KOLESTEROL TOTAL

 Metode CHOD-PAP
 Metode

Kolesterol ditentukan setelah hidrolisis enzimatik dan oksidasi. indikator quinoneimine dibentuk dari
hidrogen peroksida dan 4-aminophenazone dengan adanya fenol dan peroksidase.

 Prinsip Reaksi

CHE
Kolesterolester + H2O kolesterol + asam lemak

CHO
Kolesterol + O2 Kolesten -3-satu+H2O2

POD
2H2O+4-amino-phenazone+fenol quinoneimine+4H2O

 Isi

Reagen 4x30 ml,3x250 ml atau 4x100 ml reagen enzim

Penyangga fosfat (6,5) 100 mmol/l

4-aminophenazone 0,3 mmol/l

Phenol 5 mmol/l

Peroksidase > 5 KU/l

Kolesterolesterase > 150 U/l

Kolesteroloksidase > 100 U/l

Sodium azida 0.05%

Standar 3 ml standar

Cholesterol 200 mg/dl or 5,17 mmol/l

 Persiapan reagen

Reagen dan standar siap untuk digunakan

 Stabilitas reagen

Reagen stabil sampai tanggal kadaluarsa yang diberikan,bahkan setelah dibuka,saat disimpan pada suhu
2...8˚C. reagen yang dibuka stabil selama 2 minggu pada suhu 15 ...25 ˚C. Kontaminsai harus dihindari.

 Spesimen

Serum, heparin atau plasma – EDTA

 Catatan: spesimen lipemik biasanya menghasilkan kekeruhan dari sampel/campuran reagen yang
mengarah pada kesalahan hasil. tes kolesterol liquicolor dihindari dari kesalahan hasil yang ditimbulkan
melalui faktor pembersihan lemak (LCF). LCF membersihkan kekeruhan sepenuhnya yang disebabkan
oleh spesimen lipemik.
 Pengujian

Panjang gelombang = 500 nm, Hg 546 nm

Jalur Optik = 1cm

Temperatur = 20..25oC atau 37oC

Pengukuran = Melawan reagen blanko. Hanya satu reagen blanko per seri yang dibutuhkan

 Skema Pipet

Pipet ke tabung Reagen blanko Sampel atau standar

Sampel/standar ..... 10 µl

Reagen 1000 µl 1000 µl

Dihomogenkan,diinkubasi selama 10 menit pada suhu 20...25 oC atau 5 menit pada

suhu 37 oC. Ukur absorbansi sampel/standar terhadap residu reagen (ΔA) dalam
waktu 60 menit
 Perhitungan konsentrasi kolesterol
1. Dengan Faktor
Panjang gelombang C[mg/dl] C[mmol/l]
Hg 546 nm 840x ΔA 21,7x ΔA
500 nm 553x ΔA 24,8x ΔA
2. Dengan standar
Hanya standar yang direkomendasikan oleh Human (tertutup dalam kit atau tersedia secara
terpisah REF 10015) harus digunakan.

∆Asampel
C=200 x ∆ASTD
[mg/dl]

Atau

∆A
C=5,17 x ∆A sampel [mmol/l]
standar

 Karakteristik Kinerja
Linearitas
Tes ini linear sampai konsentrasi kolesterol 750 mg/dl (19,3 mmol/l). Encerkan sampel dengan
konsentrasi kolesterol yang lebih tinggi1+2 dengan garam fisiologis (0.9%) dan ulangi penentuannya.
Kalikan hasilnya dengan 3.
Data kinerja khas dapat ditemukan dalam laporan verifikasi, dapat diakses melalui:
www.human.de/data/gb/vr/su-chol.pdf
www.human-de.com/data/gb/vr/su-chol.pdf
 Interpretasi Klinik
Tersangka berakhir 220 mg/dl atau 5,7 mmol/l
Meningkat 260 mg/dl atau 6,7 mmol/l

Masyarakat atroklerosis Eropa merekomendasikan untuk menurunkan kadar kolesterol menjadi sekitar
180 mg/dl untuk orang dewasa sampai 30 tahun dan sekitar 200 mg/dl untuk orang dewasa diatas 30
tahun.

 Catatan
1. Tes ini tidak dipengaruhi oleh nilai hemoglobin sampai 20 mg/dlatau dengan nilai bilirubin sampai 5
mg/dl.
2. Reagen tersebut mengandung sodium azida sebagai pengawet (0,05%). Jangan ditelan. Hindari kontak
dengan kulit dan selaput lendir

 Referensi
1. Schetter,G. And Nussel, E., Arb. Med. Soz. Med. Präv. Med. 10, 25 (1975)
2. Richmond, W., Clin. Chem.19, 1350 (1973)
3. Röschlau, P. Et al, J. Clin. Chem. Biochem. 12, 403 (1974)
4. Trinder. P., Ann. Clin. Biochem. 6, 24 (1969)