Meri Rahmawati-Fkik PDF
Meri Rahmawati-Fkik PDF
SKRIPSI
MERI RAHMAWATI
1111102000067
i
UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi
MERI RAHMAWATI
1111102000067
ii
iii
iv
v
ABSTRAK
Pacing (Costus spiralis) merupakan tanaman yang tersebar di negara tropis seperti
Indonesia dan secara tradisional digunakan untuk mengobati diare dan penyakit
infeksi. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas antimikroba ekstrak
etanol 96% dan air rimpang pacing (Costus spiralis) terhadap bakteri Escherichia
coli ATCC 35318, Shigella dysenteriae ATCC 13313, Salmonella typhimurium
ATCC 14028, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538
dan aktivitas antifungi terhadap Candida albicans ATCC 10231 dengan
menggunakan metode difusi cakram. Ekstrak etanol 96% diperoleh dengan
menggunakan metode maserasi, sedangkan ekstrak air diperoleh melalui metode
dekokta. Kontrol positif yang digunakan adalah kloramfenikol dan nistatin. Hasil
pengujian antibakteri menunjukan dengan konsentrasi 12.5 mg/mL, 25 mg/mL, 50
mg/mL dan 100 mg/mL ekstrak etanol 96% dan ekstrak air memiliki aktivitas
terhadap bakteri yang diujikan. Konsentrasi uji 12.5 mg/mL, 25 mg/mL, 50
mg/mL, dan 100 mg/mL ekstrak etanol 96% rimpang pacing menunjukan zona
hambat terhadap bakteri Shigella dysenteriae (6.65-8 mm), Salmonella
typhimurium (6.1-6.75 mm), Bacillus subtilis (7.15-7.75 mm) serta
Staphylococcus aureus (6.5-6.75 mm). Ekstrak air rimpang pacing dengan
konsentrasi 12.5 mg/mL, 25 mg/mL, 50 mg/mL dan 100 mg/mL memiliki
aktivitas terhadap Shigella dysenteriae (6.85-7.5 mm), Salmonella typhimurium
(7-8.55 mm), Bacillus subtilis (6.55-7.05 mm), Escherichia coli (6.550.77), serta
tidak aktif terhadap Staphylococcus aureus. Hal ini menunjukan penggunaan
secara tradisional dengan cara direbus telah sesuai. Hasil penelitian menunjukan
ekstrak etanol 96% dan air memiliki potensi sebagai antibakteri, namun tidak
berpotensi sebagai antifungi.
Kata kunci: pacing (Costus spiralis), rimpang, antimikroba, ekstrak etanol 96%,
ekstrak air, difusi cakram.
vi
ABSTRACT
Pacing (Costus spiralis) is a native plant which is widely spread on the tropical
countries such as, Indonesia and traditional used to treat diarrhea and other
infectional diseases. The aims of this research were to investigate the
antimicrobial activities of pacing (Costus spiralis) rhizome 96% ethanolic and
aqueous extract against Escherichia coli ATCC 35318, Shigella dysenteriae
ATCC 13313, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Bacillus subtilis ATCC
6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 and Candida albicans ATCC 10231 by
using disc diffusion method. The 96% ethanolic extract was obtained by using
maceration method, while the aqueous extract was obtained by using decoction
method. Chloramphenicol and nystatin used as positive controls. The results
showed that both of 12.5 mg/mL, 25 mg/mL, 50 mg/mL and 100 mg/mL of 96%
ethanolic and aqueous extract has antibacterial activity against the treatment group
bacteria. The 12.5 mg/mL, 25 mg/mL, 50 mg/mL and 100 mg/mL of 96%
ethanolic extract showed inhibition zone against 25 mg/mL, 50 mg/mL and 100
mg/mL of Shigella dyssenteriae (6.65-8 mm), Salmonella typhimurium (6.1-6.75
mm), Bacillus subtilis (7.15-7.75 mm) and Staphylococcus aureus (6.5-6.75 mm)
bacteria . The 12.5 mg/mL, 25 mg/mL, 50 mg/mL and 100 mg/mL of aqueous
extract showed antimicrobial activity against Escherichia coli (6.550.77),
Shigella dysenteriae (6.85-7.5 mm), Salmonella typhimurium (7-8.55 mm),
Bacillus subtilis (6.55-7.05 mm), while showed no activity against Staphylococcus
aureus, this results proved that traditional used by using boiling method was
appropriate. The results showed that 96% ethanolic and aqueous extract of pacing
(Costus spiralis) rhizome has potential effect as antibacterial, while showed no
potential effect as antifungal.
vii
KATA PENGANTAR
viii
7. Kakak-kakakku tersayang Hani Safitri, Joko Arianto, S. E., adikku A. Luqy
Wijayanto dan seluruh keluarga besar atas semangat, perhatian dan doanya.
8. Sahabat dan keluarga penulis selama kuliah Khoirunnisa, Henny, Nurul,
Mida, Ghina, Puspita, Rianisa, Rika, Wina, Nicky, Ayu, Vernanda yang telah
menjadi orang-orang yang selalu membantu dan meghibur.
9. Teman-teman Farmasi angkatan 2011 ABCD yang telah banyak memberikan
warna selama perkuliahan di Farmasi.
10. Teman-teman tim Mikrobiologi 2011 Ambar, Brasti, Rahma, Arini, Ati,
Puput dan teman-teman yang lain atas kerjasama dan kebersamaan yang
begitu hangat selama melaksanakan penelitian ini.
11. Para laboran Farmasi UIN, Mba Rani, Kak Tiwi, Kak Lisna, Kak Eris dan
Kak Rahmadi yang telah membantu selama proses penelitian ini berlangsung.
12. Semua pihak yang telah ikut membantu penulis selama proses penelitian ini
berlangsung yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu.
Penulis menyadari bahwa penulisan dan penyusunan skripsi ini memiliki
banyak kekurangan dan kelemahan, maka dengan kerendahan hati penulis
mangharapkan kritik dan saran dari pembaca untuk kemajuan dan kesempurnaan
skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi banyak pihak
khususnya manambah ilmu pengetahuan di Program Studi Farmasi Universitas
Islam Negeri Jakarta.
Penulis
ix
x
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ........................................................................................................... ii
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS ...................................... iii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ........................................ iv
HALAMAN PENGESAHAN SKRIPSI ....................................................... v
ABSTRAK ................................................................................................... vi
ABSTRACT ................................................................................................. vii
KATA PENGANTAR .................................................................................viii
HALAMAN PERSETUJUAN PUBLIKASI .............................................. x
DAFTAR ISI .................................................................................................. xi
DAFTAR GAMBAR .................................................................................. xiii
DAFTAR TABEL ..................................................................................... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................ xv
BAB 1 PENDAHULUAN .............................................................................. 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................ 1
1.2 Rumusan Masalah ....................................................................... 3
1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................ 3
1.4 Manfaat Penelitian ...................................................................... 3
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................... 5
2.1 Tanaman Pacing .......................................................................... 5
2.1.1 Klasifikasi Taksonomi ................................................... 5
2.1.2 Deskripsi Tanaman ........................................................ 5
2.1.3 Kegunaan Tanaman......................................................... 5
2.1.4 Kandungan Senyawa ....................................................... 6
2.2 Metode Ekstraksi ....................................................................... 6
2.2.1 Ekstraksi Cara Dingin .................................................... 6
2.2.2 Ekstraksi Cara Panas ...................................................... 7
2.3 Metode Pengujian Antimikroba.................................................. 7
2.3.1 Metode Difusi ................................................................ 8
2.3.2 Metode Dilusi ................................................................ 8
2.4 Tinjauan Tentang Mikroorganisme ............................................ 9
2.4.1 Pertumbuhan Mikroorganisme ...................................... 9
2.4.2 Kurva Pertumbuhan Bakteri .......................................... 9
2.4.3. Mikroorganisme Uji.................................................. .... 11
2.5 Tinjauan Antimikroba .............................................................. 14
2.5.1. Antibakteri yang Digunakan Sebagai Kontrol Positif ...15
2.5.2. Antifungi yang Digunakan Sebagai Kontrol Positif .....16
2.6 Media Pertumbuhan Mikroorganisme ...................................... 17
BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN ..................................................... 19
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian.................................................... 19
3.2 Alat dan Bahan yang Digunakan ............................................... 19
3.2.1 Alat .................................................................................19
3.2.2 Bahan .............................................................................19
3.3 Metode Penelitian ..................................................................... 20
3.3.1 Determinasi Tanaman ................................................... 20
3.3.2 Pembuatan Ekstrak ....................................................... 20
xi
3.3.3
Penetapan Kadar Air Ekstrak ....................................... 21
3.3.4
Skrining Fitokimia Ekstrak Rimpang Pacing................ 21
3.3.5
Sterilisasi Alat dan Bahan .............................................23
3.3.6
Pembuatan Media ......................................................... 23
3.3.7
Peremajaan Mikroba dan Pembuatan Kultur Kerja .......24
3.3.8
Identifikasi Mikroba Uji................................................ 24
3.3.9
Pembuatan Kurva Pertumbuhan Bakteri .......................25
3.3.10
Pembuatan suspensi Mikroba Uji ..................................25
3.3.11
Pengujian Aktivitas Antimikroba dengan Metode Difusi
Cakram ...........................................................................26
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 27
4.1 Hasil Determinasi...................................................................... 27
4.2 Pembuatan Ekstrak.................................................................... 27
4.3 Penetapan Kadar Air Ekstrak Rimpang Pacing ........................28
4.4 Skrining Fitokimia Ekstrak Rimpang Pacing ........................... 28
4.5 Identifikasi Mikroba Uji ........................................................... 29
4.6 Kurva Pertumbuhan Bakteri ......................................................30
4.7 Pengujian Aktivitas Antimikroba dengan Metode Difusi
Cakram .......................................................................................33
BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 41
5.1 Kesimpulan ...............................................................................41
5.2 Saran ......................................................................................... 41
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 42
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Tanaman pacing....................................................................... 5
Gambar 2.2 Struktur kloramfenikol ............................................................. 16
Gambar 2.3 Struktur nistatin ........................................................................ 17
Gambar 4.1 Hasil identifikasi mikroba uji ................................................... 29
Gambar 4.2 Kurva pertumbuhan baktei uji .................................................. 31
Gambar 4.2 Grafik hubungan konsentrasi dengan zona hambat ekstrak
etanol 96% rimpang pacing terhadap bakteri ......................... 37
Gambar 4.3 Grafik hubungan konsentrasi dengan zona hambat ekstrak
air rimpang pacing terhadap bakteri ........................................ 38
xiii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 2.1 Klasifikasi media ........................................................................ 18
Tabel 4.1 Skrining fitokimia ekstrak rimpang pacing................................. 28
Tabel 4.2 Waktu fase log bakteri ................................................................ 32
Tabel 4.3 Rata-rata diameter zona hambat ekstrak etanol 96% konsentrasi
1 mg/ml, 2 mg/ml,4 mg/ml dan 8 mg/ml .................................... 34
Tabel 4.4 Rata-rata diameter zona hambat ekstrak air konsentrasi
1 mg/ml, 2 mg/ml,4 mg/ml dan 8 mg/ml .................................... 34
Tabel 4.5 Rata-rata diameter zona hambat ekstrak etanol 96% konsentrasi
12.5 mg/mL, 25 mg/mL, 50 mg/mL dan 100 mg/mL............ 35
Tabel 4.6 Rata-rata diameter zona hambat ekstrak air konsentrasi
1 mg/ml, 2 mg/ml,4 mg/ml dan 8 mg/ml .................................... 36
xiv
Daftar Lampiran
Halaman
xv
1
BAB 1
PENDAHULUAN
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
hidrogen (H), nitrogen (N), sulfur (S), fosfor (P), kalium (K), magnesium (Mg),
kalsium (Ca), dan besi (Fe). Mikroelemen yaitu elemen-elemen nutrisi yang
diperlukan dalam jumlah sedikit (Pratiwi, 2008).
b) Temperatur
Temperatur menentukan aktivitas enzim yang terlibat dalam aktivitas kimia.
Peningkatan temperatur sebesar 10C dapat meningkatkan aktivitas enzim sebesar
dua kali lipat. Temperatur yang sangat tinggi akan menyebabkan denaturasi
protein yang tidak dapat balik (irreversible), sedangkan pada temperatur yang
sangat rendah aktivitas enzim akan terhenti.
Suhu yang berkaitan dengan pertumbuhan mikroorganisme dapat
digolongkan menjadi tiga, yaitu: (Kamila, 2014)
a. Suhu minimum, yaitu suhu yang apabila berada dibawahnya maka
pertumbuhan bekteri terhenti.
b. Suhu optimum yaitu suhu dimana pertumbuhan berlangsung paling cepat
dan optimum (disebut juga suhu inkubasi).
c. Suhu maksimum yaitu suhu apabila berada diatasnya maka pertumbuhan
tidak terjadi.
c) Keasaman dan kebasaan (pH)
pH merupakan indikasi konsentrasi ion hidrogen. Peningkatan dan
penurunan konsentrasi ion hidrogen dapat menyebabkan ionisasi gugus-gugus
dalam protein, amino dan karboksilat. Hal ini dapat menyebabkan denaturasi
protein yang mengganggu pertumbuhan sel (Pratiwi, 2008). Jawetz dkk (2004)
membagi mikroorganisme berdasarkan pH optimum untuk pertumbuhan yaitu:
a. Asidofil yaitu mikroorganisme yang dapat tumbuh pada kisaran pH
optimal 1,00-5,5.
b. Neutralofil yaitu mikroorganisme yang dapat tumbuh pada kisaran pH
optimal 5,5-8,5.
c. Alkalifil yaitu mikroorganisme yang dapat tumbuh pada kisaran pH
optimal 9,0-11,0.
d) Oksigen (Pratiwi, 2008)
Berdasarkan kebutuhan oksigen, dikenal mikroorganisme yang bersifat
aerob dan anaerob. Mikroorganisme aerob memerlukan oksigen untuk
2. Shigella dysenteriae
Ordo : Enterobacteriales
Famili : Enterobacteriaceae
Genus : Shigella
Spesies : Shigella dysenteriae
Shigella dysenteriae merupakan bakteri Gram negatif, bentuk kokobasil dan
ditemukan pada biakan muda (Dewi dkk., 2013). Shigella dysenteriae bersifat
fakultatif anaerob tetapi paling baik tumbuh secara aerobik. Koloninya konveks,
bulat, transparan, dengan pinggir-pinggir utuh, mencapai diameter kira-kira 2 mm
dalam 24 jam (Zelina, 2011).
Infeksi yang disebabkan oleh Shigella dysenteriae hampir selalu terbatas
pada saluran pencernaan, bakteri ini memproduksi eksotoksin tidak tahan panas
yang dapat mempengaruhi saluran pencernaan dan susunan saraf pusat. Setelah
masa inkubasi yang pendek (1-2 hari), akan menimbulkan nyeri perut, demam,
dan tinja encer (Jawetz dkk., 1996).
3. Salmonella typhimurium
Ordo : Enterobacteriales
Famili : Enterobacteriaceae
Genus : Salmonella
Spesies : Salmonella typhimurium
4. Bacillus subtilis
Ordo : Bacillales
Famili : Bacillaceae
Genus : Bacillus
Spesies : Bacillus subtilis
Merupakan kelompok bakteri Gram positif, aerobik, dan mampu
membentuk endospora. Bacillus subtilis merupakan organisme saprofit yang
lazim terdapat dalam tanah, air dan udara serta tumbuh-tumbuhan (Jawetz dkk.,
2004). Bakteri ini dapat menyebabkan penyakit meningitis, endokarditis, infeksi
mata dan lain-lain (Staf pengajar FKUI, 1994).
5. Staphylococcus aureus
Ordo : Eubacteriales
Famili : Micrococcaceae
Genus : Staphylococcus
Spesies : Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus merupakan bakteri Gram positif berbentuk bulat
yang hidup di dalam saluran pengeluaran lendir dari tubuh manusia dan hewan
seperti hidung, mulut, tenggorokan dan dapat dikeluarkan pada waktu batuk atau
bersin. Staphylococcus aureus memiliki kemampuan untuk mensintesis lipase
yang dapat mengubah sebum trigliserida menjadi asam lemak bebas yang dapat
merangsang inflamasi (Sukatta dkk (2008) dalam Aziz (2011)).
6. Candida albicans
Ordo : Moniliales
Famili : Cryptococcaceae
Genus : Candida
Spesies : Candida albicans
Spesies Candida tumbuh sabagai sel ragi tunas, berbentuk oval, pada
medium agar atau dalam suhu 37C selama 24 jam atau suhu ruangan. Spesies
Candida menghasilkan koloni lunak berwarna krem dengan bau seperti ragi.
Candida albicans adalah jamur uniseluler yang merupakan flora normal rongga
mulut, usus besar dan vagina. Kondisi tertentu Candida albicans dapat tumbuh
berlebih dan melakukan invasi sehingga menyebabkan penyakit dan merupakan
penyebab utama kandidiasis. Spesies ini merupakan yang paling patogen
menyerang permukaan kulit, mukosa mulut dan vagina (Jawetz dkk., 2004)
daripada diluar sel maka kerusakan dinding sel kuman akan menyebabkan
terjadinya lisis, yang merupakan dasar efek bakterisidal pada kuman yang
peka.
c. Antimikroba yang mengganggu keutuhan membran sel mikroba
Obat antimikroba yang termasuk dalam kelompok ini adalah polimiksin
serta golongan polien. Polimiksin dapat merusak membran sel setelah bereaksi
dengan fosfat pada fosfolipid membran sel mikroba. Antibiotik polien bereaksi
dengan struktur sterol yang terdapat pada membran sel fungi sehingga
mempengaruhi permeabilitas selektif membran. Bakteri tidak sensitif dengan
antibiotik polien, karena tidak memiliki struktur sterol pada membran selnya.
Kerusakan membran sel dapat menyebabkan keluarnya berbagai komponen
penting dari dalam sel mikroba yaitu protein, asam nukleat, nukleotida dan
lain-lain.
d. Antimikroba yang menghambat sintesis protein sel mikroba
Obat yang termasuk kelompok ini adalah golongan aminoglikosida,
makrolida, linkomisin, tetrasiklin dan kloramfenikol. Sel mikroba dalam
kehidupannya perlu mensintesis berbagai protein. Sintesis protein berlangsung
di ribosom. Ribosom sel bakteri mengandung dua sub unit yaitu ribosom 30S
dan 50S, pada sintesis protein komponen ini akan bersatu menjadi ribosom
70S. Penghambatan sintesis protein dapat terjadi dengan berbagai cara.
Streptomisin berikatan dengan komponen ribosom 30S dan menyebabkan kode
pada mRNA salah dibaca oleh tRNA pada saat sintesis protein.
Rumus bangun :
Rumus bangun :
BAB 3
METODOLOGI PENELITIAN
3.2.2. Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain simplisia
kering rimpang pacing yang diperoleh dari Balai Penelitian Tanaman Rempah dan
Obat (Balittro), antibiotik Kloramfenikol (Oxoid), antifungi Nistatin, NaCl 0.9%,
media Nutrient Agar (Merck), Mueller Hinton Agar (Merck), Nutrient Broth
(Merck) dan Potato dextrose Agar (Merck). Kultur bakteri Escherichia coli
ATCC 35318 yang diperoleh dari PT. Dipa Puspa, kultur bakteri Shigella
dysenteriae ATCC 13313, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Bacillus
subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 dan Candida albicans
ATCC 10231 yang diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Universitas
Indonesia, aquades, aquades steril, etanol 96%, metanol, alkohol 70%, pereaksi
Dragendorf, pereaksi Mayer, FeCl3, HCl 2 N, H2SO4 P, asam asetat anhidrat,
NaOH, kloroform, pewarna gentian violet, pewarna safranin, lugol dan metylen
blue.
1) Identifikasi Alkaloid
Pengujian identifikasi alkaloid digunakan pereaksi Dragendrof dan Mayer.
Sebanyak 0,5 g diambil dalam tabung reaksi dilarutkan dengan pelarut masing-
masing ekstrak, selanjutnya ke dalam tabung reaksi dimasukkan 2 mL pereaksi
Dragendrof dan 2 mL pereaksi Mayer pada tiap tabung pengujian yang berbeda.
Hasil uji positif dengan pereaksi Dragendrof bila terdapat endapan berwarna
jingga (Garg dkk., 2013). Hasil positif untuk pereaksi Mayer menghasilkan
endapan berwarna kuning (Tiwari, dkk., 2011).
2) Identifikasi Flavonoid
Sebanyak 0,5 g ekstrak dilarutkan dengan 2 mL pelarutnya dan ditambahkan
3 tetes NaOH. Terjadi perubahan warna kuning yang intens menjadi tidak
berwarna pada penambahan asam sulfat mengindikasikan adanya flavonoid
(Tiwari dkk., 2011).
3) Identifikasi Saponin
Sebanyak 0,5 g ekstrak ditambahkan 10 mL air dalam tabung reaksi dan
dikocok kuat-kuat selama 10 menit. Ekstrak dikatakan mengandung saponin jika
terbentuk buih yang mantap ditandai dengan terbentuknya buih setinggi 1 sampai
10 cm (Tiwari dkk., 2011).
4) Identifikasi Tanin
Ekstrak 0,5 g dalam tabung reaksi ditambahkan 2 mL pelarutnya kemudian
ditambahkan FeCl3 sebanyak 3 tetes, positif jika menghasilkan hitam-hijau (Garg
dkk., 2013).
autoklaf pada suhu 121C selama 15 menit, setelah dingin media NB disimpan
dalam lemari pendingin.
BAB 4
HASIL DAN PEMBAHASAN
diperoleh dilakukan proses freeze dry dan didapatkan hasil ekstrak akhir sebanyak
12,23 g dengan rendemen yaitu 12,23%.
terlihat melalui peningkatan resolusi (daya pisah) dan kontras. Proses identifikasi
yang dilakukan untuk mengidentifikasi kemurnian dari bakteri uji adalah dengan
melakukan proses pewarnaan, pewarnaan organisme adalah prosedur mewarnai
mikroorganisme dengan menggunakan zat warna yang dapat menonjolkan
struktur bakteri yang diamati (Pratiwi, 2008), dengan dilakukan pewarnaan maka
dapat diketahui bakteri uji yang akan digunakan tidak terkontaminasi oleh bakteri
lain.
Salah satu pewarnaan yang digunakan untuk identifikasi bakteri adalah
dengan menggunakan pewarnan Gram. Pewarnaan Gram dapat membedakan
bakteri menjadi dua kelompok besar, yaitu bakteri Gram positif dan Gram negatif
melalui perbedaan warna yang dihasilkan. Warna merah menunjukkan bakteri
Gram negatif dan warna biru menunjukkan bakteri Gram positif. Hasil pewarnaan
ditunjukkan pada gambar 4.1.
Gambar 4.1 menunjukkan hasil pewarnaan untuk biakan mikroba uji (a)
bakteri Escherichia coli yang merupakan bakteri Gram negatif berbentuk basil,
(b) bakteri Shigella dysenteriae yang merupakan bakteri Gram negatif berbentuk
kokobasil, (c) bakteri Salmonella typhimurium merupakan bakteri Gram negatif
berbentuk basil,(d) bakteri Bacillus subtilis merupakan bakteri Gram positif
berbentuk basil, (e) bakteri Staphylococcus aureus merupakan bakteri Gram
positif berbentuk bulat bersusun seperti anggur dan (f) merupakan fungi Candida
albicans dengan bentuk oval.
Perbedaan warna yang dihasilkan setelah proses pewarnaan Gram
disebabkan oleh perbedaan struktur dinding sel bakteri. Dinding sel bakteri Gram
positif banyak mengandung peptidoglikan sedangkan bakteri Gram negatif
dinding selnya banyak mengandung lipopolisakarida. Pewarna kristal violet yang
masuk ke dalam sel bakteri Gram positif pada poses pewarnaan awal tidak dapat
tercuci dengan alkohol sehingga menyebabkan warna ungu pada pengamatan
dengan mikroskop sedangkan lapisan lipopolisakarida yang terdapat pada dinding
sel bakteri Gram negatif dapat dirusak dengan penambahan alkohol sehingga
ketika ditambahkan pewarna tandingan safranin bakteri akan berwarna merah.
2.5 2
Absorbansi (OD)
Absorbansi (OD)
2 1.5
1.5
1
1
0.5
0.5
0 0
0 10 20 30 0 10 20 30
Waktu (jam) Waktu (jam)
2 2.5
Absorbansi (OD)
Absorbansi (OD)
1.5 2
1.5
1
1
0.5 0.5
0 0
0 10 20 30 0 20 40
Waktu (jam) Waktu (jam)
2.5
Absorbansi (OD)
2
1.5
1
0.5
0
0 10 20 30
Waktu (jam)
Tabel 4.3. Rata-rata diameter zona hambat ekstrak etanol 96% konsentrasi
1 mg/mL, 2 mg/mL,4 mg/mL dan 8 mg/mL
Rata-rata Diameter Zona Hambat (mm)
Mikroba Uji
1 2 4 8
(+) (-)
mg/mL mg/mL mg/mL mg/mL
Escherichia coli 10.9 1.2 - - - - -
Shigella
23.8 0.72 - - - - -
dysenteriae
Salmonella
21 0 - - - - -
typhimurium
Staphylococcus
33.15 0.2 - - - - -
aureus
Candida albicans 34 0 - - - - -
Tabel 4.4. Rata-rata diameter zona hambat ekstrak air konsentrasi 1 mg/ml,
2 mg/ml,4 mg/ml dan 8 mg/ml
Rata-rata Diameter Zona Hambat (mm)
Mikroba Uji
1 2 4 8
(+) (-)
mg/mL mg/mL mg/mL mg/Ml
Shigella
23.6 0 - - - - -
dysenteriae
Salmonella
21 1.41 - - - - -
typhimurium
Staphylococcus
15.95 1.06 - - - - -
aureus
Candida albicans 34 0 - - - - -
Tabel 4.5. Rata-rata diameter zona hambat ekstrak etanol 96% konsentrasi
12.5 mg/mL, 25 mg/mL, 50 mg/mL dan 100 mg/mL
Rata-rata Diameter Zona Hambat (mm)
Mikroba Uji
12.5 25 50 100
(+) (-)
mg/mL mg/mL mg/mL mg/mL
Shigella
19.07 1.87 - 6.65 0.21 7.1 0.14 7.25 0.35 8 1.41
dysenteriae
Salmonella
23 0 - 6.1 0.14 6.3 0.42 6.4 0.56 6.75 0.63
typhimurium
Bacillus subtilis 14.32 1.3 - 7.15 0.21 7.15 0.21 7.2 0.21 7.75 0.63
Staphylococcus
17.85 1.90 - - 6.5 0.07 6.6 0.84 6.75 1.06
aureus
Candida albicans 34 0 - - - - -
Shigella
dysenteriae 21 0.70 - 6.85 1.2 7.3 0.4 7.32 0.45 7.5 0.70
Salmonella
24.3 0.98 - 70 7.1 0.14 7.45 0.35 8.55 0.35
typhimurium
Bacillus subtilis 17.1 0.98 - 6.55 0.63 70 7.05 0.07 7.05 0.07
Staphylococcus
15.05 0.07 - - - - -
Aureus
Candida albicans 33 0 - - - - -
Keterangan:
- Pengukuran diameter zona hambat termasuk diameter kertas cakram (6
mm
- Tanda (-) menunjukkan tidak terbentuknya zona hambat
Tabel 4.4 dan 4.5 diatas menunjukkan bahwa ekstrak etanol 96% dan air
rimpang pacing memiliki aktivitas antibakteri dengan adanya peningkatan
konsentrasi ekstrak uji. Berdasarkan pada data diameter zona hambat maka dapat
digambarkan dengan grafik peningkatan aktivitas sebagai berikut:
8
Konsentrasi Ekstrak
6 12.5 mg/mL
5 25 mg/mL
4
50 mg/mL
3
2 100 mg/mL
1
0
1 2 3 4 5 6
Mikroba Uji
9
8
7 Konsentrasi Ekstrak
Zona Hambat (mm) 6 12.5 mg/mL
5
25 mg/mL
4
50 mg/mL
3
2 100 mg/mL
1
0
1 2 3 4 5 6
Mikroba Uji
adalah terdapatnya gugus basa yang mengandung nitrogen akan bereaksi dengan
senyawa asam amino yang menyusun dinding sel dan DNA mikroba. Reaksi ini
mengakibatkan terjadinya perubahan struktur susunan asam amino. sehingga akan
menimbulkan perubahan keseimbangan genetik pada rantai DNA sehingga akan
mendorong terjadinya lisis sel yang akan menyebabkan kematian sel pada
mikroba (Gunawan (2009) dalam Rinawati (2011).
Flavonoid mempunyai aktivitas antimikroba dengan mengganggu fungsi
metabolisme melalui perusakan dinding sel dan mendenaturasi protein mikroba.
Menurut Cowan (1999) senyawa flavon, flavonoid dan flavonol merupakan
senyawa fenolik yang diketahui disintesis oleh tanaman sebagai respon terhadap
infeksi mikroba. Mekanisme kerja sebagai antibakteri kerena kemampuan untuk
membentuk kompleks dengan protein ekstraseluler dan terlarut dengan dinding sel
mikroba.
Saponin memiliki aktivitas antimikroba dengan menggangggu tegangan
permukaan dinding sel. Saat tegangan permukaan terganggu zat antimikroba akan
dengan mudah masuk kedalam sel dan akan mengganggu metabolisme hingga
akhirnya terjadilah kematian sel bakteri (Karlina dkk., 2013). Tanin mempunyai
aktivitas antimikroba dengan targetnya adalah merusak dinding sel mikroba
(Tiwari dkk., 2011). Berdasarkan Teori tersebut dapat diduga bahwa aktivitas
antibakteri rimpang pacing berasal dari metabolit sekunder yang terkandung pada
masing-masing ekstrak, sedangkan pada aktivitasnya sebagai antifungi yang
menunjukkan hasil negatif dapat disebabkan pada konsentrasi ekstrak yang
digunakan masih terlalu kecil untuk menghambat perumbuhannya.
BAB 5
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan pada hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa:
1. Ekstrak etanol 96% rimpang pacing (Costus spiralis) memiliki aktivitas
antibakteri terhadap bakteri Shigella dysenteriae ATCC 13313, Salmonella
typhimurium ATCC 14028 dan Bacillus subtilis ATCC 6633 dengan
konsentrasi 12.5 mg/mL, 25 mg/mL, 50 mg/mL dan 100 mg/mL, serta
terhadap Staphylococcus aureus ATCC 6538 dengan konsentrasi 25 mg/mL,
50 mg/mL dan 100 mg/mL. Ekstrak etanol 96% tidak memiliki aktivitas
antimikroba terhadap Escherichia coli ATCC 35318 dan Candida albicans
ATCC 10231.
2. Ekstrak air rimpang pacing (Costus spiralis) memiliki aktivitas antibakteri
terhadap bakteri Escherichia coli ATCC 35318 dengan konsentrasi 100 mg/mL
dan terhadap bakteri Shigella dysenteriae ATCC 13313, Salmonella
typhimurium ATCC 14028, Bacillus subtilis ATCC 6633 dengan konsentrasi
12.5 mg/mL, 25 mg/mL, 50 mg/mL dan 100 mg/mL. Ekstrak air rimpang
pacing tidak memiliki aktivitas antimikroba terhadap Staphylococcus aureus
ATCC 6538 dan Candida albicans ATCC 10231.
5.2 Saran
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai aktivitas antimikroba dengan
bakteri dan fungi lainnya yang tidak diujikan pada penelitian ini.
2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai aktivitas antimikroba dengan
menggunakan pelarut yang berbeda.
DAFTAR PUSTAKA
Amalia, sari., Sri Wahdaningsih dan Eka Kartika Untari. 2014. Uji Aktivitas
Antibakteri Fraksi n-Heksan Kulit Buah Naga Merah (Hylocereus
polyrhizus Britton & Rose) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus
ATCC 25923. Traditional Medicine Journal 19 (2): 8994.
Asna, Zelina. 2011. Uji Aktivitas Antibakteri Fase Etil Asetat Rumput Laut
(Gracillaria Verrucosa) Terhadap Beberapa Bakteri Patogen Gram
Negatif. Skripsi. Program Studi Farmasi. Fakultas Kedokteran dan Ilmu
Kesehatan. UIN Syarif Hidayatullah. Jakarta.
Aziz, S. 2010. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun dan Umbi Bakung
Putih (Crinum asiaticum L.) Terhadap Bakteri Penyebab Jerawat. Skripsi.
Program Studi Farmasi. Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan. UIN
Syarif Hidayatullah. Jakarta.
Das, K., RKS Tiwari dan DK Shivastava. 2010. Techniques for Evaluation of
Medical Plant Products as Antimicrobial Agent: Current Methods and
Future Trends. Journal of Medicinal Plants Research 4(2): 104-111.
Gholib, Djaenudin. 2009. Daya Hambat Ekstrak Kencur (Kaempferia galanga L.)
Terhadap Trichophylon mentagrophytes dan Cryptococcus neoformans
Jamur Penyebab Penyakit Kurap pada Kulit dan Penyakit Paru. Bul Littro
20 (1): 59-67.
Gull, Iram., Mariam Saeed, Halima Shaukat, Shahbaz M Aalam, Zahoor Qadir
Samra dan Amin M Athar. 2012. Inhibitory Effect of Allium sativa and
Zingiber officinale Extract on Clinically Important Drug Resistant
Phatogenic Bacteria. Annal of Chinical Microbiology and
Antimicrobials.
Handa, S.S., Suman Preet Singh Khanuja, Gennaro Longo, dan Dev Dutt Rakesh.
2008. Extraction Technologies for Medical and Aromatic Plants. Trieste.
International Centre For Science and High Technology.
Jawetz, E., Melnick, J.L dan Adelberg. 2004. Mikrobiologi Kedokteran Ed. 23.
Penerjemah dan editor bagian mikrobiologi kedokteran Universitas
Airlangga. Penerbit Salemba Medika. Jakarta.
Kinho, Julianus., Diah Irawati Dwi Arini, Supratman Tabba, Harwiyaddin Kama,
Yermias Kafiar, Syamsir Shabri dan Moody C. Karundeng. 2011.
Tumbuhan Obat Tradisional di Sulawesi Utara. Manado. Balai Penelitian
Kehutanan Manado.
Kamila, Z. 2014. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak dan Fraksi Duin Sintok
(Cinnamomum sintoc Blume.) Terhadap Sraphylococcus aureus dan
Pseudomonas aeruginosa serta Analisis Komponen Senyawa Fraksi Aktif
dengan Kromatografi Gas-Spektrometri Massa. Skripsi. Program Studi
Farmasi. Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan. UIN Syarif
Hidayatullah. Jakarta.
Karlina. C.Y.. Muslimin I.. Guntur T. 2013. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Herba
Krokot (Portulaca oleracea L.) Terhadap Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli.
http://ejournal.unesa.ac.id/index.php/lenterabio/article/view/1397/bacaarti
kel diakses pada tanggal 22 juni 2015.
Martins IM, Corts JGC, Munoz J, Moreno MB, Ramos M dan Clemente-Ramos
JA. 2011. Differential Activities of Three Families of Specific (1.3)
Glucan Synthase Inhibitors in Wild-Type and Resistant Strains of Fission
Yeast. The Jornal of Biological Chemistry 5: 3484-3496.
Oktavia, Gebby A E., Muslimin Ibrahim dan Lisa Lisdiana. 2013. Pengaruh
Pemberian Ekstrak Biji Mahoni (Swietenia mahagoni) terhadap
Penghambatan Pertumbuhan Escherichia coli dengan Metode Difusi
Cakram. LenteraBio 3(3): 239-243.
Pangalinan, F.R., Novel Kojong, Paulina V.Y dan Yamlean. 2011. Uji Aktivitas
Antijamur Ekstrak Etanol Kulit Batang Rambutan (Nephelium lappaceum
L.) Terhadap Jamur Candida albicans Secara In Vitro. FMIPA UNSRAT:
712.
Pawar. A.V. dan Pawar. P.R. 2012. Costus speciosus: An Important Medical
Plant. International Journal of Science and Rasearch 3: 2833.
Prez. celso.. Alina Falero. Blanca Rosa Hung. Talena Ledon dan Rafael Fando.
2008. Antibacterial Effect of Costus spiralis Leaves Extract on Pathogenic
Strain of Vibrio Cholerae. Revista CENIC Ciencias Biologicas 39(1): 70
72.
Rumita. 2011. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Air Daun Sirih (Piper Betle L)
dan Ekstrak Air Campurannya Terhadap Beberapa Jenis Bakteri.
Skripsi. Program studi farmasi. Fakultas kedoketran dan ilmu
kesehatan UIN Syarif Hidayatullah. Jakarta.
Sari, Lusia Oktora Ruma Kumala. 2006. Pemanfaatan Obat Tradisional dengan
Pertimbangan Manfaat dan Keamanannya. Majalah Ilmu Kefarmasian 3:
1-7.
Sari, Yeni Dianita., Sitti Nur Djanah dan Laela Hayu Nurani. 2010. Uji Aktivitas
Antibakteri Infusa Daun Sirsak (Annona Muricata L.) Secara in Vitro
Terhadap Sthaphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli
ATCC 35218 Serta Profil Kromatografi Lapis Tipisnya. KES MAS 4(3):
144-239.
Sukmawati. Vita Oppica. 2013. Daya Antibakteri Dekokta Kulit Buah Delima
Putih (Granati fructus cortex) Terhadap Streptococcus mutans.
Fakultas Kedokteran Gigi. Universitas Jember.
Surono. Angela Stevy. 2013. Antibakteri Ekstrak Etanol Umbi Lapis Bawang
Merah (Allium cepa L.) terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli. Jurnal Ilmiah Mahasiswa Universitas Surabaya 2 (1): 1-
15.
Sutarma. 2000. Kultur Media Bakteri. Temu Teknis Fungsional non Peneliti. 52-
57.
Tiwari, Prashant., Bimlesh Kumar, Mandeep Kaur, Gurpreet Kaur dan Harlen
Kaur. 2011. Phytochemical Screening and Extraction: A Review.
International Pharmaceutica Sciencia 1: 98106.
Yulianti, Dian., Bambang S., Rini Y. 2014. Pengaruh Lama Ekstraksi dan
Konsentrasi Pelarut Etanol Terhadap Sifat Fisika-Kimia Ekstrak Daun
Stevia (Stevia rebaudiana Bertoni M.) dengan Metode Microwave
Assisted Extraction Methods. Jurnal Bioproses Komoditas Tropis: 35-41.
( )
Rendemen ekstrak (%) = ( )
Ekstrak air
( )
Rendemen ekstrak (%) = ( )
( ) ( )
=
= 10.45%
= 23.74%
Alkaloid
Saponin
Tanin
Triterpenoid
(Lanjutan)
Flavonoid
Fenolik
Gambar Keterangan
50 mg/mL
12,5 mg/mL
25 mg/mL
25 mg/mL
100 mg/mL
30 l (K+). kontrol negatif metanol
K-
(K-) terhadap Salmonella typhimurium
50 mg/mL
12,5 mg/mL
25 mg/mL
(Lanjutan)
50 mg/mL
12,5 mg/mL
25 mg/mL
12,5 mg/mL
25 mg/mL
12,5 mg/mL
25 mg/mL
Gambar Keterangan
Hasil pengujian ekstrak air dengan
kontrol positif kloramfenikol 30 g
100 mg/mL
K+
(K+). kontrol negatif air steril (K-)
terhadap Escherichia coli
50 mg/mL
K-
25 mg/mL
12,5 mg/mL
50 mg/mL
12,5 mg/mL
25 mg/mL
12,5 mg/mL
50 mg/mL
25 mg/mL
Lanjutan
12,5 mg/mL
50 mg/mL
25 mg/mL
12,5 mg/mL
50 mg/mL
25 mg/mL
50 mg/mL
25 mg/mL
Vortex
Inkubator
Oven
(Lanjutan)
Autoklaf Digital
Shaker incubator
Spektrofotometer UV-VIS
(Lanjutan)
Hot plate
(Lanjutan)