Mekanisme Potensial yang Mendasari Gangguan Lipid disebabkan Antipsikotik

Atipikal

Pengantar
Tingkat tinggi komorbiditas dengan gangguan metabolik telah dikaitkan
dengan skizofrenia (SZ) pasien setelah pengobatan dengan obat antipsikotik atipikal
(AAPDs). Review oleh De Hert et al menemukan bahwa tingkat prevalensi sindrom
metabolik (Mets) adalah dua sampai tiga kali lebih tinggi pada pasien dengan SZ atau
gangguan skizoafektif daripada populasi umum. Selain itu, pasien pertama-episode
SZ yang dimulai dengan AAPDs memiliki tingkat kejadian tiga kali lebih tinggi dari
Mets dibandingkan dengan pasien SZ episode pertama diobati dengan antipsikotik
atipikal. Mets seperti yang terdiri dari dislipidemia darah tinggi dapat berkontribusi
pada peningkatan mortalitas kardiovaskular pada penyakit ini melemahkan. Oleh
karena itu, upaya penelitian yang bertujuan untuk mengurangi gangguan metabolisme
AAPD diinduksi ini sangat penting.
Mekanisme yang mendasari pengaruh AAPDs pada neuroendokrin dan
metabolik disfungsi tertentu tetap kurang dipahami. Studi sebelumnya telah
menghubungkan efek dari serotonin 5-HT2 (ref.4) dan reseptor histamin H1 kenaikan
berat badan AAPD-Induced, mungkin dihasilkan dari asupan makanan meningkat.
Studi terbaru, bagaimanapun, menyarankan bahwa elemen-mengikat protein sterol-
peraturan (SREBPs) adalah pusat dalam kontrol alosterik dari berbagai jalur
biosintesis lipid. Secara khusus, SREBP-1 terutama bertanggung jawab untuk regulasi
asam lemak dan metabolisme triasilgliserol, sedangkan SREBP-2 adalah regulator
utama untuk metabolisme kolesterol. Dalam hati, aktivitas SREBP kelebihan dapat
menjelaskan peningkatan kolesterol yang beredar, asam lemak bebas (FFA) dan
trigliserida.
Kompleks bentuk SREBPs dengan protein SREBP-pembelahan mengaktifkan
(SCAP), protein transport yang mengawal SREBPs tidak aktif (ia-SREBPs) dari
retikulum endoplasma (ER) untuk Golgi aparatus, di mana besarbesaran-SREBPs
diaktifkan sebelum memasuki pada gen nuklir dan mengatur untuk biosintesis lipid
(Gambar 1a). gen insulin-induced (INSIGs) kemudian terikat untuk SCAP untuk

1
mempromosikan retensi ER dari SCAP dan memblokir transportasi ER-to-Golgi dari
SCAP / SREBP ketika cholesterogenesis ditinggikan dan dengan demikian
mengurangi lipogenesis dan cholesterogenesis. INSIGs memiliki dua isoform terdiri
dari Insig-1, target SREBPs nuklir dan naik gen mereka dan jatuh terkoordinasi
dengan tingkat SREBPs nuklir dan Insig-2 diekspresikan pada tingkat yang rendah
tapi konstan dan diatur negatif oleh insulin tanpa dipengaruhi oleh SREBPs. Insig-2
polimorfisme gen dan interaksi gen antara Insig-1 dan Insig-2 telah dikaitkan dengan
efek buruk dari kenaikan berat badan dan Mets pada pasien SZ setelah pengobatan
AAPD. Hal ini menduga bahwa INSIGs mungkin kandidat gen untuk distrurbances
lipid AAPD diinduksi.
Jalur biokimia yang melibatkan SREBP dapat diubah oleh berbagai AAPDs.
Olanzapine, clozapine (CLO) dan risperidone (RIS) dapat menimbulkan peningkatan
regulasi yang signifikan dari-SREBP 1 dan SREBP-2 dan gen target hilir
menyebabkan peningkatan lipid dan sintesis kolesterol. Bahkan injeksi intraperitoneal
tunggal CLO atau olanzapine dapat menginduksi peningkatan serum FFA, diikuti oleh
akumulasi hati lipid. Di sisi lain, quetiapine dan aripiprazole (ARI) yang hampir tanpa
efek samping metabolisme.
Seperti diilustrasikan pada Gambar 1a, Insig dan SCAP juga terikat pada
reseptor progesteron membran komponen 1 (PGRMC1), yang memiliki fungsi
regulasi dalam biosintesis lipid. PGRMC1 dianggap sebagai anggota dari kompleks
multiprotein yang istimewa mengikat berbagai steroid dalam kondisi fisiologis,
mengerahkan berbagai fungsi biologis seperti sintesis sterol, memperbaiki kerusakan,
obat dan metabolisme hormon, apoptosis penindasan dan regulasi kolesterol.
PGRMC1 sangat disajikan dalam tikus dan hati manusia dan sebagian besar berada di
UGD. Sangat mungkin bahwa aktivitas progesteron mengikat PGRMC1 terkait
memiliki afinitas yang sama untuk kortikosteron, testosteron dan kortisol. Progesteron
mungkin memiliki peran regulasi dalam penindasan ekspresi PGRMC1.
Secara bersama-sama, kita hipotesis og PGRMC1 / Insig mungkin terlibat
dalam gangguan metabolisme AAPD-diinduksi di hati. Tujuan utama dari penelitian
ini adalah untuk menguji (a) apakah PGRMC1 hati / Insig / SCAP / SREBP jalur
mendasari mekanisme gangguan lipid AAPD-diinduksi dan (b) apakah mifepristone

2
antagonis steroid (MIF) dapat memodifikasi AAPD- yang diinduksi gangguan lipid
oleh kemampuannya memulihkan defisit dalam PGRMC1 / Insig / SCAP / SREBP
jalur.

Bahan dan metode

bahan kimia
CLO, RIS, ISPA, haloperidol (HAL), sertraline (SER) dan MIF yang dibeli
dari Eastbang Pharmaceuticals (Guangzhou, Cina). Antibodi dari PGRMC1 dan Insig-
1 yang dibeli dari Proteintech (Chicago, IL, USA), sedangkan Insig-2 SCAP, SREBP-
2 diperoleh dari Santa Cruz Bioteknologi (Santa Cruz, CA, USA). Trizol reagen dibeli
dari teknologi kehidupan (Gaithersburg, MD, USA). Internal standar -aktin antibodi

3
dibeli dari Proteintech. Selain itu, uji kit enzyme-linked immunosorbent untuk
progesteron, corticosterone dan insulin tes dibeli dari antibodi-secara online
(Shanghai, Cina)
Persiapan larutan obat
Di hadapan tdk dpt, CLO (4,2 mg ml-1), RIS (0,2 mg ml-1) dan ARI (0,4 mg
ml -1) awalnya dilarutkan dalam 0,5% (v / v) asam asetat dan kembali ditangguhkan-
menjadi 10% (v / v) larutan garam 0,9% yang mengandung 0,5% Tween 80.
Kemudian, konsentrasi akhir telah disesuaikan dengan larutan garam 0,9% tambahan
yang mengandung 0,5% tween 80 dan pH diatur antara 5,6 dan 6,0 menggunakan
NaOH 0,1 M solusi. HAL (0,2 mg ml-1) dan SER (1,4 mg ml-1) secara langsung
dilarutkan dalam 0,9% salin yang mengandung 0,5% tween 80. MIF (40 mg ml-1)
disiapkan sebagai suspensi menggunakan 0,2% tween 80 dilarutkan dalam air steril
yang mengandung 0,2% karboksimetilselulosa.
Hewan
Untuk menghindari fluktuasi progesteron selama siklus menstruasi, hanya
laki-laki tikus Sprague Dawley-yang digunakan dalam penelitian ini. The Sprague
Dawley-tikus dengan berat 150-200 g dibeli dari Rumah Sakit Xiangya kedua. Semua
tikus dipertahankan pada 22-25 c dan kelembaban 50-60% di bawah / siklus gelap
12-h ringan dengan akses gratis ke komersial tikus chow (SLAC Laboratorium
Hewan, Sanghai, Cina) dan air. Mereka diaklimatisasi selama satu minggu sebelum
eksperimen. Setiap tikus ditempatkan dalam kandang yang terpisah dan direkam
dengan berat badan dan asupan makanan sehari-hari. Dosis obat disesuaikan dengan
berat badan berubah setiap hari. Protokol penelitian menggunakan hewan telah
disetujui oleh Komite Etika lokal Universitas Tengah Selatan. Semua prosedur
eksperimental sesuai dengan Deklarasi Helsinki dan Peraturan of Experimental
Administrasi Hewan, yang diterbitkan oleh Komite Negara Sains dan Teknologi
Republik Rakyat Cina.
Pengaruh antipsikotik pada PGRMC1 hati / Insig / SCAP / SREBP jalur
Pada seri pertama percobaan (Tambahan Tabel 1), 42 tikus secara acak dibagi
menjadi enam kelompok (n = 7) diobati dengan obat antipsikotik yang berbeda: (1)
kontrol normal (NC), (2) SER, (3) HAL, (4) ARI, (5) RIS dan (6) CLO. Mereka

4
diberikan injeksi intraperitoneal kendaraan (0,9% garam yang mengandung 0,5%
Tween 80), SER (7 mg kg-1 per hari), HAL (1mg kg-1 per hari) ARI (2 mg kg-1 per
hari), RIS (1mg kg-1 per hari) atau CLO (21 mg kg-1 per hari) pada awal dan setiap
hari selama 4 minggu. Dosis untuk antipsikotik yang digunakan pada tikus yang
dikonversi dari dosis klinis ditentukan dengan menggunakan metode luas normalisasi
permukaan tubuh. Dosis manusia-setara mereka untuk orang-60 kg adalah 70mg / hari
untuk SER, 10 mg / hari untuk HAL, 20mg / hari untuk ISPA. 10mg / hari untuk RIS
dan 200mg / hari selama CLO. Seperti tikus secara signifikan lebih pendek paruh
antipsikotik dibandingkan dengan manusia, kita dimaksudkan untuk menggunakan
dosis obat yang relatif tinggi untuk menantang sistem SREBP dan untuk
mengkompensasi clearance cepat AAPDs pada tikus, dengan tujuan mendeteksi
respon transkripsi ditandai. HAL dan RIS dipilih pada akhir dosis atas, sedangkan
ISPA adalah chosenat dosis menengah karena bukti menunjukkan bahwa dosis lebih
20mg / hari tidak memberikan manfaat tambahan. Dalam percobaan awal kami, kami
memilih 450mg / hari CLO (setara dengan 46mg kg-1 per hari untuk tikus) dan
menemukan bahwa tikus tidak bisa mentolerir seperti dosis tinggi dalam jangka waktu
studi 4 minggu. Oleh karena itu, kami akhirnya memilih dosis pemeliharaan rendah
dari 200 mg / hari CLO untuk memastikan tingkat kelangsungan hidup kelompok
CLO. Tikus dipuasakan selama 12 jam sebelum dibunuh. Sampel diambil dari hati
median lobus dan beku-dijepit segera dalam nitrogen cair sebelum penyimpanan pada
-80 C. darah trunkal dikumpulkan dalam tabung vakum. Serum dipisahkan dari
seluruh darah dengan sentrifugasi pada 3600 g selama 7 menit pada 4 C dan
disimpan di bawah -80 C sebelum tes laboratorium.

Efek dari add-on perawatan MIF pada PGRMC1 hati / Insig / SCAP / SREBP
jalur
Pada seri kedua percobaan (Tambahan Tabel 1), 42 tikus secara acak
ditugaskan untuk salah satu dari enam grup berikut (n = 7 masing-masing): (1) NC
(kendaraan), (2) MIF (saja), (3) CLO, (4) CLO + MIF, (5) RIS dan (6) RIS + MIF.
The (3) CLO dan RIS (4) kelompok pertama diberikan injeksi intraperitoneal saja dari
dosis yang sama seperti yang dijelaskan dalam seri pertama dari eksperimen. Di add-

5
on eksperimen (empat dan enam kelompok) itu, MIF (200 mg kg-1 per hari) diberikan
secara gavage oral harian. NC kelompok kendaraan menerima baik injeksi
intraperitoneal 0,9% garam yang mengandung 0,5% Tween 80 dan gavage oral 0,2%
karboksimetilselulosa dan 0,2% Tween 80 dilarutkan dalam air steril. Eksperimental
selama dan prosedur sampling yang identik dengan seri pertama dari eksperimen.

Real-time qPCR
Untuk real-time PCR kuantitatif (qPCR) analisis, RNA total dari jaringan hati
diisolasi menggunakan reagen Trizol berikut protokol produsen. Setelah konfirmasi
kemurnian secara spektrofotometri, kuantifikasi mRNA dilakukan pada Biorad Cx96
Detection System (Hercules, CA, USA) dengan menggunakan SYBR green PCR kit
(Applied Biosystems Foster City, CA, USA) dan primer-gen tertentu. DNA
komplementer (cDNA; 5 ng) sampel yang digunakan dengan 40 siklus amplifikasi
dan setiap cDNA diuji dalam rangkap tiga. Kuantisasi relatif untuk produk PCR
dinormalisasi menggunakan standar internal -aktin. Urutan primer-gen tertentu yang
diringkas dalam Tambahan tabel 2.

Analisis Western blot

Untuk percobaan Barat blot, total protein dibuat dari 100 mg jaringan dan
konsentrasi diukur menggunakan metode Bradford. Sekitar protein 50g itu dimuat ke
pracetak 12% natrium dodesil sulfat-poliakrilamida gel elektroforesis gel. Semua
antibodi diencerkan dengan benar (PGRMC1, 1: 1500;-Insig 1, 1: 1000; Insig-2, 1:
200; SCAP, 1: 200;-SREBP 1, 1: 200, dan SREBP-2, 1: 500) sebelum digunakan.
Semua membran yang kemudian diperiksa dengan 1: 4000 pengenceran antibodi -
aktin. Sinyal Film secara digital scan dan kemudian dikuantifikasi dengan
menggunakan software image J (National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA).
Sinyal yang dinormalisasi menggunakan -aktin sebagai standar internal.

Tes biokimia
Kadar serum progesteron, corticosterone dan insulin ditentukan dalam rangkap
menggunakan enzim-linked immunosorbent assay kit komersial. Trigliserida serum,

6
kolesterol total dan FFA diukur dengan menggunakan Arsitek C8000 otomatis
Biochemical Analyzer (Abbott, Wiesbaden, Jerman) di laboratorium klinis di Ruma
Sakit Xiangya Kedua.
Analisis statistik
Data dinyatakan sebagai sarana dan sd dan dianalisis menggunakan paket
perangkat lunak SPSS 19.0 (SPSS, Chicago, IL, USA). Perubahan berat badan dan
asupan makanan dibandingkan di kelompok menggunakan langkah-langkah analisis
ulang dari model berbeda dengan t-test Dunnett untuk post hoc perbandingan. Model
ini termasuk kelompok perlakuan sebagai antara faktor subjek dan waktu sebagai
faktor dalam subyek. Karena sampel kecil dan varians non-terdistribusi normal,
perbedaan relatif mRNA dan ekspresi protein serta parameter biokimia serum di
seluruh kelompok pada titik akhir ditentukan dengan menggunakan Kruskal-Wallis
analisis satu arah nonparametrik varians diikuti oleh beberapa perbandingan
berpasangan. Tingkat signifikansi didirikan pada P <0,05.

HASIL

Perubahan berat badan dan asupan makanan setelah AAPDs atau pengobatan MIF
Keduanya berat badan dan asupan makanan dicatat setiap hari berikut 4 minggu
pengobatan berbagai obat antipsikotik serta sebagai pengobatan tambahan MIF.
Persentase rata-rata mingguan berat badan dan akumulasi asupan makanan yang
ditampilkan di Gambar Tambahan 1a-d, berturut-turut. Persentasi berat badan lebih
rendah ditemukan signifikan pada kelompok CLO setelah 2- dan Pengobatan 28 hari
dibandingkan pada mereka dari kelompok NC. Demikian pula, pengurangan
akumulasi asupan makanan secara signifikan juga ditemukan di CLO- Tikus diobati.
Tidak ada perbedaan signifikan baik berat badan atau diet asupan antara kelompok
perlakuan lainnya (Gambar Tambahan 1a dan b). Setelah 4 minggu pengaya
pengobatan MIF, tidak berat badan (Tambahan Gambar 1c) atau asupan makanan
(Tambahan Gambar 1d) secara signifikan diubah oleh antagonis MIF steroid.

Efek obat antipsikotik pada parameter serum metabolik

Serum lipid utama dan kadar hormon ditentukan setelah pengobatan 4 minggu dengan
AAPDs dibandingkan dengan NCS dan kelompok SER (antidepresan). Kedua
kelompok CLO dan RIS memiliki peningkatan yang signifikan dalam trigliserida
serum, kolesterol total, FFA, progesteron dan corticosterone tingkat dibandingkan
kelompok NC (Tabel 1). Di sisi lain, tidak ada yang signifikan perubahan parameter

7
serum ini antara kelompok NC dan HAL (atau ARI). Demikian pula, tidak ada
perubahan yang signifikan antara NC dan kelompok SER. Selain itu, kadar insulin
serum tetap dasarnya sama di antara semua kelompok.

Efek dari perawatan tambahan MIF pada parameter serum metabolik

Tidak ada perubahan yang signifikan dari kedua lipid serum dan parameter hormon
antara kelompok NC dan MIF-pengobatan-sendiri (Tabel 1). Sesuai dengan temuan
kami di atas, besar parameter metabolik serum meningkat signifikan di kedua
kelompok CLO dan RIS. Setelah pengobatan tambahan dengan MIF, Namun,
parameter lipid utama yang drastis berkurang. Menariknya, progesteron serum dan
kortikosteron tetap di tingkat tinggi. Sekali lagi, tidak ada perubahan yang signifikan
kadar insulin puasa di antara semua kelompok.

Efek modulator diferensial dari antipsikotik pada jalur hati

PGRMC1/INSIG/SCAP/SREBP Untuk mengeksplorasi efek modulator potensi
berbagai antipsikotik digunakan untuk SZ pada jalur PGRMC1/INSIG/SCAP/SREBP,
gen hati (Gambar 2a dan b) dari enam faktor kunci (yaitu, PGRMC1, INSIG -1,
INSIG -2, SCAP, SREBP-1 dan SREBP-2) yang dibandingkan setelah 4 minggu
pengobatan antipsikotik.
Dalam kelompok CLO dan RIS, ekspresi PGRMC1 dan INSIG -2 secara
signifikan berkurang tanpa mempengaruhi INSIG -1 (Gambar 2a), sedangkan
ekspresi SCAP/REBP yang nyata meningkat (Gambar 2b) dibandingkan dengan
kelompok NC. Di samping itu, tidak ada perubahan yang signifikan dari ekspresi
mRNA relative enam faktor telah diuji antara kelompok NC dan HAL (atau ARI).
Untuk memverifikasi apakah ekspresi gen dari enam regulator kunci
perubahan lebih lanjut yang disebabkan dalam ekspresi protein mereka, percobaan
western blot juga dilakukan pada tikus setelah pengobatan antipsikotik (Gambar 3).
Demikian pula, CLO dan RIS penyebab penurunan yang signifikan dalam ekspresi
protein dari PGRMC1 (Gambar 3a) dan INSIG-2 (Gambar 3c), dan peningkatan yang
signifikan dalam ekspresi protein dari SCAP/SREBP (Gambar 3d dan f) sebagai
perbandingan dengan NC. Sekali lagi, tidak ada ekspresi uji protein yang signifikan
dipengaruhi oleh ARI atau HAL (Gambar 3a-f).
Karena tidak ada pengaruh yang signifikan dari SER pada asupan makanan
dan berat badan (Tambahan Gambar 1) serta tingkat parameter lipid dan hormon
(Tabel 1), qPCR dan Percobaan western blot dihilangkan dari kelompok SER ini.

Peningkatan ekspresi hati PGRMC1/INSIG-2 oleh pengobatan tambahan MIF

Sesuai dengan data kami di atas, PGRMC1/INSIG-2 gen ekspresi secara signifikan
berkurang pada kedua kelompok CLO dan RIS (Gambar 2c), sedangkan ekspresi
SCAP/SREBP yang nyata meningkat (Gambar 2d). Setelah pengobatan tambahan
MIF, bagaimanapun, baik berkurangnya PGRMC1/INSIG-2 dan meningkatnya

8
Ekspresi SCAP/SREBP tampaknya dinormalisasi tanpa mempengaruhi INSIG-1
(Gambar 2c dan d).
Mirip dengan ekspresi gen, pengobatan tambahan MIF yang signifikan
membalikkan efek dari penurunan PGRMC1/INSIG -2 (Gambar 4a dan c) dan
peningkatan SCAP/SREBP (Gambar 4d-f) ekspresi protein baik kelompok CLO atau
RIS. Tidak ada yang perubahan signifikan dari semua ekspresi uji protein di
kelompok pengobatan MIF sendiri (Gambar 4a-f).

DISKUSI

Pengaruh AAPDs dan penambahan terapi MIF pada kenaikan berat badan dan
asupan makanan. Dalam penelitian ini, tidak ada kenaikan berat badan yang
signifikan atau asupan makanan yang meningkat pada tikus jantan setelah pengobatan
28 hari dari semua obat antipsikotik diuji (Gambar Tambahan 1a dan b) serta
penambahan pengobatan MIF (Tambahan Gambar 1c dan d). Secara umum, temuan
kami yang sesuai dengan hewan merekastudi yang dilakukan dalam pengobatan
kurang dari 1 bulan dengan AAPDs seperti olanzapine, CLO atau obat antipsikotik
khas lainnya. Sebaliknya, persentase kenaikan berat badan dan akumulasi asupan
makanan yang secara signifikan berkurang berikut 21- dan 28-hari terapi dari CLO
(Tambahan Gambar 1a dan b).
Demikian pula, Baptista et al.36 juga menunjukkan signifikan pengurangan
kan dalam tubuhberat badan dan makan pada tikus jantan setelah 21 hari pengobatan
CLO dengan dosis yang sama dengan studi kita sekarang (-20mg/kg); Namun, itu
adalahdianggap sebagai efek toksik. Hal demikian diduga bahwa tikus

9
jantantampaknya lebih sensitif terhadap efek toksik dari CLO dibandingkantikus
wanita.
Di sisi lain, tikus wanita lebih rentan terhadap kenaikan berat badan diinduksi
AAPD. Selain itu, tikus laki-laki dengan dosis rendah AAPD tampaknya lebih efektif
dalam kenaikan berat badan dan peningkatan asupan makanan dibandingkan dengan
pemberian dosis tinggi AAPD. Namun, dosis rendah seperti itu tidak
mempunyaiklinikal relevancies.
Pada pria sehat, namun, ada kenaikan berat badan signifikan ataupeningkatan
lingkar pinggang dalam jangka pendek (1 bulan), pengobatan AAPDs (misalnya,
olanzapine atau resperdone) .Demikian pula, pasien SZ menerima AAPDs (secara
khusus CLO danolanzapine) juga menunjukkan masalahsignifikan dengan obesitas
dan MetS. Perbedaan antara manusia dan hewan mungkinhasil dari perbedaan dosis
AAPD ini, asupan makanan, usia atau jenis kelamin.
Namun demikian, temuan ini menunjukkanpeninggian signifikan dari
parameter metabolik oleh AAPDs yang terjadi sebelum adanya kenaikan berat badan
yang sebenarnya, yang memberikan asosiasi temporal antara obat AAPD dan
konsekuensi metabolik. Bersama-sama, data hewan kami mendukung gagasan
bahwapemberian akut AAPDs memberikan sebuah efek yang kuat pada regulasi
metabolisme, yang dapat berkontribusi untuk Sindrom Metabolik terlihat di manusia.

Overexpression SCAP / SREBP oleh AAPDs

Seperti diilustrasikan dalam Gambar 1a, yang SREBPs yang sentral dalam
pengendalian alosterik dari berbagai lipid biosintesis pathways. Penelitian
sebelumnya oleh Ferno dan colleagues telah menunjukkan bahwaAAPDs seperti
CLO, Olanzapine atau RIS nyata meningkatkan ekspresi dari kedua-SREBP 1 dan
SREBP-2 serta terkait gen target mereka mengatur de novo lipid dan sintesis
kolesterol dalam hepatosit. Selain gen SREBP meningkat (Gambar 2b) dan protein
(Gambar 3e dan f) ekspresi, data kami hadir mendemonstrasikan peningkatan
parameter lipid(Tabel 1) memberikan dukungan lebih lanjut bahwa SREBPs hati over-
dinyatakan dalam pidogrel atau RIS-diperlakukan rats.
The stearoil-CoA desaturase (SCD1) adalah enzim limited-rateyang
mengkatalisis konversi asam lemak rantai panjang jenuh menjadi asam lemak tak
jenuh tunggal yang diperlukan untukbiosintesis triasilgliserol de novo, fosfolipid dan
kolesterol esters. Ini adalah target faktor transkripsi SREBP dan terlibat langsung
dalam lipid homeostasis. Sejumlah penelitian telah menemukanbahwa obat AAPD
berbeda ekspresi peningkatan regulasi kontrol SREBP downstream termasuk SCD1.
Mereka sesuai dengan temuan kamiyaitu CLO- atau RIS-diinduksi aktivasi SREBP
mengarah ke peningkatan tingkat lipid, yang dimediasi melalui efek SREBP pada
SCD1 dan gen target lainnya. Dalam studi ini, kami terutama difokuskan pada
mekanisme pengaturan upstream SREBP.

10
 SCAP, protein transport yang mengawal besarbesaran-SREBPs dari ER ke
Golgi aparatus (Gambar 1a), adalah penting selama proses aktivasi SREBP, dan
aktivasi bisa menginduksi sintesis lipid di hati. Gambar 2b dan 3d menunjukkan
bahwa aktivasi SREBP disertai oleh SCAP upregulation mengikuti terapi CLO atau
RIS. Temuan kami menunjukkan bahwa dengan demikian pengaruh AAPD yang
sudah mendahului proses pematangan proteolitik mereka dalam aparatus Golgi.

11
Progesteronereceptorandantipsychotics-induceddyslipidemiaHLCaietal
5

Supresi INSIG-2 gen dan protein oleh AAPDs

INSIG adalah regulator negatif SCAP / SREBP. Menanggapi penghambatan INSIG, SCAP
dilepaskan untuk mengawal SREBP ke aparatus Golgi untuk di aktivasi. Untuk mendukung
temuan sebelumnya bahwa gen INSIG-2 mungkin terkait dengan Mets pada pasien SZ setelah
pengobatan antipsikotik. Data kami hadir memberikan bukti lebih lanjut bahwa protein INSIG-2
daripada INSIG-1 ditekan dalam hati tikus setelah pengobatan dengan baik CLO atau RIS
(Gambar 2a dan 3b, c).
Hal ini juga diketahui bahwa ekspresi INSIG-2 dapat diregulasi oleh insulin dihati. Bertentangan
dengan data kami menunjukkan pengurangan signifikan ekspresi INSIG-2 , tingkat insulin tidak
diubah secara signifikan dari CLO atau RIS yang sama di kelompok terapi (Tabel 1). Paradoks
ini menunjukkan bahwa faktor tambahan dapat menyumbang penguranganekspresi INSIG
diinduksi-AAPD.

Peran PGRMC1 Di SREBP Aktivasi Diinduksi-AAPD

Seperti diilustrasikan dalam Gambar 1a, PGRMC1 adalah reseptor progesteronmembran
komponen 1 yang mengikat INSIGs dan SCAP. Dalam data ini, ekspresi hati dari PGRMC1

12
adalahmenurunkan regulasi secara paralel dengan penurunan ekspresiINSIG-2 ekspresi (Gambar
2a dan 3a, c), yang didukung peran dari PGRMC1 dalam regulasi INSIGs selama terapi CLO
atau RIS.
Selain peningkatan dari parameter lipid, juga meningkatnya kadar progesteron serum dan
kortikosteron pada kelompok terapi CLO dan RIS-diobati (Tabel 1), yang dapat berkontribusi
untuk supresi pengiriman signal.

Regulasi Jalur PGRMC1 Oleh Penambahan TerapiMIF

Kortisol adalah hormon glukokortikoid, yang dapat dimetabolisme untuk11-

hydroxyglucocorticoid oleh 11-hidroksisteroid dehydrogen-ase system. Sistem enzim ini
berlimpah hadir dalamhati dan jaringan adiposa, yang dianggap sebagai faktor etiologi
menghubungkan obesitas dan terkait Sindrom Metabolik.
Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa MIF, antagonis glukokortikoid kuat, mampu
membalikkan kenaikan berat badan yang ditampilkan ditikus muda obese fa/fa Zucker .
Beberapa penelitian terbaru tealh mengkonfirmasi lebih jauh efek MIF dalam mengurangi atau
mencegah kenaikan berat badan diinduksi-AAPD di subjek yang sehat, serta di tikus
juga.Namun, mekanisme yang tepat yang mendasari kenaikan berat badan diinduksi-AAPD
masih belum jelas.
Dalam penelitian ini, data kami menunjukkan bahwa kedua CLO dan RIS secara berarti
mengurangi ekspresi PGRMC1 (Gambar 2a dan 3a) dan, kemudian, menyebabkan perubahan
dalam jalur INSIG / SCAP / SREBP (Gambar 2a, b dan 3c-f) . Setelah penambahan terapi MIF p,
bagaimanapun, perubahan tersebut dalam PGRMC1 dan INSIG jalur / SCAP / SREBP terkait
terbalik di kedua kelompok CLO dan RIS (Angka 2c, d dan 4a, c-f). Dengan demikian, ada
kemungkinan bahwa jalur PGRMC1 mungkin sebagai target terapi untuk kenaikan berat badan
diinduksi-AAPD (Gambar 1b). Selain itu, PGRMC1, INSIGs, SCAP dan SREBPs terkait secara
dinamis bersama-sama dalam biosintesis lipid diinduksi AAPD serta aksi anti-lipogenik juga.
Sesuai dengan perubahan ekspresi PGRMC1, penambahan terapi MIF juga secara
signifikan mengurangi tingkat CLO- atau RIS- diinduksi parameter lipid (Tabel 1). Sebelumnya,
Takaishi et al. menunjukkan bahwa ekspresi berlebihhepatik INSIG-1 atau -2 dapat dikaitkan
dengan pengurangan lipogenesis di tikus obesitas diabetes Zucker dan tikus normal yang dalam
berpuasa / diberi makan.
Data kami, bagaimanapun, menunjukkan bahwa ekspresi INSIG-2, tidak INSIG-1, adalah
mengurang secara asignifikan dengan antipsikorik CLO- atau RIS- (Gambar 2a dan 3b, c).
Setelah penambahan terapi MIF, hanya INSIG-2 (Angka 2c dan 4c) yang diregulasi,
menunjukkan bahwa PGRMC1 / INSIG-2 mungkin menjadi target terapi untuk risiko
kardiovaskular diinduksi AAPD untuk jangka panjang.
Sebelumnya, Beebe et al.21 telah menunjukkan kenaikan berat badan yang
signifikanpada tikuswanita Sprague Dawley setelah 35 hari pengobatan Olanzapine
dibandingkan dengan kontrol. Mengikuti penambahan terapi MIF, bagaimanapun, sebagian

13
kenaikan berat badan diinduksi Olanzapinemenghilang, menunjukkan bahwa MIF dapat
mengurangi berat badan dengan menghalangi efek reseptor glukokortikoid.
Dalam penelitian ini, untuk menghindari fluktuasi hormon progesteron selama siklus
menstruasi, maka hanya tikus jantan yang digunakan. Tidak ada peningkatan yang jelas dari
berat badan atau asupan makanan di kelompok CLO, RIS, MIF-sendiri atau kelompok
penambahan terapi MIF (Gambar Tambahan 1c dan d). Kurangnya penambahan berat badan
mungkin karena perbedaan gender. Di sisi lain, tidak jelas mengapa serum CLO atau RIS
penguat tingkat progesteron dan kortikosteron tidak terpengaruh oleh antagonis reseptor steroid
(Tabel 1).

14
.

Singkatnya, data kami menunjukkan secara signifikan meningkatkan hepatik ekspresi

dari SCAP / SREBP dan penghambatan paralel PGRMC1 / INSIG-2, dimana kadar serum lipid
dan parameter hormon yang meningkat nyata di kelompok tikus terapi CLO- atau RIS-.
Gangguan metabolisme seperti, bagaimanapun, dapat dimodifikasi dengan penambahan
terapi pengobatan antagonis steroid MIF, menunjukkan bahwa sinyal PGRMC1 / INSIG-2
mungkin menjadi sasaran terapi untuk kenaikan berat badan diinduksi AAPD.

15