalam menghambat aktivitas lipase pankreas secara in vitro pada pH 8,0,
waktu inkubasi 45 menit, dan suhu 40C. Penelitian ini menggunakan lipase pankreas
manusia (1,4 10-5 g/L) dan minyak wijen (16,2 g/L) sebagai substrat.
Ekstrak air dan etanol buah asam gelugur secara berurutan mengandung saponin
dan alkaloid. Ekstrak lengkuas mengandung alkaloid, flavonoid, saponin, dan kuinon,
sedangkan ekstrak etanolnya mengandung alkaloid, flavonoid, saponin, dan steroid.
Ekstrak air kencur mengandung saponin dan kuinon, sedangkan ekstrak etanolnya
mengandung alkaloid, flavonoid, steroid, dan kuinon. Ketiga tanaman berpotensi sebagai
antiobesitas karena berdasarkan hasil uji in vitro mampu menginhibisi aktivitas lipase
pankreas. Daya inhibisi tertinggi dari semua ekstrak dicapai oleh ekstrak etanol buah
asam gelugur dengan nilai 86,3% pada konsentrasi 150 ppm. Daya inhibisi tertinggi
lengkuas dicapai oleh ekstrak etanolnya pada konsentrasi 200 ppm, yaitu sebesar 56,2%.
Daya inhibisi tertinggi ekstrak kencur dicapai oleh ekstrak etanolnya dengan nilai 37,6%
pada konsentrasi 300 ppm. Nilai-nilai tersebut lebih besar jika dibandingkan dengan
kontrol positif (Xenical) pada 100 ppm, yaitu sebesar 10,6%.

ABSTRACT

ANA FITRIYANI. In Vitro Assay of Water and Ethanol Extracts of Asam Gelugur
Fruits, Lengkuas, and Kencur Rhizomes as Inhibitor of Pancreatic Lipase Activity.
Supervised by DYAH ISWANTINI PRADONO and LATIFAH KOSIM DARUSMAN.
Asam gelugur fruits of Garcinia oftenly used to reduce body weight. Lengkuas and
kencur are traditional herbal that potential as inexpensive and available antiobesity
because they had been studied could reduce the level of phospholipids, triglycerides, and
cholesterol. This research evaluated the potencies of these herbal as antiobesity by their
water and ethanol extracts capabilities in inhibiting pancreatic lipase activity in vitro at
pH 8,0, incubation time 45 minutes, and temperature 40C. This research used human
pancreatic lipase (1,4 10-5 g/L) and sesame oil (16,2 g/L) as substrate.
The water and ethanol extracts of asam gelugur fruits contained saponins and
alkaliods, respectively. The water extract of lengkuas rhizomes contained alkaloids,
flavonoids, saponins, dan quinones, while the ethanol extract contained alkaloids,
flavonoids, saponins, and steroids. The water extract of kencur rhizomes contained
saponins and quinones, while the ethanol extract contained alkaloids, flavonoids, steroids,
and quinones. These plants have potencies as antiobesity based on in vitro assay in
inhibiting pancreatic lipase activity. The highest inhibitory effect of all extracs was
obtained from the ethanol extract of asam gelugur fruits with value of 86,3% at 150 ppm.
The highest inhibitory effect of lengkuas extracts was from the ethanol extract at 200
ppm, which was about 56,2%. The highest inhibitory effect of kencur was showed by the
ethanol extract with the value 37,6% at 300 ppm. These values were higher than the
inhibitory effect of the positive control (Xenical) at 100 ppm, about 10,6%.
 UJI IN VITRO EKSTRAK AIR DAN ETANOL DARI
BUAH ASAM GELUGUR, RIMPANG LENGKUAS, DAN
KENCUR SEBAGAI INHIBITOR AKTIVITAS
LIPASE PANKREAS

ANA FITRIYANI

Skripsi
sebagai salah satu syarat memperoleh gelar
Sarjana Sains pada
Departemen Kimia

DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2009
Judul Skripsi : Uji in Vitro Ekstrak Air dan Etanol dari Buah Asam Gelugur, Rimpang
Lengkuas, dan Kencur sebagai Inhibitor Aktivitas Lipase Pankreas
Nama : Ana Fitriyani
NIM : G44204027

Menyetujui:

Pembimbing I, Pembimbing II,

Dr. Dyah Iswantini Pradono, M.Agr Prof. Dr. Ir. Latifah K. Darusman, M.S.
NIP 132 956 706 NIP 130 536 681

Mengetahui:

Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Institut Pertanian Bogor,

Dr. drh. Hasim, DEA

NIP 131 578 806

Tanggal lulus:
 PRAKATA

Puji syukur ke hadirat Allah SWT atas segala kasih sayang, nikmat, rahmat, dan
karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ilmiah ini. Karya ilmiah yang
berjudul Uji in Vitro Ekstrak Air dan Etanol dari Buah Asam Gelugur, Rimpang
Lengkuas, dan Kencur sebagai Inhibitor Aktivitas Lipase Pankreas ini merupakan salah
satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana sains pada Departemen kimia FMIPA IPB.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu Dr. Dyah Iswantini Pradono, M.Agr
dan Ibu Prof. Dr. Ir. Latifah K. Darusman, M.S. sebagai pembimbing yang telah
memberikan arahan, saran, dan dorongan selama pelaksanaan penelitian dan penulisan
karya ilmiah ini. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Hibah Kompetensi
atas nama Dr. Dyah Iswantini Pradono, M.Agr yang telah membantu pembiayaan
penelitian dan Pusat Studi Biofarmaka IPB yang telah memberikan bantuan dalam hal
tempat penelitian dan peralatan laboratorium yang penulis gunakan dalam penelitian ini .
Ungkapan terima kasih penulis berikan kepada ibu, ayah, kakak, adik, dan
keluarga besar Kamari yang selalu memberikan semangat, doa, dan kasih sayang dalam
berbagai bentuk yang tak pernah putus. Selain itu, terima kasih kepada Laboratorium
Terpadu, seluruh laboran Kimia Fisik dan Lingkungan, serta Kimia Analitik, Bu Nunuk,
Mba Salina, serta semua staf dan pegawai Pusat Studi Biofarmaka atas bantuan yang
diberikan selama penelitian. Ucapan terima kasih tak lupa penulis berikan kepada Kak Ita,
Kak Sabet, dan Ai yang turut membantu dalam penyusunan karya ilmiah ini.
Semoga karya ilmiah ini dapat bermanfaat.

Bogor, Januari 2009

Ana Fitriyani
 RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Kendal pada tanggal 5 Mei 1987 dari ayah Masrochan dan ibu
Musanah. Penulis merupakan putri ketiga dari empat bersaudara. Tahun 2004 penulis
lulus dari SMU Negeri 1 Kendal dan pada tahun yang sama lulus seleksi masuk Institut
Pertanian Bogor (IPB) melalui jalur undangan seleksi masuk IPB (USMI) di Departemen
Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam.
Selama mengikuti perkuliahan, penulis pernah menjadi asisten praktikum Kimia
Dasar (2005/2006 dan 2007/2008), Kimia Fisik Layanan (2007/2008), Kimia Analitik
Layanan (2007/2008), serta Kromatografi II untuk program Diploma Analisis Kimia
(2007/2008). Penulis juga pernah menjadi Staf Komisi Keilmuan Dewan Perwakilan
Mahasiswa Fakultas MIPA (2005/2006) dan Staf Departemen Chem Art Ikatan
Mahasiswa Kimia (2006/2007). Selama perkuliahan penulis juga memperoleh beasiswa
dari POM (Persatuan Orang Tua Mahasiswa) selama 2 tahun, yaitu tahun 2004-2006.
Bulan Juli-Agustus 2007, penulis melaksanakan praktik lapangan di Laboratorium CQA
PT Indofood Sukses Makmur Tbk, Ancol.
 DAFTAR ISI
Halaman

DAFTAR TABEL........................................................................................................... vi

DAFTAR GAMBAR ..................................................................................................... vi

DAFTAR LAMPIRAN...................................................................................................vii

PENDAHULUAN .......................................................................................................... 1

TINJAUAN PUSTAKA
Asam Gelugur (Garcinia atroviridis) .................................................................. 2
Lengkuas (Alpinia galanga)................................................................................. 2
Kencur (Kaempferia galanga) ............................................................................. 3
Lipase Pankreas.................................................................................................... 3
Penelitian Pendukung........................................................................................... 4
Uji Toksisitas Larva Udang ................................................................................ 5

BAHAN DAN METODE

Bahan dan Alat..................................................................................................... 5
Metode Penelitian ................................................................................................ 5
Persiapan Contoh ................................................................................................. 5
Penetapan Kadar Air (AOAC 2000) .................................................................... 5
Uji Fitokimia (Harborne 1987) ............................................................................ 6
Ekstraksi Air (Padikkala & Achuthan 1997)........................................................ 6
Ekstraksi Etanol (Padikkala & Achuthan 1997) .................................................. 6
Uji Toksisitas Ekstrak (Meyer et al. 1982) .......................................................... 6
Uji in Vitro Ekstrak sebagai Inhibitor Aktivitas Lipase Pankreas
(Han et al. 2005) .................................................................................................. 7
Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak (Codex 1986 diacu dalam
Nobre et al. 2005) ................................................................................................ 7

HASIL DAN PEMBAHASAN

Kadar Air Contoh................................................................................................. 7
Ekstraksi............................................................................................................... 7
Uji Fitokimia ........................................................................................................ 8
Uji Toksisitas ....................................................................................................... 9
Uji in Vitro Ekstrak sebagai Inhibitor Aktivitas Lipase Pankreas .......................10
Uji Statistik .........................................................................................................14
Kadar Flavonoid Total .........................................................................................15

SIMPULAN DAN SARAN

Simpulan ..............................................................................................................16
Saran ....................................................................................................................16

DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................16

LAMPIRAN ...................................................................................................................19
 DAFTAR TABEL

Halaman

1 Hasil uji fitokimia buah asam gelugur .......................................................................... 8

2 Hasil uji fitokimia rimpang lengkuas............................................................................ 8
3 Hasil uji fitokimia rimpang kencur ............................................................................... 9
4 Nilai LC50 ekstrak air dan etanol contoh terhadap larva udang..................................... 9
5 Daya inhibisi ekstrak contoh pada konsentrasi maksimum .......................................... 12

DAFTAR GAMBAR

Halaman

1 Buah asam gelugur (Garcinia atroviridis).................................................................... 2

2 Rimpang lengkuas (Alpinia galanga) ........................................................................... 2
3 Rimpang kencur (Kaemferia galanga) ......................................................................... 3
4 Rendemen berbagai macam ekstrak contoh ................................................................. 8
5 Grafik daya inhibisi ekstrak air contoh terhadap aktivitas lipase pankreas .................. 11
6 Grafik daya inhibisi ekstrak etanol contoh terhadap aktivitas lipase pankreas ............. 11
7 Grafik daya inhibisi kontrol positif (Xenical) terhadap aktivitas lipase pankreas ..... 12
 DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

1 Bagan alir penelitian ..................................................................................................... 20

2 Bagan alir ekstraksi air.................................................................................................. 21
3 Bagan alir ekstraksi etanol ............................................................................................ 21
4 Bagan alir penentuan nilai LC50 ekstrak dengan menggunakan larva udang................. 22
5 Bagan alir uji in vitro inhibisi ekstrak terhadap aktivitas lipase pankreas .................... 23
6 Prosedur pembuatan pereaksi tembaga ........................................................................ 23
7 Bagan alir penentuan kadar flavonoid total ekstrak ..................................................... 24
8 Penentuan kadar air....................................................................................................... 25
9 Rendemen berbagai ekstrak contoh dan perhitungan.................................................... 26
10 Aktivitas ekstrak terhadap larva A. salina setelah 24 jam .......................................... 27
11 Data dan perhitungan daya inhibisi ekstrak terhadap aktivitas lipase pankreas ......... 28
12 Perhitungan statistik ekstrak buah asam gelugur, rimpang lengkuas, dan kencur ...... 30
13 Kurva estimasi berbagai ekstrak contoh dan kontrol positif ....................................... 33
14 Data dan perhitungan penentuan kadar flavonoid total............................................... 34
 PENDAHULUAN
Kegemukan saat ini menjadi salah satu
masalah kesehatan masyarakat karena dapat
menurunkan produktivitas kerja, mengganggu
penampilan, dan menyebabkan beberapa
penyakit degeneratif seperti diabetes melitus
tipe 2, aterosklerosis, kanker, dan hipertensi.
Oleh karena itu, para penderita kegemukan
atau obesitas rela melakukan berbagai upaya
untuk menurunkan bobot badan mereka, mulai
dari mengatur kembali pola makan, berolah
raga, mengonsumsi berbagai obat penurun
bobot badan atau pelangsing, hingga
melakukan pembedahan.
Sebagian besar obat penurun bobot badan
atau pelangsing sintetik di pasaran, seperti
sibutramin dan orlistat dapat menimbulkan
efek samping yang tidak baik bagi kesehatan
(Downey et al. 2004) sehingga masyarakat
lebih memilih mengonsumsi pelangsing dari
tanaman obat karena dinilai lebih aman dan
harganya lebih terjangkau. Mekanisme obat
pelangsing salah satunya adalah menghambat
penyerapan lemak melalui penghambatan
aktivitas lipase pankreas sebagai sumber
utama kelebihan kalori. Hal ini dikarenakan
peningkatan aktivitas lipase pankreas mampu
meningkatkan jumlah monogliserida dan asam
lemak yang diserap tubuh, penyebab
kegemukan.
Inhibitor lipase yang pertama ditemukan
adalah orlistat, suatu turunan lipstatin yang
diisolasi dari bakteri Streptomyces toxitricini
(Hadvary et al. 1988). Inhibitor lipase dari
beberapa ekstrak tanaman antara lain ekstrak
herba Cassia mimosoides (Yamamoto et al.
2000), biji kacang kedelai (Satouchi 1998),
biji anggur (Moreno et al. 2003), rimpang
galangal (Alpinia officinarum) (Shin et al.
2003), rimpang Panax japonicus (Han et al.
2005a), dan rimpang jahe (Han et al. 2005b).
Selain itu, daun oolong tea (Han et al. 1999),
daun Thea sinensis (Han et al. 2001), buah
Kochia scoparia (Han et al. 2006), buah
Juglans mandshurica (Han et al. 2007), akar
Platycodin grandiflorum (Xu et al. 2005),
serta akar tanaman Actinidia arguta (Jang et
al. 2008) juga diketahui mampu menginhibisi
lipase pankreas secara in vitro.
Penelitian dari tanaman obat Indonesia
menunjukkan bahwa ekstrak metanol daun jati
belanda (Iswantini et al. 2003a), ekstrak
tunggal dan gabungan dari bangle (Iswantini
et al. 2003b), serta ekstrak metanol bangle
(Wirakusumah 2005) secara in vitro mampu
menginhibisi lipase yang diisolasi dari
Rhizopus arrhizus. Ekstrak etanol daun jati
belanda secara in vivo juga mampu
menghambat aktivitas lipase serum Rattus
norvegicus (Rahardjo et al. 2005). Inhibisi
terhadap aktivitas lipase pankreas manusia
ditunjukkan oleh ekstrak saponin, etanol, dan
air dari daun jati belanda dan rimpang bangle
(Silitonga 2008), serta ekstrak tunggal etanol
dan air dari daun kemuning dan gabungannya
dengan ekstrak daun jati belanda dan bangle
secara in vitro (Martatilofa 2008).
Tanaman lain yang berpotensi sebagai
antiobesitas adalah Garcinia cambogia karena
banyak mengandung asam hidroksisitrat
(Heymsfield 1998). Bahkan telah terdapat
paten mengenai pengaturan bobot badan
menggunakan ekstrak Garcinia cambogia dan
Gymnema sylvestre serta beberapa senyawa
lainnya (Alviar et al. 2002). Jenis Garcinia
lain yang ditemui di Indonesia dengan
kandungan utama dan potensi yang sama
adalah asam gelugur (Garcinia atroviridis).
Lengkuas dan kencur sebagai tanaman
obat tradisional yang mudah didapat dan
murah juga berpotensi sebagai antiobesitas
karena ekstrak etanolnya secara efektif dapat
menurunkan kolesterol, trigliserida, serta
fosfolipid total pada jaringan dan serum
(Padikkala & Achuthan 1997). Senyawaan
flavonoid dan terpenoid yang terkandung
dalam rimpang lengkuas, serta adanya
saponin, polifenol, dan flavonoid dalam
rimpang kencur diharapkan mendukung
potensi tersebut. Akan tetapi, mekanisme
penurunan bobot badan oleh buah asam
gelugur, rimpang lengkuas, dan kencur
melalui penghambatan terhadap aktivitas
lipase pankreas belum diketahui.
Penelusuran melalui situs paten Amerika
(www.uspto.gov) menunjukkan beberapa hasil
penelitian mengenai penanganan obesitas
yang telah dipatenkan antara lain sinergitas
antara ekstrak rimpang jahe dengan beberapa
tanaman obat lainnya (Pushpangadan et al.
2006) serta gabungan ekstrak teh hijau,
gingseng, dan bahan-bahan kimia seperti
kafein dan garam-garam kalsium sebagai
suplemen penurun bobot badan (Yatcilla et al.
2008). Selain itu terdapat senyawa asam 3-(4-
{[2-(4-etoksifenil)-etilkarbamoil]-metoksi}-
fenil)-2-metoksi-propionat dan beberapa asam
lainnya digunakan untuk penanganan obesitas,
diabetes melitus tipe 2, dan beberapa penyakit
lainnya yang berkaitan dengan sindrom X dan
kardiovaskuler (Crespo et al. 2008). Akan
tetapi, paten yang memuat informasi
mengenai ekstrak buah asam gelugur, rimpang
lengkuas, dan kencur sebagai antiobesitas
melalui inhibisi aktivitas lipase pankreas

belum ditemukan. Penelitian ini bertujuan
mengevaluasi daya inhibisi ekstrak air dan
etanol dari buah asam gelugur, rimpang
lengkuas, dan kencur terhadap aktivitas lipase
pankreas dalam potensinya sebagai
antiobesitas.
TINJAUAN PUSTAKA
Asam Gelugur (Garcinia atroviridis)
Tanaman marga Garcinia tersebar di
daerah tropis Asia. Jenisnya yang banyak
dikenal, yaitu Garcinia cambogia umumnya
dijumpai di India bagian selatan, sedangkan
jenis lainnya, yaitu Garcinia atroviridis (asam
gelugur) umumnya dijumpai di daerah
Semenanjung Malaya (Rittirut & Siripatana
2007). Asam gelugur atau gelugor digunakan
secara luas sebagai penyedap masakan oleh
masyarakat Melayu. Tanaman ini masih satu
famili dengan manggis dan asam kandis yang
menyebar di Asia Tenggara. Tanaman ini
termasuk ke dalam bangsa Guttiferales dan
suku Guttiferae yang tingginya bisa mencapai
20 m (Jansen 1992).
Buah asam gelugur muda berwarna hijau
kekuningan, berbentuk bulat seperti buah
jeruk yang sudah dikupas (Gambar 1). Buah
ini biasanya dipotong dan dikeringkan,
kemudian dimanfaatkan sebagai pemberi rasa
asam dan penyedap masakan. Selain itu,
buahnya yang tidak dikupas, apabila direbus
dengan gula dapat dibuat selai (Heyne 1987a)
Ekstrak daun asam gelugur yang diberikan
secara oral dengan dosis 360 mg/Kg terhadap
mencit memberi efek inhibitor terhadap
perkembangan Plasmodium berghei penyebab
malaria (Syamsudin et al. 2004).
Gambar 1 Buah asam gelugur (Garcinia
atroviridis).
Asam hidroksisitrat (asam 1,2-dihidroksi-
propana-1,2,3-trikarboksilat) dalam buah
gelugur akan menghambat secara kompetitif
kerja enzim ATP-sitrat liase yang berfungsi
mengubah asam sitrat menjadi asetil koenzim
A. Dalam siklus Krebs, asetil Ko-A akan
diubah menjadi malonil Ko-A yang kemudian
dikonversi menjadi asam lemak.
2
Penghambatan aktivitas ATP-sitrat liase oleh
asam hidroksisitrat (HCA) akan menyebabkan
penurunan produksi asam lemak sebagai
prekursor pembentukan lemak dalam tubuh.
Buah asam gelugur juga bersifat
antioksidan dan mampu menurunkan bobot
badan dan kolesterol (Chung 2006). Mackeen
(1998) meneliti bioaktivitas ekstrak metanol-
DMSO dari tanaman ini yang memberikan
hasil bahwa ekstrak tersebut bersifat
antibakteri (akar), antifungi (buah dan daun),
antioksidan (akar, buah, dan batang), dan
antitumor (daun, buah, dan batang).
Lengkuas (Alpinia galanga)
Lengkuas (Alpinia galanga) lebih dikenal
sebagai bumbu masak berbagai kuliner di
Indonesia dan Malaysia. Nama lainnya adalah
Languas galanga atau lebih dikenal dengan
greater galangal. Lengkuas diklasifikasikan
ke dalam kingdom Plantae, divisi
Magnoliophyta, kelas Liliopsida, ordo
Zingiberales, subfamili Alpinioideae, dan
genus Alpinia (Heyne 1987b).
Rimpang lengkuas besar dan tebal,
berdaging, berbentuk silindris, diameter
sekitar 2-4 cm, dan bercabang-cabang. Bagian
luar berwarna coklat agak kemerahan atau
kuning kehijauan pucat, mempunyai sisik-
sisik berwarna putih atau kemerahan, keras
mengkilap, sedangkan bagian dalamnya
berwarna putih (Gambar 2). Daging rimpang
yang sudah tua berserat kasar. Rimpang dan
batangnya yang muda banyak dimanfaatkan
sebagai bahan sayur atau sambal. Bunganya
berbentuk lonceng, berwarna putih, dan juga
dapat dibuat sayur.
Gambar 2 Rimpang lengkuas (Alpinia
galanga).
Ada 2 jenis lengkuas yang dikenal yaitu
varitas dengan rimpang berwarna putih dan
rimpang merah. Lengkuas putih banyak
digunakan sebagai penyedap, sedangkan
lengkuas merah lebih banyak digunakan
sebagai obat. Pada penelitian ini digunakan
lengkuas merah.
Lengkuas tumbuh di tempat terbuka yang
mendapat sinar matahari penuh atau yang
sedikit terlindung. Lengkuas diduga berasal

dari Cina dan sekarang tersebar luas di
berbagai daerah di Asia antara lain Indonesia,
Malaysia, Filipina, Cina bagian selatan,
Hongkong, India, Bangladesh, dan Suriname.
Lengkuas mengandung minyak atsiri dengan
komponen utama terpinen-4-ol dan 1-
asetoksikalsiferol asetat yang mempunyai
kemampuan sebagai antibakteri, serta
flavonoid dengan komponen utama kaemferol,
galangin, dan kuersetin (BPOM 2004).
Komponen flavonol dan dihidroflavonol
dikenal sebagai senyawa yang bersifat
fungistatik dan fungisida yang terdapat pada
tumbuhan Alpinia dan Kaempferia adalah
alpinetin (Rahayu 2000).
Pemanfaatan lengkuas antara lain untuk
obat penyakit kulit, obat tetes telinga, pelancar
kemih, penguat empedu, rematik, dan
memperbaiki pencernaan. Beberapa penelitian
sebelumnya menunjukkan kemampuan
lengkuas sebagai antimikroba dengan
senyawa aktifnya 1-asetoksikalsiverol asetat
(Rahayu 2000). Ekstrak etanol lengkuas dan
kencur secara efektif telah dipelajari dapat
menurunkan kolesterol, trigliserida, fosfolipid
total pada jaringan dan serum, serta mampu
meningkatkan high density lipoproteins
(HDL) serum secara signifikan secara in vivo
pada tikus putih dengan kolesterol tinggi
(Padikkala & Achuthan 1997).
Kencur (Kaempferia galanga)
Kencur (Kaempferia galanga) dikenal
sebagai salah satu rempah-rempah dan bumbu
berbagai masakan di Indonesia. Kencur
diklasifikasikan dalam kerajaan Plantae,
divisi Magnoliophyta, kelas Liliopsida, ordo
Zingiberales, famili Zingiberaceae, subfamili
Zingiberoideae, dan genus Kaempferia
(Heyne1987).
Kencur merupakan tanaman tahunan,
berbatang basal dengan tinggi lebih kurang 20
cm. Daunnya tunggal, berwarna hijau dengan
pinggir merah kecoklatan bergelombang.
Bentuk daunnya lebar sampai bundar, ujung
runcing, dan tepinya rata. Permukaan daun
bagian atas tidak berbulu, sedangkan bagian
bawah berbulu halus. Tangkai daun pendek,
berukuran 3-10 cm, pelepah terbenam dalam
tanah dengan panjang 1,5-3,5 cm, dan
berwarna putih. Bunga kencur berbentuk
terompet dan tunggal dengan panjang antara
2,5-5 cm. Panjang benang sarinya sekitar 4
mm dan berwarna kuning. Putik berwarna
putih atau putih keunguan. Akarnya serabut
dan berwarna coklat kekuningan. Rimpangnya
pendek, berwarna coklat, berbentuk jari, dan
tumpul. Bagian luar rimpang seperti bersisik,
3
daging rimpang tidak keras, rapuh, mudah
patah, dan bergetah (Gambar 3). Rimpang
kencur berbau harum dengan rasa pedas yang
khas.
Kencur banyak tumbuh liar di tepi kebun,
namun saat ini sudah banyak dibudidayakan
di Indonesia, terutama di pulau Jawa, selain
itu juga di India, Malaysia, Taiwan, dan Cina.
Kencur tumbuh subur di daerah tropis dengan
curah hujan tinggi, dataran rendah, dan
pegunungan. Tanaman ini tumbuh subur pada
tanah yang berwarna hitam, berpasir, dan di
tempat yang sedikit terlindung.
Rimpang kencur mengandung saponin,
flavonoid, minyak atsiri, asam metil kanilat,
serta senyawaan polifenol dan pentadekan.
Ekstrak etanol kencur mengandung minyak
atsiri tidak kurang dari 37,9% dengan
komponen utama etil-p-metoksisinamat tidak
kurang dari 4,3% dan etilsinamat (BPOM
2004).
Gambar 3 Rimpang kencur (Kaempferia
galanga).
Rimpang kencur dapat digunakan sebagai
obat gosok untuk bengkak karena terkilir
(keseleo) atau terpukul benda tumpul, serta
untuk encok dan rematik. Selain itu, rimpang
kencur juga digunakan untuk mengobati
masuk angin, radang lambung, kejang perut,
mual, diare, penawar racun, serta sebagai obat
batuk. Kencur juga dipakai untuk mengobati
infeksi telinga, sakit kulit, bisul, dan dapat
pula digunakan sebagai bioinsektisida. Kencur
juga telah digunakan pada sistem pengobatan
Ayurveda untuk menangani berbagai penyakit
yang disebabkan peradangan, diabetes militus,
dan obesitas (Padikkala & Achuthan 1997).
Lipase Pankreas
Lipase pankreas merupakan enzim yang
larut dalam air. Enzim ini disintesis oleh sel-
sel parenkim pankreas dan ditransfer ke
permukaan luminar usus halus untuk
menghidrolisis substratnya. Substrat enzim
lipase pankreas berupa lemak atau minyak
dari makanan dalam bentuk triasilgliserol
(trigliserida) yang akan dihidrolisis menjadi
monogliserida dan asam lemak bebas rantai
panjang. Lipase pankreas menghidrolisis 50-
70% dari total lemak dari asupan makanan

(Birari &Bhutani 2007). Enzim ini memecah
lipid dengan memutuskan ikatan ester yang
merupakan ikatan tulang punggung gliserol
pada substrat. Monogliserida yang dihasilkan
akan digunakan untuk kerja oleh otot dan
sebagian disimpan dalam jaringan adiposa
(Santoso 2001). Lipase pankreas bekerja pada
daerah permukaan minyak air dan titik-titik
lipid yang teremulsi secara halus dibentuk
oleh gerakan mekanis dalam usus dengan
adanya garam empedu. Semakin aktif kerja
enzim tersebut maka lemak dan minyak yang
dihidrolisis akan semakin banyak sehingga
semakin banyak pula monogliserida yang
dihasilkan. Sebagai akibatnya, monogliserida
yang diserap oleh usus halus dan kemudian
disimpan sebagai cadangan lemak dalam
jaringan adiposa pun akan meningkat. Hal ini
dapat memicu penumpukan lemak dalam
jaringan tersebut dan menyebabkan
kegemukan atau obesitas.
Salah satu inhibitor lipase yang telah
digunakan sebagai pelangsing di pasaran
adalah orlistat (Xenical). Orlistat merupakan
suatu turunan lipstatin yang dihasilkan oleh
bakteri Streptomyces toxitricini bekerja
dengan membatasi absorpsi lemak dari
makanan di dalam lambung dan usus halus
dengan menghambat aktivitas lipase gaster
dan pankreas (Hadvary et al. 1988).
Pemakaian orlistat memiliki efek samping
seperti insomnia dan terjadinya malabsorbsi
terhadap vitamin A, D, E, dan K yang larut
lemak.
Struktur orlistat (tetrahidrolipstatin).
Penelitian Pendukung
Berbagai penelitian telah dilakukan untuk
menentukan senyawa dari berbagai ekstrak
tumbuhan yang berperan sebagai penurun
bobot badan (antiobesitas) baik secara in vitro
dengan menghambat aktivitas lipase maupun
secara in vivo pada hewan coba. Ekstrak
tanaman yang telah dipelajari mampu
menghambat aktivitas lipase pankreas adalah
fraksi saponin dari ekstrak air daun oolong tea
(Han et al. 1999) dan senyawa aktif saponin
yang terdapat pada tanaman Thea sinensis
(Han et al. 2001). Senyawa saponin lainnya
yang memiliki kemampuan sama adalah yang
diisolasi dari platycodi radix yang merupakan
akar dari tamanan Platycodon grandiflorum
(Xu et al. 2005) dan chikusetsusaponin dari
4
rimpang Panax japonicus (Han et al. 2005a).
CT-II, suatu fraksi dari ekstrak etanol tanaman
Cassia mimosoides diketahui dapat
menghambat aktivitas lipase secara in vitro
dan in vivo (Yamamoto et al. 2000). Inhibisi
lipase pankreas juga mampu dilakukan ekstrak
etanol biji anggur pada konsentrasi 1 mg/mL
yang mampu mencapai 80% (Moreno et al.
2003), serta senyawa 3-metiletergalangin yang
diisolasi dari tanaman galangal (Alpinia
officinarum) yang juga secara in vivo mampu
menurunkan kadar kolesterol tikus jantan
(Shin et al. 2003). Penelitian lainnya oleh Han
et al. (2005b) menunjukkan bahwa ekstrak air
rimpang jahe dapat menurunkan bobot
jaringan adiposa mencit secara signifikan dan
mampu menginhibisi hidrolisis triolein yang
diemulsi dengan fosfatidilkolin oleh lipase
pankreas. Aktivitas antiobesitas juga dimiliki
oleh buah Juglans mandshurica (Han et al.
2007) dan beberapa triterpena dari ekstrak
etanol akar tanaman Actinidia arguta , yaitu
asam 3-O-trans-p-kaoumaroil aktinidat, asam
ursolat, asam 23-hidroksiursolat, asam
kurosolat, asam asiatat, dan asam betulinat
(Jang et al. 2008).
Penelitian serupa dari ekstrak tanaman-
tanaman obat Indonesia juga banyak
dilakukan. Uji in vitro terhadap aktivitas
lipase yang berasal dari mikroba Rhizopus
arrhizus menunjukkan bahwa ekstrak metanol
daun jati belanda yang mengandung alkaloid,
triterpenoid, dan steroid berpotensi sebagai
inhibitor lipase baik pada konsentrasi tinggi
maupun rendah (Iswantini et al. 2003a).
Ekstrak etanol daun jati belanda dapat
menghambat aktivitas lipase serum Rattus
norvegicus secara in vivo (Rahardjo et al.
2005). Penelitian oleh Silitonga (2008)
menggunakan lipase pankreas manusia
menunjukkan bahwa ekstrak air, etanol, dan
saponin daun jati belanda dan bangle mampu
menginhibisi aktivitas lipase pankreas dengan
daya inhibisi tertinggi dicapai oleh ekstrak
etanol bangle.
Penelitian mengenai ekstrak tanaman
bangle lainnya menunjukkan bahwa ekstrak
air, metanol, flavonoid, dan steroid dapat
menghambat aktivitas lipase, sedangkan
ekstrak tanin meningkatkan aktivitas lipase
(Iswantini et al. 2003b). Ekstrak metanol dan
air memiliki daya inhibisi tertinggi terhadap
aktivitas lipase pada konsentrasi 100 ppm,
sedangkan untuk ekstrak flavonoid dan
steroidnya pada konsentrasi 200 ppm.
Gabungan ekstrak flavonoid, tanin, dan
steroidnya juga mampu menginhibisi lipase
dengan perbandingan tertentu dengan inhibisi

tertinggi dicapai oleh gabungan ekstrak
flavonoid dan tanin pada perbandingan 2:1
(Febriany 2004). Ekstrak kasar metanol
bangle dapat menghambat aktivitas lipase
Rhizoppus arrhizus pada konsentrasi 100 dan
300 ppm, sedangkan ekstrak air seduhannya
pada konsentrasi 100, 300, dan 400 ppm
(Wirakusumah 2005). Penelitian lainnya
menyebutkan bahwa pemberian jus buah
mengkudu masak dengan konsentrasi 5%,
10%, dan 20% (b/v) telah memberikan efek
penurunan bobot badan tikus putih jantan
masing-masing sebesar 5,02%; 7,67%; dan
11,10% (Burhanuddin et al. 2004).
Martatilofa (2008) menyatakan bahwa ekstrak
air kemuning mampu menghambat kerja
lipase pankreas manusia dengan daya inhibisi
tertinggi sebesar 25,66% pada konsentrasi 100
ppm dan ekstrak etanolnya pada konsentrasi
30 ppm dengan daya inhibisi sebesar 22,80 %,
serta gabungannya dengan ekstrak etanol daun
jati belanda dan bangle mencapai 21,58%
dengan perbandingan 1:1:1.
Penelusuran melalui situs paten Amerika
(www.uspto.gov) menunjukkan banyak hasil
penelitian yang berhubungan dalam
pemeliharaan obesitas yang telah dipatenkan
di antaranya adalah ekstrak Garcinia
cambogia dan Gymnema sylvestre (Alviar et
al. 2002). Paten lainnya menyebutkan bahwa
Garcinia cambogia digunakan sebagai
suplemen herbal penurun bobot badan (Kurk
& Vital 2002). Selain itu, telah dipatenkan
pula sinergitas ekstrak jahe dengan beberapa
tanaman obat lainnya seperti Gentiana kurroo,
Murraya koenigii, Allium sativum,
Amorphophallus campanulatus, dan beberapa
bahan tambahan lainnya untuk perawatan
obesitas dan aterosklerosis (Pushpangadan et
al. 2006).
Uji Toksisitas terhadap Larva Udang
Uji toksisitas merupakan suatu metode
untuk mengamati aktivitas farmakologi suatu
senyawa. Salah satu metode uji bioaktivitas
senyawa bahan alam adalah uji letalitas larva
udang atau brine shrimp lethality test (BSLT).
Keunggulan penggunaan larva udang adalah
sifatnya yang peka terhadap bahan uji, waktu
siklus yang cepat, mudah dibiakkan, dan
murah. Konsentrasi letal 50% (LC50) ekstrak
dapat diperoleh melalui BSLT. LC50 adalah
dosis senyawa bioaktif yang dapat
menyebabkan 50% kematian hewan uji.
Umumnya, suatu senyawa kimia dikatakan
berpotensi bioaktif apabila mempunyai nilai
LC50 kurang dari 1000 ppm. Uji toksisitas ini
merupakan uji toksisitas awal suatu ekstrak
5
sebelum dilakukan uji toksisitas akut atau uji
aktivitas lainnya. Hasil uji ini dapat digunakan
untuk menentukan batas atau kisaran
konsentrasi ekstrak yang digunakan pada uji
aktivitas.
BAHAN DAN METODE
Bahan dan Alat
Buah asam gelugur kering diperoleh dari
Medan, sedangkan rimpang lengkuas dan
kencur kering diperoleh dari Balai Penelitian
Tanaman Rempah dan Obat (Balitro). Lipase
pankreas yang digunakan adalah lipase
pankreas manusia dengan kode Sigma L9780-
50 units.
Bahan-bahan yang digunakan adalah
Xenical, asam oleat, minyak wijen, telur
udang A. salina, kuersetin, pereaksi tembaga
(Lampiran 6), pereaksi Meyer, Wagner,
Dragendorf, dan Lieberman Buchard. Alat
yang digunakan adalah spektrofotometer UV-
Vis U-2800 Hitachi.
Metode Penelitian
Penelitian ini dilakukan melalui beberapa
tahap, yaitu persiapan contoh, penelitian
pendahuluan (penetapan kadar air dan uji
fitokimia), dan penelitian utama (ekstraksi,
penentuan LC50, uji in vitro inhibisi ekstrak
terhadap aktivitas lipase pankreas, dan
penentuan kadar flavonoid total ekstrak
dengan daya inhibisi tertinggi) (Lampiran 1).
Persiapan Contoh
Persiapan contoh yang dilakukan meliputi
pengumpulan bahan baku, pencucian,
perajangan, dan pengeringan. Contoh yang
sudah kering selanjutnya digiling hingga
diperoleh bentuk serbuk untuk mempermudah
proses ekstraksi.
Penetapan Kadar Air (AOAC 2000)
Cawan porselin dikeringkankan di dalam
oven bersuhu 105 C selama 30 menit,
kemudian didinginkan dalam desikator, lalu
ditimbang bobot kosongnya. Sebanyak 3 g
contoh dimasukkan ke dalam cawan,
kemudian dikeringkan kembali dalam oven
selama 3 jam pada suhu yang sama. Setelah
itu cawan didinginkan dalam desikator, lalu
ditimbang. Contoh dalam cawan dikeringkan
kembali di dalam oven selama 3 jam pada
suhu yang sama dan setelah dingin ditimbang
kembali. Prosedur yang sama dilakukan
hingga diperoleh bobot contoh yang konstan.

Kadar air ditentukan dengan persamaan
berikut.
ab
Kadar air = 100%
a 1997)
Keterangan:
a = bobot contoh awal (g)
b = bobot contoh akhir (g)
Uji Fitokimia (Harborne 1987)
Uji fitokimia yang dilakukan meliputi uji
alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, kuinon,
dan triterpenoid/ steroid.
Uji alkaloid. Sejumlah ekstrak ditambahkan
10 mL kloroform dan beberapa tetes NH3.
Filtrat dipisahkan dan diasamkan dengan
H2SO4 2 M. Lapisan asam yang tidak
berwarna diuji dengan pereaksi Meyer,
Dragendorf, dan Wagner. Adanya alkaloid
ditandai dengan terbentuknya endapan putih
(dengan pereaksi Meyer), endapan merah
(dengan pereaksi Dragendorf), dan endapan
coklat (dengan pereaksi Wagner).
Uji flavonoid. Sejumlah ekstrak ditambah air
secukupnya dan dipanaskan selama 5 menit,
kemudian ditambahkan serbuk Mg, 0,2 mL
HCl pekat, dan beberapa tetes amil alkohol.
Larutan dikocok dan dibiarkan memisah.
Keberadaan flavonoid ditandai dengan
terbentuknya warna kuning hingga merah
kecoklatan pada lapisan amil alkohol.
Uji saponin. Sejumlah ekstrak ditambah air
secukupnya dan dipanaskan selama 5 menit,
setelah itu didinginkan dan dikocok kuat.
Adanya saponin ditandai dengan timbulnya
busa yang stabil selama 10 menit.
Uji tanin. Sejumlah ekstrak dalam tabung
reaksi ditambah air secukupnya dan
dipanaskan selama 5 menit, lalu disaring.
Filtrat ditambahkan FeCl3 1% (b/v). Adanya
tanin ditandai dengan terbentuknya warna
hijau kebiruan.
Uji kuinon. Sejumlah ekstrak dalam tabung
reaksi ditambah air, dididihkan selama 5
menit, lalu disaring. Filtrat ditambah NaOH
15% (b/v). Adanya kuinon ditandai dengan
terbentuknya warna merah.
Uji triterpenoid/steroid. Sejumlah ekstrak
ditambah etanol panas 50 C, kemudian
disaring ke dalam pinggan dan diuapkan
hingga kering. Residu yang dihasilkan
ditambah eter. Lapisan eter dipipet dan diuji
dengan pereaksi Lieberman Buchard (asam
asetat anhidrat : H2SO4 pekat = 3:1). Warna
merah atau ungu menunjukkan adanya
6
triterpenoid dan warna hijau atau biru
menunjukkan adanya steroid.
Ekstraksi Air (Padikkala & Achuthan
Metode ekstraksi ini berdasarkan pada
penelitian Padikkala & Achuthan (1997)
dengan beberapa modifikasi. Serbuk contoh
ditimbang sebanyak 100 g kemudian
dimaserasi dengan air dengan perbandingan
1:8 selama 24 jam. Ekstrak dipekatkan dengan
rotary evaporator. Ekstrak yang diperoleh
ditimbang dan dihitung rendemennya
(Lampiran 2).
Ekstraksi Etanol (Padikkala & Achuthan
1997)
Metode ekstraksi ini berdasarkan pada
penelitian Padikkala & Achuthan (1997)
dengan beberapa modifikasi. Serbuk contoh
ditimbang 100 g kemudian dimaserasi
dengan etanol 70% selama 24 jam, lalu
disaring. Setelah itu ekstrak dipekatkan
dengan rotary evaporator hingga diperoleh
ekstrak kering (Lampiran 3). Ekstrak
ditimbang dan dihitung rendemennya dengan
persamaan sebagai berikut.
a
Rendemen ekstrak = 100% fk
b
Keterangan:
a = bobot ekstrak (g)
b = bobot contoh awal (g)
fk = faktor koreksi =
100
100 kadar air
Uji Toksisitas Ekstrak (Meyer et al. 1982)
Uji toksisitas ekstrak dilakukan dengan
menggunakan larva udang Artemia salina.
Kista A. salina sebanyak 50 mg dimasukkan
ke dalam wadah yang berisi air laut yang
sudah disaring dan dilengkapi aerator. Kista
dibiarkan selama 48 jam di bawah
pencahayaan lampu agar menetas sempurna.
Setelah menetas, larva A. salina sebanyak 10
ekor dimasukkan ke dalam vial 2 mL,
kemudian ditambahkan larutan stok ekstrak
dengan konsentrasi 4000 ppm dan ditepatkan
volumenya dengan air laut sehingga
konsentrasi akhir ekstrak menjadi 0, 10, 100,
dan 1000 ppm. Setelah 24 jam, jumlah larva
yang mati dihitung. Nilai konsentrasi letal
50% (LC50) ditentukan dengan metode
analisis probit dengan selang kepercayaan
95%. Bagan alir uji toksisitas ekstrak
diperlihatkan pada Lampiran 4.

Uji in Vitro Ekstrak sebagai Inhibitor
Aktivitas Lipase Pankreas (Han et al. 2005)
Metode uji inhibisi yang digunakan
berdasarkan pada metode yang digunakan
oleh Han et al. (2005) dengan beberapa
modifikasi. Sebanyak 1 mL campuran dari
ekstrak dengan berbagai konsentrasi, 10 g
albumin 10% (b/v), lipase pankreas murni
dengan konsentrasi 1,4 10-4 g/L, dan ditera dengan etil asetat. Selanjutnya, larutan
bufer fosfat pH 8 dimasukkan ke dalam
tabung reaksi dan diinkubasi pada suhu 40C
selama 45 menit. Setelah itu ditambahkan
kloroform sebanyak 3 mL. Larutan kemudian
dipisahkan dengan sentrifus selama 5 menit.
Lapisan klorofom kemudian diambil sebanyak
1,0 mL dan ditambahkan larutan kloroform-
heptana (1:1) sebanyak 4 mL, lalu dikocok
hingga homogen. Setelah homogen, ke dalam
larutan ditambahkan pereaksi tembaga
sebanyak 2,5 mL, dikocok selama 3 menit,
lalu dimasukkan ke dalam sentrifus selama 10
menit. Setelah itu, lapisan kloroform diambil
sebanyak 3 mL, kemudian larutan natrium
dietilditiokarbamat 0,25% (v/v) dalam butanol
ditambahkan sebanyak 0,25 mL hingga
terbentuk larutan berwarna kuning.
Selanjutnya, absorbans larutan diukur dengan
spektrofotometer UV-Vis pada panjang
gelombang 435 nm. Absorbans yang
diperoleh dikonversi hingga diperoleh nilai
aktivitas enzim dan daya inhibisi ekstrak. Hal
yang sama dilakukan untuk kontrol positif
(Xenical), sedangkan untuk kontrol negatif
dilakukan tanpa penambahan larutan ekstrak.
Bagan alir uji inhibisi ekstrak diperlihatkan
pada Lampiran 5.
Penentuan Kadar Flavonoid Total (Codex
1986 diacu dalam Nobre et al. 2005)
Metode ini berdasarkan pada Codex
(1986) diacu dalam Nobre et al. (2005).
Ekstrak dengan daya inhibisi tertinggi
terhadap aktivitas lipase pankreas dari setiap
contoh ditimbang dengan bobot yang setara
dengan 200 mg serbuknya, kemudian ekstrak
tersebut dimasukkan ke dalam sistem
hidrolisis yang berupa 1,0 mL larutan
heksametilenatetramina 0,5% (b/v), 20 mL
aseton, dan 2 mL HCl 25% dalam labu bulat.
Hidrolisis ekstrak dilakukan dengan
pemanasan menggunakan refluks selama 30
menit. Filtrat hasil hidrolisis disaring
menggunakan kapas ke dalam labu takar 100
mL, sedangkan residunya ditambah 20 mL
aseton dan direfluks kembali selama 30 menit.
Filtrat digabungkan, sedangkan residunya
ditambah 20 mL aseton dan dihidrolisis
7
kembali. Filtrat digabungkan kembali, dan
larutan ditera dengan aseton.
Sebanyak 20 mL filtrat hasil hidrolisis dan
20 mL akuades dimasukkan ke dalam corong
pisah, kemudian diekstraksi dengan etil asetat
(ekstraksi yang pertama dengan 15 mL etil
asetat, ekstraksi kedua dan ketiga dengan 10
mL etil asetat). Fraksi etil asetat dikumpulkan
dalam labu takar 50 mL, kemudian larutan
tersebut diambil 10 mL ke dalam labu takar
25 mL, direaksikan dengan AlCl3 2% (b/v) 1
mL, dan ditera dengan larutan asam asetat
glasial dalam metanol 5% (v/v). Pengukuran
larutan dilakukan pada panjang gelombang
370,8 nm. Standar dibuat dengan kuersetin
murni ditimbang 0,0026 g kemudian
dilarutkan dengan asam asetat glasial dalam
metanol 5% (v/v) dalam labu takar 50 mL,
kemudian dibuat deret standarnya dengan
konsentrasi 0; 0,5; 2,5; 5,0; 7,5; dan 10 ppm.
Bagan alir penentuan kadar flavonoid total
diperlihatkan pada Lampiran 7.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Kadar Air Contoh
Penetapan kadar air dari buah asam
gelugur, rimpang lengkuas, dan kencur
dilakukan untuk mengetahui kadar air masing-
masing contoh sehingga dapat diperkirakan
penanganan terbaik bagi contoh dalam hal
penyimpanan. Contoh dikatakan dapat
disimpan dalam jangka waktu yang lama
apabila kadar airnya <10%. Kadar air buah
asam gelugur, rimpang lengkuas, dan kencur
masing-masing sebesar 18,7% (b/b), 9,59%
(b/b), dan 8,60% (b/b) (Lampiran 8).
Hasil penentuan kadar air tersebut
menunjukkan bahwa buah asam gelugur tidak
baik untuk disimpan dalam jangka waktu yang
lama karena memiliki kadar air >10% atau
diperlukan penanganan khusus dalam
penyimpanannya. Penanganan tersebut dapat
dilakukan dengan pengeringan lebih lanjut
hingga kadar airnya <10% dan tidak
menyimpannya pada tempat yang lembab.
Ekstraksi
Metode ekstraksi ini berdasarkan pada
penelitian Padikkala & Achuthan (1997)
dengan beberapa modifikasi. Padikkala &
Achuthan (1997) menggunakan nisbah antara
contoh dan pelarut etanol 70% sebesar 1:10
sedangkan pada penelitian ini menggunakan
nisbah 1:8 dengan pelarut etanol 70% dan air
bebas ion. Ekstraksi contoh menggunakan air
 8

dan etanol dilakukan karena air merupakan yang berperan dalam menghambat aktivitas
pelarut yang biasa digunakan masyarakat lipase pankreas. Hasil uji fitokimia terhadap
untuk mengambil ekstrak dari obat-obatan buah asam gelugur (Tabel 1) menunjukkan
tradisional (jamu) sedangkan etanol bahwa buah asam gelugur kering hanya
merupakan pelarut yang umum digunakan mengandung alkaloid dan saponin. Saponin
pada industri farmasi. Menurut Harborne dalam buah gelugur diduga lebih banyak
(1987) alkohol merupakan pelarut serba guna terdapat dalam bentuk glikosida sehingga
yang baik untuk ekstraksi pendahuluan. Selain hanya dapat terekstrak dengan air, sedangkan
itu, menurut Darusman et al. (2001) etanol alkaloidnya bersifat lebih nonpolar sehingga
adalah pelarut yang umum digunakan dalam lebih terekstrak oleh etanol. Tidak
pembuatan jamu dan obat-obatan fitofarmaka. terdeteksinya senyawa metabolit sekunder
Maserasi dimaksudkan untuk dapat lainnya dalam buah asam gelugur kering
mengekstrak keseluruhan senyawa yang larut maupun ekstrak air dan etanolnya dapat
dalam pengekstrak yang digunakan. disebabkan kadar senyawa-senyawa tersebut
Rendemen yang dihasilkan dikoreksi dengan di dalam buah asam gelugur kering dan
nilai kadar air contoh pada bentuk serbuk ekstraknya sangat sedikit atau berkurang
kering (simplisia). Nilai rendemen yang akibat pengeringan.
diperoleh dari hasil ekstraksi pada ketiga Oluyemi et al. (2007) menyebutkan bahwa
contoh tanaman terhadap bentuk simplisianya dalam marga Garcinia lainnya, yaitu G. kola
tersaji pada Lampiran 9 dan grafiknya terkandung senyawa aktif biflavonoid yang
diperlihatkan pada Gambar 4. berpotensi sebagai antioksidan. Asam gelugur
baik dalam bentuk kering, ekstrak air, maupun
30.0
26.2 ekstrak etanol tidak terdeteksi adanya
25.0 23.7 flavonoid. Jenis tanaman yang berbeda dapat
21.1
20.0
menyebabkan perbedaan kandungan senyawa
metabolit sekundernya walaupun masih dalam
15.0
10.1
satu marga. Perbedaan ini juga dapat
10.0 7.56 dipengaruhi oleh kondisi lingkungan tempat
5.0
4.78 tanaman tersebut tumbuh. Jumlah flavonoid
yang sangat sedikit dalam ekstrak dapat
0.0
menyebabkan flavonoid tidak terdeteksi pada
AG EG AL EL AK EK
uji kualitatifnya.
Ekstrak contoh
Tabel 1 Hasil uji fitokimia buah asam gelugur
Gambar 4 Rendemen berbagai macam ekstrak
Golongan Asam gelugur Ekstrak
contoh. : AG (ekstrak air buah asam
gelugur); : EG (ekstrak etanol buah senyawa kering Air Etanol
asam gelugur); : AL (ekstrak air Alkaloid + - ++
lengkuas); : EL (ekstrak etanol
Saponin + + -
lengkuas); : AK (ekstrak air kencur);
: EK (ekstrak etanol kencur). Tanin - - -
Flavonoid - - -
Ekstrak etanol buah asam gelugur
menghasilkan rendemen yang paling tinggi Triterpenoid - - -
dari semua ekstrak contoh, yaitu mencapai Steroid - - -
26,2%. Rendemen ekstrak etanol ketiga Kuinon - - -
contoh lebih besar dibandingkan rendemen
ekstrak airnya. Hal ini menunjukkan bahwa Tabel 2 Hasil uji fitokimia rimpang lengkuas
etanol dapat mengekstrak lebih banyak Golongan Lengkuas Ekstrak
komponen dalam contoh daripada air karena senyawa kering Air Etanol
etanol mampu melarutkan senyawa polar dan Alkaloid + + +
nonpolar sehingga hampir semua komponen Saponin ++ +++ ++
contoh ikut terekstrak.
Tanin - - -
Uji Fitokimia Flavonoid +++ ++ +++
Uji fitokimia bertujuan untuk mengetahui Triterpenoid + - -
kandungan senyawa metabolit sekunder dan Steroid - - +
golongan senyawa bioaktif yang terkandung Kuinon + + -
di dalam setiap ekstrak contoh. Dari hasil uji
fitokimia ini dapat diduga golongan senyawa

Uji fitokimia terhadap rimpang lengkuas
(Tabel 2) dan kencur (Tabel 3) menunjukkan
bahwa golongan senyawa metabolit sekunder
yang terkandung dalam lengkuas dan kencur
yang terekstrak dengan etanol lebih banyak
daripada yang terekstrak dengan air secara
kualitatif. Hal ini dikarenakan sifat alkohol
yang mampu melarutkan senyawa polar dan
nonpolar. Dari hasil tersebut dapat diketahui
bahwa lengkuas kering mengandung alkaloid,
saponin, flavonoid, triterpenoid, dan kuinon.
Hasil uji fitokimia tersebut sejalan dengan
yang dikemukakan BPOM (2004) bahwa
lengkuas mengandung flavonoid dan
terpenoid yang berupa minyak atsiri.
Flavonoid lengkuas terdiri atas kaemferol,
galangin, kuersetin dan mirisetin. Uji steroid
menunjukkan hasil yang negatif pada serbuk
lengkuas kering, akan tetapi positif pada
ekstrak etanolnya. Hal ini dapat terjadi karena
jumlah steroid yang merupakan salah satu
jenis triterpenoid dalam lengkuas sangat
sedikit dan jenis steroid tersebut bersifat
cendenrung nonpolar sehingga tidak
terekstrak oleh air melainkan oleh etanol.
Menurut Rahayu (2000), selain flavonoid dan
terpenoid, lengkuas juga mengandung saponin
dan tanin, akan tetapi pada uji tanin diperoleh
hasil yang negatif. Perbedaan metode
ekstraksi, lamanya waktu ekstraksi, dan
perbandingan antara contoh yang diekstraksi
dengan pelarut juga dapat menyebabkan
perbedaan besarnya kadar suatu senyawa
dalam ekstrak. Oleh karena itu, tidak
terdeteksinya tanin dalam ekstrak dapat
disebabkan jumlah tanin di dalam ekstrak
sangat sedikit.
Tabel 3 Hasil uji fitokimia rimpang kencur
Golongan Kencur Ekstrak
senyawa kering Air Etanol
Alkaloid + - + Contoh
Saponin ++++ ++++ - Asam gelugur
Tanin - - - Etanol
Flavonoid ++ - +
Triterpenoid - - - Etanol
Steroid ++ - ++
Kuinon + + + Etanol
Berdasarkan hasil uji fitokimia, serbuk
kencur kering mengandung alkaloid, saponin,
flavonoid, steroid, dan kuinon. Saponin
kencur terekstrak baik oleh air karena sifatnya
yang polar. Busa yang dihasilkan dari hasil uji
saponin pada ekstrak air kencur dan serbuk
keringnya lebih banyak dan stabil
dibandingkan dengan ekstrak contoh lainnya
9
sehingga diduga kencur mengandung saponin
dengan kadar yang lebih tinggi dibandingkan
kelima ekstrak lainnya secara kualitatif.
Ekstrak etanol kencur mengandung
alkaloid, flavonoid, dan kuinon yang rendah
secara kualitatif. Menurut BPOM (2004)
ekstrak etanol kencur banyak mengandung
minyak atsiri dengan komponen etil-p-
metoksisinamat dan etil sinamat. Minyak
atsiri kencur memiliki bagian utama yang
sama dengan triterpenoid, yaitu terpenoid.
Hasil uji fitokimia menunjukkan bahwa
triterpenoid tidak terdeteksi baik pada serbuk
kencur kering maupun kedua ekstraknya.
Senyawa aktif lainnya, yaitu steroid di dalam
ekstrak etanol kencur secara kualitatif lebih
banyak daripada ekstrak contoh lainnya. Hasil
uji tanin pada kencur baik yang berupa serbuk
kering maupun ekstraknya menunjukkan hasil
yang negatif. Hal ini menunjukkan bahwa
rimpang kencur tidak mengandung tanin atau
kadar tanin dalam ekstrak sangat rendah.
Uji Toksisitas
Uji toksisitas dilakukan sebagai uji
pendahuluan untuk mengetahui bioaktivitas
dan toksisitas dari setiap ekstrak sebelum
dilakukan uji aktivitas. Uji ini dilakukan
menggunakan larva udang karena lebih
ekonomis dan cukup akurat sebagai uji
toksisitas awal. Hasil uji toksisitas yang
berupa nilai konsentrasi letal 50% (LC50) akan
digunakan untuk menentukan batas
konsentrasi ekstrak pada uji aktivitasnya
sebagai inhibitor lipase pankreas. Hasil uji
toksisitas dari keenam ekstrak diperlihatkan
pada Lampiran 10, sedangkan nilai LC50
ekstrak contoh tersaji pada Tabel 4.
Tabel 4 Nilai LC50 ekstrak air dan etanol
contoh terhadap larva udang
Ekstrak LC50 (ppm)
Air 117,63
103,64
Lengkuas Air 547,23
1445,5
Kencur Air 1142,7
47,974
Berdasarkan hasil tersebut dapat diketahui
bahwa ekstrak etanol kencur memiliki
bioaktivitas yang paling tinggi karena
memiliki nilai LC50 yang paling rendah, yaitu
47,974 ppm. Menurut Meyer at al. (1982),
suatu ekstrak tanaman dapat dikatakan
memiliki bioaktivitas yang tinggi apabila
memiliki nilai LC50 <1000 ppm. Dengan
demikian, ekstrak etanol lengkuas dan ekstrak

air kencur dapat dikatakan mempunyai potensi
bioaktif yang rendah karena untuk mematikan
50% populasi larva udang diperlukan
konsentrasi ekstrak yang mencapai <1000
ppm. Akan tetapi, ekstrak dengan bioaktivitas
tertinggi belum tentu memiliki nilai daya
inhibisi tertinggi dalam uji inhibisi. Hal ini
disebabkan nilai LC50 yang diperoleh hanya
digunakan sebagai batas maksimum
konsentrasi ekstrak pada uji inhibisi dan
belum diketahui secara pasti mengenai
hubungan antara nilai LC50 terhadap aktivitas
(daya inhibisi) suatu ekstrak.
Buah asam gelugur (Garcinia atroviridis)
yang memiliki kandungan utama asam
hidroksisitrat (HCA) memiliki nilai LC50
untuk ekstrak air dan etanolnya, masing-
masing 117,63 ppm dan 103,64 ppm. Marga
Garcinia lainnya dengan kandungan utama
yang sama, yaitu Garcinia cambogia
diketahui mempunyai dosis letal 50% (LD50)
pada tikus >2000 mg/Kg dengan perlakuan
menggunakan suntik ke dalam pembuluh
darah dan >4000 mg/Kg melalui oral (Anonim
2007). Nilai LC50 tersebut tidak dapat
digunakan sebagai batas konsentrasi untuk
konsumsi, akan tetapi diperlukan penelitian
lebih lanjut secara in vivo untuk menentukan
nilai LD50 ekstrak agar diketahui
keamanannya secara pasti dalam tujuannya
dikonsumsi lebih lanjut sebagai obat.
Uji in Vitro Ekstrak sebagai Inhibitor
Aktivitas Lipase Pankreas
Metode uji inhibisi yang digunakan
mengacu pada metode yang digunakan oleh
Han et al. (2005) dengan beberapa modifikasi.
Han et al. (2005) menggunakan substrat
triolein, bufer N-tris-(hidroksimetil)-metil-2-
aminoetana-asam sulfat pada pH 7,0, suhu 37
C dengan waktu inkubasi 30 menit, dan
larutan pengkompleks warna batokuproin
dalam kloroform 0,05% (b/v). Penelitian ini
menggunakan standar asam oleat (4,25 mol)
dengan serapan sebesar 0,041 dan substrat
yang berupa minyak wijen dengan konsentrasi
16,2 g/L. Minyak wijen digunakan karena
memiliki kandungan utama berupa asam oleat
dan linoleat. Lipase yang digunakan adalah
lipase pankreas manusia dengan konsentrasi
1,4 10-5 g/L. Uji aktivitas ini dilakukan berpotensi sebagai inhibitor aktivitas lipase
pada kondisi optimum kinerja lipase pankreas,
yaitu pada pH 8, suhu 40 C, dan waktu
inkubasi selama 45 menit berdasarkan hasil
optimalisasi aktivitas lipase pankreas oleh
Silitonga (2008). Aktivitas lipase ditentukan
dengan mengukur laju asam oleat yang
dihasilkan dari hidrolisis minyak wijen yang
10
dinyatakan dalam mol asam oleat/L menit
dengan metode spektrofotometri pada panjang
gelombang 435 nm.
Ekstrak yang ditentukan daya inhibisinya
dilarutkan dalam bufer fosfat pH 8 dan setelah
diinkubasi, reaksi hidrolisis lipase pankreas
dihentikan dengan penambahan kloroform.
Campuran pelarut organik kloroform dan
heptana (1:1) berfungsi untuk mengekstrak
asam oleat yang terbentuk sebagai hasil
hidrolisis minyak wijen, sedangkan pereaksi
tembaga berfungsi untuk mengikat asam oleat
bebas. Larutan natrium dietilditiokarbamat
akan membentuk kompleks warna kuning
dengan lapisan kloroform-heptana yang
mengandung asam oleat. Daya inhibisi ekstrak
ditentukan dengan membandingkan selisih
aktivitas lipase pada blanko (tanpa ekstrak)
dengan ekstrak, terhadap aktivitas lipase
blanko (Lampiran 11).
Kontrol positif yang digunakan dalam
penelitian ini adalah Xenical yang
merupakan produk pelangsing komersial yang
banyak digunakan masyarakat. Xenical
digunakan karena mempunyai kandungan
utama orlistat (tetrahidrolipstatin) yang
merupakan salah satu inhibitor lipase pankreas
yang bersifat selektif irreversibel yang
pertama kali ditemukan (Hadvary et al. 1988).
Selain itu, berdasarkan pada penelitian Cariere
(2001) telah diketahui bahwa orlistat
menginhibisi lipase pankreas melalui
mekanisme inhibisi nonkompetitif. Larutan
blanko (tanpa penambahan ekstrak) digunakan
sebagai kontrol negatif. Uji inhibisi ini
menggunakan lima ragam konsentrasi yang
sama untuk semua ekstrak yaitu dari 100-300
ppm dengan interval 50 ppm. Ragam
konsentrasi ini dimaksudkan untuk melihat
hubungan penambahan konsentrasi ekstrak
terhadap daya inhibisi yang dicapai. Bagi
beberapa ekstrak diketahui ragam konsentrasi
tersebut melebihi nilai LC50nya. Hal ini
dilakukan karena hubungan antara nilai LC50
dengan nilai daya inhibisi ekstrak belum
diketahui secara pasti.
Daya inhibisi ekstrak dengan pelarut yang
sama pada kelima ragam konsentrasi (Gambar
5 dan 6) memperlihatkan bahwa ekstrak
etanol dan air ketiga tanaman cenderung
pankreas karena telah dapat menginhibisi
aktivitas lipase pankreas mulai dari
konsentrasi 100-300 ppm. Kemampuan ini
menyerupai kemampuan CT-II, suatu fraksi
dari ekstrak air tanaman Cassia mimosoides
yang mampu menginhibisi 50% aktivitas
lipase pankreas porsin (0,071 mg/mL) pada
 11

50.0

.9
.3
41
41

.9
40.0

35
.2
.3

32

.7
30

.2

.8
Daya inhibisi (%)

29
28

27
.5
30.0

25
.0
22
.9
19

.6
17

.9
20.0

14
.6

.6
10

10
10.0

.6
-4
0.0
100

150

200

250

300

100

150

200

250

300

100

150

200

250

300
Kontrol (+)

-10.0

Konsentrasi (ppm)

Gambar 5 Grafik daya inhibisi kontrol positif, ekstrak air buah asam gelugur, rimpang lengkuas,
dan kencur terhadap aktivitas lipase pankreas. : kontrol positif; : ekstrak air asam
gelugur; : ekstrak air lengkuas; : ekstrak air kencur.

100.0
.3
86

80.0
.2
Daya inhibisi (%)

56

60.0
.5
.7

48
46
.5
41

.6
37
.9

40.0
30

.1
.3

.4

.4

26
24

23

23

.1
15
.6

20.0
10

2
.3

1.

.4
-3

-1

-5

0.0
100
150

200
250

300

100

150

200
250

300

100

150
200

250

300
Kontrol (+)

-20.0

Konsentrasi (ppm)

Gambar 6 Grafik daya inhibisi kontrol positif, ekstrak etanol buah asam gelugur, rimpang
lengkuas, dan kencur terhadap aktivitas lipase pankreas. : kontrol positif;
: ekstrak air asam gelugur; : ekstrak air lengkuas; : ekstrak air kencur.

konsentrasi 100 ppm (Yamamoto et al. 2000). Ekstrak air dari ketiga contoh cenderung
Berdasarkan gambar tersebut diketahui bahwa menginhibisi aktivitas lipase pankreas pada
hubungan antara konsentrasi keenam ekstrak kelima ragam konsentrasi, kecuali ekstrak air
dengan daya inhibisinya terhadap aktivitas kencur pada konsentrasi 150 ppm
lipase pankreas tidak linier. Kenaikan memperlihatkan potensinya sebagai aktivator
konsentrasi ekstrak tidak selalu diiringi lipase pankreas karena memiliki daya inhibisi
dengan kenaikan daya inhibisinya. Hal ini sebesar -4,6%. Potensi yang sama juga
disebabkan ekstrak yang digunakan masih dimiliki oleh ekstrak etanol lengkuas pada
berupa ekstrak kasar yang terdiri atas konsentrasi 250 dan 300 ppm, serta ekstrak
beberapa golongan senyawa yang diduga etanol kencur pada konsentrasi 150 ppm
memiliki respon berbeda yang saling karena masing-masing mempunyai daya
mempengaruhi satu sama lain, baik berupa inhibisi sebesar -3,3%, -11,2%, dan -5,4%.
pengaruh sinergis maupun antagonis dalam Nilai konsentrasi ekstrak pada daya
menghambat aktivitas lipase pankreas pada inhibisi maksimum (Tabel 5) menunjukkan
konsentrasi tertentu. bahwa ekstrak etanol buah asam gelugur
memiliki daya inhibisi yang paling tinggi dari

semua ekstrak contoh, yaitu sebesar 86,3%
pada konsentrasi 150 ppm. Ekstrak air buah
asam gelugur dan lengkuas masing-masing
memiliki daya inhibisi tertinggi sebesar 41,9%
dan 32,2% pada konsentrasi 150 ppm,
sedangkan ekstrak air kencur mencapai daya
inhibisi tertinggi pada konsentrasi 250 ppm
sebesar 35,9%. Ekstrak etanol lengkuas
memiliki daya inhibisi tertinggi sebesar 56,2%
pada konsentrasi 200 ppm, sedangkan ekstrak
etanol kencur memiliki daya inhibisi tertinggi
sebesar 37,6% pada konsentrasi 300 ppm.
Tabel 5 Konsentrasi kontrol ekstrak pada
daya inhibisi maksimum.
Konsentrasi Daya
Ekstrak
optimum (ppm) inhibisi (%)
Kontrol (-) 0 0,0
Air gelugur 150 41,9
Etanol gelugur 150 86,3
Air lengkuas 150 32,2
Etanol lengkuas 200 56,2
Air kencur 250 35,9
Etanol kencur 300 37,6
Kontrol (+) 100 10,6
Nilai-nilai daya inhibisi tersebut lebih
tinggi daripada yang dicapai oleh kontrol
positif (Xenical) yang hanya mampu
menginhibisi lipase pankreas sebesar 10,6%
pada konsentrasi 100 ppm. Nilai daya inhibisi
Xenical tersebut berbeda dengan yang
dikemukakan oleh Silitonga (2008), yaitu
sebesar 17,53% pada konsentrasi yang sama.
Hal ini dapat disebabkan konsentrasi substrat
yang digunakan pada penelitian Silitonga
(2008) berbeda, yaitu 16,6750 g/L.
Kelarutan orlistat yang lebih rendah
dibandingkan dengan ekstrak-ekstrak contoh
dalam bufer fosfat dapat menyebabkan nilai
daya inhibisi kontrol positif cenderung lebih
rendah daripada ekstrak.
Kontrol positif juga diuji pada ragam
konsentrasi yang sama dengan ekstrak contoh,
yaitu 100-300 ppm dengan selang 50 ppm.
Hasil uji inhibisi tersebut diperlihatkan pada
Gambar 7. Berdasarkan Gambar 7 dapat
diketahui bahwa kontrol positif (Xenical)
mampu menginhibisi lipase pankreas pada
konsentrasi 100 ppm, namun mulai dari
konsentrasi 150-300 ppm memperlihatkan
potensi sebagai aktivator lipase pankreas.
Hasil ini berbeda dengan hasil penelitian
Hadvary et al. (1988) yang menggunakan
orlistat murni, substrat triolein murni, bufer
Tris/HCl, NaCl, CaCl2, dan dimetil sulfoksida
yang diinkubasi pada suhu ruang selama 10
12
menit. Dari penelitian tersebut diperoleh
bahwa kemampuan orlistat dalam
menginhibisi aktivitas lipase pankreas
cenderung meningkat dengan meningkatnya
konsentrasi dengan daya inhibisi mencapai
50% pada konsentrasi 0,1 g/mL secara in
vitro dan 0,27 g/mL secara in vivo pada
cairan usus tikus.
15.0 10.6
10.0
5.0
D aya in h ib isi (% )
0.0
-5.0 100 150 200 250 300
-10.0
-9.3
-15.0
-20.0 -18.3
-25.0
-23.4
-30.0 -26.3
Konsentrasi (ppm)
Gambar 7 Grafik daya inhibisi kontrol positif
(Xenical) terhadap aktivitas lipase
pankreas.
Hasil penelitian ini tidak dapat
dibandingkan dengan hasil penelitian oleh
Hadvary et al. (1988) tersebut karena orlistat
yang terkandung di dalam kontrol positif
(Xenical) tidak murni sehingga konsentrasi
orlistat yang digunakan berbeda. Selain itu,
suhu, waktu inkubasi, pH, metode uji inhibisi,
pereaksi, peralatan, serta jenis dan konsentrasi
substrat yang digunakan pun berbeda. Kondisi
inkubasi pada penelitian ini diduga bukan
merupakan kondisi optimum inhibisi orlistat
terhadap lipase pankreas. Meskipun demikian,
metode yang digunakan pada penelitian ini
dapat dikatakan lebih efektif karena dengan
menggunakan substrat dan pereaksi-pereaksi
lainnya yang lebih murah telah dapat
memperlihatkan kemampuan inhibisi ekstrak
ketiga contoh terhadap aktivitas lipase
pankreas.
Berdasarkan data pada Tabel 5 juga
diketahui bahwa ekstrak etanol dari ketiga
contoh memiliki daya inhibisi yang lebih
tinggi daripada ekstrak airnya. Hal ini dapat
disebabkan jumlah senyawa metabolit
sekunder yang diduga berperan dalam proses
inhibisi aktivitas lipase pankreas lebih banyak
terekstrak oleh etanol. Golongan senyawa
yang berperan dalam menginhibisi aktivitas
lipase pankreas dapat diduga dari hasil uji
fitokimia ekstrak. Ekstrak air buah gelugur,
rimpang lengkuas, dan kencur secara kualitatif
diketahui mengandung saponin dengan jumlah

yang lebih banyak daripada golongan senyawa
metabolit sekunder lainnya dalam ekstrak
tersebut sehingga saponin diduga sebagai
senyawa yang paling berperan dalam proses
inhibisi tersebut.
Telah dijelaskan sebelumnya bahwa daya
inhibisi tertinggi ekstrak air ketiga tanaman
dicapai oleh ekstrak air buah asam gelugur
dengan daya inhibisi sebesar 41,9% pada
konsentrasi 150 ppm. Kemampuan ini lebih
baik dibandingkan dengan ekstrak saponin
dari beberapa tanaman yang telah diketahui,
misalnya fraksi saponin dari ekstrak air daun
oolong tea (Han et al. 1999) yang mulai aktif
menginhibisi lipase pankreas pada konsentrasi
500-2000 g/mL dan saponin dari daun
Accantopanax sessiliflorus, yaitu sessilosida
dan chiisanosida yang masing-masing
memiliki nilai IC50 sebesar 0,36 dan 0,75
mg/mL (Yoshizumi et al. 2006). Akan tetapi
kemampuan ekstrak air buah asam gelugur
tersebut hampir sama dengan yang dimiliki
oleh chikusetsusapinin III, 28-deglukosil-
cikusetsusaponin IV, dan 28-deglukosil-
cikusetsusaponin V yang diisolasi dari fraksi
total saponin rimpang Panax japonicus yang
aktif menginhibisi lipase pada konsentrasi
125-500 g/mL (Han et al. 2005b). Ekstrak
saponin dari bangle dan daun jati belanda juga
memiliki kemampuan yang lebih rendah
daripada ekstrak air ketiga contoh karena daya
inhibisi tertingginya masing-masing sebesar
10,22% pada konsentrasi 30 ppm dan 12,61%
pada konsentrasi 60 ppm (Silitonga 2008)
dengan metode ekstraksi dan uji inhibisi yang
sama.
Secara kualitatif saponin dalam ekstrak air
kencur lebih banyak daripada ekstrak air buah
asam gelugur, akan tetapi daya inhibisi yang
dicapai oleh ekstrak air kencur cenderung
lebih rendah daripada ekstrak air buah asam
gelugur. Perbedaan jenis dan kadar saponin
yang terkandung dalam setiap ekstrak
tanaman mempengaruhi besarnya daya
inhibisi ekstrak terhadap aktivitas lipase
pankreas. Kadar saponin dalam ekstrak air
buah asam gelugur dan rimpang kencur tidak
ditentukan secara kuantitatif sehingga tidak
dapat dibandingkan. Selain itu, adanya
senyawa lain yang terkandung dalam ekstrak
dapat mempengaruhi kemampuan saponin
dalam menghambat aktivitas lipase pankreas.
Kemampuan saponin buah asam gelugur,
rimpang lengkuas, dan kencur dalam
menghambat aktivitas lipase pankreas perlu
dipastikan melalui penelitian lebih lanjut.
Ekstrak etanol ketiga contoh juga
memperlihatkan kemampuannya sebagai
13
inhibitor lipase dan daya inhibisi tertinggi
dicapai oleh ekstrak buah asam gelugur yang
mampu menghambat hingga 86,3% aktivitas
lipase pankreas pada konsentrasi 150 ppm
(Gambar 6). Kemampuan tersebut hampir
sama dengan yang dimiliki oleh ekstrak etanol
biji anggur yang mampu menginhibisi lipase
pankreas secara in vitro sebesar 80% pada
konsentrasi 1 mg/mL dengan waktu inkubasi
5 menit dan suhu 37 C (Moreno et al. 2003),
akan tetapi golongan senyawa yang berperan
dalam proses inhibisi tersebut belum
diketahui. Daya inhibisi tertinggi ekstrak
etanol ketiga tanaman melebihi daya inhibisi
tertinggi ekstrak etanol beberapa tanaman
lainnya terhadap aktivitas lipase, seperti
ekstrak etanol daun jati belanda, yaitu 25,31%
pada konsentrasi 60 ppm dan bangle sebesar
29,17% pada konsentrasi 100 ppm (Silitonga
2008), serta daun kemuning sebesar 22,80%
pada konsentrasi 30 ppm (Martatilofa 2008).
Berdasarkan hasil uji fitokomia, ekstrak
etanol buah asam gelugur hanya mengadung
alkaloid sehingga diduga alkaloid asam
gelugur yang berperan sebagai inhibitor lipase
pankreas, akan tetapi belum ada literatur yang
mengatakan bahwa senyawa alkaloid mampu
menginhibisi lipase pankreas. Dengan
demikian, tidak menutup kemungkinan bahwa
senyawa selain hasil metabolit sekunder yang
juga berperan dalam proses inhibisi tersebut.
Kandungan asam hidroksisitrat (HCA) dalam
asam gelugur yang mencapai 45,17%
(Muzakki 2006) dan sifat HCA yang mudah
larut dalam air dan alkohol mendukung
dugaan tersebut. Adanya gugus trikarboksilat
pada asam ini diduga mampu menghambat
hidrolisis asam lemak yang juga memiliki
gugus karboksilat oleh lipase pankreas secara
kompetitif. Akan tetapi, mekanisme tersebut
belum dapat dipastikan hanya berdasarkan
hasil uji inhibisi tersebut. Penelitian lebih
lanjut perlu dilakukan untuk mengetahui ciri
senyawa aktif dan mekanisme inhibisi ekstrak
etanol buah asam gelugur dalam menghambat
aktivitas lipase pankreas.
Sruktur asam hidroksisitrat.
Berdasarkan hasil uji toksisitas diketahui
bahwa ekstrak etanol buah asam gelugur
memiliki bioaktivitas yang lebih rendah
dibandingkan dengan ekstrak air kencur
(Tabel 4), akan tetapi daya inhibisi yang

dicapai oleh ekstrak etanol asam gelugur lebih
tinggi daripada yang dapat dicapai oleh
ekstrak etanol kencur, yaitu sebesar 37,6%.
Hal ini membuktikan bahwa ekstrak yang
memiliki bioaktivitas tertinggi belum tentu
memiliki daya inhibisi yang tertinggi pula.
Ekstrak etanol lengkuas dan kencur secara
kualitatif mengandung flavonoid dan steroid
sehingga kedua senyawa tersebut diduga
berperan dalam menginhibisi aktivitas lipase
pankreas pada konsentrasi tertentu dari
ekstrak. Potensi flavonoid dan steroid dalam
menginhibisi lipase dari Rhizopus arrhizus
sebelumya telah diteliti oleh Febriany (2004)
dari ekstrak rimpang bangle pada konsentrasi
200 ppm akan tetapi mekanisme inhibisi
kedua golongan senyawa tersebut belum
diketahui. Inhibitor lipase pankreas lain dari
golongan flavonoid adalah 3-metileter-
galangin yang diisolasi dari ekstrak etanol
rimpang Alpinia officinarum yang memiliki
nilai IC50 sebesar 1,3 mg/mL dengan substrat
berupa triolein (Shin et al. 2003), akan tetapi
mekanisme hambatannya belum diketahui.
Alpinia officinarum masih satu ordo dengan
kencur dan satu marga dengan lengkuas.
Tanaman dengan marga dapat mengandung
senyawa yang sama dan mekanisme inhibisi
suatu senyawa dapat diduga dari struktur
senyawa tersebut.
Struktur 3-metiletergalangin.
Senyawa 3-metiletergalangin memiliki dua
buah gugus hidroksil dan gugus metil eter
pada karbon ke-3nya. Struktur ini berbeda
dengan struktur trigliserida sebagai substrat
lipase pankreas yang terdiri atas gugus
karboksilat dan gliserol yang terikat dengan
ikatan ester. Oleh karena itu, mekanisme
inhibisi yang terjadi diduga bukan secara
kompetitif. Hal tersebut dapat dipastikan
dengan penelitian lebih lanjut. Salah satu
senyawa yang telah diketahui mekanisme
inhibisinya terhadap aktivitas lipase pankreas
adalah orlistat. Orlistat menginhibisi lipase
pankreas secara nonkompetitif dengan
membentuk suatu ikatan kovalen pada gugus
serin, yaitu sisi aktif dari lipase pankreas dan
lambung sehingga enzim tersebut menjadi
nonaktif (Cariere 2001). Mekanisme inhibisi
lipase pankreas oleh ekstrak buah asam
gelugur, rimpang lengkuas, dan kencur belum
14
tentu sama dengan orlistat. Mekanisme
inhibisi lain yang dimungkinkan adalah secara
kompetitif (bersaing dengan substrat mengikat
sisi aktif enzim) dan unkompetitif (merusak
struktur enzim) (Tze & Wong 1975).
Mekanisme hambatan ekstrak kasar dari
ketiga contoh dan senyawa yang paling
berperan dalam proses tersebut dapat
diketahui melalui penelitian lebih lanjut.
Berdasarkan hasil uji inhibisi tersebut juga
diketahui bahwa beberapa ekstrak mencapai
daya inhibisi maksimum pada konsentrasi di
atas nilai LC50nya, antara lain ekstrak air dan
etanol buah asam gelugur, serta ekstrak etanol
kencur. Hasil ini masih dapat diterima karena
uji toksisitas menggunakan larva udang yang
telah dilakukan hanya merupakan uji
toksisitas awal. Penelitian lebih lanjut secara
in vivo perlu dilakukan untuk mengetahui
tingkat toksisitas akut keenam ekstrak tersebut
untuk mengetahui keamanannya apabila akan
dikonsumsi lebih lanjut sebagai obat.
Uji Statistik
Uji statistik dilakukan untuk mengetahui
pengaruh daya inhibisi antar ekstrak contoh.
Rancangan yang digunakan adalah rancangan
acak lengkap Perlakuan yang dibandingkan
adalah konsntrasi ekstrak air dan etanol ketiga
tanaman pada daya inhibisi maksimum, serta
perlakuan dengan kontrol negatif dan kontrol
positif. Berdasarkan hasil uji statistik
(Lampiran 12) diketahui bahwa ekstrak air
ketiga contoh memberikan pengaruh daya
inhibisi terhadap aktivitas lipase pankreas
yang tidak berbeda nyata, karena nilai Fhitung
yang diperoleh, yaitu 1,478 lebih kecil dari
Ftabel (5,143), sementara itu ekstrak etanolnya
memberikan pengaruh yang berbeda nyata
terhadap aktivitas lipase pankreas karena
karena Fhitung (17,910) lebih besar dari Ftabel
(5,143).
Uji beda perlakuan terhadap ekstrak etanol
asam gelugur, lengkuas, dan kencur, serta
kontrol negatif dan positif menyatakan bahwa
paling sedikit ada satu pasang perlakuan yang
memberikan pengaruh daya inhibisi yang
berbeda nyata. Melalui uji Duncan diperoleh 9
perlakuan yang berbeda nyata pengaruhnya
terhadap daya inhibisi lipase pankreas.
Perlakuan-perlakuan tersebut adalah kontrol
negatif dengan ekstrak etanol kencur, kontrol
negatif dengan ekstrak etanol lengkuas,
kontrol negatif dengan ekstrak etanol asam
gelugur, kontrol positif dengan ekstrak etanol
kencur, kontrol positif dengan ekstrak etanol
lengkuas, kontrol positif dengan ekstrak
etanol asam gelugur, ekstrak etanol kencur

dengan ekstrak etanol lengkuas, ekstrak etanol
asam gelugur dengan ekstrak etanol lengkuas,
dan ekstrak etanol asam gelugur dengan
ekstrak etanol kencur. Lampiran 13
memperlihatkan kurva estimasi hubungan
antara konsentrasi ekstrak dan kontrol positif
dengan daya inhibisinya menggunakan kurva
linier, logaritmik, kuadratik, power, dan
eksponensial untuk mengetahui model
inhibisinya.
Kadar Flavonoid Total Ekstrak
Metode ini berdasarkan pada Codex
(1986) diacu dalam Nobre et al. (2005)
dengan beberapa modifikasi, yaitu sistem
hidrolisis yang berupa 1,0 mL urotropin 0,5%
dan 2,0 mL asam hidroklorat R diganti dengan
larutan heksametilentetramina 0,5% (b/v)
dalam metanol dan 2,0 mL HCl 25%, serta
panjang gelombang yang digunakan dari 425
nm diganti dengan 370,8 nm. Penentuan kadar
flavonoid total ekstrak dengan daya inhibisi
tertinggi didasarkan pada hasil uji fitokimia.
Kadar flavonoid ini ditentukan untuk
mengetahui jumlah flavonoid yang terdapat
dalam ekstrak yang diduga berpotensi atau
bahkan merupakan senyawa yang paling
berperan sebagai inhibitor lipase pankreas.
Sebagaimana telah dijelaskan sebelumnya,
ekstrak etanol ketiga contoh mampu
memberikan hambatan yang lebih tinggi
daripada ekstrak airnya. Berdasarkan uji
fitokimia ekstrak etanol asam gelugur tidak
mengandung flavonoid sehingga penentuan
kadar flavonoid total hanya dilakukan pada
ekstrak etanol lengkuas dan kencur.
Metode untuk menentukan kadar flavonoid
total antara lain metode spektrofotometri UV
(Codex 1986 diacu dalam Nobre et al. 2005),
kromatografi cair kinerja tinggi (Merkeen &
Beecher 2000), elektroforesis kapiler
(Marchant et al. 2003), serta spektrofotometer
IR yang digabungkan dengan kemometrik.
Metode ini dipilih karena lebih cepat dan
murah. Metode ini juga disebut dengan
metode AlCl3 karena digunakan AlCl3 sebagai
pengkompleks warna. Flavonoid total yang
terukur adalah sumbangan dari golongan
flavon dan flavonol yang terdapat dalam
ekstrak karena hanya senyawa-senyawa
tersebut yang mampu membentuk kompleks
stabil dengan AlCl3.
Penentuan kadar flavonoid total ini
menggunakan standar kuersetin murni.
Kuersetin digunakan sebagai standar karena
merupakan jenis flavonoid yang umum
ditemukan pada tumbuhan serta terkandung
dalam lengkuas dan kencur. Larutan standar
15
kuersetin berwarna kuning sehingga
pengukuran absorbansi deret standar
dilakukan pada panjang gelombang 370,8 nm
yang kemudian dibuat plot terhadap
konsentrasi standar untuk memperoleh kurva
standar (Lampiran 14). Konsentrasi flavonoid
ekstrak ditentukan dari persamaan garis yang
diperoleh dari kurva standar. Absorbans
flavonoid ekstrak etanol lengkuas terukur
sebesar 0,055 sehingga diperoleh kadar
flavonoid totalnya sebesar 0,08% yang diduga
terdiri atas kaemferol, galangin, kuersetin,
dan mirisetin (Rahayu 2000, BPOM 2004).
Flavonoid pada ekstrak etanol kencur
memiliki absorbans 0,038 sehingga diperoleh
kadar totalnya sebesar 0,04 %, lebih kecil
daripada dalam ekstrak etanol lengkuas. Day
dan Underwood (2001) menggolongkan
perolehan analat hasil analisis kuantitatif
dalam 3 kelompok, yaitu konstituen utama,
minor, dan jejak atau runut. Hasil penentuan
flavonoid total ekstrak etanol lengkuas dan
kencur ini termasuk ke dalam konstituen
minor karena memiliki kadar di antara 0,01-
1%. Nilai kadar flavonoid total tersebut
hampir sama dengan yang diperoleh
Wahyuningrum (2006), menggunakan teknik
spektroskopi IR dan kemometrik pada
tanaman tempuyung dari tiga daerah yang
berbeda, yaitu antara 0,62-0,82%. Nilai kadar
flavonoid total yang diperoleh tersebut tidak
menunjukkan kadar flavonoid total dari
contoh sebenarnya, akan tetapi hanya kadar
flavonoid total yang terekstrak oleh pelarut,
yaitu etanol 70% secara maserasi.
Kadar flavonoid total yang diperoleh
tersebut dapat dipengaruhi oleh lingkungan
tempat tumbuh tanaman seperti temperatur,
sinar UV dan tampak, nutrisi, ketersediaan air,
dan kadar CO2 di atmosfer karena senyawa
metabolit sekunder yang dihasilkan tanaman
merupakan bentuk adaptasi tanaman terhadap
lingkungan untuk bertahan hidup. Jenis
pelarut, metode, lamanya waktu ekstraksi,
serta nisbah antara jumlah pelarut dan contoh
yang digunakan juga sangat mempengaruhi
kadar senyawa metabolit sekunder dalam
ekstrak. Apabila flavonoid di dalam tanaman
tersebut banyak terdapat dalam bentuk glikon
(terikat pada gugus gula) maka akan
cenderung lebih terekstrak dengan pelarut
yang lebih polar seperti air, sedangkan apabila
dalam bentuk aglikon (tidak terikat pada
gugus gula) maka akan lebih terekstrak
dengan pelarut dengan kepolaran lebih rendah
daripada air, seperti alkohol.
Umar (2008) melakukan optimalisasi
penentuan kadar flavonoid total pada daun jati

belanda yang diekstrak menggunakan pelarut
etanol dengan metode refluks. Hasil
optimalisasi tersebut adalah kadar flavonoid
total daun jati belanda secara optimal
diperoleh dengan nisbah antara simplisia
dengan pelarut sebesar 1:10 yang direfluks
selama 3 jam menggunakan etanol 70%. Pada
penelitian ini ekstrak etanol lengkuas dan
kencur diperoleh dengan maserasi selama 24
jam menggunakan etanol 70% dengan nisbah
1:8. Optimalisasi kondisi ekstraksi contoh
pada penelitian ini tidak dilakukan
sebelumnya sehingga kadar flavonoid ekstrak
yang diperoleh diduga belum optimal.
SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Ekstrak air dan etanol dari buah asam
gelugur, rimpang lengkuas, dan kencur
berpotensi sebagai antiobesitas melalui
inhibisi aktivitas lipase pankreas dengan daya
inhibisi tertinggi dicapai oleh ekstrak etanol
buah asam gelugur sebesar 86,3% pada
konsentrasi 150 ppm. Uji statistik
menunjukkan bahwa interaksi daya inhibisi
aktivitas lipase pankreas antara kontrol
negatif, kontrol positif, dan ekstrak etanol dari
ketiga contoh berbeda nyata satu dengan
lainnya, kecuali interaksi antara kontrol positif
dengan kontrol negatif. Flavonoid total dalam
ekstrak etanol lengkuas dan kencur yang
diduga berperan dalam proses inhibisi tersebut
termasuk dalam konstituen minor.
Saran
Pencirian senyawa aktif dalam ekstrak
perlu dilakukan untuk mengetahui senyawa
yang berpotensi sebagai inhibitor aktivitas
lipase pankreas. Mekanisme inhibisi ekstrak
terhadap aktivitas lipase pankreas juga perlu
diteliti lebih lanjut. Selain itu, uji in vivo
terhadap hewan coba juga diperlukan untuk
mengetahui kemampuan senyawa aktif dalam
ekstrak sebagai antiobesitas.
DAFTAR PUSTAKA
Alviar B et al., penemu; Access Business
Group International LLC. 2 Juli 2002.
Diet composition and method of weight
management. United States Patents No.
6413545.
[AOAC] Association of Official Analytical
Chemist. 2000. Official Methods of
Analysis of AOAC International. Volume
16
ke-1. Ed ke-17. Agricultural Chemicals,
Contaminants, Drugs. Maryland: AOAC
International.
[Anonim]. 2007. Extract HCA or
hydroxycitric acid calcium salt?
[terhubung berkala]. http://www.mdidea.
com/products/herbextract/hca/data.html.
[27 Mei 2008].
Birari RB, Bhutani KK. 2007. Pancreatic
lipase inhibitors from natural sources:
unexplored potential. Drug Discovery
Today 12:379-389.
[BPOM] Badan Pengawas Obat dan
Makanan. 2004. Monografi Ekstrak
Tumbuhan Obat Indonesia. Volume 1.
Jakarta: Badan POM RI.
Burhanuddin et al. 2004. Pengaruh jus buah
mengkudu masak (Morinda citrifolia L.)
terhadap penurunan bobot badan tikus
putih jantan. Di dalam: Buku Panduan
Seminar Nasional XXV Tumbuhan Obat
Indonesia; Tawangmangu, 27-28 Apr
2004. hlm 21. abstr no M-33.
Cariere F et al. 2001. Inhibition of gastro-
intestinal lipolysis by OrlistatTM during
digestion of test meals in healthy
volunteers. Am J Physiol Gastrointest
Liver Physiol 281(1): G16-G28.
Chung CS. 2006. Sweet and sour, the lovely
gelugor. Gardenwise 26:18-19.
Crespo RF, Martin MD, Finger O, penemu;
Eli Lilly and Company. 22 Jan 2008.
Selective peroxisome poliferator activated
reseptor modulators. United States
Patents No. 7231056.
Darusman LK, Rohaeti E, Sulustiyani. 2001.
Kajian senyawa golongan flavonoid asal
tanaman bangle sebagai senyawa peluruh
lemak melalui aktivitas lipase. Bogor:
Pusat Studi Biofarmaka, Lembaga
Penelitian IPB.
Day RA, Underwood AL. 2001. Analisis
Kimia Kuantitatif. Iis Sopyan,
penerjemah. Ed ke-6. Jakarta: Erlangga.
Terjemahan dari Quantitative Analysis.
Downey M, JS Stern, Kazaks A. 2005.
Future and implications of reimbursement
for obesity treatment. [terhubung
berkala]. http://www.clevelandclinic.org/
health/healthinfo/docs/2400/2451.asp?ind
ex=9472. [21 Feb 2008].

Febriany S. 2004. Potensi ekstrak tunggal
bangle dan gabungan dalam
meningkatkan aktivitas enzim lipase
secara in vitro [skripsi]. Bogor: Jurusan
Kimia. FMIPA, IPB.
Hadvary P, Lengsfeld H, Wolfer H. 1988.
Inhibition of pancreatic lipase in vitro by
the covalent inhibitor tetrahydroplastin. J
Biochem 256:357-361.
Han LK, Takaku T, Li J, Kimura Y, Okuda
H. 1999. Anti-obesity action of oolong
tea. Int. J. of Obesity 23:98-105.
Han LK et al. 2001. Anti-obesity effects in
rodents of dietary teasaponin, a lipase
inhibitor. Int J of Obesity 25:1459-1464.
Han LK et al. 2005a. Anti-obesity effects of
chikusetsusaponins isolated from Panax
japonicus rhizomes. BioMed Central
5(9):1-10.
Han LK et al. 2005b. Antiobesity action of
Zingiber officinale Roscoe. [abstrak].
Yakugaku Zasshi 125(2):213-217.
Han LK et al. 2006. Reduction of fat storage
in mice fed a high-fat diet long term by
treatment with saponins prepared from
Kochia scoparia fruit. [artikel]. Phyt Res.
Han LK et al. 2007. Inhibitory effect of
compounds isolated from fruit of Juglans
mandshurica on pancreatic lipase.
[abstrak]. J of Natural Medicine.
61(2):184-186.
Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia:
Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan. Edisi ke-2. Padmawinata K,
Soediro I, penerjemah. Bandung: ITB.
Terjemahan dari: Phytochemical
Methode.
Heyne K. 1987a. Tumbuhan Berguna
Indonesia. Jilid ke-2. Jakarta: Yayasan
Sarana Warna Jaya.
Heyne K. 1987b. Tumbuhan Berguna
Indonesia. Jilid ke-3. Jakarta: Yayasan
Sarana Warna Jaya.
Heysmfield SB et al. 1998. Garcinia
cambogia (hydrocitric acid) as a potensial
antyobesity agent. JAMA 280(8):1596-
1600.
Iswantini D, Darusman LK, Gunawan E,
Nurulita Y. 2003a. Identifikasi senyawa
bioaktif daun jati belanda (Guazuma
ulmifolia Lamk.) sebagai pelangsing
17
dengan menggunakan metode enzimatis.
Gakuryoku 9(2):138-142.
Iswantini D, Darusman K, Febriany S.
2003b. Pengaruh ekstrak tunggal dan
gabungan dari bangle terhadap aktivitas
enzim lipase dalam kajian sebagai
pelangsing. Prosiding Seminar Nasional
Tumbuhan Obat Indonesia XXIV; Bogor,
19-20 September 2003. Pusat Studi
Biofarmaka LP-Institut Pertanian Bogor;
2003. hlm 276-282.
Jang DS et al. 2008. A new pancreatic
inhibitoe isolated from the roots of
Actinidia arguta. Arc Parm Res
31(5):666-670.
Jansen PCM. 1992. Plant Resourches Sout-
East Asia No 2: Edible fruits and nuts.
EWM Verheij dan PE Coronel, editor.
Bogor: Prosea. Hal 175-177.
Kurk M, Vital O, penemu; Fay, Sharpe,
Fagan, Minnich and McKee, LLP. 6
Agust 2002. Herbal weight loss
suplement. United States Patents No.
6428806.
Mackeen MM. 1988. Bioassay-guided
isolation and identification of bioactive
compounds from Garcinia atroviridis
(Asam gelugor). [Tesis]. Abstrak.
[terhubung berkala]. http:www.znatur-
forsch.com. [22 Nov 2008].
Marchant E, Kreeb L, Kopp B. 2003.
Quantification of the flavonoid
glycocides in Passiflora incarnata by
capillary electrophoresis. Planta Med
69:452-456.
Martatilofa E. 2008. Daya inhibisi ekstrak
bangle, jati belanda, kemuning, dan
formula biolangsing terhadap lipase
pankreas [skripsi]. Bogor: Jurusan Kimia.
FMIPA, IPB.
Merkeen HM, Beecher GR. 2000. Liquid
chromatographic method for the
separation and quantification of
prominent flavonoid aglycones. J
chromatogr A 897:177-184.
Meyer B et al. 1982. Brine shrimp: A
convent general bioassay for active plant
constituents. Planta Medica 45:31-34.
Moreno DA et al. 2003. Inhibitory effects of
grape seed extract on lipases. Nutrition
19(10):876-879.

Muzakki MH. 2006. Pencirian produk
pemisahan asam hidroksisitrat dri buah
gelugur (Garcinia atroviridis) [skripsi].
Bogor: Jurusan Kimia FMIPA, IPB.
Nobre CP, Raffin FN, Moura TF. 2005.
Standardization of extracts from
Momordica charantia L. (Cucurbitaceae)
by total flavonoids content determination.
Acta Farm Bonaerense 24(4): 562-566.
Oluyemi KA et al. 2007. Effect of crude
ethanolic extract of Garcinia cambogia
on the reproductive system of male wistar
rats (Rattus novergicus). African Journal
of Biotechnology 6(10):1236-1238.
Padikkala J, Achuthan CR. 1997.
Hipolipidemic effect of Alpinia galanga
(Rasna) and Kaemferia galanga
(Kachoori). Indian J of Chemical
Biochemistry 12(1):55-58.
Pushpangadan P et al., penemu; Council of
Scientific and Industrial Research. 24 Jan
2006. Synergistic composition for treating
hiperlipidemia. United States Patents No.
6989165.
Rahardjo SS, Ngatijan, Pramono S. 2005
Influence of etanol extract of jati belanda
leaves (Guazuma ulmifolia Lamk.) on
lipase enzyme activity of Rattus
norvegicus serum. Inovasi. 4(17):48-53.
Rahayu WP, Fardiaz S, Darusman LK. 2000.
Kajian aktivitas dan produksi komponen
antimikroba dari rimpang lengkuas
(Alpinia galanga). Di dalam: Laporan
Akhir Penelitian HIBAH Bersaing VII
Perguruan Tinggi Tahun Anggaran 1998-
2000.
Rittirut W, Siripatana C. 2007. Diffusion
properties of Garcinia fruit Acids
(Garcinia atroviridis). Walailak J Sci &
Tech 4(2):187-202.
Santoso A. 2001. Down regulation of
mammary lipoprotein lipase activity by
ribonucleid acid and protein synthesis
inhibitors. Anales Bogorienses 8:31-36.
Satouchi K et al. 1998. Lipoxygenase-1 from
soybeen seed inhibiting the activity of
pancreatic lipase. JSBA 62(8):1498-1503.
Shin JE, Han MJ, Kim DH. 2003. 3-
methylethergalangin isolated from
Alpinia officinarum inhibits pancreatic
lipase. J Biol Pharm 26(6):854-857.
18
Silitonga RF. 2008. Daya inhibisi ekstrak
daun jati belanda dan bangle terhadap
aktivitas lipase pankreas sebagai
antiobesitas [skripsi]. Bogor: Jurusan
Kimia. FMIPA, IPB.
Syamsudin, Rita MD, Simotiyan H. 2004.
Efek Ekstrak Daun Asam Gelugur
(Garcinia atroviridis Griff Tanders)
terhadap Plasmodium berghei pada
Mencit. [abstrak]. Majalah Farmasi
Airlangga 4(3).
Tze J, Wong F. 1975. Kinetics of Enzyme
Mechanisms. New York: Academic Press
Inc.
Umar F. 2008. Optimasi kadar flavonoid total
daun jati belanda [skripsi]. Bogor:
Jurusan Kimia. FMIPA, IPB.
Wirakusumah LH. 2005. Fraksinasi dan
karakterisasi senyawa aktif flavonoid dari
ekstrak kasar metanol rimpang bangle
(Zingiber cassumar Roxb.) [skripsi].
Bogor: Jurusan Kimia. FMIPA, IPB.
Wahyuningrum A. 2006. Penentuan
flavonoid total tempuyung (Sonchus
arvensis L.) secara cepat dengan teknik
spektroskopi IR dan kemometrik
[skripsi]. Bogor: Jurusan Kimia. FMIPA,
IPB.
Xu BJ, Han LK, Zheng YN, Lee JH, Sung
CK. 2005. In vitro inhibitory effect of
triterpenoidal saponins from Platycodi
radix on pancreatic lipase. Arch Pharm
Res 28(2):180-185.
Yamamoto M et al. 2000. Anti-obesity
effects of lipase inhibitor CT-II, an
extract from edible herbs, Nomame
Herba, on rats fed a high-fat diet. Int J of
Obesity 24:758-764.
Yoshizumi K et al.. 2006. Lupane type
saponins from leaves of Acanthopanax
sessiliflorus and their inhibitory activity
on pancreatic lipase. J Agric Food Chem
54:335-341.
Yatcilla M, Krumhar K, Thompson J,
penemu; Herbalife International, Inc. 12
Feb 2008. herbal supplement to support
weight loss. US Patent No. 7329419.
LAMPIRAN
 20

Lampiran 1 Bagan alir penelitian

Buah asam gelugur, rimpang lengkuas, dan kencur

Persiapan contoh

pencucian
perajangan
pengeringan
penggilingan

Serbuk contoh

Penetapan kadar air Ekstraksi air dan etanol

Ekstrak air dan etanol

Uji fitokimia Uji toksisitas dengan larva udang

Uji inhibisi ekstrak terhadap

aktivitas lipase pankreas

Uji flavonoid total ekstrak

dengan daya inhibisi tertinggi
(berdasarkan hasil uji fitokimia)
 21

Lampiran 2 Bagan alir ekstraksi air

Serbuk contoh

Maserasi dengan air (1:8)

24 jam

disaring

Filtrat

dipekatkan

Ekstrak air

Lampiran 3 Bagan alir ekstraksi etanol

Serbuk contoh

Maserasi dengan atanol 70%

(1:8) 24 jam

disaring

Filtrat

dipekatkan

Ekstrak etanol
 22

Lampiran 4 Bagan alir penentuan nilai LC50 ekstrak dengan menggunakan larva udang

air laut + telur udang (ditetaskan 48 jam) 0,1000 g ekstrak

Dilarutkan
dengan air laut

Ditera dengan
air laut hingga
25 mL

Ekstrak 4000 ppm

1 10 ekor larva udang + 1500 l air laut + 500 l larutan ekstrak

(1000 ppm, triplo)

2 10 ekor larva udang + 1950 l air laut + 50 l larutan ekstrak

(100 ppm, triplo)

3 10 ekor larva udang + 1995 l air laut + 5 l larutan ekstrak

(10 ppm, triplo)

4 10 ekor larva udang + 2000 l air laut

(kontrol, triplo)

1 2 3 4

Dibiarkan 24 jam

Jumlah larva udang yang mati dihitung

Analisis menggunakan Probit Analysis Methode

Nilai LC50 ekstrak

 23

Lampiran 5 Bagan alir uji in vitro inhibisi ekstrak terhadap aktivitas lipase pankreas

ekstrak contoh
15 L minyak wijen
10 L albumin 10% (b/v)
L lipase pankreas murni inkubasi 45 menit, T=40C
Ditera dengan buffer fosfat pH 8
hingga 1 mL + kloroform 3 mL
dikocok
disentrifusa selama 5 menit

1,0 mL lapisan kloroform

+ 4 mL kloroform-heptana (1:1)
dikocok
+ 2,5 mL pereaksi tembaga
dikocok selama 3 menit
disentrifusa selama 10 menit

3,0 mL lapisan kloroform

+ 0,25 mL larutan
Na-dietilditiokarbamat

Larutan berwarna kuning

serapan diukur pada = 435 nm

Aktivitas hidrolitik lipase

dan daya inhibisi ekstrak

Lampiran 6 Prosedur pembuatan pereaksi tembaga (250 mL)

Sebanyak 71,25 g NaCl dilarutkan dalam 150 mL akuades, kemudian ditempatkan pada labu takar
250 mL. Setelah itu, ke dalam larutan NaCl ditambahkan 6,04 g Cu(NO3)2.3H2O dan 21,25 g
trietanolamin, lalu diaduk hingga larut. Selanjutnya ditambahkan 0,7125 mL asam asetat glasial
dan ditera dengan akuades.
 24

Lampiran 7 Bagan alir penentuan kadar flavonoid total

ekstrak dengan daya inhibisi tertinggi

ditimbang setara dengan 200 mg serbuk

sistem hidrolisis (refluks) 30 menit

1,0 mL larutan HMT 0,5% b/v
20 mL aseton
2 mL HCl 25%

filtrat residu + 20 mL aseton

labu takar 100 mL dihidrolisis

filtrat
tera dengan aseton

ekstrak

20 mL ekstrak + 20 mL akuades
+ 15 mL etil asetat

ekstraksi dalam corong pisah

ditampung dalam labu takar 50 mL

ditera dengan etil asetat

fraksi etil asetat

10 mL fraksi etil asetat pada labu takar 25 mL

+ 1 mL AlCl3 2% (b/v)
ditera dengan asam asetat glasial 5% (v/v)

larutan flavonoid contoh

Standar kuersetin
0; 0,5; 2,5; 5,0; 7,5; 10 ppm

Fotometri pada = 370,8 nm

 25

Lampiran 8 Penentuan kadar air

Kadar air asam gelugur

Bobot cawan Bobot cawan + Bobot contoh Bobot contoh Kadar air
kosong (g) contoh (g) basah (g) kering (g) (%)
19,8685 22,9149 3,0464 22,3549 18,4
19,0184 22,0287 3,0103 21,4687 18,6
23,9589 26,9966 3,0377 26,4141 19,2
Rerata 18,7

Kadar air lengkuas

Bobot cawan Bobot cawan + Bobot contoh Bobot contoh Kadar air
kosong (g) contoh (g) basah (g) kering (g) (%)
27,2390 29,2443 2,0053 29,0480 9,79
34,5572 36,5686 2,0114 36,3759 9,58
24,6942 26,7002 2,0060 26,5115 9,41
Rerata 9,59

Kadar air kencur

Bobot cawan Bobot cawan + Bobot contoh Bobot contoh Kadar air
kosong (g) contoh (g) basah (g) kering (g) (%)
30,2507 32,2531 2,0024 32,0797 8,66
34,5716 36,5724 2,0008 36,4007 8,58
28,6343 30,6352 2,0009 30,4642 8,55
Rerata 8,60

Perhitungan:
Bobot sampel basah bobot sampel kering
Kadar air (%) = 100%
Bobot sampel basah
 26

Lampiran 9 Rendemen berbagai ekstrak contoh dan perhitungan

Contoh Ekstrak Bobot awal (g) Bobot ekstrak (g) Rendemen (%)
Air 100,0570 19,2366 23,7
Asam gelugur
Etanol 100,0174 21,3037 26,2
Air 100,0086 9,1294 10,1
Lengkuas
Etanol 100,0134 19,0875 21,1
Air 100,0129 4,3682 4,78
Kencur
Etanol 100,0251 6,9090 7,56

Perhitungan:
bobot ekstrak (g)
Rendemen ekstrak = 100% faktor koreksi
bobot contoh (g)
bobot ekstrak (g) 100
= 100%
bobot contoh (g) 100 kadar air

Contoh perhitungan (ekstrak air asam gelugur ):

bobot ekstrak (g) 100
Rendemen ekstrak = 100%
bobot contoh (g) 100 kadar air
19,2366 g 100
= 100%
100, 0570 g 100 18,7
= 23,7 %
 27

Lampiran 10 Aktivitas ekstrak terhadap larva A. Salina setelah 24 jam

Konsentrasi Jumlah larva udang yang mati

Contoh Ekstrak
(ppm) Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3
Blanko 0 0 0 0

Asam Air 10 0 0 0
gelugur 100 3 3 2
1000 10 10 10

Etanol 10 2 2 4
100 4 5 5
1000 10 10 10

Lengkuas Air 10 0 0 0
100 3 3 3
1000 9 9 8

Etanol 10 1 1 2
100 1 1 3
1000 3 4 3

Kencur Air 10 0 0 0
100 2 1 1
1000 5 4 3

Etanol 10 1 1 2
100 9 10 10
1000 10 10 10
 28

Lampiran 11 Data dan perhitungan daya inhibisi ekstrak terhadap aktivitas lipase pankreas
Konsentrasi Absorbans Aktivitas enzim Daya inhibisi
Contoh Ekstrak Rerata
(ppm) 1 2 3 (mol/L.menit) (%)
4
Kontrol (-) 0 1,548 1,587 1,573 1,569 4,82 10 0,0

Asam Air 100 0,819 1,055 0,889 0,921 2,83 104 41,3
gelugur 150 0,993 0,979 0,765 0,912 2,80 104 41,9
200 1,255 1,255 1,260 1,257 3,86 104 19,9
250 1,175 1,389 1,313 1,292 3,97 104 17,6
300 1,190 1,167 0,923 1,093 3,36 104 30,3
Etanol 100 1,051 0,849 0,854 0,918 2,82 104 41,5
150 0,123 0,265 0,257 0,215 6,60 103 86,3
200 1,130 1,063 1,370 1,188 3,35 104 24,3
250 0,758 0,673 1,075 0,835 2,57 104 46,7
300 0,812 1,161 1,278 1,084 3,33 104 30,9

Lengkuas Air 100 1,210 1,221 0,951 1,127 3,46 104 28,2
150 1,102 0,920 1,169 1,064 3,27 104 32,2
200 1,367 1,437 1,404 1,403 4,31 104 10,6
250 1,156 1,154 1,001 1,104 3,39 104 29,7
300 1,345 1,181 1,143 1,223 3,76 104 22,0
Etanol 100 0,633 0,845 0,945 0,808 2,48 104 48,5
150 1,425 1,090 1,087 1,201 3,69 104 23,4
200 0,473 0,768 0,820 0,687 2,11 104 56,2
250 1,851 1,602 1,407 1,620 4,98 104 -3,3
300 1,580 1,839 1,813 1,744 5,36 104 -11,2

Kencur Air 100 1,086 1,410 1,012 1,169 3,59 104 25,5
150 1,602 1,565 1,757 1,641 5,04 104 -4,6
200 1,341 1,407 1,253 1,334 4,10 104 14,9
250 1,053 0,953 1,010 1,005 3,09 104 35,9
300 1,374 1,073 0,957 1,135 3,48 104 27,8
Etanol 100 1,319 1,160 1,125 1,201 3,69 104 23,4
150 1,616 1,750 1,593 1,653 5,08 104 -5,4
200 1,460 1,218 1,313 1,330 4,09 104 15,1
250 1,188 1,318 0,970 1,159 3,56 104 26,1
300 1,132 0,779 1,025 0,979 3,01 104 37,6

Kontrol (+) 100 1,397 1,413 1,399 1,403 4,31 104 10,6
150 1,821 1,783 1,959 1,854 5,70 104 -18,3
200 2,009 1,951 1,987 1,982 6,09 104 -26,3
250 1,900 2,036 1,876 1,937 5,95 104 -23,4
300 1,757 1,818 1,577 1,717 5,27 104 -9,3
 29

Lanjutan Lampiran 11

Perhitungan aktivitas enzim lipase

Aktivitas enzim lipase pankreas (mol/l,menit)

A 1 volume zat pengekstra k 1
= mol standar
B volume enzim (L) volume zat yang diukur waktu(meni t)
Keterangan:
A = absorbans sampel
B = absorbans standar (asam oleat) = 0,041
mol standar = jumlah standar oleat yang digunakan (4,25 mol)
Bobot standar = 0,0155 g
3
0,0155 g 10 3 mL 10 mg
[standar] = = 1,24 103 ppm
1,25 mL 1L 1g

[standar] setelah pengenceran ke dalam 1,00 mL

V1M1 = V2M2
1,24 103 ppm 97,0 L = 1,00 mL M2
M2 = 1,20 103 ppm
1,20 10 3 mg 1L 1 mol 1g 10 6 mol
mol standar = 1mL 3
1L 10 mL 282,4614 g 10 3 mg 1 mol
= 4,25 mol
1L
Volume enzim = 100 L = 100 L 6
= 1,00 10-4 L
10 L
Volume zat pengekstrak = volume kloroform-heptana (1:1) = 4,0 mL
Volume zat yang diukur = 3,0 mL
Waktu = waktu inkubasi = 45 menit

Perhitungan daya inhibisi ekstrak terhadap aktivitas lipase pankreas

Aktivitas enzim blanko - Aktivitas enzim ekstrak

Daya inhibisi = 100%
Aktivitas enzim blanko
 30

Lampiran 12 Perhitungan statistik ekstrak buah asam gelugur, rimpang lengkuas, dan kencur

a. Ekstrak air
Daya inhibisi (%) ekstrak air asam gelugur dan lengkuas terhadap aktivitas lipase pankreas
Ekstrak air
Ulangan Yj
Asam Gelugur Lengkuas Kencur
1 36,8 29,8 33,0 99,6
2 37,6 41,4 39,3 118,3
3 51,3 25,6 35,9 112,8
Yi 125,7 96,8 108,2 330,7

Analisis sidik ragam daya inhibisi ekstrak air terhadap aktivitas xantin oksidase
Sumber keragaman db JK KT F-hitung F-tabel
Perlakuan 2 141,27 70,64 1,478 5,143
Galat 6 286,69 47,78
Total 8 427,96

H0 : 1 = 2 = 3 (semua perlakuan memberikan daya inhibisi yang sama terhadap aktivitas lipase
pankreas)
H1 : i j (paling sedikit ada satu pasang perlakuan yang memberikan daya inhibisi yang berbeda
terhadap aktivitas lipase pankreas)

2 (330,7) 2
FK = Y.. = = 12151,39
pr (3 3)
Yi
2 125,7 2 + 96,8 2 + 108,2 2
JKP = FK = 12151,39 = 141,27
r 3
JKT = Yij2 FK = (36,82 + + 35,92) 12151,39 = 427,96
JKG = JKT JKP = 416 138,67 = 286,69
JKP 141,27
KTP = = = 70,64
dbp 2
JKG 286,69
KTG = = = 47,78
dbg 6
= 70,64 = 1,478
KTP
F hitung =
KTG 47,78
F0,05(2,6) = 5,143
Fhitung < Ftabel Kesimpulan : Terima H0 (berarti ekstrak air asam gelugur, lengkuas, dan
kencur memberikan pengaruh daya inhibisi yang tidak
berbeda nyata terhadap aktivitas lipase pankreas)

b. Ekstrak etanol (1 faktor daya inhibisi tertinggi)

Daya inhibisi (%) ekstrak etanol terhadap aktivitas lipase pankreas
Ekstrak etanol
Ulangan Yj
Asam Gelugur Lengkuas Kencur
1 92,1 69,5 26,9 188,5
2 82,9 50,4 49,8 183,1
3 83,4 47,1 33,8 164,3
Yi 258,4 167,0 110,5 535,9
 31

Lanjutan Lampiran 12

Analisis sidik ragam daya inhibisi ekstrak etanol terhadap aktivitas lipase pankreas
Sumber keragaman db JK KT F-hitung F-tabel
Perlakuan 2 3713,4 1856,7 17,910 5,143
Galat 6 622,02 103,67
Total 8 4335,42

Fhitung > Ftabel Kesimpulan : Tolak H0 (berarti ekstrak etanol asam gelugur, lengkuas, dan
kencur memberikan pengaruh daya inhibisi yang berbeda
nyata terhadap aktivitas lipase pankreas)

c. Uji statistika daya inhibisi maksimum dari ekstrak asam gelugur, lengkuas, dan kencur terhadap
kontrol negatif dan positif
Perlakuan:
I : tanpa penambahan ekstrak (kontrol negatif)
II : penambahan ekstrak etanol buah asam gelugur 150 ppm
III : penambahan ekstrak etanol lengkuas 200 ppm
IV : penambahan ekstrak etanol kencur 300 ppm
V : penambahan Xenical 100 ppm (kontrol positif)

Daya inhibisi (%) sample terhadap aktivitas lipase pankreas

Perlakuan
Ulangan Yj
I II III IV V
1 0,00 92,1 69,5 26,9 9,9 198,4
2 0,00 82,9 50,4 49,8 8,8 191,9
3 0,00 83,4 47,1 33,8 9,7 174,0
Yi 0,00 258,4 167,0 110,5 28,4 564,3
0,00 86,1 55,7 36,8 9,5 188,2

Analisis sidik ragam daya inhibisi sampel terhadap aktivitas lipase pankreas
Sumber keragaman db JK KT F-hitung F-tabel
Perlakuan 4 14663,15 3665,79 58,868 3,478
Galat 10 622,71 62,271
Total 14 15285,86

H0 : 1 = 2 = 3 = 4 = 5 (semua perlakuan memberikan daya inhibisi yang sama terhadap

aktivitas lipase pankreas)
H1 : i j (paling sedikit ada satu pasang perlakuan yang memberikan daya inhibisi yang berbeda
terhadap aktivitas lipase pankreas)
2 2
FK = Y.. = (564,3) = 21228,97
pr (5 3)
= 3665,79 = 58,868
KTP
F hitung =
KTG 62,271
F0,05(4,10) = 3,478

Fhitung > Ftabel Kesimpulan : Tolak H0 (berarti perlakuan memberikan pengaruh daya
inhibisi yang berbeda nyata terhadap aktivitas lipase
pankreas)
 32

Lanjutan Lampiran 12

Untuk melihat perlakuan mana yang memberikan pengaruh yang berbeda, dilakukan uji Duncan.

Uji Duncan
Rp = r0,05 (p,dbg) KTG
r
Tolak Ho jika |i - j| > Rp
R2 = 3,15 4,94 = 15,57
R3 = 3,30 4,94 = 16,30
R4 = 3,37 4,94 = 16,65
R5 = 3,43 4,94 = 16,94
Urutan perlakuan: 1 = 0 (kontrol negatif)
2 = 10,6 (kontrol positif)
3 = 37,6 (etanol kencur)
4 = 56,2 (etanol lengkuas)
5 = 86,3 (etanol asam gelugur)

|1 2| = 10,6 < R2 Terima Ho*

|1 3| = 37,6 > R3 Tolak Ho
|1 4| = 56,2 > R4 Tolak Ho
|1 5| = 86,3 > R5 Tolak Ho
|2 3| = 27,0 > R3 Tolak Ho
|2 4| = 45,6 > R4 Tolak Ho
|2 5| = 75,7 > R5 Tolak Ho
|3 4| = 18,6 > R4 Tolak Ho
|3 5| = 48,7 > R5 Tolak Ho
|4 5| = 30,1 > R4 Tolak Ho
Keterangan: * = tidak berbeda nyata

Kesimpulan: perlakuan yang berbeda nyata terdapat pada interaksi antara

1 kontrol negatif dengan ekstrak etanol kencur
2 kontrol negatif dengan ekstrak etanol lengkuas
3 kontrol negatif dengan ekstrak etanol asam gelugur
4 kontrol positif dengan ekstrak etanol kencur
5 kontrol positif dengan ekstrak etanol lengkuas
6 kontrol positif dengan ekstrak etanol asam gelugur
7 ekstrak etanol kencur dengan ekstrak etanol lengkuas
8 ekstrak etanol kencur dengan ekstrak etanol asam gelugur
9 ekstrak etanol lengkuas dengan ekstrak etanol asam gelugur
 33

Lampiran 13 Kurva estimasi berbagai ekstrak contoh dan kontrol positif

Contoh Ekstrak Kurva Persamaan garis R

Asam gelugur Air Logaritma y = -18,36 ln(x) + 126,19 0,4845
Linier y = -0,0925 + 48,714 0,4088
Kuadratik y = 0,0013x - 0,5928x + 92,49 0,6702
Power y = 654,31x--0,6002 0,4181
Exponensial y = 51,401e-0,003x 0,3401

Etanol Logaritma y = -19,215ln(x) + 146,39 0,1185

Linier y = -0,1216x + 70,249 0,1576
Kuadratik y = - 0,001x + 0,2981x + 33,527 0,1986
Power y = 340,34x-0,4018 0,1314
Exponensial y = 67,411e-0,0024x 0,1567

Lengkuas Air Logaritma y = --6,1578 ln(x) + 56,715 0,0954

Linier y = -0,0299x + 30,498 0,0746
Kuadratik y = 0,0005x - 0,229x + 47,925 0,1471
Power y = 92,654x-0,2676 0,0654
Exponensial y = 28,837e-0,0012x 0,0407

Etanol Logaritma y = -50,053 ln(x) + 284,41 0,5210

Linier y = -0,2925x + 81,245 0,5912
Kuadratik y = - 0,0017x + 0,369x + 23,361 0,6573

Kencur Air Logaritma y = 13,183 ln(x) 49,002 0,1344

Linier y = 0,09x + 1,9087 0,2083
Kuadratik y = 0,0013x - 0,4292x + 47,344 0,3599

Etanol Logaritma y = 17,521 ln(x) - 72,219 0,2256

Linier y = 0,1195x - 4,5228 0,3486
Kuadratik y = - 0,002x - 0,6914x + 66,432 0,6997

Kontrol (+) Logaritma y = -21 ln(x) + 96,425 0,3756

Linier y = -0,09x + 4,6473 0,2294
Kuadratik y = 0,0628x - 1,1973x + 101,54 0,9881
 34

Lampiran 14 Data dan perhitungan penentuan kadar flavonoid total

Konsentrasi
Larutan Absorbans
(ppm)
Blanko 0,00 0,000
Standar 1 0,00 0,003
Standar 2 0,50 0,055
Standar 3 2,50 0,334
Standar 4 5,00 0,557
Standar 5 7,50 0,863
Standar 6 10,00 1,048
Ekstrak etanol lengkuas 0,24 0,050
Ekstrak etanol kencur 0,13 0,038

1.2 y = 0.1064x + 0.0245

2
1 R = 0.9932

0.8
Absorbans

0.6

0.4

0.2

0
0 2 4 6 8 10 12
[Kuersetin] (ppm)

Kurva standar kuersetin.

Perhitungan kadar flavonoid total

Persamaan regresi linear y = 0,0245 + 0,1064 x, R = 99,32%

[Flavonoid] etanol lengkuas = 0,050 - 0,0245 = 0,24 ppm

0,1064

Kadar flavonoid total ekstrak etanol lengkuas

0,24 mg 50 mL 100 mL 21,1% 1L
= 25 mL = 0,08 %
1L 10 mL 20 mL 38,20 mg 3
10 mL

0,038 - 0,0245
[Flavonoid] etanol kencur = = 0,13 ppm
0,1064

Kadar flavonoid total ekstrak etanol kencur

0,13 mg 50 mL 100 mL 7,56% 1L
= 25 mL = 0,04 %
1L 10 mL 20 mL 13,82 mg 3
10 mL