PATOLOGI KLINIK

JUMLAH LEUKOSIT
(Jumlah Sel Darah Putih)

Jumlah leukosit adalah jumlah sel darah putih per Liter darah keseluruhan (Unit Sistem
Internasional) atau per ml darah utuh (Unit Konvensional).
Jumlah normal: 4 - 11 x 106 per Liter atau 4.000 - 11.000/ml.
Ada dua ggjjgfjkmetode untuk mengetahui jumlah sel darah putih, secara manual dan
elektronik. Akan tetapi, metode elektronik hanya umum digunakan di laboratorium besar. Jadi,
metode manual memiliki peran yang penting.

Metode Manual
Prinsip
Pengenceran darah dengan larutan asam, hemolyze sel darah merah, tetapi leukosit
masih utuh sehingga lebih mudah untuk menghitung.

Alat dan bahan:

Untuk mengencerkan, dapat digunakan salah satu cairan berikut:
1. Turk:
Asam asetat glasial 3 ml
Gentian violet 1% 1 ml
Aquadest 100 ml
2. HCL 1%
3. Asam asetat 2%
4. Pipet leukosit
5. Improved Neubauer chamber dengan kaca penutup
6. Mikroskop

Spesimen: darah kapiler atau darah keseluruhan, dengan menggunakan EDTA sebagai
antikoagulan.
Prosedur:
1. Pengencerandarah:
mengambil darah dengan pipet leukosit sampai tanda 0,5, jika darah diambil terlalu banyak,
bagian pipet yang dalam tidak menyerap bahan, misalnya nail atau plastik sampai darah
turun ke persis tanda 0,5. Bersihkan darah di bagian luar pipet dengan kapas kering atau
kain kasa. Memberi tandapada pengenceran cairan ke pipet untuk tanda 11 (pengenceran
1:20). Pegang pipet leukosit sehingga kedua ujung pipet pada ibu jari dan jari telunjuk
tangan kanan. Kocok selama sekitar 3 menit sampai semua eritrosit telah hemolyzed.
2. Bersihkan improved Neubauer dan kaca penutup dengan etanol 95%. Tempatkan kaca
penutup pada posisi.
3. Menghitung isi chamber:
Pegang ujung bawah dari pipet dengan jari telunjuk, mengeluarkan empat tetes pertama
dari campuran dan tempat ujung pipet yang di daerah pinggir memerintah
daripenghitungan chamber.
Isi chamber dengan tetesan kelima dan biarkan selama sekitar 3 menit sehingga leukosit
akan menetap dalam chamber.
Yang harus diperhatikan; terlalu banyak cairan dapat membanjiri ruang saluran, campuran
yang tidak cukup di ruang penghitungan dapat menyebabkan adanya gelembung udara atau
kotoran di ruangan.

Menghitung:
Tempatkan ruang pada tahap mikroskop, menggunakan perbesaran lemah (obyektif
10X). Memindai persegi empat bagian besar di sudut ruang dimana setiap persegi besar dibagi
menjadi 16 bagian persegi kecil.
 Jumlah sel darah putih pada keempat bagian ruangan persegi besar. Pada setiap
persegi, jumlah sel-sel hanya yang menyentuh kiri / garis bagian atas, mengabaikan yang
menyentuh kanan / sisi bawah luar margin.

Jumlah leukosit / ml = jumlah sel dihitung dalam empat bagian persegi besar X
pengenceran. Volume empat bagian persegi besar = 4 (1,0 x 1,0 x
0,1) ml = 0,4 ml.

Kemungkinan Kesalahan:
1. Instrumen:
a. kebersihan pipet atau pipet basah sehingga volume tidak akurat
b. ruang terkontaminasi kotoran atau berminyak dapat menyebabkan ketidakakuratan
dan kesulitan dalam menghitung sel darah putih
2. Teknik:
a. Volume darah yang tidak akurat, karena kotoran atau darah yang mengering di pipet
b. Kesalahan pengenceran
c. Kesalahan pada pengisian ruang penghitungan
d. Terdapat kesalahan sekitar 15% untuk WBC manual
e. Perhitungantertunda, sehingga cairan di ruang mulai menguap, menyebabkan
ketidakakuratan dalam hitungan
3. Spesimen:
a. Penurunan WBC:
Sedikit pengurangan darah dapat digunakan (mengambil darah untuk tanda 1)
b. WBC sangat tinggi, disarankan untuk melakukan pengenceran darah yang lebih banyak,
dapat digunakan pipet sel merah.
 JUMLAH DIFERENSIAL SEL DARAH PUTIH

Jumlah diferensial sel darah putih dilakukan untuk menentukan jumlah relatif setiap
jenis sel darah putih yang dalam darah. Pada saat yang sama, sebuah studi sel darah merah,
sel darah sel darah putih dan morfologi trombosit dilakukan. Perkiraan jumlah trombosit juga
dibuat.
Dari hapusan darah, kita juga dapat memperkirakan hemoglobin, serta ukuran, bentuk
dan struktur WBC.
Menghitung jenis WBC dilakukan pada apusan darah dengan menggunakan kaca slide
dengan pewarnaan khusus. Sehingga perlu untuk menjelaskan prosedur untuk membuat
smear, bagaimana cara pewarnaan dan bagaimana memeriksa serta melaporkan hasilnya.

Alat dan bahan:

1. Kaca slide dan penutup kaca
2. Aplikator stick
3. Rak pewarnaan
4. Pipet Pasteur
5. Pewarna Giemsa
6. Methanol
7. Minyak imersi

Spesimen:
Kapiler darah atau darah secara keseluruhan menggunakan EDTA sebagaiantikoagulan.

Prosedur:
1. Meneteskan setetes darah dengan diameter 2-3 mm sehingga menyentuh slide sekitar
1 cm dari ujung. Pegang slide dengan ibu jari dan jari telunjuk tangan kanan.
Menggunakan sisi lain, tempatkan spreaderhanya di depan tetesan darah pada sudut
30-45 derajat. Menarik spreader sampai menyentuh tetesan darah. Biarkan darah
menyebar sepanjang tepi spreader. Dorong spreader ke ujung slide dengan gerakan
 halus sampai semua darah telah menyebar ke lapisan tipis. Darah dari pasien dengan
anemia harus tersebar lebih cepat
2. Mengeringkan preparat
Slide harus cepat kering di udara dengan melambaikan slide atau dengan menggunakan
kipas listrik.
Pengeringan cukup penting untuk menjaga kualitas preparat, terutama di daerah yang
beriklim lembab. Tandai preparat kering dengan nama pasien atau nomor. Menulis
dengan pensil pada bagian tebal dari preparat yang tidak digunakan untuk
pemeriksaan.
3. Pewarnaan
Membersihkan preparat darah tipis dengan metanol selama 2-3 menit. Tutup slide
dengan pewarnaan Giemsa selama 30 menit. Mencucipewarnaandengan aliran air.
Setelah selesai dicuci dengan air dan preparat diberdirikan di rak pengeringan sampai
kering. Menggunakan perbesaran 100xdengan minyak emersi, periksa bahwa preparat
ini tidak terlalu tebal. Jika Anda melihat bahwa preparat semakin tebal (sel darah merah
yang sangat padat), berhenti bergerak menuju ujung depan; bergerak melintasi dan
kearah ujung preparat.
4. Teknik pemeriksaan
Tempatkan preparat darah pada mikroskop, menggunakan perbesaran rendah
(obyektif 10X).
a. Sel darah putih harus merata.
b. Perkirakan jumlah sel darah putih (jumlah WBC dengan jumlah RBC). Apakah sesuai
dengan hitungan WBC? Jika tidak, jumlah WBC harus diulang.
c. Periksa preparat darah dari atas ke bawah. Umumnya, sel-sel yang lebih besar
seperti monosit dan neutrofil terletak di bagian bawah. Sel-sel yang lebih kecil
seperti limfosit mendominasi di pusat atau bagian atas dari preparat darah.
d. Tuliskan kelainan sel.
e. Periksa preparat pada bagian di mana tidak ada tumpang tindih dari sel-sel merah,
meneteskan satu tetes minyak imersi, menggunakan perbesaran tinggi (objektif
100x).
5. Hitung berbagai bentuk leukosit per 100 WBC di lapangan sempit (gbr. 3) di strip
menjalankan seluruh panjang film. Melaporkan hasil sebagai persentase.
 Pada pasien dengan jumlah yang sangat tinggi (seperti pada leukemia) metode ini harus
ditinggalkan, dan sel-sel harus dihitung dalam area yang tersebar di mana mudah untuk
mengidentifikasijenis sel.
6. Hitung berbagai bentuk leukosit menggunakan instrumen diferensial sel counter. Jika
tidak ada instrumen tersebut, membuat baris sebagai berikut:

Kemungkinan Kesalahan:
1. Teknik blood smear
a. Tetesan darah terlalu besar atau terlalu kecil
b. Menggeserspreader slide secara tersentak-sentak
c. Kegagalan menjaga seluruh tepi slide spreadersaat melakukan smear
d. Kegagalan menjaga slide spreader pada sudut yang tepat dengan slide.
e. Kegagalan mendorong slide spreader sepenuhnya di slide.
f. Ketika terdapat udara pada blood smears, harus tetap tanpa penundaan, setiap
berlalunya waktu dapat menyebabkan morfologi eritrosit abnormal.
2. Pewarnaan
a. Rak pewarnaan harus tepat tingkatannya.
b. Pencucian yang tidak sempurna.
c. Pembilasan yang berlebihan akan menyebabkan pewarnaan memudar.
 TINGKAT LAJU PENGENDAPAN

Laju pengendapan eritrosit mengukur tingkat pengendapan sel darah merah dalam
plasma dan dilaporkan dalam mm/jam. Metode Westergren telah dipilih sebagai metode
standar oleh Komite Internasional untuk Standardisasi dalam Hematologi (ICSH).
LED ini dipengaruhi oleh tiga langkah: Langkah 1, pembentukan sel darah merah
(pembentukan rouleaux) dimana terdapat sedikit laju pengendapan. Langkah 2, laju
pengendapan lebih cepat dan konstan. Langkah 3, mengurangi laju pengendapan.

Metode Westergren'S
Normal: wanita 0-20 mm/jam, pria 0-15 mm/jam

Alat dan Bahan:

1. Pipet Westergren dan rak pipet Westergren
2. Larutan Natrium sitrat sebagai anticoagulant
Tri Natrium dihidrat 32.08 g
Aquadest 1.000 mL
Campurkan hingga mencair dan disaring. Jika disimpan pada suhu 4°C, campuran akan
stabil selama beberapa bulan.
3. Larutan Natrium klorida 0,85%
Spesimen:
Seluruh darah anticoagulated dengan Natrium sitrat 4: 1 (1,6 ml darah + 0,4 ml Na
sitrat) atau darah EDTA anticoagulated yang diencerkan dengan Natrium sitrat (4: 1), atau
darah EDTA anticoagulated yang diencerkan dengan Natrium sitrat0,85%.

Prosedur:
1. Campur spesimen sampai homogen
2. Bersihkan dan keringkan tabung Westergren
3. Isi pipet Westergren dengan tepat hingga tanda 0
4. Tempatkan pipet di rak dalam posisi vertikal dan jauhkan dari sinar matahari
5. Biarkan pipet berdiri selama sekitar 60 menit. Mencatat berapa banyak milimeter sel
darah merah telah jatuh.

WINTROBE'S METODE:
Normal: wanita 0-20 mm/jam dan laki-laki 0-9 mm/jam

Alat dan bahan:

1. Tabung Wintrobe dan rak pipet Wintrobe
2. Disposable kapiler pipet

Spesimen:
Seluruh darah menggunakan EDTA sebagai antikoagulan atau darah amonium
potasiumoksalat

Prosedur:
1. Campurkan spesimen dengan hati-hati sampai homogen
2. Dengan pipet Pasteur, mengisi tabung Wintrobe ke tanda 0
3. Tempatkan tabung di rak dalam posisi vertikal
4. Memungkinkan untuk berdiri selama sekitar 60 menit, dan mencatat tingkat column
eritrosit

Kemungkinan Kesalahan:
 1. Tidak mengisi tabung pengendapan dengan tepat hingga tanda 0. Hal yang harus
diperhatikan ketika membuat pembacaan akhir.
2. Jika konsentrasi antikoagulan lebih besar dari yang direkomendasikan, LED akan palsu
rendah.
3. Jika LED berdiri selama lebih dari 60 menit, hasilnya akan ditinggikan palsu.
4. Terjadi kenaikan (atau penurunan) pada suhu kamar menyebabkan peningkatan (atau
penurunan) hasil ESR.
5. Memiringkan tabung ESR meningkatkan laju pengendapan.
6. Gelembung dalam darah menyebabkan hasil yang tidak valid.
7. Gumpalan fibrin yang ada dalam darah membatalkan hasil tes.
8. ESR harus terbentuk dalam waktu 2 jam dari koleksi darah.
9. Hal yang harus diperhatikan dalam pengumpulan darah, menghindari pencampuran
dengan alkohol.
10. Cuci tabung dengan air, alkohol dan aseton. Hindari deterjen atau bichromic.

ANTI-STREPTOLYSIN O (ASO)

Pengantar
Infeksi diketahui oleh adanya infeksi streptokokus akut. Antibodi O Anti-streptolysin
diproduksi karena adanya streptolysin antigen O dikeluarkan oleh bakteri. Informasi tentang
tingkat dan derajat infeksi dapat diperoleh dari pengukuran kadar serum ASO. Peningkatan
tingkat ASO juga dikaitkan dengan demam rematik danglomerulonefritis.

Prinsip
Reagen ASO mengandung partikel lateks dilapisi dengan streptolysin 0 antigen. Ketika
reagen dicampur dengan serum ASO yang mengandung tingkat yang lebih besar dari 200 IU/ml
partikel akan mengaglutinasi.
Semikuantifikasi sampel ASO diencerkan rentang pengenceran dan masing-masing diuji
secara kualitatif. Tingkat ASO dapat diperkirakan dari pengenceran terakhir dengan terlihat
aglutinasi.
Preparasi sampel
Gunakan serum segar yang diperoleh dengan sentrifugasi darah beku. Sampel dapat
disimpan pada 2-8°C selama 48 jam sebelum melakukan tes. Untuk waktu yang cukup lama
serum harus dibekukan. Tolak setiap kontaminasi, lipaemic atau hemolysed sera. Hindari
fibrinogen plasma yang dapat menyebabkan aglutinasi spesifik.

Pereaksi:
1. Reagen Lateks: Sebuah suspensi berair lateks-partikel dilapisi dengan antigen
streptolysin O (1 tetes 50 ul)
2. Pengencer: glisin buffered saline pH 8,2
3. Positif kontrol: sebuah ASO stabil berisi cairan pada konsentrasi yang lebih besar dari
200 IU/ml.
4. Negatif kontrol: sebuah ASO stabil berisi cairan pada konsentrasi kurang dari 200 IU/ml.
Uji reagen
Semua pereaksi harus diperbolehkan untuk mencapai suhu ruang sebelum digunakan.
Jangan membekukan salah satu reagen.

Metode
1. Biarkan setiap komponen untuk mencapai suhu kamar.
2. Kocok perlahan reagen lateks untuk pembubaran partikel.
3. Tempat setetes sampel serum murni, satu tetes kontrol positif dan satu tetes kontrol
negatif ke lingkaran slide test menggunakan pipet pakai yang disediakan.
4. Tambahkan satu tetes reagen lateks di sebelah tetesan serum.
5. Menggunakan ujung pipet, yang tersebar di sampel reagen dan serum di seluruh area
lingkaran uji.
6. Perlahan miringkan slide uji belakang dan ke depan kira-kira sekali setiap dua detik
selama dua menit. Kontrol positif dan negatif harus disertakan pada interval teratur.
Keduanya siap digunakan dan tidak memerlukan cairan lebih lanjut. Pada akhir
pengujian bilas slide uji dengan air suling dan kering.
 Sampel Kontrol positif Kontol negatif

Sampel/kontrol 50 µL 50 µL 50 µL

Hasil:
Adanya aglutinasi yang menunjukkan tingkat ASO dalam sampel yang sama atau> 200
IU/ml.
Kurangnya aglutinasi (suspensi halus larutan homogen) menunjukkan tingkat, ASO
dalam sampel jika <200 IU/ml.

Interpretasi hasil:
Hasil positif mengindikasikan adanya infeksi streptokokus akut, dalam hal pengujian
harus diulangi pada interval mingguan untuk menentukan perkembangan infeksi.
Peningkatan kadar ASO juga telah ditemukan pada pasien yang menderita demam
berdarah, demam rematik akut, tonsilitis dan infeksi streptokokus lainnya sebagai
carriers sehat.
 PROTEIN C-REAKTIF (CRP) TEST LATEX

Protein C-reaktif (CRP) adalah reaktan fase akut digunakan sebagai indikator sensitivitas
untuk peradangan, infeksi, dan nekrosis jaringan.

Latar Belakang:
Reagen CRP terdiri dari partikel-partikel lateks dilapisi dengan antibodi CRP Anti-
Human. Ketika reagen dicampur dengan serum yang mengandung CRP, sebuah bentuk
mengaglutinasi jelas terlihat jika konten CRP lebih dari 6 mg/L. Hal ini dapat ditafsirkan sebagai
hasil positif. Reagen ini juga dapat digunakan untuk analisis semi-kuantitatif. Jumlah CRP dapat
ditentukan dari pengenceran tertinggi yang terjadi aglutinasi.

Spesimen:
Pengenceran serum. CRP stabil dalam serum selama tiga hari pada 15-25°C, selama enam
hari pada 2-8°C, atau enam bulan pada -20°C.

Reagen:
(Kit: Randox)
1. Pereaksi Lateks. Suspended partikel lateks biru dilapisi dengan antibodi CRP Anti-
Human (1 tetes 50 L).
2. Mengencerkan pelarut. Glycine buffer saline pH 8,2.
3. Kontrol positif. Pelarut stabil konsentrasi CRP 30 ± 6 mg/L (1 tetes 50 L).
4. Kontrol negatif. Pelarut stabil konsentrasi CRP kurang dari 6 mg/L (1 tetes 50 L).

Persiapan reagen:
Reagent dan kontrol siap untuk digunakan dan stabil sampai dengan kadaluarsa bila
disimpan pada 2-8°C. Sebelum menggunakan, membawa ke suhu kamar. Jangan simpan dalam
lemari es. Kocok Reagen lateks sebelum digunakan.

Arah:
1. Analisis Kualitatif
Tempatkan pada slide berikut:
sampel Kontrol negatif Kontrol positif

Teagen latex 50 µL tetes 50 µL tetes 50 µL tetes

Campurkan dan menyebarkan campuran di atas slide. Memutar slide dan memeriksa
aglutinasi setelah dua menit. Aglutinasi akan terjadi pada konsentrasi CRP yang lebih
tinggi dari 6 mg/L.
2. Analisis Semi-kuantitatif
Siapkan sampel yang akan diencerkan. Gunakan pelarut untukmengencerkan sesuai
dengan tabel berikut:
Pengenceran CRP (mg/L dalam sampel yang
dicairkan)

1+1 12

1 +2 18

1+3 24

1+4 30

1+5 36

1+6 42

Ect…

Membuat dan memeriksa serial pengenceran serum sampai aglutinasi tidak terjadi.
Jumlah CRP dapat ditentukan dari pengenceran tertinggi yang terjadi aglutinasi.
Gunakan perhitungan sebagai berikut:
CRP (mg/L) = pengencerantertinggi dengan hasil positif x sensitivitas reagen
pengenceran(6 mg/L)
Nilai normal dalam serum:
Dewasa: sampai 6 mg/L.

Sensitivitas:
Sensitivitas reagen lateks adalah 6 mg/L.

Spesifikasi:
Antiserum yang digunakan adalah mono-spesifik untuk Human CRP dan tidak akan
cross-bereaksi dengan serum protein lain. Sampel yang sangat lipemic atau hemolitic
dan memiliki konsentrasi ion deterjen yang tinggi dapat mempengaruhi hasil.
 TRANSUDATES DAN EKSUDAT

Paru-paru, jantung, dan organ-organ perut dikelilingi oleh selaput, tipis kontinyu,
serosa (membran viseral), seperti permukaan internal dari dinding rongga tubuh (membran
parietal). Ruang antara membran yang berlawanan diisi dengan sejumlah kecil cairan yang
berfungsi sebagai pelumas, yang memungkinkan gerakan bebas dari organ tertutup. Nama
Cairan serosa adalah istilah umum yang sering digunakan untuk menggambarkan cairan ini,
komposisi yang mirip dengan serum. Akumulasi cairan dalam rongga tubuh disebut efusi dan
menunjukkan suatu proses patologis.
Sebuah efusi, terutama dalam rongga pleura atau peritoneum, diklasifikasikan sebagai
baik transudate atau eksudat. Klasifikasi ini dapat didasarkan pada beberapa kriteria, termasuk
penampilan, jumlah leukosit, kadar protein total, kadar albumin dan konsentrasi kolesterol.
Namun, karena tumpang tindih antara kategori, tidak ada parameter tunggal yang
membedakan transudate dari seorang eksudat pada semua pasien (Krieg, 1991).
Mengelompokkan suatu efusi sebagai transudate atau eksudat ini penting karena
informasi ini membantu dokter dalam mengidentifikasi penyebabnya: penyakit sistemik yang
menyebabkan baik peningkatan tekanan hidrostatik atau penurunan tekanan plasma oncotic
di membran kapiler parietalis. Perubahan ini non-inflamasi dan ini sering berhubungan dengan
gagal jantung kongestif, sirosis hati, dan sindrom nefrotik (yaitu, hypoproteinemia). Setelah
efusi yang telah diidentifikasi sebagai suatu transudate, pengujian laboratorium lebih lanjut
biasanya tidak diperlukan.
Sebaliknya, eksudat hasil dari proses peradangan yang meningkatkan permeabilitas
kapiler endotelium pada selaput parietal, atau mengurangi penyerapan cairan oleh sistem
limfatik. Banyak proses penyakit seperti infeksi, kelainan neoplasma sistemik, trauma, atau
kondisi peradangan dapat menyebabkan eksudat. Eksudat memerlukan pengujian
laboratorium lebih dari transudat, seperti studi mikrobiologi untuk mengidentifikasi organisme
patologis atau, studi sitologi untuk mengevaluasi neoplasma ganas dicurigai.

Tujuan:
Untuk membedakan transudate dan eksudat.

Pemeriksaan fisik
Volume :
Kejelasan :Transudates biasanya cairan bening yang mempunyai viskositas mirip
dengan serum.
Eksudat biasanya berawan, dan mungkin memiliki shimmer atau kemilau
kepada mereka.
Warna : Transudates kuning pucat ke kuning.
Eksudat bervariasi dari kuning, hijau, merah muda sampai merah.
Pembekuan spontan: Transudate tidak mengandung fibrinogen, mereka tidak membeku
secara spontan. Eksudat sering mengandung fibrinogen, mereka
dapat membentuk bekuan, sehingga membutuhkan antikoagulan
ketika mereka dikumpulkan.

Pemeriksaan mikroskopis
Pemeriksaan mikroskopis meliputi total eritrosit dan jumlah leukosit, dan jumlah jenis
leukosit.
1. Jumlah Sel Darah Putih
Tujuan: untuk menentukan jumlah leukosit
Bahan:
Improved Naubauer counting chamber
Pipet Pasteur
Larutan Turk
Metode
1. Tutup ruang menghitung dengan penutup kaca yang disediakan.
2. Perlahan campurkan cairan, mengisi ruang dengan fluida.
3. Tidak diencerkan, jika cairan tersebut tampak jelas. Pengenceran jika muncul
berawan (membuat 1 dalam 20 pengenceran menggunakan 0,05 ml cairan dan
0,95 ml larutan Turk).
4. Meninggalkan ruang penghitungan selama 5 menit untuk memungkinkan sel untuk
menyelesaikan. Tempatkan ruang pada tahap mikroskop.
5. Memeriksa ruang hemacytometer mikroskopik untuk pemerataan sel tanpa
tumpang tindih atau menggumpal. Jika salah satu tumpang tindih atau menggumpal
 hadir, hemacytometer harus dibersihkan, spesimen dicampur dengan baik, dan
ruangan diisi ulang, atau pengenceran baru harus dibuat.
6. Menghitung semua sel yang terdapat dalam empat kotak sudut besar dan pusat
persegi.
Perhitungan:
Bila menggunakan hemacytometer ini, jumlah sel dihitung dikalikan dengan faktor
pengenceran (yang penting untuk setiap pengenceran yang dibuat sebelum mengisi ruang
terus bertambah) untuk mendapatkan jumlah sel yang ada di setiap L (atau mm3) cairan.
Angka ini dikalikan dengan faktor konversi untuk mendapatkan jumlah sel per liter cairan.
Terlepas dari jumlah kuadrat dihitung atau pengenceran digunakan, semua perhitungan
hemacytometer menggunakan rumus umum berikut:

Sel yang ada x faktor pengenceran x faktor volum = sel/L (mm3)

Untuk menghitung faktor volume, harus ditentukanvolume aktual cairan dihitung dalam
mm3 (L). Volume ini ditentukan dengan mengalikan luas dihitung dengan kedalaman (0,1
mm) antara kaca penutup dan ruang. Selanjutnya, faktor volume sama dengan 1 dibagi
dengan volume dihitung dalam mm3 (L)

Faktor volume = 1 / daerah x kedalaman

Misalnya, jika lima kotak besar yang dihitung (5 X 1 mm2), daerah tersebut adalah 5 mm2,
kedalaman adalah 0,1 mm, dan volume cairan dihitung adalah 0,5 mm3. Oleh karena itu
faktor volume 2, yaitu, 1 dibagi dengan 0,5.

2. Menghitung Diferensial leukosit

Tujuan: untuk menghitung persentase variasi leukosit di transudate atau eksudat
Prinsip: perbedaan morfologi leukosit dan kemampuan penyerapan tiap jenis leukosit
dengan pewarnaan
Peralatan:
mikroskop
kaca objek dan kaca penutup
sentrifuse
 tabung
pipet Pasteur
Sampel: transudate atau eksudat
Reagent: pewarnaan Giemsa
Metode:
1. centrifuge transudate/eksudat pada 2500 rpm selama 10 menit
2. mengambil sedimen dan teteskan pada objek kaca, membuat preparat smear, biarkan
kering pada suhu kamar
3. diwarnai dengan pewarnaan Giemsa (seperti saatmenghitung diferensial WBC)
4. dihitung dalam hitungan diferensial WBC.

3. Pemeriksaan kimia
Protein Kualitatif (Test Rivalta)
Tujuan: Membedakan antara transudate dan eksudat.
Prinsip: Penambahan asam asetat ke cairan akan menyebabkan protein menumpuk. Hal ini
dapat dilihat sebagai kekeruhan.
Alat:
pipet Pasteur
gelas 100 mL
Batang kaca
Reagent: asam asetat
Analisis bahan: transudate cair atau eksudat
Arah
1. Tuangkan 100 mL air suling ke dalam gelas 100 mL.
2. Tambahkan 1 tetes asam asetat, campurkan menggunakan pengaduk kaca.
3. Meneteskan 1 tetes cairan transudate/eksudat kedalam gelas dan 1 cm di permukaan.
4. Perhatikan apa yang terjadi sebagai mengental menjadi cair dan berkabut dengan
menempatkan secarik kertas hitam di belakang gelas.
5. Jika tidak keruh (berkabut), ulangi.
Analisa
Jika keruh : eksudat
Jika tidak keruh : Transudate
Laporan: Transudate atau eksudat
Mengatasi masalah: Penggunaan terlalu banyak tetes (lebih dari 1 cm di permukaan).