Jurnal Nematologi 21 (1): 121-130. 1989. © The Society of Nematologists 1989.

Kelangsungan hidup Paecilomyces dan Efek Terkait pada

Meloidogyne lilacinus
di incognita
Dipilih pada Carriers
Tomat 1
Enrich CABANILLAS, KR BARKER, DAN LA NELSON 2
Abstrak: Percobaan laboratorium dan microplot dilakukan untuk menentukan pengaruh pembawa dan penyimpanan
Paecilomyces lilacinus pada kelangsungan hidup dan perlindungan terkait tomat terhadap Meloidogyne incognita. Spora P.
lilacinus disiapkan dalam lima formulasi: pelet alginat (pelet), butiran tanah diatomaceous (butiran), gandum gandum, tanah, dan
tanah plus chitin. Viabilitas jamur tinggi dalam gandum dan butiran, intermediet dalam pelet, dan rendah tanah dan chitin-diubah
tanah disimpan pada 25 _ + 2 C. Pada tahun 1985 P. lilacinus di bidang microplots menghasilkan peningkatan sekitar 25% dalam
hasil tomat dan 25 % penindasan empedu, dibandingkan dengan nematoda saja. Penekanan terbesar terhadap perkembangan sel
telur terjadi pada plot yang diobati dengan P. lilacinus pada pelet, gandum gandum, dan granula. Pada tahun 1986 perlindungan
dari tomat terhadap M. incognita menghasilkan sekitar tiga kali lipat peningkatan hasil buah tomat dan 25% penindasan
perkembangan empedu, dibandingkan dengan tanaman yang diobati dengan nematoda saja. Jumlah yang lebih tinggi dari massa
telur yang terinfeksi jamur terjadi di plot yang diperlakukan dengan pelet (32%) dibandingkan pada mereka yang diperlakukan
dengan tanah chitin-diubah (24%), gandum (16%), butiran (12%), atau tanah (7%) . Jumlah unit pembentuk koloni jamur per
gram tanah di plot yang diperlakukan dengan pelet 10 kali lipat lebih besar daripada tingkat awal yang diperkirakan pada waktu
tanam pada tahun 1986.
Kata kunci: kontrol biologis, Lycopersicon esculentum, Meloidogyne incognita, Paecilomyces lilacinus, nematoda akar-simpul
, tomat.
Nematoda akar-simpul adalah patogen tanaman penting yang mempengaruhi produksi tanaman di seluruh dunia
(10,13). Masalah terbaru dalam penggunaan pestisida kimia telah meningkatkan pengembangan metode biokontrol
untuk pengelolaan nematoda nematoda tanaman yang terintegrasi dengan berbagai jenis organisme antagonis
(1,10,13,15). Aksi para-jamur jamur telur dalam mengurangi populasi nematoda adalah bentuk yang menjanjikan
dari perlindungan tanaman terhadap Meloidogyne spp. Paecilomyces lilacinus (Thorn) Samson digambarkan sebagai
parasit jamur yang efektif dari telur Me- loidogyne incognita (Kofoid & White) Chit- wood dan Globodera pallida
(Stone) Beh-rens (13). Upaya untuk mengendalikan berbagai nematoda dengan jamur ini telah memberikan hasil
yang tidak konsisten (1,10,13,19).
NC ilar oleh tidak Penelitian menyediakan Universitas Menerima Jurnal yang Utara 27695-7601. menyiratkan Latin tidak ke
Layanan dukungan Carolina Series untuk Dr. disebutkan. dan publikasi Amerika J. Penggunaan oleh N. Kertas Sasser Pertanian,
suatu produk dengan perdagangan Ini Beasiswa Internasional No. 29 Departemen 11515 nama penelitian Maret Utara bernama,
Penelitian dalam Program 1988.
Carolina adalah Potato yang ini atau Journal didukung Layanan, publikasi Kritik tanaman Pusat Patologi Pertanian,
Seri Amerika Raleigh,
dalam bentuk hibah
merupakan bagian dari
North ogy, Graduate dan Carolina Professor Research State of University.
Statistik, Asisten, Profesor Utara Carolina dari Plant State Pathol- Universitas, Pusat Forrest, Para penulis Raleigh, Tanaman
Penelitian Evelyn terima kasih B. NC Reller, 27695-7616.
DW Station Marvin Byrd, untuk Jr., Williams, bantuan teknis DW dan Corbett.
staf Kathy di
 metode baru diperlukan untuk P. lilacinus untuk digunakan lebih efektif terhadap Melaminoidne spp. dan
nematoda tumbuhan-parasit lainnya. Satu taktik adalah menerapkan agen biokontrol dengan cara yang mirip dengan
nematicides. Pengiriman P. lilacinus ke dalam tanah telah terbatas pada metode tradisional seperti butiran penuh
atau suspensi spora air (1,10,13). Produksi komersial bahan bernama BIOCON telah dimulai di Filipina (13). Royal
350, suatu produk komersial yang mengandung Ar- throboWys irregularis strain l141b diaplikasikan pada butir
gandum (140 g / m 2) ke tanah sebagai sarana untuk mengontrol Meloidogyne sp. di ladang tomat (7).
Formulasi, metode dan waktu aplikasi, dan pemilihan agen pengendali biologis memainkan peran penting dalam
pengenalan antagonis yang berhasil dan sub-urutan biocontrol dari para-tanaman pabrik tertentu (8,9,11,14). Metode
yang digunakan untuk mengirimkan agen kontrol biologis ke tanah termasuk pembawa seperti granula tanah
diatomacea (2), pelet kulit (21), vermikulit atau tanah liat seperti pyrax (11), dan gel Laponite dengan bibit
berkecambah (8). Baru-baru ini, semua pelet dengan filler lempung pyrophyllite mengandung spora jamur dan sel
bakteri telah diformulasikan (11,22). Ini pel- memungkinkan biodegradable, relatif seragam dalam ukuran, dan
nyaman untuk menyimpan, pengapalan
121
122 Jurnal Nematologi, Volume 21, Nomor 1, Januari 1989
ping, dan memberikan antagonis ke dalam tanah. Ada sedikit informasi yang tersedia, bagaimanapun, pada efek
formulasi P. lilacinus pada kelangsungan hidup selama penyimpanan, pembentukan, kelangsungan hidup, atau
berdampak pada kontrol nematoda ketika dikirim ke dalam tanah.
Tujuan penelitian ini adalah untuk 1) mengetahui pengaruh pembawa dan lama penyimpanan terhadap viabilitas
P. lilacinus; 2) menjelaskan keampuhan pembawa jamur ini pada perlindungan tomat terhadap M. incognita; 3)
menentukan kelangsungan hidup jamur setelah pengantar ke dalam tanah; dan 4) menentukan efek residu P.
lilacinus pada M. incognita.
BAHAN DAN METODE Pengaruh pembawa dan panjang penyimpanan pada viabilitas jamur: Isolat P.
lilacinus yang digunakan berasal dari International Potato Center, Lima, Peru (13). Jamur dimasukkan ke dalam
microplots di Central Crops Research Station dekat Clayton, North Carina, dan direisolasikan dari massa telur yang
terinfeksi. incognita pada akar tomat. Jamur dikultur pada potato dextrose agar (PDA), pada 25 C selama 14 hari,
kemudian ditambahkan ke carrier.
Spora dari P. lilacinus diformulasikan dalam pelet alginat, granula tanah diatomacea, tanah, atau tanah plus chitin,
atau mereka ditumbuhkan pada biji gandum steril. Pelet alginat dengan dan tanpa jamur ini disiapkan seperti yang
dijelaskan sebelumnya (11,22), kecuali 10 g natrium alginat dan 100 g pyrax ditambahkan ke 1 liter air suling steril
dan dicampur dalam blender disterilkan selama 30 detik. Dua ratus mililiter campuran alginat-pyrax, yang
disesuaikan dengan pH 7, dipindahkan ke labu erlenmeyer mulut lebar 500 ml dengan sistem penggandengan.
Campuran ini diubah dengan 20 ml suspensi berair spora dari budaya PDA 14-hari-lama. lilacinus (5,2 x 107 spora /
ml). Campuran akhir ditambahkan tetes demi tetes ke dalam 500 ml larutan gellant 0,1 M kalsium glukonat (Sigma,
Cat. No. 6-4615 asam D-glukonat). Setiap droplet yang menembus larutannya terbentuk, membentuk pellet bulat
yang berbeda. Proses ini
difasilitasi dengan menggunakan katup akuarium empat geng yang melekat pada peralatan yang dijelaskan
sebelumnya untuk menyiapkan pelet (11). Pelet dikumpulkan pada kain katun tipis, dikeringkan semalam dalam kap
aliran udara laminar, dan disimpan dalam kantong plastik pada suhu kamar (24-26 C). Pelet basah adalah 3 mm d,
setelah pengeringan pelet adalah 1 mm d. Berat kering udara adalah 400 pelet / g.
Pelet diuji dengan pelapisan pengenceran sebagai berikut: satu gram pelet yang dikeringkan dengan udara
dilarutkan dalam 100 ml campuran 8,7 x 10 -2 M KH2PO ~ dan 3,0 x 10 -2 M Na2 HPO4 selama sekitar 5 jam.
Pengenceran homogenat dibuat dengan mengeluarkan 1 ml suspensi spora ke dalam 9 ml air suling destilasi dan
mencampur pada pengocok aksi pergelangan tangan selama sekitar 1 menit; 1-ml ali dicairkan dalam cawan petri
dan dicampur dengan sekitar 20 ml lelehan agar (40-45 C) media semiselektif untuk P. lila-cinus (6).
Media gandum dengan dan tanpa P. lil- acinus disiapkan secara terpisah dengan menggandakan 300 cm 3 gandum
secara otomatis dalam tas autoklaf (Fisher Scientific Co.) yang mengandung 250 ml air suling pada 121 C selama 30
menit selama 2 hari berturut-turut. Inokulum jamur dikumpulkan dari budaya 14 hari pada PDA. Sepuluh mililiter
suspensi spora berair P. lilacinus disuntik dengan jarum suntik steril melalui kantong ke biji yang diautoklaf. Kultur
diinkubasi pada kondisi ruangan (25 + 2 C) selama 20 hari. Tas dikocok dengan tangan selama sekitar 5 menit setiap
hari untuk menyeragamkan inokulum pada biji gandum.
Diatomaceous earth butiran dengan dan tanpa P. lilacinus disiapkan secara terpisah dengan modifikasi prosedur
yang telah dijelaskan sebelumnya (2). Tiga ratus sentimeter kubik dari butiran tanah diatomaceous (Celatom MP-78)
dalam kantong autoclaving diresapi dengan 150 ml larutan 10% (v / v) dari molase pada pH 5.0 yang mengandung 3
g KNO3 dan 3 g KH2PO4 per liter solusi. Campuran diautoklaf dan dibiarkan mendingin selama 24 jam. Granul-
granul itu kemudian disebarkan dalam panci plastik polipropilena dengan penutup dan diinokulasi dengan kultur
PDA berusia 14 hari yang sudah tua dari
P. lilacinus Carriers: Cabanillas et al. 123
P. lilacinus. Butiran diinkubasi pada 24 C selama 5 hari. Gumpalan granul dihancurkan, dan granul dikeringkan
dengan pengadukan dan disimpan dalam ruangan (25 _ + 2 C) selama 20 hari.
Inokulum tanah dari P. lilacinus dipreparasi dengan mengeluarkan 20 ml suspensi berair spora yang terbuat dari
budaya PDA 14 hari dari jamur ini ke 500 cm ~ tanah pasir kukus (75 C selama 90 menit) yang terkandung dalam
tas autoklaf . Persiapan tanah-jamur dicampur secara menyeluruh selama sekitar 5 menit setiap hari dan disimpan
pada kondisi ruangan selama 20 hari. Kontrol tanah dan persiapan tanah jamur dibandingkan untuk menentukan
pengaruh panjang penyimpanan dan suhu pada kelangsungan hidup P. lilacinus di dalam tanah. Pada 20 Juli 1984,
10 ml suspensi spora (3,2 x l0 s) ditambahkan ke 250 cm 3 tanah rumah yang dikukus sterilisasi (1: 1 pasir: tanah)
yang terkandung dalam botol kaca 500-ml. Tanah diinkubasi pada suhu kamar (24-26 C) selama 14 hari dan
kemudian didinginkan pada 5 C. Sampel, diambil pada 20 Juni 1985 (hampir 1 tahun setelah infeksi tanah) yang
diuji oleh kultur pengenceran pada media semiselektif. Populasi P. lilacinus (2,3 x 106 CFU / g tanah) masih layak
dan dapat dengan mudah dan cepat dicakup kembali dari kultur tanah.
Persiapan tanah ditambah chitin dengan dan tanpa P. lilacinus melibatkan prosedur yang sama yang dijelaskan
untuk persiapan tanah, kecuali chitin ditambahkan ke tanah. Chitin kelas praktis (poli-N-acetylglucosamine dari
cangkang kepiting (Sigma Chemical Co.) ditambahkan ke suspensi spora 100-ml dengan laju 3% b / v. Dua puluh
mililiter kitin-spora susun ditambahkan ke 500 cm s tanah pasir dikukus yang terkandung dalam kantong
autoclaving.Proses tanah-jamur ini diubah dengan chitin disimpan pada kondisi ruangan (25 + 2 C) selama 20
hari.Efek dari pembawa dan panjang penyimpanan pada viabilitas P. lilacinus ditentukan dalam waktu 8 minggu.
Empat puluh butir pelet kering, 100 g butiran, 100 g gandum, 200 g tanah, dan 200 g tanah ditambah chitin yang
mengandung jamur ini ditempatkan secara terpisah dalam kantong plastik dan dalam - dadu pada suhu kamar (25 +
2 C).
Sampel diambil setelah 1, 7, 14, 28, dan 56 hari penyimpanan. Sampel diambil secara acak, dan unit pembentuk
koloni P. lilacinus per gram pembawa (CFU / g) ditentukan oleh pelapisan dilusi pada media semisiliabel. Untuk
setiap pembawa yang diolah oleh jamur, pengenceran 10 kali lipat adalah p erformed dengan dua piring per
pengenceran per mereplikasi. Prosedur ini direplikasi dua kali.
Desain percobaan ini adalah split-plot dengan carrier sebagai keseluruhan plot dan waktu penyimpanan sebagai
subplot. Ada dua ulangan pembawa dan dua piring per replikasi. Data pembawa CFU / g diubah menjadi log10 Y
sebelum analisis statistik untuk menormalkan varians. Analisis regresi dilakukan untuk membandingkan hubungan
antara viabilitas propagul jamur (tanggapan variabel independen) dan lama penyimpanan setiap formulasi (variabel
independen). Ejficacy of carriers of P. lilacinus: Dua percobaan dilakukan di plot-plot mikro di lapangan. Pada 3 Juli
1985, microplots didirikan (3) di lempung pasir Varina (89% pasir, 9,5% lanau, 1,5% lempung, 0,8% bahan organik;
pH 6,0; CEC 4,4 meq / 100 cm 3, saturasi basa 82 % dari KTK) di Central Crops Research Station dekat Clayton,
North Carolina. Petak-petak difumigasi dengan metil bromida (0,10 kg / m ~) 4 minggu sebelum tanam tomat
(Lycopersicon esculen- turn Mill.).
Meloidogyne incognita race 1 (E589) dari Penelitian dan Pengendalian Nematoda Tanaman di Raleigh, North
Carolina, dipelihara pada tomat Rutgers di rumah kaca (26-28 C) selama 60 hari. Telur nematoda diekstraksi dengan
teknik NaOCI (4) dan disesuaikan dengan 500 telur / 500 cm 3 tanah. Setiap microplot penuh dengan 42.000 telur
yang dimasukkan ke dalam 42.000 cm 3 tanah di tengah plot 76-cm-d.
Persiapan P. lilacinus diuraikan di bagian formulasi. Formulasi jamur disesuaikan untuk menyamai laju 18 g
fungus-dipenuhi gandum per 0,4778-m 2 plot (1,5 kg / 40 ms) (17). Formulasi P. lil- acinus disiapkan 13 Juni 1985
dan disimpan pada suhu kamar. Sebelum aplikasi lapangan, kelangsungan hidup dari
124 Journal of Nematology kering, Volume 21, No. 1, Januari I989
TABEL 1. Konsentrasi spora yang layak dari Pae- cilomyces lilacinus di operator yang berbeda digunakan untuk aplikasi
lapangan pada tahun 1985.
Carrier CFU / g ~ g / plot
Gandum 3,1 x 107 18 Pelet 2,9 x 10 ~ 19 Butiran 3,3 x 107 17 Tanah 5,5 x 106 101 Tanah + kitin 5,6 x 106 100
Jumlah spora distandarisasi di setiap carrier sama dengan 1,5 kg gandum per 40 m 2 (0,4 ton / ha) (plot = 0,4778 - m2).
] "CFU / g = unit pembentuk koloni per gram formulasi.

Preparat diuji 7 hari setelah persiapan dengan secara terpisah menempatkan 10 subsampel setiap formulasi pada dua
piringan yang mengandung media semiselektif. Standarisasi inokulum adalah per - terbentuk 14 hari setelah
persiapan for- mulations dengan teknik pengenceran. Dua 1-g subsamples dari masing-masing bahan diferencing ke
10 -4 dan 10 -5. Suspensi 1-ml ditempatkan di masing-masing lima piring dari medium semiselektif Semua lempeng
diinkubasi di laboratorium pada 25 + 2 C selama 4 hari sebelum menghitung koloni P. lilacinus, Konsentrasi spora
yang viabel dan jumlah inokulum yang digunakan bervariasi dengan formulasi (Tabel 1).
Kecuali untuk kontrol. , setiap plot penuh dengan M. incognita dan formulasi jamur ditambahkan pada
transplantasi di pusat microplot. Dua tanaman tomat Rutgers berumur 13 minggu ditransplantasi di setiap plot pada
3 Juli 1985. Desain eksperimental adalah acak- blok lengkap lengkap 12 perawatan (Tabel 2) dan 9 ulangan.
Untuk menilai populasi nematoda, sampel tanah komersil (sepuluh core 2,5 cm per plot) dikumpulkan dari 20 cm
atas zona akar. Remaja diekstraksi dari sampel tanah dengan elutriation dan sentrifugasi (4). Akar dari saringan 425-
tzm-mesh diobati dengan NaOC1 untuk mengekstrak telur (4).
Efek residu P. lilacinus 1 tahun kemudian: Percobaan kedua dilakukan pada tahun 1986 untuk menentukan efek P.
lilacinus pada kedua M. incognita dan kelangsungan hidup jamur 1 tahun setelah penambahan ke tanah. Desain
eksperimental mirip dengan yang digunakan dalam percobaan pertama, kecuali bahwa microplot tidak difumigasi
sebelum penanaman. Percobaan dimulai 16 Mei 1986 dan dihentikan 5 September 1986. Plot tidak menerima
pengobatan nematoda atau jamur selain yang diterapkan pada 3 Juli 1985. Dua tanaman tomat Rutgers berumur 9
minggu ditransplantasikan ke masing-masing plot. Pengumpulan sampel tanah dari microplot dan ekstraksi
nematoda mengikuti prosedur yang sama yang dijelaskan untuk eksperimen 1985. Populasi populasi M. entognita
juvenile awal diperkirakan dari sampel tanah yang diambil 1 hari sebelum penanaman (Pi), dan tingkat populasi
akhir (Pf) diperkirakan pada panen buah akhir.
Untuk menilai tingkat populasi nematoda dan jamur, sampel tanah komposit (sepuluh 2,5 cm-d core)
dikumpulkan dari 20 cm atas tanah di zona akar. Nikel dan nematoda awal dan akhir diperkirakan pada saat yang
sama. Sampel disegel dalam kantong plastik dan disimpan pada 5 C. Satu 10-g subsampel tanah diencerkan sampai
10 -8, dan 1 ml pengenceran tersebar merata ke masing-masing dua cawan petri yang mengandung 15-20 ml semi -
media selektif untuk P. lilacinus. Semua hidangan diinkubasi dalam gelap pada 24 C selama 2 hari dan di bangku
laboratorium pada 25 + 2 C di bawah cahaya fluorescent selama 2 hari tambahan 10-g
porsi sebelum menghitung setiap koloni sampel tanah jamur. digunakan A
untuk menentukan kadar air. Itu dikeringkan dalam oven pada 105 C selama 24 jam. Jumlah rata-rata koloni jamur
dihitung per gram tanah kering oven. Pada saat panen, sistem akar yang digali dari mikrotip dengan lembut dicuci
untuk menghilangkan partikel tanah, dikeringkan, dibungkus dalam menara kertas, disegel dalam kantong plastik,
dan disimpan pada 5 C selama 16 hari. Sepuluh massa telur diambil secara acak dari akar yang digali, permukaan
disterilkan dengan 0,5% NaOC1 selama sekitar 30 detik, dibilas dua kali dalam air keran steril, dan ditempatkan di
masing-masing dua piring berisi media selektif yang dipadatkan. Setiap hidangan memiliki 10 telur didistribusikan
secara merata. Semua hidangan diinkubasi pada 24 C dalam gelap selama 2 hari dan di bangku laboratorium di 25
P. lilacinus Carriers: Cabanillas et al. 125
+ 2 C selama 2 hari tambahan sebelum menghitung koloni P. lilacinus. Jumlah massa telur yang terinfeksi oleh
jamur dihitung setelah 4 hari dan dinyatakan sebagai persentase dari massa telur yang terinfeksi.
Rancangan blok lengkap yang diacak termasuk 12 perlakuan yang diulang sembilan kali. Analisis varians
menggabungkan kontras linear dilakukan pada data. Cara pengobatan dan hasil tes signifikansi dari kontras linear
untuk berbagai variabel respon dihitung. Data untuk perawatan dengan nol berarti dihilangkan dari analisis varians.
HASIL Pengaruh pembawa P. lilacinus dan panjang penyimpanan pada viabilitas jamur: Viabilitas
propagul jamur berbeda dengan panjang penyimpanan di carrier (Gambar 1). Viabilitas tetap tinggi pada butir
gandum dan butiran diato-maceous tetapi menurun pada pelet alginat, tanah, dan tanah yang di-chitin selama waktu
penyimpanan. Viabilitas jamur paling sedikit di tanah pelet, tanah, dan chitin-amended pada 7 dan 14 hari
penyimpanan; setelah 14 hari itu menurun tajam di tanah, dan tanah chitin berubah. Viabilitas adalah intermediet
dalam pelet.
Kemanjuran pembawa P. lilacinus pada perlindungan M. incognita 1985: Pembawa jamur secara diferensial
mempengaruhi perlindungan tomat terhadap M. incognita (Tabel 2). Perlindungan terbaik adalah dengan P. lil-
acinus diformulasikan dalam bentuk butiran dan pada gandum, yang menghasilkan sekitar 25% peningkatan hasil
tomat dan supresi 25% empedu bila dibandingkan dengan plot yang diperlakukan dengan nematoda saja. Meskipun
supresi perkembangan empedu, nekrosis akar dikembangkan di semua perawatan (kisaran 27-53%) tanpa perbedaan
yang signifikan di antara mereka.
Berdasarkan kontras linear, pengaruh P. lilacinus pada reproduksi nematoda juga tergantung pada jenis pembawa
yang digunakan untuk pengiriman ke tanah (Tabel 2). Petak yang diobati dengan jamur memiliki jumlah remaja
yang lebih rendah di midseason (data tidak termasuk) dan pada saat panen daripada plot yang tidak diobati. Tomat
dalam plot yang diperlakukan dengan P. lilacinus juga mendukung lebih sedikit telur nematoda devel-
8

_=
Iv- 7
o

Q, ==
0 O5
J
4
0

~
"~" "WHEAT
GRANULES
" ,,, ..... ~

\\
\ \\
PELLETS
(0,05) Isd \ ~ \
"~ .... SOIL \

\
~ _. SOIL + CHITIN
14 28 HARI PENYIMPANAN PADA 42 25 C
56
Gambar 1. Pengaruh pembawa dan panjang penyimpanan pada 25 4 - 2 C pada viabilitas
Paecilomyces lilacinusoposisi
CFU = unit pembentuk koloni,

daripada tomat dalam plot yang diperlakukan dengan carrier dikurangi jamur. Penekanan pengembangan telur saat
panen lebih besar pada plot yang diperlakukan dengan jamur dalam pelet dibandingkan dengan yang diperlakukan
dengan pelet saja. Demikian pula, penghambatan pengembangan telur pada tanaman lebih besar di plot di mana P.
lila- cinus diaplikasikan dalam granula daripada yang menerima butiran saja. Secara umum, menghilangkan
penekanan M. incognita yang diperoleh oleh perawatan dengan P. lilacinus, tingkat telur lebih besar daripada remaja
di semua plot.
Efek residu P. lilacinus 1 tahun setelah melahirkan), ke dalam tanah: Efi ency dengan yang formulasi P. lilacinus
dilindungi to- mato terhadap M. incognita menurun 1 tahun setelah pengenalan ke dalam tanah (Tabel 3). Namun
demikian, populasi residu dari jamur ini di tanah meningkat pada akhir musim tanam tomat kedua. Pada musim
tanam kedua hasil tomat menurun sebanyak 75% atau lebih, pertumbuhan empedu sedikit meningkat, dan nekrosis
akar meningkat 15 hingga 43% dibandingkan dengan hasil yang diperoleh pada tahun sebelumnya. Di
126 Journal of Nematology, Volume 21, No. i, Januari 1989,
TABEL 2. Kemanjuran komparatif pembawa Paecilomyces lilacinus dalam membatasi kerusakan pada tomat oleh
Melydidogyne incognita pada petak mikro, 1985.
Perlakuan
Nematoda akhir angka (dalam 1.000)
Tomat indeks hasil Gall necrosis Root (telur Akar per
Tanah (500 cm)
(g / plot) (0-100) (0-100) 10 g) Telur Remaja
1. Pelet (jamur) + M. incognita (MI) 4,991 2. Gandum (jamur) + MI 6,171 3. Butiran (fungus) + MI 6,403 4. Tanah (jamur) + MI
5,451 5. Tanah + kitin (jamur) + MI 5,159 6. Pelet + MI 4.907 7. Gandum + MI 4.567 8. Butiran + MI 5.016 9. Tanah + MI
4.811 10. Tanah + kitin + MI 5.535 11. M. incognita hanya 4.919 12. Kontrol (tidak ada telur nematoda, tanpa jamur) 7,746 CV
(%) 28
Kontras linier] "
12 banding 1 -I1 ** 11 vs. 1-10, 12 NS 1-5 vs. 6-10 *
4 vs. 1-3, 5 NS 5 vs. 1-4 NS 2 vs. 1, 3 NS 1 vs. 3 NS 1 vs. 6 NS 2vs 7 * 3 vs. 8 NS 5 vs. 10 NS
79 43 87 19 1.6 63 27 63 27 2.5 62 33 58 36 2.9 76 37 80 55 3.1 84 37 82 36 2.5 82 46 113 64 4.8 81 32 149 50 5.0 91 53 126 73
6.6 79 39 128 67 6.9 86 41 106 46 5.9 88 43 121 79 17.9 0 0 0 0 0 20 62 39 66 154
NS NS NS ** ** ** NS ** ** NS
* NS NS NS NS NS NS NS NS * NS NS NS NS NS ** NS * NS ** NS NS ** NS ** * NS NS NS NS NS NS
Data di badan meja adalah sarana sembilan ulangan. Untuk indeks empedu dan nekrosis akar, 0 = terpengaruh.
] "Data untuk perawatan dengan nol berarti dihilangkan dari analisis varians. *, ** P = 0,05 dan 0,01, masing-masing; NS =
tidak ada perbedaan yang signifikan.
Sehat dan 100 = 100% dari akar
menunjukkan perbedaan yang signifikan pada saat

panen, beberapa tomat tanaman dipengaruhi oleh layu bakteri yang disebabkan oleh Pseudomonas lanacearum.
Meskipun kinerja yang buruk ini, biokontrol M. incognita lebih baik di plot yang diperlakukan dengan formulasi P.
lilacinus dibandingkan pada mereka yang diperlakukan dengan carrier saja. 0,05) terdeteksi dalam hasil, berat akar,
indeks empedu, dan nekrosis akar.Perlindungan terbaik terhadap M. incognita diperoleh di plot yang diperlakukan
dengan butiran P. lilacinus yang menghasilkan peningkatan sekitar tiga kali lipat dalam hasil tomat, 26% penekanan
perkembangan empedu , 47% penekanan nekrosis pada akar, dan 12% massa telur yang terinfeksi dengan bakteri
dibandingkan dengan mereka yang diobati dengan nematoda saja. Tidak ada perbedaan dalam hasil plot yang
diperlakukan dengan P. lilacinus pada butiran, gandum, atau tanah. Namun, tidak ada perbedaan dalamempedu
perkembanganpada tanaman yang diobati dengan jamur ini pada butiran, gandum, pelet, atau tanah. Persentase
infeksi telur-telur tertinggi adalah di plot di mana P. lilacinus diaplikasikan dalam pelet (32%); itu secara signifikan
lebih tinggi dari pada plot yang diperlakukan dengan granula dengan jamur (12%) sesuai dengan kontras garis-
telinga (Tabel 3). Infeksi jamur pada massa telur juga ditemukan di plot di mana P. lilacinus diaplikasikan di tanah
yang telah mengalami chitin-amended (24%), pada gandum (16%), dalam granul (12%), dan di tanah (7%) (Tabel
3). ).
Jenis pembawa jamur juga memiliki efek besar pada reproduksi nematoda dan perkembangan populasi jamur di
tanah (Tabel 3). Jumlah telur dan juvenin pada saat tanam dan saat panen kurang dalam plot yang telah menerima
berbagai formulasi P. lilacinus daripada di kontrol.
 TABEL 3. Pengaruh formulasi Paecilomyces lilacinus pada kontrol Meloidogyne incognita pada aktivitas tomat dan jamur
setelah 1 tahun pengiriman ke dalam tanah, 1986.
Pengobatan
Jumlah nematoda / 500 cm s Tanah
Akar Tomat yang terinfeksi menghasilkan indeks Gall nekrosis massa telur Penanaman Panen Akhir Telur Remaja
(CFU / g P. tanah - dalam lilacinus
1.000s) (g / plot)
(0-100) (0-100) (%) Telur Remaja (dalam 1.000) Penanaman Panen
1. Pelet ( fungus) + M. incognita (MI) 528 61 42 32 2. Gandum (jamur) + MI 674 69 54 16 3. Butiran (fungus) + MI 977 56 49
12 4. Tanah (jamur) + M1 710 67 57 7 5 Tanah + chitin (fungus) + MI 541 74 66 24 6. Pelet + MI 640 83 68 0 7. Gandum + MI
420 89 83 0 8. Butiran + MI 581 84 68 0 9 ° Tanah + MI 479 91 87 0 10 Tanah + kitin + MI 500 91 81 0 11. M. incognita hanya
252 95 96 0 12, Kontrol (tidak ada nematoda, tidak ada jamur) 1,979 0 0 0 CV (%) 54 16 32 97
Linear contrastst
12 vs 1-11 ** 11 vs. 1-10, 12 ** ** ** 1-5 vs. 6-10 * ** **
4 vs. 1-3, 5 NS * * NS 5 vs. 1-4 N S NS NS * 2 vs. 1, 3 NS * NS NS 1 vs. 3 * NS NS * 1 vs. 6 NS ** * 2 vs. 7 NS ** ** 3 vs. 8 *
** NS 5 vs. 10 NS ** NS
235 119 202 3.0 2.0 20.6 174 77 259 4.6 0.9 2.1 368 93 280 3.7 0.6 6.6 586 93 293 3.3 1.7 9.8 500 57 286 3.0 1.6 13.1 777 199
412 2.3 0 0 797 189 313 3.8 0 0 705 153 306 3.0 0 0 722 157 459 2.7 0 0 1.002 133 511 4.0 0 0 910 132 537 4.5 0 0 0 0 0 0 0 0
83 124 53 78 131 142
NS NS ** NS ** * ** NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS NS * NS * NS * NS NS NS NS NS NS NS *
NS * NS
~ 0 NS NS NS NS NS *
°. NS *
Data dalam tubuh tabel berarti sembilan ulangan; J2 = ikan muda; CFU / g = unit pembentuk koloni per gram berat kering tanah.
t "Data untuk perawatan dengan nol berarti dihilangkan dari analisis varians. *, ** menunjukkan perbedaan yang signifikan pada
P = 0,05 dan 0,01, masing-masing; NS = tidak ada perbedaan signifikan.
1" ,, 9
128 Journal of Nematology, Volume 21 , No. 1, Januari 1989
Jumlah telur terbesar pada saat panen berada di petak yang diinokulasi dengan M. incognita saja. Penetasan telur
saat panen sedikit lebih tinggi pada plot yang telah menerima funkus dalam pelet (62%) dibandingkan dengan yang
diberi gandum (52%), granul (48%), tanah (45%), atau kitin-amin tanah (47%).
Populasi P. lilacinus meningkat dari 556 menjadi 2.000 CFU / g tanah saat tanam menjadi 2-11 kali lebih banyak
pada saat panen (Tabel 3). Pada saat panen, populasi P. lilacinus di plot yang diperlakukan dengan pellet fungus
adalah 20.556 CFU / g tanah.
DISKUSI Hasil percobaan kami menunjukkan bahwa jenis pembawa yang digunakan dalam
pengenalan P. lilacinus ke tanah mempengaruhi kelangsungan hidupnya selama penyimpanan, pembentukannya di
tanah lapangan, dan perlindungan tomat selanjutnya terhadap M. incognita. Perbedaan dalam kelangsungan hidup
jamur pada operator dapat dikaitkan dengan ketersediaan nutrisi, panjang penyimpanan, suhu yang menguntungkan,
dan faktor pertumbuhan lainnya (14). Penambahan nutrisi bersama dengan propagul dapat meningkatkan
perkecambahan spora selama as-said. Beberapa biokontrol jamur berkembang biak secara melimpah di berbagai
tanah alami ketika propagul bersentuhan dengan basis makanan yang memungkinkan antagonis tumbuh melalui
tanah (17). Penambahan basis makanan bersama dengan propagul dapat merangsang spora untuk berkecambah,
tetapi pertumbuhan mungkin tidak terjadi, mungkin karena substrat organik dijajah dan dieksploitasi lebih cepat oleh
jamur patogen atau saprofit yang memiliki kemampuan saprofit kompetitif yang lebih tinggi daripada antagonis.
Masalah lain yang terkait dengan penggunaan perubahan nutrisi dengan agen biokontrol hasil dari stimulasi
patogen indigeous dan karenanya peningkatan penyakit. Kelebihan nutrisi (molase) dalam granul yang mengandung
Trichoderma harzianum dapat digunakan dengan cepat oleh patogen Phy- tophthora cinnamomi, terutama di tanah
basah ketika pertumbuhan antagonis ditekan oleh kekurangan oksigen, yang menyebabkan penyakit yang meningkat
(14). Meskipun kelangsungan hidup yang tinggi dari agen biokontrol potensial yang
diinginkan untuk keberhasilan (5,15), tidak ada bukti eksperimental untuk menunjukkan hubungan antara
kelangsungan hidup P. lilacinus dalam berbagai formulasi dan kontrol biologis.
Dalam penelitian ini, persentase kerugian terbesar dalam kelangsungan hidup P. lilacinus dalam pelet terjadi
selama 2-4 minggu pertama. Viabilitas konidia berbagai biokontrol jamur dalam pelet alginat diformulasikan dengan
penurunan lempung pyrophyllite sebesar 10-100% selama periode 4 minggu pada suhu kamar, tetapi beberapa
konidia masih bertahan setelah 12 minggu (11). Demikian pula, viabilitas Trichoderma dan Gliocladium dalam pelet
alginat pada suhu 25 C tetap tinggi (> 70%) setelah 1 minggu, tetapi menurun menjadi kurang dari 10% setelah 24
minggu. Meskipun hilangnya viabilitas propagul dalam pelet yang disimpan, jumlah CFU yang dihasilkan setelah
menambahkan pelet ini ke tanah sebanding dengan yang dihasilkan dari pelet yang baru disiapkan (16). Suhu selama
penyimpanan merupakan faktor penting dalam kelangsungan hidup jamur dalam formulasi. Konidia Tala-
romycesflavus dalam pelet alginat-bran disimpan selama 15 minggu bertahan lebih baik pada 5 dan 15 C dari pada
25 C (17). Dengan demikian, vi- kemampuan P. lilacinus tinggi dalam kultur tanah disimpan pada 5 C selama lebih
dari 1 tahun.
Hasil dari uji lapangan menunjukkan bahwa butiran-butiran bumi yang tumpang tindih, gandum, dan pelet algin
merupakan pembawa yang paling memuaskan untuk aktivitas P. liIacinus melawan M. incognita. Meskipun P.
lilacinus menjadi lahir di semua plot yang dirawat, efisiensi perlindungan biologis menurun pada akhir musim tanam
kedua. Operator dengan basis nutrisi muncul untuk meningkatkan kelangsungan hidup P. lil- acinus dan aktivitas
antagonis, dan mungkin memungkinkan kolonisasi mikroorganisme saprofit lainnya.
Produk dekomposisi dari basa uji juga dapat berkontribusi terhadap penekanan nema- tode. Zat organik dikenal
untuk merangsang pertumbuhan rangsangan predator, tetapi juga dapat menstimulasi pertumbuhan tanaman dan
mengimbangi kerusakan nematoda (15). Selama penguraian, bahan organik dapat menghasilkan produk pemecahan
nematicidal (18). Oleh karena itu, penambahan bahan organik dalam jumlah besar ke tanah dapat mengurangi nema-
P. lilacinus Carriers: CabaniUas et al. 129
nomor tode, tetapi efek tersebut berumur pendek kecuali ditambahkan ke tanah berulang kali. Demikian pula, lebih dari satu
aplikasi P. lil- acinus mungkin diperlukan pada saat yang tepat untuk mempertahankan biokontrol efektif nematoda (6,19).
Sedikit yang diketahui tentang nasib propulir dari P. lilacinus ditambahkan ke tanah di lingkungan yang beragam. Data kami
menunjukkan bahwa beberapa P. lilacinus ditambahkan ke tanah sebagai konidia tanpa suplai nutrisi amandemen bertahan lebih
dari 1 tahun. Panjang kelangsungan hidup, bagaimanapun, dapat bergantung pada isolat yang digunakan atau kondisi tanah. Isolat
P. lilacinus yang digunakan untuk persiapan formulasi kami memiliki potensi dan keagresifan untuk berkolaborasi dan
membangun di lingkungan alam. Isolat ini telah digunakan untuk menginfestasi lahan yang penuh dengan nematoda simpul akar,
kemudian pulih dari telur yang terinfeksi.
Nematode reproductive potential should be considered in evaluating the utility of antagonists (15). In the second growing
season, population levels ofM. incognita in- creased 500 x over those at planting time, whereas the numbers ofP. lilacinus
(CFU/g soil) increased only 10 x (in pellets). There- fore, this fungus needs to be very efficient to reduce populations of
nematodes such as M. incognita with a high reproductive capacity. Consequently, parasites or pred- ators that attack adult stages
of nematodes should be evaluated because they are more likely to suppress nematode multiplication than those that attack
juveniles or eggs (15). The populations ofP. lilacinus added to soil in the carriers in our study did not reach sufficient numbers to
give immediate and economic control. A biocontrol fungus must survive several seasons and build up in soil to an optimum level
to control M. incognita. Edaphic factors such as soil mois- ture affect nematode and fungal activity (12) and are likely to impact
the efficacy of P. lilacinus as a biocontrol agent. More in- formation is needed on inoculum level of P. lilacinus necessary to
effectively control root-knot nematodes for various field con- ditions.
Several carriers can be utilized to deliver fungi to soil, but some of these require
large quantities of material or are imprac- tical. Alginate pellets show promise as a carrier of P. lilacinus and should be con-
sidered for commercial production be- cause of their potential versatility in bio- logical control. The advantages of pellets as
carriers for biocontrol agents have been described by other investigators (9,11,16,22). The development of opti- mum delivery
systems for biocontrol agents should aid in the advancement of biocon- trol research and its integration into man- agement
systems.
LITERATURE CITED
1. Adiko, A. 1983. Biological control of Meloido- gyne incognita with Paecilomyces lilacinus. MS thesis, North Carolina State
University, Raleigh.
2. Backman, PA, and R. Rodriguez-K~bana. 1975. A system for the growth and delivery of bio- logical 819-821.
control agents to the soil. Phytopathology 65:
plot 3. techniques Barker, K. in R. nematological 1985. The application research. of Pp. micro- 127- 134 in KR Barker, CC
Carter, and JN Sasser, eds. An advanced treatise on Meloidogyne, vol. II. sity Methodology. Graphics.
Raleigh: North Carolina State Univer-
4. Barker, KR, JL Townshend, GW Bird, IJ Thomason, and DW Dickson. 1986. Determining nematode population responses to
control agents. Pp. 283-296 in KD Hickey, ed. Methods for evaluating pesticides for control of plant pathogens. St. Paul, MN:
The American Phytopathological Society Press. control 5. Baker, of plant KF, pathogens. and RJ St. Cook. Paul, 1974. MN: The
Biological Amer- ican Phytopathological Society Press. efficacy 6. Cabanillas, of Paecilomyces HE 1987. lilacinus Factors in
biocontrol influencing of Me- the
loidogyne incognita on tomato. Ph.D. thesis, North Car- olina State University, Raleigh. m~thode 7. Cayrol,J. de lutte C.,
biologique andJ. P. Frankowsky. contre les n~matodes 1979. Une ~. ticole galles P~pini~ristes des 193:15-23.
racines Horticulteurs appartenant Maraichers-Revue au genve Meloidogyne. Hor-
8. Conway, KE, CG Fisher, and JE Motes. 1982. A new technique for delivery of biological agents with germinated vegetable
seed. Phytopa- thology 72:987 (Abstr.).
9. Cranston, PM 1983. Alginic acid derivatives as a solidifying agent for microbiological nutrient sus- pensions. Food
Technology in Australia 35:134-136. control 10. Dube, of Meloidogyne B., and G. incognita C. Smart,Jr. by Paecilomyces 1987.
Biological lilacinus and 222-227.
Pasteuria penetrans. Journal of Nematology 19:
11. Fravel, DR,JJ Marois, RD Lumsden, and WJ Connick, Jr. 1985. Encapsulation of potential
130 Journal of Nematology, Volume 21, No. l, January 1989
biocontrol agents on alginate-clay matrix. Phyto- pathology 75:774-777.
12. Ioannou, N., RW Schneider, and RG Gro- position gan. 1977. and Effect the production of flooding of microsclerotia on the
soil gas by com- Ver- ticillium dahliae in the field. Phytopathology 67:651- 656.
13. Jatala, P. 1986. Biological control of plant- parasitic nematodes. Annual Review of Phytopa- thyology 24:453-489.
harzianum-impregnated for 14. Phytophthora Kelley, W. cinnamoni D. 1976. Evaluation of Trichoderma clay granules as a
biocontrol causing damping-off of pine seedlings. Phytopathology 66:1023-1027.
15. Kerry, BR 1984. Nematophagous fungi and the regulation of nematode populations in soil. Hel- minthological Abstracts,
Series B 53:1-14. 16. acteristics Lewis, of J. alginate A., andG. pellets C. formulated Papavizas. 1985. with Tricho- Char-
derma and Gliocladium and their effect on the prolif- eration of two fungi in soil. Plant Pathology 34:571- 577.
17. Papavizas, GC, DR Fravel, andJ. A. Lewis. 1987. Proliferation of Talaromycesflavus in soil in alginate pellets.
Phytopathology 77:131-136.
18. Patrick, ZA, RM Sayre, and HJ Thorpe. 1965. Nematocidal substances selective for plant- parasitic nematodes in extracts of
decomposing rye. Phytopathology 55:702-704. population incognita Effect 19. of Roman, in the tomato. and fungus J., root-knot
and Journal Paecilomyces A. Rodriguez-Marcano. of formation Agriculture lilacinus of on Meloidogyne of the the larval 1985.
Uni- versity of Puerto Rico 69:159-167. loidogyne 20. Stirling, javanica GR with 1984. Bacillus Biological penetrans. control
Phytopa- of Me-
thology 74:55-60. control 21. Sundheim, of Phomopsis L. sclerotioides 1977. Attempts at biological in cucumber. Neth- erlands
Journal of Plant Pathology 83:439-442.
22. Walker, HL, and WJ Connick, Jr. 1983. Sodium alginate for production and formulation of mycoherbicides. Weed Science
31:333-338.