)
TERHADAP IMUNITAS DAN SINTASAN UDANG VANNAMEI
(Litopenaeus vannamei) YANG DIINFEKSI BAKTERI
Vibrio harveyi
SKRIPSI
Oleh:
ADDARUL UMAM
201210260311026
JURUSAN PERIKANAN
FAKULTAS PERTANIAN-PETERNAKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2017
1
iii
iv
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT yang telah memberikan
anugerah serta hidayah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan
skripsi dengan judul “Efektifitas Ekstrak Buah Mengkudu (Morinda citrifolia
L.) Terhadap Imunitas dan Sintasan Udang Vannamei (Litopenaeus
vannamei) yang Diinfeksi Bakteri Vibrio harveyi”.
Skripsi ini disusun dalam rangka memenuhi persyaratan untuk meraih gelar
sarjana di Fakultas Pertanian dan Peternakan Unversitas Muhammadiyah Malang.
Pada kesempatan ini penulis sampaikan rasa hormat dan terimakasih yang
sedalam-dalamnya kepada :
1) Bapak Dr. Ir. David Hermawan, MP, IPM selaku Dekan Fakultas
Pertanian -Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang.
2) Bapak Riza Rahman Hakim S.Pi, M.Sc. selaku Ketua Jurusan Perikanan
Fakultas Pertanian - Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang.
3) Ibu Drh. Sri Samsundari, MM dan Ibu Anis Zubaidah, S.Pi, M.Si selaku
Dosen pembimbing I dan Dosen Pembimbing II atas saran, koreksi dan
petunjuk. Serta yang sudah dengan sabar, meluangkan tenaga, pikiran
dan waktu dalam membimbing penulis sehingga laporan penelitian ini
dapat tersusun dengan baik.
4) Secara khusus penulis mengucapkan terima kasih kepada Ayah Madawi
tercinta dan Ibu Kunik tersayang yang telah membesarkan, mendidik
dan memberikan bekal hidup yang tak dapat ternilai, serta yang terus
memberikan semangat untuk menyelesaikan skripsi ini.
5) Kakak-kakaku tercinta Akhsanul Kholiqin, Ahmad Amil dan Afdholul
Jihad yang tak pernah lupa mengingatkan dan yang selalu memberi
dukungan semangat untuk penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
6) Bapak Arman Faries, S.Pi selaku Pembimbing Lapang Laboratorium
Kesehatan dan Lingkungan BPBAP Balai Perikanan Budidaya Air
Payau Situbondo atas bimbingannya dalam melaksanakan penelitian.
v
7) Saudara-saudaraku Perikanan angkatan 2012 khususnya Riandy
Darmawan, S.Pi, Muzakki Albab, S.Pi, Muhammad Akbar, S.Pi,
Muhammad Kelana, S.Pi, Yogatama Mustaf, S.Pi, Aji Cahyo Nugroho,
S.Pi dan yang lain yang tidak bisa penulis sebutkan satu persatu, di
mana telah banyak memberikan motivasi dan dukungan pada penulis
untuk tetap semangat dalam menyelesaikan laporan penelitian ini.
8) Kepada semua pihak yang telah membantu dan mendukung dalam
proses penulisan skripsi ini, yang tidak bisa penulis sebutkan satu per
satu.
Penulis menyadari bahwa hasil laporan skripsi ini tidak luput dari kesalahan
dan semua yang telah dicapai dan diwujudkan dalam skripsi ini masih jauh dari
kata sempurna. Oleh karena itu, untuk kritik dan saran yang membangun dari
semua pihak sangat membangun sangat penulis harapkan guna kesempurnaan
penyusunan laporan skripsi ini. Penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat
dalam memperkaya khasanah ilmu pengetahuan.
Malang, …...………...
Penulis
vi
DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................. ii
KATA PENGANTAR ...................................................................................... iv
DAFTAR ISI ..................................................................................................... vi
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ viii
DAFTAR TABEL ............................................................................................ ix
DAFTAR LAMPIRAN ……………………………………………………... x
RINGKASAN ................................................................................................... xi
SUMMARY ................................................................................................. xii
BAB I PENDAHULUAN .................................................................. …… 1
1.1 Latar Belakang ........................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ...................................................................... 2
1.3 Tujuan ........................................................................................ 3
1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................... 3
1.5 Hipotesa Penelitian..................................................................... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA. ................................................ ………… 4
2.1 Udang Vannamei (Litopenaeus vannamei) ................................ 4
2.1.1 Klasifikasi Udang Vannamei ............................................ 5
2.1.2 Morfologi Udang Vannamei ............................................ 6
2.1.3 Daur Hidup Udang Vannamei ........................................... 7
2.1.4 Habitat dan Kebiasaan Hidup............................................ 7
2.1.5 Makan dan Kebiasaan Makan ........................................... 8
2.2 Penyakit Vibriosis (Vibrio harveyi) ........................................... 9
2.2.1 Penyakit Vibriosis............................................................. 9
2.2.2 Bakteri Vibrio harveyi........................................................ 10
2.3 Mekanisme Pertahanan Udang................................................... 12
2.4 Buah Mengkudu (Morinda citrifolia L,)..................................... 13
2.4.1 Klasifikasi dan Morfologi Buah Mengkudu ..................... 14
2.4.2 Senyawa Fenol .................................................................. 17
2.4.3 Kandungan Antibakteri Ekstrak Buah Mengkudu ............ 18
2.5 Etanol ......................................................................................... 23
BAB III MATERI DAN METODE PENELITIAN .................. ………… 24
3.1 Waktu dan Tempat ..................................................................... 24
3.2 Materi Penelitian ........................................................................ 24
3.2.1 Alat .................................................................................... 24
3.2.2 Bahan ................................................................................ 25
3.3 Batasan Variabel ........................................................................ 25
3.4 Metode Penelitian....................................................................... 26
3.5 Rancangan Percobaan ................................................................ 26
3.6 Tahapan Penelitian ..................................................................... 28
3.6.1 Pembuatan Ekstrak Buah Mengkudu …………………... 28
3.6.2 Persiapan Hewan Uji ......................................................... 29
vii
3.6.3 Uji Tantang........................................................................ 29
3.6.3.1 Persiapan dan Kultur Bakteri Vibrio harveyi ........ 29
3.6.3.2 Uji Pengganasan Bakteri Vibrio Harveyi ………. 30
3.6.3.3 Persiapan Wadah Uji ………………………….… 31
3.6.4 Infeksi Bakteri dan Pengobatan Pada Hewan Uji ………. 31
3.7 Parameter Uji …………………………………………………. 31
3.7.1 Parameter Uji Utama …………………………………… 31
3.7.1.1 THC (Total Haemosite Count) ………………… 31
3.7.1.2 DHC (Differensial Haemosite Count) …………. 32
3.7.1.3 Gejala Klinis …………………………………… 33
3.7.2 Parameter Uji Penunjang................................................... 33
3.7.2.1 Kualitas Air …………………………………….. 33
3.7.2.2 Sintasan…………………………………………. 33
3.8 Analisis Data............................................................................... 34
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ……………………………… 35
4.1 Pembuatan Ekstrak Buah Mengkudu ........................ ………. 35
4.2 Persiapan Biakan Bakteri Vibrio harveyi ............................ … 38
4.3 Uji Tantang.......................................................................... … 39
4.3.1 Infeksi Bakteri Pada Udang Uji ................................ … 39
4.3.2 Pengobatan ............................................................... … 39
4.4 Pengamatan Darah Udang Vannamei (Hemolymph) .......... … 40
4.4.1 THC (Total Haemosite Count) ................................... … 41
4.4.2 DHC (Differensial Haemosite Count) ………………… 47
4.5 Sintasan (Survival Rate) …………………………………….. 55
4.6 Gejala Klinis ....................................................................... … 59
4.7 Kualitas Air ......................................................................... … 62
BAB V PENUTUP ................................................................................ … 65
5.1 Kesimpulan ......................................................................... … 65
5.2 Saran .................................................................................... … 65
DAFTAR PUSTAKA..................................................................................... 66
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1. Morfologi udang vannamei ……………………………………………… 6
2. Vibrio harveyi……………………………………………………………. 11
3. Buah mengkudu (Morinda citrifolia L.) ………………………………… 14
4. Denah percobaan ………………………………………………………… 28
5. a) Proses maserasi, dan
b) Proses penguapan etanol dengan rotary evaporator …………………. 36
6. Ekstrak buah mengkudu …………………………………………………. 36
7. Proses pengobatan secara deeping ………………………………………. 40
8. a) Proses pengambilan hemolim dan b) Pengamatan hemolim udang …... 42
9. Diagram batang Jumlah Total Hemosit udang vannamei ……………….. 43
10. Pengamatan Differensial Haemosite Count, meliputi Sel Granular, Sel
Semi Granular dan Sel Hyalin …………………………………………... 47
11. Diagram Batang Jumlah Sel Granular ………………………………….. 47
12. a) Proses pewarnaan DHC dan b) proses pengamata DHC ……………… 48
13. Diagram Batang Jumlah Sel Semi Granular………...………………….... 51
14. Diagram Batang Jumlah Sel Hyalin ……………………………………... 53
15. Diagram Batang Sintasan Udang Vannamei…………..…………………. 56
16. Gejala klinis udang vannamei yang terinfeksi bakteri Vibrio harveyi …... 61
17. Kondisi pemulihan morfologi udang pasca pengobatan ……………….... 62
viii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
1. Peralatan penelitian ................................................................................. 24
2. Bahan penelitian ...................................................................................... 25
3. Nilai rata-rata THC pada udang vannamei ……………………………. 41
4. Analisis uji BNT nilai THC udang vannamei ………………………… 44
5. Analisis sidik ragam nilai THC ……………………………………….. 44
6. Nilai Rata-rata Sel Granular Udang Vannamei …….….……………… 49
7. Analisis Sidik Ragam Sel Granular Udang Vannamei ..……………… 49
8. Uji BNT Sel Granular Udang Vannamei …………..…………………. 50
9. Nilai Rata-rata Sel Semi Granular ……………………………………. 50
10. Analisis Sidik Ragam Sel Semi Granular Udang Vannamei …..……... 51
11. Uji BNT Sel Semi Granular …………………….…………………….. 52
12. Nilai Rata-rata Sel Hyalin …………………………………………….. 52
13. Analisis Sidik Ragam Sel Hyalin pada Udang ………………………... 54
14. Uji BNT Sel Semi Granular……………………………........................ 54
15. Nilai rata-rata kelangsungan hidup udang vannamei …………………. 56
16. Analisa Sidik ragam sintasan udang vannamei ……………………….... 57
17. Uji BNT sintasan udang vannamei ………………………......................... 58
18. Gejala klinis udang vannamei pasca ijeksi bakteri dan pengobatan…… 59
19. Pengukuran kualitas air ………………………………………………... 62
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Analisa Statisik nilai Total Haemosite Count ........................................... … 73
2. Analisa Statistik Differensial Haemosite Count ....................................... … 77
3. Analisa Statistik Sintasan Udang Vannamei ............................................. … 88
4. Tahapan Penelitian .................................................................................... … 91
5. Data Kualitas Air Selama Penelitian ......................................................... … 96
x
DAFTAR PUSTAKA
Amri, K dan Kanna, I, 2008. Budidaya Udang Vaname: Secara Intensif, Semi
Intensif, dan Tradisional. PT Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Austin B. dan D.A.Austin. 2007. Bacterial Fish Pathogens. Disease in Farmed and
Wild Fish.Fourth edition. Ellis Horword limited, Chichester. Dalam
Jurnal Kelautan Tropis Desember 2015 Vol. 18(3):189–196 ISSN 0853-
7291.
Aziz, T., Febrisky, S., Mario, A.D., 201. Pengaruh Jenis Pelarut Terhadap Persen
Yiedalkaloid dari Daun Salam India (Moerya Koenigii). J. Tek. Kim. 20.
id.scribd.com/document/361374031/nia-fix.
66
Chan-Blanco, Y., F. Vaillantt, A.M. Perez, M. Reynes, Brillouet, Jean-Mare & P.
Brat., 2006. The noni fruit (Morinda citrifolia L): A review of
agricultural research, nutritional and therapiutic properties. J. Food
Composit. Anal. 19 : 645-654.
Chisolm, JRS dan Smith, 1995. Perbandingan akttivitas antibateri dalam hemosit
yang berbeda spesies Crustacea. Perbandingan Biokimia dan Fisiologi.
Diakses http://edepot.wur.nl/121288. Hal. 40.
Co, L.L. 1989. Common Medical Plant of the Cordillera Region (Northen Luzon,
Phillipines). Community Health Education, Services and Training in the
Cordillera Region (CHESTCORE), Baquo City.
Departemen Kesehatan RI. 1980. Materia Medika Indonesia. Jilid IV. Jakarta.
Dewi, N. 2012. Budidaya, Khasiat & Cara Olah Mengkudu Untuk Mengobati
Berbagai Penyakit. Yogyakarta :Penerbit Pustaka Baru Press.
Djauhariya, E., Raharjo M., dan Ma’mun. 2006. Karakteristik morfologi dan mutu
buah mengkudu. Buletin Plasma Nutfah, Vol.12, No. 1, Tahun 2006,
Balai Tanaman Obat dan Aromatik, Bogor, Halaman 6.
Effendie, M.I. 2002. Biologi Perikanan. Yayasan Pustaka Nusantama. 163 hal.
Ekawati W. A., Nursyam H., Widjayanto E., dan Marsoedi, 2012. Diaatomae
Chaetoceros ceratosporum Meningkatkan Respon Imun Penaeus
monodon Fab. Fakultas Kedokteran. Universitas Brawijaya.
67
Mitokondria Udang Windu Peneus monodon Fab. [Skripsi]. Fakultas
Perikanan dan Ilmu Kelautan. Universitas Brawijaya Malang.
Ghufron MH, Kordi AB & Tanjung B. 2007. Pengolahan kualitas air dalam
budidaya perairan. Rineka cipta. Jakarta.
Haliman, R.W. dan Adijaya, D.S. 2005. Udang Vannamei. Jakarta: Penebar
Swadaya.
Holt, J.G., and N.R. Krieg. 1984. Bergey’s Manual Of Sistematic Bacteriology.
Vol.1. The Williams and Wilkins Co. Baltimore.
Holt. G., Krieg, N.R., Sneath, P.H.A., Staenly, J.T. and Williams, S.T. 1994.
Bergeys’s manual of systematic bacteriology. Baltimore: Williamn and
Wilkins Baltimore.
Holt, J. G., P. H.A. Sneath, J.T. Staenly, and S.T. Williams. 1994. Klasifikasi dan
Gambar Bakteri Vibrio harveyi.
http://media.unpad.ac.id/thesis/23010/2009/230210090039_2_8579.pdf.
Kabata, Z. 1985. Parasites and Diseases of Fish Cultured in the Tropic. London :
Taylor dan Pancis.
Khopkar, S.M. (2003). Kimia Analisis. Jakarta : UI Press. Jakarta. Halaman 14.
68
Le Moullac G.L., Le Groumellec ML., Ansquer D., Froissard S., Levy P., dan
Aquacop. 1997. Haematological and phenoloxidase activity changes in
the shrimp Penaeus stylirostris in relation with the molt cycle: protection
against vibriosis. Fish Shellfish Immunol. 7: 227-234. Dalam J.Exp. Life
Sci. Vol. 2 No. 2, 2014 ISSN. 2087-2852 E-ISSN. 2338-1655.
Lavilla-Pitogo, C.R., Albright, L.J., Paner, M.G. and Sunaz, NA. 1990. Studies on
the Souece of Luminescent Vibrio harveyi in Penaeus monodon
Hatcheries. p157-146.
Manopo Henky dan Magdalena E.F. Kolopita 2014. Respon imun krustasea.
Review Artikel. Vo. 2 No. 2: 22-26.
Martin, G.G. and L.B. Graves. 1985. Structur and classification of shrimp
haemocytes. J. Morfology. 185:339-348.
Mulia, Dini Siswani., Arif Husin. 2013. Efektifitas Ekstrak Daun Sirih dalam
Menanggulangi Ikan Patin yang Terinfeksi Bakteri Aeromonas
hydrophila. [Skripsi]. Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
Purwokerto. 12 hlm.
Nelson, J. S. 2006. Fishes of the World. Fourth Edition. John Wiley and Sons.
Inc., New York, USA. 601 p.
Pelczar, M.J., E.C.S. Chan & N.R. Krieg. 1993. Microbiology. Concepts and
Applications. Mc. Graw-Hill, Inc. New York. P. 446-451.
http://journal.ipb.ac.id?index.php/jai.
Rethinam P., Chandha K.L., Peter P.I., Peter K.V., Singh B., Kadam S.S., 2007.
International Journal of Noni Research. World Noni Research
Foundation. 15. Daya Hambat Ekstrak Mengkudu.
69
http://adln.lib.unair.ac.id/files/disk1/534/gdlhub-gdl s 1 2013
wicaksonoa-26662-10.bab-2.pdf. Perpustakaan Universitas Airlangga.
Rukyani, A. 1996. Jenis Penyakit Udang dan Tambak dan Cara Pengendaliannya.
Makalah Pertemuan Aplikasi Paket Teknologi Pertanian, tgl 9 – 11
Januari 1996 di BIP Bandung. 17 hal.
Sahoo PK, Das A, Mohanty S, Mohanty BK, Pilai BR, Mohanty J. 2008. Dietary
β-1,3 glucan improve the immunity and disease resistance of freshwater
prawn Macrobrachium rosenbergii challenged with Aeromonas
hydrophila. Aquaculture 39: 1574-1578.
http://repository.ipb.ac.id/jspui/bitstream/123456789/61298/7/C12tnc.pdf
Sarida, M., Tarsim, dan Iwan F. 2010. Jurnal Penelitian Sains. Volume 13
no.3(D). 13313. Program Studi Budidaya Perairan. Fakultas Pertanian.
Universitas Lampung. Lampung. Indonesia.
Sarjito, N.E.W. Ningrum., O.K. Radjasa and S.B. Prayitno. 2012. Application of
Repetitive Sequence-Based PCR on the Richness of Vibrio on the Tiger
Shrimp (Panaeusmonodon Fab.). journal of Coastal Development. 15(3)
: 303-309.
70
Solomon, 1999. Kandungan Mengkudu.
http://media.unpad.ac.id/thesis/230110/2009/230110090062_2_6699.pdf.
Song YL, Yu CI, Lien TW, Huang CC, Lin MN. 2003. Hemolymph parameters of
Pacific white shrimp Litopenaeus vannamei infected with taura syndrome
virus. Fish Shellfish Immunology l14: 317–331. Sarmin et al. / Jurnal
Akuakultur Indonesia 12 (2), 122–128 (2013).
Tepu, 2006. Seleksi Bakteri probiotik untuk Biokontrol Vibriosis pada Larva
Udang Windu (Penaeus monodon) menggunakan cara kultur bersama.
Skripsi. Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu
Kelautan, IPB.
Syahailatua, D.Y. 2009. Seleksi Bakteri Probiotik sebagai Stimulator Sistem Imun
pada Udang Vaname (Litopaneus vannamei). Thesis. Sekolah
Pascasarjana. Institute Pertanian Bogor. Bogor, 58 p.
Van de Braak K., Faber F. and Boon J.H. 1996. Cellular and humoral
characteristisc of Penaeus monodon (Fabricius, 1798) haemolymph.
Comp. Haematol. Internat., 6: 194-203. Dalam J. Exp. Life Sci. Vol. 2
No. 1, 2012 ISSN.
71
2087-2852. Diatomae Chaetoceros ceratosporum Meningkatkan Respon
Imun Penaeus monodon Fab.
Wang, M.Y., B.J. Brest, C.J. Jensen, D. Nowicki,C. Su, A.K. Palu, and G.
Andersen. (2002). Morinda citrifolia (noni): A literature review and
recent advances in noni research. Acta Pharmacol. Sin. 23(12):1.127-
1.141.
Wyban J.A. and Sweeney J.N. 1991. Intensive Shrimp Production Technology.
The Ocean Institute Honolu, Hawai.
Yang, J., R. Gadi and T. Thomson. 2011. Antioxidant capacity, total phenol and
ascorbic acid content of noni (Morinda citrifolia) fruits and leaves at
various stages of maturnity. Micronesia 41: 167-176.
Zhang, X., C. Huang, and Proteotomics to Study White Spot Syndrome Virus. In:
Leung, K.Y(ed.). Current Trens in the Study of Bacterial an Viral Fish
and Shrimp Disease. World Scientific Publishing, Singapura, pp. 204-
234. Dalam Journal of Aquaculture Management and Technology
Volume 1, Nomor 1, Tahun 2013, Halaman 206-221 Online di :
http://ejournal-s1.undip.ac.id/index.php/jfpik.
72