BAHAN PENDUKUNG ONLINE B: PASIEN DAN METODE

Pasien

Pasien berusia 18-75 tahun dan didiagnosis menderita rheumatoid arthritis (RA) (menurut

kriteria klasifikasi American College of Rheumatology [ACR] 1987 yang telah direvisi [Arnett

et al. Arthritis Rheum 1988; 31: 315-24]) selama ≥6 bulan sebelum pengacakan

direkrut. Pasien yang memenuhi syarat memiliki penyakit aktif — didefinisikan sebagai ≥6 sendi bengkak
(dari 66

dinilai) dan ≥6 persendian tender (dari 68 dinilai) plus protein serum C-reaktif

(CRP) ≥1,5 mg / dL atau laju sedimentasi eritrosit (ESR) ≥28 mm / jam — dan memiliki

menerima metotreksat oral atau parenteral (MTX; 10-25 mg / minggu) selama ≥12 minggu sebelumnya

skrining (4 minggu terakhir dengan dosis stabil). Semua pasien sebelumnya telah menunjukkan

respon yang tidak memadai, atau intoleransi terhadap, agen faktor nekrosis tumor (TNF)

(adalimumab, certolizumab, etanercept, golimumab, atau infliximab).

Kriteria eksklusi meliputi perawatan sebelumnya dengan lebih dari dua obat biologis; alergi

atau hipersensitif terhadap murine, chimeric, human, atau protein yang dimanusiakan (seperti yang
dilaporkan oleh

pasien atau ditentukan dari riwayat medis pasien); penerimaan lisan atau

antibiotik parenteral yang disuntikkan ≤2 minggu atau ≤4 minggu sebelum pengacakan,

masing-masing, atau infeksi serius lainnya ≤6 bulan sebelum pengacakan; sejarah

herpes zoster berulang atau infeksi kronis atau berulang lainnya; sejarah rematik

penyakit autoimun selain RA (kecuali sindrom Sjögren sekunder); dan

keterlibatan sistemik yang signifikan sekunder akibat RA (vaskulitis, fibrosis paru, atau

Sindrom Felty).

Etika percobaan

Persidangan dilakukan sesuai dengan Deklarasi Helsinki dan

Konferensi Internasional tentang Harmonisasi Pedoman Praktek Klinis yang Baik. Percobaan

protokol ditinjau dan disetujui oleh komite etika masing-masing pusat dan yang relevan

otoritas pengaturan. Semua pasien memberikan persetujuan tertulis.

Pengacakan

Pasien secara acak ditugaskan 2: 1 untuk menerima CT-P10 atau innovator rituximab (RTX).

Pengacakan dilakukan menggunakan jadwal pengacakan yang dihasilkan komputer dan

dikelompokkan berdasarkan wilayah (Eropa versus non-Eropa) dan status agen anti-TNF sebelumnya
(kegagalan

versus intoleransi).

Perawatan bersamaan

Semua pasien melanjutkan pengobatan dengan MTX (10-25 mg / minggu) dan asam folat oral

(≥5 mg / minggu) dengan dosis obat ini stabil dipertahankan selama penelitian.

Pasien dapat menerima glukokortikoid (prednison / prednisolon ≤10 mg / hari atau

setara) dan obat antiinflamasi nonsteroid jika diberikan dengan dosis stabil

obat-obatan ini selama ≥4 minggu sebelum pengacakan hingga studi berakhir. Paracetamol dan / atau

tramadol diizinkan sebagai terapi penyelamatan tetapi tidak dalam 24 jam sebelum evaluasi sendi.

Methylprednisolone (100 mg intravena), acetaminophen / paracetamol (biasanya 500-

1.000 mg) dan antihistamin (chlorpheniramine [2-4 mg atau dosis yang sama]) adalah

diberikan 30-60 menit sebelum masing-masing infus obat studi.

Penilaian dan titik akhir

Pasien menjalani penilaian klinis saat skrining, hari ke 0, dan kemudian setiap 8 minggu

kemudian. Sampel darah untuk penilaian farmakokinetik (PK) dan sel B adalah

diperoleh 15 kali antara skrining dan 24 minggu untuk setiap pasien. Analisis darah

sampel untuk parameter laboratorium rutin, CRP, ESR, imunoglobulin (IgM, IgG, dan

IgA), dan antibodi anti-obat (ADA) juga dilakukan selama penelitian.

Titik akhir PK primer didefinisikan dalam makalah utama. Termasuk titik akhir PK sekunder

konsentrasi serum maksimum setelah infus pertama (Cmax, 1); melalui konsentrasi serum

sebelum infus kedua (Ctrough); volume distribusi (Vd); pembersihan total tubuh berakhir

kedua infus (CL); paruh eliminasi terminal setelah infus kedua (T1 / 2); dan waktu

ke Cmax setelah infus pertama dan kedua (Tmax).

Alat penghubung elektrokemiluminesen (ECL) dikembangkan dan divalidasi untuk

analisis konsentrasi RTX dan CT-P10 dalam serum manusia. Dengan metode ini, manusia

sampel serum yang mengandung RTX / CT-P10 (setelah pengenceran 1:25 dalam buffer tes yang
mengandung

3% serum albumin sapi) diinkubasi bersama dengan tikus anti biotinilasi

antibodi (biotin) dan antibodi anti-rituximab tikus berlabel ruthenium, dan antibodi-

jembatan kompleks terbentuk. Bagian biotin kompleks kemudian berikatan dengan pelat Meso Scale
Discovery (MSD) bertingkat ketika dipindahkan ke piring. Cuci

Langkah ini kemudian dilakukan untuk menghapus materi yang tidak terikat. Setelah penambahan
buffer baca

mengandung tripropilamin, lempeng tersebut dibaca pada MSD SECTOR Imager 6000. The

Tegangan yang diberikan oleh pembaca memicu rutenium untuk menghasilkan chemiluminescence

sinyal yang berbanding lurus dengan konsentrasi RTX / CT-P10.

Penilaian klinis aktivitas penyakit termasuk ACR 20%, 50%, dan 70% (ACR20,

ACR50, dan ACR70) tingkat respons, waktu-on-onset ACR20, komponen ACR individu

skor, kriteria respons Liga Eropa Terhadap Rematik (EULAR), rata-rata

Yoo et al (manuskrip RCT CT-P10 fase I): SUPPLEMENT 05 Agustus 2016

RAHASIA 6

penurunan Skor Aktivitas Penyakit 28 (DAS28), Indeks Aktivitas Penyakit Klinis (CDAI),

Indeks Aktivitas Penyakit Sederhana (SDAI), cacat fungsional (Penilaian Kesehatan

Indeks Disabilitas Kuesioner), dan status kesehatan umum (Medical Outcomes Study

Survei Kesehatan Bentuk-Pendek [SF-36]).

Kinetika sel-B, termasuk penipisan dan pemulihan, dievaluasi menggunakan absolut

jumlah sel CD19 + dan CD20 + dengan cytometer aliran FACScalibur (Becton

Dickinson and Company; San Jose, CA, USA).

Metode immunoassay ECL (MSD, Rockville, Maryland, USA) digunakan untuk mengukur

ADA. Metode ini menggunakan platform MSD SECTOR Imager 6000 dan mengikuti pendekatan uji
twotier yang terdiri dari uji skrining dan uji spesifisitas / konfirmasi.

(lihat materi pelengkap online C). Tes pertama kali dievaluasi dengan pengganti

kontrol positif yang terdiri dari antibodi anti-manusia CT-P10 / RTX tikus murni yang dimurnikan. Itu

pengujian skrining kemudian dilakukan pada sampel yang dikumpulkan untuk mendeteksi keberadaan
antibodi pengikat CT-10. Sampel dengan nilai sinyal-ke-noise lebih besar atau sama

ke titik potong uji kemudian dianalisis untuk mengkonfirmasi spesifisitas respons. Sampel yang diobati
dengan obat dianalisis dalam uji spesifisitas / konfirmasi yang habis dalam

Kehadiran obat terlarut berlebih kemudian dilaporkan sebagai positif untuk keberadaan antibodi
antidrug. Selama validasi metode immunoassay ECL, tidak ada efek

faktor rheumatoid diamati selama pengujian gangguan.

Antibodi penawar terhadap CT-P10 / RTX diukur dalam serum manusia menggunakan a

uji sitotoksisitas komplemen-dependen (CDC). Uji ini tergantung pada kemampuan

dari sistem komplemen yang akan diaktifkan oleh pengikatan CT-P10 atau RTX (mis.

antibodi anti-CD20 monoklonal) terhadap antigen CD20 pada sel-B. Jika sampel serum

mengandung tingkat antibodi yang dapat dideteksi yang dapat menetralkan CT-P10 atau RTX dengan
cara mengikat

daerah F (ab ') 2 mereka, ini menghasilkan sinyal output yang meningkat dalam uji sitotoksisitas

Yoo et al (manuskrip RCT CT-P10 fase I): SUPPLEMENT 05 Agustus 2016

KERAHASIAAN 7

yang berbanding lurus dengan jumlah sel yang hidup. Dengan tidak adanya netralisasi

antibodi, CT-P10 atau RTX dapat mengikat CD20, menghasilkan sinyal keluaran yang menurun

berbanding terbalik dengan aktivitas CDC.

Evaluasi keselamatan meliputi pemantauan kejadian buruk, kejadian buruk serius, dan

efek samping dari minat khusus (mis. infeksi, reaksi terkait infus termasuk

hipersensitivitas, dan keganasan atau limfoma), analisis laboratorium klinis, umum

pemeriksaan fisik, tanda-tanda vital, dan elektrokardiogram. Uji pelepasan interferon-γ

digunakan untuk memantau infeksi TB laten pada awal dan minggu ke-24 Analisis statistik

Perhitungan ukuran sampel didasarkan pada asumsi kesetaraan dalam primer

titik akhir (AUC0-last dan Cmax) antara kelompok CT-P10 dan RTX. Berdasarkan daya 90%, a

jenis kesalahan 0,1, koefisien variasi antar pasien dalam AUC0-terakhir dari 35%, rasio yang benar

rata-rata 1,0, dan margin ekivalensi 2-sisi 80-125% untuk AUC0-last dan Cmax, 78

dan 39 pasien dalam kelompok CT-P10 dan RTX, masing-masing, diperlukan. Memungkinkan

untuk tingkat drop-out 20%, 147 pasien diperlukan untuk pengacakan.

Analisis statistik utama untuk penelitian ini dijelaskan dalam makalah utama. Sekunder
Parameter PK dirangkum menggunakan statistik deskriptif. T-test digunakan untuk itu

membandingkan data efikasi pada minggu ke 24 di seluruh kelompok perlakuan. Farmakodinamik (PD)

parameter dan evaluasi keselamatan dijelaskan secara deskriptif.

Semua analisis PK dilakukan pada populasi PK (semua pasien yang menerima dua

dosis obat studi [pada minggu 0 dan 2 dengan dosis total 2.000 mg] dan diberikan

data konsentrasi darah yang memadai). Khasiat dan populasi analisis PD termasuk semua

pasien yang menerima setidaknya satu dosis penuh CT-P10 atau RTX dan memberikan setidaknya satu
kemanjuran pasca perawatan atau hasil PD, masing-masing. Populasi keamanan mencakup semua

pasien yang menerima setidaknya satu (penuh atau sebagian) dosis CT-P10 atau RTX.

(((((* Satu pasien tidak diobati dengan obat studi karena kesulitan dalam menemukan vena

infus intravena. Oleh karena itu pasien ini dikeluarkan dari populasi keamanan))))) ))))

Penarikan pasien karena efek samping

Tiga pasien (2,9%) yang diobati dengan CT-P10 menarik diri dari penelitian karena merugikan

kejadian: steatosis hati (dianggap terkait dengan pengobatan), efusi perikardial

(tidak terkait), dan divertikulitis (tidak berhubungan). Dua pasien (3,9%) dirawat dengan inovator

rituximab (RTX) menarik karena efek samping: neutropenia (terkait) dan menurun
Jumlah limfosit B (tidak berhubungan [pasien ini memiliki kadar CD19 + dan CD20 + yang rendah)

limfosit sebelum pengobatan RTX dan hanya menerima infus RTX pertama]).

Infeksi

Proporsi pasien yang mengalami setidaknya satu infeksi adalah serupa

kelompok CT-P10 (23,5%) dan RTX (25,5%) (Tabel K-1). Yang paling sering dilaporkan

infeksi terkait pengobatan pada kedua kelompok perlakuan adalah saluran pernapasan bagian atas

infeksi (n = 7 [6,9%] dan n = 5 [9,8%] untuk CT-P10 dan RTX, masing-masing). Serius

infeksi dilaporkan oleh satu pasien di masing-masing kelompok (CT-P10: divertikulitis, tidak
berhubungan dengan

pengobatan; RTX: lobar pneumonia, mungkin terkait dengan pengobatan); kedua peristiwa itu

terselesaikan. Proporsi pasien yang dites positif menggunakan uji pelepasan interferon

serupa antara kedua kelompok pada awal dan minggu 24.

Penilaian keamanan lainnya

Perubahan dari baseline dalam hematologi, kimia klinis, dan parameter urinalisis

kecil dan sebanding antar kelompok. Temuan fisik umum

pemeriksaan, pengukuran tanda vital dan elektrokardiogram juga serupa setelahnya

Perawatan CT-P10 dan RTX.