Tujuan: Mengetahui khasiat antidiabetes dan antioksidan Peperomia pellucida

(P. pellucida) pada tikus diabetes yang diinduksi alloxan. Metode: Selain tikus chow, ada dua diet

dirancang untuk mengandung 10% b / b dan 20% b / b P. pellucida sebagai suplemen masing-masing.
Diabetes

diinduksi dalam kelompok lima tikus albino jantan dengan satu suntikan intraperitoneal alloxan.

Dua kelompok tikus diabetes dan tikus normo masing-masing diberi makan satu dari makanan ini,
sementara

Dua kelompok lainnya masing-masing berfungsi sebagai kontrol positif dan negatif. Kelompok ketujuh
adalah

diberi makan tikus bergeret. Hasil: Tikus diabetes pada diet ditambah dengan 10% b / b dan

20% b / b P. pellucida untuk 28 d mengakibatkan penurunan kadar glukosa darah. Tingkat totalnya

kolesterol serum, trigliserida dan kolesterol LDL menurun secara signifikan (P <0,05) dengan

suplemen diet dibandingkan dengan tikus diabetes yang tidak diobati. Juga pengobatan dengan
glibenklamid

dan P. pellucida (10% dan 20% b / b) menyebabkan peningkatan aktivitas SOD, CAT dan GSH.

Ada penurunan signifikan (P <0,05) pada tingkat aktivitas kolesterol HDL, Katalase, SOD
dan konsentrasi GSH pada tikus diabetes yang tidak diobati. Diet tambahan secara signifikan (P <0,05)

mengurangi peroksidasi lipid, yang meningkat pada tikus diabetes yang tidak diobati. Penurunan yang
signifikan

(P <0,05) dalam aktivitas AST, ALT dan ALP juga diamati pada tikus yang diberi makan P. pellucida

melengkapi diet Kesimpulan: Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa P. pellucida memiliki

sifat antidiabetes dan antioksidan pada diabetes melitus eksperimental dan dengan demikian
membenarkan

penggunaan antidiabetes tradisional yang diakui.

1. Perkenalan

Diabetes melitus merupakan masalah kesehatan masyarakat yang utama di Indonesia

dikembangkan serta negara berkembang. Ini adalah peringkat sebagai

penyebab ketujuh kematian di dunia dan ketiga saat

Ini adalah komplikasi fatal yang dipertimbangkan [1]. Saya t

adalah penyakit yang ditandai dengan hiperglikemia kronis dan

glukosuria yang dihasilkan oleh insufisiensi absolut atau relatif

dari insulin. Penyakit bisa berakibat pada perkembangan

gangguan metabolisme dan anatomi lebih lanjut

adalah lipemia, hiperkolesterolemia, penurunan berat badan, ketosis,

arteriosklerosis, dan gangren, perubahan patologis pada

mata, neuropati, penyakit ginjal dan koma [2,3]. Yang diketahui

bahwa diabetes adalah suatu kondisi di dalam tubuh dimana beta

Sel-sel pulau Langerhans di pankreas tidak

menghasilkan cukup insulin dan / atau reseptor insulin

tidak bekerja dengan baik Hal ini berakibat pada persediaan yang tidak memadai

insulin dan karena itu kadar glukosa darah meningkat. Itu

Gejala diabetes meliputi peningkatan glukosa darah;

nafsu makan meningkat dan haus, penurunan berat badan yang tidak dapat dijelaskan,
kelemahan, penurunan tekanan darah dan penglihatan kabur [4].

Diabetes juga terkait dengan oksidatif yang signifikan

stres yang telah dilaporkan menjadi kontributor utama

faktor terhadap beberapa komplikasi diabetes [5]. Oksigen aktif

spesies (ROS) adalah bagian penting dari mekanisme pertahanan

terhadap infeksi, namun generasi yang berlebihan telah terjadi

terlibat dalam patogenesis penyakit vaskular [6-8].

Pasien diabetes memiliki peningkatan kejadian vaskular

penyakit dan telah menunjukkan bahwa aktivitas radikal bebas meningkat selama diabetes [9,10].
Meningkatnya stres oksidatif

juga telah diusulkan untuk menjadi salah satu penyebab utama

pemicu diabetes yang disebabkan oleh hiperglikemia.

Hyperglycemia merangsang pembentukan ROS dari berbagai macam

sumber. Sumber-sumber ini termasuk fosforilasi oksidatif,

autooksidasi glukosa, NAD (P) H oksidase, lipooksigenase,

sitokrom P450 monooxygenases, dan nitrat oksida sintase.

Tingkat normal mekanisme pertahanan antioksidan tidak

cukup untuk pemberantasan luka akibat radikal bebas,

Oleh karena itu administrasi antioksidan dari alam

asal memiliki peran yang menjanjikan untuk bermain. Beberapa antioksidan

bahan tanaman dikonfirmasi secara eksperimental dan luas

Digunakan sebagai agen yang lebih efektif melawan stres oksidatif.

Peperomia pellucida (P. pellucida) (L.) HBK (Piperaceae) adalah

dikenal di Nigeria sebagai semak mengkilap atau riri dan digunakan

lokal untuk hipertensi, diabetes dan umumnya sebagai tonik untuk

kesehatan sehat. Ini adalah tanaman herba dengan sukulen

daun alternatif dan daun bulat telur, dengan terminal dan aksila

Efloresensi, di sisi berlawanan dari daun, berkembang

baik di tanah longgar dan lembab oleh bayangan pohon [13]. Dalam rakyat

obat-obatan, spesies ini digunakan pada abses, furuncles,

dan luka kulit, juga peradangan mata (konjungtivitis).

Data literatur mengkonfirmasi antimikroba dan analgesik

Efeknya termasuk aktivitas lain, seperti antiinflamasi

efek [14,15]. Studi fitokimia menunjukkan adanya

dill-apiol dan pellucidin A, di P. pellucida [16]. Saat ini

Penelitian bertujuan untuk menyelidiki antidiabetes dan antioksidan

efek P. pellucida pada tikus diabetes yang diinduksi alloxan.

2. Bahan dan metode

2.1. Persiapan bahan tanaman

Daun segar P. pellucida dikumpulkan dari

lingkungan Universitas Ibadan, Ibadan, Nigeria. Mereka

diinspirasikan di Herbarium, Departemen Botani,

Universitas Ibadan, Ibadan, Nigeria. Daunnya terasa segar

dikeringkan di bawah kondisi laboratorium dan digiling sampai bubuk

bentuk. Bubuk halus disimpan dalam wadah kedap udara di

suhu kamar sampai pemakaian. 100 g dan 200 g P. pellucida

ditambah dengan 900 g dan 800 g tikus standar

pakan (pakan Ladokun, Ibadan) untuk mendapatkan 10% dan 20% b / b dari

masing suplemen tanaman.

2.2. Bahan kimia

Alloxan diperoleh dari dibeli dari Sigma

Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). Semua bahan kimia lainnya dan

Obat yang digunakan dalam penelitian ini adalah analitik dan

kualitas paling murni yang tersedia.

2.3. Binatang

Tikus albino jantan strain Wistar dengan berat sekitar 150-200 g

diperoleh dari fakultas Kedokteran Hewan, Universitas

dari Ibadan, Ibadan, Nigeria digunakan untuk penelitian ini. Mereka

diberi makan diet pelet tikus standar (Ladokun Feeds, Nigeria)

dan air diberi ad libitum. Mereka dipertahankan

di bawah kondisi laboratorium standar dan dikenai

untuk photoperiod alami dari 12 jam cahaya: siklus gelap. Kelompok satu

Hewan diberi garam fisiologis pada usia 10

mL / kg berat badan dan berfungsi sebagai kontrol. Eksperimental

protokol sesuai dengan "Prinsip Laboratorium Hewan

Care "(publikasi NIH No 85-23).

2.4. Alloxan Menginduksi diabetes

Diabetes diinduksi dengan injeksi tunggal (I.P) 100 mg / kg

dari alloxan monohydrate Setelah 72 jam injeksi alloxan,

Tikus diabetes (kadar glukosa> 250 mg / dL) dipisahkan dan

digunakan untuk penelitian.

2.5. Persiapan obat referensi

Obat referensi, Glibenclamide (Clamide by hovid,

Malaysia) dibeli dari Danax Pharmaceuticals, a

ahli kimia lokal di Ibadan, Nigeria. Itu diberikan secara lisan

ke kelompok obat standar setiap hari. Obat itu dibubarkan

baru dalam kadar garam normal dan volume yang sesuai diberikan

untuk binatang tergantung pada berat badan mereka. Hewan-hewan itu

diberi 600 g / kg berat badan bahan aktif.

2.6. Desain eksperimental

Sebanyak 35 tikus digunakan. Tikus-tikus itu acak-acakan

didistribusikan ke dalam tujuh kelompok dari lima tikus masing-masing.

Grup A - menerima air; pakan standar dan disajikan sebagai

Kontrol normal (10 mL / kg bb)

Kelompok B - Normal + 10% b / b P. pellucida

Kelompok C - Normal + 20% b / b P. pellucida

Kelompok D - Kontrol diabetes

Kelompok E - Diabetic + 600 g / kg berat badan glibenklamid

(obat standar)
Kelompok F - Diabetik + 10% b / b P. pellucida

Kelompok G - Diabetes + 20% b / b P. pellucida

Tikus diobati selama empat minggu setelahnya

dikorbankan oleh pemenggalan leher rahim. Plasma dikumpulkan

setelah sentrifugasi sampel darah yang dikumpulkan pada 3.000 g

selama 10 menit di MSC bench centrifuge (Beckman dan Hirsch,

Burlington, 10, USA).

Hati dari binatang dilepaskan dan dibilas di es

- isotonik dingin, larutan KCl 1.15%. Sampel hati itu

Dihomogenkan dalam empat kali fosfat isotonik es dingin

buffer, pH 7,4 dan disentrifugasi pada 10.000 g selama 15 menit

dapatkan fraksi mitokondria pos (PMF). Kedua plasma

dan aliquot PMF disimpan pada -4 sampai digunakan.

2.7. Analisis biokimia

Glukosa darah ditentukan oleh Glucose Oxidase

metode yang dijelaskan oleh NCCLS [17]. Total kolesterol plasma

ditentukan oleh Roeschlau et al [18], trigliserida plasma

dengan metode kolorimetri enzimatik menggunakan Randox Kit [19].

Plasma HDL diuji dengan metode Lopes-Virella et

Al [20] plasma LDL [21] plasma alanin aminotransferase (ALT)

dan aktivitas aminotransferase aspartat telah ditentukan

dengan mengikuti metode Reitman dan Frankel [22], menggunakan

Kit Randox, aktivitas Alkaline Phosphatase (ALP) adalah

ditentukan dengan metode DGKC yang optimal menggunakan Randox

kit. Supernatan diperoleh dari hati yang disentrifugasi

homogenat digunakan untuk uji biokimia berikut ini:

superoksida dismutase (SOD), katalase, mengurangi glutathione

(GSH) dan peroksidasi lipid (LPO) [23-26].

2.8. Analisis statistik

Semua nilai dinyatakan sebagai mean S.E.M. Data itu

dianalisis dengan analisis varians satu arah (ANOVA) diikuti

oleh Newman-Keuls beberapa tes perbandingan. Perbedaan

sarana dianggap signifikan pada P <0,05

Perangkat lunak Graph-Pad Prism Prism versi 4.00 untuk Windows,

GraphPad Software, San Diego California USA, "www.

graphpad.com. "

3.Results

Efek hipoglikemik dari P. pellucida melengkapi diet

ditunjukkan pada Gambar 1.

Gambar 1. Pengaruh P. pellucida terhadap kadar glukosa darah secara normal

dan tikus diabetes yang diinduksi alloxan. Hasil dinyatakan sebagai Mean

Standar deviasi, n = 5.

* P <0,05 antara kadar glukosa darah pada minggu ke 0 dan minggu ke 4 di masing-masing

kelompok; Sebuah

P <0,05 antara kadar glukosa darah pada minggu ke 4 dari masing-masing kelompok

dan akhir kontrol normal; b

P <0,05 antara kontrol diabetes dan

kelompok diabetes.

Peningkatan glukosa darah diamati pada penderita diabetes

mengendalikan tikus dibandingkan dengan kontrol normal saat pengobatan dengan

glibenklamid, P. pellucida dengan diet 10% b / b dan 20% b / b

Suplementasi menghasilkan penurunan kadar glukosa darah masing-masing sebesar 62%, 64% dan 68%.

Telah diamati bahwa kadar kolesterol total,

trigliserida dan kolesterol LDL kecuali kolesterol HDL

secara signifikan (P <0,05) lebih tinggi jika terjadi aloksan

hewan hiperglikemik (kontrol diabetes) bila dibandingkan

dengan kontrol normal (kelompok 1) hewan sedangkan nilai

Parameter lipid plasma yang disebutkan di atas mendekati

normal dalam kasus hewan yang mendapat glibenklamid dan diet

ditambah dengan P. pellucida 10% dan 20%. Namun,

Kolesterol HDL meningkat secara signifikan pada kelompok ini

dibandingkan dengan kontrol diabetes (Tabel 1).

Tabel 2 menunjukkan aktivitas AST, ALT dan ALP

tikus percobaan Tikus diabetes menunjukkan secara signifikan

lebih banyak aktivitas plasma AST, ALT dan ALP masing-masing

dibandingkan dengan kontrol normal. Pengobatan dengan semua tanaman

Suplemen diet dan glibenklamid berkurang secara signifikan

aktivitas AST, ALT dan ALP pada tikus kontrol diabetes

(P <0,05).

Tabel 3 menunjukkan efek P.pellucida pada peroksidasi lipid,

Konsentrasi GSH dan aktivitas enzim antioksidan,

SOD dan CAT. Kenaikan signifikan secara statistik (P <0,05)

Dalam peroksidasi lipid diamati pada kontrol diabetes

hewan dibandingkan dengan kontrol normal dan nilai ini adalah

dibawa ke hampir normal oleh tanaman diabetes

tikus dan di bawah nilai normal tikus non-diabetes. Itu

dua suplemen (10% b / b dan 20% b / b) mengurangi lipid

peroksidasi sebesar 52% dan 57% masing-masing lebih efektif

dibandingkan glibenklamid (23%). Konsentrasi GSH, SOD dan

Aktivitas CAT berkurang secara signifikan pada penderita diabetes

tikus dibandingkan dengan kontrol; namun suplementasi

dengan suplemen 10% w / w, 20% b / w P. pellucida dan

glibenklamida meningkatkan aktivitas antioksidan ini.

4. Diskusi

Diabetes mellitus adalah salah satu penyakit kronis yang paling umum

penyakit dan berhubungan dengan hiperglikemia,

hiperlipidemia, peningkatan kerusakan oksidatif, glukosuria dan

Komplikasi lain seperti obesitas dan hipertensi [27].

Alloxan, - sitotoksin menginduksi diabetes kimia secara luas

Berbagai jenis hewan dengan merusak produksi insulin

sel pankreas menyebabkan penurunan endogen

pelepasan insulin yang membuka jalan bagi penurunan

pemanfaatan glukosa oleh jaringan [9,28].

Temuan kami menunjukkan bahwa P. pellucida memiliki antidiabetes dan

aktivitas antioksidan. Kenaikan umum terjadi pada

tingkat glukosa darah pada tikus kontrol diabetes. Ini

Kenaikan signifikan bila dibandingkan dengan kontrol normal,

tikus normal diberi persentase berbeda (10% dan 20% b /

w) P. pellucida dan berbagai tikus diabetes yang diobati

glibenklamida dan P. pellucida. Tindakan hipoglikemik

lebih diutamakan dengan P. pellucida 10% dan 20%

suplementasi dibandingkan kelompok perlakuan glibenklamid. Ini

Oleh karena itu dapat disiratkan bahwa persiapan P. pellucida di

Suplemen 10% dan 20% b / b sedikit lebih manjur dari pada

glibenklamid pada 600 g / kg berat badan. Padahal tidak

mekanisme efek P. pellucida terhadap glukosa darah

Telah diusulkan, dapat disarankan agar tanaman tersebut

Mungkin mengandung zat yang meniru aksi insulin

seperti sulfonilurea yang mendorong sekresi insulin

dengan penutupan K +

-ATP saluran, depolarisasi membran

dan stimulasi Ca

2+

masuknya, sebuah langkah awal dalam insulin

sekresi [29,30].

Dilaporkan bahwa gangguan glukosa, lemak dan

metabolisme protein selama diabetes, berakibat pada

perkembangan hiperlipidemia [31,32]. Tikus diabetes adalah

diamati memiliki peningkatan lipid plasma, yaitu

bertanggung jawab atas beberapa gangguan kardiovaskular [33]. Itu

Tingkat lipid yang lebih tinggi yang terlihat pada tikus diabetes mungkin disebabkan oleh

peningkatan mobilisasi asam lemak bebas dari perifer

depot dan juga karena lipolisis yang disebabkan oleh hormon [34].

Suplementasi dengan kedua suplemen P. pellucida

menghasilkan efek menguntungkan yang signifikan dalam profil lipid di

tikus diabetes yang diinduksi alloxan, mengurangi trigliserida, total

kolesterol, LDL, dan peningkatan HDL, secara signifikan. Demikian,

Dapat disimpulkan dari temuan ini bahwa tingkat

total kolesterol plasma, trigliserida dan kolesterol LDL

yang sebenarnya diangkat dalam diabetes dapat diturunkan dengan

Suplementasi P. pellucida; antihyperlipidemic ini

Efek bisa mewakili mekanisme protektif terhadap

perkembangan gangguan kardiovaskular seperti

aterosklerosis pada pasien diabetes.Enzim hati AST, ALT dan ALP digunakan sebagai

biomarker untuk memeriksa kerusakan hati akut dini. Itu

Aktivitas AST dan ALT adalah enzim marker sitosol

mencerminkan nekrosis hepatoselular saat dilepaskan

ke dalam darah setelah kerusakan membran sel. Oleh karena itu, aktivitas ALT dan AST yang meningkat
dalam sirkulasi berfungsi

sebagai indikator kerusakan hati. ALP bertindak sebagai penanda untuk

fungsi empedu dan kolestasis. Dalam penelitian ini, semua pengobatan

kelompok dengan persiapan tanaman percobaan secara efektif

mengurangi aktivitas plasma AST, ALT dan ALP pada tikus diabetes

lebih baik daripada obat standar, menunjukkan bahwa tanaman mungkin

Mencegah cedera hati yang berhubungan dengan diabetes.

Stres oksidatif akibat radikal bebas yang meningkat

pembentukan dan / atau kerusakan pada penyebab pertahanan anti-oksidan

Kerusakan jaringan parah yang dapat menyebabkan sejumlah

penyakit seperti penyakit arteri koroner, aterosklerosis, kanker

dan diabetes. Meningkatnya tekanan oksidatif pada streptozotocin

tikus diabetes telah dilaporkan [35]. Stres oksidatif ini

juga terlibat dalam pengembangan diabetes

komplikasi [36]. Meningkatnya tekanan oksidatif yang diukur dengan

indeks peroksidasi lipid dan oksidasi protein telah terjadi

terbukti meningkat pada diabetes tipe 1 dan tipe 2 genap

pada pasien tanpa komplikasi [37,38].

Hasilnya menunjukkan peningkatan peroksidasi lipid di hati

kelompok kontrol diabetes. Ini mungkin karena jaringan

mengandung konsentrasi yang relatif tinggi mudah peroksidizable

asam lemak. Peningkatan radikal bebas oksigen pada diabetes

Bisa jadi terutama karena kenaikan kadar glukosa darah,

yang pada auto-oksidasi menghasilkan radikal bebas dan

kedua karena efek agen diabetogenik

alloxan [39]. Pada diabetes, hipoinsulinaemia meningkat

aktivitas enzim, asil koenzim lemak, koenzim A

oksidase, yang memulai -oksidasi asam lemak yang dihasilkan

dalam peroksidasi lipid [9]. Peningkatan peroksidasi lipid terganggu

fungsi membran dengan mengurangi fluiditas membran, dan

mengubah aktivitas enzim terikat membran [36]. Nya

produk (radikal lipid dan lipid peroksida) berbahaya

ke sel-sel di tubuh dan berhubungan dengan berbagai

kondisi penyakit, aterosklerosis dan kerusakan otak [36].

Suplementasi dengan P. pellucida dan glibenklamid

mengurangi tingkat peroksidasi lipid pada penderita diabetes

kelompok yang dirawat. Hal ini menunjukkan bahwa suplemen P. pellucida

dapat menghambat peroksidasi lipid dan dengan demikian kerusakan oksidatif

ke jaringan diabetes.Penurunan konsentrasi glutathione (GSH) pada diabetes

konsentrasi melitus in vivo telah dilaporkan [40].

Suplementasi dengan suplemen P. pellucida secara signifikan

meningkatkan kandungan glutathione dibandingkan dengan diabetes

kontrol tikus di mana tingkat menurun secara signifikan.

Penipisan GSH pada tikus diabetes dapat dikaitkan dengan

Konsumsi GSH dengan glutathione transferase untuk metabolisme

konjugasi dan oksidasi GSH untuk pertahanan terhadap

menghasilkan stres oksidatif [6]. Peningkatan tingkat pengobatan GSH

Dengan P. pellucida maka menunjukkan pemulihan dari oksidatif

Kerusakan yang dilakukan oleh diabetes aloksan pada jaringan.

SOD dan CAT adalah dua enzim pemulung yang dikeluarkan

radikal bebas beracun [41]. Superoksida dismutase hadir

pada dasarnya setiap sel dalam tubuh dan telah ditunjukkan

memainkan peran penting dalam melindungi sel dan jaringan melawan

stres oksidatif. Superoksida dismutases (SOD) menghapus

radikal superoksida O2

dengan mempercepat konversi menjadi

H2O2. Katalase ada di mana-mana pada kebanyakan sel aerobik pada hewan

dan terutama terkonsentrasi di hati dan eritrosit.

Hal ini diketahui menguraikan hidrogen peroksida menjadi air dan

oksigen seperti yang ditunjukkan pada persamaan:

2H2O2 2H2O + O2 (1)

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ada penurunan yang signifikan

dalam aktivitas SOD dan CAT pada tikus diabetes dibandingkan dengan

kontrol normal sementara semua kelompok perlakuan menunjukkan signifikan

peningkatan aktivitas dengan suplemen 20% w / w

kenaikan yang lebih besar dibandingkan dengan kelompok yang diobati

obat dan suplemen 10% w / w. Penurunan ini pada

Aktivitas SOD yang diamati pada tikus diabetes konsisten dengan

berbagai laporan sudah didokumentasikan [40,41]. Seperti yang diusulkan oleh

Wohaieb dan Godin [41], pengurangan aktivitas SOD mungkin terjadi

disebabkan oleh efek merusak langsung dari radikal bebas pada

enzim. Karena itu aktivitas SOD, yaitu untuk menghilangkannya

O2 radikal superoksida

dengan mempercepat konversi

untuk H2O2 tidak aktif. Kemampuan sediaan tanaman

untuk meningkatkan aktivitas katalase mungkin disebabkan oleh induksi

enzim. Katalase adalah haemoprotein dan fitokimia

Pemutaran P. pellucida juga menunjukkan adanya zat besi

(Fe) [42]. Besi sangat penting untuk fungsi katalase.

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa diet

Suplementasi P. pellucida memiliki sifat antidiabetes dan

antioksidan pada tikus diabetes yang diinduksi alloxan.

Efek ini mungkin karena adanya tanin, saponin,

flavonoid dan konstituen lainnya di pabrik, yang bisa

bertindak sinergis atau independen dalam meningkatkan

aktivitas enzim glikolitik dan antioksidan. Karena itu

Penggunaan antidiabetes tradisional yang diakui tanaman ini adalah

dibenarkan dalam penelitian ini.