Teori Salton menjelaskan bahwa ada konsentrasi lipid yang tinggi pada dinding sel bakteri Gram

negatif. Sehingga jika lipid dilarutkan dalam pemberian alcohol, maka poripori akan membesar dan
tidak mengikat pewarna. Hal ini menyebabkan bakteri menjadi tidak berwarna. Sedangkan bakteri
Gram positif akan mengalami denaturasi selama pemberian alcohol. Hal ini akan mengecilkan
poripori sehingga menghasilkan kompleks kristal iodium. Bakteri Gram positif memiliki dinding sel
yang kuat dan lapisan peptidoglikan sebanyak 30 lapisan sehingga permeabilitas dinding selnya
menjadi berkurang. Sedangkan bakteri Gram negatif hanya memiliki 12 lapisan peptidoglikan
sehingga memiliki permeabilitas dinding sel yang lebih besar. Pewarnaan Gram terdiri atas Gram A
(violet) (Kristal violet, Aalkohol, Ammonium oksalat, Aquades), Gram B (cokelat) (Iodium, Kalium
iodide, Aquades), Gram C (Aseton, Alcohol), Gram D (merah) (Safranin, Alcohol, Aquades) (Madigan,
2003).

Hasil ini tidak sesuai dengan teori yang menyatakan bahwa

Bacillus sp merupakan bakteri berbentuk batang, tergolong bakteri gram positif,

motil, menghasilkan spora yang biasanya resisten pada panas, bersifat aerob
(beberapa spesies bersifat anaerob fakultatif), katalase positif, dan oksidasi
bervariasi. Tiap spesies berbeda dalam penggunaan gula, sebagian melakukan
fermentasi dan sebagian tidak (Barrow, 1993).

Ketidak sesuaian ini dapat disebabkan oleh kesalahan dari prosedur praktikan yang tidak
tepat yaitu pemberian larutan lugol yang terlalu singkat, dan proses pembilasan dengan
aquades yang terlalu deras sehingga tidak membentuk komplek crystal violet-lugol dengan
baik, dan pada saat diberi larutan pemucat crystal violet menjadi luntur dan sel bakteri
berikatan dengan air fuchsin yang menyebabkan bakteri gram positif berwarna seperti bakteri
gram negatif (merah muda).