Prinsip Dasar Spektroskopi UV-VIS

Panjang gelombang pada sinar uv adalah 200-400 nm. Sedangkan visible adalah 400-750 nm. Apabila
suatu sampel yaitu senyawa organic diberikan sinar uv-vis, maka sampel tersebut akan menyerap sinar
uv-vis tertentu dan akan terjadi transisi electron. Transisi electron terjadi dari keadaan dasar (tingkat
energy rendah) menuju keadaan tereksitasi ( tingkat energy yang lebih tinggi). Keadaan dasar suatu
molekul organik mengandung elektron-elektron valensi dalam tiga jenis utama orbital molekul, yaitu
orbital sigma (σ); orbital pi (∏); dan orbital elektron bebas (n). Baik orbital σ maupun orbital ∏ dibentuk
dari tumpang tindih dua orbital atom atau hibrid. Masing-masing orbital molekul ini mempunyai suatu
orbital σ* atau ∏* antiikatan yang berkaitan dengannya. Transisi-transisi elektron mencakup promosi
suatu elektron dari salah satu dari tiga keadaan dasar (σ; ∏; atau n) ke salah satu dari dua keadaan
eksitasi (σ* atau ∏*).

Kegunaan spektroskopi uv-vis dalam elusidasi struktur adalah menentukan transisi elektronik yang
terjadi sehingga kromofor dapat diketahui dan menentukan kadar senyawa tertentu berdasarkan
persamaan absorbansi A = ε . b . C

Prinsip dasar Spektroskopi IR

Jika senyawa organik dikenai sinar infra-merah yang mempunyai frekwensi tertentu (bilangan
gelombang 500 - 4000 Cm-1 atau panjang gelombang 750 – 2500 nm), maka ikatan yang terdapat dalam
senyawa tersebut akan mengalami vibrasi. Karena energy yang kecil, electron tidak dapat mengalami
eksitasi, hanya mengalami vibrasi. Vibrasi ini terjadi pada ikatan-ikatan kovalen sehingga momen
dipolnya tidak sama dengan 0. Energy yang digunakan untuk vibrasi pada masing-masing ikatan
berbeda. Hal ini yang akan muncul pada serapan spektroskopi inframerah.

Kegunaan spektroskopi inframerah dalam elusidasi adalah untuk mengidentifikasi gugus fungsi dari
suatu senyawa organic dengan daerah serapan 4000 – 1500 merupakan gugus fungsi utama, dan pada
daerah 1400 – 400 merupakan daerah sidik jari yang sangat identic pada masing-masing senyawa.