Evaluasi Paecilomyces lilacinus sebagai Biocontrol

Agen Meloidogyne javanica tentang Tembakau 1

TE HEWLETT, 9 DW DICKSON, ~ DJ MITCHELL, s
DAN SAYA KANNWISCHER-MITCHELL 2

Abstrak: Efikasi parasit nematoda Paecilomyces lilacinus, tunggal dan dalam kombinasi dengan
phenamiphos dan ethoprop, untuk mengendalikan nematoda akar-simpul Meloidogyne javanica
pada tembakau dan kemampuan jamur ini untuk berkoloni dalam tanah di bawah kondisi
lapangan dievaluasi 2 tahun di microplots. Kombinasi dan perawatan individu dari jamur yang
tumbuh pada autoclaved biji gandum, M. javanica telur (76.000 per plot), dan nematicides
diterapkan ke microplots tertentu pada saat memindahkan tanam tembakau tahun pertama.
Vetch ditanam sebagai tanaman penutup musim dingin, dan jamur dan nematicides diterapkan
lagi tahun kedua untuk plot tertentu pada transplantasi waktu. Jamur tidak mengontrol
nematoda pada tahun kedua percobaan ini. Rata-rata indeks akar-empedu (0 = tidak ada galls
yang terlihat dan 5 => 100 galls per sistem akar) berkisar dari 2,7 hingga 3,9 tahun pertama dan
dari 4,3 hingga 5,0 detik di petak penuh nematoda yang diobati dengan nematicides. Tanaman
dengan M. javanica sendiri atau dalam kombinasi dengan P. lilacinus memiliki indeks
menyakitkan dari 5,0 keduanya tahun; yang terakhir menghasilkan hasil yang lebih rendah
daripada semua perawatan lain selama kedua tahun penelitian. Namun demikian, kepadatan
populasi tanah rata-rata P. Iilacinus tetap tinggi, mulai dari 1,2 menjadi 1,3 x 106 propagul / g
tanah 1 minggu setelah inokulasi awal dan dari 1,6 hingga 2,3 × 104 propagul / g tanah saat
panen tahun kedua. Saat panen tahun kedua kepadatan jamur propagul paling besar pada
kedalaman inokulasi, 15 cm, dan cepat menurun di bawah tingkat ini. Kata kunci: biocontrol,
ethoprop, 1,3-dichloropropene, fenamiphos, parasit telur jamur, Meloido- gyne javanica,
nematicide , Nicotiana tabacum, Paecilomyces lilacinus, nematoda akar-simpul, tembakau,
vetch, Vicia vilIosa

Beberapa agen kontrol biologis dari Meloidogyne spp. telah dilaporkan (7 9,11,12,18,20-22),
tetapi hingga saat ini tidak ada telah menunjukkan penindasan efektif populasi nematoda di
bawah kondisi lapangan tions. Jamur Paecilomyces lilacinus (Thom) Samson telah dilaporkan
agen kontrol biologis yang efektif ini nematoda (4,6,11,12). Infestasi tanah dengan jamur di
lapangan dan rumah kaca eksperimen telah dilaporkan untuk membatasi jumlah nematoda
akar-simpul dan meningkatkan hasil tanaman (4,5,8,12,19). Dalam ini percobaan, pemulihan
jamur dari massa telur nematoda, betina, dan tanah memutuskan bahwa ia mampu
membangunnya- diri di tanah, tetapi kemampuannya untuk menjajah tanah di bawah kondisi
lapangan belum diteliti secara kuantitatif.
Kompatibilitas P. lilacinus dengan eth ylene dibromide dipelajari, tetapi P. lilacinus gagal
menekan sisa populasi Lation dari Meloidogyne incognita (Kofoid dan Putih) Aplikasi berikut
Chitwood dari tingkat yang berbeda dari fumigan (1). Suble- thal dosis ethoprop dievaluasi
peningkatan parasitisme M. incognita oleh Catenaria anguillulae Sorokin (20); ada efek sinergis
antara nematicide dan jamur. Tujuan kami adalah mengevaluasi efficacy kombinasi dan
pengobatan individual ments of P. lilacinus dan nematicides phenamiphos dan ethoprop untuk
mengontrol Meloidogyne javanica (Neal) Chitwood on tembakau dan untuk menentukan
kemampuan P. lilacinus untuk menjajah tanah dan mengurangi nema- todes selama periode 2
tahun di bawah ditions

MATERIAL DAN METODE Sebuah studi 2 tahun (1984-85) telah dilakukan dalam microplots
76-cm-d dilingkari dengan 60- fiberglass cm-lebar dimasukkan 50 cm ke dalam tanah (14).
Microplots disusun baris 1,2-1,5 m terpisah dalam denda Arredondo pasir (93% pasir, 4%
lanau, lempung 3%, 1% atau- materi ganic; pH 5,8) diobati dengan 977 kg methyl bromide / ha
(98% ai) diterapkan under 3-mil polyethylene 1 bulan sebelumnya tanam. Tidak ada nematoda
phytoparasit terdeteksi ketika microplots itu sampel sebelum penanaman. Setiap perawatan
direplikasi tujuh kali secara acak desain blok lengkap.

Paecilomyces lilacinus diperoleh dari Pusat Kentang Internasional, Lima, Peru, ditanam pada
PDA pada 26 C dalam tabung reaksi. Inokulum P. lilacinus diproduksi pada campuran yang
diautoklaf dari 100 g biji gandum dan 100 ml air keran dalam lebar l-liter labu mulut. Suspensi
konidia, ob- diwarnai dengan mencuci budaya 20-hari-tua jamur pada PDA dengan 10 ml
diautoklaf air, ditambahkan ke gandum yang diautoklaf benih. Labu disimpan pada 25 C selama
12 hari dan dikocok kuat setiap hari untuk memastikan pertumbuhan seragam jamur. Setiap
kesenangan- plot yang diinokulasi gus menerima isinya satu botol.
Populasi lokal M. javanica adalah dibudidayakan di rumah kaca dengan tomat (Ly- copersicon
esculentum Mill. CV. Rutgers). Itu Inokulum nematoda sebagian besar terdiri dari telur (> 98%)
diekstraksi dari akar tomat dicuci dengan natrium hipoklorit 0,5% (9), dan plot diinokulasi
dengan laju 120 telur / 100 cm tanah (76.000 per mikroplot).

Perawatan selama tahun pertama menyuntikkan inokulasi dengan jamur saja dan dalam
kombinasi dengan etoprop diterapkan pada tingkat 0,45 g ai / m ~ (4,5 kg ai / ha broadcast) dan
0,9 g / m 2 (9,0 kg ai / ha disiarkan) dan fenamiphos diterapkan pada tingkat 0,34 g ai / m ~ (3,4
kg ai / ha luas- cor) dan 0,68 g ai / m ~ (6,8 kg ai / ha disiarkan) di plot yang penuh dengan
nema- todes. Kontrol termasuk tidak diobati, nema- tode saja, nematode inoculum plus 1,3-
dichloropropene diterapkan pada tingkat 14 ml ai / m ~ (140 liter siaran ai / ha), ethoprop dan
fenamiphos sendiri (tarif sebagai dengan jamur), biji gandum autoklaf saja, dan biji gandum
berjamur yang diautoklaf. Inokulum jamur dan nematoda dan non- nematicides fumigan
digabungkan dengan penggaruk hingga kedalaman 15 cm ke mi- croplots. Dua tanaman dari
simpul akar-simpul tible tobacco (Nicotiana tabacum L. cv. NC 2326) dipindahkan ke dalam 25
cm.

setiap microplot pada bulan April. Vetch berbulu (Vicia villosa Roth) diunggulkan ke microptots
selama Oktober (2,6 g biji / plot) sebagai penutup tanaman untuk lebih meningkatkan
peningkatan P. populasi lilacinus untuk tembakau berikutnya tanaman. Selanjutnya, massa telur
M. ja- vanica yang terbentuk overwinter akan menjadi vul- mudah terkena infeksi oleh P.
lilacinus.
Perawatan tahun kedua yang di- etoprop kental pada 9,0 kg ai / ha dan fen- amiphos pada 6,8
kg ai / ha diaplikasikan pada menanam ke dalam petak yang telah menerima oprop di 4,5 kg ai /
ha dan fenamiphos di 3,4 kg ai / ha tahun sebelumnya. Jamur inokulum diaplikasikan pada plot
yang menerima 1,3- dikloropropena dan nematoda pra- vious year, dan sisa plotnya dibiarkan
tanpa perawatan. Tembakau ditanam di April seperti tahun sebelumnya. Pupuk ap- petunjuk
untuk mensimulasikan agronomi lokal praktik digunakan untuk tembakau dan vetch. Microplots
disiangi dan diirigasi dan tanaman disemprotkan untuk pest trol sesuai kebutuhan. Tunas
tambahan dan terminal tembakau dihapus seperlunya.
Sampel tanah untuk memperkirakan populasi dari P. lilacinus diambil dari perawatan
ditunjukkan (Gbr. 1) pada 6, 43, dan 93 hari sesudahnya tanam tembakau tahun pertama, pada
2 hari preplant dan 82 dan 142 hari setelah tanam- ing vetch, dan di tanam dan 49 dan 94 hari
setelah tanam tembakau tahun kedua. Populasi jamur dimonitor di tanah dengan
menggemburkan tiga inti setinggi 15 cm (2,5- cm-d) dikumpulkan dari masing-masing plot. 1-g
sub- sampel dari setiap sampel massal adalah serial diencerkan dalam air deionisasi. Satu
mililiter suspensi tanah-air dipipet menjadi cawan petri yang kosong dan steril (10 piring per
sampel), dan sekitar 15 ml dium selektif untuk P. lilacinus dituangkan ke masing-masing cawan
petri (15). Hidangan- Es berputar lembut untuk mendistribusikan sampel dalam medium. Cawan
petri diinkubasi pada 25-27 C di bawah 12 jam cahaya selama 7-10 hari, dan jumlah koloni
jamur per hidangan dicatat.
Kolonisasi segmen akar dan nematoda akar-simpul dan massa telur oleh P. lilacinus dinilai 142
hari setelah tanam vetch dan 49 hari setelah tanam tembakau tahun kedua. Kehadiran dari
jamur pada segmen akar dan pada akar-simpul nematoda galls dan massa telur dinilai pada
satu tembakau atau tiga tanaman vetch per plot dari perawatan yang ditunjukkan pada Tabel 3.
Akar dicuci dalam air keran lalu direndam dalam larutan 50 t ~ g / ml chlortet- racycline dan 100
/ ~ g / ml streptomycin sul- takdir dalam air yang disterilisasi. Seratus akar bagian per sampel,
dengan atau tanpa root- simpul nematode, kemudian dilapis media selektif, dan kehadiran atau
ab- rasa jamur dicatat.
Angka-angka M. javanicajuveniles per 250 cm 3 tanah diperkirakan 43 dan 93 hari setelah
menanam tembakau tahun pertama dan di tanam dan 49 dan 94 hari setelah tanam tembakau
tahun kedua. Sampel tanah untuk analisis nematoda diambil dengan 2,5- auger berbentuk
kerucut cm-d; lima core dikumpulkan dari masing-masing microplot dan bulked. Tanah (250 cm)
diproses oleh modifikasi teknik sentrifugasi-flotasi (13). SEBUAH indeks akar-empedu
ditentukan segera- setelah panen tembakau terakhir selesai tahun (0 = tidak ada galls yang
terlihat, 1 = 1-2, 2 = 3- 10, 3 = 11-30, 4 = 31-100, 5 => 100 galls per sistem root).
Sampel kedalaman dari lima plot dengan fungus dan inokulum nematoda diambil 16 Juli 1985
dengan 10-cm-d ember auger di Interval 15 cm hingga kedalaman 75 cm. Tanah core dari
masing-masing plot pada setiap kedalaman bulked, dan populasi jamur dan nematoda diuji
seperti yang dijelaskan. Untuk- daun bacco dipanen karena mereka tured, dan berat hijau
dicatat.
Data dari perawatan menjadi sasaran analisis varians, dan sarana pengobatan dibandingkan
dengan beberapa rentang Duncan uji. Data dari pemantauan P. lilacinus pop- ulangan di tanah
menjadi sasaran anal ysis varians, dan multiple Duncan uji jangkauan. Tingkat kebebasan
tunggal trast digunakan untuk menguji signifikansi perawatan yang diinokulasi dengan jamur vs.
perawatan tidak diinokulasi dengan jamur

HASIL
Tidak ada perbedaan dalam hasil dan peringkat empedu antara perawatan dengan nematoda
sendiri dan mereka yang memiliki nematoda ditambah jamur (P = 0,05) (Tabel 1). Pada tanggal
sampling pertama, bagaimanapun, lebih sedikit juve- Nil ditemukan dari petak-petak yang
menerima nematoda plus jamur daripada dari con trol dengan nematoda sendiri (P = 0,05).
Kedua dari perawatan ini menghasilkan hasil yang lebih rendah dan peringkat empedu lebih
tinggi daripada semua yang lain perawatan (P = 0,05). Nonfumigant ne- maticides terbatas
kehilangan hasil dan menyakitkan hati disebabkan oleh M. javanica dibandingkan dengan
pengobatan dengan nematoda saja. Sana tidak ada perbedaan dalam plot yang dipenuhi
nematoda diobati dengan non-parfum maticides sendiri dan mereka yang diobati dengan
nematisida dan jamur. Kecuali untuk plot diperlakukan dengan ethoprop di 9,0 kg ai / ha, jumlah
tertinggi M. javanica ju- venil dipulihkan pada saat panen perawatan yang termasuk non-parfum
maticides. Plot diperlakukan dengan autoklaf biji gandum, dengan atau tanpa jamur dan tanpa
nematoda, menghasilkan hasil yang sama untuk kontrol yang tidak diobati.
Pada akhir tembakau kedua (1985) tes, tidak ada kombinasi dari nematicides, fun- gus, dan
nematoda diterapkan pada tahun 1984 atau 1985 hasil yang dihasilkan atau peringkat empedu
berbeda dari mereka yang berada di tanah yang dirawat dengan nema - todes sendiri. Pada
tahun 1985 hasil kontrol tanpa inokulum nematoda lebih besar dari hasil dari plot dengan
nematoda sendirian dan nematoda plus fungi pada tahun 1984 atau dari plot dengan jamur
pada tahun 1985 (P = 0,05). Plot diperlakukan dengan nematoda plus jamur pada tahun 1984
menghasilkan hasil pada tahun 1985 yang tidak berbeda dengan hasil dari pengobatan dengan
nematoda saja (P = 0,05).
Tidak ada perbedaan dalam kerapatan dari propagul jamur di tanah di antara perawatan yang
menerima P. lilacinus dalam sampel diambil tahun baik (Gbr. 1). Tanah awal sampel memiliki
kepadatan populasi jamur 1.2-1.3 x 106 propagul / g tanah. The pop- ulasi P. lilacinus yang
direkolonisasi dalam perawatan tidak diinokulasi dengan jamur adalah 2,0-3,8 x 103 propagul /
g tanah. Pop- kepadatan ulasi pada jamur yang diinokulasi plot menurun selama periode 2
tahun (Gbr. 1), dan pengobatan yang diinokulasi dan tidak diinokulasi.

TABL ~ 1. Hasil tembakau, populasi tanah Meloidogynejavanica remaja di midseason dan

panen, dan peringkat simpul akar-simpul di microplots yang diobati dengan Paecilomyces
lilacinust dan nematicides, 1984
ments memiliki kepadatan populasi 1,6- 2.3 x 104 dan 1.9-4.9 x 10 propagul / g tanah, masing-
masing, saat panen tahun kedua.
Populasi jamur tertinggi di plot diobati dengan jamur plus nematoda berada di kedalaman 0-15
cm pada akhir tes tobaqco 1985 (Tabel 2). Jamur kepadatan penduduk menurun dengan cepat
mendalam, dan jamur itu tidak terisolasi. rendah 30 cm dalam dua dari empat ulangan sampel.
Remaja nematoda akar-simpul ditemukan di semua kedalaman sampel.
Jamur berhasil menjajah galls dan massa telur M. javanica di vetch akar dalam pengobatan
dengan jamur plus nematoda (Tabel 3). Dalam satu plot 90 dari 100 galls atau massa telur
dijajah oleh jamur. Galls dan ruas akar dari to- bacco ditransplantasikan ke tempat yang sama
memiliki tingkat infestasi yang lebih rendah pada pertengahan musim. Hanya 20 dari 100 galls
yang menjajah proporsi tertinggi dicatat. A recolo- Populasi jamur cacing ditemukan dalam
jumlah rendah persentase dari akar vetch dan tembakau galls dalam perawatan yang
diinokulasi nematoda sendiri. Persentase yang sangat rendah segmen akar vetch dan tidak ada
akar tembakau segmen diperlakukan dengan jamur saja dijajah oleh rekolonisasi jamur
populasi.

DISKUSI
Aplikasi dari P. gandum yang dipenuhi lilacinus benih menghasilkan populasi tanah jamur.
Sities lebih dari 400 kali lebih besar dari populasi rekolonisasi P. lilacinus di un- diinokulasi
tanah difumigasi. Tidak etho - prop atau fenamiphos mempengaruhi kepadatan dari jamur di
tanah. Populasi den- sities P. lilacinus di plot yang diinokulasi tidak mengontrol M. javanica, dan
tanpa aditif atau aktivitas sinergis diamati di mana saja dari perawatan jamur dan nematicide.
Paecilomyces lilacinus juga gagal menekan populasi M. incognita dan meningkat hasil okra
atau kapas ditanam di mikro- plot yang diperlakukan dengan tingkat etil yang berbeda ene
dibromide (1).

Perbedaan dalam kemampuan P. lila- cinus untuk menjajah galls root dari vetch dan tembakau
mungkin karena perbedaan dalam jenis sistem root. Sistem akar tembakau tems di midseason
diperpanjang jauh melampaui 15-cm tingkat inokulasi jamur. Itu rendah jumlah jamur yang
terdeteksi pada segmen akar dan pada tingkat tanah di bawah Dalam 15 cm menunjukkan
bahwa P. lilacinus adalah tidak dapat menjajah rhizosfer dari- akar bacco dan tidak bergerak
turun melalui tanah dengan akar. Galls dan Massa telur yang dikumpulkan dari akar tembakau
di bawah tingkat 15-cm, oleh karena itu, tidak terkena populasi tinggi jamur. Ini mungkin
menyebabkan tingkat yang lebih rendah kolonisasi terdeteksi, dibandingkan dengan shal-
tanaman vetch berakar rendah. Jenis root sistem dan kedalaman inokulasi tanah memainkan
peran dalam kemampuan jamur ini, seperti serta organisme kontrol biologis lainnya untuk
memberikan kontrol akar-simpul yang memadai nematoda.

Ada beberapa pernyataan P. lilacinus mengendalikan M. incognita dan Tylenchulus

semipenetrans Cobb dalam percobaan on-farm (12). Studi lain di bawah rumah kaca atau
kondisi microplot telah menunjukkan supresi root galling atau mengurangi hasil kerugian dalam
perawatan P. lilacinus (1,2,5). Itu kurangnya kontrol M. javanica oleh P. lilacinus dalam
pengujian kami bahkan setelah 2 tahun eksposur mungkin karena perbedaan spesies Me-
Ioidogyne, inang, atau isolat P. lilacinus, atau jumlah dan jenis pembawa dari jamur. Di M.
javanica, kami memilih yang paling banyak spesies nematoda akar-simpul agresif di antara
mereka yang menginfeksi tembakau (3). Lebih bekerja di bawah kondisi lapangan akan
diperlukan- sary untuk menentukan apakah P. lilacinus adalah efektif dalam pengendalian
biologis spesies ferent nematoda akar-simpul. Di penelitian ini, kurangnya kontrol M. javanica
tidak dikaitkan dengan ketidakmampuan jamur untuk menyerang tanah. Penemuan masa
depan harus termasuk pembentukan deliv- dan antagonis di tanah serta kemampuannya. ities
untuk menjajah akar, nematoda, dan galls. Masa depan P. lilacinus sebagai potensi agen
kontrol komersial dikompromikan, namun, dengan kemampuannya bertindak sebagai patogen
manusia dan hewan lainnya dengan cedera atau defisiensi imun (2,16,17)