Imobilisasi mempengaruhi enzim dalam satu konformasi, yang mengurangi

kerentanan enzim terhadap denaturasi oleh panas. Lipase immobilisasi, seperti

yang berasal dari Mucor miehei dan Candida antarctica, menunjukkan stabilitas
termal yang baik pada suhu yang dibutuhkan untuk memproses sebagian besar
lemak dan minyak.

7.4. Aplikasi lipase

Reaksi enzim-enzim telah digunakan untuk produksi TAG yang digunakan untuk
formulasi lemak kembang gula dan aplikasi nutrisi. Reaktan lainnya dapat
digunakan untuk produksi TAG bermanfaat sebagai lemak kembang gula. Secara
khusus, ada banyak laporan tentang enzimatik fraksi minyak kelapa sawit dengan
asam stearat atau ester stearat untuk produksi Lemak yang mengandung
konsentrasi StOSt dan 1-palmitoyl-2-oleoyl-3-stearoylglycerol (POSt) tinggi,
yang merupakan komponen TAG utama dari lemak kakao. Oleh karena itu,
penargetan enzimatik dapat menghasilkan lemak dengan komposisi dan Sifat fisik
yang mirip dengan lemak kakao. Dalam contoh ini, selektivitas sebagian besar
lipase untuk posisi sn-1 dan sn-3 dari gliserol telah terbukti menguntungkan,
karena TAG dalam lemak kakao memiliki residu palmitoyl dan stearoyl terutama
pada posisi sn-1,3 dan oleoyl residu didominasi pada posisi sn-2.
Reaksi katalisis enzim digunakan untuk menghasilkan pengganti susu
untuk manusia dalam susu formula bayi. Reaksi asidolisis campuran tripalmitin
dan asam lemak tak jenuh menggunakan lipase sn-1,3-spesifik sebagai biokatalis
TAG yang berasal dari minyak sayur kaya 2 palmitat dengan gugus asil lemak tak
jnuh dalam posisi sn-1 dan sn-3. Posisi TAG meningkatkan penyerapan lemak dan
penyerapan nutrisi penting lain seperti kalsium.
Aplikasi lain adalah dalam pembuatan lemak dan minyak yang
mengandung nutrisi penting PUFA, seperti EPA dan DHA. Misalnya, aneka sayur
dan minyak hasil laut telah diperkaya dengan EPA dan DHA dengan
menggunakan reaksi katalis enzim. Penggunaan teknik ini untuk menghasilkan
lipida terstruktur dengan MCFA dan PUFA yang terletak secara khusus baik dalam
posisi sn-2 atau sn-1,3 dari TAG. Proses enzimatik sangat sesuai untuk produksi
dan modifikasi lipid yang mengandung PUFA, karena ini Asam lemak yang tidak
stabil rentan terhadap kerusakan.
Pencampuran kelapa sawit dan minyak canola terhidrogenasi dan biji
kapas dan minyak kedelai terhidrogenasi dengan menggunakan lipase spesifik sn-
1,3-spesifik sebagai biokatalis memberi lemak dengan kandungan asam lemak
trans rendah yang efektif sebagai margarin hardstocks. Dengan potensi enzimatik
ini, margarin bisa diformulasikan tanpa menggunakan lemak terhidrogenasi.

8. MODIFIKASI LEMAK DAN MINYAK UNTUK MEMPRODUKSI

LIPID TERSTRUKTUR
Lipid terstruktur dapat didefinisikan sebagai TAG yang direstrukturisasi atau
dimodifikasi untuk mengubah komposisi asam lemak atau distribusi posisinya
dalam molekul gliserol oleh reaksi kimia atau proses enzimatik. Lipid terstruktur
telah dilaporkan memiliki efek menguntungkan pada berbagai parameter
metabolik termasuk fungsi kekebalan tubuh, keseimbangan nitrogen, dan
pembersihan lipid yang lebih baik dari aliran darah.
Lipid terstruktur sering disebut sebagai generasi baru lipid yang bisa
dianggap sebagai ''nutraceutical''. Nutraceutical adalah istilah yang digunakan
untuk menggambarkan makanan yang memberikan manfaat kesehatan melebihi
efek gizi mereka.
Salah satu cara untuk mempersiapkan lipida terstruktur adalah dengan
hidrolisis gugus asil lemak dari campuran TAG diikuti dengan regresi ulang acak
ke gliserl.. Biasanya, berbagai asam lemak digunakan dalam proses ini, termasuk
kelas asam lemak jenuh, tak jenuh tunggal, dan tak jenuh ganda yang berbeda,
tergantung efek metabolik yang diinginkan. Dengan demikian, campuran asam
lemak tergabung ke molekul gliserol yang sama. Lipid yang diproduksi ini secara
struktural dan secara metabolik sangat berbeda dengan fisik acak yang lebih
sederhana campuran triasilgliserol rantai menengah (MCT) dan triasilgliserol
rantai panjang (LCT). Dimulai dengan MCT dan LCT, enam kemungkinan
kombinasi asam lemak dapat menghasilkan lipida terstruktur: dua MCFA dan satu
LCFA; satu MCFA dan dua LCFA; dua isomer posisional; dan sejumlah kecil
MCT awal dan LCT (Gambar 11).
Lipase adalah biokatalis yang efektif untuk pembuatan lipid terstruktur
yang memiliki komposisi dan distribusi yang telah ditentukan asam lemak pada
gliserol. Lipid terstruktur menyerupai TAG Susu manusia telah diproduksi dengan
trans-esterifikasi tripalmitin, diturunkan dari minyak nabati, dengan asam oleat
atau PUFA, diperoleh dari minyak nabati, dengan menggunakan sn-1,3specific
lipase sebagai biokatalis.

Penentuan minat dari LCT dengan MCT atau MCFA dengan menggunakan
sn-1,3-spesifik lipase dapat menghasilkan TAG yang mengandung asil rantai
menengah pada posisi sn-1,3 posisi dan LCFA pada posisi sn-2. Metode untuk
sintesis produk lipid terstruktur ini ditunjukkan pada Gambar 12.
 Poin penting untuk kedua strategi tersebut adalah penggunaan lipase
spesifik sn-1,3. Tujuannya adalah untuk ganti residu asam lemak secara khusus
pada posisi sn-1 dan sn-3 TAG.
Lipid terstruktur yang memiliki n-3 PUFAs, seperti EPA dan DHA,
terletak di pertengahan posisi, dengan MCFA di posisi akhir. TAG ini memberikan
pengiriman energi yang cepat melalui oksidasi MCFA dan, pada saat yang sama,
memasok metabolik asam lemak dalam molekul yang sama.
Lipid terstruktur yang mengandung GLA dan n-3 PUFA mungkin menarik
karena dari manfaat kesehatan yang mereka inginkan. Melakukan acidolysis
antara asam g-linolenat (18: 3n-6; GLA) kaya minyak.
Di sisi lain, n-3 PUFA memiliki potensi untuk pencegahan penyakit
kardiovaskular, arthritis, hipertensi, gangguan kekebalan tubuh dan ginjal,
diabetes, dan kanker. Lipid terstruktur mengandung 27,4% DHA dan 17,0% GLA.
Setelah reaksi acidolysis, lipid terstruktur berbasis minyak borage berisi
26,8% EPA dan 15,2% GLA. Sementara itu, evening primrose oil-based Lipid
terstruktur memiliki kandungan EPA dan GLA masing-masing 25,2% dan 7,6%.
18. Pemisahan Novel Teknik untuk Isolasi dan Perisai Asam Lemak dan
produk sampingan minyak

2. METODE MEMPEROLEH FATTY ACID

Asam lemak ini ditandai dengan panjang rantai karbon dan jumlah obligasi
rangkap. Komposisi karakteristik asam lemak adalah spesifik untuk setiap jenis
lemak. Banyak metode telah ditetapkan untuk mengisolasi (atau berkonsentrasi)
dan memulihkan asam lemak tertentu dan turunannya (yaitu, ester, lemak bebas
asam, triasilgliserol, dll.). Metode yang tersedia termasuk kromatografi (adsorpsi
dan partisi), distilasi fraksional atau molekuler, pemisahan enzimatik, kristalisasi
suhu rendah, ekstraksi cairan superkritis, dan kompleksitas urea Setiap teknik
memiliki kelebihan dan kekurangan tersendiri.
Pada kelapa sawit, campuran alami asam lemak dipisahkan menjadi dua
fraksi, yaitu '' olein, '' yang mengandung jumlah terendah dari asam lemak jenuh,
dan '' stearin, '' yang mengandung jumlah terendah dari asam lemak tak jenuh.
Untuk pemisahan asam lemak jenuh linier dari asam lemak tak jenuh linier mula-
mula menyiapkan turunan garam timah, melarutkan garam campuran dalam dietil
eter atau etil alkohol, dan kemudian memisahkan asam jenuh yang kurang larut
dari yang lebih mudah larut asam tak jenuh.
Proses Lanza, Henkel, atau Lipofrac digunakan pengembangan proses
pemisahan otomatis dengan perbedaan titik leleh. Proses Solexol dan Emersol
menggunakan ekstraksi cair-cair dengan perbedaan titik leleh untuk memisahkan
asam lemak ke tingkat kemurnian yang lebih tinggi. Proses Armor-Texaco mirip
dengan proses Emersol, namun menggunakan aseton sebagai pelarutnya. Sebagian
besar metode ini difokuskan pada pemulihan asam stearat dan oleat. Proses ini
tidak sesuai pemisahan asam lemak bernilai tinggi.

2.1. Metode Klasik dan Perkembangannya

Prinsip pemisahan asam lemak didasarkan pada sifat spesifik masing-masing
asam atau kelompok asam. Dua sifat utama (tekanan uap dan titik leleh) adalah
digunakan dalam mengembangkan teknik pemisahan. Tekanan uap campuran
lemak asam bervariasi secara signifikan dengan panjang rantai asam lemak yang
terlibat, yang digunakan dalam distilasi fraksional sebagai alat untuk memisahkan
asam lemak rantai pendek dan panjang. Pada metode lainnya, titik leleh asam
lemak banyak berubah dengan Tingkat unsaturation, yang bisa digunakan untuk
memisahkan campuran asam lemak menjadi komponen jenuh dan tak jenuh.
Dengan mengubah suhu Campuran, asam lemak bisa dipisahkan sesuai dengan
kadar unsaturasi pada kadar suhu kristalisasi masing-masing.

2.1.1. Metode Kromatografi Umum

Pemisahan kromatografi asam lemak banyak digunakan untuk
mendapatkan asam lemak dengan kemurnian tinggi. Beberapa paten telah
diberikan untuk berbeda jenis adsorben dan teknik untuk memisahkan asam
lemak. Asam lemak metil ester dapat digunakan sebagai alternatif untuk lemak
asam dalam produksi banyak oleokimia (alkohol lemak, alkanolamida, metil ester-
sulfonat, ester sukrosa, dan ester lemak lainnya). Metil ester lebih disukai
daripada asam lemak karena mereka menghasilkan produk dan kebutuhan dengan
kemurnian yang lebih tinggi kondisi lebih ringan selama sintesis. Metil ester
diperoleh dengan metanolisis lemak dan minyak dengan adanya katalis basa,
biasanya natrium metoksida, atau Membelah lemak dengan proses Colgate-Emery
yang intensif energi dan padat modal diikuti dengan esteri fi kasi asam lemak
yang dihasilkan dengan metanol.
Metode kromatografi cair lebih tepat untuk pemisahan asam amino atau
esternya yang bersifat preparatif dan industri. Pemisahan kromatografi asam
lemak juga telah digunakan untuk mendapatkan konsentrat dari asam lemak
tertentu atau esternya dari campuran makanan dan farmasi produk. Untuk
mendapatkan PUFA rantai panjang dalam bentuk murni, diperlukan metode
kromatografi. Pemisahan Asam lemak yang menggunakan gel perak nitrat-silika
telah menjadi langkah dalam mengisolasi ester metil ester asam lemak sesuai
dengan jumlah ikatan rangkapnya dan oleh konektifitas- gurasi (cis- / trans-) dari
ikatan rangkap. Prinsip teknik pemisahan ini adalah bahwa ion logam (mis., ion
perak) berkoordinasi secara reversibel dengan elektron a p orbital ikatan rangkap
antara atom karbon dari residu asam lemak tak jenuh untuk membentuk kompleks
logam. Kekuatan kompleks cenderung bergantung pada panjang rantai, jumlah
ikatan rangkap karbon-karbon, posisi ganda ikatan, dan konfigurasi mereka (cis-
atau trans-) dalam asam lemak yang terlibat.
Pemilihan pelarut untuk pemisahan kromatografi ester asam lemak
tergantung pada kemurnian yang diinginkan dari fraksi yang dielusi dan
penggunaan akhir serta produksi Persyaratan. Tetrahidrofuran / metanol / air (25:
55: 20, v / v / v) (41) dan metanol / air (90: 10, v / v) (42) telah dijelaskan untuk
menghasilkan EPA dan DHA dengan kemurnian tinggi (75-96%) sebagai etil ester
asam lemak dari minyak ikan.

2.1.2. Kromatografi countercurrent

Kromatografi partisi sentrifugal (CPC), Kromatografi cair-cair tanpa
penyerap, membutuhkan dua pelarut yang tidak bercampur, yang pada dasarnya
merupakan hasil dari distribusi arus balik. Dalam varian CPC yang paling
berbeda, satu fase cair tetap ada stasioner sedangkan fase pelarut kedua melewati
fase diam pelarut. Prinsip pemisahan melibatkan pemisahan zat terlarut di antara
dua pelarut tak bercampur Proporsi relatif zat terlarut yang masuk ke masing -
masing dua fase pelarut ditentukan oleh masing-masing koefisien partisi.
Kromatografi partisi sentrifugal tidak menggunakan dukungan padat seperti
stasioner tahap. Karena itu, kemungkinan retensi ireversibel sangat retentif
Instrumen CPC pada dasarnya terdiri dari dua jenis: kromatografi partisi
sentrifugal instrumen yang diproduksi oleh Sanki Engineering, Ltd. (Kyoto,
Jepang) dan sistem arus berlawanan multicoil yang dirancang oleh Ito dan
diproduksi oleh PharmaTech Penelitian (Baltimore, MD). Mirip dengan
kebanyakan sistem kromatografi, BPK memiliki komponen dasar seperti pompa
untuk pengiriman pelarut, katup untuk kontrol pengiriman pelarut dan injeksi
sampel, detektor, dan perekam. Komponen utamanya Instrumennya adalah
rotornya. Rotor terbuat dari susun terukir poli-fenilen sul fi de (PPS) atau poly-
chlorotri fl uoroethylene (DAIFLON) yang dipisahkan oleh Teflon lembaran segel
dan pelat stainless steel. Disk terdiri dari saluran dan saluran setiap sisi. Fasa
stasioner cair diadakan di saluran ini dan sentrifugal Lapangan yang dihasilkan
oleh rotor pemintal memegang fase diam yang cukup memungkinkan fase gerak
yang akan dipompa melalui.