MAKALAH FITOKIMIA

Ekstraksi, Pemurnian dan Karakterisasi Indole Alkaloid dari

Strychnos wallichiana L. - sebuah Langka Tanaman Obat dari
India

Extraction, Purification and Characterization of Indole Alkaloids

from Strychnos wallichiana L. – an Endangered Medicinal Plant
from India
 BAB I
PENDAHULUAN

A. LATAR BELAKANG

Indol merupakan senyawa organik dengan cincin aromatik heterosiklik.

Senyawa ini memiliki struktur bisiklik, yang terdiri dari struktur benzene yang
terikat pada gugus cincin pirol. Indol dikenal sebagai komponen dalam parfum
atau wewangian dan dapat menjadi perkrusor untuk senyawa senyawa farmasetis.
Alkaloid Indol mempunyai 2 cincin karbon dengan 1 cincin indol.
Ditemukan pada alkaloid ergine dan psilocybin, alkaloid reserpin dari Rauvolfia
serpentine, alkaloid vinblastin dan vinkristin dari Catharanthus roseus famili
Apocynaceae yang sangat efektif pada pengobatan kemoterapy untuk penyakit
Leukimia dan Hodgkin‟s. Alkaloid indol yang masih dapat digolong-golongkan
menjadi :
a. Alkaloid sederhana, misalnya triptamin.
b. Alkaloid ergot, misalnya serotonin.
c. Alkaloid hermala, misalnya β-karbolin.
d. Alkaloid yahimbe, misalnya reserpin.
e. Alkaloid strychnos, misalnya brusin dan strinkin (Alper, 2001)

Alkaloid indol berasal dari asam amino triptofan. Alkaloid indol yang
sederhana seperti serotonin dan psilosibin,terbentuk sebagai hasil dekarboksilasi
dari turunan triptofan yang sebanding. Namun, banyak alkaloid indol yang lebih
kompleks berasal dari penggabungan turunan asam mevalonat dan triptofan.
Dalam bentuk yang sederhana, satu molekul dimetil alil pirofosfat di
inkorporasikan ke dalam triptofan menghasilkan asam lisergat, melalui
chanoklavin dan agroklavin. Ketiga alkaloid ini ditemukan bersama-sama dalam
Claviseps purpurea (Legowo, 2003).
 Alkaloid indol dibedakan menjadi dua, yaitu isoprenoid dan non-
isoprenoid.
Non-isoprenoid:
1. turunan sederhana dari indole
2. turunan sederhana dari β-carboline
3. alkaloid Pyrroloindole Isoprenoid:
1. hemiterpenoids : alkaloid ergot
2. monoterpenoids (Hesse, 2002)
Alkaloid Sederhana dari Indol
Salah satu derivatif sederhana alkaloid indol adalah amina
biogenik tryptamine dan 5-hydroxytryptamine (serotonin). Keduanya ditemukan
pada tumbuhan dan hewan. Kerangka tryptamine merupakan sebagian besar dari
bagian alkaloid indol. Jadi N, N – dimethyl tryptamine (DMT), psilocin dan
yang terfosforilasi psilocybin, juga turunan sederhana tryptamine. Beberapa alkaloid
indol sederhana yang tidak mengandung tryptamine, seperti gramine dan glycozoline
(yang terakhir merupakan turunan dari karbazol) (Hesse, 2002).

Tanaman yang mengandung metabolit sekunder dari derivat sederhana tersebut

adalah tanaman pisang. Pisang atau Musa sp dengan famili Musaceae merupakan
tanaman buah berupa herba yang berasal dari kawasan di Asia Tenggara. Pisang
memiliki triptofan, senyawa amino yang membantu tubuh memproduksi serotonin
yang memiliki efek menenangkan otak atau obat penenang yang ringan untuk
peningkat suasana hati (mood) yang positif (Rismunandar, 1990).
Prevalensi alkaloid β-carboline dikaitkan dengan kemudahan membentuk inti β-
carboline dari tryptamine dalam intramolekul reaksi Mannich. Derivat sederhana dari
β-carboline termasuk harmine, harmaline, harmalol dan struktur yang sedikit lebih
kompleks dari canthinone. Harmaline pertama kali diisolasi pada tahun 1841 oleh
Goegel dan pada tahun 1847 oleh harmine Fritsche (Hesse, 2002).
Tanaman yang mengandung metabolit sekunder dari derivat tersebut adalah
tanaman markisa dan Rue Suriah. Markisa atau Passiflora edulis dengan famili
Passifloraceae merupakan tanaman buah yang berasal dari daerah tropis dan sub
tropis di Amerika. Markisa mengandung alkaloid harmin, harmalin, dan harmalol
yang berkhasiat sebagai penenang atau sedatif. Merupakan pembius ringan yang
mampu menenangkan saraf. Untuk gangguan insomnia (susah tidur) (Massaidi,
2011). Sedangkan pada tanaman Rue Suriah atau Peganum harmala, ketiga alkaloid
tersebut berkhasiat untuk merangsang sistem saraf pusat dengan menghambat
metabolisme dari senyawa monoamina seperti serotonin dan norepinefrin (Herraiz,
2010).
Alkaloid Pyroloindol
Alkaloid pyroloindol membentuk kelompok yang relatif kecil dari derivatif
tryptamine. Mereka diproduksi oleh metilasi inti indol pada posisi 3 dan
selanjutnya penambahan nukleofilik pada atom karbon pada posisi 2 dengan
penutupan kelompok etilamino menjadi cincin. Tipe khas dari kelompok ini
adalah physostigmine (Hesse, 2002).
Tanaman yang mengandung derivat tersebut adalah kacang Calabar atau
Physostigma venenosum dengan famili Fabaceae. Kacang Calabar ini merupakan
tanaman kacang yang sangat toksik dan mengandung fisostigmin yang berkhasiat
sebagai inhibitor asetilkolinesterase, sehingga meningkatkan aktivitas asetilkolin.
Senyawa ini menarik perhatian dalam pengobatan Alzaimer karena teramati adanya
konsentrasi rendah asetilkolin dalam otak (Heinrich, dkk, 2005).
Hemiterpenoid (Alkaloid Ergot)
Alkaloid Ergot adalah kelas alkaloid indol hemiterpenoid terkait dengan asam
lysergik, yang terbentuk dalam reaksi multistage melibatkan triptofan dan DMAPP.
Alkaloid ergot banyak berupa amida dari asam lysergik. Amida yang paling
sederhana adalah ergin, dan lebih kompleks dapat dibedakan de dalam kelompok
berikut: Air-larut derivatif amino alcohol, seperti ergometrine dan isomer
ergometrinine. Air-larut derivatif polipeptida: kelompok ergotamine, termasuk
ergotamine, ergosine dan isomernya. Kelompok ergoxine, termasuk ergostine,
ergoptine, ergonine dan isomernya. Kelompok ergoxine, termasuk ergocristine, α-
ergocryptine, β-ergocryptine, ergocornine dan isomernya (Hesse, 2002).
Tanaman yang mengandung derivat tersebut adalah tanaman gandum atau Secale
cereale dengan famili Poaceae. Ergot digunakan sebagai sediaan obstetri untuk
mempersingkat waktu persalinan. Ergot mengandung beberapa alkaloid indol yaitu
jenis ergometrin dan ergotamin. Ergometin adalah zat oksitoksik yang digunakan
untuk mengeluarkan plasenta setelah melahirkan atau untuk meningkatkan kontraksi
dan untuk meredakan migren dengan menurunkan vasodilatasi (Heinrich, 2005).
Ergotamin digunakan untuk mensintesis LSD (asam lisergat dietilamida) dan dapat
juga sebagai anti migren (Wassan, Hofmann dan Ruck, 1978).
Monoterpenoid (Alkaloid Iboga)
Alkaloid yang paling monoterpenoid termasuk C 9 atau fragmen C 10 yang
berasal dari secologanin. Tergantung pada struktur fragmen ini, para alkaloid
termasuk kelas Corynanthe, Iboga dan Aspidosperma dinamai oleh genus khas atau
spesies tanaman yang mengandung alkaloid tersebut (Hesse, 2002).
Tanaman yang mengandung derivat tersebut adalah Tabernanthe iboga dengan
famili Apocynaceae yang bersifat halusinogenik dan antikonvulsan serta sebagai obat
untuk kecanduan heroin (Heinrich, dkk, 2005).
Tanaman yang termasuk dalam alkaloid yohimbine yang mengandung reserpin
adalah Pule Pandak atau Rauwolfia serpentina dengan famili Apocynaceae yang
merupakan tanaman bersemak yang digunakan sebagai obat pada sistem pengobatan
Ayurveda, dan untuk gigitan ular, serta gangguan jiwa. Reserpin dulu digunakan
sebagai senyawa antihipertensi namun karena efek sampingnya sehingga sekarang
tidak digunakan sebagai pilihan (Heinrich, dkk, 2005).
Alkaloid Strichnos (Striknin dan Brusin)
Strychnine adalah alkaloid pertama yang diidentifikasi dalam tanaman dari genus
Strychnos, Keluarga Loganiaceae. Strychnos, dinamakan oleh Linnaeus pada tahun
1753, adalah genus pohon dan semak memanjat dari tatanan gentian. Tanaman yang
mengandung alkaloid strichnos adalah kacang muntah atau Strychnos nux-
vomica dengan famili Loganiaceae. Striknin dan brusin adalah senyawa indol yang
sangat pahit dari biji nux-vomica. Khasiatnya sebagai tonik stimulan. Namun
senyawa tersebut sangat beracun. Striknin digunakan sebagai rodentisida dan
menyebabkan beberapa insiden keracunan (Heinrich, dkk, 2005).
Alkaloid Vinca atau Bisindol (Vinkristin dan Vinblastin)
Lebih dari 200 dari dimer (bisindole) alkaloid indol dikenal. Mereka diproduksi
dalam organisme hidup melalui dimerisasi basis indol monomer, dalam reaksi
berikut: Reaksi Mannich (voacamine), Reaksi Michael (villlstonine), kondensasi dari
aldehida dengan amina (toxiferine, calebassine), Oksidatif kopling tryptamine
(calicantine), Memisahkan kelompok fungsional dari satu onomer (vinblastine,
vincristine). (Hesse, 2002).
Tanaman yang mengandung alkaloid tersebut yaitu tapak dara Madagaskar atau
Catharanthus roseus dengan famili Apocynaceae. Senyawa vinblastin dan vinkrisin
merupakan bahan alam bisindol kompleks (indol dimer) yang terdapat sedikit pada
bahan tanaman (Heinrich, dkk, 2005). Khasiatnya adalah dapat mengurangi
keganasan sel kanker, menghambat penyebaran dan perbanyakan sel
kanker. Vinkristin digunakan sebagai bahan pengobatan kanker bronkial, tumor
ganas pada ginjal, kanker payudara, dan berbagai jenis tumor ganas yang awalnya
menyerang urat saraf maupun otot. Vinblastin, sejenis alkaloid yang antineoplastik
(mampu menumpas sel-sel tumor) (Gusmayana, dkk, 2011).
Biosintesis alkaloid indol
Sintesin indol:
 BAB II
PEMBAHASAN
BAHAN DAN METODE

Bahan tanaman diambil dan dikumpulkan pada tahun 2002 dari Ghat
Timur (Bukit Veligonda) di lembah kutlamarri di sepanjang perbatasan kabupaten
kadapa dan Nellore dari Andhra Pradesh di Southern India dan disimpan di
laboratorium di Universitas Hyderabad.

Strychnos wallichiana L

 class : Equisetopsida C. Agardh

 subclass : Magnoliidae Novák ex Takht.
 Superorder : Asteranae Takht.
 Order : Gentianales Juss. ex Bercht. & J. Presl
 Family : Loganiaceae R. Br. ex Mart.
 Genus : Strychnos L. (Tropicos.org)
 Ekstraksi alkaloid dan persiapan sampel

Digunakan metode ekstraksi alkaloid pada umumnya (Bandopadhyay dan De

1997).

CHCl3
Dibasahi
(200
dg 25%
ml)
NH4OH
selama
5 g biji dan 5 g akar yang
24 jam
sudah kering, dibuat bubuk
halus

Untuk Basa asam

25% 2% H2SO4
mendapatkan
larutan encer (50 ml x
pH 10
NH4OH tiga kali)

Ekstrak +
CHCL3

kemudian
diekstraksi Lapisan
dengan CHCl3 organik dikeringkan dengan penambahan
(50 ml x tiga natrium anhidrat sulfat sampai
kali).
kering dan terkonsentrasi dengan
bantuan rotary evaporator.
 Hasil dari ekstrak akar 62 mg / 5g sementara ekstrak biji kering 58 mg /
5g. masing-masing ekstrak tanaman kering dilarutkan dalam 2 ml CHCl3 dan
disaring melalui 0,2 mm saringan ukuran jarum suntik dan dilakukan analisis TLC
dan analisis HPLC.

Menggunakan pemisahan analisa TLC, Alkaloid yang terdeteksi oleh

penyemprotan dengan pereaksi dragendorff adalah strychnine dan brucine karena
dari awal menggunakan baku pembanding kedua jenis alkaloid tersebut. Alkaloid
standar komersial nilai Rf strychnine dan brucine yaitu Rf 0,35 dan Rf
0,5,sedangkan yang didapatkan dari ekstrak Rf 0,35 dan 0,51. Namun analisa TLC
dari 2 jenis alkaloid kurangnya akurasi dalam hal kemurnian dan kuantitas dari
kedua jenis alkaloid apabila hanya memakai metode TLC.

KESIMPULAN

Dengan analisa metode HPLC didapatkan strychnine Rt: 5.1 dan brucine
Rt: 4.3. ini menunjukkan bahwa jumlah alkaloid yang ada pada akar dan biji dari
tanaman Strychnos wallichiana L cukup banyak.
 DAFTAR PUSTAKA

Alper, Kenneth R, 2001, “Ibogaine: Ulasan” The Alkaloid, Academic

Press, ISBN 0-12-053206-9.
Carl Ruck, R. Gordon Wasson, Jonathan Ott and Albert Hofmann, 1978, The
Road to Eleusis: Unveiling the Secret of the Mysteries, ISBN 978-1-
55643-752-6.
Egon Stahl. 1985. Analisis obat Secara Kromatografi dan Mikroskopi. Penerbit
ITB. Bandung.

Heinrich, dkk, 2005, Farmakognosi dan Fitoterapi, EGC, Jakarta.

Herraiz T, González D, Ancín-Azpilicueta C, Arán VJ, Guillen H., 2010, "Beta-
Carboline Alkaloid di Peganum Harmala dan Penghambatan Monoamine
Oxidase Manusia (MAO)." Food Chem Toxicol 48 (3), 839-
43. doi : 10.1016/j.fct.2009.12.019 . PMID20.036.304.
Hesse, Manfred, 2002, Alkaloid,. Alam Kutukan atau Berkah. Wiley-
VCH. ISBN 978-3-906390-24-6.
Legowo, Anang Mohamad, Dr. Ir, MSc, 2003, “Analisis Bahaya Dan Penerapan
Jaminan Mutu Komoditi Olahan Pangan”, Fakultas Peternakan
Universitas Diponegoro, Semarang.
Rao PS, Prasad Majeti NV, 2008, Extraction, Purification and Characterization
of Indole Alkaloids from Strychnos wallichiana L. – an Endangered
Medicinal Plant from India, Medicinal and Aromatic Plant Science and
Biotechnology 2 (1), 63-67
Rismunandar, 1990, Membudidayakan Tanaman Buah-Buahan, CV. Sinar Baru,
Bandung.