i

PENGARUH PEMBERIAN MINYAK IKAN NILA (Oreochromis nilotikus)

TERHADAP KADAR LDL DAN HDL PADA TIKUS JANTAN
GALUR WISTAR HIPERLIPIDEMIA

Oleh

M Dwi Cahyanto
18123534A

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SETIA BUDI
SURAKARTA
2016

i
 i

PENGARUH PEMBERIAN MINYAK IKAN NILA (Oreochromis nilotikus)

TERHADAP KADAR LDL DAN HDL PADA TIKUS JANTAN GALUR
WISTAR HIPERLIPIDEMIA

SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
Derajat Sarjana Farmasi (S. Farm.)
Program Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Setia Budi

Oleh :

M Dwi Cahyanto
NIM . 18123534A

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SETIA BUDI
SURAKARTA
2016

i
ii
 PERNYATAAN

Saya menyatakan bahwa skripsi ini adalah hasil pekerjaan saya sendiri dan

tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di

suatu Perguruan Tinggi dan sepanjang pengetahuan saya tidak terdapat karya atau

pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali secara tertulis

diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Apabila skripsi ini merupakan jiplakan dari penelitian/karya ilmiah/skripsi

orang lain, maka saya siap menerima sanksi, baik secara akademis maupun hukum.

Surakarta 14 Juni 2016

M Dwi Cahyanto

iii
 MOTTO DAN PERSEMBAHAN

“DAN ALLAH TIDAK MENJADIKAN PEMBERIAN BALA

BANTUAN ITU MELAINKAN SEBAGAI KHABAR
GEMBIRA BAGI (KEMENANGAN)MU, DAN AGAR
TENTRAM HATIMU KARENANYA. DAN KEMENANGAN
ITU HANYALAH DARI SISI ALLAH YANG MAHA
PERKASA LAGI MAHA BIJAKSANA ”
(QS. 3:126)

Skripsi ini saya persembahkan kepada :

1. Allah SWT.
2. Seluruh keluargaku orang tua, dan kedua
saudaraku, Arief, Kurnia.
3. Teman-teman seperjuangan dalam menyusun
skripsi ini.
4. Almamater, Bangsa dan Negaraku tercinta.

iv
 KATA PENGANTAR

Segala puji dan syukur kehadirat Allah SWT atas berkat dan rahmat-Nya
sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini untuk memenuhi persyaratan guna
mencapai gelar Sarjana dalam Ilmu Farmasi pada Universitas Setia Budi Surakarta.
Skripsi ini dalam penyusunannya peulis memilih judul “PENGARUH
PEMBERIAN MINYAK IKAN NILA (Oreochromis nilotikus) TERHADAP
KADAR LDL DAN HDL PADA TIKUS JANTAN GALUR WISTAR
HIPERLIPIDEMIA”

Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini telah mendapat

banyak bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu penulis menyampaikan terima
kasih sebesar-besarnya kepada :

1. Dr.Djoni Tarigan,MBA., selaku rektor Universitas Setia Budi Surakarta.

2. Prof. Dr. R.A. Oetari, SU., MM., M.sc., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Setia Budi Surakarta.
3. Ibu Dra. Suhartinah, M.Sc., Apt selaku pembimbing utama yang telah
memberikan bimbingan, petunjuk, nasehat dan saran kepada penulis selama
penelitian dan penulisan skripsi ini.
4. Ibu Vivin Nopiyanti ,M.Sc., Apt selaku pembimbing pendamping yang
memberikan tuntunan, bimbingan, nasehat dan saran kepada penulis selama
penelitian ini berlangsung.
5. Ibu Dwi Ningsih, M.Farm., Apt selaku penguji pertama yang telah meluangkan
waktunya untuk menguji penulis dan memberikan masukan untuk
menyempurnakan skripsi ini.
6. Ibu Dra. Lina Susanti., M.Si selaku penguji kedua yang telah meluangkan
waktunya untuk menguji penulis dan memberikan masukan untuk
menyempurnakan skripsi ini.
7. Bapak Sigit dan segenap karyawan Laboratorium yang telah membimbing dan
membantu saat praktikum skripsi ini, serta Segenap Dosen, Staf, Karyawan dan
karyawati Universitas Setia Budi Surakarta.

v
8. Bapak, ibu, saudara dan saudariku tercinta terima kasih banyak atas seluruh
cinta, kepercayaan, doa, kasih sayang dukungan baik material dan spiritualnya
selama ini.
9. Sahabat terbaik dan terdekat (Gatot, Wawan, Dennis, Indri) yang selalu ada di
saat senang maupun susah dan teman terkasih Ria, Dea, Novi, Aziz dan Wian
yang selalu membantu.
10. Semua pihak yang telah membantu dalam penyelesaian skripsi ini yang tidak
dapat penulis sebutkan satu per satu.

Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini masih banyak sekali

kekurangan dan kelemahan. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran
yang membangun. Kiranya skripsi ini memberikan manfaat yang positif untuk
perkembangan Ilmu Farmasi dan almamater tercinta.

Surakarta, 14 Juni 2016

M Dwi Cahyanto

vi
 DAFTAR ISI
Halaman
HALAM JUDUL .................................................................................................... i
LEMBAR PENGESAHAN .................................................................................... ii
HALAMAN PERNYATAAN .............................................................................. iii
MOTO DAN PERSEMBAHAN .......................................................................... iv
KATA PENGANTAR ............................................................................................v
DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii
DAFTAR GAMBAR ...............................................................................................x
DAFTAR TABEL .................................................................................................. xi
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xii
INTISARI ............................................................................................................ xiv
ABSTRAK ............................................................................................................xv
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................................1
A. Latar Belakang .............................................................................................1
B. Rumusan Masalah ........................................................................................4
C. Tujuan ..........................................................................................................4
D. Kgunaan .......................................................................................................5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA..............................................................................6
A. Sistematika Hewan uji..................................................................................6
1. Sistematika hewan ..................................................................................6
2. Habitat ...................................................................................................7
3. Deskripsi ..............................................................................................7
4. Syarat hidup ..........................................................................................8
5. Morfologi ..............................................................................................8
B. Kandungan Ikan Nila ...................................................................................9
C. Minyak Dan Lemak .....................................................................................9
D. Ekstraksi Minyak .......................................................................................10
1. Rendering ............................................................................................10
2. Pengepresan..........................................................................................10
E. Pemurnian Minyak Ikan .............................................................................11
1. Pemisahan dan pengendapan................................................................11
2. Netralisasi dengan alkali ......................................................................11
3. Pemucatan ...........................................................................................11

vii
 4. Penghilangan bau dan lemak ...............................................................11
F. Minyak Ikan ...............................................................................................12
G. Manfaat Asam Lemak Omega-3 ................................................................12
H. Lemak .........................................................................................................13
1. Fraksi Lemak darah ..............................................................................13
1.1. Kilomikron ...................................................................................14
1.2. Lipoprotein densitas sangat rendah (VLDL) ...............................14
1.3. Lipoprotein densitas sedang (IDL) ...............................................14
1.4. Lipoprotein densitas rendah (LDL) ...............................................14
1.5. Lipoprotein densitas tinggi (HDL) ................................................14
I. Hiperlipidemia............................................................................................15
1. Pengertian hiperlipideia .......................................................................15
2. HDL (High Density Lipoprotein) ........................................................15
3. LDL (Low Density Lipoprotein) .........................................................16
4. Atheroskelrosis ....................................................................................16
J. Obat Hiperkolesterolemia ..........................................................................17
1. Niasin ...................................................................................................17
2. Statin ....................................................................................................17
3. Golongan asam fibrat ..........................................................................18
K. Metode pemeriksaan HDL dan LDL..........................................................19
L. Hewan Uji ..................................................................................................20
1. Sistematika tikus putih .........................................................................20
2. Karakteristik hewan uji ........................................................................20
3. Biologi tikus putih ...............................................................................21
M. Landan Teori ..............................................................................................21
N. Hipotesis ....................................................................................................23
BAB III METODE PENELITIAN.........................................................................24
A. Populasi Dan Sampel .................................................................................24
1. Populasi ................................................................................................24
2. Sampel .................................................................................................24
B. Variabel Penelitian .....................................................................................24
1. Identifikasi variabel utama ...................................................................24
2. Klasifikasi variabel utama ....................................................................25
3. Devenisi operasional utama .................................................................25
C. Alat Dan Bahan ..........................................................................................26
1. Alat .......................................................................................................26
2. Bahan ...................................................................................................26
D. Jalannya Penelitian .....................................................................................27
1. Pengambilan sampel ............................................................................27
2. Determinasi ikan nila ...........................................................................27
3. Pengambilan dan pembuatan minyak ikan nila....................................27
4. Penetapan indeks bias ..........................................................................28

viii
 5. Penetapan berat jenis ...........................................................................29
6. Analisa rendemen minyak ikan ...........................................................30
7. Penetapan dosis ....................................................................................30
8. Pembuatan pakan diet tinggi lemak .....................................................31
9. Persiapan hewan uji..............................................................................31
10. Perlakuan hewan uji .............................................................................31
11. Penentuan kadar HDL dan LDL ..........................................................32
E. Analisa Data ...............................................................................................33
F. Jadwal kegiatan ..........................................................................................34
BAB IV ...........................................................................................................35
A. Hasil dan pembahasan ...............................................................................35
1. Hasil determinasi ikan nila (Oreochromis niloticu) .............................35
2. Pembuatan minyak ikan nila (Oreochromis niloticu) ..........................35
3. Penentuan indeks bias ..........................................................................36
4. Penetapan berat jenis ...........................................................................36
5. Hasil identifikasi kandungan kimia minyak ikan nila .........................37
6. Pembuatan dosis ..................................................................................38
6.1.Dosis pemberian simvastatin .........................................................38
6.2.Dosis pemberian minyak ikan .......................................................38
6.3.Dosis pemberian diet tinggi lemak ................................................39
B. Hasil penetapan kadar HDL dan LDL .......................................................40
1. Hasil rata-rata penurunan kadar LDL .................................................40
BAB V ...................................................................................................................50
A. Kesimpulan ...............................................................................................50
B. Saran ..........................................................................................................50

ix
 DAFTAR GAMBAR

1. Oreochromis niloticus ......................................................................................6

2. Skema pembuatan minyak ikan nila ..............................................................27

3. Skema perlakuan hewan uji ............................................................................33

4. Grafik hubungan antara kadar LDL dengan waktu ........................................41

5. Grafik hubungan antara kadar HDL dengan waktu .......................................45

x
 DAFTAR TABEL
Halaman

1. Tabel 1. Kadar High Density Lipoprotein ........................................................16

2. Tabel 2. Kadar Low Density Lipoprotein .........................................................16

3. Tabel 3. Hasil perhitungan rendemen ...............................................................36

4. Tabel 4. Hasil analisis indeks bias ...................................................................37

5. Tabel 5. Hasil analisi penetapan berat jenis .....................................................37

6. Tabel 6. Hasil identifikasi kandungan kimia ikan nila .....................................37

7. Tabel 7. Rata-rata penurunan kadar LDL .........................................................40

8. Tabel 8. Rata-rata kadar HDL ..........................................................................44

xi
 DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

1. Surat determinasi ikan nila ................................................................................. 55

2. Surat keterangan hewan uji ................................................................................ 56

3. Ikan nila dan inyak ikan nila .............................................................................. 57

4. Alat dan bahan pembuatan minyak ikan ............................................................ 58

5. Alat penguji berat jenis dan indeks bias ............................................................. 59

6. Hasil pemeriksaan indeks bias ........................................................................... 60

7. Larutan stok sedian uji ....................................................................................... 61

8. Alat fotometer stardust dan reahen HDL dan LDL ............................................. 62

9. Kandang hewan uji, jaarum oral, pipa kapiler ................................................... 63

10. Pemberian sedian oral dan pengambilan darah .................................................. 64

11. Perhitungan rendemen minyak ikan nila ............................................................ 65

12. Perhitungan dosis ............................................................................................... 66

a. Perhitungan dosis PGA 0,5% ...................................................................... 66

b. Perhitungan dosis simvastatin ..................................................................... 66

1. minyak ikan nila dosis I 0,8 ml/200 g BB ........................................................... 67

2. minyak ikan nila dosis II 1,6 ml/200 g BB ......................................................... 68

3. minyak ikan nila dosis III 3,2 ml/200 g BB ........................................................ 68

a. Perhitungan pemberian emulsi minyak babi ............................................... 68

13. Perhitungan indeks bias minyak ikan ................................................................. 71

14. Perhitungan berat jenis minyak ikan .................................................................. 72

15. Data rata-rata kadar HDL kelompok perlakuan ................................................. 74

xii
16. Data rata-rata kadar LDL kelompok perlakuan ................................................. 75

17. Data penimbangan berat badan tikus ................................................................ 76

18. SPSS kadar LDL T2 ........................................................................................... 77

19. SPSS kadar HDL T2 ........................................................................................... 80

20. Hasil analisis kandungan kimia minyak ikan nila .............................................. 83

xiii
 INTISARI

CAHYANTO, D.M., 2016, PENGARUH PEMBERIAN MINYAK IKAN NILA

(Oreochromis nilotikus) TERHADAP KADAR HDL DAN LDL PADA TIKUS
HIPERLIPIDEMIA, SKRIPSI, FAKULTAS FARMASI, UNIVERSITAS SETIA
BUDI, SURAKARTA.

Hiperkolesterolemia merupakan keadaan dimana terjadi peningkatan kadar

kolesterol di dalam darah, meningkatnya kadar kolesterol akan disertai dengan
peningkatan kadar LDL dalam darah yang dapat memicu terjadinya berbagai
penyakit seperti jantung koroner dan stroke. Minyak ikan dikenal memiliki banyak
manfaat karena kandungan asam lemak tak jenuhnya, diantaranya dalam
menurunkan kolesterol. Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui pengaruh
minyak ikan nila (Oreochromis nilotikus) terhadap kadar LDL dan HDL serta dosis
efektif dalam menurunkan kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL pada tikus
hiperlipidemia.
Tiga puluh ekor tikus dibagi menjadi 6 kelompok. Kelompok 1 (kontrol
normal) tanpa perlakuan, kelompok II (kontrol negatif) diberi PGA 0.5%, kelompok
III (kontrol positif) diberi dosis simvastatin 0,36 mg/200gBB, kelompok IV, V dan
VI diberi dosis perlakuan miyak ikan 0.8 ml ; 1.6 ml ; dan 3.2 ml/200gBB. Tikus
diberi perlakuan selama 21 hari dengan rentang waktu hari ke-0 sebelum perlakuan,
hari ke-14 setelah pemberian diet tinggi lemak dan hari ke-21 setelah pemberian
dosis minyak ikan, sampel darah diambil melalui vena mata, kadar LDL dan HDL
diuji dengan ANOVA dengan uji lanjutan Post Hoc test.
Hasil penelitian menunjukkan pemberian minyak ikan nila pada dosis 3.2
ml/200gBB berpengaruh terhadap kadar HDL dan LDL pada tikus hiperlipidemia
tetapi kurang efektif jika dibandingkan dengan konterol positif simvastatin di mana
persentase peningkatan dan penurunannya tidak lebih dari 50%.

Kata kunci : hiperkolesterolemia, Oreochromis nilotikus, kadar LDL dan HDL,

minyak ikan.

xiv
 ABSTRAK

CAHYANTO, D.M., 2016, THE EFFECT OF TILAPIA FISH OIL (Oreochromis

nilotikus) ON HDL AND LDL LEVELS IN MOUSE HYPERLIPIDEMIA,
THESIS, FACULTY OF PHARMACY, SETIA BUDI UNIVERSITY,
SURAKARTA.

Hypercholesterolemia is a condition where an increase in cholesterol levels

in the blood, increased cholesterol levels will be accompanied by elevated levels of
LDL in the blood which can lead to various diseases such as coronary heart disease
and stroke. Fish oil is known to have many benefits due to the content of unsaturated
fatty acids, including cholesterol-lowering. The purpose of this study was to
determine the effect of tilapia fish oil (Oreochromis nilotikus) on levels of LDL
and HDL and also the dose is effective in lowering LDL levels and increasing HDL
levels in mice with hyperlipidemia.
Thirty mice were divided into 6 groups. Group 1 (normal control) without
treatment, group II (negative control) were given PGA 0.5%, Group III (positive
control) were given doses of simvastatin 0,36/200gBW, group IV, V and VI were
given a dose of 0.8 ml fish oil treatment; 1.6 ml ; and 3.2 ml / 200gBW. Mice were
treated for 21 days with a span of days 0 before treatment, the 14th day after the
administration of high-fat diet and the 21st day after the administration of doses of
fish oil, blood samples were taken through a vein eyes, levels of LDL and HDL
were tested by ANOVA continued Post Hoc test.
The results showed tilapia fish oil at dose of 3.2 ml / 200gBW effected on
HDL and LDL cholesterol levels in rats with hyperlipidemia but was less effective
if compared with simvastatin positive control where the percentage increasing or
decline was no more than 50%.

Keywords: hypercholesterolemia, Oreochromis niloticus, LDL and HDL levels,

fish oil

xv
 1

BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang
Hiperkolesterolemia adalah peningkatan kadar kolesterol di dalam darah di

atas batas normal. Kadar kolesterol darah yang tinggi merupakan problema yang

serius karena merupakan salah satu faktor resiko yang paling utama untuk

terjadinya penyakit jantung koroner (Anwar 2003). Kolesterol sendiri merupakan

suatu senyawa lemak yang lunak seperti lilin, sebagaian besar kebutuhan kolesterol

tubuh dibuat oleh hati, tetapi kolesterol tambahan juga didapatkan dari makanan

seperti telur, daging, ayam, makanan laut dan susu. Dalam kondisi normal

kolesterol di dalam darah dijadikan sebagai sumber energi dan digunakan untuk

pembentuk dinding sel dalam tubuh (Ruslianti 2014).

Kadar kolesterol dikatakan normal jika di dalam darah kurang dari 150

mg/dl, kelibihan kolesterol dalam kurun waktu lama dapat memicu penumpukan

lemak di bawah kulit yang nantinya dapat memicu peningkatan kadar LDL (Low

Density Lipoprotein) di dalam tubuh. Kadar LDL (Low Density Lipoprotein) yang

berlebihan di dalam tubuh juga tidak baik karena dapat menyebabkan penyumbatan

pembuluh darah yang dapat mengganggu proses aliran darah ke jaringan, hal

tersebut dapat memicu timbulnya berbagai penyakit dalam tubuh seperti jantung

koroner dan stroke (Nadesul 2006).

Kadar normal LDL di dalam darah dikatakan normal bila tidak lebih dari

130 mg/dl, dikatakan waspada bila kadar LDL dalam darah mencapai 130-159

mg/dl. Kolesterol tinggi dalam darah dapat diatasi dengan cara berolahraga,

menurunkan berat badan, membatasi porsi konsumsi makanan berlemak dan porsi

1
 2

makan, mengurangi konsumsi daging merah (babi, sapi, kerbau, dan kambing) atau

dengan obat obatan penurun kolesterol Nadesul (2009). Namun pengunaan obat –

obatan dalam jangka panjang dilaporkan mempunyai efek samping yang tinggi

sehingga masyarakat memanfaatkan herbal untuk mengobati penyakit gangguan

metaboik tersebut (Kasper et all 2005).

Penggunaan obat tradisional dari kekayaan alam dapat pula dimanfaatkan

dalam mengurangi hiperkolesterolemia seperti mengonsumsi makanan yang kaya

akan asam amino esensial seperti yang terdapat pada ikan. Ikan banyak

mengandung zat yang diperlukan oleh tubuh dibandingkan dengan makanan lain,

sehingga dapat dikatakan mutu protein ikan sebanding dengan mutu protein daging

Astawan (2004). Ikan juga diketahui dapat menurunkan kadar kolesterol darah,

menurunkan kadar trigliserida darah, meningkatkan kecerdasan anak dan

meningkatkan kemampuan anak dalam belajar, menurunkan risiko kematian karena

penyakit jantung, mengurangi gejala rematik, menurunkan aktivitas pertumbuhan

sel kanker dan juga mengandung omega 3 dan omega 6 (Pandit 2008).

Selain daging ikan sendiri minyak ikan juga memiliki banyak manfaat.

Minyak ikan merupakan komponen lemak yang terdapat dalam jaringan tubuh ikan

yang diekstraksi ke dalam bentuk minyak. Minyak ikan berbeda dengan minyak

lain karena memiliki jenis asam lemak yang lebih beragam (Estiasih 2009). Minyak

ikan merupakan asupan minyak esensial yang mengandung banyak nutrisi penting

yang dibutuhkan oleh tubuh manusia.

Minyak ikan pada umumnya mengandung asam lemak omega-3 (ω-3) Poly

Unsaturated Fatty Acid (PUFA) yang terdiri dari EPA (eikosapentaenoat) dan
 3

DHA (dokosaheksaenoat). Asam lemak DHA merupakan asam lemak

paling banyak yang terdapat dalam otak mamalia. Kadarnya dalam lipid membran

dipengaruhi oleh jumlah asam lemak dalam makanan yang kita konsumsi, kadarnya

akan tinggi dalam masa pertumbuhan dan akan menurun pada masa penuaan

(Muchtadi 2011).

Menurut penelitian yang dilakukan Kurniawan (2013). Komponen asam

lemak pada ikan nila terdiri dari asam lemak jenuh dan asam lemak tak jenuh.

Asam lemak jenuh terdiri dari Asam tetradekanoat metil ester (15:0), Asam

heksadekanoat metil ester (17:0), Asam oktadekanoat metil ester (19:0). Asam

lemak tak jenuh terdiri dari Asam 9,12,15-oktadekatrienoat metil ester (19:3,ω-3),

Asam 5,8,11,14,17-eikosapentaenoat metil ester (21:5,ω-3), Asam 4,7,10,13,16,19-

dokosaheksaenoat metil ester (23:6,ω-3), Asam cis-5,8,11,14,17-eikosapentaenoat

metil ester (21:5,ω-3), Asam 5,8,11,14-eikosa tetraenoat metil ester (21:4,ω-6),

Asam 9,12-oktadekadienoat metil ester (19:2,ω-6), Asam 9,12-oktadekadienoat

(Z,Z) metil ester (19:2,ω-6), Asam 9-oktadesenoat metil ester (19:1,ω-9), Asam 9-

oktadesenoat (Z) metil ester (19:1,ω-9) dan Asam 9-heksadesenoat metil ester

(17:1,ω-7).

Menurut Syarif (2011). Konsumsi omega-3 bermanfaat untuk penderita

tekanan darah tinggi (hipertensi), aterosklerosis dan arthritis. Asam lemak omega-

3 dalam bentuk EPA (Eicosa Pentanoic Acid) dan DHA (Docosa Hexanoic Acid)

pada dosis 3-4 g/hari 4 ditemukan dapat memberikan efek terhadap penurunan

kadar trigliserid (TG). Berdasarkan ulasan tersebut minyak ikan memiliki banyak

manfaat guna menunjang kesehatan masyarakat, sehingga memicu peneliti untuk

 4

mengetahui efek pemberian minyak ikan nila terhadap penurunan kadar LDL (Low

Density Lipoprotein) dan peningkatkan kadar HDL (High Density Lipoprotein)

pada tikus putih yang diinduksi hiperlipid dengan cara pemberian pakan tinggi

lemak.

B. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang masalah tersebut, maka dapat dirumuskan

permasalahan dalam penelitian sebagai berikut:

Pertama, apakah pemberian minyak ikan nila (Oreochromis niloticus)

berpengaruh pada kadar LDL (Low Density Lipoprotein) dan HDL (High Density

Lipoprotein) pada tikus putih hiperlipidemia.

Kedua, berapakah dosis yang efektif dalam menurunkan kadar LDL (Low

Density Lipoprotein) dan meningkatkan kadar HDL (High Density Lipoprotein)

pada tikus hiperlipidemia.

C. Tujuan

Berdasarkan proposal yang telah disusun maka penelitian ini bertujuan

sebagai berikut :

Pertama, untuk mengetahui pengaruh pemberian minyak ikan nila

(Oreochromis niloticus) pada kadar LDL (Low Density Lipoprotein) dan HDL

(High Density Lipoprotein) pada tikus putih hiperlipidemia.

 5

Kedua, untuk mengetahui dosis minyak ikan yang efektif dalam menurunkan

kadar LDL (Low Density Lipoprotein) dan meningkatkan kadar HDL (High Density

Lipoprotein) pada tikus hiperlipidemia.

D. Kegunaan Penelitian

Hasil penelitian diharapkan agar dapat menjadi sumber informasi terbaru

tentang manfaat ikan nila (Oreochromis nilotikus) pada mutu kesehatan

masyarakat. Dan dapat digunakan sebagai acuan akan penelitian selanjutnya

sehingga dapat digunakan sebagai penunjang ilmu pengetahuan.

 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

A. Sistematika Hewan Uji

Gambar 1. Oreochromis niloticus

(Sumber: Dinas Kelautan dan Perikanan DIY 2014)

1. Sistematika hewan

Menurut Zipcodezoo (2013) kedudukan hewan ikan nila dalam sistematika

hewan sebagai berikut :

Kingdom : Animalia

Filum : Chordata

Sub filum : Vertebrata

Kelas : Actinopterygii

Ordo : Perciformes

Familia : Cichlidae

Genus : Oreochromis

Spesies : Oreochromis niloticus

2. Habitat

Secara alami ikan nila melakukan migrasi dari habitat aslinya, yakni di

bagian hulu sungai Nil yang melewati Uganda ke arah Selatan melewati Danau Raft

dan Tanganyika. Selain itu ikan nila juga terdapat di Afrika bagian Tengah dan

6
 7

Barat. Populasi terbanyak ditemukan di kolam-kolam ikan di Chad dan Nigeria.

Dengan campur tangan manusia, saat ini ikan nila telah menyebar ke seluruh dunia,

dari benua Afrika, Amerika, Eropa, Asia, sampai Australia (Amri dan Khairuman

2003). Ikan nila pertama kali didatangkan dari Taiwan ke Bogor oleh Balai

Penenlitian Perikanan Air Tawar pada tahun 1969. Setahun kemudian, ikan ini

mulai disebarkan ke beberapa daerah. Pemberian nama ikan berdasarkan ketetapan

Direktur Jendral Perikanan tahun 1972 (Amri dan Khairuman 2005).

3. Deskripsi

Ikan nila merah dikenal juga sebagai ikan nila nifi atau nirah. Semula ada

yang menduga ikan nila merah adalah ikan nila biasa yang mengalami

penyimpangan genetika warna tubuh sehingga menjadi albino. Namun, dugaan itu

ternyata keliru. Nila merah adalah varietas tersendiri. Ikan ini kemungkinan

merupakan hasil persilangan antara Oreochromis mossambicus, atau Oreochromis

niloticus dengan Oreochromis honorum, Oreochromis aureus, atau Oreochromis

zili (Amri dan Khairuman 2005).

Perkembangannya, nila merah disebut juga dengan nila hibrida. Penamaan

ini untuk membedakan ikan lokal dalam hal pertumbuhan karena ikan nila merah

mempunyai laju pertumbuhan yang cepat. Nila merah didatangkan setelah nila lokal

masuk ke Indonesia awal tahun 1981. Ikan ini diimpor oleh Balai Penelitian

Perikanan Air Tawar. Secara umum, spesifikasi nila merah antara lain warna tubuh

kemerahan atau kuning agak putih, pertumbuhan lebih cepat daripada nila lokal dan

keturunannya dominan jantan (Amri dan Khairuman 2005).

 8

Nila merah cepat menyebar ke seluruh pelosok tanah air karena

penampilannya yang mernarik perhatian, baik warna tubuh maupun bentuk

tubuhnya yang indah (Amri dan Khairuman 2005).

4. Syarat Hidup

Ikan nila memiliki toleransi yang tinggi terhadap lingkungan hidupnya

sehingga bisa dipelihara di dataran rendah yang berair payau hingga di dataran

tinggi yang berair tawar. Habitat hidup ikan nila cukup beragam, mulai dari sungai

, danau, waduk, rawa, sawah, kolam, hingga tambak.

Ikan nila dapat tumbuh secara normal kisaran suhu 140 C – 380 C dan dapat

memijah secara alami pada suhu 220 C – 370 C. Untuk pertumbuhan dan

perkembangbiakan, suhu optimum bagi ikan nila adalah 250 C – 300 C.

Pertumbuhan ikan nila biasanya akan terganggu jika suhu habitatnya lebih rendah

dari 140 C atau pada suhu tinggi 380 C. Ikan nila akan mengalami kematian pada

suhu 60 C atau 420 C (Amri dan Khairuman 2005).

5. Morfologi

Berdasarkan morfologi, kelompok ikan Oreochromis ini memang berbeda

dengan kelompok tilapia. Secara umum, bentuk tubuh ikan nila panjang dan

ramping, dengan sisik berukuran besar. Matanya besar, menonjol, dan bagian

tepinya berwarna putih. Gurat sisi (linea literalis) terputus dibagian tengan badan

kemudian berlanjut, tetapi letaknya lebih ke bawah daripada letak garis yang

memanjang diatas sirip dada. Jumlah sisik pada gurat sisi jumlahnya 34 buah. Sirip

punggung, sirip perut, dan sirip dubur mempunyai jari-jari lemah tetapi keras dan

tajam seperti duri. Sirip punggungnya berwarna hitam dan sirip dadanya juga
 9

tampak hitam. Bagian pinggir sirip punggung berwarna abu-abu atau hitam (Amri

dan Khairuman 2005).

B. Kandungan Ikan Nila

Menurut hasil penelitian Kurniawan (2013) menunjukkan komponen yang

terdapat dalam minyak ikan nila berupa asam lemak jenuh dan asam lemak tak

jenuh. Asam lemak jenuh terdiri dari Asam tetradekanoat metil ester (15:0), Asam

heksadekanoat metil ester (17:0), Asam oktadekanoat metil ester (19:0). Asam

lemak tak jenuh terdiri dari Asam 9,12,15-oktadekatrienoat metil ester (19:3,ω-3),

Asam 5,8,11,14,17-eikosapentaenoat metil ester (21:5,ω-3), Asam 4,7,10,13,16,19-

dokosaheksaenoat metil ester (23:6,ω-3), Asam cis-5,8,11,14,17-eikosapentaenoat

metil ester (21:5,ω-3), Asam 5,8,11,14-eikosa tetraenoat metil ester (21:4,ω-6).

C. Minyak Dan Lemak

Minyak dan lemak merupakan golongan lipid netral, lipid sendiri di

klasifikasikan dalam empat kelas, yaitu lipid netral, fosfatida, spingoli dan

glikolipid, minyak dan lemak yang telah dipisahkan dari jaringan asalnya

mengandung sejumlah kecil komponen selain trigliserida yaitu lipid komplek

leshitin, cephalin, fosfatida dan glikolipid), sterol (berada dalam keadaan bebas atau

terikat dengan Asam lemak), asam lemak bebas, lilin, pigmen yang larut dalam

lemak dan hidrokarbon (Ketaren 2008).

 10

D. Ekstraksi Minyak

Minyak dan lemak dapat diperoleh dengan cara mengekstraksi jaringan

hewan atau tanaman, pada pengolahan minyak dan lemak, pengerjaan yang

dilakukan tergantung pada sifat alami minyak atau lemak, adapun cara ekstraksi

adalah rendering (Kataren 2008).

1. Rendering

Rendering merupakan suatu proses yang sering digunakan dalam proses

ekstraksi minyak hewan dengan cara pemanasan Estiasih (2009), pemanasan bisa

dilakukan pada air panas Wet rendering dan dry rendering, Wet rendering

merupakan proses rendering dengan menambahkan sejumlah air pada saat proses

ekstraksi berlangsung, proses dikerjakan pada katel terbuka atau tertutup pada suhu

50°C dengan tekanan 40 sampai 60 psi, sedangkan pada Dry rendering adalah cara

Rendering tanpa adanya penambahan air selama proses berlangsung, dilakukan

pada katel terbuka yang dilengkapi dengan Steam jacket, serta alat pengaduk,

pemanasan dilakukan pada suhu ± 105°C (Kataren 2008).

2. Pengepresan

Pengepresan merupakan suatu teknik ekstraksi minyak yang kebanyakan

berasal dari biji-bijian. Cara ini dipilih pada pemisahan minyak berkadar tinggi 30-

70%, terdapat dua metode pengepresan yaitu pengepresan hidraulik (dengan

tekanan 2000 pound/inch) dan Pengepresan berulir (dengan pemanasan pada suhu

115,5°C) Karaten (2008). Bahan yang mengandung lemak atau minyak, harus

terlebih dahulu mendapat perlakuan yang berbeda, yaitu dengan terlebih dahulu

dipotong kecil sebelum proses pengepresan (Estiasih 2009).

 11

E. Pemurnian Minyak

Menurut Estiasih (2009). Tujuan utama dari proses pemurnim minyak

adalah untuk menghilangkan rasa atau bau yang kurang nyaman, dan juga guna

memperoleh hasil minyak yang bermutu baik, minyak dan lemak kasar harus

dimurnikan dari bahan-bahan serta kotoran dalam minyak sendiri dengan cara :

1. Pemisahan dan pengendapan

Pengendapan (setiling) dan pemisahan gumi (degumming), bertujuan untuk

menghilangkan partikel halus yang tersuspensi atau terbentuk koloidal, dilakukan

dengan cara pemanasan uap dan adsorben, terkadang dilakukan pula sentrifusa.

2. Netralisasi dengan alkali

Netralisasi dengan alkali, bertujuan memisahkan senyawa terlarut seperti

fosfatida, asam lemak bebas, dan hidrokarbon, lemak bebas dengan kandungan

tinggi dipisahkan dengan proses penguapan dengan uap air panas dalam keadaan

vakum, kemudian ditambahkan dengan alkali, sedangkan lemak dengan asam

lemak bebas rendah cukup ditambahkan NaOH , sehingga asam lemak mengikuti

fase air dan terpisah dari lemak

3. Pemucatan

Bertujuan menghilangkan zat warna dalam minyak dengan menambahkan

absorbing agent seperti arang aktif, atau reaksi kimia lainnya. Setelah penyerapan

warna asam lemak disaring dalam keadaan vakum.

4. Penghilangan bau dan lemak

Penghilangan bau lemak, dilakukan dalam botol vakum kemudian

dipanaskan dengan uap air panas yang akan membawa senyawa volatil, selesai
 12

proses penghilangan bau lemak, lemak harus segera didinginkan untuk mencegah

kontak dengan 02.

F. Minyak Ikan

Minyak ikan merupakan komponen lemak yang terdapat dalam jaringan

tubuh ikan yang diekstraksi ke dalam bentuk minyak. Minyak ikan berbeda dengan

minyak lain karena memiliki jenis asam lemak yang lebih beragam (Estiasih 2009).

Minyak ikan banyak mengandung zat yang diperlukan oleh tubuh yaitu EPA dan

DHA, asam lemak DHA dan EPA dapat membantu proses berkembangnya

kecerdasan otak. DHA merupakan asam lemak yang paling banyak terdapat pada

otak mamalia , kadarnya dalam lipid membran sel dipengaruhi oleh jumlah asam

lemak dalam makanan yang dikonsumsi. Kadarnya akan tinggi pada masa

pertumbuhan dan menurun pada masa penuaan (Muchtadi 2012).

Komposisi minyak ikan berbeda dengan minyak nabati dan minyak hewan

darat. Minyak ikan mengandung asam lemak omega-3 (ω-3) yang merupakan zat

yang diperlukan oleh tubuh manusia, asam lemak esensial sendiri tidak dapat

dibentuk langsung oleh tubuh dan harus didapat dari makanan, seperti pada minyak

ikan . Ikan dapat mengubah asam linolenat menjadi EPA dan DHA, di dalam tubuh

manusia juga terjadi perubahan asam linolenat, tetapi kurang efisien (Almatseir

2002).

G. Manfaat Asam Lemak Tak jenuh

Asam lemak tak jenuh memiliki banyak manfaat untuk tubuh manusia, asam

lemak tak jenuh diperoleh dari makanan hewani terutama pada jenis-jenis ikan.
 13

Pada minyak ikan terkandung asam lemak tak jenuh omega-3, omega-6 dan omega-

9 yang memiliki banyak manfaat untuk tubuh. Asam lemak tak jenuh berpotensi

dapat membersihkan plasma dari lipoprotein kilomikron dan kemungkinan juga

dari VLDL (Very Low Density Lipoprotein), asam lemak omega-3 dapat

menurunkan produksi trigliserid dan apolipoprotein β (beta) di dalam hati, bagian

utama lipid dan protein dalam VLDL, asam lemak omega-3 dapat dihubungkan

dengan pencegahan penyakit jantung koroner dan artitis (Micallef dan Garg 2008).

H. Lemak

Lemak merupakan senyawa yang dibutuhkan oleh tubuh, terutama saat

proses produksi berbagai hormon, sebagai pembungkus jaringan saraf (mielin)

melapisi membran sel, sebagai prekursor prostaglandin dan merupakan pelarut

vitamin (A, D, E dan K), akan tetapi kadar lemak yang berlebihan di dalam tubuh

dapat memicu timbulnya berbagai penyakit, salah satunya berupa aterosklerosis,

yaitu suatu proses pengapuran dan pengerasan dinding pembuluh darah, terutama

pada jantung, ginjal, dan otak yang dapat menyebabkan terjadinya stroke,

sedangkan pada jantung dapat menimbulkan penyakit jantung koroner (Dalimartha

2014)

1. Fraksi lemak darah

Menurut Dalimartha (2008), Lemak di dalam darah terdiri atas kolesterol,

trigliserid, fosfolipid dan asam lemak bebas. Tiga fraksi utama lemak berikatan

dengan protein khusus yang bernama apoprotein dan menjadi kompleks lipid-

protein. Ikatan tersebut yang menyebabkan lemak dapat larut, menyatu, dan
 14

mengalir di peredaran darah. Unsur lemak yang berikutnya yaitu asam lemak bebas

berikatan dengan albumin.

Lipoprotein terbagi menjadi lima fraksi sesuai dengan berat jenisnya yang

dibedakan dengan cara ultrasentrifugasi.

1.1. Kilomikron, merupakan lipoprotein dengan berat molekul terbesar

dan mengandung Apo-B48. Kandungan sebagian besar trigliserid (80-95%) untuk

dibawa ke jaringan lemak dan otot rangka, kilomikron juga mengandung kolesterol

(2-7%) untuk dibawa ke hati.

1.2. Lipoprotein densitas sangat rendah (VLDL), dibentuk dari asam

lemak bebas di hati dengan kandungan Apo-B100. VLDL mengandung 55-80%

trigliserid dan 5-15% kolesterol.

1.3. Lipoprotein densitas sedang (IDL), juga mengandung trigliserid 20-

50% dan kolesterol 20-40%. IDL merupakan zat antara yang terjadi sewaktu VLDL

dikatabolisme menjadi LDL. IDL disebut juga VLDL sisa.

1.4. Lipoprotein densitas rendah (LDL), merupakan lipoprotein

pengangkut kolesterol terbesar di dalam tubuh 40-50% untuk disebarkan ke seluruh

jaringan endotel dan perifer dan pembuluh nadi, LDL merupakan hasil metabolit

dari VLDL yang disebut juga lemak jahat karena efeknya yang aterogenik yaitu

mudah melekat pada dinding dalam pembuluh darah.

1.5. Lipoprotein densitas tinggi (HDL), merupakan lipoprotein yang

mengandung Apo AL dan Apo ALL dengan kandungan trigliserida 5-10% dan

kolesterol 15-20%, HDL mempunyai efek antiaterogenik kuat sehingga disebut

juga kolesterol baik. Fungsi utama HDL yaitu mengangkut kolesterol bebas yang
 15

terdapat di dalam jaringan endotel perifer termasuk pembuluh darah menuju ke

reseptor HDL di hati untuk dijadikan empedu dan dikeluarkan ke usus halus untuk

mencerna lemak dan dibuang berupa tinja. Dengan demikian penimbunan

kolesterol di dalam darah dapat berkurang, kadar HDL dalam darah rendah

kebanyakan ditemukan pada penderita obesitas, perokok dan peminum alkohol.

I. Hiperlipidemia

1. Pengertian hiperlipidemia

Hiperlipid merupakan suatu keadaan di mana terdapatnya kadar lipid

berlebih di dalam plasma darah sebagai hasil kelainan metabolik lipid. Hiperlipid

dapat terjadi karena produksi endogen yang berlebihan, hiperlipidemia secara klinis

dinyatakan sebagai hiperkolestrollemia, hipertrigliseridemia, atau

hiperkolesterolemia (Mansjoer et al 2001). Hiperlipidemia merupakan faktor

pencetus terjadinya penyakit jantung koroner pada usia dewasa.

Hiperkolesterolemia dan hipertrigliseridemia akan meningkatkan potensi terjadinya

penyakit jantung koroner (Supriyono 2008).

2. HDL (High density lipoprotein)

High density lipoprotein (HDL) sering disebut juga kolesterol baik, HDL

bekerja menyerap kolesterol yang berlebihan di dalam tubuh mencegah terjadinya

atelosklerosis atau penyumbatan pembuluh darah, HDL sendiri merupakan

lipoprotein yang bekerja mengangkut protein dalam darah, dengan cara

mengangkut kolesterol dari sel menuju hepar untuk dirubah menjadi asam empedu

(Nurachmach 2009).
 16

Tabel 1. Kadar normal HDL darah

Kadar HDL darah
< 40 mg/dl Rendah
≥ 60 mg/dl Tinggi

(Sukandar et al 2009)

3. LDL (Low Density Lipoprotein)

Low Density lipoprotein (LDL) merupakan lipoprotein utama yang bekerja

sebagai pengangkut kolesterol dalam darah dan yang terlibat dalam proses

terjadinya penyakit jantung koroner. LDL menjadi arteriogenesis setelah

mengalami proses modifikasi dengan melalui proses oksidasi. LDL memainkan

peranan penting pada patogenesis arteriosklerosis, proses oksidasi LDL dapat

memicu peningkatan sintesis dan sekresi molekul adhesi dari sel-sel endogen,

kemotaksis untuk monosit dalam sirkulasi (Nurachmach, 2009).

Tabel 2. Kadar normal LDL darah

Kadar LDL
<100 mg/dl Optimal
100-200 mg/dl Jauh atau di atas normal
130-159 mg/dl Cukup tinggi
160-189 mg/dl Tinggi
≥190 mg/dl Sangat tinggi
(Sukandar et al 2009)

4. Atherosklerosis

Atheroslerosis berasal dari bahasa yunani yang berarti athere (bubur) sclek

(keras). Atherosklerosis merupakan suatu proses gangguan dalam pembuluh darah

di mana terjadi penyempitan arteri yang disebabkan karena penumpukan dan

endapan lipid yang setelah beberapa waktu menyebabkan penggoresan dinding

arteri tersebut, penyumbatan terjadi pada jaringan inti di mana penyumbatan terjadi

pada bagian arteri dengan arus darah yang kuat seperti pada arteri koroner (Tan &

rahardja 2004).
 17

Plak arterosklerotik akan tumbuh terus-menerus secara progresif selama

bertahun-tahun dan bisa disertai timbulnya berbagai komplikasi seperti pengapuran,

perdarahan, pecah, atau ulcerasi dan pembetukan trombus. Pembentukan trombus

di dalam pembuluh darah yang dapat menghambat aliran darah. Apabila pecah akan

terjadi serangan jantung. Proses aterosklerosis tadi terjadi pada pembuluh darah

koroner, maka timbullah PJK. Selanjutnya bila pembentukan trombus berlangsung

terus, maka akan terjadi penyumbatan total pembuluh darah koroner sehingga

mengakibatkan berhentinya pasokan oksigen ke otot jantung. Jika proses

aterosklerosis terjadi pada pembuluh darah otak, akan infrak serebral yang

menyebabkan stroke (Dalimartha 2008).

Atherosklerosis dapat terjadi karena meningkatnya kadar LDL di dalam

tubuh, dapat menyebabkan metabolisme LDL terganggu dan menyebabkan

penyumbatan pembuluh darah. Kadar LDL yang berlebih dapat menyebabkan

suplai oksigen ke jaringan terganggu dan menyebabkan terjadinya infark miokard.

Pembuluh darah ke otak yang tersumbat dapat menyebabkan infark serebral dan

stroke (Dalimarta 2007).

J. Obat Hiperkolesterolemia

1. Niasin

Niasin merupakan bagian dari vitamin B komplek yang disebut vitamin B3,

bersifat larut air dan alkohol. Niasin bekerja dengan cara menekan aktivitas enzim

lipoprotein sehingga menurunkan produksi VLDL di dalam hepar dan dapat

menghambat mobilisasi lemak sehingga produksi trigliserida, kolesterol total, dan

 18

kolesterol LDL dapat turun. Niasin juga dapat meningkatkan HDL. Niasin juga

diperlukan tubuh untuk membentuk koezim nikotinamide adenine nucleotide

(NAD) yang berperan mendegradasi karbohidrat, lemak, protein, dan alkohol

menjadi energi. Niasin juga berperan dalam merangsang pembentukan

prostaglandin I2, yaitu hormon yang membantu pencegahan pengumpulan agregasi

trombosit. Dengan demikian, niasin dapat memperkecil proses atherosklerosis dan

akhirnya memperkecil kemungkinan terjadinya serangan jantung (Hardhani 2008).

2. Statin

Statin merupakan senyawa yang paling efektif dan paling baik toleransinya

untuk mengobati dislipidemia. Obat golongan ini efektif untuk menurunkan

kolesterol dan pada dosis tinggi dapat juga menurunkan trigliserida yang

disebabkan oleh peninggian VLDL. Statin bekerja dengan menghambat sintesis

kolesterol di hati yakni dengan penghambatan enzim HMG CoA reduktase secara

kompetitif. Obat-obat yang termasuk dalam golongan statin adalah atorvastatin,

simvastatin, lovastatin, fluvastatin dan pravastatin (Munaf 2008 ; Suyatna 2009).

Simvastatin merupakan produk dalam bentuk lakton yang setelah

dihidrolisis akan menjadi obat aktif yaitu asam β-hidroksi. Simvastatin dapat

terabsorbsi 30-50%. Simvastatin mengalami metabolisme lintas pertama,

bekerjanya di dalam hati. Obat golongan statin mengalami biotranformasi dan

sebagian besarnya masih dalam bentuk aktif (Munaf 2008 ; Suyatna 2009).

3. Golongan asam fibrat.

Efek golongan asam fibrat adalah meningkatkan aktivitas lipoprotein lipase

sehingga menghambat produksi VLDL di hati dan meningkatkan aktivitas reseptor

 19

LDL. Obat golongan ini terutama menurunkan trigliserida yang tinggi dalam darah

dan meningkatkan HDL, serta mempunyai efek yang cukup terhadap penurunan

kolesterol total dan kolesterol LDL. Efek samping yang paling sering muncul

adalah gangguan pencernaan berupa mual, mencret, perut kembung, dan nyeri

perut, meningkatkan enzim-enzim transminase (SGOT, SGPT), nyeri otot, rasa

gatal dan ruam pada kulit. Obat ini tidak boleh diberikan pada penderita dengan

gangguan fungsi hati dan ginjal yang berat, serta penderita penyakit kandung

empedu karena asam fibrat dapat memperberat penyakit tersebut. Contoh obat

golongan ini adalah bezafibrat, fenofibrat, gemfibrozil, simfibrat, siprofibrat,

klofibrat (Dalimartha 2008).

K. Metode Pemeriksaan HDL dan LDL

Pengukuran kadar HDL dan LDL dilakukan dengan menggunakan metode

CHOD-PAP, yaitu pengujian dilakukan secara enzimatis menggunakan alat

fotometer, metode ini cepat, mudah, serta efisien dalam pengukuran kadar HDL dan

LDL sesuai dengan prosedur Diasys, prinsip kerja HDL menggunakan

kilomikron,VLDL dan LDL dengan penambahan fosfotungstat dan ion magnesium,

proses sentrifue hanya akan menghasilkan kadar HDL dalam supernatan yang

kemudian ditentukan secara enzimatis dengan menggunakan Diasy cholestrol FS.

Prinsip penentuan kadar LDL, yaitu LDL mengendap karena penambahan

heparin, HDL dan LDL tetap dalam supernatan setelah sentrifugasi dan diukur

secara enzimatik dengan metode CHOD-PAP. Konsentrasi kolesterol LDL dihitung

sebagai perbedaan kadar kolestrol total dan kolestrol pada supernatan.

 20

Pada reaksi enzimatik kolesterol dengan metode CHOD-PAP, reaksi yang

terjadi adalah enzim kolesterol esterase yang menghidrolis kolesterol ester menjadi

kolesterol bebas dan asam lemak. Selanjutnya, enzim kolesterol oksidase, akan

mengoksidasei kolesterol bebas menjadi koleston dan hidrogen peroksida.

Hidrogen peroksida akan bereaksi dengan 4-aminoantipirin dan fenol dengan

adanya enzim peroksidase membentuk pigmen quinoneimin (warna merah) sebagai

indikator kolorimetri.

L. Hewan Uji

1. Sistematika tikus putih

Sistematika tikus putih menurut Sugiyanto (1995) sebagai berikut :

Filum : Chordata

Sub filum : Vertebrata

Classis : Mamalia

Ordo : Rodentia

Famili : Muridae

Genus : Rattus

Species : Rattus norvegicus

2. Karekteristik hewan uji

Tikus putih merupakan hewan yang cerdas dan relatif resisten terhadap

penyakit, tikus putih lebih tenang dan mudah ditangani, tidak begitu bersifat

fotofobik seperti halnya mencit. Kecendrungan untuk berkumpul dengan sesama

tidak begitu besar sehingga tikus putih dapat tinggal sendiri. Hewan ini harus
 21

diperlakukan dengan halus namun sigap, makan harus dijaga agar dapat selalu

memenuhi kebutuhannya (Smith & Mangkoewidjojo 1998).

3. Biologi tikus putih

Tikus putih baik jantan maupun betina dapat bertahan 2-3 tahun bahkan

sampai 4 tahun. Tumbuh dewasa pada umur 40-60 hari. Berat badan tikus jantan

dewasa berkisar 250-300 gram Smith & Mangkoewidjojo (1998). Selain itu tikus

jantan memiliki kecepatan metabolisme obat lebih cepat dari pada tikus betina, pada

tikus betina secara berkala dalam tubuhnya mengalami perubahan kondisi seperti

masa kehamilan, menyusui dan menstruasi (Sugiyanto 1995).

M. Landasan Teori

Hiperlipidemia merupakan suatu gangguan proses metabolisme di dalam

tubuh yang menyebabkan peningkatnya kadar lipoprotein di dalam tubuh. Dan

ditandai dengan meningkatnya kadar trigliserida dan kolestrol darah melebihi batas

normal Guyton & Hall (2007). Peningkatan kadar LDL di dalam darah akan

menyebabkan metabolisme LDL terganggu, (LDL) Low Density Lipoprotein

merupakan lipoprotein yang bertugas pengangkut kolesterol dalam darah menuju

jaringan dan yang terlibat dalam penyakit jantung koroner. LDL menjadi

arteriogenesis setelah mengalami modifikasi yakni melalui proses oksidasi.

Oksidasi LDL memainkan peranan penting pada proses arteriosklerosis

(Nurachmach 2009).

Minyak ikan mengandung asam lemak esensial yang berguna bagi tubuh.

Menururut penelitian Kurniawan (2013). Menunjukkan komponen asam lemak

 22

yang terdapat dalam minyak ikan nila berupa asam lemak jenuh dan asam lemak

tak jenuh. Asam lemak jenuh terdiri dari Asam tetradekanoat metil ester (15:0),

Asam heksadekanoat metil ester (17:0), Asam oktadekanoat metil ester (19:0).

Asam lemak tak jenuh terdiri dari Asam 9,12,15-oktadekatrienoat metil ester

(19:3,ω-3), Asam 5,8,11,14,17-eikosapentaenoat metil ester (21:5,ω-3), Asam

4,7,10,13,16,19-dokosaheksaenoat metil ester (23:6,ω-3), Asam cis-5,8,11,14,17-

eikosapentaenoat metil ester (21:5,ω-3), Asam 5,8,11,14-eikosa tetraenoat metil

ester (21:4,ω-6).

Berdasarkan penelitian tersebut menunjukkan adanya komponen asam

lemak (PUFA) poly unsaturated fatty acid ω-3 pada minyak ikan nila yang dapat

berpotensi menurunkan kadar kolesterol dan mencegah terjadinya penyakit jantung

koroner . Minyak ikan (fish oil) mengandung hampir 30 % asam lemak tidak jenuh

ganda omega-3. Asam lemak omega-3 mencegah terjadinya aterosklerosis melalui

efek anti agregasi trombosit, yaitu menghambat pembentukan tromboksan-A2 yang

dapat menimbulkan trombosis. Konsumsi omega-3 bermanfaat untuk penderita

tekanan darah tinggi (hipertensi), aterosklerosis dan arthritis. Asam lemak omega-

3 dalam bentuk EPA (Eicosa Pentanoic Acid) dan DHA (Docosa Hexanoic Acid)

saat digunakan pada dosis 3-4 g/hari ditemukan telah memberikan efek terhadap

penurunan kadar trigliserid (Syarief 2011). Minyak ikan komersil (PDO) pada dosis

0,8 ml/200 g BB dan 1,6 ml/200 g BB juga diketahui dapat berpengaruh terhadap

sintesis kolesterol di ditubuh (Rachmat et al 2007). Berdasarkan ulasan tersebut

maka peneliti ingin meneliti akan pengaruh minyak ikan nila terhadap sintesis

kolesterol di dalam tubuh.

 23

N. Hipotesis

Berdasarkan landasan teori yang telah diuraikan maka dapat diambil

hipotesis sebagai berikut:

Pertama, pemberian minyak ikan nila (Oreochromis niloticus), berpengaruh

terhadap kadar HDL (High Density Lipoprotein) dan LDL (Low Density

Lipoprotein) pada tikus hiperlipidemia.

Kedua, diperoleh dosis minyak ikan nila Oreochromis niloticus yang efektif

dalam menurunkan kadar LDL (Low Density Lipoprotein) dan meningkatkan kadar

HDL (High Density Lipoprotein) pada tikus hiperlipdemia.

 BAB III

METODELOGI PENELITIAN

A. Populasi Dan Sampel

1. Popolasi

Populasi adalah keseluruhan unit atau individu dalam ruang lingkup yang

ingin diteliti. Populasi dalam penelitian ini adalah ikan nila (Oreochromic niloticus)

yang diperoleh dari keramba di wilayah Wonogiri.

2. Sampel

Sampel adalah sebagian dari populasi yang ingin diteliti, yang ciri-ciri dan

keberadaannya diharapkan mampu mewakili atau menggambarkan ciri-ciri dan

keberadaan populasi sebenarnya. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini

adalah ikan nila segar yang diambil secara acak berasal dari subfilum vertebrata,

yang memiliki ciri-ciri warna tubuh kemerahan atau kuning agak putih,

pertumbuhan lebih cepat daripada nila lokal, keturunannya dominan jantan. Masa

pemanenan ikan nila dapat dilakukan pada usia 4-5 bulan. Ikan nila pada usia 4-5

bulan akan memiliki berat yang bervariasi, yaitu antara 500-600 gram.

B. Variabel Penelitian

1. Identifikasi varibel utama

Variabel utama yang pertama dalam penelitian ini adalah minyak ikan nila

(Oreochromis niloticus). Variabel utama yang kedua adalah dosis minyak ikan

terhadap tikus putih galur wistar. Variabel utama ketiga dalam penelitian ini

adalah kadar HDL dan LDL darah. Variabel utama keempat adalah tikus jantan

24
 25

galur wistar.

2. Klasifikasi variabel utama

Variabel utama memuat berbagai macam variabel yaitu. Variabel bebas,

variabel tergantung, dan variabel kendali.

Variabel bebas adalah variabel yang dapat dengan sengaja dirubah untuk

dapat dipelajari pengaruhnya pada variabel tergantung. Sehingga dapat

dinyatakan variabel bebas pada penelitian ini yaitu variasi dosis minyak ikan nila

(Oreochromis niloticus).

Variabel tergantung merupakan variabel penelitian yang diukur guna

mengetahui besarnya atau pengaruh dari variabel bebas, di mana besar efek

tersebut dapat diamati dari ada tidaknya perubahan pada kadar low density

lipoprotein (LDL), pada tikus galur wistar.

Variabel kendali adalah variabel bebas yang efeknya terhadap variabel

tergantung yang dapat dikendalikan oleh peneliti, guna menjadi batasan pada

suatu penelitian, variabel kendali pada penelitian ini adalah kondisi pengukur atau

peliti, kondisi fisik hewan yang diteliti meliputi berat badan, usia, jenis kelamin,

galur, lingkungan serta tempat tinggal.

3. Defenisi operasional utama

Pertama, ikan nila adalah biota air tawar yang diambil dari daerah Waduk

Gajah Mungkur, Wonogiri, Jawa Tengah, pada bulan Februari.

Kedua, minyak ikan nila (Oreochromis niloticus) berasal dari ikan nila

segar dibersihkan dengan air mengalir, dipotong-potong dan dikukus dengan

metode Dry rendering pada suhu 105°C-110°C selama ± 1-1,5 jam.

 26

Ketiga, dosis minyak ikan nila adalah dosis ikan nila yang diberikan

terhadap hewan uji sebagai model aktivitas penurunan kadar LDL dan

meningkatnya kadar HDL.

Keempat, hewan uji adalah tikus putih jantan, umur 2-3 bulan berat 150-

200 gram yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi Universitas Setia Budi.

Kelima, kenaikan kadar LDL adalah naiknya kadar LDL dan turunnya

kadar HDL pada tikus hiperlipidemia setelah diberi diet tinggi lemak yakni lemak

babi dan kuning telur selama 14 hari.

Keenam, penurunan kadar LDL adalah naiknya kadar HDL setelah diberi

perlakuan minyak ikan nila yang diukur dari hari ke 14 sampai ke 21.

C. Alat Dan Bahan

1. Alat

Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi: alat untuk pengambilan

minyak ikan yaitu seperangkat alat gelas (gelas ukur, beaker glass), stamfer,

timbangan, panci kecil, kain lap, stopwatch, freezer box, penyaring, separangkat

peralatan pemisahan minyak (corong pemisah) / (Destilasi). Alat untuk perlakuan

hewan uji yaitu spuit injeksi, jarum suntik oral, pipa kapiler mikrohematokrit, dan

alat untuk pengukuran kadar kolesterol yaitu, tabung, sentrifuge, mikropipet, dan

fotometer Stardust .

2. Bahan

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah ikan nila

(Oreochromis niloticus) dengan umur 3-4 bulan, tikus putih jantan (Rattus
 27

norvegicus) umur 2-3 bulan dengan berat badan 150-200 g, aquadest, PGA 0,5%,

simvastatin, minyak babi, pakan ternak BR II, kuning telur, reagen precipitant,

reagen LDL direct Natrium sulfat anhidrat (Na2SO4).

D. Jalannya Penelitian

1. Pengambilan sampel

Sampel ikan nila (Oreocromis niloticus) diambil di Kabupaten Wonogiri,

Waduk Gajah Mungkur Jawa Tengah, ikan nila yang digunakan adalah ikan nila

dewasa dan segar.

2. Determinasi ikan nila

Tahap pertama yang dilakukan dalam penelitian ini adalah melakukan

determinasi ikan nila (Oreochromis niloticus) yang bertujuan untuk menetapkan

kebenaran sampel ikan nila (Oreochromis niloticus) yang berkaitan dengan ciri-

ciri morfologi yang ada pada ikan nila yang dibuktikan di Laboratorium

Universitas Gajah Mada Yogyakarta.

3. Pengambilan minyak ikan nila

Ikan nila (Oreochromis niloticus) diperoleh dari waduk Gajah Mungkur,

Kabupaten Wonogiri, Jawa Tengah. Ikan nila yang didapat dicuci dengan air

mengalir untuk menghilangkan kotoran dan cemaran kemudian dipotong kecil-

kecil, dikukus dengan metode dry rendering pada suhu 105°C-110°C dengan

waktu ± 1 – 1.5 jam. Sari ikan yang bebas dari daging ikan ditampung pada wadah

yang telah disediakan dan disaring. Daging ikan yang masih mengandung minyak,

diperas dengan kain atau dipress secara manual.

 28

Pemisahan minyak ikan dan air menggunakan corong pisah, selanjutnya

hasil minyak ikan ditambahkan natrium sulfat anhidrat (Na2SO4) untuk mengikat

air yang teremulsi dalam minyak ikan. Kemudian hasil akhir minyak ikan nila

dianalisa sifat fisik, indeks bias dan penentuan bobot jenis minyak ikan nila.

Minyak ikan nila yang diperoleh kemudian disimpan dalam botol dan dimasukkan

dalam lemari pendingin. Minyak ikan dibuat bentuk emulsi dengan ditambahkan

zat pengemulsi PGA untuk memudahkan pemberian oral pada hewan uji. Proses

pembuatan minyak ikan nila seperti skema pada gambar 2:

Ikan nila (Oreochromis niloticus)

 Daging ikan dicuci besih

 Potong dadu
 Kukus dengan metode dry rendering
 Daging ikan di peras

Sari minyak
Dimasukkan corong pisah untuk
memisahkan minyak dan iar

Air minyak
Lalu tambahkan Na2SO4
Minyak dilakukan analisa sifat fisik antara lain
pemeriksaan bobot jenis dan indeks bias

Gambar 2. Skema pembuatan minyak ikan nila

4. Penetapan indeks bias

Indeks bias suatu zat adalah perbandingan kecepatan cahaya dalam zat

tersebut. Air dialirkan melalui alat refraktometer pada suhu pembacaan yang akan

dilakukan. Suhu tidak boleh lebih dari 20 C dari suhu referensi dan harus
 29

dipertahankan toleransi ± 0,20 C. Sebelum minyak dialirkan di dalam alat, minyak

harus berada pada suhu yang sama dengan suhu pengukuran yang akan dilakukan.

Pembacaan hanya boleh dilakukan bila suhu sudah stabil.

Instrumen diletakkan dalam posisi yang jelas dengan sinar matahri atau

penerangan lilin. Prisma dicuci dengan aquadest 20 cc, dan dibersihkan dengan

alkohol dengan hati-hati. Prisma dibuka dengan memutar sekrup atas. Beberapa

tetes minyak diteteskan dalam prisma dan prisma ditutup dengan memutar sekrup.

Instrumen dibiarkan untuk beberapa saat sebelum dibaca. Aliade

digerakkan ke belakang muka hingga bayangan dalam bagian yang gelap atau

terang. Garis yang membagi ini disebut border line. Kemudian border line

disesuaikan hingga jatuh dalam titik, sehingga memotong cross hair. Indeks bias

dapat dibaca langsung dari skala sector. Pembacaan kedua dilakukan setelah

beberapa menit untuk meyakinkan keseimbangan suhu yang telah digunakan.

5. Penetapan berat jenis

Bobot jenis adalah konstanta atau ketetapan bahan yang tergantung pada

suhu yang padat, cair dan bentuk gas yang homogen. Rapat jenis adalah

perbandingan antara bobot zat berbanding dengan volume zat pada suhu tertentu.

Untuk bidang farmasi biasanya 25° C (Ansel 2004). Uji bobot jenis digunakan

untuk mengetahui kemurnian minyak. Bobot jenis suatu zat adalah perbandingan

bobot zat terhadap air suling volume sama yang ditimbang di udara pada

suhu yang sama. Alat yang digunakan adalah piknometer. Bobot jenis minyak

pada umumnya berkisar antara 0,879-0,892 dan umumnya bobot jenis adalah

salah satu dari cara analisa yang dapat menggambarkan kemurnian minyak.
 30

Piknometer dikeringkan kemudian didiamkan di neraca analitik selama 30 menit,

kemudian ditimbang (berat piknometer kosong). Setelah itu piknometer diisi

aquadest secara perlahan-lahan hingga tidak terjadi gelembung udara dan

diletakkan di water bath yang mempunyai sirkulasi air pada suhu 250°C selama

30 menit, kemudian diangkat dan dilap sampai bersih. Kemudian ditimbang dalam

neraca analitik selama 30 menit dan ditimbang beratnya (berat piknometer +

minyak).

𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑚𝑖𝑛𝑦𝑎𝑘
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑗𝑒𝑛𝑖𝑠 = 𝑥 100
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑖𝑟

6. Analisa rendemen minyak ikan

Minyak ikan yang dihasilkan kemudian dihitung rendemennya dengan

rumus.

𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑚𝑖𝑛𝑦𝑎𝑘 𝑚𝑖𝑛𝑦𝑎𝑘 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖ℎ𝑎𝑠𝑖𝑙𝑘𝑎𝑛

𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 = 𝑥 100
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑏𝑎ℎ𝑎𝑛 𝑎𝑤𝑎𝑙

7. Penetapan dosis

Dosis kontrol positif ditentukan berdasarkan dosis manusia yang memiliki

berat badan 70 kg. Kemudian dikonversi dari dosis manusia ke tikus dengan berat

badan 200 g dengan nilai konversi yaitu 0,018. Penelitian ini menggunakan dosis

Simvastatin untuk manusia adalah 20 mg sehingga jika dikonversikan ke tikus

menjadi 0,36 mg/200 g BB tikus. Dan sebagai kontrol negatif yang digunakan pada

penelitian ini yaitu PGA 0,5% dengan pemberian 1ml/200 g BB.

 31

Pada penelitian sebelumnya dosis minyak ikan yang digunakan adalah 0,6

ml/200 g BB, 1,6 ml/200 g BB dan 3,2 ml/200 g BB tikus berpengaruh pada sintesis

kolesterol pada tikus hiperlipidemia (Rahmat et al 2007).

8. Pembuatan pakan tinggi lemak

Diet lemak tinggi yang diberikan pada tikus yang berupa lemak babi dan

kuning telur secara per oral bertujuan untuk menginduksi kenaikan kadar kolesterol.

Komposisi pakan terdiri dari 5 gram lemak babi, 10 gram kuning telur dan air

sampai 100 ml. Cara pembuatannya yaitu memanaskan lemak babi berupa padatan

sehingga diperoleh minyak lemak babi. Kemudian minyak lemak babi tersebut

dicampur dengan kuning telur sehingga terbentuk korpus emulsi dan ditambahkan

air 100 ml diaduk cepat sehingga terbentuk emulsi yang halus dan homogen. Emulsi

lemak babi dibuat baru setiap hari sebelum diberikan per oral pada tikus.

Widyaningsih (2011). Emulsi diberikan setiap hari selama 14 hari dengan dosis 1

ml/200 g BB.

9. Persiapan hewan uji

Hewan uji pada penelitian ini digunakan hewan uji berupa tikus jantan putih

galur wistar dengan kisaran umur 2-3 bulan dan berat 150-200 g sebanyak 30 ekor.

Sebelum dilakukan penelitian tikus diberi penyesuaian terhadap kondisi lingkungan

penelitian selama ± 7 hari. Kemudian dibagi secara acak menjadi 6 kelompok

perlakuan masing-masing ekor pada tiap tikus diberi tanda dan diberikan pakan diet

tinggi lemak, dan dibagi secara acak menjadi 6 kelompok perlakuan. Masing-

masing ekor pada tiap tikus diberi tanda.

10. Perlakuan hewan uji

Pada penelitian kadal low density lipoprotein (LDL), dibagi menjadi 3

 32

priode, priode 0 (T0) adalah periode di mana tikus sebelum diberikan perlakuan

atau kadar LDL awal, periode kedua (T1) adalah periode dimana tikus mulai di

induksi pakan tinggi lemak dan periode ketiga (T2) dalah periode setelah tikus

mendapat perlakuan. Dalam penelitian digunakan 30 ekor tikus putih jantan umur

2-3 bulan dengan berat 150-200 gram.

Sebelum diberi perlakukan tikus diadaptasikan terlebih dahulu dengan

pakan dan lingkungan penelitian selama 1 minggu selanjutnya dibagi secara acak

menjadi 6 kelompok dan setiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus. Kelompok I

yaitu kontrol normal tikus tidak diberi perlakuan, kelompok II kelompok negative,

tikus diberi makanan BR II, lemak babi, kuning telur, dan air minum ditambah

PGA 0,5 %. Kelompok III yaitu kontrol positif, tikus diberi makanan BR II

ditambah suspensi simvastatin dengan dosis 0,36 mg/200 g BB tikus. Kelompok

III, IV dan V merupakan variasi dosis minyak ikan nila sesui dosis Pada penelitian

sebelumnya dosis minyak ikan digunakan adalah 0,6 ml/200 g BB tikus, 1,6

ml/200 g BB tikus dan 3,2 ml/200 g BB tikus mampu menurunkan kadar LDL dan

mampu meningkatkan kadar HDL pada tikus hyperlipidemia (Rachmat et al.2007).

11. Penentuan kadar HDL dan LDL

Pengukuran kadar HDL dan LDL hewan uji dilakukan dengan mengambil

serum darah tikus melalui vena mata pada hari ke-0, hari ke-14, dan hari ke-21.

Penentuan dilakukan dengan cara langsung menggunakan metode CHOD-PAP dan

berlangsung sebagai berikut : serum darah diambil melalui vena mata dengan pipa

kapiler sebanyak ±2 ml lalu disentrifuse dengan kecepatan 3000 rpm selama 15

menit, mengukur kadar HDL, serum diambil 200 μl ditambah 500 μl reagen HDL
 33

precipitant kemudian disentrifuse kembali dengan kecepatan 4000 rpm selama 10

menit kemudiam ambil precipitatnya dan tambahkan reagen kolesterol lalu

inkubasi selama 20 menit, dan baca. Kadar LDL, serum diambil 100 μl,

ditambahkan 1000 μl reagen LDL precipitant lalu dicampur dan diinkubasi selama

15 menit pada temperatur ruang. Hasil supernatan masing-masing diambil

sebanyak 100 μl dan ditambah reagen kolesterol kit lalu dicampur dan diinkubasi

selama 10 menit pada temperatur ruang. Kemudian diamati menggunakan alat

fotometer stardust, hasil absorbansi yang terbaca dicatat dan diketahui kadar HDL

dan LDL (mg/dL).

E. Analisis Data

Analisa data dengan menggunakan bantuan aplikasi SPSS untuk

mendapatkan dosis yang efektif dalam menurunkan kadar LDL, tahap pertama

yang dapat dilakukan yaitu untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan yang

bermakna pada parameter antar kelompok yaitu dengan mengetahui distribusi

normal dengan mengunakan informasi uji Kolmogorov Semirnov, data

terdistribusi normal bila nilai yang didapat p > 0,05 dan tidak terdistribusi normal

bila p < 0,05.

Data dianalisis secara statistik dengan uji ANOVA dua arah data

terdistribusi normal signifikan > 0,05. Dilanjutkan dengan uji Post Hoc Tests

untuk membandingkan perbedaan mean antar kelompok tersebut. Uji parametrik

anova dua jalan jika menunjukkan beda nyata maka perlu dilanjutkan uji levene

untuk mengetahui variannya sama atau tidak. Kriteria uji lavene adalah bila nilai

variannya tidak sama. Jika variannya sama maka dilanjutka uji tukey HSD.
 34

Hewan uji 30 ekor tikus (dengan berat 150-200 gram umur 2-3 bulan)

Diadaptasi selama 7 hari, diberi pakan dan air minum, dibagi menjadi 6
kelompok

Dipuasakan 12 jam

Pemeriksaan kadar HDL dan LDL pada hari ke 0 (T0)

Kelompok Normal (5 ekor) tikus Kelompok Hiperlipidemia (25 ekor

diberi pakan BR II dan air minum tikus) tikus diberi lemak babi dan kuning
pada hari ke-0 sampai ke-21 telur puyuh secara oral pada hari ke-0
sampai hari ke-14 dengan dosis 1ml/200
g BB

Diukur kadar LDL dan HDL pada hari ke-14

(T1).

Kelompok Normal (I) (5 ekor) tikus Kelompok Hiperlipidemia (25 ekor)

diberi pakan BR II dan air minum diberi pakan BR II dan air minum

Kelompok Kelompok Kelompok Kelompok Kelompok

(II) (III) (IV) (V) (VI)
(5 ekor) (5 ekor) (5 ekor) (5 ekor) (5 ekor)
diberikan diberikan diberikan diberikan diberikan
PGA 0,5 % simvastatin minyak ikan minyak ikan minyak ikan
0,18 mg/200 nila dengan nila dengan nila dengan
g BB dosis 0,8 dosis 1.6 dosis 3,2
ml/200g BB ml/200g BB ml/200g BB

Pemeriksaan Kadar HDL dan LDL pada hari ke 21 (T2)

Analisa data

Gambar 3. Skema perlakuan hewan uji

Kadar normal kolesterol pada tikus : 10-54 mg/dl (Harini 2009).

Kadar normal HDL : ≥ 35 mg/dl (Hatoyo 2008).
Kadar normal LDL : 7-27,2 mg/dl (Herwiyarirasanta 2010)
 BAB IV

A. Hasil penelitian dan pembahasan

1. Hasil determinasi ikan nila (Oreochromis niloticus)

Determinasi ikan nila dilakukan dengan tujan untuk mengetahui kebenaran

sampel yang akan digunakan serta menghindari terjadinya kesalahan pengambilan

sampel yang akan digunakan pada penelitian. Ikan nila yang digunakan pada

penelitian ini merupakan ikan nila merah yang diperoleh di wilayah Wonogiri Jawa

Tengah dengan usia 3-4 bulan. Kemudian sampel di indentifikasi di labolatorium

Biologi Farmasi, Fakultas Biologi, Universitas Gajah Mada Yogyakarta, guna

mengetahui kebenaran sehubungan dengan ciri dan morfologi bahan terhadap

sumber pustaka. Berdasarkan surat hasil determinasi BF/421/Ident/Det/XII/2015

menunjukkan bahwa sampel yang digunakan merupakan ikan nila merah, jenis

Oreochromis niloticus L. Sinonim (Tilapia nilotika L.), dari suku Cichilidae. Hasil

determinasi dapat dilihat pada lampiran satu.

2. Pengambilan minyak ikan nila (Oreochromis niloticus)

Ikan nila (Oreochromis niloticus) yang diperoleh dari waduk Gajah

Mungkur, Kabupaten Wonogiri, Jawa Tengah. dicuci dan dibersihkan terlebih

dahulu dengan air mengalir untuk menghilangkan kotoran dan cemaran kemudian

dipotong kecil-kecil, dikukus dengan metode dry rendering pada suhu 100 °C-

110°C dengan waktu ± 1 – 1.5 jam.

Sari ikan yang bebas dari daging ikan ditampung pada wadah yang telah

disediakan dan disaring. Kemudian daging ikan yang masih mengandung minyak

35
 36

diperas dengan kain atau dipress secara manual. Proses pemisahan antara minyak

ikan dengan air yang masih teremulsi pada minyak dilakukan dengan cara

menambahan (Na2SO4) agar kualitas minyak yang didapat lebih baik. Kemudian

dilakukan perhitungan rendemen minyak ikan nila. Hasil perhitungan rendemen

minyak ikan sebagai berikut :

Tabel 3. Hasil perhitungan rendemen

Berat ikan nila (g) Volume minyak ikan (ml) Rendemen (%)
15.000 421 2,8

Analisa rendemen minyak ikan dilakukan dengan cara mengukur volume

minyak yang didapatkan kemudian dibagi dengan jumlah berat sampel awal.

Berdasarkan tabel 3 menunjukkan. Nilai rendemen minyak ikan nila dengan berat

awal 15 kg didapatkan nilai rendemen sebesar 2,6%. Perhitungan rendemen minyak

ikan dapat dilihat pada lampiran 11.

3. Penentuan indeks bias

Tabel 4. Hasil analisa indeks bias minyak ikan

Indeks bias minyak ikan Menurut pustaka

1.4772 Indeks bias minyak ikan 1,478-1,482 (250C)
(Dirjen POM 1979)

Pemeriksaan indeks bias dilakukan dilabolatorium Universitas Setia Budi

dengan menggunakan alat refraktometer. Menurut pustaka, pada sifat fisik indeks

bias minyak ikan sebesar 1.478-1.482 pada suhu 25ºC, hasil pemeriksaan pada

sampel minyak ikan nila didapatkan nilai sebesar 1,4772 sehingga dapat dikatakan

nilai indeks bias minyak ikan nila masih dalam kategori yang sesuai dengan sumber

pustaka. Perhitungan indeks bias dapat dilihat pada lampiran 14.

 37

4. Penetapan berat jenis

Tabel 5.Hasil penetapan berat jenis

Berat jenis minyak ikan nila Berat jenis minyak ikan menurut pustaka
0.917 Bobot jenis minyak ikan nila 0,917-0,9245
g/ml (250C) (Dirjen POM 1979)

Penetapan berat jenis dilakukan di labolatorium Universitas Setia Budi

dengan menggunakan bantuan alat piknometer serta timbangan analitik, dari hasi

pengukuran pada sampel minyak ikan nila didapatkan hasil sebesar 0,917. Hal

tersebut menunjukkan jika berat jenis minyak ikan nila tergolong dalam kriteria yang

terdapat pada pustaka yaitu 0.917- 0.9245. Perhitungan bobot jenis minyak ikan

dapat dilihat pada lampiran 15.

5. Hasil identifikasi kandungan kimia minyak ikan nila

Tabel 6. Kandungan asam lemak minyak ikan nila

BM RT Rumus Nama Golongan Luas

Molekul Area %
242 32,893 C15H30O2 Asam tetradekanoat ALJ 4,01%
metil ester
296 36,774 C19H36O2 Asam 9-heksadekanoat MUFA 7,66%
metil ester Omega-9
270 37,301 C17H34O2 Asam heksadekanoat ALJ 27,05%
metil ester
294 40,551 C19H34O2 Asam 9,12- PUFA 22,95%
Oktadekadeinoat metil Omega-6
ester
296 40,740 C19H36O2 Asam-9-oktadekanoat MUFA 28,21%
metil ester omega-9
296 40,825 C19H36O2 Asam 10-oktadekanoat MUFA 2,73%
metil ester
298 41,264 C19H38O2 Asam oktadekanoat ALJ 7,39%
metil ester

Identifikasi minyak ikan nila dilakukan di Labolatorium Fakultas MIPA ,

Universitas Gajah Mada, Yogyakarta, identifikasi dilakukan untuk mengetahui

adanya kandungan asam lemak tak jenuh pada minyak ikan nila yang dapat

berpotensi menurunkan kadar LDL pada tikus hiperlipidemia sekaligus mampu

 38

meningkatkan kadar HDL pada serum darah tikus. Hasil pengujian minyak ikan nila

menunjukkan adanya kandungan asam lemak takjenuh omega-9 dan omega-6 yang

termasuk dalam golongan MUFA dan PUFA. Omega-9 ditunjukkan pada R.Time

40,470 dengan luas area hingga 28,21% yang menunjukkan jika kadar omega-9 pada

minyak ikan nila cukup besar, sedangkan kandungan omega-6 di tunjukkan pada

R.Time 40,551 dengan luas area 22,95% Hasil identifikasi kromatografi gas dapat

dilihat pada lampiran 24.

6. Pembuatan dosis

6.1. Dosis simvastatin. Dosis kontrol positif ditentukan berdasarkan dosis

manusia dengan berat badan 70 kg. Kemudian dikonversi dari dosis manusia ke tikus

dengan BB 200 g dengan nilai konversi 0,018, Penelitian ini menggunakan dosis

Simvastatin 20 mg, yang dikoversi ke dosis tikus menjadi 0,36 mg/200 g BB tikus.

Dan kontrol negatif yang digunakan pada penelitian ini yaitu PGA 0,5% dengan

pemberian 1ml/200 g BB. Perhitungan dosis dapat dilihat pada lampiran 12.

6.2. Dosis minyak ikan. Dosis minyak ikan yang digunakan sesuai dosis

empiris atau dosis sebelumnya, menurut (Rachmat et al 2007) minyak ikan komersil

(PDO), pada dosis 3,2 ml, 1,6 ml dan 0,8 ml/200 g BB tikus dapat berpengaruh

terhadap sintesis kolesterol di dalam darah sehingga dijadikann sebagai acuan dosis

minyak ikan nila. Perhitungan dosis dapat dilihat pada lampiran 12.

6.3. Dosis pemberian diet tinggi lemak. Pemberian emulsi minyak babi

dilakukan secara oral dengan dosis 1ml/200 g BB tikus. Perhitungan dosis dapat

dilihat pada lampiran 12.

 39

B. Hasil penetapan kadar HDL dan LDL

Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini berupa tikus putih jantan

galur wistar dengan kriteria berat badan 100-200 g dan umur 2-3 bulan. Tikus putih

dipilih karena lebih mudah ditangani dan lebih resisten terhadap penyakit, data hasil

penimbangan berat tikus dapat dilihat pada lampiran 18.

Pemeriksaan kadar HDL dan LDL pada tikus dilakukan sebanyak tiga kali,

yaitu pada periode ke-0 (T0), periode ke-14 (T1) dan pada periode ke-21 (T2), metode

pemeriksaan pada penelitian ini adalah dengan menggunakan metode CHOD-PAP.

Kemudia pembacaan kadar HDL dan LDL menggunakan bantuan alat fotometer

stardust. Pemeriksaan hari ke-0 (T0) bertujuan untuk mengetahui kadar HDL dan

LDL hewan percobaan sebelum nantinya diberikan diet tinggi lemak atau sebelum

diberikan perlakuan. Pemberian diet tinggi lemak bertujuan untuk meningkatkan

kadar lipid di dalam darah, kadar lipid yang tinggi di dalam darah menunjukkan

adanya penumpukan lipid yang berlebih dalam plasma. Terutama kenaikan kadar

kolesterol total, LDL, trigliserid dan menurunnya kadar HDL. Kadar LDL yang

berlebih dalam darah dapat menyebabkan penebalan dinding pembuluh darah atau

arterosklerosis, Penyempitan pembuluh darah dapat menyebabkan terganggunya

suplai oksigen ke jantung dan dapat memicu terjadinya penyakit jantung koroner

(Iswani 2009).

Pemberian pakan tinggi lamak dilakukan selama 14 hari, setelah itu darah

diambil kembali untuk mengetahui adanya kenaikan kadar LDL setelah pemberian

pakan tinggi lemak (T1). Sedangkan pemeriksaan pada hari ke-21 bertujuan untuk

mengetahui pengaruh dosis minyak ikan nila terhadap penurunan kadar LDL dan
 40

meningkatnya kadar HDL dalam serum darah tikus sebagai (T2). Pada pemeriksaan

ini akan diketahui seberapa besar pengaruh minyak ikan dalam merunkan kadar LDL

dan meningkatkan kadar HDL pada tikus hiperlipidemia, minyak ikan mengandung

asam lemak tak jenuh yang dapat membantu penurunan kadar kolesterol, menurut

penelitian sebelumnya minyak ikan pada dosis 3.2 ml, 1.6 ml dan 0.8 ml /200 g BB

tikus dapat menurunkan kadar LDL dalam darah tikus.

1. Hasil rata-rata penurunan kadar LDL

Tabel 7. rata-rata kadar LDL serum darah tikus

kel Rata-rata kadar LDL ∆𝑻 ∆𝑻 Persentase

T-0 T-1 T-2 (T0-T1) (T2-T1) penurunan %
I 42.8 50.4* 44.6** 9.8 8 15.20%
II 46 73 65.4 27 7.6 10.41%
III 44 73.4 31.2** 29.4 42.2 57.49%
IV 44 70.4 51.4*** 26.4 24.2 34.37%
V 40.4 74.8 47*** 34.4 30.6 40.90%
VI 42.6 72.6 43.8** 34 28.8 39.66%

Keterangan
Kelompok I : Kelompok normal, tikus tidak diberi perlakuan sama sekali
Kelompok II :Kelompok negatif, larutan PGA 0,5%
Kelompok III : Kelompok positif, simvastatin dengan dosis 0.36 mg / 200 g BB tikus
Kelompok IV : Kelompok perlakuan dosis minyak ikan 0,8 ml / 200 g BB tikus
Kelompok V : Kelompok perlakuan dosis minyak ikan 1,6 ml / 200 g BB tikus
Kelompok VI : Kelompok perlakuan dosis minyak ikan 3,2 ml / 200 g BB tikus
T0 : sebelum diberi diet tinggi lemak
T1 : setelah peberian diet tinggi lemak
T2 : setelah pemberian dosis simvastatin dan minyak ikan
* : Berbeda nyata dengan kelompok perlakuan dan pembanding
** : Berbeda nyata dengan kelompok negatif (PGA 0.5%)
*** : Tidak berbeda nyata dengan kelompok negative (PGA 0.5%)
 41

LDL
80
70 Normal

60 Negatif PGA
50
Positif Simvastatin
40
30 Minyak ikan 0.8 ml
20
Minyak ikan 1.6 ml
10
0 minyak ikan 3.2 ml
T-0 T-1 T-2

Gambar 4. Grafik hubungan antara kadar LDL dengan waktu

Berdasarkan gambar 3 menunjukkan hasil rata-rata kadar LDL pada hari ke-

14 (T1) lebih tinggi dari pada hari ke-0 (T0), hal tersebut dikarenakan adanya

pemberian pakan tinggi lemak selama 14 hari. Kadar lemak yang berlebih di dalam

tubuh akan diabsorbsi usus dan masuk keperedaran darah, lemak merupakan senyawa

yang tidak larut dalam air sehingga lemak tersebut tidak dapat larut dalam plasma

darah. Agar lemak dapat diangkut ke peredaran darah, maka lemak tersebut dibuat

menjadi larut dengan mengikatnya pada protein larut air sehingga lemak akan

membentuk senyawa kompleks makromolekul dengan protein spesifik yang dapat

larut dalam plasma darah yang disebut lipoprotein.

Dalam plasma darah terdapat lima golongan lipoprotein yaitu kilomikron,

VLDL, IDL, LDL dan HDL. LDL sendiri merupakan lipoprotein yang bertugas

mengangkut kolesterol pada jaringan. Jika kadar kolesterol dalam darah meningkat

maka kadar LDL dalam darahpun meningkat guna memenuhi kebutuhan

pendistribusian kolesterol ke seluruh tubuh (Marks et all 2000). Nilai kadar LDL

dapat dilihat pada lampiran 16.

 42

Data yang diperoleh dari peningkatan kadar LDL pada hari ke-14 (T1)

kemudian dianalisis secara statistik dengan bantuan Software SPSS. Berdasarkan

hasil analisa tersebut pada uji One-way ANOVA satu jalan menunjukkan jika nilai

signifikan pada peningkatan kadar LDL (p < 0,05) dengan nilai sig. 0,000, dari

analisa tersebut menunjukkan adanya perbedaan bermakna pada kenaikan kadar LDL

tiap kelompok perlakuan, maka pengujian dilanjutkan dengan uji parametrik dengan

uji Tukey HSD Post hoc test untuk mengetahui kelompok yang memiliki perbedaan.

Dari hasil analisa SPSS pada uji Tukey HSD Post hoc test menunjukkan adanya

perbedaan bermakna pada kelompok I terhadap kelompok II, III, IV, V dan VI,

dimana kelompok tersebut sebagai kontrol pembanding tidak mendapat perlakuan

diet tinggi lemak. Sig. (p < 0,05), pada kelompok tersebut (normal) tidak terlalu

mengalami peningkatan kadar LDL darah dibandingkan kel II hingga VI, sedangakan

pada kelompok II hingga VI diperoleh nilai sig. (p > 0,05) sehingga dapat dinyatakan

bahwa kelompok II hingga VI mengalami peningkatan kadar LDL yang hampir sama.

Berdasarkan gambar 3 pada hari ke-21 (T2), menunjukkan adanya penurunan

kadar LDL pada masing masing kelompok. Hasil pengukuran kadar dari tiap

kelompok kemudian dianalisa secara statistik dengan uji One-sampel Kolmogorov

semirnov. Pada pengujian tersebut dikatakan terdistribusi normal jika nilai sig. (p >

0,05), dari hasil analisa didapat nilai sig. (p > 0,05) dengan nilai sig. 0,654 yang berarti

penurunan kadar LDL pada tiap kelompok terdistribusi normal.

Kemudian dilanjutkan dengan uji One-way ANOVA satu jalan untuk

mengetahui ada tidaknya perbedaan terhadap penurunan kadar LDL pada tiap

kelompok, dari hasil analisa tersebut didapatkan nilai sig. (p<0,05) dengan nilai sig.
 43

0,000. Sehingga dapat disimpulkan bahwa ada perbedaan bermakna pada penurunan

kadar LDL di setiap kelompok.

Untuk mengetahui perbedaan pada tiap kelompok. Maka pengujian

dilanjutkan dengan uji Tukey HSD post hoc test, perbedaan bermakna dimiliki oleh

kelompok II terhadap kelompok I (kelompok normal), III (dosis simvastatin 0,18mg

200 g BB) dan kelompok VI (dosis minyak ikan 3,2 ml/ 200g BB). Dengan nilai sig.

(p<0,05). Dan tidak berbeda nyata terhadap kelompok kelompok IV dan V pada dosis

minyak ikan 0,8 dan 1,6 ml/ 200 g BB, dengan sig. (p > 0,05) sehingga dapat

dikatakan bahwa minyak ikan dengan dosis 0.8 dan 1.6 ml/200 g BB kurang efektif

dalam menurunkan kadar LDL dalam plasma darah dibandingkan dosis 3,2 ml/ 200

g BB. Tetapi minyak ikan dengan dosis 1,6 ml/200 g BB memiliki nilai sig. (p >

0,05) terhadap kelompok I sebagai kontrol positif, dengan kata lain minyak ikan pada

dosis 1,6 ml/200 g BB juga berpengaruh terhadap kadar LDL dan memiliki efek yang

sama dengan kontrol positif sebagai antihiperlipidemia.

Berdasarkan hasil Tukey HSD post hoc test menunjukkan. Jika simvastatin

sebagai kontrol positif memiliki nilai rata-rata paling baik dalam menurunkan kadar

LDL dalam darah. Rata-rata penurunan kadar LDL dalam darah hingga 31,20 mg/dL

dengan persentase penurunan sebesar 57,49%. Simvastatin mampu menurunkan

kadar LDL darah melalui penghambatan HMG-CoA reduktase secara kompetitif

pada proses sintesis kolesterol di hati. Simvastatin akan menghambat HMG-CoA

reduktase kemudian mengubah asetil-CoA menjadi asam mevalonat (Witztum 1996).

Simvastatin juga meningkatkan jumlah reseptor LDL sehingga metabolisme LDL di

dalam darah lebih cepat dan meningkatkan pembersihan LDL dalam plasma
 44

(Katzung 2002). Berdasarkan hasil analisa statistik pada uju yang sama menunjukkan

minyak ikan pada dosis 1,6 ml/200g BB mampu menurunkan kadar LDL hingga

40,90%. sedangkan minyak ikan pada dosis 3,2 ml/200 g BB mampu menurunkan

kadar LDL hingga 39,66%. dengan rata rata penurunan sebesar 51,40 mg/dL

Tabel 8. Rata-rata kadar HDL

Rata-rata kadar LDL ∆𝑻 ∆𝑻 Persentase

Kel T-0 T-1 T-2 (T0-T1) (T2-T1) peningkatan %
I 49,2 69* 67** 19,8 2 2,98 %
II 51,8 41,2 44,8 10,6 3,6 8%
III 53,2 45,8 75,4*** 7,4 29,6 39,25 %
IV 52,2 42,6 59** 9,6 16,4 27,79 %
V 52,6 42,8 64,4** 9,8 21,6 33,54 %
VI 53,2 41,4 65** 11,8 23,6 36,30 %

Keterangan
Kelompok I : Kelompok normal, tikus tidak diberi perlakuan sama sekali
Kelompok II :Kelompok Negatif, larutan PGA dengan dosis 1 ml/ 200 g BB tikus.
Kelompok III : Kelompok positif, simvastatin dengan dosis 0.36 mg/ 200 g BB tikus
Kelompok IV : Kelompok perlakuan dosis minyak ikan 0,8 ml / 200 g BB tikus
Kelompok V : Kelompok perlakuan dosis minyak ikan 1.6 ml / 200 g BB tikus
Kelompok VI : Kelompok perlakuan dosis minyak ikan 3.2 ml / 200 g BB tikus
T0 : sebelum diberi diet tinggi lemak
T1 : setelah pemberian diet tinggi lemak
T2 : setelah pemberian dosis simvastatin dan minyak ikan
* : Berbeda nyata dengan kelompok perlakuan dan kelompok negative
** : Berbeda nyata dengan kelompok negative PGA 0.5%
*** : Tidak berbeda nyata dengan kelompok negative PGA 0.5%
 45

HDL
80
normal
70
negatif PGA
60
Positif simvastatin
50
minyak ikan 0.8 ml
40
minyak ikan 1.6 ml
30
minyak ikan 3.2 ml
20

10

0
T-0 T-2 T-3

Gambar 5. Grafik hubungan antara kadar HDL dengan waktu

Berdasarkan gambar 4. Kadar HDL pada serum darah tikus menunjukkan

adanya perubahan dari kadar awal (T0) hinga hari ke-21 (T2 ). Terlihat pada grafik

tersebut adanya penurunan nilai rata-rata kadar HDL pada hari ke-14 (T1) setelah

diberikannya diet tinggi lemak. Kadar lemak yang tinggi dalam darah dapat

menyebabkan hiperkolesterolemia, di mana kondisi tersebut dapat memicu

penurunan kadar HDL di dalam darah. Kadar kolesterol yang tinggi dalam darah

dapat memicu penurunan apoprotein A-1 yang merupakan perkusor untuk

pembentukan HDL. Kondisi hiperkolesterolemia juga dapat menyebabkan

peningkatan katabolisme apoprotein A-1 HDL dengan menambah trigliserid

sementara mengurangi kolesterol ester pada inti HDL (Setyaji 2011).

Dapat dilihat pada kelompok II hingga VI terjadi penurunan kadar HDL,

sedangkan pada kelompok pembanding (normal) kadar HDL hanya sedikit

mengalami penurunan, dari hasil analisa statistik pada penurunan kadar HDL

menunjukkan jika kadar HDL terdistribusi normal pada tiap kelompok dengan nilai
 46

sig. (p>0.05). Sedangkan pada hari ke-21 (T2) menunjukkan adanya peningkatan

kadar HDL pada kelompok III hingga VI setelah pemberian dosis simvastatin dan

minyak ikan.

Dari hasil analisa secara statistik, pada uji One-sample Kolmogorov smirnov

menunjukkan jika peningkatan kadar HDL pada tiap kelompok terdistribusi normal

dengan nilai sig.(p > 0,05). Sedangkan pada uji One-way ANOVA satu jalan didapat

nilai sig. (p < 0.05) dari hasil analisis tersebut dapat diambil kesimpulan jika terdapat

perbedaan bermakna pada peningkatan kadar HDL di tiap kelompok perlakuan.

sehingga dilanjutkan dengan uji parametrik menggunakan uji Tukey HSD post hoc

test untuk mengetahui kelompok yang memiliki perbedaan, perbedaan nyata dimiliki

oleh kelompok II terhadap kelompok I, III, V dan VI tetapi tidak berbeda nyata

dengan kelompok IV, yang artinya minyak ikan pada dosis 0,8 ml/200 g BB tidak

begitu memiliki efek yang baik terhadap peningkatan kadar HDL di bandingkan

dengan dosis 1,6 dan 3,2 ml/ 200 g BB .

Sedangkan pada kelompok I sebagai kontrol pembanding menunjukkan nilai

sig. (p > 0,05) terhadap kelompok III hingga VI, hal tersebut menunjukkan jika pada

kelompok III hingga VI mengalami peningkatan kadar HDL kembali hingga

mencapai kadar awal setelah pemberian perlakuan dosis simvastatin dan minyak

ikan. Peningkatan kadar HDL dapat dilihat pada lampiran 23.

Berdasarkan tabel 9 pada kelompok III, kontrol positif simvastatin

menunjukkan peningkatan kadar HDL hingga 39,25 % dengan rata-rata peningkatan

kadar HDL hingga 75,40 mg/dL. Sedangkan minyak ikan pada dosis 3,2 ml/200 g

BB mampu meningkatkan kadar HDL hingga 65,00 mg/dL, pada dosis 1,6 ml/ 200
 47

g BB mampu meningkatkan kadar HDL hingga 64,40 mg/dL sedangkan pada

kelompok IV minyak ikan dengan dosis 0.8 ml/200 g BB mampu meningkatkan

kadar HDL hingga 59,00 mg/dL. Hal tersebut menunjukkan jika semakin besar dosis

minyak ikan nila maka semakin besar pengaruhnya terhadap penurunan kadar LDL

serta meningkatan kadar HDL dalam darah tikus.

Kolesterol HDL sendiri mempunyai peranan yang penting dalam

hiperlipidemia sehingga kadarnya dalam darah dapat dijadikan sebagai salah satu

sasaran terapi pada penderita hiperlipidemia. Setelah disekresi oleh darah, HDL akan

mengalami perubahan serta akan menyerap kolesterol dari permukaan sel dan

lipoprotein lain, dan akan mengubahnya menjadi ester kolesterol kemudian

dikembalikan lagi ke hati , sehingga HDL berperan penting dalam pengangkutan

balik kolesterol dalam tubuh.

Minyak ikan mengandung asam lemak tak jenuh yang berpengaruh terhadap

penurunan kadar LDL di dalam tubuh, pada minyak ikan terdapat asam lemak tak

jenuh PUFA yang bekerja menghambat skresi kolesterol dengan cara menghambat

produksi serta sekresi partiket VLDL dan LDL apolipoprotein B bersama dengan

pengaturan aktifitas lipolisis plasma (klirens lipoprotein lipase) serta merangsang

oksidasi asam lemak lainnya di hati (Syarif 2011). Dalam uji kromatografi gas yang

dilakukan oleh pihak fakultas MIPA, Universitas Gajah Mada menunjukkan adanya

kandungan asam lemak tak jenuh asam-9-oktadekanoat metil ester dengan rumus

molekul (C19H36O2) omega-9 dan asam 9,12-Oktadekadeinoat metil ester omega-6

yang termasuk dalam golongan MUFA dan PUFA dalam minyak ikan nila, asam

lemak tak jenuh MUFA baik untuk kesehatan karena pada asam lemak tak jenuh
 48

tersebut berpengaruh terhadap kadar kolesterol dalam tubuh (Covas et all 2008).

Salah satu jenis MUFA omega-9 (oleat) memiliki daya perlindungan yang

mampu menurunkan kadar LDL kolesterol darah, serta meningkatkan kadar HDL

kolesterol yang lebih besar dibandingkan omega-3 dan dapat mencegah terjadinya

penyakit jantung koroner (Haryadi 2006). Asam lemak omega-9 juga melindungi

kolesterol HDL dari oksidasi, sehingga tidak terjadi hambatan laju pengambilan

kolesterol di jaringan (Rahma 2008) Selain itu omega-6 juga berpengaruh terhadap

penurunan kadar LDL, yaitu dengan cara mengurangi absorbsi kolesterol termasuk

trigliserid dan lemak makanan dalam sintesis pencernaan. Pengurangan absorbsi

kolesterol tersebut dilakukan dengan cara mengikat molekul lemak tersebut agar

tidak terserap oleh mukosa usus (Santoso 2013).

Pada penelitian ini didapatkan perubahan kadar LDL dan HDL pada serum

darah yang bervariasi meskipun dalam satu kelompok perlakuan yang sama.

Kemungkinan hal tersebut disebabkan oleh faktor internal dari tikus tersebut seperti

kondisi psikologis tikus selama perlakuan. Berdasarkan hasil pada penelitian ini dapat

diambil kesimpulan jika minyak ikan pada dosis 3,2 ml/200 g BB berpengaruh

terhadap kadar HDL dan LDL pada tikus hiperlipidemia tetapi kurang efektif jika

dibandingkan dengan kontrol positif di mana dosis subterapi yang digunakan pada

penelitian menunjukkan penurunan dan peningkatan kadar HDL dan LDL pada tikus

hiperlipid jauh lebih baikjika dibandingkan dengan dosis minyak ikan nila, hal tersebut

kemungkinan di sebabkan oleh kandungan asam lemak tak jenuh pada minyak ikan

nila kurang besar di mana persentase total kandungan asam lemak tak jenuh pada

minyak ikan nila dalam penelitian ini sebesar 61,55% sehingga kadar aktif minyak
 49

ikan yang berpotensi menurunkan kadar LDL dalam darah tikus hiperlipidemia kurang

maksimal.
 BAB V

A. Kesimpulan

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan maka dapat disimpulkan sebagai

berikut :

Pertama pemberian minyak ikan nila dapat menurunkan kadar LDL pada

tikus hiperlipidemia dan mampu memperbaiki kadar HDL di dalam darah.

Kedua dosis minyak ikan 3,2 ml/200 g BB berpengaruh terhadap kadar HDL

dan LDL pada tikus hiperlipidemia namun kurang efektif jika dibandingkan dengan

dosis simvastatin.

B. Saran

Pertama perlu dilakukannya penelitian tentang efek minyak ikan air tawar

dari jenis yang berbeda terhadap kadar kolesterol pada serum darah.

Kedua perlu dilakukannya penelitian dengan menggunakan metode ekstraksi

selain metode Dry rendering dalam menarik minyak pada ikan.

50
 Daftar pustaka

Almatsier, S., 2002, Prinsip Dasar Ilmu Gizi, PT. Gramedia Pustaka Utama,
Jakarta. Penerbit Universitas Indonesia. Hal 97-101

Anwar T, Bahri, 2003, Ilmu Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara, E-Usu
Repository digitized by USU digital library

Astawan, M. 2004. Tetap Sehat dengan Produk Makanan Olahan. Tiga Serangkai.
Solo. Hal 117

Dalimartha S. 2007. 36 Resep Tumbuhan Obat untuk Menurunkan Kolesterol.

Jakarta: Penerbit Swadaya. hlm 1-13

Dalimartha S. 2008. 36 Resep Tumbuhan Obat untuk Menurunkan Kolesterol.

Jakarta: Penebar Swadaya. Hlm 8-10

Dr. Handrawan Nadesul.2009.Resep Mudah Tetap Sehat. Jakarta. PT. Kompas

Media Nusantara. hlm 15-20

Dwiratna, R. 2010. Pengaruh pemberian ekstrak bawang merah (Allium

ascaloonicum) terhadap kadar kolesterol-LDL serum tikus
hiperlipidemia. Semarang: Fakultas kedokteran, Universitas
Diponegoro.

Dirjen POM Departemen Kesehatan republik Indonesia. 1979. Farmakope Indonesia.

Edisi III. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia . Hal. 639

Estiasih, T. 2009. Minyak Ikan Teknologi dan Penerapannya untuk Pangan dan
Kesehatan. Graha Ilmu. Yogyakarta. Hlm 69-72

Estruch, R, Gonzales, M.A.M., corella, D., salvado, J.S., Gutierrez, V.R., Covas, M.I.,
et al. 2008. Effects of a Mediterranean Style Diet on Cardiovascular Risk
Factors. Annals of internal medicine.

Garg, R., & Gupta, G.D., 2008, Progress in Controlled Gastroretentive Delivery
Systems, Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 7(3), Hal 1055-
1066.

Guyton A.C. and J.E. Hall 2007. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 9. Jakarta:
EGC. 74,76, 80-81, 244, 248, 606,636,1070,1340

Hardhani, A. S. 2008. Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Salam (Eugenia Polyantha)

Terhadap Kadar Trigliserida Serum Tikus Jantan Galur Wistar

5051
 52

Hiperlipidemia. Artikel Penelitian Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro,

Semarang.

Harini,M., DA, Okid. 2009. Blood Cholesterol Level of Hypercholesterolemia Rat

(Rattus norvegicus) After VCO Treatment. Journal Bioscience Vol 1 No
2 : 53-58

Hartoyo, et all. 2008. Pengaruh Fraksi Karbohidrat Kacang Komak (Lablab

79Purpureus (L) Sweet). Jurnal teknologi dan industri pangan, 19: 25-31

Haryadi, Triono., 2006, Fraksi asam lemak omega-3,6 dan omega-9 dari Daging
Bekicot (Achatina fulica)menggunakkan kolom kromatografi. Sekip Utara,
UGM, Yogyakarta. Hal 316-321

Herlialna, E., STP. 2009, Solusi Sehat Mengatasi Kolesterol Tinggi, Agromedia
Pustaka : PT Agromedia pustaka. Hlm 1-11

Herwiyarirasanta., BA, Eduardus. 2010. Effect of Black Soybean Extract

Supplementation in Low Density Lipoprotein Level of Rats (Rattus
norvegicus) With High Fat Diet. Science Article UniversitasAirlangga.
Surabaya. Indonesia. Vol 10

Katzung, B. G. (2002). Farmakologi Dasar dan Klinik, edisi II. Jakarta, Salemba
Medika. Halaman 671, 677-678.

Ketaren, S. 2008. Pengantar Teknologi Minyak Lemak Dan Pangan. UI. Press.
Jakarta. Hlm 99

Khairuman et all. 2005. Budidaya Ikan Nila secara Intensif (Cetakan Keempat). PT
Agromedia Pustaka. Jakarta Selatan. Hlm 15-18

Kurniawan, A. 2013. Analisis Komponen Asam Lemak Pada Minyak Ikan Nila
(Oreochomis niloticus) secara GC-MS. [SKRIPSI] Medan: Fakultas
Farmasi. Universitas Sumatera Utara.

Mamat Supriyono. 2008. Faktor-faktor Risiko yang Berpengaruh Terhadap Kejadian

Penyakit Jantung Koroner pada Kelompok Usia ≤ 45 Tahun. Program
Pasca Sarjana Magister Epidemiologi Universitas Diponegoro Semarang.
http://eprints.undip.ac.id. (20 desember 2009).

Marks Dawn B, Marks Allan D, Smith Colleen M. Biokimia kedokteran dasar : Sebuah
pendekatan klinis, Edisi 1, Jakarta, : EGC, 2000.h.513-30

Micallef MA dan Garg ML (2008). The Lipidlowering effects of phytosterols and (n-
3) polyunsaturated fatty acids are synergistic and complementary in
hyperlipidemic men and women. The Journal of Nutrition 138: 1086–
1090.
 53

Munaf, S., 2008. Kumpulan Kuliah Farmakologi. Palembang: EGC. Hlm 98

Muttaqin, A. Editor Nurachmach, E. (2009). Asuhan Keperawatan Klien

Gangguan Sistem Kardiovaskuler. Jakarta: Salemba Medika. Hal 35

Nadesul, Handrawan, 2009. Sehat Itu Murah. Jakarta PT. Kompas Media
Nusantara. hlm 8

Nurachmach.2009. Pengantar Asuhan Keperawatan Klien Dengan Gangguan

Sistem Kardiovaskuler. Jakarta. Selamba Medica. Hlm 57-59

Pandit S, 2008. Optimalkan Distribusi Hasil Perikanan, http://www.balipost.co.id,

diakses tanggal 02 Oktober 2008

Raharja, R., 2004. Kumpulan kuliah farmakologi, Ed.2. Jakarta. buku kedokteran
EGC. Hlm 406-414

Rachmat et al.2007. Pengaruh Minyak Ikan PDO Yang Kaya Akan Kandungan
Omega-3 Terhadap Sintesis kolesterol Pada tikus. Labolatorium
Biofarmasetika dan Diagnostik, Puslit Bioteknologi-LIPI. Vol 1

Rahma, W.N. 2008. Potensi aktivitas ekstrak etanol daun dewandaru sebagai agen
penghelat logam Fe dan penangkap malonaldehid [SKRIPSI]. Fakultas
Farmasi. UMS. Surakarta.

Rasyid A. 2003. Asam lemak omega-3 dari minyak ikan. Oseana Volume XXVIII
(Nomor 3): 11-16.

Ruslianti, 2014. Kolesterol Tinggi Bukan Untuk Ditakuti. Jakarta : Argo Media
Pustaka. Hal 10

Santoso Arif, dkk., 2013. Penggunaank Pakan Fungsional Mengandung Omega 3,

Probiotik Isolat Antihistamin N3 Terhadap Kadar Lemak dan Kolesterol
Kuning Telur Ayam Kampung. Jurnal Ilmiah Ternak. Fakultas
Peternakan. Universitas Jendral Sudirman. Purwokerto Vol 1

Setyaji, DY. 2011. Pengaruh Pemberian Nata De Coco Terhadap Kadar Kolesterol
LDL Dan HDL Pada tikus hiperkolesterolesmia (Artikel penelitian)
Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro

Smith, J.B. dan Mangkoewidjojo, S., (1998), Pemeliharaan, Pembiakan

danpenggunaan Hewan percobaan di Daerah Tropis, Jakarta;
Universitas Indonesia. Hlm 37-57
Suyatna, 1995. Hipolipidemik. In: Departemen Farmakologi dan TerapeutikFK UI.
Farmakologi dan Terapi Edisi 4. Fakultas Kedokteran UI. Hal 374-375
 54

Syarif, 2011. Efek Suplementasi Serat Chitosan dengan Omega-3 dalam Minyak Ikan
Terhadap Trigliserida Plasma dan Kolesterol Total pada Pekerja Obes.
Sun Hope Nutrisi, Jakarta. Vol.2/NO.1/JANUARI/2011

Widyaningsih W. 2011. Efek ekstrak etanol rimpang temugiring (Curcuma heynaena

val) terhadap kadar trigliserida. Jurnal Ilmiah Kefarmasian 1(1): 55-65.

Witztum, J.L. (1996). Drugs Used in tha Treatment of Hyperlipoproteinemias. In:

Molinoff, P.B., and Ruddon, R.W. (editor). Goodman & Gilman’s The
Pharmacological Basic Of Therapeutics. Ninth Edition. New York :
McGraw Hill, Inc. Page 887.
L
A
M
P
I
R
A
N
 55

Lampiran 1. Surat Keterangan identifikasi ikan nila

 56

Lampiran 2. Surat keterangan hewan uji.

 57

Lampiran 3. Foto ikan nila dan minyak ikan nila.

Ikan nila (Oreochromis niloticus)

Minyak ikan nila

 58

Lampiran 4. Foto alat dan bahan pembuatan minyak ikan

C. Daging ikan nila yang sudah D. Kepala dan duri ikan nila
dipotong-potong
 59

Lampiran 5. Foto alat pengujian berat jenis dan indeks bias

Piknometer

Refraktrometer
 60

Lampiran 6. Hasil pemeriksaan indeks bias

 61

Lampiran 7. Foto larutan stok sediaan uji

Gambar larutan stok PGA dan Simvastatin

Gambar minyak ikan

 62

Lampiran 8. Foto alat dan reagen HDL dan LDL

alat sentrifuge
Alat foto stardust

Reagen HDL Precipitant Standar trigliserida

 63

Lampiran 9. Foto kandang hewan uji, jarum oral dan pipa kapiler

Kandang hewan uji

Jarum oral

Pipa kapiler
 64

Lampiran 10. Foto pemberian sediaan secara oral dan pengambilan sampel
darah

Pemberian sediaan secara oral

Pengambilan sampel darah

 65

Lampiran 11. Perhitungan persentase minyak ikan nila

Berat ikan nila (gram) Volume minyak ikan Rendemen (%)
nila (ml)
15.000 421 2,8

Rendemen dapat diperoleh dengan rumus :

𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑚𝑖𝑛𝑦𝑎𝑘 𝑖𝑘𝑎𝑛
Rendemen = × 100%
𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑖𝑘𝑎𝑛 𝑛𝑖𝑙𝑎
421 𝑚𝑙
Rendemen = 15.000 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 100%

Rendemen = 2,8 %v/b

Kesimpulan: rendemen volume minyak ikan nila terhadap berat ikan nila yang
didapat adalah 2,8 % v/b
 66

Lampiran 12. Perhitungan dosis perlakuan

A. Perhitungan dosis dan volume pemberian PGA 0,5%
PGA 0,5% = 0,5 gram/100 ml
= 500 mg/100ml
= 5 mg/ml
Dibuat larutan stok, dengan cara melarutkan PGA 0,5 dengan aqua dest sampai
100 ml.
160 𝑔𝑟𝑎𝑚
1. Tikus dengan berat badan 160 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 5 𝑚𝑔 = 4 𝑚𝑔
4 𝑚𝑔
Volume pemberian = 5 𝑚𝑔 × 1 𝑚𝑙 = 0,8 𝑚𝑙
155 𝑔𝑟𝑎𝑚
2. Tikus dengan berat badan 155 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 5 𝑚𝑔 = 3,88 𝑚𝑔
3,88 𝑚𝑔
Volume pemberian = × 1 𝑚𝑙 = 0,7 𝑚𝑙
5 𝑚𝑔
165 𝑔𝑟𝑎𝑚
3. Tikus dengan berat badan 165gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 5 𝑚𝑔 = 4,12 𝑚𝑔
4,12 𝑚𝑔
Volume pemberian = × 1 𝑚𝑙 = 0,8 𝑚𝑙
5 𝑚𝑔
160 𝑔𝑟𝑎𝑚
4. Tikus dengan berat badan 160 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 5 𝑚𝑔 = 4 𝑚𝑔
4 𝑚𝑔
Volume pemberian = 5 𝑚𝑔 × 1 𝑚𝑙 = 0,8 𝑚𝑙
165 𝑔𝑟𝑎𝑚
5. Tikus dengan berat badan 165 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 5 𝑚𝑔 = 4,13 𝑚𝑔
4,13 𝑚𝑔
Volume pemberian = × 1 𝑚𝑙 = 0,8 𝑚𝑙
5 𝑚𝑔
B. Perhitungan dosis dan volume pemberian obat simvastatin.
Untuk obat simvastatin 20 mg konversi dosis dari manusia dengan berat badan
70 kg ke tikus dengan berat badan 200 gram adalah 0,018
Pemakaian untuk 1 hari = 2 × 20 mg = 40 mg
Dosis tikus = 20 mg × 0,018 = 0,36 mg/200 g BB tikus
Larutan stok 0,036 % = 0,036 gram/ 100 ml
= 36 mg/ 100 ml
= 0,36 mg/ ml
0,5995
Bobot tiap tablet yang berisi 20 mg simvastatin = = 0,1998
3

𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 𝑡𝑖𝑘𝑢𝑠
Pengambilan serbuk = 𝑑𝑜𝑠𝑖𝑠 𝑠𝑖𝑚𝑣𝑎𝑠𝑡𝑎𝑡𝑖𝑛 × 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑡𝑎𝑏𝑙𝑒𝑡
0,36 𝑚𝑔
= × 0,1998 = 0,0035 × 100 𝑚𝑙 = 0,35 𝑔
20 𝑚𝑔
 67

Menggerus 2 tab simvastatin dan ditimbang sejumlah 0,35 kemudian dilarutkan

dalam PGA 0,5 % sampai volume 100 ml dan selanjutnya digunakan sebagai
0,36 𝑚𝑔
larutan stok volume oral = 0,36 𝑚𝑔 × 1 𝑚𝑙 = 1 𝑚𝑙

165 𝑔𝑟𝑎𝑚
1. Tikus dengan berat badan 165 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 0,36 𝑚𝑔 = 0,3 𝑚𝑔
0,3 𝑚𝑔
Volume pemberian = × 1 𝑚𝑙 = 0,83𝑚𝑙
0,36𝑚𝑔
155 𝑔𝑟𝑎𝑚
2. Tikus dengan berat badan 155 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 0,36 𝑚𝑔 = 0,3 𝑚𝑔
0,3 𝑚𝑔
Volume pemberian = × 1 𝑚𝑙 = 0,83𝑚𝑙
0,36𝑚𝑔
160 𝑔𝑟𝑎𝑚
3. Tikus dengan berat badan 160 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 0,36 𝑚𝑔 = 0,3 𝑚𝑔
0,3 𝑚𝑔
Volume pemberian = × 1 𝑚𝑙 = 0,83𝑚𝑙
0,36𝑚𝑔
165 𝑔𝑟𝑎𝑚
4. Tikus dengan berat badan 165 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 0,36 𝑚𝑔 = 0,3 𝑚𝑔
0,3 𝑚𝑔
Volume pemberian = × 1 𝑚𝑙 = 0,83𝑚𝑙
0,36𝑚𝑔
160 𝑔𝑟𝑎𝑚
5. Tikus dengan berat badan 160 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 0,36 𝑚𝑔 = 0,3 𝑚𝑔
0,3 𝑚𝑔
Volume pemberian = × 1 𝑚𝑙 = 0,83𝑚𝑙
0,36𝑚𝑔

C. Perhitungan dosis dan volume pemberian minyak ikan.

Dosis I = 0,8 ml
160
1. Tikus dengan berat badan 160 gram = × 0,8 𝑚𝑙 = 0.64𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
160
2. Tikus dengan berat badan 160 gram = × 0,8 𝑚𝑙 = 0.64𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
170
3. Tikus dengan berat badan 170 gram = × 0,8 𝑚𝑙 = 0.68 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
165
4. Tikus dengan berat badan 165 gram = × 0,8 𝑚𝑙 = 0.66 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
165
5. Tikus dengan berat badan 165 gram = × 0,8 𝑚𝑙 = 0.66𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚

Dosis II = 1,6 ml
165
1. Tikus dengan berat badan 165 gram = × 1,6 𝑚𝑙 = 1.32 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
170
2. Tikus dengan berat badan 170 gram = × 1,6 𝑚𝑙 = 1.36 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
165
3. Tikus dengan berat badan 165 gram = × 1,6 𝑚𝑙 = 1.32 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
 68

150
4. Tikus dengan berat badan 150 gram = × 1,6 𝑚𝑙 = 1.28𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
170
5. Tikus dengan berat badan 170 gram = × 1,6 𝑚𝑙 = 1.36 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚

Dosis III = 3,2 ml

155
1. Tikus dengan berat badan 155 gram = × 3,2 𝑚𝑙 = 2.48 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
155
2. Tikus dengan berat badan 155 gram = × 3,2 𝑚𝑙 = 2.48𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
170
3. Tikus dengan berat badan 170 gram = × 3,2 𝑚𝑙 = 2.72 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
160
4. Tikus dengan berat badan 160 gram = × 3,2 𝑚𝑙 = 2.56 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
165
5. Tikus dengan berat badan 165 gram = × 3,2 𝑚𝑙 = 2.64 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚

D. Pemberian doss lemak babi

a. Kelompok negatif
160 𝑔𝑟𝑎𝑚
1. Tikus dengan berat badan 160 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
155 𝑔𝑟𝑎𝑚
2. Tikus dengan berat badan 155 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 1𝑚𝑙 = 0.7 𝑚𝑙
165 𝑔𝑟𝑎𝑚
3. Tikus dengan berat badan 165gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
160 𝑔𝑟𝑎𝑚
4. Tikus dengan berat badan 160 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
165 𝑔𝑟𝑎𝑚
5. Tikus dengan berat badan 165 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙

b. Kelompok positif
165 𝑔𝑟𝑎𝑚
Tikus dengan berat badan 165 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
155 𝑔𝑟𝑎𝑚
Tikus dengan berat badan 155 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 1𝑚𝑙 = 0.7 𝑚𝑙
160 𝑔𝑟𝑎𝑚
Tikus dengan berat badan 160 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
165 𝑔𝑟𝑎𝑚
Tikus dengan berat badan 165 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
160 𝑔𝑟𝑎𝑚
Tikus dengan berat badan 160 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚 × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
 69

c. Kelompok dosis minyak ikan dosis 0.8 ml

160
Tikus dengan berat badan 160 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
160
Tikus dengan berat badan 160 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
170
Tikus dengan berat badan 170 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.9 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
165
Tikus dengan berat badan 165 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
165
Tikus dengan berat badan 165 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚

d. Kelompok dosis minyak ikan 1.6 ml

165
Tikus dengan berat badan 165 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
170
Tikus dengan berat badan 170 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.9 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
165
Tikus dengan berat badan 165 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
150
Tikus dengan berat badan 150 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.75𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
170
Tikus dengan berat badan 170 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.9 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚

e. Kelompok dosis minyak kan 3.2 ml

155
Tikus dengan berat badan 155 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
155
Tikus dengan berat badan 155 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.8𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
170
Tikus dengan berat badan 170 gram = 200 𝑔𝑟𝑎𝑚
× 1𝑚𝑙 = 0.9 𝑚𝑙
160
Tikus dengan berat badan 160 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
165
Tikus dengan berat badan 165 gram = × 1𝑚𝑙 = 0.8 𝑚𝑙
200 𝑔𝑟𝑎𝑚
 70

Lampiran 13. Perhitungan indeks bias minyak ikan nila.

Indeks bias minyak ikan pada suhu Pustaka
1, 4772 1,478-1,482 (250C)
Perhitungan:
Faktor konversi suhu pada setiap kenaikan 10C = 0,0004
Indeks bias teoritis 250C = 1,478-1,482
Suhu praktek = 250C
Perhitungan
= (25-25)× 0,0004 = 0
Jadi indeks bias
= (1,478+0)-(1,482+0)
= 1,478-1,482
 71

Lampiran 14. Perhitungan berat jenis minyak ikan nila.

Botol timbang kosong Botol timbang + minyak Bobot minyak (gram)

(gram) ( gram)
28,383 75,378 46,995
28,383 75,355 46,972
28,383 75,345 46,962
Rata-rata 46,976

Perhitungan bobot jenis:

Botol timbang + air = 79,534
Botol timbang kosong = 28,383
Bobot air = 51,151
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑚𝑖𝑛𝑦𝑎𝑘 46,995
Bobot jenis minyak ikan = = 51,151 = 0,918
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑖𝑟

Botol timbang + air = 79,596

Botol timbang kosong = 28,383
Bobot air = 51,213
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑚𝑖𝑛𝑦𝑎𝑘 46,972
Bobot jenis minyak ikan = = = 0,917
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑖𝑟 51,213

Botol timbang + air = 79,511

Botol timbang kosong = 28,383
Bobot air = 51,128
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑚𝑖𝑛𝑦𝑎𝑘 46,962
Bobot jenis minyak ikan = = 51,128 = 0,918
𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑎𝑖𝑟

0,918 +0,917+0,918
Rata-rata bobot jenis minyak ikan = = 0,917
3

Jadi bobot jenis minyak ikan adalah 0,917

Perhitungan konversi suhu ruang dalam percobaan bobot jenis:
Faktor konversi suhu pada setiap kenaikan 10 C = 0,0007
Bobot jenis teoritis 250C = 0,917-0,9245
 72

Suhu ruang praktek = 250C

Perhitungan:
= (25-25)× 0,0007 = 0
Jadi bobot jenis teoritis pada suhu 250C
= (0,917+0)-(0,9245+0)
= 0,917-0,9245
Bobot jenis menurut praktek adalah 0,917
Jadi bobot jenis praktek sesuai dengan bobot jenis menurut pustaka.
 73

Lampiran 15. Kadar HDL tiap kelompok perlakuan

kelompok replikasi Hari ke-0 Hari ke-14 Hari ke-21
(T0) (T1) (T2)
Kontrol 1 50 76 69
normal 2 47 63 60
3 47 79 73
4 49 65 68
5 53 62 65
Rata-rata 49.2 69 67
Kelompok 1 43 36 41
negatf 2 54 46 49
3 68 48 50
4 52 41 44
5 42 35 40
Rata-rata 51.8 41.2 44.8
Kelompok 1 58 43 72
positif 2 59 45 78
3 47 46 71
4 51 49 76
5 51 46 80
Rata-rata 53.2 45.8 75.4
Kelompok 1 49 35 63
dosis I 2 62 50 48
3 43 60 75
4 56 36 55
5 51 32 54
Rata-rata 52.2 42.6 59
Kelompok 1 58 43 65
dosis II 2 46 40 59
3 56 41 70
4 42 44 58
5 61 46 70
Rata-rata 52.6 42.8 64.4
Kelompok 1 55 60 71
dosis III 2 56 38 60
3 51 34 58
4 50 35 69
5 54 40 67
Rata-rata 53.2 41.4 65
 74

Lampiran 16. Kadar LDL tiap kelompok

kelompok replikasi Hari ke-0 Hari ke-14 Hari ke-21
(T0) (T1) (T2)
Kontrol 1 43 47 42
normal 2 45 53 39
3 42 57 49
4 39 52 50
5 45 54 43
Rata-rata 42.8 50.4 44.6
Kelompok 1 43 55 47
negatf 2 44 89 84
3 55 70 66
4 40 74 70
5 48 77 60
Rata-rata 46 73 65.4
Kelompok 1 44 76 40
positif 2 51 80 28
3 37 76 30
4 47 66 34
5 41 69 24
Rata-rata 44 73.4 31.2
Kelompok 1 40 67 55
dosis I 2 42 70 54
3 40 54 53
4 47 78 40
5 51 83 55
Rata-rata 44 70.4 51.4
Kelompok 1 42 71 51
dosis II 2 40 75 48
3 45 75 46
4 36 83 45
5 39 70 55
Rata-rata 40.4 74.8 47
Kelompok 1 52 81 39
dosis III 2 37 72 40
3 37 70 45
4 38 55 40
5 49 85 55
Rata-rata 42.6 72.6 43.8
 75

Lampiran 17. Data penimbangan berat badan tikus

kelompok replikasi Hari ke-0 (T0) Volume oral

Kelompok 1 160 0.8

negatf 2 155 0.77
3 165 0.83
4 160 0.8
5 165 0.83

Kelompok 1 165 0/83

positif 2 160 0.83
simvastatin 3 155 0.83
4 160 0.83
5 165 0.83

Kelompok dosis 1 160 0.64

I 2 160 0.64
0.8 ml 3 170 0.68
4 165 0.66
5 165 0.66

Kelompok dosis 1 165 1.32

II 2 170 1.36
1.6 ml 3 165 1.32
4 160 1.28
5 170 1.36

Kelompok dosis 1 155 2.48

III 2 155 2.48
3.2 ml 3 170 2.72
4 160 2.56
5 165 2.64
 76

Lampiran 18. Hasil SPSS kadar LDL pada hari ke-21 T2

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
penrunan kadar
LDL
N 30
Normal Parametersa,,b Mean 47.23
Std. Deviation 12.511
Most Extreme Differences Absolute .134
Positive .134
Negative -.122
Kolmogorov-Smirnov Z .734
Asymp. Sig. (2-tailed) .654
a. Test distribution is Normal.
b. Calculated from data.
Descriptives
penrunan kadar LDL
95% Confidence Interval
for Mean
Std. Std.
N Mean Deviation Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum
Normal 5 44.60 4.722 2.112 38.74 50.46 39 50
(-) PGA 5 65.40 13.557 6.063 48.57 82.23 47 84
(+) simvastatin 5 31.20 6.099 2.728 23.63 38.77 24 40
Dosis minyak ikan 0.8 5 51.40 6.427 2.874 43.42 59.38 40 55
ml
Dosis minyak ikan 1.6 5 47.00 5.148 2.302 40.61 53.39 41 55
ml
Dosis minyak ikan 3.2 5 43.80 6.686 2.990 35.50 52.10 39 55
ml
Total 30 47.23 12.511 2.284 42.56 51.91 24 84

Test of Homogeneity of Variances

penrunan kadar LDL
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1.149 5 24 .362

ANOVA
penrunan kadar LDL

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 3116.167 5 623.233 10.510 .000
Within Groups 1423.200 24 59.300
Total 4539.367 29
 77

ultiple Comparisons

penrunan kadar LDL

Tukey HSD

Mean 95% Confidence Interval

Difference (I-
(I) kelompok perlakuan (J) kelompok perlakuan J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound
Normal (-) PGA -20.800* 4.870 .003 -35.86 -5.74
(+) simvastatin 13.400 4.870 .101 -1.66 28.46

Dosis minyak ikan 0.8 -6.800 4.870 .729 -21.86 8.26

ml
Dosis minyak ikan 1.6 -2.400 4.870 .996 -17.46 12.66
ml
Dosis minyak ikan 3.2 .800 4.870 1.000 -14.26 15.86
ml
(-) PGA normal 20.800* 4.870 .003 5.74 35.86
(+) simvastatin 34.200* 4.870 .000 19.14 49.26

Dosis minyak ikan 0.8 14.000 4.870 .079 -1.06 29.06

ml
Dosis minyak ikan 1.6 18.400* 4.870 .011 3.34 33.46
ml
Dosis minyak ikan 3.2 21.600* 4.870 .002 6.54 36.66
ml
(+) simvastatin normal -13.400 4.870 .101 -28.46 1.66
(-) PGA -34.200* 4.870 .000 -49.26 -19.14

Dosis minyak ikan 0.8 -20.200* 4.870 .004 -35.26 -5.14

ml
Dosis minyak ikan 1.6 -15.800* 4.870 .036 -30.86 -.74
ml
Dosis minyak ikan 3.2 -12.600 4.870 .139 -27.66 2.46
ml
Dosis minyak ikan 0.8 normal 6.800 4.870 .729 -8.26 21.86
ml (-) PGA -14.000 4.870 .079 -29.06 1.06

(+) simvastatin 20.200* 4.870 .004 5.14 35.26

Dosis minyak ikan 1.6 4.400 4.870 .942 -10.66 19.46

ml
Dosis minyak ikan 3.2 7.600 4.870 .631 -7.46 22.66
ml
Dosis minyak ikan 1.6 normal 2.400 4.870 .996 -12.66 17.46
ml
(-) PGA -18.400* 4.870 .011 -33.46 -3.34

(+) simvastatin 15.800* 4.870 .036 .74 30.86

Dosis minyak ikan 0.8 -4.400 4.870 .942 -19.46 10.66

ml
Dosis minyak ikan 3.2 3.200 4.870 .985 -11.86 18.26
ml
 78

Dosis minyak ikan 3.2 normal -.800 4.870 1.000 -15.86 14.26
ml
(-) PGA -21.600* 4.870 .002 -36.66 -6.54

(+) simvastatin 12.600 4.870 .139 -2.46 27.66

Dosis minyak ikan 0.8 -7.600 4.870 .631 -22.66 7.46

ml
Dosis minyak ikan 1.6 -3.200 4.870 .985 -18.26 11.86
ml
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
 79

Lampiran 19. Hasil SPSS kadar HDL pada Hari ke-21 T2

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

kadar HDL
N 30
Normal Parametersa,,b Mean 62.60
Std. Deviation 11.053
Most Extreme Differences Absolute .121
Positive .073
Negative -.121
Kolmogorov-Smirnov Z .665
Asymp. Sig. (2-tailed) .769
a. Test distribution is Normal.
b. Calculated from data.

Descriptives
kadar HDL
95% Confidence Interval for
Mean
Std.
N Mean Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum
normal 5 67.00 4.848 2.168 60.98 73.02 60 73
(-) PGA 5 44.80 4.550 2.035 39.15 50.45 40 50
(+) simvastatin 5 75.40 3.847 1.720 70.62 80.18 71 80
Dosis minyak ikan 0.8 5 59.00 10.416 4.658 46.07 71.93 48 75
ml
Dosis minyak ikan 1.6 5 64.40 5.771 2.581 57.23 71.57 58 70
ml
Dosis minyak ikan 3.2 5 65.00 5.701 2.550 57.92 72.08 58 71
ml
Total 30 62.60 11.053 2.018 58.47 66.73 40 80

Test of Homogeneity of Variances

kadar HDL
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1.836 5 24 .144

ANOVA
kadar HDL

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 2610.000 5 522.000 13.425 .000
Within Groups 933.200 24 38.883
Total 3543.200 29
 80

Multiple Comparisons

kadar HDL
Tukey HSD

95% Confidence Interval

Mean
(J) kelompok Difference (I- Lower
(I) kelompok perlakuan perlakuan J) Std. Error Sig. Bound Upper Bound
normal (-) PGA 22.200* 3.944 .000 10.01 34.39

(+) simvastatin -8.400 3.944 .306 -20.59 3.79

Dosis minyak ikan 0.8 8.000 3.944 .356 -4.19 20.19

ml
Dosis minyak ikan 1.6 2.600 3.944 .985 -9.59 14.79
ml
Dosis minyak ikan 3.2 2.000 3.944 .995 -10.19 14.19
ml
(-) PGA normal -22.200* 3.944 .000 -34.39 -10.01
(+) simvastatin -30.600* 3.944 .000 -42.79 -18.41

Dosis minyak ikan 0.8 -14.200* 3.944 .016 -26.39 -2.01

ml
Dosis minyak ikan 1.6 -19.600* 3.944 .001 -31.79 -7.41
ml
Dosis minyak ikan 3.2 -20.200* 3.944 .000 -32.39 -8.01
ml
(+) simvastatin normal 8.400 3.944 .306 -3.79 20.59
(-) PGA 30.600* 3.944 .000 18.41 42.79

Dosis minyak ikan 0.8 16.400* 3.944 .004 4.21 28.59

ml
Dosis minyak ikan 1.6 11.000 3.944 .094 -1.19 23.19
ml
Dosis minyak ikan 3.2 10.400 3.944 .127 -1.79 22.59
ml
Dosis minyak ikan 0.8 normal -8.000 3.944 .356 -20.19 4.19
ml (-) PGA 14.200* 3.944 .016 2.01 26.39

(+) simvastatin -16.400* 3.944 .004 -28.59 -4.21

Dosis minyak ikan 1.6 -5.400 3.944 .744 -17.59 6.79

ml
Dosis minyak ikan 3.2 -6.000 3.944 .655 -18.19 6.19
ml
Dosis minyak ikan 1.6 normal -2.600 3.944 .985 -14.79 9.59
ml (-) PGA 19.600* 3.944 .001 7.41 31.79

(+) simvastatin -11.000 3.944 .094 -23.19 1.19

Dosis minyak ikan 0.8 5.400 3.944 .744 -6.79 17.59

ml
Dosis minyak ikan 3.2 -.600 3.944 1.000 -12.79 11.59
ml
 81

Dosis minyak ikan 3.2 normal -2.000 3.944 .995 -14.19 10.19
ml
(-) PGA 20.200* 3.944 .000 8.01 32.39

(+) simvastatin -10.400 3.944 .127 -22.59 1.79

Dosis minyak ikan 0.8 6.000 3.944 .655 -6.19 18.19

ml
Dosis minyak ikan 1.6 .600 3.944 1.000 -11.59 12.79
ml
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
 82

Lampiran 20. Hasil GCMS

 83

Asam tetradekanoat metil ester Asam

tetradekanoat metil ester

Asam 9-heksadekanoat metil ester

Asam heksadekanoat metil ester

Asam 9,12-Oktadekadeinoat metil ester

Asam-9-oktadekanoat metil ester

 84

Asam 10-oktadekanoat metil ester

Asam oktadekanoat metil ester

85