Dalam aktivitas antibakteri vitro dari ekstrak alkaloid dari

hijau, merah dan coklat makroalga dari pantai barat

Libya

organisme laut dan mikroorganisme yang dikenal sebagai sumber yang kaya alkaloid dengan kimia yang
unik
Fitur dan aktivitas biologis yang menarik. Studi saat menyajikan efek antibakteri dari
ekstrak alkaloid dari beberapa ganggang hijau, merah dan coklat dikumpulkan dari pantai barat Libya,
melawan, Escherichia coli, Salmonella typhi, Klebsiella spp., dan Pseudomonas aeruginosa,
Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Bacillus spp. dan Staphylococcus epidermidis yang
diselidiki. Meskipun ekstrak alkaloid dari ganggang hijau menghambat semua bakteri yang diuji, efek
maksimum adalah
dipamerkan oleh spesies alga coklat dan merah. Dengan demikian, Cystoseira ekstrak alkaloid barbata
menunjukkan luar biasa
penghambatan patogen manusia Klebsiella spp. Dictyopteris membranacea alkaloid ekstrak juga
menunjukkan pengaruh yang besar serupa terhadap S. typhi dengan nilai MIC 1,56 mg / ml. The
diucapkan
aktivitas antibakteri C. barbata dan D. membranacea dapat dikaitkan dengan isi alkaloid yang tinggi.
Hasil ini menunjukkan bahwa metabolit sekunder merah dan coklat ganggang merupakan sumber
penting yang
bisa menghasilkan potensi agen kemoterapi.

TranslateTurn off instant translation

TranslateTurn off instant translation

organisme. Pertama Contoh medis manfaat suatu

alkaloid adalah morfin, terisolasi pada tahun 1805 dari opium
papaver somniferum (Fessenden dan Fessenden, 1982).
Meskipun, alkaloid telah dipelajari secara ekstensif di
tanaman dan beberapa studi di ganggang laut dilaporkan karena
fakta bahwa alkaloid dari ganggang laut relatif
langka dibandingkan dengan alkaloid tanaman terestrial (Guven et
al., 2010). Alkaloid yang ditemukan di ganggang laut dapat
diklasifikasikan menjadi tiga kelompok: alkaloid Phenylethylamine,
indol dan alkaloid indol terhalogenasi, dan alkaloid lainnya. Secara struktural, phenylethylamine
dan kelompok indole
adalah yang paling alkaloid yang diisolasi dari ganggang laut. aktivitas biologis terhalogenasi
dan non-halogenasi
formulir telah dilaporkan sebagai senyawa bioaktif dan
sebagai probe biologi untuk studi fisiologis (Kasim et
al., 2010). Selain itu, Caulerpin terisolasi dari makroalga, adalah satu-satunya alkaloid indol dari
sumber kelautan
yang telah dilaporkan memiliki anti-inflamasi
potensi (. Carolina et al, 2011; Everton et al, 2009.). Di
Selain itu, ada dua turunan: lophocladine A dan
lophocladine B yang telah diisolasi dari alga merah
Lophocladia spp., Yang dikumpulkan dari Fiji Island, New
Zealand (Gross et al., 2006) dan aktivitas antikanker mereka
telah terbukti berhasil di berbagai lini sel kanker
(Patricia et al., 2010).
Studi sebelumnya mengungkapkan bahwa ekstrak rumput laut,
terutama polifenol memiliki aktivitas antioksidan (Chandini
et al., 2008; . Ganesan et al, 2008); sedangkan alkaloid
umumnya ditemukan memiliki sifat antimikroba terhadap
Bakteri baik Gram-positif dan Gram-negatif (Guven
et al., 2010) seperti alkaloid indol terhalogenasi yang
terisolasi dari ganggang merah (Ayyad dan Badria, 1994).
Senyawa ini telah disetujui untuk aktivitas antibakteri mereka (Guella et al., 2006). Aktivitas
biologis
alkaloid indol laut jelas merupakan produk dari
fungsi yang unik dan unsur yang terlibat dalam biosintesis produk alami laut yang meningkatkan
aktivitas biologis rumput laut. Misalnya, brominasi
dari banyak produk alami memiliki potensi untuk meningkatkan
aktivitas biologis secara signifikan (Gul dan Hamann, 2005).
Penelitian ini dilakukan untuk menyelidiki
efek antibakteri dari ekstrak alkaloid dari 6 spesies
ganggang laut (dua Chlorophyceae, tiga Phaeophyceae
dan satu Rhodophyceae) yang dikumpulkan dari Libya
pantai barat, terhadap bakteri Gram-negatif patogen:
Escherichia coli, Salmonella typhi, Klebsiella spp., Dan
Pseudomonas aeruginosa serta bakteri Gram positif, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis,
Bacillus
spp., dan Staphylococcus epidermidis
 BAHAN DAN METODE
pengumpulan sampel
Ulva lactuca, Codium tomentosum (Chlorophyta), Cystoseira
barbata, Sargassum vulgare, Dictyopteris membranacea
(Phaeophyta) dan Gelidium latifolium (Rhodophyta) dikumpulkan
dari pantai barat Libya antara Februari dan musim semi 2009. (Li, 2009;. Saidani et al, 2011), antivirus
(Romanos et al,.
2002; Mayer et al., 2009), anti-inflam-matory dan
kegiatan antikanker (Jaswir dan Monsur, 2011; Bhakuni
dan Rawat 2005; Vasanthi et al., 2004; Natarajan dan
Kathiresan, 2010). Namun demikian, di Libya semacam ini
Studi belum tergarap dengan baik, meskipun kekayaan
Flora laut Libya. Oleh karena itu, penelitian ini adalah untuk
menyelidiki senyawa alkaloid yang diekstrak dari
makro-alga dari pantai Libya.
Alkaloid adalah senyawa nitrogen heterosiklik, alami pada tanaman, mikroba, hewan dan kelautan
Sampel alga yang taksonomi diidentifikasi di Botany, Fakultas Ilmu, Tripoli University. Ganggang dicuci
benar dengan air suling, kemudian mereka teduh dikeringkan pada ruang
temperatur, setelah mereka hancur di penggilingan listrik sampai
bubuk halus diperoleh (Chiheb et al., 2009).
strain bakteri
Delapan strain bakteri (Gram positif dan negatif) yang dipilih
untuk penelitian. Spesies Gram positif: S. aureus (S. aur)
diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Klinik, Azzawiya
Pusat medis (Azzawiya, Libya). B. subtilis (B. sub) yang ramah
disediakan oleh Mohamed Elghazali, Departemen Mikrobiologi
Bioteknologi Pusat Penelitian (Twaisha, Libya), sementara Bacillus
spp. (B. spp.) Dan S. epidermidis (S. epi) diperoleh dari
Departemen Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Tripoli
Universitas. Gram spesies negatif S. typhi (S. typhi), E. coli (E.
coli), P. aeruginosa (P. aer) dan klebsiella spp. (K. spp.) Yang
diperoleh dari Departemen Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Hewan
Kedokteran, Tripoli University, Libya.

ekstraksi alkaloid
bahan ganggang bubuk (50 g) diekstraksi beberapa kali dengan
metanol (300 ml). ekstraksi metanol dilanjutkan sampai
bahan tanaman memberikan hasil yang negatif untuk alkaloid (uji Mayer).
ekstrak metanol yang diperoleh diuapkan di bawah berkurang
Tekanan pada 40 ° C, untuk meminimalkan degradasi termal kemungkinan
alkaloid dan senyawa labil thermo lainnya. Campuran alkaloid mentah kemudian dipisahkan dari
bahan netral dan asam,
dan air bahan terlarut dengan ekstraksi dengan asetat berair
asam, diikuti oleh ekstraksi diklorometana, maka basification dari
larutan berair yang dikenakan untuk lebih ekstraksi diklorometana sesudahnya (Hadi dan
Bremner, 2001).
 kromatografi lapis tipis (TLC)
Identifikasi alkaloid selanjutnya dilakukan dengan KLT menggunakan precoated silika gel 60 F264 piring
(Wagner dan Bladt, 2004).
sistem penyaringan yang berbeda digunakan untuk mendapatkan resolusi yang lebih baik dari
komponen. reagen Dragendorff ini digunakan sebagai locating a
reagen (Harborne, 1992). Nilai Rf dari masing-masing tempat dihitung sebagai
Rf = Jarak perjalanan dengan zat terlarut / Jarak perjalanan dengan
pelarut.

Penentuan aktivitas antibakteri

Uji aktivitas antimikroba ekstrak mentah alga dilakukan
in vitro menggunakan "metode difusi lubang-plate" (Sarvanakumar et
al., 2009). Setiap organisme uji dipertahankan pada agar nutrien
miring dan pulih untuk pengujian oleh pertumbuhan dalam kaldu nutrisi
(Biolab, Difco) selama 14 jam pada 37 ° C sebelum melesat. Budaya secara rutin disesuaikan dengan
suspensi dari 1 × 106 untuk 2 × 106 CFU / mL menggunakan
pra-dibuat kurva kalibrasi yang mewakili jumlah sel yang layak (X × 106)
terhadap OD 660 nm (Y). Lempeng dengan bakteri diinkubasi pada
37 ° C selama 24 jam. Setelah inkubasi, zona inhibisi yang terbentuk di sekitar
lubang diukur. Metanol (100%) tanpa rumput laut
ekstrak digunakan sebagai kontrol negatif dan disc ciprofloxacin (30 mg)
digunakan sebagai kontrol positif.

Penentuan konsentrasi hambat minimum (MIC)

The MIC ditentukan dengan metode dilusi agar (Daud andSanchaz, 2005). Dua kali lipat pengenceran
serial ganggang asli
ekstrak (100 mg / ml) disusun dalam kaldu nutrisi untuk mendapatkan
konsentrasi 100-1,56 mg / ml pelarut. Piring diinkubasi
pada 27 ° C selama 18 jam

metode bioautografi
Sepuluh mikroliter (10 ml) dari solusi yang sesuai dengan 1000 ug
ekstrak alkaloid yang diterapkan untuk precoated Silica gel TLC piring,
dikembangkan dengan CHCl3 / MeOH / Na2CO3 (3: 8: 1, v / v) untuk setiap ekstrak,
dan diuapkan untuk menyelesaikan kekeringan. piring kering yang
dilapis dengan media nutrien agar diunggulkan dengan E. coli (106-107
CFU / ml) dan kemudian diinkubasi semalam pada suhu 37 ° C.
analisis statistik
Semua tes dilakukan dalam rangkap tiga. Semua data dinyatakan sebagai sarana
± S.D. Data dianalisis dengan analisis varians (P <0,05)
dan sarana dipisahkan oleh satu arah ANOVA dengan uji b Turki
menggunakan SPSS versi 20.0.
HASIL DAN DISKUSI
Analisis fitokimia kualitatif untuk U. lactuca, C.
barbata, D. membranacea, C. tomentosum, S. vulgare
dan G. latifolium menunjukkan adanya alkaloid menurut temuan sebelumnya (Alghazeer et al.,
2013). Itu
Penelitian ini dilakukan dalam rangka untuk mengekstrak alkaloid
dari spesies yang sama dan kemudian menilai antibakteri mereka
aktivitas. Gambar 1 menunjukkan isi alkaloid (% mg / g)
diekstrak dari spesies ganggang hijau, merah dan coklat. Itu
konten tertinggi tercatat untuk D. Membranacea
(6.11%), S. vulgare (5,84%), U. lactuca (5.33%), (6.11%);
sedangkan C. barbata dan C. tomentosum menunjukkan konten moderat alkaloid (3,2 dan 2,84%,
masing-masing),
sedangkan konten alkaloid terendah diperoleh dari G.
latifolium (2,37%). minat khusus alkaloid hadir
karena aktivitas farmakologi mereka. Bahkan, banyak
laporan mengungkapkan adanya alkaloid di laut
ganggang dan beberapa dari mereka telah diselidiki karena adanya
aktivitas biologis (Guven et al, 2010;.. Kasim et al, 2010).
Kegiatan antimikroba ekstrak alkaloid dari enam
spesies rumput laut yang diwakili oleh tiga Phaeophyta (S.
vulgare, D. membranacea dan C. barbata), dua Chlorophyta (U. lactuca dan C. tomentosum) dan
satu Rhodophyta (G. latifolium) diperiksa terhadap delapan uji
bakteri (Bacillus spp., B. subtilis, S. aureus, S. epidermidis,
E. coli, kleb. spp., P. aeruginosa dan Salmonella typhi).
Zona penghambatan coklat, hijau dan merah ganggang
ekstrak terhadap bakteri gram positif dan negatif Gram berkisar antara 13-35, 12-29 dan 15-34
mm,
masing-masing, semua nilai ditunjukkan pada Tabel 1.
Ekstrak alkaloid dari U. lactuca menunjukkan relatif
rata zona tinggi inhibisi (21 ± 0,11 mm) terhadap
Gram positif S. aureus, S. epidermis kemudian Bacillus spp.
(17 ± 0,3 mm), E. coli (16 ± 0,12 mm) dan B. subtilis (14
± 0,10 mm). Sedangkan ekstrak alkaloid dari C. tomentosum
menunjukkan zona penghambatan tinggi yang luar biasa terhadap S.
epidermis (29 ± 0,35 mm) kemudian Bacillus spp. (20 ± 0,3
mm), S. aureus (16 ± 11) dan B. subtilis (13 ± 0,09 mm).
Untuk bakteri gram negatif, zona maksimum penghambatan
tercatat dengan ekstrak alkaloid dari U. lactuca terhadap
kleb spp. (18 ± 0,15 mm) dan S. typhi (17 ± 0,11 mm).
Juga, zona penghambatan maksimum dicatat oleh C.
ekstrak alkaloid tomentosum terhadap klebsiella spp. (27 ±
0.35 mm) maka E. coli (23 ± 0,11 mm), S. typhi (21 ± 0,23
mm) dan P. aeruginosa (12 ± 0,09 mm) (Tabel 1). Itu
ekstrak alkaloid dari S. vulgare dan C. barbata menunjukkan
rata zona tertinggi penghambatan terhadap positif Gram
Alghazeer et al. 708
Bacillus spp. (19 ± 0.21 mm and 31 ± 0.15 mm,
respectively) then against S. epidermis (18 ± 0.11;
20 ± 0.11 mm, respectively), and S. aureus (13 ±
0.09; 22 ± 0.15). However, D. membranacea
alkaloid extract had no effect on Bacillus spp., but
showed high inhibition zones against B. subtilis
and S. epidermis (23 ± 0.6 and 23 ± 0.15 mm).
Maximum inhibition zone of Gram negative bacteria was recorded for alkaloid extract of S.
vulgare and D. membranacea against S. typhi (25
± 0.6 mm; 35 ± 0.74 mm) while the highest effect
by the alkaloid extract of C. barbata was observed
against klebsiella spp. (35 ± 0.54 mm). Whereas,
P. aeruginosa was not susceptible to the alkaloid
extracts of S. vulgare, D. membranacea and C.
barbata.
The antibacterial activity of the alkaloid extract
of D. membranacea and C. barbata were significantly high (P<0.05) compared with the positive
control(CiprofloxacinandChloramphenicol)against
Gram negative bacteria (Table 1), the antibacterial
activity of green, brown and red algae is well
documented (Del Val et al., 2001) as well as their
isolated alkaloids (Masuda et al., 1997; Kasim etal.,
2010). Alkaloid ekstrak G. latifolium
menunjukkan zona rata tinggi signifikan dari penghambatan
terhadap epidermis Gram positif S. (34 ± 0,6
mm) dibandingkan dengan kontrol positif (Ciprofloxacin
dan Neomycin) (P <0,05) yang di konsisten
dengan temuan sebelumnya di mana alkaloid yang diisolasi dari
ganggang merah dipamerkan berbagai mode bioaktivitas
(Sato et al, 1998;.. Gross et al, 2006). zona penghambatan direkam terhadap Bacillus spp. dan S.
aureus adalah 24 ± 0,11 dan 15 ± 0,12 mm masing-masing, sementara tidak ada penghambatan
diamati terhadap
B. subtilis. Untuk bakteri gram negatif, maksimum
zona inhibisi tercatat dengan alkaloid
ekstrak G. latifolium terhadap E. coli (29 ± 0.54
mm), S. typhi (18 ± 0,11 mm) dan Kleb. sp. (15 ±
0,11 mm), sementara tidak ada penghambatan diamati
terhadap P. aeruginosa (Tabel 1). Aktivitas
ganggang merah, hijau dan coklat terhadap kedua Gram
bakteri negatif positif dan Gram mungkin menunjukkan adanya antibiotik spektrum luas
senyawa atau hanya isi pharmacolo--
konstituen aktif gical seperti alkaloid (Omulokoli
et al., 1997; Phang et al., 1994).
konsentrasi hambat minimum (MIC) dari alkaloid yang diekstrak dari ganggang (Gambar 2)
ditemukan
berada dalam kisaran 100-1,56 mg / ml. Itu
tingkat tinggi dari MIC untuk beberapa ekstrak alkaloid
dapat dikaitkan baik dengan kehadiran
komponen aktif dalam konsentrasi rendah, atau ke
Kehadiran beberapa komponen antagonis yang
berfungsi sebagai promotor pertumbuhan bakteri. Itu
konsentrasi hambat (MIC) nilai minimum
ganggang hijau (U. lactuca, C. tomentosum) terhadap
Bakteri itu berkisar antara 6,25-100 mg / ml.
Nilai MIC terendah tercatat untuk C.
tomentosum dan U. ekstrak lactuca (6,25, 25
mg / ml masing-masing) terhadap S. epidermidis sementara
Minimum konsentrasi penghambatan (MIC) nilai
ganggang coklat (S. vulgare, D. membranacea dan
C. barbata) terhadap bakteri yang berkisar antara
6,25-100 mg / ml. MIC terendah (1,56, 6,25
dan 12,5 mg / ml) nilai tercatat untuk C.
barbata, D. membranacea dan S. ekstrak vulgare, masing-masing melawan klebsiella spp.
(Angka
1). Untuk alkaloid yang diekstrak dari ganggang merah (G.
latifolium), konsentrasi hambat minimum
(MIC) nilai-nilai dari ganggang coklat (S. vulgare, D.
membranaceaandC.barbata) againstbacteriawere berkisar antara 1,56-100 mg / ml. Terendah
MIC (1,56
/ Ml) nilai mg tercatat melawan kleb. sp (Gambar 1).
Awal TLC dan tes uji bioautographic
dilakukan pada ekstrak untuk memisahkan senyawa
yang bertanggung jawab untuk penghambatan menguji bakteri
maka salah satu tempat mungkin berisi lebih dari satu senyawa.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa uji antibakteri dapat
dikaitkan dengan senyawa diamati di berbagai Rf
nilai pada pemisahan TLC. Meskipun, kadang-kadang
aktivitas senyawa tidak mudah terdeteksi oleh ini
assay, jika senyawa tersebut tidak menyebar melalui agar-agar,
maka kegiatan itu dapat bertopeng. bioautoghraphy yang
Metode diaplikasikan pada ekstrak menggunakan E. coli mengisolasi ke
yang semua ekstrak menunjukkan aktivitas antimikroba (Tabel
1). Hasil penelitian menunjukkan aktivitas yang baik terhadap E. coli, dengan
zona penghambatan menonjol untuk alkaloid dari D.
membranacea, C. barbata, S. vulgare, G. latifolium dan
ekstrak U. lactuca memiliki dua zona inhibisi, sedangkan,

alkaloid dari ekstrak C. tomentosum dipamerkan satu zona

inhibisi (Tabel 2).
kesimpulan
Hasil karya ini menunjukkan adanya alkaloid
dalam alga diuji yang memainkan peran yang sangat diperlukan dalam aktivitas antibakteri, namun
penelitian lebih lanjut untuk mengidentifikasi dan
ciri senyawa aktif tertentu, serta
evaluasi aspek beracun yang direkomendasikan.
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada Dr Hussein dan Dr Asma
AlNajar untuk dorongan konstan dan
konsultasi.

Gambar 2. in vitro aktivitas antimikroba ekstrak alkaloid dari diuji ganggang dinyatakan sebagai hambat
minimum
konsentrasi (MIC) (mg / ml) terhadap beberapa bakteri. S. aur: Staphylococcus aureus, B. sub: Bacillus
subtilis, E. coli:
Escherichia coli, P. aer: Pseudomonas aeruginosa, B. sp: Bacillus spp, S. typhi. Salmonella typhi, S. epi:
Staphylococcus epidermidis, Kleb. sp: klebsiella spp.
Tabel 2. Lokasi dan menonjol dari zona inhibisi pada nilai Rf yang berbeda
ekstrak alkaloid terhadap E. coli.

Tabel 1. In vitro aktivitas antimikroba ekstrak alkaloid alga (100 mg / ml) terhadap bakteri gram positif
dan gram negatif

Gambar 1. Persentase hasil alkaloid (alkaloid mg / g kering berat) diekstrak dari U. lactuca, C.
tomentosum, C. barbata, S. vulgare, D. membranacea dan G. latifolium