KATA PENGANTAR

Segala puji bagi Tuhan yang telah menolong hamba-Nya menyelesaikan makalah ini dengan
penuh kemudahan. Tanpa pertolongan-Nya mungkin penyusun tidak sanggup menyelesaikan
dengan baik.
Makalah ini disusun agar pembaca dapat mengetahui tentang KOEFISIEN FENOL yang
kami sajikan berdasarkan pengamatan dari berbagi sumber. Makalah ini disusun oleh
penyusun dengan berbagai rintangan. Baik itu yang datng dari diri diri penyusun maupun
yang dating dari luar. Namun dengan penuh kesabaran dan terutama pertolongan dari tuhan
akhirnya makalah ini dapat terselesaikan.
Makalah ini memuat tentang KOEFISIEN FENOL yang merupakn tugas dalam mata
kuliah Teknik Analisa Hayati.
Penyusun juga mengucapkan terima kasih kepada dosen pembimbing yang telah banyak
membantu penyusun agar dapat menyelesaikan makalah ini.
Semoga makalah ini dapat memberikan wawasan yang lebih luas kepada pembaca. Walaupun
makalah ini memiliki kelebihan dan kekurangan. Penyusun mohon untuk saran dan
keritiknya.
Terima kasih.

Penulis

DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR.................. 1
DAFTAR ISI. 2

BAB I PENDAHULUAN 3

A. LATAR BELAKANG MASALAH. 3

B. RUMUSAN MASALAH.. 4
C. TUJUAN MAKALAH.. 4

BAB II PMBAHASAN............................................................................................ 4

A. BEBERAPA PENGERTIAN DAN ISTILAH KOEFISIEN FENOL.. 4

B. UJI KOEFISIEN FENOL..... 5
C. PRINSIP UJI KOEFISIEN FENOL. 9
D. METODE KERJA UJI KOEFISIEN FENOL......9
 E. CONTOH UJI KOEFISEN FENOL..9

BAB III PENUTUP

A. KESIMPULAN. 15
B. SARAN..15

DAFTAR PUSTAKA16

BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang
Pengawasan terhadap mikroorganisme penyebab penyakit telah menjadi pemikiran para ahli
semenjak penyakit-penyakit mulai dikenal. Berbagai macam substansi telah dicoba untuk
memilih yang paling tepat guna menghilangkan pencemaran oleh jasad renik terhadap benda-
benda baik hidup ataupun mati.
Bahan anti mikroba yang ditemukan memiliki keefektifan yang bermacam-macam, dan
pengunaannya pun ditujukan terhadap hal-hal yang berbeda-beda pula. Salah satu jenis anti
mikroba dikenal sebagai disinfektan, merupakan suatu zat (biasanya kimia) yang dipakai
untuk maksud disinfeksi pada bahan-bahan tidak bernyawa.
Fenol adalah salah satu contoh disinfektan yang efektif dalam membunuh kuman. Pada
konsentrasi rendah, daya bunuhnya disebabkan karena fenol mempresipitasikan protein
secara aktif, dan selain itu juga merusak membran sel dengan menurunkan tegangan
permukaannya. Dengan persetujuan para ahli dan peneliti, fenol dijadikan standar
pembanding untuk menentukan aktivitas sesuatu disinfektan.
Zat-zat antimikroba yang dipergunakan untuk disinfeksi harus diuji keefektifannua. Cara
menentukan daya sterilisasi zat-zat tersebut adalah dengan melakukan tes koefisien fenol. Uji
ini dilakukan untuk membandingkan aktivitas suatu produk (desinfektan) dengan daya bunuh
fenol dalam kondisi tes yang sama. Berbagai pengenceran fenol dan produk yang dicoba
 dicampur dengan suatu volume tertentu biakan Salmonella thyphosa atau Staphylococcus
aureus.
Fenol atau asam karbolat atau benzenol adalah zat kristal tak berwarna yang memiliki bau
khas. Rumus kimianya adalah C6H5OH dan strukturnya memiliki gugus hidroksil (-OH)
yang berikatan dengan cincin fenil.
Fenol memiliki kelarutan terbatas dalam air, yakni 8,3 gram/100 ml. Fenol memiliki sifat
yang cenderung asam, artinya ia dapat melepaskan ion H+ dari gugus hidroksilnya.
Pengeluaran ion tersebut menjadikan anion fenoksida C6H5O yang dapat dilarutkan dalam
air.
Dibandingkan dengan alkohol alifatik lainnya, fenol bersifat lebih asam. Hal ini dibuktikan
dengan mereaksikan fenol dengan NaOH, di mana fenol dapat melepaskan H+. Pada keadaan
yang sama, alkohol alifatik lainnya tidak dapat bereaksi seperti itu. Pelepasan ini diakibatkan
pelengkapan orbital antara satu-satunya pasangan oksigen dan sistem aromatik, yang
mendelokalisasi beban negatif melalui cincin tersebut dan menstabilkan anionnya

B. Rumusan Masalah
Makalah ini disusun dengan rumusan makalah sebagai berikut :

1. Apa yang dimaksud dengan Koefisien Fenol?

2. Apa prinsip atau teori dasar Koefisien Fenol?
3. Bagaimana cara kerja uji Koefisien Fenol?
4. Apa kelebihan dan kekurangan Koefisien Fenol?

C. Tujuan Makalah
Makalah ini disusun dengan tujuan sebagai berikut :

1. Untuk mempermudah proses belajar Teknik Analisa Hayati.

2. Utuk mengetahui cara uji Koefisien Fenol.
3. Untuk memenuhi tugas mata kuliah Teknik Analisa Hayati.

BAB II
PEMBAHASAN

A. Beberapa Pengertian dan Istilah Koefisien Fenol

Koefisien fenol adalah perbandingan ukuran keampuhan suatu bahan antimikrobial
dibandingkan dengan fenol. Fenol dijadikan pembanding karena fenol sering digunakan
untuk mamtikan mikroorganisme. Koefisien fenol yang kurang dari 1 menunjukkan bahwa
bahan antimikrobial tersebut kurang efektif dibandingkan fenol. Sebaliknya, apabila koefisien
fenol lebih dari 1 artinya bahan mikrobial tersebut lebih ampuh daripada fenol

Koefisien fenol ditentukan dengan cara membagi pengenceran tertinghi dari fenol yang
mematikan mikroorganisme dalam sepuluh menit tetapi tidak mematikannya dalam lima
menit terhadap pengenceran tertinggi bahan antimikrobial yang mematikan mikroorganisme
dalam sepuluh menit tetapi tidak dalam lima menit.

Fenol adalah salah satu contoh disinfektan yang efektif dalam membunuh kuman. Pada
konsentrasi rendah, daya bunuhnya disebabkan karena fenol mempresipitasikan protein
secara aktif, dan selain itu juga merusak membran sel dengan menurunkan tegangan
permukaannya. Dengan persetujuan para ahli dan peneliti, fenol dijadikan standar
pembanding untuk menentukan aktivitas sesuatu disinfektan.

B. Uji Koefisien Fenol

Zat-zat antimikroba yang dipergunakan untuk disinfeksi harus diuji keefektifannya. Cara
menentukan daya sterilisasi zat-zat tersebut adalah dengan melakukan tes koefisien fenol. Uji
ini dilakukan untuk membandingkan aktivitas suatu produk (desinfektan) dengan daya bunuh
fenol dalam kondisi tes yang sama. Berbagai pengenceran fenol dan produk yang dicoba
dicampur dengan suatu volume tertentu biakan Salmonella thyphosa atau Staphylococcus
aureus.

Tujuan dari uji koefisien fenol adalah untuk mengevaluasi daya anti mikroba suatu
desinfektan dengan memperkirakan potensi dan efektifitas desinfektan berdasarkan
konsentrasi dan lamanya kontak terhadap kuman dan membandingkannya terhadap fenol
standard yang disebut koefisien fenol.

Dalam berbagai keperluan tentunya kita telah mengenal, bahkan mungkin menggunakan
beberapa produk keperluan rumah tangga, laboratorium, atau rumah sakit yang bernama
desinfektan. Tidak jarang istilah desinfektan dirancukan dengan istilah lain yakni antiseptik.
Padahal keduanya memiliki definisi dan fungsi yang berbeda. Desinfektan didefinisikan
sebagai bahan kimia atau pengaruh fisika yang digunakan untuk mencegah terjadinya infeksi
atau pencemaran jasad renik seperti bakteri dan virus, juga untuk membunuh atau
menurunkan jumlah mikroorganisme atau kuman penyakit lainnya. Sedangkan antiseptik
didefinisikan sebagai bahan kimia yang dapat menghambat atau membunuh pertumbuhan
jasad renik seperti bakteri, jamur dan lain-lain pada jaringan hidup. Bahan desinfektan dapat
digunakan untuk proses desinfeksi tangan, lantai, ruangan, peralatan dan pakaian (Rismana,
2008).

Pada dasarnya ada persamaan jenis bahan kimia yang digunakan sebagai antiseptik dan
desinfektan. Tapi tidak semua bahan desinfektan adalah bahan antiseptik karena adanya
batasan dalam penggunaan antiseptik. Antiseptik tersebut harus memiliki sifat tidak merusak
jaringan tubuh atau tidak bersifat keras. Terkadang penambahan bahan desinfektan juga
dijadikan sebagai salah satu cara dalam proses sterilisasi, yaitu proses pembebasan kuman.
Tetapi pada kenyataannya tidak semua bahan desinfektan dapat berfungsi sebagai bahan
dalam proses sterilisasi.Walaupun kita sering menggunakan produk desinfektan, sebagian
besar konsumen tentunya belum mengenal jenis bahan kimia apa yang ada dalam produk
tersebut. Padahal bahan kimia tertentu merupakan zat aktif dalam proses desinfeksi dan
sangat menentukan efektivitas dan fungsi serta target mikroorganime yang akan dimatikan
(Rismana, 2008).
Beberapa jenis bahan yang berfungsi sebagai desinfektan dijelaskan di bawah ini

Golongan aldehid
Bahan kimia golongan aldehid yang umum digunakan antara lain formaldehid, glutaraldehid
dan glioksal. Golongan aldehid ini bekerja dengan cara denaturasi dan umum digunakan
dalam campuran air dengan konsentrasi 0,5% - 5% . Daya aksi berada dalam kisaran jam,
tetapi untuk kasus formaldehid
daya aksi akan semakin jelas dan kuat bila pelarut air diganti dengan alkohol.
Formaldehid pada konsentrasi di bawah 1,5% tidak dapat membunuh ragi dan jamur, dan
memiliki ambang batas konsentrasi kerja pada 0,5 ml/m3 atau 0,5 mg/l serta bersifat
karsinogenik (dapat menyebabkan kanker). Larutan formaldehid dengan konsentrasi 37%
umum disebut formalin dan biasa digunakan utuk pengawetan mayat (Rismana, 2008).
Glutaraldehid memiliki daya aksi yang lebih efektif disbanding formaldehid, Sehingga lebih
banyak dipilih dalam bidang virologi dan tidak berpotensi karsinogenik. Ambang batas
konsentrasi kerja glutaraldehid adalah 0,1 ml/m3 atau 0,1 mg/l. Pada prinsipnya golongan
aldehid ini dapat digunakan dengan spektrum aplikasi yang luas, Misalkan formaldehid untuk
membunuh mikroorganisme dalam ruangan, peralatan dan lantai, sedangkan glutaraldehid
untuk membunuh virus.
Keunggulan golongan aldehid adalah sifatnya yang stabil, persisten, dapat dibiodegradasi,
dan cocok dengan beberapa material peralatan. Sedangkan beberapa kerugiannya antara lain
dapat mengakibatkan resistensi dari mikroorganisme, untuk formaldehid diduga berpotensi
bersifat karsinogen, berbahaya bagi kesehatan, mengakibatkan iritasi pada sistem mukosa,
aktivitas menurun dengan adanya protein serta berisiko menimbulkan api dan ledakan
(Rismana, 2008).

Golongan alkohol
Golongan alkohol merupakan bahan yang banyak digunakan selain golongan aldehid.
Beberapa bahan di antaranya adalah etanol, propanol dan isopropanol. Golongan alkohol
bekerja dengan mekanisme denaturasi serta berdaya aksi dalam rentang detik hingga menit
dan untuk virus diperlukan waktu di atas 30 menit. Umum dibuat dalam campuran air pada
konsentrasi 70-90 %. Golongan alkohol ini tidak efektif untuk bakteri berspora serta kurang
efektif bagi virus non-lipoid. Penggunaan pada proses desinfeksi adalah untuk permukaan
yang kecil, tangan dan kulit. Adapun keunggulan golongan alkohol ini adalah sifatnya yangn
stabil, tidak merusak material, dapat dibiodegradasi, kadang cocok untuk kulit dan hanya
sedikit menurun aktivasinya bila berinteraksi dengan protein. Sedangkan beberapa
kerugiannya adalah berisiko tinggi terhadap api/ledakan dan sangat cepat menguap (Rismana,
2008).

Golongan pengoksidasi
Bahan kimia yang termasuk golongan pengoksidasi kuat dibagi ke dalam dua golongan yakni
peroksida dan peroksigen di antaranya adalah hidrogen peroksida, asam perasetik, kalium
peroksomono sulfat, natrium perborat, benzoil peroksida, kalium permanganat. Golongan ini
membunuh mikroorganisme dengan cara mengoksidasi dan umum dibuat dalam larutan air
berkonsentrasi 0,02 %. Daya aksi berada dalam rentang detik hingga menit, tetapi perlu 0,5 -
2 jam untuk membunuh virus. Pada prinsipnya golongan pengoksidasi dapat digunakan pada
spektrum yang luas, misalkan untuk proses desinfeksi permukaan dan sebagai sediaan cair.
Kekurangan golongan ini terutama oleh sifatnya yang tidak stabil, korosif, berisiko tinggi
menimbulkan ledakan pada konsentrasi di atas 15 %, serta perlu penanganan khusus dalam
hal pengemasan dan sistem distribusi/transport (Rismana, 2008).

Golongan halogen
Golongan halogen yang umum digunakan adalah berbasis iodium seperti larutan iodium,
iodofor, povidon iodium, sedangkan senyawa terhalogenasi adalah senyawa anorganik dan
organik yang mengandung gugus halogen terutama gugus klor, misalnya natrium hipoklorit,
klor dioksida, natrium klorit dan kloramin. Golongan ini berdaya aksi dengan cara oksidasi
dalam rentang waktu sekira 10-30 menit dan umum digunakan dalam larutan air dengan
konsentrasi 1-5%. Aplikasi proses desinfeksi dilakukan untuk mereduksi virus, tetapi tidak
efektif untuk membunuh beberapa jenis bakteri gram positif dan ragi. Umum digunakan
sebagai desinfektan pada pakaian, kolam renang, lumpur air selokan (Rismana, 2008).
Adapun kekurangan dari golongan halogen dan senyawa terhalogenasi adalah sifatnya yang
tidak stabil, sulit dibuat dalam campuran air pada konsentrasi 70-90 %. Golongan alkohol ini
tidak efektif untuk bakteri berspora serta kurang efektif bagi virus non-lipoid. Penggunaan
pada proses desinfeksi adalah untuk permukaan yang kecil, tangan dan kulit. Adapun
keunggulan golongan alkohol ini adalah sifatnya yangn stabil, tidak merusak material, dapat
dibiodegradasi, kadang cocok untuk kulit dan hanya sedikit menurun aktivasinya bila
berinteraksi dengan protein. Sedangkan beberapa kerugiannya adalah berisiko tinggi terhadap
api/ledakan dan sangat cepat menguap (Rismana, 2008).

Golongan fenol
Senyawa golongan fenol dan fenol terhalogenasi yang telah banyak dipakai antara lain fenol
(asam karbolik), kresol, para kloro kresol dan para kloro xylenol. Golongan ini berdaya aksi
dengan cara denaturasi dalam rentang waktu sekira 10-30 menit dan umum digunakan dalam
larutan air dengan konsentrasi 0,1-5%. Aplikasi proses desinfeksi dilakukan untuk virus,
spora tetapi tidak baik digunakan untuk membunuh beberapa jenis bakteri gram positif dan
ragi. Umum digunakan sebagai dalam proses desinfeksi di bak mandi, permukaan dan lantai,
serta dinding atau peralatan yang terbuat dari papan/kayu. Adapun keunggulan dari golongan
golongan fenol dan fenol terhalogenasi adalah sifatnya yang stabil, persisten, dan ramah
terhadap beberapa jenis material, sedangkan kerugiannya antara lain susah terbiodegradasi,
bersifat racun, dan korosif. Golongan garam amonium kuarterner Beberapa bahan kimia yang
terkenal dari golongan ini antara lain benzalkonium klorida, bensatonium klorida, dan
setilpiridinium klorida (Rismana, 2008).
Golongan ini berdaya aksi dengan cara aktif-permukaan dalam rentang waktu sekira 10-30
menit dan umum digunakan dalam larutan air dengan konsentrasi 0,1%-5%. Aplikasi untuk
proses desinfeksi hanya untuk bakteri vegetatif, dan lipovirus terutama untuk desinfeksi
peralatannya. Keunggulan dari golongan garam amonium kuarterner adalah ramah terhadap
material, tidak merusak kulit, tidak beracun, tidak berbau dan bersifat sebagai pengemulsi,
tetapi ada kekurangannya yakni hanya dapat terbiodegradasi sebagian. Kekurangan yang lain
yang menonjol adalah menjadi kurang efektif bila digunakan pada pakaian, spon, dan kain
pel karena akan terabsorpsi bahan tersebut serta menjadi tidak aktif bila bercampur dengan
sabun, protein, asam lemak dan senyawa fosfat.
Salah satu produk yang sudah dipasarkan dari golongan ini diklaim efektif untuk membunuh
parvovirus, di mana virus ini merupakan jenis virus hidrofilik
yang sangat susah untuk dimatikan (Rismana, 2008).

Fenol
Fenol atau asam karbolat atau benzenol adalah zat kristal tak berwarna yang memiliki bau
khas. Rumus kimianya adalah C6H5OH dan strukturnya memiliki gugus hidroksil (-OH)
yang berikatan dengan cincin fenil.

Struktur Fenol

Fenol memiliki kelarutan terbatas dalam air, yakni 8,3 gram/100 ml. Fenol memiliki sifat
yang cenderung asam, artinya dapat melepaskan ion H+ dari gugus hidroksilnya. Pengeluaran
ion tersebut menjadikan anion fenoksida C6H5O yang dapat dilarutkan dalam air (Aditya,
2009).
Dibandingkan dengan alkohol alifatik lainnya, fenol bersifat lebih asam. Hal ini dibuktikan
dengan mereaksikan fenol dengan NaOH, di mana fenol dapat melepaskan H+. Pada keadaan
yang sama, alkohol alifatik lainnya tidak dapat bereaksi seperti itu. Pelepasan ini diakibatkan
pelengkapan orbital antara satu-satunya pasangan oksigen dan sistem aromatik, yang
mendelokalisasi beban negatif melalui cincin tersebut dan menstabilkan anionnya.
Fenol didapatkan melalui oksidasi sebagian pada benzena atau asam benzoat
dengan proses Raschig, Fenol juga dapat diperoleh sebagai hasil dari oksidasi batu bara.
Fenol dapat digunakan sebagai antiseptik seperti yang digunakan Sir Joseph Lister saat
mempraktikkan pembedahan antiseptik. Fenol merupakan komponen utama pada anstiseptik
dagang, triklorofenol atau dikenal sebagai TCP (trichlorophenol). Fenol juga merupakan
bagian komposisi beberapa anestitika oral, misalnya semprotan kloraseptik (Aditya, 2009).
Fenol berfungsi dalam pembuatan obat-obatan (bagian dari produksi aspirin, pembasmi
rumput liar, dan lainnya. Fenol yang terkonsentrasi dapat mengakibatkan pembakaran
kimiawi pada kulit yang terbuka. Penyuntikan fenol juga pernah digunakan pada eksekusi
mati. Penyuntikan ini sering digunakan pada masa Nazi, Perang Dunia II. Suntikan fenol
diberikan pada ribuan orang di kemah-kemah, terutama di Auschwitz-Birkenau. Penyuntikan
ini dilakukan oleh dokter secara penyuntikan ke vena (intravena) di lengan dan jantung.
Penyuntikan ke jantung dapat mengakibatkan kematian langsung (Aditya, 2009).

Bacillus subtilis
Bacillus subtilis berasal dari famili Bacillaceae, bersifat aerob berbentuk basil dan merupakan
bakteri gram positif yang membentuk endospora. Umumnya bekteri ini bersifat saprofit yang
hidup di tanah, debu, tumbuh tumbuhan, dan air. Jika hidup pada jaringan manusia, dapat
menyebabkan infeksi, seperti infeksi mata.
Rangkaian genom lengkap dari Bacillus subtillis adalah bakteri gram positif pertama.
Rangkaian genom ini memberi pengetahuan signifikan terhadap kapasitas bakteri untuk
digunakan secara luas sebagai sumber karbon dan untuk mensekresi enzim penting bagi
industri dalam jumlah yang besar. Rangkaian ini setidaknya mengandung sepuluh pro fage
atau lebih, yang berperan penting untuk infeksi bakteri dalam transfer dari gen selama
perkembangan evolusi bakteri.
Publikasi dari rangkaian genom lengkap bakteri gram positif, Bacillus subtilis, memberikan
kontribusi yang sangat besar untuk mempelajari bakteri lain dalam golongan ini. Bakteri
gram positif mencakup beberapa pathogen pada manusia, seperti penyebab Botulisme,
Pneumonia, dan Tuberkulosis. Genom Bacillus subtilis menghasilkan banyak gen yang
mengkode transkripsi regulator. Gen ditemukan sebanyak 77 tipe yang berbeda dari protein
pentransfer, yang dapat mengambil nutrisi untuk bakteri dan mengeluarkan racun seperti
antibiotik.

Media Nutrient Broth

Penyiapan media pertumbuhan mikroorganisme harus mengandung nutrisi yang dibutuhkan
bakteri supaya dapat tumbuh membentuk koloni dan harus steril sehingga tidak ada
kontaminan dari lingkungan.
Media pertumbuhan dasar untuk bakteri adalah Nutrient Broth (NB), Nutrient Agar (NA),
Tryptic Soy Broth (TSB), dan Tryptic Soy Agar (TSA).
 C. PRINSIP UJI KOEFISIEN FENOL

membandingkan aktivitas suatu produk (desinfektan) dengan daya bunuh fenol dalam kondisi
tes yang sama. Berbagai pengenceran fenol dan produk yang dicoba dicampur dengan suatu
volume tertentu biakan bakteri.

D. Metode Kerja Uji Koefisien Fenol

Cara Melakukan Uji Koefisien Fenol

Perbandingan aktivitas fenol dengan pengenceran baku terhadap aktivitas sampel dengan
pengenceran tertentu, MIC ( konsentrasi terendah dimana pertumbuhan bakteri terhambat )
suatu antiseptik terhadap bakteri tertentu

Metode pegenceran bertingkat dengan mengurangi konsentrasi zat sebanyak setengah dari
konsentrasi awal dengan volume yang sama
Metode turbidimetri, menentukan takaran dengan melihat kekeruhan yang terjadi setelah
percobaan dilakukan

V1 C1 = V2 C2

Hasil kali konsentrasi dengan volume senyawa yang semula digunakan adalah sama dengan
hasil kali konsentrasi senyawa tersebut dalam volume setelah pengenceran.

Contoh Uji koefisien Fenol Dengan Disinfektan

I. Tujuan : Tujuan dari praktikum uji koefisien fenol adalah untuk mengevaluasi daya anti
mikroba suatu desinfektan dengan memperkirakan potensi dan efektifitas desinfektan
berdasarkan konsentrasi dan lamanya kontak terhadap kuman dan membandingkannya
terhadap fenol standard yang disebut koefisien fenol.

I. Prinsip : Pertumbuhan bakteri uji pada media yang sesuai setelah bakteri tersebut kontak
dengan disinfektan dalam waktu 5, 10, dan 15 menit.

II. Alat dan Bahan :

Alat :
o Tabung reaksi
o Ose/sengkelit
o Pencatat waktu (stopwatch)
o Mc Farland III (109 kuman/ml)
o Vortex
o Stiker label
o Spiritus
 Bahan :
o Kaldu nutrisi (Nutrient Broth)
o Air suling steril
o Staphylococcus aureus ATCC 25953 dalam agar nutrisi (Gram +)
o Salmonella thyphosa ATCC 6539 dalam agar nutrisi (Gram -)
o Larutan NaCl fisiologis 0,9%
o Fenol standar
o Desinfektan uji

IV. Dasar Teori :

Zat-zat antimikroba yang dipergunakan untuk disinfeksi harus diuji keefektifannua. Cara
menentukan daya sterilisasi zat-zat tersebut adalah dengan melakukan tes koefisien fenol. Uji ini
dilakukan untuk membandingkan aktivitas suatu produk (desinfektan) dengan daya bunuh fenol
dalam kondisi tes yang sama. Berbagai pengenceran fenol dan produk yang dicoba dicampur dengan
suatu volume tertentu biakan Salmonella thyphosa atau Staphylococcus aureus.

V. Cara Kerja
1. Pembuatan media
Media kaldu nutrisi (Nutrient Broth) dimasukkan dalam 12 tabung reaksi ukuran 20 x 150
mm, volume masing-masing dibuat 5 ml. Komposisi perliter terdiri dari pepton 10 g, ekstrak
daging 5 g, dan NaCl 5 g; pH akhir 6,8.
1. Pembuatan inokulum
Bakteri Salmonella thyphosa atau Staphylococcus aureus sebelumnya telah ditanam pada
agar nutrisi (Nutrient Agar) miring dan diinkubasi pada suhu 37C selama 24-48 jam.
Tahap pengenceran bakteri uji adalah sebagai berikut:
a. Siapkan tabung reaksi berisi 2 ml NaCl fisiologis 0,9%
b. Pindahkan biakan S. thyphosa atau S. aureus tersebut (pilih salah satu) ke dalam larutan
NaCl dengan ose, dan setarakan kekeruhannya dengan larutan Mc Farland III (109
kuman/ml)
c. Suspensi kuman tersebut kini diperkirakan berisi 109 kuman/ml
d. Siapkan 3 buah tabung reaksi masing-masing berisi 4,5 ml NaCl fisiologis 0,9%
e. Pipet 0,5 ml dari suspensi kuman sebelumnya (109 kuman/ml), pindahkan ke salah satu
tabung reaksi berisi 4,5 ml NaCl. Suspensi kuman kini berkonsentrasi 108 kuman/ml
f. Lakukan pengenceran kedua dengan mengambil 0,5 ml dari suspensi kuman 108 dan
memindahkannya ke dalam tabung berisi 4,5 NaCl yang kedua. Suspensi kuman kini
berkonsentrasi 107 kuman/ml
g. Pengenceran terakhir dilakukan dengan memindahkan 0,5 ml dari suspensi kuman 107 ke
dalam tabung terakhir NaCl. Suspensi kuman telah setara dengan 106 kuman/ml. Suspensi
bakteri dengan konsentrasi inilah yang akan digunakan untuk melakukan uji praktikum ini.
1. Pembuatan larutan baku fenol
Dibuat larutan persediaan baku fenol 5% dengan cara menimbang 2,5 g fenol dalam 50 ml air
suling steril. Kemudian dilakukan pengenceran konsentrasi menjadi 1:80 dengan mempipet
12,5 ml larutan fenol 5% ditambahkan dengan 37,5 ml air suling steril pada tabung steril
ukuran 25 x 150 mm.
1. Pembuatan larutan desinfektan
 Pengenceran larutan desinfektan dilakukan pada tabung steril berukuran 25 x 150 mm.
Tahapannya adalah sebagai berikut:
a. Siapkan 4 buah tabung steril berisi aquades dengan volume yang berbeda-beda di dalamnya
yaitu 9 ml, 7 ml, 4,5 ml, dan 7 ml, secara berurutan
b. Lakukan pengenceran pertama dengan mempipet 1 ml larutan desinfektan ke dalam 9 ml air
suling sehingga konsentrasi menjadi 1:10
c. Pengenceran selanjutnya adalah dengan memindahkan 1 ml desinfektan 1:10 ke dalam
tabung berisi 7 ml air suling. Konsentrasi desinfektan pada tabung ini adalah 1:80
d. Pindahkan 0,5 ml desinfektan 1:80 ke dalam 4,5 ml aquades sehingga konsentrasi kini 1:100
e. Pipet 0,5 ml desinfektan 1:100 ke dalam tabung berisi 7 ml air suling sehingga konsentrasi
pada tabung ini adalah 1:150
f. Desinfektan yang akan dipakai selanjutnya adalah yang konsentrasinya 1:80, 1:100, dan
1:150. Oleh karena itu, samakan volumenya masing-masing menjadi 5 ml
Media, bakteri uji, larutan fenol, dan desinfektan telah disiapkan. Dengan demikian kita dapat
melakukan inokulasi kuman uji dalam desinfektan dan fenol dengan memperhitungkan waktu
kontak 5, 10, dan 15 menit secara akurat. Label 12 tabung berisi Nutrient both dengan
menandai F5, F10, F15, DES 1:80 5, DES 1:80 10, DES 1:80 15, DES 1:100 5, DES
1:100 10, DES 1:100 15, DES 1:150 5, DES 1:150 10, DES 1:150 15.
Uji Fenol
Pipet inokulum berkonsentrasi 106 kuman/ml sebanyak 0,5 ml ke dalam larutan fenol 1:80.
Tunggu sampai 5 menit, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung berlabel F5.
Lima menit kemudian, ambil lagi 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung F10. Setelah
lima menit kemudian, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung F15.
Uji I 1:80
Pipet inokulum berkonsentrasi 106 kuman/ml sebanyak 0,5 ml ke dalam desinfektan 1:80.
Tunggu sampai 5 menit, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung berlabel DES
1:80 5. Lima menit kemudian, ambil lagi 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES
1:80 10. Setelah lima menit kemudian, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung
DES 1:80 15.
Uji II 1:100
Pipet inokulum berkonsentrasi 106 kuman/ml sebanyak 0,5 ml ke dalam desinfektan 1:100.
Tunggu sampai 5 menit, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung berlabel DES
1:100 5. Lima menit kemudian, ambil lagi 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung
DES 1:100 10. Setelah lima menit kemudian, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam
tabung DES 1:100 15.
Uji III 1:150
Pipet inokulum berkonsentrasi 106 kuman/ml sebanyak 0,5 ml ke dalam desinfektan 1:150.
Tunggu sampai 5 menit, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung berlabel DES
1:150 5. Lima menit kemudian, ambil lagi 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung
DES 1:150 10. Setelah lima menit kemudian, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam
tabung DES 1:150 15.
Tabung-tabung reaksi uji kemudian dieramkan di dalam inkubator pada suhu 37C selama
24-48 jam.
Diamati ada tidaknya pertumbuhan bakteri pada setiap tabung
Pengamatan :
(+) keruh : ada pertumbuhan
(-) jernih : tidak ada pertumbuhan
VI. Data Pengamatan

Setelah tabung reaksi diinkubasi padsa suhu 37C selama 24 - 48 jam, maka didapatkan hasil
sebagai berikut:
Jenis Waktu / menit
pengenceran 5 10 15
FENOL 1 : 80 + + _
DESINFEKTAN 1 : 80 _ _ _
DESINFEKTAN 1 : 100 _ _ _
DESINFEKTAN 1 : 150 + _ _

VII. Perhitungan
Koefisien fenol adalah hasil bagi dari faktor pengenceran tertinggi desinfektan dengan faktor
pengenceran tertinggi baku fenol yang masing-masing dapat membunuh bakteri uji dalam
jangka waktu 10 menit, tetapi tidak membunuh dalam jangka waktu 5 menit.

VIII. Pembahasan
Dari pengamatan praktikum kali ini didapatkan hasil tes fenol 1:80, suatu desinfektan dengan
konsentrasi 1:80, 1:100, dan 1:150. Tes fenol dengan pengenceran 1:80 pada tabel di atas
menunjukkan bahwa kuman masih hidup sampai menit ke-10 namun setelah 15 menit, kuman
tersebut mati. Hal ini cukup rasional oleh karena semakin lama fenol tersebut bekerja,
semakin efektif pula daya disinfeksinya.

Pada pengenceran suatu desinfektan 1:80, tidak terdapat kuman sama sekali dari menit ke-5
sampai menit ke-15. Dengan hasil tersebut, asumsi kami adalah desinfektan ini memiliki
kefektifitasan yang cukup bagus sehingga dapat langsung membunuh kuman dengan cepat.
Sementara pada pengenceran 1:100, tabung reaksi juga tidak menampakkan kekeruhan dan
disimpulkan bahwa tidak ada bakteri yang hidup.

Namun pada pengenceran desinfektan yang terakhir, yaitu 1:150, terdapat kekeruhan di menit
ke-5 tetapi tidak pada menit ke-10 dan ke-15. Kekeruhan pada pengenceran terakhir ini
menimbulkan keraguan pada hasil dari pengenceran 1:100, atau pada pengenceran 1:150 ini.
Oleh karena kesalahan yang kami lakukan pada praktikum ini, kita tidak dapat melakukan
perhitungan koefisien fenol.Terjadinya hal ini dapat diakibatkan oleh berbagai faktor
kemungkinan. Faktor-faktor kemungkinan penyebab terjadinya kesalahan kami antara lain
adalah:
Pengerjaan praktikum secara paralel
Kegagalan yang terjadi dalam praktikum ini mungkin juga disebabkan oleh pengerjaan
tabung Uji Disinfektan secara paralel yang saat itu dimaksudkan untuk mempersingkat waktu
 pengerjaan. Pengerjaan secara paralel tersebut telah mengakibatkan ketidakakuratan dan
ketidaktelitian perhitungan waktu yang diperlukan.
Ketidakakuratan dalam pengambilan kuman menggunakan ose
Dalam menginokulasi kuman uji terhadap desinfektan, kami memindahkan kuman tersebut
hanya dengan 1 ose. Dengan penggunaan ose, terdapat kemungkinan kuman tidak terangkat
sesuai dengan konsentrasi yang diinginkan. Sebab pada percobaan kami, banyak kuman yang
mati. Pengambilan kuman dengan 2 ose mungkin dapat lebih akurat.
Penggunaan spiritus yang berlebihan
Banyaknya kuman yang mati juga dapat disebabkan terlalu seringnya dilakukan flambir pada
pembuatan inokulum dan pada penginokulasian kuman uji terhadap desinfektan. Kuman S.
aureus dan S. thyphosa tumbuh optimum pada suhu 37C, oleh karena itu tidak diperlukan
suhu panas yang berlebihan.
Pengenceran desinfektan yang tidak akurat
Pada percobaan kali ini, kami mungkin juga melakukan kesalahan ketika melakukan
pengenceran desinfektan ke dalam 1:80, 1:100, 1:150. Pengenceran yang dilakukan tidak
akurat, yaitu terlalu banyak desinfektan yang terkandung dalam 1:80 atau 1:100, sehingga
desinfektan terlalu pekat dan tidak sebanding dengan jumlah kuman yang dibiakkan.

IX. Kesimpulan
Dari percobaan yang kami lakukan tidak dapat diambil kesimpulan karena tidak ditemukan
hasil yang sesuai.

BAB III
PENUTUP
A. Kesimpulan
Koefisien fenol adalah perbandingan ukuran keampuhan suatu bahan antimikrobial
dibandingkan dengan fenol. Fenol dijadikan pembanding karena fenol sering digunakan
untuk mamtikan mikroorganisme. Koefisien fenol yang kurang dari 1 menunjukkan bahwa
bahan antimikrobial tersebut kurang efektif dibandingkan fenol. Sebaliknya, apabila koefisien
fenol lebih dari 1 artinya bahan mikrobial tersebut lebih ampuh daripada fenol

Tujuan dari uji koefisien fenol adalah untuk mengevaluasi daya anti mikroba suatu
desinfektan dengan memperkirakan potensi dan efektifitas desinfektan berdasarkan
konsentrasi dan lamanya kontak terhadap kuman dan membandingkannya terhadap fenol
standard yang disebut koefisien fenol.
PRINSIP UJI KOEFISIEN FENOL membandingkan aktivitas suatu produk (desinfektan) dengan
daya bunuh fenol dalam kondisi tes yang sama. Berbagai pengenceran fenol dan produk yang
dicoba dicampur dengan suatu volume tertentu biakan bakteri.

B. Saran
Penulis berharap Uji Koefisien Fenol yang telah disajikan dalam bab pembahasan dapat
dijadikan referensi ataupun tambahan wawasan bagi pembaca sehingga dapat
membedakannya dan dapat menerapkanya secara tepat dengan tujuan memajukan pendidikan
di Indonesia.

DAFTAR PUSTAKA

1. http://pharzone.com/blog/50-mikrobiologi/108-uji-koefisien-fenol.html
2. http://id.wikipedia.org/wiki/Fenol
3. JEWETZ, 2007, MIKROBIOLOGI KEDOKTRAN,CETAKAN I EDISI 23,
JAKARTA : BUKU KEDOKTERAN EGC.