Nama : Bandhia Ayu Lestari TTD

Nim : 05031281621032
Email : bandhia.ayulestari@yahoo.com
Tugas Lipid Analysis

DESI–MS as A Tool For Direct Lipid Analysis in Cultured Cells

Desorption electrospray ionization (DESI) metode spektrometri pencitraan massa (MSI)

yang digunakan dalam ilmu biologi untuk analisis permukaan. Emitor electrospray digunakan
untuk menghasilkan microdroplets bermuatan yang diarahkan ke permukaan untuk analisis,
di mana mereka membuat film cair tipis yang melarutkan analit. Mikrodroplet sekunder berisi
analit yang dihasilkan oleh dampak tetesan primer selanjutnya. Analit dimasukkan ke dalam
MS inlet di mana ion dianalisis dengan massa spektrometer. Keuntungan lainnya dari DESI
yaitu tidak membutuhkan persiapan sampel yang melelahkan dan dapat dilakukan pada
kondisi ruang kamar. DESI adalah alat yang cepat dan nyaman untuk analisis lipid dalam
sampel biologis. Stres oksidatif adalah keadaan patologis sel/organisme di mana jumlah
radikal oksigen meningkat tetapi tidak dapat diimbangi oleh sistem pertahanan antioksidan
internal, atau ketika tingkat radikal oksidatif tetap pada keadaan fisiologis, tetapi sistem
pertahanan terganggu. Lipid sangat sensitif terhadap patofisiologi dan mengalami
peroksidasi, yang menghasilkan sejumlah spesies yang sangat reaktif yang dapat
memodifikasi protein dan lipid lainnya, menghasilkan aldehid dan senyawa karbonil
terpolimerisasi. Metode paling sederhana untuk menginduksi stres oksidatif di dalam kultur
sel dengan mengganggu keseimbangan prooksidan antioksidan dengan meningkatkan beban
radikal, yang bisa dicapai dengan menambahkan hidrogen peroksida (atau agen lainnya) ke
medium kultur sel. Sehubungan dengan analisis lipid membran sel dalam berbagai kultur sel,
DESI tampaknya merupakan metode analisis yang paling cepat, nyaman, dapat diandalkan,
dan sensitif. Berbeda langsung dengan teknik pewarnaan, radioimmunoassay, derivatisasi
lipid atau analisis homogenat, DESI tidak memperkenalkan zat tambahan apa pun ke sampel,
dan prosedur lanjutan dan langkah-langkah tidak diperlukan. Perubahan kelimpahan ion
sesuai dengan lipid di bawah stres oksidatif, bisa dilihat. Selain itu, menggunakan DESI
dalam kombinasi dengan analisis MS / MS memungkinkan spesies ini diidentifikasi. Dengan
bantuan DESI, efek destruktif langsung dari hidrogen peroksida pada membran-membran sel
hidup dapat diamati. Interaksi antara oksigen reaktif dan membran sel dapat menyebabkan
kerusakan parsial yang akan mengekspos lipid, membuat mereka lebih rentan terhadap
ionisasi. Ini didukung oleh adanya jumlah sel mati yang lebih besar (trypan blue) setelah
pengenalan jumlah H2O2 yang lebih tinggi ke dalam kultur sel. Penjelasan lain bisa karena
efek yang lebih halus, berdasarkan interaksi antara sistem sinyal intraseluler dan spesies
oksigen reaktif ekstraseluler. Dalam hal ini, reaktivitas sel mungkin telah menyebabkan
perubahan dalam membran sel yang menghasilkan peningkatan eksposisi molekul lipid yang
bekerja sebagai pelindung terhadap lingkungan ekstraseluler yang merugikan.

Sumber :
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4628929/pdf/10616_2014_Article_9734.pdf