Straminipiles (Oomycota) berkembang pada telur dari suatu

Lele dumbo, Clarias gariepinus Burchell dalam air

badan Polandia

Straminipiles (Oomycota), garis keturunan mikroorganisme eukariotik seperti jamur, tumbuh pada
telur dari
Lele dumbo Afrika, Clarias gariepinus, dalam air yang berbeda-beda di Polandia telah diteliti.
Dua puluh satu (21) spesies dicatat. Jumlah terbesar spesies terjadi pada telur dalam air dari
Sungai Biala dan Pond Fosa (lebih biogenik), yang terkecil dalam air dari Sungai Suprasl dan Pond
Dojlidy
(buruk dalam biogen). Spesies yang paling sering ditemui pada telur C. gariepinus adalah:
Saprolegnia parasitica, Achlya polyandra, A. oblongata, A. prolifera, Aphanomyces frigidophilus, S.
ferax dan Leptomitus lakteus. Uji asam amino, karbohidrat dan urease digunakan. 11,4% dari C.
Telur gariepinus yang diselidiki ditemukan terinfeksi oleh spesies Straminipiles.
Kata kunci: Clarias gariepinus, telur, straminipiles (Oomycota), infeksi, hidrokimia

PENGANTAR
Di beberapa negara, termasuk yang berasal dari Afrika
Benua, daging ikan berutang nilai gizi tidak hanya untuk
protein dan lemak, tetapi juga aktif secara biologis lainnya
zat, yang telah memainkan peran penting dalam
kehidupan manusia (Czeczuga et al., 2013). Dunia telah
sangat bergantung pada dua sistem alami: perikanan laut
dan peternakan sapi (Brown, 2000). Dengan ikan liar
produksi stagnan, pertumbuhan produksi ikan secara keseluruhan
hampir seluruhnya berasal dari boom global di Indonesia
akuakultur, terutama di negara berkembang. Lebih dari satu
periode 10 tahun terakhir, produksi akuakultur meningkat
dengan rata-rata 11% per tahun (van West, 2006). Di
tahun-tahun mendatang, akuakultur akan mewakili lebih dari 30%
total ikan yang tersedia untuk konsumsi (dan itu meningkatkan semua
jalan hingga 41% pada tahun 2012) (Delgado et al., 2003). Secara keseluruhan
tempat pembenihan, salah satu masalah yang lebih penting datang
dari jamur straminipilous akuatik yang tumbuh di ikan
telur (Woo dan Bruno, 1999).
Spesies Straminipile bertanggung jawab untuk infeksi
ikan di budidaya, peternakan ikan dan tangki ikan hobi. Di
beberapa negara (termasuk Polandia), ada minat
pengenalan spesies ikan eksotis tertentu untuk akuakultur,
saat ini jelas dalam mengimpor telur dan menetas dan
kegiatan pemuliaan (Perez et al., 2003). Clarias gariepinus
(dikenal sebagai ikan patin lele atau lele Afrika) adalah satu
spesies seperti itu dan sangat direkomendasikan sebagai ikan makanan
di Afrika dan di luar (Okeyo, 2003).
BAHAN DAN METODE
Deskripsi spesies inang
Clarias gariepinus Burchell, 1822 (sin. C. lazera Cuvier et Valenc.,
1840); C. mossambicus Peters, 1852 (nama bahasa Inggris: sharptooth
lele lele dumbo).
C. gariepinus didistribusikan di Afrika, hampir Pan-Afrika; tidak hadir
*Penulis yang sesuai. E-mail: bazzylio@poczta.onet.pl

Tabel 1

dari Maghreb, Guinea atas dan bawah dan Provinsi Cape,

dan mungkin Provinsi Natal. Hadir juga di Asia Barat Daya,
Yordania, Lebanon, Israel, Suriah dan Turki selatan (Skelton, 2002),
dan secara luas diperkenalkan ke bagian lain di Afrika, Eropa dan Asia.
Beberapa negara melaporkan dampak ekologis yang merugikan setelah
pengantar mereka (ITIS, 2010).
Spesies ini terjadi terutama di perairan yang tenang, danau dan kolam renang tetapi
mungkin juga terjadi di sungai yang mengalir cepat dan di jeram (Allanson, 2004).
Mereka toleran terhadap kondisi lingkungan yang ekstrim (Teugels,
1986). Mereka memakan serangga, plankton, invertebrata dan ikan, tetapi
juga mengambil burung-burung muda, daging dan tumbuhan yang membusuk (de Moor dan Bruton,
1988). Mereka bermigrasi ke sungai dan aliran sementara untuk bertelur
(Witte dan de Winter, 1995). Dipasarkan segar dan beku, mereka
dimakan panggang, digoreng dan dipanggang (Frimodt, 1995).
Karakteristik badan air
Tiga sungai dan tiga kolam yang terletak di wilayah timur laut
Polandia (53 ° 07 'N, 23 ° 10' E hingga 53 ° 13 'N, 23 ° 20' E) dipilih untuk
penelitian: 1) Sungai Biala, panjang 9,8 km, lebar 3,7 m, kedalaman 0,85 m,
anak sungai kiri dari Sungai Suprasl yang mengalir melalui Bialystok
Kota. 2) River Suprasl, panjang 93,1 km, lebar 6,0 m, kedalaman 1,1 m,
anak sungai kanan terbesar di tengah Sungai Narew mengalir
melalui Hutan Knyszynska. 3) Sungai Krasna, panjang 7,5 km,
lebar 3,1 m, kedalaman 0,7 m, anak sungai kiri dari Sungai Suprasl,
mengalir melalui hutan Knyszynska. 4) Kolam Dojlidy, dekat
Bialystok City, area 34,2 ha; kedalaman maksimum, 2,85 m. Selatannya
pantai berbatasan dengan hutan termasuk jenis pohon jarum dan perbatasan bagian baratnya
Kota Bialystok. 5) Pond Fosa terjadi di Branicki Park of Bialystok
Kota, luas 2,5 ha, kedalaman maksimum 1,75 m, di mana angsa berkembang biak
dan koloni bebek liar tinggal di samping ikan mas crucian. 6) Tambak
Komosa, luas 3,2 ha, kedalaman maksimum 1,25 m, dikelilingi rapat
oleh pohon-pohon coniferous dari hutan Knyszynska.
Sembilan belas (19) parameter air tersebut ditentukan (Tabel 1) sesuai dengan metode yang
diterima secara umum (APHA, 2005).
Mengisolasi dan mengidentifikasi spesies straminipiles
Telur yang diteliti (720), ditutupi dengan miselia, dikumpulkan
pada akhir Mei dari tempat pembenihan Institute of Ichtyobiology
dan Akuakultur, Akademi Ilmu Pengetahuan Polandia di Golysz, Polandia.
Telur dicuci tiga kali dalam air suling steril
sebelum percobaan (Paterson and Bridge, 1994).
Prosedur berikut digunakan saat menentukan
Kehadiran straminipiles Oomycota spesies pada diselidiki
telur (setelah pembuahan) C. gariepinus. Sampel air (800 ml
masing-masing) dari berbagai situs yang diteliti ditempatkan dalam 1000 ml
kapal. Dua puluh (20) hingga 30 telur dipindahkan ke masing-masing kapal di
sesuai dengan prinsip-prinsip umum prosedur budaya (Watanabe,
2002). Semua kapal tertutup dalam cawan Petri dengan tempat tidur berubah
terbalik untuk mencegah kemungkinan kontaminasi di udara dengan
spora mycotal. Pembuluh darah disimpan pada suhu 15 ± 2 ° C, dengan akses
ke siang hari menyerupai kondisi alam dan mengikuti
instruksi yang direkomendasikan (Seymour dan Fuller, 1987). air
analisis dan eksperimen dilakukan dalam tiga paralel
pengulangan.
Telur yang ditutupi oleh miselia (dari masing-masing kapal) diamati
setiap tiga hingga empat hari di bawah mikroskop cahaya dan kehadiran
struktur morfologi (zoospora, antheridia dan oogonia) dari
jamur akuatik dicatat. Percobaan-percobaan itu dilakukan
untuk satu bulan. Taksiran spesies straminipiles diidentifikasi
menggunakan kunci dari Johnson et al. (2005), Pystina (1998) dan Dick
(2001). Tes asam amino, karbohidrat dan urease
dilakukan pada genera: Achlya, Aphanomyces, Leptolegnia,
Pythium dan Saprolegnia menurut Yuasa dan Hatai (1996) dan
Kitancharoen dan Hatai (1998). Untuk pemanfaatan karbohidrat
tes, media yang digunakan untuk membudidayakan isolat mycotal adalah ragi
Agar berbasis nitrogen (Difco) dan glukosa-ragi (GY) ekstrak agar
digunakan untuk tes urease.

Tabel 2

Untuk mencegah pertumbuhan bakteri, ampisilin dan streptomisin

diaplikasikan untuk dilasi yang dipilih. Medium basal digunakan di
uji asimilasi asam amino. Persiapan dan indikator sedang
sama dengan tes asimilasi karbohidrat.
Bromothymol blue dan phenol red digunakan sebagai indikator, ditambahkan
ke dalam kaldu basis nitrogen ragi dan kaldu GY, masing-masing. SEBUAH
hasil positif ditentukan oleh perubahan warna
sedang ke merah muda atau ungu, dan perubahan menjadi oranye dan kuning
dianggap sebagai hasil negatif. Metode-metode itu dijelaskan
secara rinci dalam makalah kami sebelumnya (Czeczuga et al., 2011b). Hasil
diuji untuk signifikansi dengan analisis varians (ANOVA) dan
dievaluasi dengan tes S-Scheffe (Winer, 1997).
HASIL
Parameter hidrokimia air yang digunakan dalam
percobaan ditunjukkan pada Tabel 1. Yang paling eutrofik
adalah air dari Sungai Biala dan Pond Fosa. air
dari River Suprasl memiliki kandungan terendah dari semua bentuk
nitrogen dan fosfat. Tingkat COD tertinggi,
CO2, klorida, sulfat dan kalsium ditemukan di
Sungai Biala. Air dari Komosa Tambak berisi
kadar magnesium dan besi tertinggi. Delapan puluh dua (11,4%)
dari 720 C. gariepinus yang telah diperiksa
terinfeksi dengan organisme straminipiles.
Dua puluh satu (21) spesies straminipiles, termasuk 18
milik Saprolegniales, 2 hingga Pythiales dan 1 hingga
Leptomital ditemukan tumbuh pada telur
C. gariepinus (Tabel 2). Spesies dari Achlya dan
Genera Saprolegnia adalah yang paling umum. Saprolegnia

Tabel 3

parasitika (28) spesimen, Achlya polyandra (27), A.

oblongata (25), A. prolifera (22), Aphanomyces
frigidophilus (20), Saprolegnia ferax (18) dan Leptomitus
lacteus (15) termasuk yang paling sering ditemui
spesies pada telur yang diperiksa. Di banyak telur
diperiksa, hanya beberapa spesies straminipile
ditemui. Jumlah straminipile tertinggi
spesies diamati tumbuh di air dari Sungai
Biala dan Pond Fosa (keduanya yang paling eutrofik), sedangkan
jumlah terendah terjadi pada telur dalam air dari Sungai
Suprasl dan Pond Dojlidy (rendah eutrofikasi).
Spesies dari Achlya, Aphanomyces, Leptolegnia dan
Saprolegnia genera berasimilasi alanin, tetapi tidak
mengasimilasi metionin, lisin, ornithin atau leusin dan
glisin (Tabel 3). Semua spesies yang terisolasi dari Achlya,
Aphanomyces, Leptolegnia dan Saprolegnia genera
berasimilasi glukosa dan pati, tetapi mereka tidak
mengasimilasi arabinose dan salicin. Urease hanya
berasimilasi oleh spesies dari Leptolegnia, Pythium dan
Genera Saprolegnia.
DISKUSI
Spesies yang ditemukan dalam penelitian ini telah dilaporkan
sebelumnya (Czeczuga dkk., 2011b). Dua puluh satu (21)
Spesies straminipile milik delapan genus adalah
ditemukan tumbuh pada telur C. gariepinus di dalam air
dari enam air yang berbeda dan berbeda secara tropika
badan Polandia Utara-timur. The Achlya dan
Genera Saprolegnia adalah yang paling umum. Di dalam air
badan benua Afrika, di kawasan alam
distribusi spesies, ada juga yang seperti itu
spesies straminipile milik Achlya, Aphanomyces,
Genus Dictyuchus, Pythium dan Saprolegnia (ElSharouny dan Badram, 1995; El-Nagdy dan Nasser,
2000; El-Hissy et al., 1982, 2004; Ali dan Abdel-Raheem,
2003; Ali, 2007). Yang paling sering ditemui
spesies yang ditemukan di perairan Afrika adalah milik
Saprolegnia, Pythium, Phytophthora dan Achlya genera
(El-Hissy dan Khallil, 1989; Khallil et al., 1993; El-Hissy et
al., 2004). Yang paling sering ditemui dari
Saprolegnia genus telah menjadi S. ferax, kurang begitu S.
parasitika dan Leptomitus lacteus spesies belum
terdaftar sebelumnya di badan air tersebut.
El-Sharouny dan Badram (1995), saat menyelidiki
jamur zoospora pada berbagai bagian tubuh Tilapia
nilotica dan T. galileae dari perairan Sungai Nil,
telah mencatat 17 spesies milik Saprolegnia,
Achlya, Dictyuchus, Pythium, Allomyces dan
Aphanomyces genera. Yang paling umum adalah:
Saprolegnia ferax, S. diclina, Achlya dubia, A. americana,
A. racemosa, A. flagellata, Dictyuchus sterilis, Pythium
undulatum dan Aphanomyces sp. Seperti yang sudah disebutkan,
di Sungai Biala dan Pond Fosa, yang paling eutrofik
badan air diperiksa, kami menemukan nomor paling sedikit
spesies straminipile pada telur C. gariepinus, sementara
di Sungai Suprasl dan Pond Dojlidy (paling sedikit berlimpah
dalam biogenes) jumlah spesies yang terisolasi telah menjadi
paling tinggi. Kami mengamati fenomena tersebut saat belajar
pertumbuhan mycobiota pada telur cyprinid tertentu
spesies (Czeczuga dan Muszynska, 1999) dan coregonid
spesies (Czeczuga dan Muszynska, 1998). Harus
menekankan bahwa di danau oligotrophic di Swiss lebih
spesies mycobiota telah ditemukan di masing-masing
spesies ikan daripada di danau eutrofik (Meng, 1980).
Namun, dalam spesies ikan acipenseridae, kami punya
mengamati fenomena sebaliknya - lebih sedikit spesies
ditemukan tumbuh pada telur di perairan eutrofik
(Czeczuga dkk., 2011c). Hanya dua spesies yang termasuk
genus Pythium telah terdeteksi pada telur C.
gariepinus. Mereka adalah spesies umum air
tubuh dan telur ikan air tawar
(Czeczuga, 1996).
Seperti yang ditunjukkan penyelidikan ini, S. parasitica adalah yang paling banyak
habitat mycotal yang biasa ditemui pada C. gariepinus
telur. Fenomena serupa telah diamati selama
investigasi tentang pengembangan spesies mycobiota
pada telur koregonid (Czeczuga dan Muszynska,
1998), salmonid (Czeczuga et al., 2005, 2011a) dan
spesies ikan sturgeonid (Czeczuga et al., 2011c).
Menurut Fregeneda-Grandes et al. (2007) paling banyak
sering spesies straminipiles air pada telur
Salmo trutta L. termasuk dalam S. diclina. Sekunder
kista (taksonomi penting) dari S. parasitica
spesimen dari telur C. gariepinus memiliki perbedaan jumlah bundel per kista, rambut per bundel
dan
panjangnya berbeda. Studi tentang morfologi
kista sekunder spesies Saprolegnia patogenik dari
wilayah geografis yang berbeda (Hatai et al., 1990;
Fregeneda-Grandes et al., 2000; Diéguez-Uribeondo et
al., 2007) telah menunjukkan bahwa jumlah bundel,
jumlah rambut dan panjangnya adalah fitur adaptif
terkait dengan berbagai kondisi lingkungan dan
struktur permukaan inang air. Juga bahan kimia
komposisi zoospora dan kista saprotropik
dan spesies ikan Saprolegnia patogen berbeda
(Burr and Beakes, 1994). Salinitas secara signifikan
mengurangi total asam amino bebas dan kandungan protein
ikan patogen Saprolegnia parasitica miselia (Ali, 2005).
Juga investigasi Saprolegnia diclina-S.
parasitika kompleks dari berbagai wilayah geografis di
Urutan rDNA ITS telah menunjukkan morfologi dan
perbedaan fisiologis dan variasi dalam mereka
patogenisitas (Diéguz-Uribeondo et al., 2007).
Adaptasi terhadap parasitisme pada spesies Saprolegnia juga
mungkin terjadi pada tingkat spora oleh
perkembangan rambut yang panjang kaitannya untuk memudahkan
lampiran host. Perbedaan dalam jumlah
stramina morfologi dan fisiologis membentuk dan
hasil analisis filogenetik dari
Saprolegnia spesies berdasarkan ITS urutan rDNA
diamati. Itu semua menyebabkan masalah taksonomi dalam
Saprolegniales. Ada beberapa laporan tentang jamur sejati
sebagai agen infeksi utama spesies ikan dewasa dari
Genus Clarias dari benua Afrika (Easa et al.,
1984; Refai, 1987; Refai et al., 2010). Jamur terisolasi
spesies termasuk genera seperti: Aspergillus,
Fusarium, Mucor, Penicillum, Rhizopus, Scopulariopsis,
Paeciliomyces dan Curvularia. Ragi dari Candida,
Rhodotorula dan Torulopsis juga telah diisolasi. Itu
kebanyakan jamur dominan adalah spesies-spesies seperti:
Aspergillus flavus, spesies Fusarium dan Candida
albicans (Refai et al., 2010). Karena itu, di spesimen liar
C. gariepinus parasit ikan yang paling penting adalah
protozoa (Dykova, 2006), monogeneas (Buchmann
dan Bresciani, 2006) dan straminipiles - terutama dari
genus Saprolegnia. Menurut Refai et al. (2010)
Saprolegnia spesies diisolasi hanya dalam beberapa saat
spesies yang ditemui. Dalam spesimen bertani C.
gariepinus, terutama sindrom intensif yang pecah (RIS),
penyakit perut terbuka dan penyakit kepala yang patah
(BHD) telah terjadi (Chybowski, 2000). Formasi
cedera pada kedua penyakit mewakili infestasional
moncong untuk spesies mycotal patogen yang terjadi di air
mayat. Dalam biologi mycobiota, terutama di mereka
nutrisi, enzim yang mereka hasilkan memainkan peran penting
peran. Sebagian besar enzim tersebut sama untuk spesies
dari Achlya dan Saprolegnia genera, tetapi beberapa kelompok
enzim berbeda pada spesies tertentu (Denis, 1985). Di
spesies phytosaprotrophic, enzim dari
selulase dan kelompok pektinase, dikenal untuk memecah
dinding sel sayuran, mendominasi (Chamier, 1985), sementara dalam spesies zoosaprotrophic dan
parasit, proteolitik
enzim dari kelompok proteinase, yang terurai
sel-sel hewan, hadir (Izvekova, 1985). Lipase
dan fosfatase alkali telah ditemukan di miselium
Saprolegnia diclina yang diisolasi dari lembaran
Telur Salinalinus fontinalis (Rand dan Munden, 1992).
Dalam satu dan spesies straminipiles yang sama, tidak hanya
morfologis tetapi pertama-tama fisiologis dan
isolat biokimia yang hadir (Yuasa dan Hatai, 1994)
menyerap senyawa organik masing-masing (Griscenko
dan Rudikov, 1985). Strain tertentu ikan-patogenik
Saprolegnia menunjukkan aktivitas seperti chymotripsin dan ini
aktivitas enzimatik telah diklaim sebagai kemungkinan
faktor yang berkontribusi terhadap patogenesis saprolegniasis
(Peduzzi dan Bizzozero, 1977). Mempelajari parasit
crayfish - Aphanomyces astaci, spesies straminipiles
telah menunjukkan (Diéguz-Uribeondo et al., 1995) sebuah angka
tindakan morfologis, fisiologis dan biokimia
untuk beradaptasi dengan faktor lingkungan, yang menghasilkan beberapa
pergantian pada genom jamur (Huang et al., 1994).
Perubahan sifat yang sama mengarah pada produksi strain
virulensi bervariasi dalam satu spesies.
Seperti yang ditunjukkan, spesies yang diteliti dari Saprolegnia
dan genera Achlya telah berasimilasi paling banyak amino
asam, sedangkan jumlah terendah telah diasimilasi oleh
Spesies Pythium. Kedua spesies Pythium dan semua spesies
dari Achlya telah berasimilasi jumlah tertinggi
Karbohidrat (16 dan 14, masing-masing). Aphanomyces
spesies hanya berasimilasi glukosa dan pati. Sama
Fenomena telah diamati sebelumnya selama
penyelidikan spesies mycobiota pada telur
Spesies Oncorhynchus (Czeczuga et al., 2011b). Itu
spesies, dicatat pada telur C. gariepinus (milik
untuk Saprolegniales dan Leptomitales) telah diklasifikasikan
sebagai patogen oportunistik, yaitu sapro- dan
nekrotrofik (van West, 2006; Czeczuga et al., 2011). Di
hifa spesies oportunistik baik proteolitik (hewan)
dan enzim selulase / pektinase telah terjadi. Di
spesies phytosaprophitic, di mana urutan Pythiales
milik Peronosporales (Oomycota), enzim
yang dikenal untuk memecah dinding sel sayuran
mendominasi (Bodemann et al., 1985). Ini bisa menyarankan
bahwa spesies Pythium terjadi pada C. gariepinus
telur lebih disukai kebanyakan zat tanaman seperti
karbohidrat.
Studi kami saat ini telah membuktikan bahwa dibandingkan dengan
spesies ikan lainnya, telur C. gariepinus sangat
tahan (hanya 11,4% dari telur yang terinfeksi). Kami
investigasi yang telah dikhususkan untuk buatan
reproduksi ikan salmonid melaporkan
tingkat kematian telur yang cukup besar karena
Infeksi saprolegnia: hingga 29,4% di Salmo trutta m.
trutta (Czeczuga et al., 2005), 31,8% dari S. salar
(Czeczuga dkk., 2011a), hingga 27,1% di Oncorhynchus
gorbuscha (Czeczuga dkk., 2011b).
Pada ikan sturgeonid, kehilangan ini mencapai 70 hingga 90% dari semuanya
telur yang diinkubasi (Lartzeva, 1986). Kesuburan besar dari 5 x 103 hingga 193 x 103 telur (Skelton,
2002), resistensi yang lebih tinggi terhadap C. gariepinus oleh telur sebagai
serta toleransi yang luas terhadap lingkungan yang ekstrim
kondisi adalah faktor utama yang mendukung populasi
kepadatan C. gariepinus di badan air yang beragam.

PENGAKUAN
Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada pengulas anonim untuk
koreksi berharga dari naskah mereka.