I.

Judul : Uji Kuantitatif Lipida

II. Hari/Tanggal Percobaan : Senin/15 Oktober 2012

III. Hari/Tanggal Selesai Percobaan : Senin/15 Oktober 2012

IV. Tujuan Percobaan :

1. Menentukan Angka Peroksida
2. Menentukan Asam lemak bebas (FFA)

V. Dasar Teori :
Lipid adalah senyawa organik yang diperoleh dari proses dehidrogenasi endotermal
rangkaian hidrokarbon. Lipid kadang disebut lemak. Lipid juga meliputi molekul molekul
seperti asam lemak dan turunan-turunannya termasuk trigliserida, digliserida, monogliserida,
fisfolipid, juga metabolit yang mengandung sterol, seperti kolesterol. Meskipun manusia dan
mamalia memiliki metabolism untuk memecah dan membentuk lipid, beberapa lipid tidak
dapat dihasilkan melalui cara ini dan harus diperoleh melalui makanan.
Bilangan peroksida didefinisikan sebagai jumlah meq peroksida dalam setiap 1000
gram (1kg) minyak atau lemak. Bilangan peroksida ini menunjukkan tingkat kerusakan lemak
atau minyak. Penentuan bilangan peroksida didasarkan pada pengukuran sejumlah iod yang
dibebaskan dari kalium iodide melalui reaksi oksidasi oleh peroksida pada suhu ruang
didalam medium asam asetat/ chloroform. Proses oksida dapat berlangsung bila terjadi
kontak antara sejumlah oksigen dengan minyak dan lemak.
Asam lemak bebas terbentuk karena proses oksidasi dan hidrolisa asam. Asam lemak
bebas ditentukan sebagai kandungan asam lemak yang terdapat paling banyak dalam minyak
tertentu. Pada minyak kelapa sawit asam lemak yang terbanyak adalah palmiat, minyak
kelapa asam laurat, minyak jagung/kedelai asam linuleat, susu asam oleat. Tingginya asam
lemak bebas dapat mengakibatkan rendemen minyak turun. Hasil asam lemak bebas ini
disebabkan adanya reaksinya hidrolisa pada minyak. Reaksi ini dipercepat dengan faktor
panas, air, keasaman, dan katalisator (enzim). Semakin lama reaksi berlangsung maka
semakin tinggi kadar asam lemak bebas yang terbentuk.
Pada kelapa sawit bermutu baik yang mengandung asam lemak (FFA, Free Fatty
Acid) tidak lebih dari 25% pada saat pengapalan. Kualitas standar minyak kelapa sawit
mengandung tidak lebih dari 5% FFA. Setelah pengolahan, kelapa sawit bermutu akan
menghasilkan rendemen minyak 22,1% - 22,2% (tertinggi) dan kadar asam lemak bebas
1,7%-2,1% (terendah).
Pada titrasi Iodometrik digunakan larutan standar natrium tiosulfat (Na2S2O3). Metode
titrasi iodometri langsung mengacu kepada titrasi dengan suatu larutan iod standar. Metode
titrasi iodometri tidak langsung berkenaan denga titrasi dari iod yang dibebaskan dalam
reaksi kimia, dengan reaksi :
I2 + 2e 2I-
Titrasi iodometri langsung digunakan suatu larutan iod dalam kalium iodida, dan spesi
reaktifnya adalah ion I3-, dengan reaksi :
I3- + 2 S2O32- 3I- + S4O62-
Iodin bekerja sebagai indicator yang member warna ungu atau merah lembayung yang
kuat kepada pelarut-pelarut sebagai karbon tetraklorida atau kloroform dan kadang kadang
digunakan untuk mengetahui titik akhir titrasi.
Lipid adalah senyawa organik yang diperoleh dari proses dehidrogenasi endotermal
rangkaian hidrokarbon. Lipid bersifat amfifilik, artinya lipid mampu membentuk struktur
seperti vesikel, liposom, atau membran lain dalam lingkungan basah. Lipid biologis
seluruhnya atau sebagiannya berasal dari dua jenis subsatuan atau "blok bangunan" biokimia:
gugus ketoasil dan gugus isoprena.[4] Dengan menggunakan pendekatan ini, lipid dapat dibagi
ke dalam delapan kategori:[5] asil lemak, gliserolipid, gliserofosfolipid, sfingolipid,
sakarolipid, dan poliketida (diturunkan dari kondensasi subsatuan ketoasil); serta lipid sterol
dan lipid prenol (diturunkan dari kondensasi subsatuan isoprena).
Meskipun istilah lipid kadang-kadang digunakan sebagai sinonim dari lemak. Lipid
juga meliputi molekul-molekul seperti asam lemak dan turunan-turunannya (termasuk tri-, di-
, dan monogliserida dan fosfolipid, juga metabolit yang mengandung sterol, seperti
kolesterol. Meskipun manusia dan mamalia memiliki metabolisme untuk memecah dan
membentuk lipid, beberapa lipid tidak dapat dihasilkan melalui cara ini dan harus diperoleh
melalui makanan.

VI. Alat dan Bahan

- Gelas Kimia
- Pipet Ukur
- Buret
- Erlenmeyer
- Minyak/Lemak
- Larutan Asam Asetat-kloroform (3:2)
- Larutan KI jenuh
- Na2S2O3 0,1 N
- Larutan Pati 1%
- Larutan NaOH 0,1 N
- Larutan Baku Oksalat 0,1 N
- Indikator PP 1%
- Etanol 96%
VII.ALUR KERJA
1. Penentuan Angka Peroksida

5 gram Sampel Minyak 5 gram Larutan Blanko

 Ditimbang dalam  Ditimbang dalam

erlenmeyer erlenmeyer
 +30 mL Larutan  +30 mL Larutan
Asam Asetat- Asam Asetat-
Kloroform Kloroform
 Digoyangkan  Digoyangkan
sampai larut sampai larut
 + 0,5 mL KI jenuh  + 0,5 mL KI jenuh
 Didiamkan 20  Didiamkan 20
menit sesekali menit sesekali
digoyangkan digoyangkan
 +0,5 mL larutan  +0,5 mL larutan
Pati 1% Pati 1%
 Dititrasi denagn  Dititrasi denagn
Na2S2O3 0,01 N Na2S2O3 0,01 N
sampai jernih sampai jernih

Volume Na2S2O3 Volume Na2S2O3

2. Penentuan Asam Lemak Bebas (FFA)

6 gram Minyak 6 gram Larutan Blanko

 Ditimbang dalam  Ditimbang dalam

erlenmeyer erlenmeyer
 +10 mL alkohol  +10 mL alkohol
96% 96%
 + 5-8 tetes PP  + 5-8 tetes PP
 Dititrasi dengan  Dititrasi dengan
0,05 N NaOH 0,05 N NaOH
samapi warna samapi warna
merah jambu merah jambu

Volume NaOH Volume NaOH

VIII. HASIL PENGAMATAN
Hasil Pengamatan
No Prosedur Kerja Dugaan / Reaksi Kesimpulan
Sebelum Sesudah
1. Penentuan Angka Peroksida - Minyak : Coklat SAMPEL : I2 + 2e 2I- Bilangan Peroksida
kehitaman Minyak + Larutan sampel : -
5 gram Sampel 5 gram Larutan Asetat-Kloroform : - 2-
- Asam asetat- I3 + 2 S2O3
Minyak Blanko Larut, warna kuning Bilangan Peroksida
Kloroform :
jernih tak muda Blanko : 44
 Ditimbang  Ditimbang berwarna + KI : Larut, warna 3I- + S4O62-
dalam dalam - KI jenuh : kuning
erlenmeyer erlenmeyer +aquades : Larut
kuning jernih
 +30 mL  +30 mL
Larutan Larutan - Na2S2O3 : jernih warna kuning
Asam Asam tak berwarna +Pati : tetap warna
Asetat- Asetat- - Larutan Pati : kuning
Kloroform Kloroform jernih tak + Na2S2O3 larutan
 Digoyangka  Digoyangka berwarna sampel tetap tak ada
n sampai n sampai
larut larut
- Larutan Blanko : perubahan warna,
air jernih sehingga titrasi tidak
 + 0,5 mL KI  + 0,5 mL KI dapat dilakukan
jenuh jenuh
 Didiamkan  Didiamkan
20 menit 20 menit Larutan Blanko :
sesekali sesekali Blanko + Larutan
digoyangkan digoyangkan Asetat-Kloroform :
 +0,5 mL  +0,5 mL Larut, jernih tak
larutan Pati larutan Pati berwarna
1% 1%
+ KI : Larut, larutan
 Dititrasi  Dititrasi
denagn denagn jernih agak
Na2S2O3 Na2S2O3 kekuningan
0,01 N 0,01 N +aquades : jernih
sampai sampai agak kekuningan
jernih jernih +Pati : ungu muda
jernih
Volume Na2S2O3 Volume Na2S2O3
+ Na2S2O3 : jernih tak
 berwarna
V1 : 1,6 mL
V2 : 2,7 mL
V3 : 2,3 mL
2. Penentuan Asam lemak Bebas - Minyak : coklat Minyak + alkohol : % FFA sampel :
kehitaman awalnya timbul 0,52%
6 gram Minyak - Alkohol 96% : gelembung,
jernih tak kelamaan larut %FFA blanko :
 Ditimbang dalam erlenmeyer berwarna berwarna kuning. 0,042 %
 +10 mL alkohol 96% - NaOH : jernih +PP larutan
 + 5-8 tetes PP tak berwarna berwarna kuning.
 Dititrasi dengan 0,05 N NaOH - Aquades : + NaOH : larutan
samapi warna merah jambu jernih berubah menjadi
- PP : jernih tak warna merah jambu.
Volume NaOH berwarna V1 : 1 mL
V2 : 1,4 mL
V3 : 1,3 mL
6 gram Larutan Blanko
Aquades + alkohol :
 Ditimbang dalam erlenmeyer
jernih tak berwarna,
 +10 mL alkohol 96%
ketika ditambahkan
 + 5-8 tetes PP
 Dititrasi dengan 0,05 N NaOH PP tetap jernih tak
samapi warna merah jambu berwarna. Ketika
dititrasi dengan
NaOH warna
berubah menjadi
Volume NaOH
ungu muda.
V = 0,2 mL
Reaksi percobaan 2
IX. PEMBAHASAN
1. Penentuan Bilangan Peroksida
Telah dilakukan percobaan yang berjudul Uji Kuntitatif pada Lipida dan terdapat dua
percobaan. percobaan pertama yang kami lakukan adalah Penentuan Bilangan Peroksida,
dimana bilangan peroksida merupakan jumlah meq peroksida dalam setiap 1000 gram (1kg)
minyak atau lemak. Bilangan peroksida ditentukan berdasarkan jumlah iodin yang dibebaskan
dari KI melalui reaksi oksidasi oleh peroksida dalam lemak/minyak pada suhu ruang dalam
medium asam asetat-kloroform. 5 gram sampel minyak yang berwujud cair berwana hitam
kecoklatan dicampur dengan 30 mL larutan asam asetat-kloroform yang berwujud cair tak
berwarna dilarutkan hingga sempurna dan warna larutan berubah menjadi kuning muda.
Fungsi dari penambahan asam asetat-kloroform adalah sebagai pelarut. karena minyak
merupakan kelompok yang termasuk pada golongan lipid , yaitu senyawa organik yang
terdapat di alam serta tidak larut dalam air, tetapi larut dalam pelarut organik non-polar
misalnya, Kloroform(CHCl3), benzena dan hidrokarbon lainnya, lemak dan minyak dapat
larut dalam pelarut tersebut karena minyak mempunyai polaritas yang sama dengan pelarut
tersebut.
Kemudian ditambahkan 0,5 mL larutan KI jenuh yang berwujud cair, kuning jernih
dan larutan menjadi kuning jernih. Fungsi dari penambahan KI adalah untuk membebaskan
iodine yang ditandai terbentuknya warna kuning pada sampel. kemudian larutan didiamkan
selama 20 menit dan sesekali digoyang dan ditambah 30 mL aquades hal ini bertujuan agar
larutan bisa bercampur merata. Sebelum melakukan dititrasi dengan Na2S2O3 larutan
ditambahkan larutan pati 1 % terlebih dahulu. Penambahan pati berfungsi sebagai indicator
adanya I2. Ternyata setelah ditambahkan larutan pati larutan tidak berubah warna dan
menunjukkan bahwa larutan tidak mengandung I2. Sehingga titrasi belum bisa dilakukan dan
kami belum bisa melakukan analisis kuantitatif penentuan bilangan peroksida. Tujuan
penentuan Bilangan peroksida ini adalah untuk mengetahui tingkat kerusakan lemak atau
minyak, dimana kerusakan ini diakibatkan oleh reaksi oksida yang menghasilkan peroksida,
asam lemak, aldehid, dan keton.
Nilai bilangan peroksida menunjukkan jumlah peroksida yang terkandung dalam
minyak/lemak. Artinya, semakain tinggi nilai bilangan peroksida, maka minyak/lemak
semakin jelek. Karena sampel minyak yang kami gunakan kemungkinan mengandung
antioksidan yang tinggi yang membuat sampel tidak bisa dititrasi sehingga kami belum bisa
melakukan analisis kuantitatif penentuan bilangan peroksida

Larutan Blangko
Pada percobaan ini dilakukan hal yang sama seperti percobaan sebelumnya hanya saja
mengganti sampel dengan larutan blangko. Setelah penambahan larutan pati 1 % terjadi
peubahan warna menjadi ungu muda jernih. Perubahan warna ini mengindikasikan bahwa
adanya I2. Sehingga dapat kami lakukan langkah selanjutnya yaitu titrasi dengan Na2S2O3.
Dari percobaan ini diperoleh volume titrasi sebanyak
- Erlenmeyer I = 1,6mL
- Erlenmeyer II = 2,7mL
- Erlenmeyer III = 2,1mL
Reaksi yang terjadi
I2 + 2S2O3- 2I2 + S4 O62-
Angka peroksida yang dihitung menggunakan rumus
( )
( )
Didapatkan angka peroksida masing-masing volume Na2S2O3 yaitu 32, 54 dan 46, dan
didapatkan angka peroksida rata-rata blanko yaitu 44.

2. Penentuan Asam Lemak Bebas (FFA)

 Pada percobaan penentuan asam lemak bebas ini bertujuan untuk mengatahui berapa
banyak asam lemak yang telah dibebaskan. Mekanisme pada percobaan kedua ini, adalah
untuk larutan uji, 6 gram sampel minyak/lemak ditimbang dalam tabung erlenmeyer,
kemudian ditambahkan 10 mL etanol 96%. Campuran minyak dan etanol, pertama
ditambhakan larutan terdapat gelembung, tetapi setelah dicampur dan dikocok. Larutan
menjadi homogen berwarna kuning. Setelah itu campuran larutan tersebut ditambahkan
indikator phenophtalein (PP), larutan tetap berwarna kuning. Kemudian larutan tersebut
dititrasi dengan larutan NaOH 0,1 N. Tujuan dititrasi ini adalah untuk mengetahui volume
NaOH yang digunakan untuk menistrasi analit. Setelah dititrasi dengan NaOH larutan tersebut
berubah warna menjadi merah jambu. Warna ini disebabkan karena indikator berubah warna
pada titik ekivalen. Dan volume yang digunakan untuk titrasi yang pertama, volume yang
digunakan adalah sebanyak 1mL. Volume NaOH yang digunakan pada titrasi yang kedua
dann ketiga adalah 1,4 mL dan 1,3 mL. Reaksi yang etrjadi pada percobaan ini adalah sebagai
berikut :

+ NaOH  +

Hasil volume NaOH yang dihasilkan dari volume NaOH yang digunakan untuk mentitrasi
tersebut digunakan untuk menghitung kadar FFA yang terjandung dlam sampel minyak yang
kami gunakan praktikum. Adapun penghitungan Kadar FFA berdasarkan volume NaOH yang
dibutuhkan adalah digunakan rumus penghitungan kadar FFA sebagai berikut :
( )
( )
Berdasarkan rumus diatas dan dengan menggunakan volume NaOH yang digunakan untuk
titrasi maka dihasilkan %FFa untuk volume NaOH 1mL adalah 0,059831 % ; untuk volume
NaOH 1,4mL % Ffa sebesar 0,55558 % dan pada volume NaOH 1,3 mL menghasilkan %FFA
sebesar 0,4273667%. Dan rata - rata dari % FFA untuk sampel minyak yang kami teliti
adalah sebesar 0,5270856%. Dari hasil perhitungan diatas dapat kita ketahui kadar FFA yang
terkandung dalam minyak sampel yang kita gunakan adalah 0,52%. Hal ini mengindikasikan
bahwa minyak sampel yang kami teliti mengandung asam lemak bebas sebesar 0,52%. Hasil
yang kami peroleh ini menunjukkan bahwa minyak sampel yang kami gunakan hanya
mengandung asam lemak bebas yang sangat minim. Artinya minyak yang kami gunakan
masih cukup bagus digunakan, karena hasil indikasi kadar FFA sebesar 0,52% menunjukkan
bahwa minyak tersebut hanya mengalami kerusakan minyak yang sewajarnya. Karena minyak
bisa dikatakan benar – benar rusak jika kadar FFA sebesar ....
Selain kita menguji larutan uji sebagai sampel yang kita analisis, kita juga
menggunakan larutan blanko sebagai pembanding. Langkah pertama adalah 6 gram aquades
ditambah 10mL etanol dan 5-8 tetes PP. Campuran larutan ini menghasilkan larutan jernih tak
berwarna. Langkah selanjutnya adalah dititrasi dengan NaOH, dan volume yang digunakan
untuk mentitrasi larutan tersebut sebanyak 0,2 mL (satu tetes). Warna larutan setelah dititrasi
adalah berubah menjadi ungu. Warna ungu ini desebabkn indikator PP berubah warna setelah
mencapai titik ekuivalen. Larutan blanko ini digunakan untuk membandingkan warna larutan
uji dan blanko setelah dititrasi. Reaksi yang terjadi pada perlakuan blanko ini adalah sebagai
berikut :

H2O +  H3O+ +
H3O+ + NaOH  Na+ + 2H2O

Dengan menggunakan rumus

( )

Didapatkan Asam lemak bebas untuk blanko didapatkan sebesar 0,042% .

X. KESIMPULAN
1. Bilangan Peroksida sampel minyak tidak dapat ditentukan karena banyaknya
pengoksidan dalam sampel minyak, bilangan peroksida blanko adalah 44.
2. Asam lemak bebas (FFA) dalam sampel minyak adalah sebesar 0,52 %, Asam Lemak
bebas (FFA) blanko sebesar 0,042 %.

XI. Jawaban Pertanyaan

1. Tuliskan semua reaksi yang menyertai uji asam lemak pada percobaan ini!
Jawab :
Percobaan 1 :
I2 + 2e 2I-
- 2-
I3 + 2 S2O3 3I- + S4O62-
Percobaan 2 :

+ NaOH  +

H2O +  H3O+ +

H3O+ + NaOH  Na+ + 2H2O

2. Sebutkan yang termasuk asam lemak esensial bagi tubuh. Mengapa asam karboksilat
bukan merupakan asam lemak essensial?
Jawab :
o Asam Lemak esensial : Asam linoleat (18:2 omega 6), linoleat (18:3, omega 3)
dan arahidonat (20:4 omega 6), DHA (Asam Dokosaheksaeoat), EPA (Asam
Eikosapentaenoat), ALA (Asam Alfalinolenat) dan GLA (Gamma Linolenic
Acid).
o Asam lemak esensial adalah asam lemak tak jenuh poli , sedangkan asam
lemak adalah asam karboksilat yang terdiri dari asam lemak jenuh dan asam
lemak tak jenuh. Sehingga asam karboksilat bukan asam lemak esensial.
3. Apa perbedaan asam lemak jenuh dan tak jenuh pada proses oksidasi?
Jawab :
Asam lemak jenuh : jika dioksidasi tidak banyak radikal bebas yang dilepaskan.
 Asam lemah tak jenuh : jika dioksidasi banyak radikal bebas yang dilepas yang
menyehatkan tubuh.

4. Apa perbedaan antara minyak dan lemak ditinjau dari struktur molekulnya?
Jawab :

Struktur Kimia Lemak Struktur Kimia Minyak

XII.Daftar Pustaka

Anonim. 2012. Uji Lipida. http://www.scribd.com/doc/32769327/UJI-LIPID . Diakses 19

Oktober 2012
Lehninger. A.L. 1982. Dasar-Dasar Biokimia Jilid 1. Jakarta : Erlangga.
Yuanita, Leny, dkk. 2010. Perangkat Pembelajaran Biokimia Petunjuk Praktikum. Surabaya :
Unesa University Press.
LAMPIRAN PERHITUNGAN
1. Angka Peroksida :
o Untuk sampel tidak dapat ditentukan karena banyaknya antioksidan.
o Untuk blanko :
Dengan rumus :
( )
( )
Erlenmeyer I = 1,6mL

Erlenmeyer II = 2,7mL

Erlenmeyer III = 2,1mL

Sehingga,

2. Asam lemak bebas :

o Untuk sampel :
Dengan rumus :
( )
( )
V1 : 1 mL

V2 : 1,4 mL

V3 : 1,3 mL

Sehingga ,

o Untuk blanko :
LAMPIRAN FOTO
No. Gambar Keterangan

Sampel minyak + asam

asetat-kloroform

Sampel minyak + asam

asetat-kloroform + larutan KI
jenuh

Sampel minyak + asam

asetat-kloroform + larutan KI
jenuh + larutan pati 1%

Larutan Blangko

Larutan blangko + asam

asetat-kloroform + larutan KI
jenuh
Larutan blangko + asam
asetat-kloroform + larutan KI
jenuh + larutan pati 1%